מעי והשתלות קטן עכברים

Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

המעי הדק העכבר מודל השתלת הוכר ככלי חשוב ללמוד mechanismes הדחייה החיסונית מסך תרופות מדכאות חיסון חדש. עם זאת, מודל זה הוא מוגבל לשימוש בגלל טכניקות מעורב הוא אתגר מאוד מבחינה טכנית. עכשיו אנחנו מציגים את הטכניקה שונה.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Liu, F., Kang, S. Small Bowel Transplantation In Mice. J. Vis. Exp. (7), e258, doi:10.3791/258 (2007).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

מאז 1990, את הפיתוח של החיסון tacrolimus מבוססי טכניקות ניתוחיות משופרת, מערך מוגבר של תרופות מדכאות חיסון חזק, מונע זיהומים, בחירת המטופל מתאים עזר לשפר שתל האקטוארי שיעור הישרדות המטופל לכל סוגי השתלת המעי. חולים עם אי ספיקת המעי סיבוכים בלתי הפיך של תזונה Parenteral עכשיו צריך להיחשב כדבר שבשגרה עבור השתלת המעי הדק. עם זאת, שיעורי ההישרדות של השתלת המעי הדק היה איטי יותר ויותר כדי לשפר את משווה לטובה עם כליות, כבד, לב וריאות. השתלת המעי הדק עדיין מספקות בהשוואה לאיברים אחרים. התקדמות נוספת תלויה הבנה טובה יותר של אימונולוגיה ופיזיולוגיה של השתל ניתן להקל במידה רבה על ידי מודלים של בעלי חיים. שימוש רחב יותר של עכבר קטן מודל השתלת מעי יש צורך במחקר של אימונולוגיה הפיזיולוגיה של המעי השתלת כמו גם שיטות יעילות באבחון מוקדם דחייה. עם זאת, מודל זה הוא מוגבל לשימוש בגלל טכניקות מעורב הוא מאוד מאתגר מבחינה טכנית. פיתחנו טכניקה שונה. כשאתה מבצע השקה של וריד שער ונחות הווריד הנבוב, שני תפרים עשויים להישאר בפסגת הפרוקסימלית ומ לשיא דיסטלי של הנבוב נחות הנמען של קאווה עם וריד הפורטל של התורם. הקיר השמאלי של נחות הווריד הנבוב ו וריד שער של התורם סגורה עם תפרים המשך הפנימי של הווריד הנבוב נחות אחרי, אחרי קשר אחד עם השהייה לשיא הפרוקסימלי תפר את הקיר הימני של נחות הווריד הנבוב ו הפורטל של התורם וריד סגורים עם התפרים המשך מחוץ למערה הנבוב נחות עם 10-0 התפרים. שיטה זו היא קלה יותר לביצוע כי השקה נעשית רק על צד אחד של נחות הווריד הנבוב ו 10-0 התפרים הוא בגודל הנכון, כדי למנוע דימום פקקת. במאמר זה, אנו מספקים פרטים של הטכניקה כדי להשלים את הווידאו.

Protocol

התורם הכנה הקציר המעי הדק:

  1. העכבר הוא ansetheized עם זריקה intraperitoneal של פרקדן pentobarbital והניחה על שדה הניתוח.
  2. חתך ארוך בבטן קו האמצע הוא עשה. הפרוקסימלי של מעי צם מזוהה ligated עם 6-0 תפרים. כלי mesenteric שצורפו דיסטלי לקשור את מעי צם הם ligated עם 8-0 תפרים.
  3. דיסטלי של מעי מזוהה ligated עם 6-0 תפרים. כלי mesenteric מצורף דיסטלי כדי מעי הם ligated עם 8-0 תפרים.
  4. הפורטל חשוף מרקמות שומן מחוברת שמסביב, ligated וחילקו הוורידים pancreaticoduodenal ואת הטחול.
  5. אבי העורקים בבטן חשופה וחשף את העורק mesenteric מעולה מן הרקמות הסובבות.
  6. 1 מ"ל של הפרין (10u/ml) מוזרק לתוך הווריד הנבוב נחות עבור heparinization.
  7. וריד הפורטל מחולק ב hilum של הכבד, עורק mesenteric מעולה מחולק בין אבי העורקים, כולל תיקון העיון של האאורטה.
  8. מעי צם מעי ו מחולקים דיסטלי על הקשר. המעי הדק כולו הוסר, מאוחסן אז 4 מעלות צלזיוס תמיסת מלח.

נמען הכנה להשתלה:

  1. העכבר הוא ansetheized עם זריקה intraperitoneal של פרקדן pentobarbital והניחה על שדה הניתוח.
  2. חתך ארוך בבטן קו האמצע הוא עשה. תכולת הבטן הם חזר בו מחוץ הבטן עם גזה לחשוף את אבי העורקים בבטן הנחות הווריד הנבוב.
  3. הסניפים של אבי העורקים בבטן הנחות הווריד הנבוב חשופים ligated עם 10-0 התפרים.
  4. ליגטורה הפרוקסימלית ומ הדיסטלי ממוקם סביב האאורטה ונחות הווריד הנבוב בהתאמה.
  5. Venotomy הוא עשה הנחות הווריד הנבוב של הנמען עם מחט מד 30. פתיחת הוארך אז לאורך של שווה וריד שער של התורם עם מיקרו מספריים.
  6. Aortotomy עשוי באבי העורקים בבטן של הנמען עם מחט מד 30. פתיחת הוארך אז לאורך של שווה תיקון עורק מעולה של התורם העיון mesenteric עם מיקרו מספריים
  7. חתכים של אבי העורקים בבטן הנחות הווריד הנבוב הם perfused עם תמיסת מלח.
  8. המעי הדק של התורם ממוקם בצד השמאלי של הבטן של הנמען מכסה עם גזה.
  9. התפרים נשארים ממוקמים בפסגת הפרוקסימלית ומ לשיא הדיסטלי של האאורטה הנמען בטן עם תיקון עורק מעולה של התורם mesenteric העיון.
  10. השקה של הצד הימני של אבי העורקים בבטן של הנמען העורק mesenteric מעולה של התורם תיקון העיון הושלמו הראשון עם התפרים המשך.
  11. שני התפרים נשארים הם לראשונה בפסגת הפרוקסימלית ומ לשיא דיסטלי של הנבוב נחות של הנמען קאווה עם הפורטל של התורם על השקה של וריד השער של התורם הנבוב נחות של הנמען קאווה.
  12. הקיר השמאלי של נחות הווריד הנבוב ו וריד שער של התורם סגורה עם תפרים המשך בתוך הווריד הנבוב נחותים.
  13. אחרי אחד הקשר עם תפר להישאר הפרוקסימלי הקודקוד, הקיר הימני של נחות הווריד הנבוב ו וריד שער של התורם סגורה עם תפרים המשך מחוץ למערה הנבוב נחותים.
  14. המעי הדק של התורם הוא התהפך לצד ימין של הבטן של הנמען. הקיר הימני של אבי העורקים בבטן של הנמען עורק השקה מעולה של התורם mesenteric סגורה עם תפרים להמשיך.
  15. אחרי הכל הוא עשה השקה, המיתר דיסטלי מוסר הראשון לבדוק את מדמם השקה.
  16. אם יש דימום מועט או ללא מ השקה את הקשר הפרוקסימלית מוסר. המעי הדק של תורם מלא דם מיד; את הצבע של המעי הדק הופך אדום.
  17. סוף דיסטלי של מעי השתל הוא anastomosed end-to-צד לחלק הפרוקסימלי של מעי צם של הנמען עם תפר מתמשך של 8-0 תפרים.
  18. מעי צם הפרוקסימלי של התורם הוא exteriorized כמו סטומה ומאובטחת על העור בצד ימין של דופן הבטן עם ארבעה תפרים בכל צד של 8-0 תפרים.
  19. המעיים הם חזרו חלל הבטן וסגרו עם 6-0 תפרים להמשיך.
  20. העכבר מקבל מושם על אזור חם. לאחר שעה, הנמען משחזרת.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

התגובה החיסונית לאחר ההשתלה הייחודית המעי הדק כבר את הנושא של מחקר מקיף באמצעות מודל קטן השתלת מעיים בעכברים. התגובות החיסוניות בסיסיות, כגון השתל נגד לתגובות, מארח, לעומת שתל התגובה, שילוב של דחייה, הן תגובות סובלנות כרונית היו מעורבים. כמעט כל סוכני לדיכוי המערכת החיסונית של שייכות קליני מוכח או פוטנציאלי נבדקו יעילותם במודל השתלת המעי הדק.

שינינו את המעי הדק העכבר טכניקת השתלת בכמה דרכים כדי לשפר את היעילות ואת שיעורי ההצלחה:

  1. החלק הפנימי של המעי הדק של התורם צריך להיות שמירה ברורה לא כל צואה שמאל.
  2. בקצה חלקת העיון של אבי העורקים של העורק mesenteric מעולה יש לחלק את גודל חלקה שווה עם פתיחתו של אבי העורקים בבטן של הנמען.
  3. אין לסובב את וריד שער עם העורק mesenteric מעולה כאשר anastomoses את הווריד הנבוב הפורטל עם נחות של הנמען קאווה. מכיוון הפורטל הוא הוריד יותר העורק mesenteric מעולה.
  4. המעי הדק צריך להיות ממוקם על אמצע הבטן ולשמור את העורק mesenteric מעולה וריד שער במתח הנכון כאשר לשקם את זרימת הדם, כדי למנוע פקקת.
  5. עורק mesenteric מעולה יש לשמור על המתח הנכון כאשר המעי מארח קטן חזר לתוך חלל הבטן, כדי למנוע פקקת לאחר סגירת הבטן.
  6. 0.1 מ"ל cefuroxine (20mg/kg) נותרים בחלל הבטן, כדי למנוע זיהום לפני סגירת הבטן.
  7. כדי להיות בטוח לא נותנים את זרימת הצואה לתוך הפעילות הבטן בעת ​​ביצוע השקה המעי הדק, כדי למנוע זיהום לאחר הניתוח.
  8. אין נזק לכלי mesenteric כאשר קצירת המעי הדק כדי למנוע נמק המעי הדק לאחר הניתוח.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
Sutures 10-0 and 11-0 MONOSOF
Microscope Unversal S3 Carl Zeiss, Inc.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. SJ, M. iddleleton Is intestinal transplantation now an alternative to home parenteral nutrition. Proc Nutr Soc. 66, (3), 316-320 (2007).
  2. Lopez Santamaria, M., Hernadez Oliveros, F. Indications, techniques, and outcomes of small bowel transplant. Nutr Hosp. 22, Suppl 2. 113-123 (2007).
  3. Grant, D. Current results of intestinal transplantation. The International Intestinal Transplant Registry. Lancet. 347, (9018), 1801-1803 (1996).
  4. Timmermann, W., Gasser, M., Meyer, D., Kellersmann, R., Gassel, H. J., Otto, C., Thiede, A. Progress in experimental intestinal transplantation in small animal models. Acta Gastroenterol Belg. 62, (2), 216-220 (1999).

Comments

1 Comment

  1. Hi
    Dr Fengchun Liu
    Congratulations for excellent video.
    I am from Brazil and I fellow in University in São Paulo.
    I started my trainning small bowell transplantation in mice. Now it is third transplantation, your video it is much important for trainining.
    Thank´s

    Reply
    Posted by: Anonymous
    April 14, 2010 - 9:23 PM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics