Farelerde Küçük Bağırsak Nakli

Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Fare ince bağırsak nakli modeli bağışıklık ret ve ekran yeni immünsupresif ilaçlar mechanismes çalışma için önemli bir araç olarak kabul edilmiştir. Ancak, bu model ilgili teknikleri son derece teknik bir sorundur çünkü kullanımı sınırlıdır. Şimdi değiştirilmiş teknik tanıtmak.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Liu, F., Kang, S. Small Bowel Transplantation In Mice. J. Vis. Exp. (7), e258, doi:10.3791/258 (2007).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

1990 yılından bu yana, takrolimus-bazlı immünsupresyon ve gelişmiş cerrahi teknikler, artan bir dizi güçlü immünosüpresif ilaçlar, enfeksiyon profilaksisi ve uygun hasta seçimi ve geliştirilmesi, her türlü bağırsak nakli için aktüeryal greft ve hasta sağ kalım oranları artırmak yardım etti. Parenteral beslenme geri dönüşü olmayan intestinal yetmezlik ve komplikasyonları olan hastalar artık rutin bir ince bağırsak nakli için düşünülmelidir. Ancak, ince bağırsak nakli için Survival oranlarını artırmak için yavaş giderek olumlu böbrek, karaciğer, kalp ve akciğer ile karşılaştırır. Ince bağırsak nakli diğer organlara kıyasla hala tatmin edici değil. Daha fazla ilerleme kaydedilmesi, immünoloji ve greft fizyolojisi daha iyi anlaşılmasını bağlıdır ve hayvan modelleri ile büyük ölçüde kolaylaştırılabilir. Fare ince bağırsak nakli modeli daha geniş bir kullanımı nakli gut immünoloji ve fizyoloji çalışmanın yanı sıra erken rejeksiyon tanısında etkin yöntemler gereklidir. Ancak, bu model ilgili teknikleri son derece teknik olarak oldukça zor, çünkü kullanımı sınırlıdır. Biz değiştirilmiş bir teknik geliştirdik. Portal ven ve inferior vena kava anastomoz yaparken, iki kalış dikişlerle, donör portal ven proksimal apeks ve alıcı vena kava distal apeks yapılır. Proksimal apeks kalış süresi ile bir düğüm sonra sağ inferior vena kava duvar ve donör s portalı dikiş, sonra inferior vena kava ve donör portal ven sol duvar inferior vena kava içinde devam dikişlerle kapatılır ven 10-0 sütür ile inferior vena mağara dışında devam dikişlerle kapatılır. Inferior vena kava ve 10-0 sütür bir tarafta anastomoz yapılır çünkü bu yöntemi gerçekleştirmek için kolay kanama ve tromboz önlemek için doğru boyut. Bu makalede, video tamamlamak için teknik ayrıntıları sağlar.

Protocol

Donör hazırlanması ve ince barsak hasat:

  1. Fare, çalışma alanına yerleştirilir ve pentobarbital yatar intraperitoneal enjeksiyonu ile ansetheized.
  2. Uzun bir orta hat abdominal kesi yapılır. Proksimal jejunum tespit ve 6-0 sütür ile bağlandı. Jejunum kravat distal Eklenmiş mezenterik damarlar 8-0 sütür ile bağlandı.
  3. Distal ileum tespit ve 6-0 sütür ile bağlandı. Ileum distalinde bağlı mezenterik damarları 8-0 sütür ile bağlandı.
  4. Portalı, çevresindeki yağ ve ekli dokulardan maruz bağlandı ve pancreaticoduodenal ve dalak damarları ayrılmıştır.
  5. Abdominal aorta maruz kalan ve çevre dokulara superior mezenterik arter maruz kalmaktadır.
  6. Heparin (10u/ml) 1 ml heparin için inferior vena kava enjekte edilir.
  7. Portal ven karaciğer hilusta bölünmüş olup, superior mezenterik arter aort, aort Carrel yama dahil ayrılmıştır.
  8. Jejunum ve ileum distalinde bağları ayrılır. Tüm ince barsak kaldırılır, daha sonra 4 ° C salin solüsyonu saklanır.

Alıcı hazırlanması ve nakli:

  1. Fare, çalışma alanına yerleştirilir ve pentobarbital yatar intraperitoneal enjeksiyonu ile ansetheized.
  2. Uzun bir orta hat abdominal kesi yapılır. Karın içeriği, abdominal aorta ve inferior vena kava maruz gazlı bez ile karın dışında geri çekilir.
  3. , Abdominal aorta ve inferior vena kava dalları maruz kalan ve 10-0 sütür ile bağlandı.
  4. Proksimal ve distal ligatür sırasıyla aorta ve inferior vena kava etrafında yerleştirilir.
  5. Venotomi, 30 gauge iğne ile alıcı inferior vena kava yapılır. Açılış sonra, mikro-makas ile donör portal ven eşit bir uzunluk kadar uzatılmıştır.
  6. Aortotomy, 30 gauge iğne ile alıcı abdominal aorta yapılır. Açılış sonra mikro-makas ile donör superior mezenterik arter Carrel patch eşit uzunluğu kadar uzatılmıştır
  7. Abdominal aorta ve inferior vena kava kesiler serum fizyolojik ile perfüze.
  8. Vericinin ince bağırsak, gazlı bez ile kapsayan alıcının karnın sol tarafına yerleştirilir.
  9. Kalış dikişlerle proksimal apeks ve alıcı vericinin superior mezenterik arter Carrel yama ile abdominal aorta distal apeks yerleştirilir.
  10. Sürdürülen dikişlerle alıcının abdominal aorta ve donör superior mezenterik arter Carrel yama sağ tarafında anastomoz tamamlandı.
  11. İki kalış dikişlerle proksimal anastomoz için donör portal ven ve alıcının inferior vena kava donör portalı ile apeks ve alıcının vena kava distal apeks önce yapılır.
  12. Inferior vena kava ve donör portal ven sol duvarda inferior vena kava içinde devam dikişlerle kapatılır.
  13. Sonra bir düğüm proksimal apeks kalış dikiş, inferior vena kava sağ duvar ve vericinin portal ven ile vena mağaranın dışında devam dikişlerle kapatılır.
  14. Vericinin alıcının karın sağ tarafında ince bağırsak üzerinden açıktır. Alıcının abdominal aorta ve donör superior mezenterik arter anastomoz sağ duvar devam sütür ile kapatılır.
  15. Tüm anastomoz yapıldıktan sonra, distal ligatür anastomoz kanama kontrol etmek için ilk kaldırılır.
  16. Proksimal ligatür anastomoz çok az veya hiç kanama varsa kaldırılır. Vericinin ince bağırsak hemen kan ile dolu, ince barsak kırmızı renk olur.
  17. Greft ileum distal ucundan 8-0 sütürler sürekli bir sütür ile alıcının jejunum proksimal uç-yan anastomoz.
  18. Donörün proksimal jejunum olarak exteriorized bir stoma ve 8-0 sütür her iki tarafında dört sütür ile karın duvarı sağ tarafta cilt için güvenli.
  19. Bağırsaklar karın boşluğuna geri döndü ve 6-0 devam dikişlerle kapatılır.
  20. Alıcı fare sıcak bir alan üzerine yerleştirilir. Bir saat sonra, alıcı kurtarır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Ince bağırsak nakli sonrası benzersiz bir immün yanıt farelerde ince bağırsak nakli modeli kullanarak kapsamlı bir araştırma konusu olmuştur. Graft-versus-reaksiyonlar, versus-host-greft reaksiyon, iki reaksiyonlar, kronik rejeksiyon ve hoşgörü bir arada yer almış gibi temel immunolojik reaksiyonlar. Ince bağırsak nakli modeli etkinliği kanıtlanmış ya da potansiyel klinik önemi hemen hemen tüm immünosupresif ajanlar test edilmiştir.

Biz verimlilik ve başarı oranlarını artırmak için çeşitli yollar fare ince bağırsak nakli tekniği güncellendi:

  1. Donör ince bağırsak içindeki açık ve hiç herhangi bir dışkı sol tutmak olmalıdır.
  2. Superior mezenterik arter aort Carrel yama kenarı Alıcının abdominal aorta açılması ile pürüzsüz ve eşit büyüklükte bölünmüş olmalıdır.
  3. Alıcının inferior vena kava ile portal ven anastomozlar superior mezenterik arter ile portal ven bükmeyin. Portal ven süperior mezenterik arter daha uzun olduğundan.
  4. Kan dolaşımını yeniden trombozu önlemek için, ince bağırsak, karın ortasına yerleştirilir ve uygun gerginlikte superior mezenterik arter ve portal ven tutmak olmalıdır.
  5. Ev sahibi ince barsak karın kapattıktan sonra trombozu önlemek için karın boşluğuna döndüğünde superior mezenterik arter uygun gerginlikte tutmak olmalıdır.
  6. 0.1 ml cefuroxine (20mg/kg) karın kapatmadan önce enfeksiyonu önlemek için karın boşluğuna bırakılır.
  7. Ameliyat sonrası enfeksiyonları önlemek için ince barsak anastomoz yaparken emin olmak için karın faaliyet içine dışkı akış izin vermeyin.
  8. Ameliyat sonrası ince barsak nekrozu önlemek için ince bağırsak hasat mezenterik damarlar zarar vermeyin.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Type Company Catalog Number Comments
Sutures 10-0 and 11-0 MONOSOF
Microscope Unversal S3 Carl Zeiss, Inc.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. SJ, M. iddleleton Is intestinal transplantation now an alternative to home parenteral nutrition. Proc Nutr Soc. 66, (3), 316-320 (2007).
  2. Lopez Santamaria, M., Hernadez Oliveros, F. Indications, techniques, and outcomes of small bowel transplant. Nutr Hosp. 22, Suppl 2. 113-123 (2007).
  3. Grant, D. Current results of intestinal transplantation. The International Intestinal Transplant Registry. Lancet. 347, (9018), 1801-1803 (1996).
  4. Timmermann, W., Gasser, M., Meyer, D., Kellersmann, R., Gassel, H. J., Otto, C., Thiede, A. Progress in experimental intestinal transplantation in small animal models. Acta Gastroenterol Belg. 62, (2), 216-220 (1999).

Comments

1 Comment

  1. Hi
    Dr Fengchun Liu
    Congratulations for excellent video.
    I am from Brazil and I fellow in University in São Paulo.
    I started my trainning small bowell transplantation in mice. Now it is third transplantation, your video it is much important for trainining.
    Thank´s

    Reply
    Posted by: Anonymous
    April 14, 2010 - 9:23 PM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics