המעבדה שלנו חוקרת את התפתחותם של תאי CD4 T בהקשרים שונים של סבילות וחסינות. בפרויקטים שלנו, אנו מתעניינים בעיקר באופן שבו חשיפה לאנטיגן מניעה התפתחות של תת-קבוצות פנוטיפיות של תאי T המבססות זיכרון חיסוני שיכול לשפר את הסבילות לעצמו או את החסינות מפני פתוגנים. לאחרונה התמקדנו בפיתוח תת-קבוצות תאי T רגולטוריות וזיכרון השוכנות ברקמת הריאה.
תאי T שוכנים ברקמה אלה ממלאים תפקיד חשוב בחיזוק הסבילות לאנטיגנים עצמיים במהלך פגיעה ברקמות, או בקידום תגובות דלקתיות לפתוגנים במהלך הדבקה חוזרת. המעבדה שלנו מתמחה במחקר ישיר של תאי T ספציפיים לאנטיגן, אך ריאגנטים טטרמרים MHC פפטידים מותאמים אישית. זה מאפשר לנו לחקור את תאי T אלה ללא שימוש במודלים טרנסגניים של TCR או מניפולציות ניסיוניות אחרות הידועות כגורמות לממצאים ניסיוניים.
למרות שאנו יכולים לזהות בקלות תאי T ספציפיים לאנטיגן עם טטרמרים, תאי T אלה נמצאים לעתים קרובות בתדרים נמוכים מאוד, במיוחד כאשר הם במצב נאיבי או זיכרון. זה גם מאתגר לבודד את תאי T אלה מרקמות שאינן לימפה, שם הם שוכנים לעתים קרובות בעקבות תגובה חיסונית. בעוד שישנם מספר פרוטוקולים מבוססים לבידוד תאי T מריאות עכבר, הפרוטוקול שאנו מציגים כאן עבר אופטימיזציה לזיהוי עוקב של תאי T ספציפיים לאנטיגן בתדר נמוך על ידי צביעת טטרמר.
במסגרת פרוטוקול זה, כללנו גם שתי אפשרויות לשיוך רקמות כדי להתאים טוב יותר למשאבי הספרייה. הפרוטוקול שלנו יסייע לחוקרים להרחיב את השימוש בטטרמרים לתאי T ספציפיים לאנטיגן ברקמת הריאה. זה יוביל למחקרים חזקים יותר in vivo של זיכרון תושב רקמות התפתחות תאי T ותפקודם, שהם נושאים בעלי עניין רב בתחום.
Shin, D. S., Barreto de Albuquerque, J., Moon, J. J. Identification of Rare Antigen-Specific T Cells from Mouse Lungs with Peptide:Major Histocompatibility Complex Tetramers. J. Vis. Exp. (209), e66939, doi:10.3791/66939 (2024).