Экс естественных механические нагрузки сухожилия

Published 5/28/2007
0 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





By clicking "Submit", you agree to our policies.

 

Summary

Новое в системе пробирке для одновременной загрузки четыре сухожилия в культуре описывается.

Cite this Article

Copy Citation

Asundi, K., Rempel, D. Ex vivo Mechanical Loading of Tendon. J. Vis. Exp. (4), e209, doi:10.3791/209 (2007).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Травмы сухожилий (например, запястья тендинит, epicondyltis) из-за чрезмерного распространены в спортивных мероприятиях и на рабочем месте. Большинство из них связаны с повторяющимися, высокой активности стороны силы. Механизмов клеточного и структурные повреждения из-за циклического нагружения не известно. Целью этого видео является презентация новой системы, которые могут одновременно загружать четыре сухожилия в культуре ткани. Видео описываются методы сбора стерильной ткани и как сухожилия загружены на зажимные системы, которая впоследствии погружается в средствах массовой информации и поддерживается на уровне 37 ° C. Один зажим фиксируется, а другой перемещается с линейным приводом. Сухожилия силы растяжения контролируется с датчика последовательно с мобильного зажимом. Приводы контролируются с помощью программы LabView. Четыре сухожилия может быть повторно загружены с различными формами загрузки, частота повторения, скорость загрузки, и продолжительность. Загрузка может продолжаться в течение нескольких минут до 48 часов. В конце погрузки, сухожилий удаляются и середине вещества, экстрагированного для биохимических анализов. Эта система позволяет при исследовании эффектов загрузки узоры на экспрессию генов и структурные изменения в сухожилии. В конечном счете, механизмы повреждения из-за чрезмерного могут быть исследования с выводами применяется для лечения и профилактики.

Protocol

  1. Дополнение СМИ СО 2-независимые средства массовой информации с эмбриональной телячьей сыворотки, L-глутамина, антибиотиков, и аскорбиновой кислоты
  2. Алиготе 40 мл в 50 мл пробирки центрифуги (1 для каждого сухожилия)
  3. Алиготе 10 мл на 15 мл пробирок центрифуг (1 для каждого сухожилия)
  4. Стерилизовать хирургические инструменты, автоклав листов, пинцет и гаечный ключ в автоклаве
  5. Стерилизовать зажимы и советы силу микрометра путем замачивания в 70% этанола ночь
  6. Урожай сухожилия из задней лапы кролика. Кролик должны были быть умерщвлены не более 2 часов назад.
  7. Место сухожилия в 15 мл центрифужную пробирку заполнены СМИ
  8. Выложить стерилизовать автоклаве листа создать стерильные поле
  9. Мера площади поперечного сечения сухожилия
    1. Место микрометра советы по микрометра, выровнять правильно
    2. Ручки сухожилия к концам
    3. Fit тонкий разделе сухожилия в паз
    4. У помощника место 50g вес
    5. Подождите 30 секунд, читать толщины (CSA = толщина х 1,3)
  10. Место сухожилие еще в 15 мл центрифужную пробирку
  11. Повторите с каждой сухожилие должно быть загружено
  12. Удалить привод из базы
  13. Вырежьте два 15 мм на 40 мм полоски и одна 3 мм на 5 мм кусок из стерильных марлевых для каждого сухожилия
  14. Раскатайте каждый полосы плотно и между канавками дистального зажим
  15. Удалить сухожилия от центрифуги трубы и место на зажим, дистального конца сухожилия на дистальной зажим и волокнистый хрящ области сухожилия на проксимальных зажим
  16. Место 3x5 кусок марли поверх дистального конца сухожилия и безопасный зажим
  17. Безопасные проксимальных зажим, обеспечение сухожилие остается соответствие между зажимами и с достаточно слабый, что он не находится под напряжением, когда зажимы затянуты. Затяните зажимы для 1N-м
  18. Место 50 мл центрифужную пробирку со средствами массовой информации в базе
  19. Установить привод в базовой
  20. Повторите с каждой сухожилие должно быть загружено
  21. Место базы за водяной бане
  22. Загрузка протокола
    1. Условие сухожилий
    2. Применяют 0,5 N нагрузку, измерять длину сухожилий (это расстояние между метками)
    3. Применение циклического нагружения
  23. Удалить привод из базы
  24. Выпуск сухожилия от зажимов
  25. Процесс сухожилия

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Видео представляет новую систему для одновременной загрузки до четырех жить сухожилия в культуре ткани. Типичная длительность загрузки от 2 до 48 часов. После загрузки, сухожилий удаляются и обрабатываются для экспрессии генов. Система позволяет для исследования влияния загрузки рисунка на изменения в генах, связанных с дегенеративными изменениями в сухожилие. Эти эксперименты могут обеспечить некоторое представление о механизмах травмы связаны с повторяющимися нагрузки. Они также обеспечивают понимание нагрузок, которые могут привести к повреждению тканей. В конечном итоге, результаты могут быть использованы для профилактики и лечения чрезмерного травмы сухожилий и связок.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

References

  1. Asundi, K., Kursa, K., Lotz, J. C., Rempel, D. In vitro system for applying cyclic loads to connective tissues under displacement or force control. Ann Biomed Eng. 35, 1188-1195 (2007).
  2. Asundi, K. R., Rempel, D. M. Cyclic loading inhibits expression of MMP-3 but not MMP-1 in an in vitro rabbit flexor tendon model. Clin Biomech. In Press Forthcoming.
  3. Asundi, K. R., Rempel, D. M. MMP-1, IL-1β and COX-2 mRNA Expression is Modulated by Static Load in Rabbit Flexor Tendon. Ann Biomed Eng. In Press Forthcoming.

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Video Stats