איפוק ידני ומסלולי מנהל מתחם נפוצים בעכברים וחולדות

Biology
 

Summary

עבודה בצורה בטוחה ואנושית עם מכרסמי מחקר דורשת מיומנות ליבה בשיטות טיפול ובאיפוק. מאמר זה יציג את העקרונות הבסיסיים הנדרשים לטיפול בצורה בטוחה ויעילים לנהל תרכובות לעכברים וחולדות.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771 (2012).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

היכולת הבטוחה ויעילה לריסון עכברים וחולדות היא חלק חשוב של מחקר. עבודה בביטחון ובאנושיות עם עכברים וחולדות דורשת מיומנות בסיסית בשיטות טיפול ובאיפוק. מאמר זה יציג את העקרונות הבסיסיים הנדרשים לטיפול בבעלי חיים בבטחה. בשתי ידות, ואיפוק ביד אחת, עם חפצי ריסון תוכננו במיוחד יומחש. לעתים קרובות, חלק אחר של המחקר או בדיקה של השימוש בבעלי חיים הוא הממשל היעיל של תרכובות לעכברים וחולדות. למרות שיש מספר רב של מסלולים אפשריים ניהול (מוגבל רק על ידי הגודל והאיברים של בעלי החיים), רובם לא השתמשו באופן קבוע במחקר. וידאו זה מדגים כמה מהמסלולים הנפוצים יותר, לרבות תוך ורידים, תוך שרירית, תת עורית, וgavage האוראלי. המטרה של מאמר זה היא לחשוף את צופה מכירה את הטכניקות האלה לאיפוק בסיסי ונתיבי ממשל בסמים. וידאו זהלא מחליף ידות על הכשרה נדרשות במתקן שלך, אך נועד כדי להגדיל ולהשלים את ההכשרה הזאת.

Protocol

1. איפוק בטוח וטיפול עדין של בעלי חיים הוא חלק מרכזי של פרוצדורות

  1. הווידאו הזה נועד להיות תוספת להדרכה מעשית הניתנת על ידי המוסד שלך.
  2. תמיד להיות בטוח כי אישור IACUC או ועדת אתיקה הוא במקום לפני תחילת כל הליך ניסויי.
  3. כל אדם עובד על פרוטוקול צריך לדעת את הפרטים של נהלים שאושרו לאותו פרוטוקול, וכן אחרים שבם הם עובדים.
  4. מתקרבים המכרסם בביטחון ולטפל בבעלי החיים בעדינות, אך בתקיפות. שניהם טיפול מדי מחוספס ומהוססות גישות עלולים לגרום לעקיצות או סריטות למטפל או לפגיעות בבעלי החיים.
  5. בעת טיפול בבעלי חיים, תמיד יש את האפשרות של שחרור בשוגג או החיה להיות ירד. רוב המניפולציות אלה מבוצעים טובים ביותר על משטח עבודה, כך שאם בעל החיים נפלו או בורח, הוא לא נפגע וניתן בקלות תפסה אותו. עקוב instiמדיניות הנוגעת לבעלים חיים tutional כי פנו רצפה.
  6. לא לטפל על ידי חי קצה הזנב, כמו זו עלולה לגרום לפגיעת degloving של הזנב. היו זהיר במיוחד בחולדות או עכברים גדולות בהריון. השתמש תמיד בשנייה כדי לתמוך בגוף כמו שאתה מרים בזנבו.
  7. מחטים חדות העבודה הטובות ביותר בעת מתן זריקות. למרות מחטים למכרסמי מעבדה משמשות לעתים לזריקות מרובות, זה לא מומלץ למספר הסיבות, האחת מהן היא שהמד הקטן לעתים קרובות השתמש באמצעים שהמחטים קהות במהירות.
  8. ננשך או נשרט הוא תמיד אפשרות בעבודה עם בעלי חיים. אם עובד עם חומר או גורם מזהם שעלול לגרום לפציעות לבני אדם, לנקוט אמצעי זהירות מיוחדת, בעלי חי מניפולציות כאלה או סוכנים בברדסי קטר או ארונות biosafety.
  9. גישות והסתגלות רכות לטיפול לפני שתנסה הליך יכולים לשלם בחיות שפחות לחוץ על ידי טיפול.
  10. עיסוק איפוק לפני שתנסה ממשל מתחם, ובפועל מתן חומרים לשליטת בעלי חיים לפני ניסויים בעכברים.
  11. תרגול הטכניקות הללו מחדיר באופן קבוע בטחון ואמון בתוצאות טיפול טוב יותר, בעלי חיים פחות לחוץ, ותוצאות מדעיות טובות יותר.
  12. עם כל טכניקת טיפול, אם בעל החיים הם סרבנים, לנסות שיטה אחרת. בעלי החיים (ומטפל) עשויים ליהנות גם לשים את החיה לכלוב ולנסות שוב מאוחר יותר.

2. איפוק ידני

  1. איפוק עכבר ביד האחת
    1. הרם עכבר בבסיס הזנב ולמקם אותו על מכסה כלוב, כלוב העליון בר תיל, או משטח מחוספס דומה.
      1. איפוק עכבר ביד אחת מתבצע לרוב עם היד הלא הדומיננטית, ומשאיר את היד החופשית לשימוש הדומיננטית.
      2. שיטה חלופית מאפשרת לטכנאי להשתמש מעיילם המעבדה או השרוול אחיד המכסה את הזרוע למצבחיה לפני האיפוק.
    2. קח את בסיס הזנב בין 3 ובאצבע ה 4, ואילו בעדינות מושך לאחור על הזנב. זה יגרום בעכבר כדי לתפוס את המשטח עם הארבע הרגליים ולמשוך קדימה.
      1. אל לתפוס עכברים על ידי הקצה של הזנב, במיוחד אם השעיית כל משקל גופם בזנבם. זה יכול לגרום לפציעה בdegloving שבעור של הזנב מחליק מעל.
    3. בשלב בא, בתקיפות לתפוס את העכבר בעורפו עם אותה היד שמחזיקה את הזנב. לתפוס עם האצבע והאגודל ליד הבסיס של הראש ולהאריך את האחיזה על גביו של העכבר על ידי שילוב של האמצע ואצבעות טבעת.
      1. הקפד להחיל לחץ מספיק פשוט, או תוקף, לעור סביב הצוואר כדי למנוע את העכבר מהפיכה או פיתול מתוך האיפוק, אבל לא מושך את העור כל כך חזק שבעלי החיים לא יכולים לנשום.
      2. בקרה של הראש היא קריטית. אםעכבר יכול להזיז את הראש שלה, זה יכול להגיע לאצבעות של האמרגן ועלול לנשוך. זו עלולה להתרחש כאשר מפעילים מתחילים לתפוס את העכבר רחוק מדי במורד הגב, ולא ממש מאחורי הגולגולת.
  2. איפוק מאוס בשתי ידות
    1. הרם עכבר בבסיס הזנב והמקום על מכסה הכלוב, מכסת בר תיל, או משטח מחוספס.
      1. שיטה חלופית מאפשרת לטכנאי להשתמש מעיילם המעבדה או השרוול אחיד המכסה את הזרוע כדי למקם את החיה לפני האיפוק.
    2. משוך בעדינות לאחור על הזנב והעכבר יהיה לתפוס את המשטח עם ארבע רגליים ולמשוך קדימה.
    3. בשלב הבא, ביד השנייה במהירות ובתקיפות לתפוס את העכבר בעורף (ראה איפוק יד אחת למעלה).
    4. עם זנב ביד אחת והעורף בצד השני, הרם את העכבר ולתחוב את בסיס הזנב בין כף היד והאצבע ה 3 באו 4 של היד האוחזת בעורפו.
      1. כמו בשיטה ביד אחת, בתקיפות לתפוס בעורפו כדי למנוע את העכבר מסיבוב או הפיכה בעת אינו אוחז בעצמה כזאת שבעלי החיים לא יכולים לנשום.
      2. אם העכבר הוא עמיד בפני scruffing, לחץ עדין על גביו של העכבר יכול לאפשר היד כדי לעלות לאחיזה טובה יותר.
  3. איפוק עכברוש; scruffing
    1. scruffing העכברוש מתבצע בדרך כלל בשתי ידות, ורק בחולדות קטנות יותר. זה לא טכניקה נפוצה בגלל חולדות מקבלות פחות מscruffing מעכברים, אבל זה שימושי במצבים מסוימים איסוף דם.
    2. לתפוס את העכברוש בזנב עם היד הלא הדומיננטית ומושך בעדינות לאחור על משטח מחוספס (כמתואר לעיל לעכברים).
      1. היזהר לתפוס ליד בסיס הזנב, כמו העור של זנבו של העכבר יכול לבוא מאם תפס יד הקצה.
    3. להחזיק את הזנב בחוזקה ביד ומתקרב בעורפו של העכברוש מהאחורי.
      1. לexample, אם זנבו של העכבר הוא ביד השמאל של המטפלים, לא הגיש את העכברוש מהאף לעורפו עם יד ימין. במקום זאת, להגיע מעל יד השמאל, ולפנות העורף מאחור.
    4. החל לחץ עדין על הגב של העכברוש, על שכמות ואז לאחוז בעורף קרוב לבסיס הגולגולת בין האצבעות וכף היד.
    5. שליטה בראש היא חשובה למניעת עקיצות. נשיכות עכברושים יכולות לגרום לפציעה חמורה.
    6. חולדות יכולות להשמיע כאשר רסנו באופן זה.
  4. איפוק עכברוש; על אחיזת הכתף
    1. לתפוס את העכברוש בזנב עם היד הדומיננטית ומושך בעדינות לאחור על משטח מחוספס (כמתואר לעיל לעכברים).
      1. שיטה חלופית מאפשרת לטכנאי להשתמש מעיילם המעבדה או השרוול אחיד המכסה את הזרוע כדי למקם את החיה לפני האיפוק.
      2. היזהר לתפוס ליד בסיס הזנב, כמו זנב עור ca של החולדהn יורד אם תפס יד הקצה.
    2. הנח את היד הלא הדומיננטית מעל גבו של העכברוש, מתקרב מאחור.
    3. לתפוס את החולדה סביב בית החזה עם קמיצה, זרת ואגודל. הראש של החולדה צריך להיות בין האצבע ואמה.
      1. לא לדחוס את בית החזה.
    4. העכברוש יכול להיות מוחזק באופן זה ביד אחת, אם הגוף התייצב נגד המטפל.
  5. איפוק עכברוש; תחת אחיזת הכתפיים
    1. לתפוס את העכברוש בזנב עם היד הדומיננטית ומושך בעדינות לאחור על משטח מחוספס (כמתואר לעיל לעכברים).
      1. שיטה חלופית מאפשרת לטכנאי להשתמש מעיילם המעבדה או השרוול אחיד המכסה את הזרוע כדי למקם את החיה לפני האיפוק.
      2. היזהר לתפוס ליד בסיס הזנב, כמו העור של זנבו של העכבר יכול לבוא מאם תפס יד הקצה.
    2. הנח את היד הלא הדומיננטית על rבגב, מתקרב מאחור.
    3. לתפוס את החולדה סביב בית החזה, ממש מתחת לשכמות. האמות של החולדה יש ​​דחף בעדינות עם האגודל ואצבע המורה.
      1. האמות צריכות לעבור מתחת לסנטרו של העכברוש, ומונעות ממנו לנשוך.
      2. לא לדחוס את בית החזה.
    4. העכברוש יכול להיות מוחזק באופן זה ביד אחת, אם הגוף התייצב נגד המטפל.
  6. Decapicone
    1. Decapicone היא חתיכה גמישה, בצורה החרוטה של ​​פלסטיק דק עם חור בקצה אחד. החור קטן מספיק, כך העכבר או החולדה יכול לקבל את אפה מחוץ לבור, אבל לא את שאר הגוף.
    2. כדי לרסן את החיה, הנח את העכבר או החולדה בDecapicone של גודל מתאים.
    3. דחוף את החיה קדימה עד אפה מזדקר מהחור בDecapicone.
    4. כך או להחזיק את התיק נסגר סביב הזנב, או להשתמש בעניבת טוויסט לאטום את החיה בחרוט.
    5. Advantage של Decapicone הוא שהפלסטיק הדק מאפשר זריקות דרך החומר.
    6. החסרון הוא שהחומר אינו נושם וחיות יכולות להיות יתר על מידה. רק לשמור על בעלי חיים בDecapicone במשך זמן רב ככל שנדרש כדי לבצע את ההליך.
  7. עוצר פלסטיק אקריליק / נוקשה
    1. התקני ריסון פלסטיק הם שימושיים במיוחד כאשר הזנב של בעל החיים חייב להיות נגיש.
    2. אלה ניתן לרכוש באופן מסחרי או במעבדה.
    3. הגודל צריך להיות מתאים לבעלי החיים לרסן - החיים לא צריכים להיות מסוגלים להסתובב באיפוק.
    4. הנח את החיה במכשיר על ידי איפוק 1 מרסן בעדינות את בעל חיים ומשחררים אותו, ראשו תחילה, בפתיחה של המכשיר.
      1. זה עשוי לעזור כדי לכוון את המכשיר כלפי מעלה מעל לכלוב, כמו מכרסמים לעתים קרובות לטפס לתוך מבנה מאובטח, כמו צינור.
    5. הנח את הסגר על הסוףמכשיר, נזהר שלא לפגוע בזנבו של בעל החיים, רגליים, או אשכים.
    6. לצמצם את הזמן בילה בrestrainers מאחר שבעלי חיים עלולים להתחמם יתר על המידה.
  8. בעלי החיים עשויים להיות מרוסנים בדרכים אחרות גם כן, כגון על ידי עטיפתו במגבת קטנה, או פשוט על ידי חופן את יד על בעלי החיים. טכניקות יכולות להיות מותאמות כדי לענות על הצרכים של החיה והעובדת. תמיד כדאי להימנע מנשיכות וסריטות ולאבטח את הבהמה משחרור מקרי או נפילות מגבהים.

3. שיטות ניהול מתחם

  1. זה בהחלט לא רשימה ממצה ומסלולים אחרים אפשריות. פרוטוקול זה מבקש להמחיש את המסלולים הנפוצים ביותר. מסלולים אחרים עשויים לדרוש הרדמה של בעלי החיים והקלה בכאב שלאחר ממשל.
  2. ללא קשר לשיטת ממשל בשימוש, כדי להיות בטוח שכל החומרים מוכנים לפני ריסון בעלי חיים.
  3. חומרים מימיים הם קלים יותר מאשר להזריק חומרים עבים, כגון בסיס שמןתרכובות ד. תמיד להזריק תרכובות עבות מאוד לאט כדי להימנע מהזיז את המחט מהמזרק.
  4. שיקולי מחט מזרק ובשימוש ציבורי.
    1. הקפד תמיד לאחסן ולהיפטר ממזרקים ומחטים כראוי.
    2. אם אתה חדש לשימוש במזרקים ומחטים, תרגול טיפול במזרק והזריק לפני שתנסה להזריק בעלי חיים. באופן אידיאלי, תוכל בביטחון כדי לתפעל את המזרק ומחט ביד אחת, ומשאיר את השני לריסונו של בעל החיים. יד יציבה ממזערת מחט תנועה אשר ממזערת את הניזק לרקמות.
    3. מחטים יש נקודה, שיפוע, פירים, ורכזת. מזרקים יש לך טיפ, חבית, וטובל (1 איור ו ב).
    4. מחטים הן בגודל של מד ואורך. מספר המד הגדול יותר, קטן יותר המחט. מחטים קטנות נוטות מאוד ערפול (מצרימה, להרכיב על הקצה) ולא אמור לשמש לבקבוקוני פירס רב במינון (איור 1 ג). תמיד לבחורמחט הקצרה ביותר שיפעל לניהול מתחם.
    5. המחט מחוברת לקצה המזרק ידי הרכזת. מזרקים מספר טיפי נעילה. תמיד להיות בטוח המזרק מחובר היטב למחט.
    6. מחטים מוחדרות טובה ביותר לבעלי החיים עם השיפוע למעלה, במיוחד לזריקות תוך ורידים.
    7. לעולם אל תסכם מחטים ביד. זוהי סיבה שכיחה לפציעות דקירת מחט. השלך מחטים ומזרקים כראוי בכותרת הדיאזים מכולות. אם יש recapped מחטים, מכשירים זמינים (איור 1 ד).
  5. אפי (IN)
    1. לרסן את החיה כפי שתואר לעיל.
    2. באמצעות מזרק או pipettor, הנח כמות קטנה של החומר שיש בשאיפה בnares של בעלי החיים.
    3. צפה לחומר להיעלם לתוך nares.
    4. חזור על פי צורך עד לעצמה הרצויה כבר מנוהלת.
  6. תוך שרירית (IM)
    1. לרסן את החית הדואר כפי שתואר לעיל. ודא אחת מהרגליים האחוריות של בעלי החיים הוא בחינם, והתייצב לזריקה. איפוק עלול לקחת שני אנשים. אם בעל החיים יכולים לבעוט במהלך ההזרקה, ניזק לשרירים מהמחט יגרום.
    2. המחט צריכה להיות מוכנסת בניצב לעורו של בעל החיים. השימוש במזרק ומחט בגודל המתאים,, להכניס את המחט כ פוע עמוק ולהזריק את החומר לתוך שריר הירך של בעלי החיים (קדמת הירך) או מסת שריר ירך לרוחב.
    3. אין להזריק לתוך מסת השריר האחורית כפי שניתן לפגוע בעצב הירך.
    4. אם בעלי חיים הם לקבל זריקות IM מרובות, רגליים חלופיות.
  7. Intraperitoneal (IP)
    1. לרסן את החיה כפי שתואר לעיל.
    2. עצת אפה של החיה לכיוון הרצפה, וחושף את הבטן להזרקה.
    3. אתר קו האמצע של החיה ונפשית לחלק את הבטן לרביעים (איור 2). הנמוך יותררביעים, במיוחד ברבע הימני התחתון של החיה, הם האתרים המתאימים לזריקות intraperitoneal.
      1. רבע הימני התחתונה נבחר בשל חוסר מבנים אנטומית חשובים.
    4. שימוש במזרק ומחט בגודל המתאים-, להזריק את החומר לבעלי החיים.
    5. אם בעלי חיים הם לקבל זריקות IP חוזר ונשנות, לסירוגין במקום הזרקה.
  8. תת עורית (SC, SQ)
    1. לרסן את החיה כפי שתואר לעיל. בעלי החיים חייבים להיות מרוסנים באופן רופף עד כדי כך שהעור יכול להיות מגויס.
    2. אם בעלי חיים הם להיות מטופלים באופן שגרתי לאחר הזרקת SC, אין להשתמש בעורף (העורף). במקום זאת, השתמש עור על ישבן הגבה או האגף. אם בעלי חיים הם לקבל זריקות SC מרובות, אתרים חלופיים להזרקה.
    3. לתפוס את העור ומשוך בעדינות כלפי מעלה, מה שהופך "אוהל".
      1. אם מבצע את הסולו ההזרקה, להכניס את המחט ולא בעדינותאף אוזן גרון העור כלפי מעלה עם המחט כדי לאשר שהמחט היא במרחב התת עורית.
    4. השימוש במזרק ומחט בגודל המתאים-, הכנס את המחט בזווית של ° 30-45 לתוך עור האוהלים, ולהזריק את החומר. הזרק מקביל והרחק מהאצבעות מחזיקות כלפי מעלה בעור.
    5. אם ההזרקה היא מוצלחת, נפיחות קטנה מתחת לעור שנראה.
    6. לאחר הזרקה, להפעיל לחץ עדין כדי למנוע זרימה חוזרת של החומר.
  9. Intradermal (ID)
    1. לזריקות intradermal, בעלי חיים לעתים קרובות מגולחים כך שהעור שניתן לראות.
    2. איפוק של החיה לזריקות intradermal מרובות עלול להיות קשה. במקרה זה, תרופות הרגעה כימית עשויות להיות נחוצות. האתרים לזריקות זהות הם זהים לאלו של SC.
    3. הכנס מחט בגודל המתאים, לתוך העור בזווית ° 15-30. המחט לא תוכנס רחוק מאוד וההזרקה אמורה להיפגש עם מחדשsistance.
      1. גישה חלופית היא לצבוט בעדינות את העור בסמוך למקום ההזרקה ולהכניס את המחט בזווית רדודה מאוד. זה שימושי בעכברים שכן הוא מונע מהם לנוע בתהליך ההזרקה.
    4. אם ההזרקה היא מוצלחת, בועה קטנה שנראית. זה יהיה חיוור יותר מעור שמסביב.
    5. לאחר הזרקה, להפעיל לחץ עדין כדי למנוע זרימה חוזרת של החומר.
  10. Intravascular (IV)
    1. ורידי הזנב לרוחב השמאל וימין הם ציר גישת כלי דם הנפוץ ביותר בשימוש בעכברים וחולדות.
    2. דרכי גישה של כלי דם אחר אפשריים בעכברים וחולדות, אך בדרך כלל דורשים הרדמה והקלה על כאבים שלאחר הזרקה.
    3. להזרקת וריד זנב, לרסן את החיה בDecapicone או עוצרים מכרסם פלסטיק.
    4. הנח זנב של בעל החיים מתחת לפנס, או בהתקן התחממות מוגן. זו תקדם הרחבת כלי דם, ומאפשרת הזרקה קלה יותר.
      1. לא לחמם יותר מדי את החיה.
      2. לחולדות זכרים גדולות, מנקה את קשקשי העור מעל הזנב עשוי לאפשר להדמיה טובה יותר של הווריד. ניקוי צריך להיות עדין כל כך שהעור לא פצוע.
    5. לשמור על הזנב של החיה על ידי הקצה עם היד הלא הדומיננטית. זה יישר את הזנב.
    6. סובב את זנב ¼ להפוך למקום את ורידי זנב dorsally להזרקה קלה יותר. בעלי החיים יש שני עורקים לרוחב זנב וזנב עורק גחון (איור 3).
    7. מתקרב זנב עם המחט בזווית ° 15-20. התחילו בחלקו האחורי של הזנב.
      1. הוורידים שטחיים והמחט לא צריכה להיות מוכנסת הרבה מעבר להטיה.
      2. אם ההזרקה החלה כdistally ככל האפשר, יש וריד ניזוק יותר לנסות זריקה, צריך לנסות הראשון להיכשל.
    8. מזריק את החומר. זריקה מוצלחת תביא את החומר שנכנס לווריד ללאהתנגדות והבחלה של וריד הזנב לתקופת ההזרקה.
      1. אל לשאוב לפני ההזרקה, כמו זה יקרוס וריד.
      2. לחץ עדין באתר venipuncture לאחר הזרקה יהיה למנוע דימום.
    9. בזריקה לא מוצלחת, החומר לא זורם בקלות. במקום זאת, עור הזנב הוא מחוויר או בחומר לא ניתן להזריק בכל.
  11. Intragastric ממשל (gavage האוראלי)
    1. לבצע gavage רק על בעלי חיים מאופקים, ערים. הרדמה או הרגעה מגדילה את הסיכון לשאיפה (חומר בטעות נכנס לריאות).
    2. בחר מחט האכלה דרך פה בגודל המתאים לשימוש. מחטים אלה יש עצות כדור בסוף כדי למנוע את מעברם לקנה הנשימה.
    3. אורך צורך ניתן לקבוע על ידי החזקת בעלי החיים המאופקים ומדידה מהפינה של הפה. טיפ הכדור של מחט ההאכלה צריך להגיע ל< הצלע האחרונה של בעל החיים (חזק> איור 4). מד מחט נקבע לפי המשקל של החיה.
    4. לרסן את החיה כך שהראש והגוף שלה הם בקו ישר, אנכי. זה מיישר את הוושט, המאפשר תנועה קלה יותר של מחט ההאכלה.
    5. הכנס את קצה הכדור של המחט לתוך פיו של בעל החיים, על הלשון. ברגע שהמחט נמצאת במקום, להביא את מחט מזרק ומעלה, לחץ בעדינות על החיך, ולכן אפה של החיה הוא לכיוון התקרה.
      1. בחולדות המחט ייתכן שתצטרך להיות מנותבת במקצת כשהוא עובר האחורי של הגרון. כל מתח במחט מצביע על הצורך להתאים את המצב
    6. תמשיך להעביר את המחט עד למרחק שנקבע מראש הוא הגיע. המחט צריכה לעבור בקלות, ובעלי החיים לא צריכים להשתנק או להיחנק.
    7. לנהל את החומר. זה צריך לזרום אל הקיבה. אם יש התנגדות או את הנשימות כבדות של בעלי החיים, החונק, או הופך לכחול, להפסיק באופן מיידי ולהסיר את הצורךle. בעלי חיים שaspirated עשויים לדרוש המתת חסד, בהתאם למתחם להיות מנוהל.

4. נציג תוצאות

כאשר חי מטופלות כראוי, יש מינימום של מתח עבור בעלי חיים והן מטפל. מטפלים לא מקבלים ננשכו או נשרטים, וחי מטופלות אנושיות ומיומנות. תרכובות מנוהלות באמצעות המסלול הנכון עם ניזק מינימאלי לרקמות וכחוסר נוחות לבעל החיים קטן ככל האפשר.

אם חוקרים חדשים לטיפול בבעלי חיים, עבודה עם בובת פרווה קטנה עשויים להיות מועיל. יש גם סימולטורים זמינים לטכניקות מסוימות של בעלי חיים, כגון עכברי קוקן. עבור חוקרים רבים, יש סיכוי קטן לזכות בהיכרות עם מחטים ומזרקים לפני העבודה עם בעלי חיים. חלקים יציגים של מחט מזרק ובבאים לידי ביטוי באיור 1A ו-1B. לפני הזרקת חיות בפעם הראשונה, זהיכול להיות שימושי כדי לתרגל הזרקה לפני העבודה עם בעלי חיים. מחטים עדינות מאוד, כמו 28 ו 30 גרמו, קלות לניזק. אם נסיגת חומרים מבקבוקונים רבים שימושיים, להשתמש במחט גדולה יותר למטרה ולאחר מכן להחליף אותו עם מחט המד הקטן יותר להזרקה. מחט זמזם נראית באיור 1C. אמצעי זהירות בסיסית צריך להילקח בעת עבודה עם מחטים, כגון לא recapping מחטים המשמשות ביד. 1D האיור מראה recapper מחט בשימוש. זה יכול להיות בעל ערך רב לחוקרים שצריכים להסיר את מחטים, למשל, דם מפורש ממזרק בלי המוליזה ראה כאשר הדם נדחף דרך מחט.

איורים 2, 3 ציוני דרך להמחיש להזרקת intraabdominal והמבנה הטיפוסי של הזנב, הממחישים את המטרות לזריקה. איור 4 מספקים דוגמאות לשינוי הגודל הנכון של מחטי gavage. מחטי Gavage צריכות להגיע מפיו שלnimal לימין מתחת לצלע האחרונה.

איור 1
איור 1). מחט וB) חלקי מזרק, שהכותרת. ג) בר במחט הנגרמת על ידי הנפקה חוזרת של המחט לתוך בקבוקון שימוש רב. ד) recapper מחט בשימוש.

איור 2
איור 2. רביעים של בטן הגחון. להזריק רק לשני הרביעים הנמוכים, מעדיף הרבע ימני התחתון.

איור 3
איור 3. סכמטי של הזנב בחתך, הממחיש את הקשר של עורקים וורידים למבנים הגרמיים וtendenous.

איור 4
איור 4. מחט Gavage אומדת בחולדות. א) מחט Gavage מדי לוןגרם. B) מחט gavage בגודל מתאימה. ג) מדידת Gavage מחט קצרה מדי, D) בדקה בידי לצלע האחרונה כדי לקבוע גודל המחט gavage מתאים.

עכבר עכברוש
מסלול נפח מומלץ מד ואורך מומלץ של מחט נפח מומלץ מד ואורך מומלץ של מחט
1 אפי 5-25 μl N / 5-25 μl N /
1,2 תוך שהרירית מיליליטר 0.00005 / g <23 גרם, 0.5-0.75 ב 0.1 מ"ל / ק"ג <21 גרמו, 0.5-0.75 ב
1,2 intraperitoneal 0.02 מ"ל / גרם <21 גרמו, 0.75 ל 1 ב 10 מ"ל / ק"ג <21 גרמו, 0.75 ל 1 ב
תת עורית 1,2 0.01 מ"ל / גרם <22 גר ', 0.5 ל 1 ב 5 מ"ל / ק"ג <22 גר ', 0.5 ל 1 ב
1 intradermal 0.05-0.1 מ"ל <26 גרם, 0.5 ב 0.05-0.1 מ"ל <26 גרם, 0.5 ב
1,2 תוך ורידים 0.005 מ"ל / גרם * -0.025 מ"ל / גרם <25 גרם, 0.75 ל 1 ב 5 מ"ל / ק"ג * ml/kg-20 <23 גרם, 0.75 ל 1 ב
1,2 gavage האוראלי 0.01 מ"ל / גרם מחט 20-22 גרם האכלה מ"ל / ק"ג 5-10 מחט 16-20 גרם האכלה

* המספר הראשון הוא הנפח נתון כמו בולוס תוך ורידים במשך כ 1 דקה. הכרך השני הוא הנפח שניתן לתת עירוי איטי במשך 5-10 דקות.

Discussion

פרוטוקול זה יש לראות כמבוא לטיפול בבעלי חיים וממשל חומר שנועד להשלים את הידות על אימונים ספקו במתקן של החוקר. אמצעי הריסון שישמש ואת המסלולים של ממשל חומר יש לשקול בעיצוב הניסיון וכאשר המחקר או פרוטוקול ועדת אתיקת הפרוטוקול כתוב.

הדרכה בנהלים הקשורים לבעלי חיים היא חיונית להצלחתו של מחקר. כדי לבצע את רוב הניסויים, בעלי חיים חייבים להיות מטופלים על ידי צוות מחקר, וטיפול בבעלי החיים הטוב יותר, פחות לחוץ בעלי החיים 3. הרגיל את בעלי חיים למגע אנושי עדין יכול להפחית את הלחץ ולעשות חי נבדקים צייתנים יותר 4,5. מתח טיפול הוכח להשפיע על כמה סוגים של 6 מחקר וזה אפשרי זה יכול להשפיע גם על אחרים. איפוק של מכרסמים צריך להתבצע בזהירות, אבל טיפול חברה (לא סופיאחיזה עשויה לגרום לפציעה למכרסם ומטפל) וצריכה להיות לכל תקופה הקצרה ביותר המעשית. שיטות ריסון בדרך כלל נבחרו על סמך גודלו של בעל החיים או הגישה בקשה. לדוגמה, טיפול בחולדות בוגרות בעורפו, אם כי ניתן, לעתים קרובות נתקל בהתנגדות חזקה של העכברוש, במיוחד אם המטפל הוא חסר ניסיון. מחזיק עכבר או חולדה ביד יכולה להפוך את הגישה לורידי הזנב קשה ומכשיר איפוק לעתים קרובות בחר לשמור את החיה בשקט ככל האפשר.

כאשר חוקרים להתמודד עם בעלי חיים, לעתים קרובות הם מבקשים לנהל את מתחם או ביולוגי למחקר נוסף. המסלול של מתן חומרים יכול להשפיע על קליטה, זמינותו ביולוגית, והתאמת לניסוי מסוים. היכרות עם מסלולים שונים צריכה לספק לחוקרים עם היכולת לניהול החומר שלהם בצורה הטובה ביותר האפשרית עבור המחקר שלהם. לדוגמה, במסלול שמקדם ספיגה מהירה של חומר, כמו ורידים או intraperitoneal, אין להשתמש אם החוקר רוצה לנהל את החומר באופן איטי יותר טווח. הביקורות האחרונות של חלק מהטכניקות האלה ושיקולים לנפח, ציוד, ומומס ניתן למצוא בשני מסמכים של טרנר ואח'. 1,7

בכל פעם שהם חומרים שניתן למכרסמים במעבדה, יש להתחשב בגודל הנכון של ציוד ונפח של חומר (המפורטים בטבלה 1). כיאות ציוד בגודל או בכמויות גדולות עלול לגרום לחוסר נוחות, פציעה או מוות של בעל החיים. באופן כללי, חומרים המנוהלים parenterally הם עקרים, אלא אם מטרות המחקר היינו להפוך את זה בלתי אפשרי (כלומר, מחקרי חיידקים). תרכובות ביולוגיות וצריכות להיות במומס או רכב שתהיה ההשפעה לפחות על החיה. PH פיסיולוגי (7.3 -7.4) הוא מקובל היטב, במיוחד עבור תת עורית, תוך שרירית, וintrapeמסלולי ritoneal. רמות ה-pH ללא פיסיולוגיות בחומרים המנוהלים על ידי נתיבים אלו עלולות לגרום לכאב או נימק וניזק לרקמות. טווחים רחבים של pH נסבלים עם מסלולי intragastric ווריד 7. במכרסמים קטנים, שיקול חשוב נוסף הוא האפשרות של מצמרר אם כמויות גדולות של נוזלים בטמפרטורת חדר מקבלות. אם נוזלים מתבצעים בהזרקה לוריד או intraperitoneally, במיוחד בתמיכה של בעלי חיים חולים, הם צריכים להיות חממו לטמפרטורת גוף (37 מעלות צלזיוס).

את המסלולים של ממשל שנדונו בפרוטוקול זה הם אלה ששמשו בדרך כלל בתכניות מחקר רבות, הם פשוטים להורים, ובדרך כלל לא דורש הרדמה. מגוון כמעט אינסופי של מסלולים של ממשל הוא אפשרי, עם זאת, כולל תוך גולגולתי, intrathecal, אפידורל, intratracheal, intraosseous, וintraarticular אבל לתת שם כמה. הדרכה במסלולים מיוחדים אלה של ממשל צריכה להיות בקשה מאנשי WHo יש ניסיון רב עם המסלול ותוצאות טובות.

במכרסמים, המסלול אפי משמש בדרך כלל כדי ללמוד חומרים שהוכנסו לריאות דרך "טבעית" יותר; שיטה מהחדרת intratracheal. עכברים וחולדות הם נושמים אף מחייבים את, כך שפיתו אותם לשאוף כמויות קטנות מאוד של נוזל זה לא קשה, גם בבעלי חיים מודעים. מאז רירית האף היא מצוידת היטב בכלי דם, מנהל אפי של כמה חומרים יכול להיות דומה לעירוי לוריד. מסלול זה אינו מומלץ בבעלי חיים עם נזלת, עם זאת, כפי שעלול לפגוע בספיגה. ניסיונות לנהל כמויות גדולות על ידי התוואים אפי עלולים לגרום לקוצר נשימה או בטביעתו של בעל החיים.

זריקות תוך שרירית לספק ספיגה מהירה של חומרים. זריקות לשריר יכולות להיות מאתגרות בחולדות ועכברים, בשל גודלם הקטן והשרירים בהתאמה קטנים. הם מבוצעים ברגל האחוריתs. בשל הפוטנציאל לניזק של עצב הירך, femoris הארבעה הראשיים הוא השריר של בחירה.

למרות שגם תת עורית ומסלולי intradermal כרוך בעור, יש הבדלים בין הזמינות הביולוגית של חומרים הממוקמים בעור לעומת subcutis. תת עורית ממשל נחשב לעתים קרובות מסלול "תצהיר", עם ספיגה איטית יותר ממסלולים אחרים, כגון תוך ורידית או intraperitoneal. ממשל intradermal משמש לנפחים קטנים מאוד של חומרים, בדרך כלל חומרי immunostimulatory כגון תערובות אדג'ובנט-אנטיגן. בשני המקרים, את החומרים המנוהלים צריכים להיות של pH הפיזיולוגי ולא מעצבן. לא צריך להתבצע intradermal או תת עורית זריקות בעורף, שכן מדוברים באתר בשימוש נפוץ לריסון המכרסם.

עירוי לוריד וintraperitoneal נחשבים לעתים קרובות מקביל במכרסמים. נתיבים תוך ורידים של מינון לספק יותר rספיגת apid של תרכובות, עם זאת, בעוד שממשל intraperitoneal צריך להיחשב שווה בערך לנטילה דרך פה 8. יש להקפיד עם intraperitoneally תרכובות מנוהל כפי שהם עלולים לגרום לכאב אם נאגרו לא תקין. המסלול המשותף של ממשל בולוס תוך ורידים במכרסמים הוא דרך ורידי הזנב. אם עירוי לוריד כרוני של חומר הוא רצוי, השתלה של ורידים או עורקי cannulae צריכה להיחשב. חומרי הזרקה לוריד צריכים להיות מועברים נקי מחיידקים, וצריך להיות מוצגים כדי להיות בטוח כדי לנהל דרך וריד. לדוגמה, חומרים שעלולות לגרום המוליזה, פקק או דלקת כלי דם אינם מתאימים לעירוי לוריד.

מסלול gavage intragastric או בעל פה משמש לעתים קרובות לחקות מסלול מינון נפוץ בבני אדם. זה גם מאפשר מינון מדויק של חומרים בהשוואה לנטילה דרך פה באמצעות מזון או מים. זמינות ביולוגית של תרכובותמנוהל באמצעות gavage ישתנה בהתאם למדינה הנמאסת / צום של בעלי החיים, כמו גם מומס או הרכב של המתחם או הביולוגי. מחטי Gavage או האכלה צריכות להיות בגודל המתאים לבעלי החיים בשימוש, ויש לנקות בין חיות, אם מחטים חד פעמיות gavage אינן מעשיות. פציעות שנגרמו על ידי gavage אינן נדירות וכוללות תצהיר של החומר לתוך הריאות או הקרע בקיבה או הוושט. אימון צריך להיות מפוקח על ידי צד מנוסה והתחייב על בעלי חיים מורדמים ראשונה, ואז חיות מורדמות (שיהיה מורדם) לפני gavage בעודם ערים הוא ניסה. ניסיונות gavage ראשונים על חיות ערות צריכים לערב חיות בגודל ממוצע ונפחים קטנים של חומר, כגון מי מלח, שלא יגרמו לפגיעה אם ההליך משתבש. בעלי חיים יש להעריך באופן הדוק לסימני מצוקה, כגון מתנשף, פונים, דימום כחול, או ריור העודף, לאחר gavage ולהרדים במקרה צורך. אם euthanasia נדרש, בעלי החיים צריכים שלאחר מוות כדי לקבוע מדוע הליך gavage נכשל.

Disclosures

הכותבים הם עובדי צ'ארלס ריבר.

Acknowledgments

המחקר הנוכחי נתמך על ידי צ'ארלס ריבר.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Needles Various Various Needles are sold by both gauge and length. Check both before ordering.
Syringes Various Various Always choose an appropriate size for the volume to be administered.
DecapiCones Braintree Scientific DC-200, DCL-120, MDC-200 Available in mouse and rat sizes.
Rodent restrainer Harvard Apparatus, Braintree Scientific, Plas-Labs, others Available in clear Plexiglas, adjustable plastic, and sized for mice and rats.
50 ml conical tube Various
Feeding needles VWR, Popper and Sons Various Fit the needle gauge and length to the animals as described above. Both disposable and reusable feeding needles are available.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613 (2011).
  2. Diehl, K. H. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. J. Appl. Toxicol. 21, 15-23 (2001).
  3. Hurst, J. L., West, R. S. Taming anxiety in laboratory mice. Nat. Methods. 7, 825-826 (2010).
  4. Maurer, B. M., Döring, D., Scheipl, F., Küchenhoff, H., Erhard, M. H. Effects of a gentling programme on the behaviour of laboratory rats towards humans. Appl. Anim. Behav. Sci. 111, 329-341 (2008).
  5. Cloutier, S., Newberry, R. C. Use of a conditioning technique to reduce stress associated with repeated intra-peritoneal injections in laboratory rats. Appl. Anim. Behav. Sci. 112, 158-173 (2008).
  6. Romanovsky, A. A., Kulchitsky, V. A., Simons, C. T., Sugimoto, N. Methodology of fever research: why are polyphasic fevers often thought to be biphasic. Am. J. Physiol. 275, 332-338 (1998).
  7. Turner, P. V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., Brabb, T. Administration of substances to laboratory animals: equipment considerations, vehicle selection, and solute preparation. JAALAS. 50, 614-627 (2011).
  8. Lukas, G., Brindle, S. D., Greengard, P. The route of absorption of intraperitoneally administered compounds. J. Pharmacol. Exp. Ther. 178, 562-564 (1971).
  9. AALAS. Laboratory Mouse Handbook. AALAS. (2009).
  10. AALAS. LAT Training Manual. AALAS. (2009).
  11. AALAS. LATg Training Manual. AALAS. (2009).
  12. Barnett, S. W. Manual of Animal Technology. Wiley-Blackwell. 440 (2007).
  13. Baumans, V., Pekow, C. A. Handbook of Laboratory Animal Science. Hau, J., Schapiro, S. J. 1, CRC Press. 401-446 (2010).
  14. Bogdanske, J. J., Hubbard-Van Stelle, S., Riley, M. R., Schiffman, B. M. Laboratory Mouse Procedural Techniques. CRC Press. (2011).
  15. Danneman, P., Suckow, M. A., Brayton, C. The Laboratory Mouse. CRC Press. (2000).
  16. Sharp, P. E., La Regina, M. C. The Laboratory Rat. CRC Press. (1998).

Comments

7 Comments

  1. Hi,
    What is the possibility that I could request a DVD of the mouse handling training video. I will use it for training purposes at uconn.
    Thank you
    Janet

    Reply
    Posted by: Janet T.
    October 25, 2012 - 8:17 AM
  2. Hello Janet,

    Thank for viewing the video article and we're delighted to hear you found it to be helpful.

    Our goal is to provide the video via joVE so it can be accessed from any site as needed. You can certainly link directly to the article for your internal trianing needs, but at this time we are not offering the video in other formats including DVD/CD. If that changes, I have your contact inforamation and will follow up with you.

    Regards

    Elton

    Reply
    Posted by: Elton M.
    October 26, 2012 - 12:35 PM
  3. This video is a great tool for the training of technicians and graduate students. It is accessible and easy to follow for people that are more comfortable with visual training.

    Reply
    Posted by: Rana S.
    January 30, 2014 - 1:25 PM
  4. I can not download this video what is the problem ?

    Reply
    Posted by: maryam s.
    June 10, 2014 - 1:28 AM
  5. please send me this video to my email .i can not download it

    Reply
    Posted by: maryam s.
    June 10, 2014 - 1:29 AM
  6. How do i download the video?It is great for teaching purposes.

    Reply
    Posted by: Dotte Chegu A.
    September 12, 2014 - 3:39 AM
  7. Hi,
    I have seen your video administration in rodents by different routes and handling. Really, I found it very useful in my work and thanks a lot. In the video you have shown administration for all the routes except Intra-articular route. Intra-articular drug injection is very important for my studies could you please update that video also. It would be very helpful for me.

    Thanks and regards
    Mukesh Dhanka

    Reply
    Posted by: Mukesh D.
    September 9, 2016 - 10:21 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics