수동 규제와 마우스 및 쥐 일반적인 합성 관리 경로

Biology
 

Summary

연구 설치류와 함께 안전하고 편안하게 일하는 것은 처리 및 규제 방법의 핵심 역량이 필요합니다. 이 문서는 안전하게 처리하고 효과적으로 마우스 및 쥐에 화합물을 관리하는 데 필요한 기본 원칙을 제시합니다.

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Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771 (2012).

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Abstract

안전하고 효과적으로 마우스 및 쥐를 제지 할 수 있다는 것은 연구의 중요한 부분입니다. 마우스 및 쥐와 함께 자신과 편안하게 작업하면 처리 및 규제 방법의 기본 역량이 필요합니다. 이 문서는 안전하게 동물을 처리하는 데 필요한 기본 원칙을 제시합니다. 특별히 고안된 구속 개체 한 손, 두 손, 그리고 구속이 설명됩니다. 종종, 동물의 연구 또는 시험 사용의 또 다른 부분은 마우스 및 쥐에 대한 화합물의 효과적인 관리이다. 가능한 관리 노선의 큰 번호 (만 동물의 크기와 기관에 의해 제한)가 있지만, 대부분은 연구에 정기적으로 사용되지 않습니다. 이 동영상은 정맥 주사, 근육, 피하, 그리고 구두 gavage 등의보다 일반적인 경로, 여러을 설명합니다. 이 문서의 목적은 기본 구속 및 약물 관리 노선에 이러한 기술에 익숙 뷰어를 노출하는 것입니다. 이 동영상은귀하의 시설에서 교육에 - 손 필수를 대체하지 않습니다,하지만 그건 교육을 보강하고 보완하기위한 것입니다.

Protocol

1. 안전 규제 및 동물의 부드러운 처리를 실험 절차의 핵심

  1. 동영상이 기관에서 제공하는 체험 교육에 대한 보충 할 수 있도록 설계되었습니다.
  2. 항상 모든 실험 절차를 시작하기 전에 IACUC 또는 윤리위원회의 승인이 제자리에 있는지 확인하십시오.
  3. 프로토콜 작업을 각 사람이 그 프로토콜에 대한 승인 절차의 세부 사항, 그리고 그들이 작업하는 모든 사람들을 알고 있어야합니다.
  4. 자신감이있는 쥐에 접근하고 부드럽게 동물을 처리하지만, 단단히. 너무 거친 처리 및 임시 접근 방법 모두 처리기 또는 동물에 상해에 물린 상처 나 긁힌 자국이 될 수 있습니다.
  5. 동물을 취급 할 때 실수로 자료 나 감소되는 동물의 가능성이 항상 있습니다. 이러한 조작의 대부분은 가장 동물이 감소하거나 탈출하는 경우, 그것은 부상되지 않고 쉽게 탈환 할 수 있도록 작업 표면에 수행됩니다. 당신의 insti에 따라바닥에 연락 동물에 관한 tutional 정책.
  6. 이 꼬리 degloving 부상을 초래할 수 있으므로, 꼬리의 끝에서 동물을 처리하지 마십시오. 큰 쥐 또는 임신 쥐를 특히주의하십시오. 항상 꼬리가 들어로 몸을 지원하기 위해 다른 손을 사용합니다.
  7. 주사를 제공 할 때 날카로운 바늘이 가장 적합합니다. 실험실 설치류에 바늘이 때로는 여러 주사에 사용하고 있지만, 이것은 데는 여러 가지 이유가, 작은 게이지는 종종 바늘이 지루 속도가 수단을 사용하는 것입니다있는 최소한에 권장되지 않습니다.
  8. 물린 또는 긁힌가된다는 것은 언제나 동물과 협력 가능성입니다. 물질이나 인체 부상을 일으킬 수 있습니다 전염성 에이전트로 작업하는 경우, 연기 후드 또는 바이오 안전성 캐비닛의 추가 조치 등 조작 동물이나 대리인을.
  9. 절차를 수행하기 전에 처리로 부드러운 접근 방식과 acclimation 적은 처리에 의해 스트레스 동물에 돈을 지불 할 수 있습니다.
  10. 화합물 관리를 시도하기 전에 연습 덮개를, 그리고 실험 동물 이전에 동물을 제어 할 수 물질을 관리 연습.
  11. 이러한 기술을 연습하는 것은 정기적으로 신뢰와 자신감 결과 더 나은 처리에 덜 스트레스 동물, 그리고 더 나은 과학 결과를 instills.
  12. 동물이 완강히 저항하는 경우 모든 처리 기법으로, 다른 기술을 시도합니다. 동물 (및 핸들러)도 케이지에 다시 동물을 집어 넣고 나중에 다시 시도 혜택을 누릴 수 있습니다.

2. 수동 구속

  1. 한 손으로 마우스 덮개
    1. 꼬리의 기지에 의해 마우스를 올려 케이지 뚜껑, 와이어 바 케이지 상단, 또는 이와 유사한 거친 표면에 놓으십시오.
      1. 한 손으로 마우스 덮개는 일반적으로 사용하는 무료 지배적 인 손을두고, 비 지배적 인 손으로 수행됩니다.
      2. 다른 방법은 기술자가 팔이 위치를 위해 다루는 자신의 실험실 코트 균일 한 슬리브를 사용 할 수 있습니다규제 이전 동물.
    2. 부드럽게 꼬리에 돌아 당기는 동안, 3, 4 번째 손가락 사이의 꼬리 기지를 넣어. 이 네 가지 발과 표면을 파악하고 앞으로 끌어 마우스를 발생합니다.
      1. 자신의 꼬리를하여 전체 bodyweight을 중단 특히, 꼬리의 끝에서 쥐를 파악하지 마십시오. 이 꼬리의 피부에서 미끄러에 degloving 부상을 입을 수 있습니다.
    3. 다음 단단히 꼬리를 잡고 같은 손으로 안녕하세요, 마우스를 파악. 머리의 기지 근처에 엄지와 검지로 잡고 중간 및 링 손가락을 통합하여 마우스의 등 아래에 이해를 확장합니다.
      1. 회전 또는 구속에서 왜곡에서 마우스를 막기 위해 목 주변의 피부에, 충분한 압력, 또는 증거를 적용 할 수 있지만, 너무 단단히 동물이 숨을 쉴 수없는 피부를 당기지 않도록한다.
      2. 머리 컨트롤 중요합니다. 경우마우스가 머리를 이동할 수 있습니다, 그것은 처리기의 손가락을 도달 할 수 있으며, 물어 수 있습니다. 초보자 핸들러 오히려 두개골 바로 뒤에보다, 다시 아래로 너무 멀리 마우스를 파악하면 이러한 문제가 발생할 수 있습니다.
  2. 마우스 덮개 두 손
    1. 케이지 뚜껑, 와이어 바 덮개, 또는 거친 표면에 꼬리와 장소의 바닥에 마우스를 올려.
      1. 다른 방법은 기술자 이전 규제에 동물을 배치 할 수있는 팔을 다루는 자신의 실험실 코트 균일 한 슬리브를 사용 할 수 있습니다.
    2. 꼬리에 부드럽게 뒤로 당겨와 마우스 네 발로 표면을 파악하고 앞으로 가져옵니다.
    3. 다음, 다른 손으로 신속하고 단호하게 (위의 한 손으로 덮개 참조) 목의 비듬 마우스를 파악.
    4. 한 손의 꼬리와 다른에 비듬으로 마우스를 들고 손바닥 안녕하세요,를 가지고있는 손의 3 또는 4 번째 손가락 사이의 꼬리 기지를 넣어.
      1. 한 손으로 방법과 마찬가지로, 단단히 왜곡 정도 단단히 동물이 호흡 할 수 욕심되지 않고 회전에서 마우스를 방지하기 위해 안녕하세요,를 파악.
      2. 마우스가 scruffing에 강한 경우, 마우스의 뒷면에 부드러운 압력은 손이 더 나은 이해에 이동 할 수 있습니다.
  3. 쥐 덮개, scruffing
    1. 쥐 scruffing는 일반적으로 두 손 만 작은 쥐에서 수행됩니다. 쥐 쥐보다 scruffing 덜 동의하는,하지만 혈액 수집 상황에서 유용합니다 때문에 일반적으로 사용되는 기술이 아닙니다.
    2. 비 지배적 인 손으로 꼬리가 쥐를 파악하고 거친 표면합니다 (마우스에 위에서 설명한)에 부드럽게 뒤로 당긴다.
      1. 끝 가까이에 파악 경우 쥐의 꼬리 피부가 꺼져 올 수 있으므로, 꼬리의 기지 근처에 이해하기주의하십시오.
    3. 단단히 손에 꼬리를 잡고 후면에서 쥐의 비듬에 접근한다.
      1. examp에 대한르는 쥐의 꼬리 처리기 '왼쪽에 있다면, 오른쪽 손으로 안녕하세요, 여기에 코에서 쥐에 접근하지 않습니다. 대신 왼쪽 위에 도달하고, 뒤에서 안​​녕하세요, 접근.
    4. , 쥐의 뒷면에 부드러운 압력을 적용 어깨 블레이드 동안 다음 닫기를 손가락과 손바닥 사이의 두개골의 기지에 비듬를 파악.
    5. 머리 제어 자국을 방지하는 것이 중요합니다. 쥐의 상처는 심각한 부상을 일으킬 수 있습니다.
    6. 이 방식으로 막았 때 쥐가 목소리를 내다 수 있습니다.
  4. 쥐 덮개, 어깨 그립 이상
    1. 지배적 인 손으로 꼬리가 쥐를 파악하고 거친 표면합니다 (마우스에 위에서 설명한)에 부드럽게 뒤로 당긴다.
      1. 다른 방법은 기술자 이전 규제에 동물을 배치 할 수있는 팔을 다루는 자신의 실험실 코트 균일 한 슬리브를 사용 할 수 있습니다.
      2. , 꼬리의 기지 근처에 이해하기주의 쥐의 꼬리 피부 CA로끝 가까이에 파악 경우 n은 해제되어 있습니다.
    2. 후방에서 접근, 쥐의 뒷면을 통해 비 지배적 인 손을 놓으십시오.
    3. 손가락, 새끼 손가락과 엄지 손가락으로 가슴 주위의 쥐를 파악. 쥐의 머리는 색인과 중간 손가락 사이 여야합니다.
      1. 가슴을 압축하지 마십시오.
    4. 몸 처리기에 대해 안정화되어있는 경우 쥐가 한 손으로 이러한 방식으로 개최 할 수 있습니다.
  5. 쥐 덮개, 어깨 그립에 따라
    1. 지배적 인 손으로 꼬리가 쥐를 파악하고 거친 표면합니다 (마우스에 위에서 설명한)에 부드럽게 뒤로 당긴다.
      1. 다른 방법은 기술자 이전 규제에 동물을 배치 할 수있는 팔을 다루는 자신의 실험실 코트 균일 한 슬리브를 사용 할 수 있습니다.
      2. 끝 가까이에 파악 경우 쥐의 꼬리 피부가 꺼져 올 수 있으므로, 꼬리의 기지 근처에 이해하기주의하십시오.
    2. 연구를 통해 비 지배적 인 손을 놓으십시오에서의 후방에서 접근, 돌아 왔어.
    3. 오른쪽 어깨 블레이드 아래에있는 가슴 주위 쥐를 파악. 쥐의 팔이 부드럽게 엄지와 검지 손가락으로 밀어 넣었해야합니다.
      1. 팔은 물고에서 방지 쥐의 턱 아래로 건너해야합니다.
      2. 가슴을 압축하지 마십시오.
    4. 몸 처리기에 대해 안정화되어있는 경우 쥐가 한 손으로 이러한 방식으로 개최 할 수 있습니다.
  6. Decapicone
    1. Decapicone는 한쪽 끝에서 구멍 얇은 플라스틱 유연하고 콘 모양의 조각입니다. 그 구멍은 몸의 나머지 부분 때문에 마우스 나 쥐가 구멍으로 코를 얻을 수있을 정도로 작은이지만, 아닙니다.
    2. 동물을 억제하기 위해 적절한 크기의 Decapicone에서 마우스 또는 쥐를 놓습니다.
    3. 그 코가 Decapicone의 구멍에서 돌출 될 때까지 앞으로 동물을 밀어 넣습니다.
    4. 어느 꼬리 주위에 폐쇄 가방을 보유, 또는 콘에 동물을 밀봉하기 위해 트위스트 넥타이를 사용합니다.
    5. advantaDecapicone의 GE는 얇은 플라스틱 소재를 통해 주사를 허용한다는 것입니다.
    6. 단점은 소재가 숨을 못 않으며 동물이 과열 될 수 있다는 것입니다. 만 아니라 그것이 절차를 수행하는 데 걸리는으로에 Decapicone에서 동물을 유지.
  7. 강성 / 아크릴 플라스틱 restrainer
    1. 플라스틱 구속 장치는 동물의 꼬리에 액세스 할해야 할 때 특히 유용합니다.
    2. 이러한 상업적으로 구입하거나 실험실에서 만들 수 있습니다.
    3. 크기는 감금되지는 동물에 적합해야합니다 - 짐승이 구속에 돌아 할 수 없습니다.
    4. 첫째 부드럽게 한 다음 장치의 오프닝에서 머리 먼저를 발표, 동물을 억제하여 구속 장치에 동물을 놓으십시오.
      1. 이 설치류는 종종 튜브 같은 보안 구조로 영접하기위한 유일한 것 같이 우리를 통해 위쪽으로 장치를 목표로하는 데 도움이 될 수 있습니다.
    5. 의 끝 부분에 폐쇄를 놓고장치는 조심하는 것은 동물의 꼬리, 발, 또는 고환을 손상 할 수 없습니다.
    6. 동물이 과열 될 수 있으므로 restrainers에서 보낸 시간을 최소화합니다.
  8. 동물이 작은 수건을 포장하여 같은뿐만 아니라 다른 방법에 감금 될 수 있습니다, 또는 단순히 동물을 통해 손을 컵으로. 기술은 동물과 노동자의 요구를 충족하기 위해 조정할 수 있습니다. 항상 물린 자국을 방지하고 높이에서 실수로 릴리스지면에서 동물을 보호하는데주의를 기울여야.

3. 복합 관리 방법

  1. 이것은 완전한 목록과 다른 노선이 가능하다는 뜻입니다. 이 프로토콜은 가장 일반적으로 사용되는 경로를 설명하고자한다. 다른 노선 동물 및 사후 관리 통증 완화의 마취가 필요할 수 있습니다.
  2. 에 관계없이 관리 방법의 사용, 모든 자료는 동물을 억제하기 전에 준비해야합니다.
  3. 수성 물질은 석유 거점으로 두꺼운 소재보다 삽입하기 쉽게D 화합물. 항상 주사기에서 바늘을 dislodging 방지하기 위해 매우 천천히 두꺼운 화합물을 주사.
  4. 일반 바늘과 주사기를 사용 고려.
    1. 항상 저장하고 제대로 주사기와 바늘 폐기하십시오.
    2. 당신은 연습 주사기를 취급하고 동물을 주입하기 전에 주입, 주사기와 바늘을 처음 사용하는 경우. 이상적으로, 당신은 자신 동물의 구속에 대한 다른 남겨두고, 한 손으로 주사기와 바늘을 조작 할 수 있습니다. 꾸준한 손이 조직의 손상을 최소화 바늘 움직임을 최소화합니다.
    3. 바늘은 포인트, 베벨, 축 및 허브가 있습니다. 주사기는 팁, 통하고, 플런저 (그림 1 a와 b)를 갖추고 있습니다.
    4. 바늘이 게이지와 길이의 크기입니다. 큰 게이지 번호, 작은 바늘. 작은 바늘은 dulling 매우 쉽다 (끝에 형성 버에서)와 피어스 멀티 복용 튜브 (그림 1 C)에 사용할 수 없습니다. 항상을 선택화합물을 관리하기 위해 노력합니다 최단 바늘.
    5. 바늘은 허브에 의해 주사기의 끝에 부착되어 있습니다. 일부 주사기는 팁을 잠금했습니다. 항상 주사기가 안전하게 바늘에 첨부해야합니다.
    6. 바늘은 가장 특히 정맥 주사 주사에 대해 최대 베벨과 동물에 삽입됩니다.
    7. 손으로 바늘을 요점을 되풀이하지 마십시오. 이 바늘 스틱 부상의 일반적인 원인입니다. 표시 sharps 용기에 제대로 바늘과 주사기을 폐기합니다. 바늘이 recapped해야하는 경우, 장치는 (그림 1 D) 이용하실 수 있습니다.
  5. 비강 (IN)
    1. 위에 설명 된대로 동물을 억제.
    2. 주사기 또는 pipettor를 사용하여 동물의 nares에서 흡입되는 물질의 작은 금액을 넣으십시오.
    3. nares 사라질 수있는 재료보세요.
    4. 원하는 볼륨 시행 될 때까지 필요한만큼 반복합니다.
  6. 근육 (IM)
    1. 일를 구속위에서 설명한 전자 동물. 동물의 뒷다리 중 하나가 무료로 분사에 대한 안정화 있는지 확인하십시오. 억제 두 사람이 걸릴 수 있습니다. 동물이 분사 동안 낼 수 있다면, 바늘에서 근육 손상이 발생할 수 있습니다.
    2. 바늘은 동물의 피부에 수직 삽입해야합니다. 적절한 크기의 주사기와 바늘을 사용하여, 약 베벨 깊이 바늘을 삽입하고 동물의 quadriceps (허벅지의 전면) 또는 측면 허벅지 근육 질량에 자료를 삽입.
    3. 이 좌골 신경을 손상 할 수 있으므로 뒤쪽 근육 질량에 삽입하지 마십시오.
    4. 동물은 여러 IM 주사, 다른 다리를 수신 할 경우.
  7. Intraperitoneal (IP)
    1. 위에 설명 된대로 동물을 억제.
    2. 분사에 대한 복부를 노출, 바닥쪽으로 동물의 코를 팁.
    3. 동물의 중간 선을 찾아 정신적 당장 자리 (그림 2)에 복부를 나눕니다. 낮은당장 자리, 특히 동물의 오른쪽 아래 사분면은 intraperitoneal 주사에 해당하는 사이트입니다.
      1. 오른쪽 아래 사분면은 해부학 중요한 구조의 부족으로 인해 선택됩니다.
    4. 적절한 크기의 주사기와 바늘 사용하여 동물에 자료를 삽입.
    5. 동물이 반복 IP 주사를받을 경우, 분사의 사이트를 번갈아.
  8. 피하 (SC, SQ)
    1. 위에 설명 된대로 동물을 억제. 동물은 느슨하게 충분히 피부가 동원 할 수 있도록 막았해야합니다.
    2. 동물 SC 주입 한 후 정기적으로 처리 할 경우, (목의 목덜미) 안녕하세요,를 사용하지 않습니다. 대신 등쪽의 엉덩이 나 옆구리의 피부를 사용합니다. 동물은 여러 SC 주사, 사출의 다른 사이트를받을 경우.
    3. 피부를 잡고 부드럽게 "텐트"하고, 이상을 당긴다.
      1. 사출 솔로를 수행하면, 바늘을 삽입하고 부드럽게 t다닐 피부는 바늘은 피하 공간에 있는지 확인 바늘로 위쪽으로.
    4. 적절한 크기의 주사기와 바늘 사용하여 솟은 피부에 30-45 ° 각도로 바늘을 삽입하고, 자료를 삽입. 피부 이상을 가지고있는 손가락에서와 멀리 평행 주사.
    5. 사출에 성공하면, 피부 밑에 작은 붓기가 될 것이다.
    6. 주입 후 물질의 역류를 방지하기 위해 부드러운 압력을 적용 할 수 있습니다.
  9. Intradermal (ID)
    1. intradermal 주사를 들어, 동물은 종종 피부가 볼 수 있도록 면도 있습니다.
    2. 여러 intradermal 주사에 대한 동물의 덮개가 어려울 수 있습니다. 이 경우, 화학 진정 작용이 필요할 수 있습니다. ID 주사의 사이트는 SC에 대한 동일합니다.
    3. 15-30 ° 각도로 피부에 적절한 크기의 주사 바늘을 삽입합니다. 바늘은 매우 멀리 삽입되지 않습니다 및 분사가 다시을 만나sistance.
      1. 다른 방법은 부드럽게 주사 사이트에 인접한 피부를 찔러과 매우 얕은 각도로 바늘을 삽입하는 것입니다. 가 주입 과정에서 이동에서 그들을 방지 때문에이 쥐 유용합니다.
    4. 사출이 성공하면, 작은 물집이 될 것이다. 그것은 주변의 피부보다 창백 될 것입니다.
    5. 주입 후 물질의 역류를 방지하기 위해 부드러운 압력을 적용 할 수 있습니다.
  10. 혈관 (IV)
    1. 왼쪽 및 오른쪽 측면 꼬리 정맥 마우스 및 쥐에 사용되는 가장 일반적인 혈관 접근 경로입니다.
    2. 기타 혈관 접근 경로 마우스 및 쥐 가능하지만, 일반적으로 진정 작용과 포스트 분사 통증 릴리프가 필요합니다.
    3. 꼬리 정맥 주입 들어, Decapicone 또는 플라스틱 쥐 restrainer에서 동물을 억제.
    4. 램프에 따라, 또는 보호 온난화 장치에 동물의 꼬리를 놓습니다. 이 쉽게 주입을 허용, vasodilation을 촉진합니다.
      1. 동물을 과열하지 마십시오.
      2. 큰 남성 쥐를 들어, 꼬리에서 피부 비늘을 청소하는 것은 정맥의 더 나은 시각화를 위해 허용 할 수 있습니다. 피부가 abraded되지 않습니다 않도록 청소 부드러운해야합니다.
    5. 비 지배적 인 손 끝으로 동물의 꼬리를 잡아. 이 꼬리를 바르게합니다.
    6. 꼬리 회전 ¼ 쉽게 주입에 대한 dorsally 꼬리 정맥을 배치십시오. 동물은 두 측면 꼬리 정맥과 복부 꼬리 동맥 (그림 3)이 있습니다.
    7. : 15 ° 각도에서 바늘과 꼬리에 접근한다. 꼬리의 말초 부분에 시작합니다.
      1. 정맥은 얕은 있으며, 바늘이 많이 베벨 이상 삽입 할 수 없습니다.
      2. 분사가 같은 distally 가능한 시작되는 경우 첫 번째 실패를 시도해야 주입을 시도하는 더 큰 피해를 정맥이 있습니다.
    8. 자료를 주사. 성공적으로 주입이없는 정맥을 입력 자료를 얻을 수 있습니다저항 및 분사 기간 동안 꼬리 정맥의 창백.
      1. 이 정맥을 축소되므로, 주입하기 전에 기음하지 마십시오.
      2. 주사 후 venipuncture 사이트에 젠틀 압력은 출혈을 방지 할 수 있습니다.
    9. 실패 주사에서, 자료는 쉽게 흐를 수 없습니다. 대신, 꼬리 피부가 희게되거나 자료는 전혀 주입 할 수 없습니다.
  11. Intragastric 관리 (경구 gavage)
    1. 만 억제, 깨어있는 동물 gavage을 수행합니다. 마취 또는 진정 작용이 흡인의 위험 (소재가 실수로 폐를 입력)을 증가시킵니다.
    2. 사용을위한 적절한 크기의 구두 먹이 바늘을 선택합니다. 이러한 바늘은 기관에 자신의 흐름을 방지하기 위해 끝에서 볼 팁을 갖추고 있습니다.
    3. 필요한 길이는 절제된 동물을 들고와 입의 모서리에서 측정하여 결정될 수있다. 먹이 바늘의 볼 끝이 동물의 마지막 리브 (<에 도달해야합니다STRONG> 그림 4). 니들 게이지는 동물의 무게에 의해 결정됩니다.
    4. 머리와 몸이 직선, 수직선에 있도록 동물을 억제. 이것은 먹이 바늘을보다 쉽게​​ 통과를 위해 수 있도록 식도를 직선.
    5. 혀 위에, 동물의 입에 바늘의 볼 끝을 삽입합니다. 바늘이 제자리에되면, 입맛에 대해 살짝 누르면, 바늘과 주사기를 가져, 동물의 코가 천장을 향해집니다.
      1. 쥐에서 바늘은 목의 뒤쪽을 통과으로 약간 이동해야 할 수 있습니다. 바늘에 모든 긴장이 위치를 조절 할 필요를 나타냅니다
    6. 미리 결정된 거리에 도달 할 때까지 바늘을 통과하고 있습니다. 바늘은 쉽게 통과하고, 동물은 숨이 막히다 나 질식 안됩니다.
    7. 물질을 관리 할 수​​ 있습니다. 그것은 위장으로 흘러해야합니다. 저항이나 동물 놀라서,된다는 의미, 또는 파란색집니다이있는 경우, 즉시 중지하고의 필요성을 제거르. 흡입 한 동물 관리되는 화합물에 따라 안락사를 필요로 할 수 있습니다.

4. 대표 결과

동물이 제대로 처리하면, 동물과 핸들러 모두에게 스트레스가 최소가 있습니다. 처리기가 물이나 긁힌, 동물이 편안하고 competently 처리되지 않습니다. 화합물은 조직에 최소한의 손상과 가능한 동물에 거의 불편 함과 올바른 경로를 통해 관리됩니다.

조사는 작은 동물 인형과 협력, 동물을 취급에 새로하는 경우 도움이 될 수 있습니다. 예를 Koken 쥐와 같은 일부 기술을 사용할 수 동물 시뮬레이터도 있습니다. 많은 조사를 들어, 동물과 작업하기 전에 바늘과 주사기와 친숙를 얻을 수있는 약간의 기회가 있습니다. 바늘과 주사기의 대표 부분은 그림 1A와 1B에 설명되어 있습니다. 처음으로 동물을 주입하기 전에동물들과 작업하기 전에 주입을 연습하는 데 유용 할 수 있습니다. 등 28 30g로 매우 고급 바늘은 손상 용이합니다. 다중 이용 병의 물질을 인출하는 경우, 분사에 대한 작은 게이지 바늘로 교체 한 후 그 목적을 위해 더 큰 바늘을 사용합니다. burred 바늘이 그림 1C에서 볼 수 있습니다. 이러한 손으로 사용하는 바늘을 recapping하지는 않습니다 바늘과 작업 할 때 기본 안전 조치를 취한다. 그림 1D 사용에 바늘 recapper을 보여줍니다. 이 혈액은 바늘을 통해 푸시 할 때 볼 수있는 용혈없이 주사기에서 예를 들어,로 고속 혈액을 주사 바늘을 제거해야 수사에 도움이 될 수 있습니다.

도 2 및도 3은 분사에 대한 목표를 설명, intraabdominal 주입 및 꼬리의 전형적인 구조 랜드 마크를 보여줍니다. 그림 4는 gavage 바늘의 적절한 크기 조정의 예를 제공합니다. Gavage 바늘이의 입에서 도달해야합니다마지막 늑골 아래 오른쪽에 nimal.

그림 1
그림 1. A) 니들 및 B) 주사기 부품이 표시. C) 다중 사용 약병에 바늘의 반복 배치로 인한 바늘에 버. 사용 D) 니들 recapper.

그림 2
그림 2. 복부 복부의 당장 자리. 만 우선적으로 하단이 당장 자리, 오른쪽 하단 사분면에 주입.

그림 3
그림 3. 크로스 섹션의 꼬리 도식, 뼈 및 tendenous 구조에 동맥과 정맥의 관계를 설명.

그림 4
그림 4. Gavage 바늘은 쥐 크기 조절. A) Gavage 바늘이 너무 경도g. B) 적절히 크기 gavage 바늘. C) 너무 짧 Gavage 바늘 측정, D)은 적절한 gavage 바늘 크기를 결정하는 마지막 갈비 촉진.

마우스
추천 볼륨 바늘의 추천 게이지 및 길이 추천 볼륨 바늘의 추천 게이지 및 길이
비강 1 5-25 μl N / A 5-25 μl N / A
근육의 1,2 0.00005 ML / g <23g에서 0.5-0.75 0.1 ML / kg <21g, 0.5 0.75에의
Intraperitoneal 1,2 0.02 ML / g <21g, 0.75-1에서 10 ML / kg <21g, 0.75-1에서
피하 1,2 0.01 ML / g <22g에서 0.5-1 5 ML / kg <22g에서 0.5-1
Intradermal 1 0.05-0.1 ML 의 <26g, 0.5 0.05-0.1 ML 의 <26g, 0.5
정맥 1,2 0.005 ML / g -0.025 ML / g * 의 <25g, 0.75-1 5 ml/kg-20 ML / kg * <23g에서 0.75-1
구강 gavage 1,2 0.01 ML / g 20~22g 먹이 바늘 5-10 ML / kg 16-20g 먹이 바늘

* 첫 번째 숫자는 약 일분 이상의 정맥 bolus로 주어진 볼륨입니다. 두 번째 볼륨 5-10 분 동안 천천히 주입으로 제공 될 수 있습니다 볼륨입니다.

Discussion

이 프로토콜은 연구원의 시설에서 제공 교육 실습을 보완하기위한 동물 처리 및 약물 관리에 대한 소개로 볼 수 있습니다. 사용되며 물질 관리의 노선이 연구 프로토콜이나 윤리위원회 프로토콜이 작성 될 때 실험 설계에 고려하고해야 덮개의 의미합니다.

동물 관련 절차에 교육 연구의 성공에 매우 중요합니다. 대부분의 실험을 수행하려면, 동물 연구 직원이 처리해야하며, 더 나은 동물 취급, 적은 동물 3 강조했다. 부드러운 인간의 연락처로 동물을 Accustoming은 스트레스를 줄이고 동물보다 다루기 쉬운 연구 과목 4,5 할 수 있습니다. 취급 스트레스는 연구 6 몇 가지 유형에 영향을 표시하고이뿐만 아니라 다른 사람에 영향을 미칠 수 있습니다 수 있습니다되었습니다. 설치류의 규제는 (예정주의를 달성하지만, 회사 처리해야그립은 쥐와 핸들러에 부상을 초래할 가능성이)와 실제 짧은 기간 동안해야합니다. 구속 방법은 일반적으로 동물의 크기에 따라 선택하거나 접근을 모색하고 있습니다. 예를 들어, 가능하지만, 안녕하세요,이 성인 쥐를 취급,​​ 자주 처리기가 미숙 특히 경우, 쥐에 의해 강한 저항을 만났 있습니다. 손으로 마우스 또는 쥐를 개최하는 것은 꼬리 정맥에 액세스 어렵고 구속 장치가 자주 여전히 가능한 동물을 유지하기로 선택되어 있는지 확인 할 수 있습니다.

연구자들이 동물을 처리 할 때, 그들은 종종 더 연구를위한 화합물이나 생물학을 관리하기 위해 찾고 있습니다. 물질 관리의 경로는 특정 실험을 흡수, 생체 이용률, 그리고 적합성에 영향을 미칠 수 있습니다. 다양한 노선과 친숙 함은 연구 최선의 방법으로 자신의 물질을 관리 할 수​​있는 능력을 가진 연구자를 제공해야합니다. 물질의 빠른 흡수를 촉진 예를 들어, 경로연구자가 느린 - 연기 방식으로 물질을 관리하기를 원하는 경우, 이러한 정맥 주사 또는 intraperitoneal으로 사용할 수 없습니다. 볼륨, 장비 및 용질에 대해 이러한 기술과 고려 사항 중 일부 최근 리뷰가 터너 외하여 두 논문에서 찾을 수 있습니다. 1,7는

물질이 실험실 동물에 투여 할 때마다, 고려는 장비와 물질 (표 1에서 설명)의 볼륨의 적절한 크기로 제공해야합니다. 잘못 크기의 장비 나 대형 볼륨 불편, 부상, 또는 동물의 죽음에 발생할 수 있습니다. 일반적으로, parenterally 실시 물질 연구 목표 (즉, 세균 연구)이 불가능 할 곳을 제외하고 무균 수 있습니다. 화합물 및 생체은 동물에 최소 영향을 미칩니다 용질 또는 차량에 있어야합니다. physiologic 산도 (7.3 -7.4)은 특히 피하, 근육, 그리고 intrape를 들어, 일반적으로 잘 인정합니다ritoneal 노선. 이 노선에서 관리 물질의 비 physiologic pH의 수준은 통증이나 괴사 및 조직 손상 될 수 있습니다. 산도의 넓은 범위는 intragastric와 정맥 주사 경로를 7 용납되어 있습니다. 작은 설치류에서 또 다른 중요한 고려 사항은 룸 온도 유체의 대량이 주어진 경우 냉각의 가능성입니다. 유체 특히 병 동물의 지원에 intravenously 또는 intraperitoneally 관리되는 경우는 체온 (37 ° C)로 예열해야합니다.

이 프로토콜에서 설명하는 관리의 노선 마스터 간단하고, 일반적으로 마취를 필요로하지 않는, 일반적으로 많은 연구 프로그램에 사용되는 것들입니다. 행정의 노선의 거의 무한한 다양성 intracranial, intrathecal, 경막 외, intratracheal, intraosseous, 그리고 이름 intraarticular하지만 몇을 포함하지만, 가능합니다. 행정 이러한 전문 노선의 교육 사람들 대체에서 추구되어야한다O는 경로 좋은 결과와 다양한 경험을 보유하고 있습니다.

intratracheal 기지보다 방법, 동물에서 비강 경로는 일반적으로 더 "자연"을 통해 폐에 도입 물질을 연구하는 데 사용됩니다. 마우스 및 쥐도 의식 동물에 어렵지 않습니다 그래서 그들이 유체의 매우 작은 양을 흡입하는 유도, 고맙게 여기게 코 - breathers 있습니다. 코 점막은 혈관, 일부 물질의 비강 관리를 잘 공급되어 있기 때문에 정맥 주사 관리와 유사 할 수 있습니다. 그 흡수를 손상 할 수 있으므로이 경로는하지만, 비염과 동물에 권장하지 않습니다. 비강 경로에서 큰 볼륨을 관리하려고 시도 dyspnea 또는 동물의 구조 될 수 있습니다.

근육 주사는 물질의 빠른 흡수를 제공합니다. 근육 주사는 쥐와 작은 크기와 상응 작은 근육으로 인해 마우스에 도전 할 수 있습니다. 그들은 뒷다리로 진행됩니다s입니다. 좌골 신경의 손상의 가능성으로 인해, quadriceps femoris의 선택의 근육이다.

피하와 intradermal 노선 모두 피부를 포함하지만, subcutis 대 피부에 배치 물질의 생체 이용률의 차이가 있습니다. 피하 관리는 종종 이러한 정맥 주사 또는 intraperitoneal 등 다른 노선보다 느린 흡수와 함께 "증착"루트로 간주됩니다. Intradermal 관리는 일반적으로 물질 등 도움이되는 - 항원 혼합물로 immunostimulatory 물질의 아주 작은 볼륨에 사용됩니다. 두 경우 모두, 관리 물질 physiologic pH의 비 자극을해야합니다. 이 쥐을 억제를위한 일반적으로 사용되는 사이트이기 때문에 Intradermal 또는 피하 주사는, 안녕하세요,에 수행 할 수 없습니다.

정맥 주사와 intraperitoneal 관리는 종종 동물의 상응하는 것으로 간주됩니다. 주입의 정맥 주사 경로를 더 연구를 제공합니다화합물의 apid 이해하지만, intraperitoneal 관리가 구강 관리 8 대략적으로 비슷 고려되어야하는 동안. 부적절한 버퍼 경우는 통증의 원인이 될 수 있습니다으로 케어 화합물 관리 intraperitoneally로 촬영해야합니다. 설치류의 정맥 bolus 관리의 일반적인 경로는 꼬리 정맥을 통해 수 있습니다. 물질의 만성 정맥 주사 관리가 필요하다면, 정맥 또는 동맥 캐 뉼러의 주입이 고려되어야한다. intravenously 관리 물질 무균 전달해야하며 intravenously 관리하는 안전 표시 될 것입니다. 예를 들어, 용혈, 혈전증, 또는 vasculitis을 유도 할 수 있습니다 물질 정맥 주사 관리에 적합하지 않습니다.

intragastric 또는 구두 gavage 경로는 종종 인간의 일반적인 주입 경로를 모방하는 데 사용됩니다. 음식이나 물을 통해 구두 관리에 비해 또한 물질의 정확한 주입 할 수 있습니다. 화합물의 생체 이용율gavage를 통해 관리 동물의 먹이 / 공복 상태뿐만 아니라 화합물 또는 생물학적의 용질 또는 차량에 따라 달라집니다. Gavage 또는 수유 바늘이 사용되는 동물에 대한 적절한 크기이어야하고, 일회용 gavage 바늘이 실제하지 않은 경우, 동물 사이에 청소해야합니다. gavage로 인한 부상은 드문 일이 아니에요 있으며, 폐 또는 위 또는 식도의 파열에 물질의 증착이 포함되어 있습니다. 교육은 경험이 풍부한 자에 의해 감독과 깨어있는 동물 gavage 전에 anesthetized 동물 (euthanized 될 것이다)를 먼저 euthanized 동물에 수행되어야한다이 시도됩니다. 깨어있는 동물 최초의 gavage 시도는 프로 시저가 틀려서되면 부상을 입을되지 않는 생리 등의 평균 크기의 동물과 물질의 작은 볼륨을, 포함한다. 동물 밀접하게 gavage와 euthanized 필요한 경우 이후, 파랑, 출혈, 또는 초과 타액의 분비를 돌려 같은 웃음과 같은 고통의 흔적에 대한 평가해야합니다. 만약 euthanasia은 동물이 gavage 절차가 실패 이유를 확인 necropsied해야 필요합니다.

Disclosures

저자는 찰스 강 (Charles River)의 직원입니다.

Acknowledgments

여기에 제시된 연구는 찰스 강 (Charles River)에 의해 지원되었다.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Needles Various Various Needles are sold by both gauge and length. Check both before ordering.
Syringes Various Various Always choose an appropriate size for the volume to be administered.
DecapiCones Braintree Scientific DC-200, DCL-120, MDC-200 Available in mouse and rat sizes.
Rodent restrainer Harvard Apparatus, Braintree Scientific, Plas-Labs, others Available in clear Plexiglas, adjustable plastic, and sized for mice and rats.
50 ml conical tube Various
Feeding needles VWR, Popper and Sons Various Fit the needle gauge and length to the animals as described above. Both disposable and reusable feeding needles are available.

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References

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  16. Sharp, P. E., La Regina, M. C. The Laboratory Rat. CRC Press. (1998).

Comments

7 Comments

  1. Hi,
    What is the possibility that I could request a DVD of the mouse handling training video. I will use it for training purposes at uconn.
    Thank you
    Janet

    Reply
    Posted by: Janet T.
    October 25, 2012 - 8:17 AM
  2. Hello Janet,

    Thank for viewing the video article and we're delighted to hear you found it to be helpful.

    Our goal is to provide the video via joVE so it can be accessed from any site as needed. You can certainly link directly to the article for your internal trianing needs, but at this time we are not offering the video in other formats including DVD/CD. If that changes, I have your contact inforamation and will follow up with you.

    Regards

    Elton

    Reply
    Posted by: Elton M.
    October 26, 2012 - 12:35 PM
  3. This video is a great tool for the training of technicians and graduate students. It is accessible and easy to follow for people that are more comfortable with visual training.

    Reply
    Posted by: Rana S.
    January 30, 2014 - 1:25 PM
  4. I can not download this video what is the problem ?

    Reply
    Posted by: maryam s.
    June 10, 2014 - 1:28 AM
  5. please send me this video to my email .i can not download it

    Reply
    Posted by: maryam s.
    June 10, 2014 - 1:29 AM
  6. How do i download the video?It is great for teaching purposes.

    Reply
    Posted by: Dotte Chegu A.
    September 12, 2014 - 3:39 AM
  7. Hi,
    I have seen your video administration in rodents by different routes and handling. Really, I found it very useful in my work and thanks a lot. In the video you have shown administration for all the routes except Intra-articular route. Intra-articular drug injection is very important for my studies could you please update that video also. It would be very helpful for me.

    Thanks and regards
    Mukesh Dhanka

    Reply
    Posted by: Mukesh D.
    September 9, 2016 - 10:21 AM

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