अवेध्य Vivo में लघु पशु एमआरआई और मिसेज: बेसिक प्रायोगिक प्रक्रिया

Biology

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Summary

यह काम noninvasive छोटे जानवर एमआरआई और मिसेज के बुनियादी प्रक्रियाओं का वर्णन

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Lee, D., Marcinek, D. Noninvasive In Vivo Small Animal MRI and MRS: Basic Experimental Procedures. J. Vis. Exp. (32), e1592, doi:10.3791/1592 (2009).

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Abstract

लघु पशु अनुसंधान चुंबकीय अनुनाद (एमआर) के कारण इसकी प्रकृति गैर इनवेसिव और जैविक जानकारी की समृद्धि प्रदान करता है यह आधुनिक जैव चिकित्सा अनुसंधान के एक महत्वपूर्ण तत्व के रूप में उभरा है. एमआर किसी भी विकिरण की आवश्यकता नहीं होती और noninvasively उच्च संकल्प और अन्य tomographic या स्पेक्ट्रोस्कोपी रूपरेखा की तुलना में बेहतर संकेत से शोर अनुपात प्रदान कर सकते हैं. इस प्रोटोकॉल में, हम छोटे जानवर एमआर इमेजिंग और एमआर स्पेक्ट्रोस्कोपी (एमआरआई मिसेज /) पर ध्यान केंद्रित करने के लिए noninvasively विश्राम भारित प्राप्त होगा

Protocol

भाग 1: चुंबक सुरक्षा

दोनों एमआरआई और मिसेज एक मजबूत चुंबकीय क्षेत्र है कि अत्यधिक सावधानी की आवश्यकता का उपयोग करें. उदाहरण के लिए, 4.7 टी साधन है कि हम वर्तमान कार्य के लिए प्रयोग किया जाता है एक चुंबकीय क्षेत्र है लगभग 90,000 बार पृथ्वी के चुंबकीय क्षेत्र. उच्च चुंबकीय क्षेत्र हमेशा जब भी एमआर स्कैनर का इस्तेमाल नहीं किया जा रहा है पर है. किसी भी धातु वस्तु है कि इस तरह के एक उच्च चुंबकीय क्षेत्र के साथ संपर्क में आता है दृढ़ता और तेजी से चुंबक द्वारा आकर्षित किया जाएगा. यह बेहद खतरनाक है अगर एक प्रयोगात्मक विषय ऑपरेटर या एक धातु चुंबक में फ्लाइंग ऑब्जेक्ट के प्रक्षेप्य पथ में स्थित है. इसलिए, जो एमआर प्रयोगों का संचालन कर्मियों साधन की निकटता में प्रवेश करने से पहले अपने कपड़ों से किसी भी धातु की वस्तुओं और निकाल भी ऐसी वस्तुओं से आसपास मुक्त वातावरण बनाए रखने के लिए सावधान किया जाना चाहिए. चुंबक सुरक्षा पर अधिक विस्तृत जानकारी 1 साहित्य और निम्नलिखित वेबपेज में प्रकट होता है: http://www.imrser.org/ . धातु सामग्री की उपस्थिति केवल aforementioned सुरक्षा के मुद्दे का कारण नहीं है, लेकिन इमेजिंग / स्पेक्ट्रोस्कोपी कलाकृतियों उत्प्रेरण द्वारा प्रायोगिक परिणामों के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं. इमेजिंग वस्तु के निकट या अंदर धातु सामग्री मौजूद आसपास के क्षेत्र में चुंबकीय क्षेत्र में परिवर्तन और इसलिए अधिग्रहीत छवियों पर कलाकृतियों या स्पेक्ट्रा की लाइन चौड़ाई व्यापक उत्पन्न कर सकते हैं.

तदनुसार, चुंबक बाहर बटुआ, चाबियाँ, कलम, आदि को छोड़ अगर आप एमआर प्रक्रियाओं के लिए जानवरों को संभाल.

माउस के Vivo एमआरआई में एक क्षैतिज बोर चुंबक में: भाग 2

एमआरआई के लिए पशु तैयारी

  1. सभी पशु प्रक्रियाओं संस्थागत जानवरों की देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) जानवर से निपटने के किसी भी प्रकार को क्रियान्वित करने से पहले द्वारा अनुमोदित किया जाना चाहिए.
  2. हम एमआरआई प्रयोगों के लिए पशुओं anesthetize isoflurane vaporized का उपयोग करें. पशुओं के संज्ञाहरण AVERTIN (2,2,2-tribromoethanol या TBE) और ketamine और xylazine के एक कॉकटेल के रूप में अन्य anesthetics द्वारा प्राप्त किया जा सकता है. प्रत्येक चतनाशून्य करनेवाली औषधि की खुराक जानकारी तालिका 1 में पाया जाता है.
  3. रेखा प्लास्टिक समर्थित शोषक पैड (नीले पैड या चक) के साथ एक प्रेरण कक्ष. प्रेरण कक्ष में एक माउस (या बहु - माउस इमेजिंग के लिए कई चूहों) रखें.
  4. 0.8 1.5 / एल मिनट isoflurane vaporizer के flowmeter समायोजित करें. फिर 4% isoflurane vaporizer 2 के बारे में 3 मिनट के लिए समायोजित.
  5. संज्ञाहरण के सर्जिकल विमान (यानी कोई पैर के अंगूठे चुटकी प्रतिक्रिया) तक पहुँचने के बाद, एक जानवर धारक पर अपनी एक नाक शंकु (या मुखौटा) में सम्मिलित नाक के साथ माउस जगह है. एक सिर restrainer सिर इमेजिंग के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है और एक शरीर धारक शरीर इमेजिंग के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
  6. पशु धारकों के लिए संभावित गति को रोकने के लिए उपयोग किया जाता है: वहाँ वाणिज्यिक धारकों के कई प्रकार के होते हैं. इसके अलावा, एक कस्टम डिजाइन धारक को एक प्रयोगात्मक सेटअप के किसी भी विशेष आवश्यकताओं को समायोजित करने के लिए गढ़े जा सकता है. एक कस्टम डिजाइन धारक के लिए, केवल nonmagnetic सामग्री का उपयोग सुनिश्चित करें.
  7. इमेजिंग अवधि के दौरान 0.4 एमएल / मिनट 0.8 flowmeter समायोजित और 1.2 1.5% करने के लिए isoflurane vaporizer कम. अवधि समाप्त हो माउस नाक शंकु से आ रही गैस एक पंप द्वारा एकत्र की है और एक घर में वैक्यूम में हटा दिया.
  8. पशु की आंखों के साथ एक बाँझ आंख चिकनाई मरहम नम रखा जाएगा. जानवर एक गर्म पानी परिसंचरण तंत्र के भीतर प्रयोग के दौरान 35-37 ° सी में रखा जाएगा. गर्मी स्रोत के अन्य प्रकार गर्म पैड और गर्म रेडियोफ्रीक्वेंसी कुंडली (आरएफ) में उड़ा हवा के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है.
  9. एक जानवर की निगरानी प्रणाली जगह में है शरीर का तापमान, श्वसन / हृदय चक्र की निगरानी, ​​और छवि अधिग्रहण के साथ श्वसन / हृदय gating सिंक्रनाइज़.
  10. Agarose का एक मानक बनाया नमूना जानवर को अचानक संकेत परिवर्तन पर नजर रखने के बगल में रखा गया है. इस मानक अगर नमूना बहु टुकड़ा और बहु ​​- समय बिंदु इमेजिंग के लिए विशेष रूप से उपयोगी है. जब एक अप्रत्याशित संकेत बदल अधिग्रहीत छवियों से एक टुकड़ा में पाया जाता है, अप्रत्याशित संकेत परिवर्तन के साथ टुकड़ा समाप्त किया जा सकता है. इसके अलावा, इसके संकेत तीव्रता के बाद छवि विश्लेषण के दौरान मानक नमूना के संकेत परिवर्तन पर आधारित समायोजित किया जा सकता है.
  11. सुरक्षित जानवरों की धारक पर जानवर और निगरानी के घटकों रखने के बाद, एक आरएफ कुंडली के केंद्र में पशु धारक की स्थिति.
  12. चुंबक कमरा आरएफ का तार ले जाएँ और गर्म पानी परिसंचरण चुंबक अंदर रखा प्रणाली में आरएफ का तार डालने. चित्रा 2 प्रदर्शित करता है चुंबक के सामने से मनाया एक एमआरआई स्कैनर के कई घटकों बोर.

एमआरआई प्रयोग

  1. 1 एच अनुनाद आवृत्ति आरएफ कुंडल ट्यून और 50 एमआर स्कैनर में ट्यूनिंग पैनल का उपयोग ओम कुंडली की विशेषता प्रतिबाधा मैच . यह संकेत स्वागत के इष्टतम स्थितियों को प्राप्त है. हाल मानव एमआरआई स्कैनर धुन / छोड़कर मैच की एक अलग प्रक्रिया की आवश्यकता नहीं हैमिसेज प्रक्रियाओं में.
  2. एक shimming प्रक्रिया का उपयोग कर एक एकल पल्स अनुक्रम आचरण. एक एमआर संकेत पर्यावरण चुंबकीय क्षेत्र एकरूपता पर निर्भर करता है. shimming प्रक्रिया ब्याज के रूप में संभव के रूप में सजातीय के क्षेत्र में चुंबकीय क्षेत्र के लिए सक्षम बनाता है. प्रत्येक एमआर स्कैनर की अपनी shimming प्रक्रिया स्वत: तेजी से shimming तेजी नक्शा और ढाल shimming के रूप में ऐसी प्रक्रियाओं सहित, प्रदर्शन है.
  3. एक आयामी छवि प्रोफ़ाइल अधिकतम आरएफ नाड़ी द्वारा ऑप्टिमाइज़ करें. 5x ऊतक के एक टी - आरएफ नाड़ी शक्तियों जबकि पल्स लंबाई निरंतर और एक लंबे समय पर्याप्त टी.आर. (पुनरावृत्ति देरी) है कि लगभग 3 है रखने arrayed जा सकता है .
  4. तीन orthogonal axial, राज्याभिषेक और बाण के समान चित्र बनाने के झुकाव के साथ छवियों को स्काउट मोल. एक तेज छवि अधिग्रहण अनुक्रम (यानी ढाल गूंज या तेजी से स्पिन गूंज इमेजिंग अनुक्रम) स्काउट छवियों प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. अधिग्रहीत छवियों इमेजिंग विमानों के दृढ़ संकल्प के साथ वास्तविक इमेजिंग के लिए योजना के लिए उपयोग किया जाएगा.
  5. गूंज अनुक्रम स्पिन बदलें. उचित क्रम मापदंडों का चयन करें: टी.आर. (पुनरावृत्ति देरी) तीन से पांच बार 1 टी प्रोटॉन घनत्व या टी 2 भारित छवियों के रूप में पूरी तरह से आराम छवियों को प्राप्त करने के लिए ऊतक होना चाहिए. ते (गूंज समय) पहली आरएफ नाड़ी और गूंज संकेत के केंद्र के बीच समय की अवधि है. एक ते मूल्य तालिका 2 में संक्षेप के रूप में छवि के विपरीत के आधार पर चुना जा सकता है है. Vivo में 1 टी, टी 2 और 2 * टी के विभिन्न विश्राम प्रभाव के साथ अपनी पीठ पर एक xenograft ट्यूमर के साथ एक नग्न माउस के लिए अधिग्रहीत छवियों में चित्रा 2 से पता चलता है.
  6. टी 2 माप या तो multiecho इमेजिंग या एकाधिक ते मूल्यों के साथ एक गूंज इमेजिंग का उपयोग किया जा सकता है.
  7. प्रयोग / vivo में एमआरआई मिसेज के बाद, पशुओं वसूली की प्रक्रिया के दौरान निगरानी की जानी चाहिए. एमआर इमेजिंग के बाद जानवरों आरएफ तार के बाहर ले जाया जाएगा और पूरी वसूली विश्वास दिलाता हूं जब पिंजरे को लौट निगरानी. हीट हानि anesthetized चूहों में तेजी है. धुंध पैड या तौलिए और / के साथ उन्हें कवर या जब तक पशुओं संज्ञाहरण से बरामद कर रहे हैं एक गर्मी स्रोत उपलब्ध कराने के द्वारा पशुओं गर्म रखें.

छवि प्रसंस्करण

  1. समीक्षा एमआर कंसोल पर छवियों का अधिग्रहण और प्रसंस्करण के बाद एक कंप्यूटर के लिए चयनित डेटा अंतरण.
  2. आम तौर पर हम ImageJ (का उपयोग http://rsbweb.nih.gov/ij/ छवियों का विश्लेषण करने के लिए). छवि विश्लेषण छवि स्केलिंग / फ़िल्टरिंग, 1 टी 2 टी और प्रसार की गणना, ट्यूमर मात्रा माप और ट्यूमर के विभाजन भी शामिल है.

भाग 3. माउस Hindlimb कंकाल की मांसपेशी के लिए एक कार्यक्षेत्र बोर चुंबक में Vivo मिसेज में

गिरफ्तार की प्रतिवर्ती Ischemia उत्प्रेरण के लिए निर्माण

  1. पीवीसी पाइप का एक टुकड़ा है कि 12-15 मिमी की एक आईडी के साथ लगभग 5-7 मिमी चौड़े है के साथ शुरू करो. इस टुकड़ा और धागे की दीवार के माध्यम से एक छोटा सा छेद ड्रिल.
  2. गुब्बारे का एक टुकड़ा कट तो यह दोनों सिरों पर खुला है (हीलियम गुणवत्ता गुब्बारे सबसे अच्छा काम). पीवीसी टुकड़े के माध्यम से इस टुकड़े डालें और उसके चारों ओर वापस लपेटो और टेप पीवीसी टुकड़े के बाहर की दीवार पर एक साथ समाप्त होता है.
  3. लपेटो हटना गुब्बारा मुहर का उपयोग करें ट्यूब के आसपास समाप्त होता है. आप एक ठोस बाहरी दीवार और एक inflatable भीतरी दीवार के साथ एक कफ होना चाहिए.
  4. लड़ी पिरोया छेद के आसपास लपेटो हटना और गुब्बारे के एक क्षेत्र बाहर कट, ध्यान लेने के छेद और पीवीसी टुकड़े के किनारे के बीच सामग्री के बहुत सारे छोड़. अलौह धातु (यानी पीतल) परमवीर चक्र में छेद में एक 1.5 सेमी टुकड़ा धागा. यह आप कफ बढ़ के लिए अनुमति देता है. 5 मिनट epoxy के साथ क्षेत्र सील.
  5. जगह में इस कफ मिसेज जांच में आरएफ का तार करने के लिए अगले फिक्स और एक बाहरी रक्तदाबमापी के लिए कनेक्ट.

कस्टम श्वसन मॉनिटर

  1. हम एक कस्टम मेड श्वसन मॉनिटर कि प्रतिबंधित अंतरिक्ष और बोर करने के लिए चुंबक का उपयोग के साथ संगत होना करने के लिए किया जाता है का उपयोग करें. कई वाणिज्यिक मॉडल भी उपलब्ध हैं.
  2. खिंचाव प्रतिरोधी टयूबिंग की जांच में खिलाया अंत करने के लिए एक छोटा सा गुब्बारा बाँधो.
  3. दबाव transducer टयूबिंग के दूसरे छोर संलग्न.
  4. यकीन है कि लाइन और गुब्बारे हवा के बुलबुले के लिए स्वतंत्र हैं. बुलबुले माउस श्वसन करने के लिए कारण शरीर के आंदोलन की वजह से गुब्बारे के संपीड़न से संकेत attenuate जाएगा.

मिसेज जांच में माउस पोजिशनिंग

  1. 5% AVERTIN (.010 / एमएल जी शरीर के वजन) के साथ माउस anesthetize.
  2. संज्ञाहरण के सर्जिकल विमान तक पहुँचने के बाद, माउस समर्थन पर अपनी पीठ पर माउस रखकर मिसेज जांच में माउस की स्थिति. माउस के ventral पक्ष पर तरल पदार्थ से भरे गुब्बारे प्लेस और माउस समर्थन पट्टियों के साथ जगह में सुरक्षित है.
  3. स्थिति माउस और मिसेज जांच में शरीर का समर्थन करते हैं.
  4. इस्कीमिक कफ और मिसेज का तार के माध्यम से एक hindlimb खींचो. पैर कुंडली में म्यू के रूप में केंद्रित किया जाना चाहिएसंभव के रूप में चर्चा. यह व्यवस्था की अनुमति देता है माउस शरीर एक ऊर्ध्वाधर बोर चुंबक में करने के लिए तैनात क्षैतिज (चित्रा 3).
  5. कठोर समर्थन करने के लिए पैर टेप द्वारा जगह में पैर ठीक.
  6. कुंडल द्वारा नमूना क्षेत्र के बाहर hindlimb में thermocouple subcutaneously प्लेस.
  7. आँख स्नेहन के लिए सुखाने से आंखों को रोकने के मरहम के साथ आंखों को गीला. माउस आँखें बंद और चेहरा जांच की दीवार से रगड़ या जलन को रोकने के.
  8. अन्य निगरानी जांच प्रयोग की विशिष्ट जरूरतों पर निर्भर करता है जोड़ा जा सकता है है.

मिसेज प्रयोग की स्थापना

  1. हीटिंग तत्व के लिए मिसेज जांच पर airflow कनेक्ट.
  2. सॉफ्टवेयर VNMR पर चर तापमान नियंत्रण इकाई 35-37 पर पैर का तापमान बनाए रखने डिग्री सेल्सियस सेट
  3. ट्यून का तार आवृत्ति और मैच दोनों एच 1 और 31 पी अनुनादों के लिए मिसेज सॉफ्टवेयर में ट्यूनिंग पैनल का उपयोग प्रतिबाधा.
  4. सर्किट shimming 1 एच स्पेक्ट्रोस्कोपी का उपयोग करते हुए हित के क्षेत्र में B1 चुंबकीय क्षेत्र की एकरूपता का अनुकूलन समायोजित करें.
  5. 31 पी आवृत्ति करने के लिए स्विच आरएफ पल्स चौड़ाई निर्धारित करने के लिए एक मुक्त प्रेरण (खूंटी) क्षय (90 ° समय) से अधिकतम संकेत उपज.
  6. शोर पूरी तरह आराम स्पेक्ट्रा (FRS) के लिए उच्च संकेत लीजिए पूरी तरह से आराम की शर्तों के तहत एटीपी अकार्बनिक फॉस्फेट के अनुपात (पी मैं) और phosphocreatine (पीसीआर) का निर्धारण. इन स्पेक्ट्रा खूंटी अधिग्रहण के बीच समय के (टी.आर.) के साथ 90 ° समय का उपयोग कर एकत्र कर रहे हैं लगभग 5x पीसीआर के 1 टी (20 सेकंड पर 7 टी ). इन पीसीआर और पी एमआर स्पेक्ट्रा से मैं स्तर की मात्रा का ठहराव के लिए इस्तेमाल किया जाएगा .

Ischemic प्रयोग

  1. के दौरान phosphocreatine में परिवर्तन को मापने के द्वारा एक सरल इस्कीमिक गड़बड़ी आराम और अधिक से अधिक mitochondrial एटीपी उत्पादन के निर्धारण के लिए अनुमति देता है और तुरंत ischemia के बाद.
  2. सेट अप के लिए एक 45 का उपयोग एकाधिक स्पेक्ट्रा एकत्र सरणी ° पल्स चौड़ाई (यानी 0.5 x 90 ° समय) और 0.5x के एक टी.आर. 1 T (~ 1.5 सेकंड) . हम आम तौर पर लगभग 6 सेकंड के एक समय समाधान के लिए हर स्पेक्ट्रा (VNMR सॉफ्टवेयर में औसत की संख्या () = 4) के लिए 4 FIDS इकट्ठा. इस बार संकल्प को सही आराम और अधिक से अधिक mitochondrial एटीपी उत्पादन का निर्धारण करने के लिए पर्याप्त है.
  3. लगभग 5 मिनट के लिए आराम स्पेक्ट्रा लीजिए.
  4. 10-12 मिनट के लिए 270-300 mmHg कफ inflating द्वारा ischemia प्रेरित.
  5. कफ को छोड़ दें और 5 मिनट के लिए वसूली स्पेक्ट्रा एकत्र.
  6. माउस और जांच से चुंबक से जांच निकालें. माउस संज्ञाहरण से उचित शर्तों के तहत ठीक करने के लिए अनुमति दें. प्रयोगों के बाद के दिन पर दोहराया जा सकता है. अंतिम स्पेक्ट्रोस्कोपी प्रयोग माउस पैर की मांसपेशियों के बाद हटा रहे हैं और तुरंत फ्रीज clamped HPLC द्वारा एटीपी सांद्रता के विश्लेषण के लिए 2 तरल एन.

डेटा विश्लेषण

  1. डेटा ऑफ़लाइन कई एनएमआर स्पेक्ट्रा के लिए वर्णक्रम विश्लेषण कार्यक्रमों के उपयोग का विश्लेषण किया जाता है. हमारी प्रयोगशाला आम तौर पर पीक क्षेत्रों बढ़ाता लिए मानक 2 और jMRUI (http://www.mrui.uab.es/mrui/mrui_Overview.shtml) के लिए फिट का उपयोग करता है.
  2. Ischemia के दौरान प्रारंभिक पीसीआर टूटने दरों normoxic की शर्तों के तहत mitochondrial एटीपी उत्पादन के एक उपाय के रूप में कई 3-5 अखबारों में वर्णित है. पीसीआर वसूली दर 4,6 पहले से वर्णित mitochondrial एटीपी उत्पादन के लिए अधिक से अधिक क्षमता दृष्टिकोण के आधार पर निर्धारित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.

चित्रा 1
चित्रा 1 vivo में एमआरआई चुंबक के सामने से देखा सेटअप में बोर. सेटअप एक आरएफ कुंडल, पशु वार्मिंग प्रणाली (या गर्म पानी परिसंचरण तंत्र) और ढाल डालने शामिल हैं. इन सभी घटकों को एक क्षैतिज चुंबक में डाला जाता है. चुंबक कमरे के बाहर एक पानी जलाशय में गर्म पानी गरम किया जाता है और एक Tygon ट्यूब (हरी टेप) के माध्यम से पशु वार्मिंग प्रणाली में पेश किया. सिलेंडर में परिसंचारी के बाद, पानी वार्मिंग प्रणाली से खींचा है वापस पानी जलाशय के लिए गर्म किया जा. एक isoflurane ट्यूब और वैक्यूम ट्यूब एमआरआई प्रयोगों के दौरान चूहों anesthetize किया जाता है.

चित्रा 2
चित्रा 2 अलग विश्राम प्रभाव के साथ अपनी पीठ (तीर) पर xenograft ट्यूमर (D282 ट्यूमर) के साथ एक नग्न माउस के लिए vivo छवियों में: 1 ए टी छवि (/ टी.आर. ते = 500/14.2ms) तौला. बी 2 टी छवि (/ टी.आर. ते = 2s/40ms) तौला. दोनों 1 टी और टी 2 भारित छवियों स्पिन गूंज अनुक्रम द्वारा हासिल किया गया. सी टी 2 नक्शा अलग द्वारा अधिग्रहीत छवियों के 4 सेट के साथ कार्रवाईअलग ते 20 से 80 एमएस लेकर मूल्यों. डी. 2 टन * तौला छवि (टी.आर. / ते = 180/7.39ms, फ्लिप कोण = 20 डिग्री) ढाल गूंज अनुक्रम द्वारा हासिल कर ली. 35 x 35 मिमी 2 के दृश्य के फील्ड सभी एमआर छवियों के लिए है.

चित्रा 3
चित्रा 3. माउस का चित्रण पैर के साथ क्षैतिज शरीर धारक में तैनात आरएफ कुंडली में सुरक्षित है .

चित्रा 4
चित्रा 4 vivo 31 पी स्पेक्ट्रा में एक ischemia reperfusion के चक्र के माध्यम से .. डेटा एक 7 टी ऊर्ध्वाधर बोर चुंबक और रेखा एक 20 हर्ट्ज घातीय फिल्टर के साथ चौड़ी पर एकत्र किए गए थे. टी.आर. = 1, ना = 4, हर 20 स्पेक्ट्रा प्लॉट किए जाते हैं.

तालिका 1. चतनाशून्य करनेवाली औषधि के लिए माउस एमआरआई / मिसेज खुराक.

पशु
प्रजाति
चतनाशून्य करनेवाली औषधि
एजेंट
मात्रा
(Injectables के लिए मिलीग्राम / किग्रा)
मार्ग
माउस Isoflurane गैस 2-3 मिनट (प्रेरण) के लिए 4.0%, फिर 1,2 1,5 लगातार% (अनुरक्षण) नाक शंकु के माध्यम से साँस
माउस Avertin 5%, शरीर के वजन 10ml/kg intraperitoneal (आईपी)
माउस / Ketamine Xylazine 100 मिलीग्राम / किग्रा और 10 मिलीग्राम / किग्रा आईपी


तालिका 2. विश्राम weightings के साथ छवि

छवि भार टी.आर. (पुनरावृत्ति देरी) ते (गूंज समय)
T1 अल्प (T1 की तुलना में कम) अल्प (टी 2 की तुलना में कम)
टी 2 (3 ~ 5 बार T1) लांग (टी 2 के आसपास)
पीडी (प्रोटॉन घनत्व) (3 ~ 5 बार T1) अल्प (टी 2 की तुलना में कम)

T1: स्पिन जाली (या अनुदैर्ध्य विश्राम) विश्राम का समय
टी 2: स्पिन स्पिन (या अनुप्रस्थ विश्राम) विश्राम का समय

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Discussion

धुन / मैच और shimming के पूर्व अधिग्रहण कदम उच्च स्थानिक संकल्प और एक उच्च संकेत से शोर अनुपात (SNR) के अधिग्रहण के लिए महत्वपूर्ण हैं. यह भी एक जानवर निगरानी प्रणाली संकेत अधिग्रहण के दौरान पशुओं के लिए एक स्थिर शारीरिक राज्य के लिए मानवीय जानवर से निपटने के साथ पालन करने के लिए और किसी भी संभावित artifactual माप को रोकने के लिए बनाए रखने के साथ जानवर की स्थितियों की निगरानी करने के लिए महत्वपूर्ण है. प्रोटोकॉल में समझाया प्रक्रियाओं के लिए प्रसार छिड़काव, और प्रवाह इमेजिंग और vivo में स्थानीयकृत स्पेक्ट्रोस्कोपी सहित अतिरिक्त जानकारी प्राप्त करने के लिए संशोधित किया जा सकता है है. सभी जानवरों की तैयारी इसी तरह हो सकता है जब तक एक प्रक्रिया एक अनुपूरक सेटअप की आवश्यकता चाहिए. एमआरआई और मिसेज के इस अध्ययन में वर्णित प्रोटोकॉल nanoprobes mitochondrial एटीपी 5,8 के उत्पादन के लिए 7 ट्यूमर और मिसेज पढ़ाई लक्ष्य के विकास के लिए अनुदैर्ध्य एमआरआई अध्ययन सहित कई अनुप्रयोगों के लिए इस्तेमाल किया गया है . एमआरआई और मिसेज noninvasively जानवर शारीरिक, विश्राम परिवर्तन कल्पना या nondestructively चयापचय की निगरानी के लिए उपयोगी तकनीकों हैं. दोनों तकनीकों अनुदैर्ध्य निगरानी प्रक्रियाओं के रूप में इस्तेमाल किया जा करने के लिए समय पर उपर्युक्त परिवर्तनों की जांच कर सकते हैं. मिसेज के लिए हम एक कस्टम आरएफ जांच है कि जानवर एक ऊर्ध्वाधर बोर चुंबक में क्षैतिज स्थिति में बनाए रखा करने के लिए अनुमति देता है बनाया. इस प्रकार, इन प्रयोगों किसी भी ऊर्ध्वाधर विस्तृत बोर चुंबक पर प्रदर्शन किया जा सकता है, जैसे सबसे रसायन शास्त्र विभाग में पाया जाता है.

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Acknowledgements

इस अध्ययन में भाग डीएल और एनआईए AG028455 और एनआईए AG022385 लिए DJM NIH / NIBIB R21EB008166 द्वारा समर्थित किया गया. हम अपने D282 ट्यूमर चूहों प्रदान करने के लिए फ्रेड हचिंसन कैंसर रिसर्च सेंटर के डॉ. जेम्स Olson धन्यवाद.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Inova 200 MR scanner/4.7 T Varian Inc., Agilent Used for mouse MRI
Inova 300 NMR spectrometer/7 T Varian Inc., Agilent Used for MRS of mouse skeletal muscle

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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  8. Marcinek, D. J. Reduced mitochondrial coupling in vivo alters cellular energetics in aged mouse skeletal muscle. J Physiol. 569, 467-467 (2005).

Comments

2 Comments

  1. can i take the image from mice with conventional head or knee coil?

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 18, 2010 - 3:09 PM
  2. You could acquire images from a small animal with a human head or knee coil. But the signal-to-noise ratios of the acquired images will be substantially lower than those in the images shown in the video. You will need a smaller RF coil that is in the similar dimensions of the animal body to increase the filling factor which is linearly proportional to the signal-to-noise ratio. Hope this will help. Please let me know if you have a further question.
    Best,
    Donghoon Lee

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 18, 2010 - 4:10 PM

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