Manuel Tutucu ve Fare ve Sıçanlarda Ortak Bileşik İdaresi Rotalar

Biology
 

Summary

Araştırma kemirgenler ile güvenli ve insanca çalışma taşıma ve bağlama yöntemleri bir temel yetkinlik gerektirir. Bu makalede, güvenli işlemek ve etkili fare ve sıçanlara bileşikler yönetmek için gerekli temel ilkeleri sunacak.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771 (2012).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Güvenli ve etkili fare ve sıçanlarda dizginlemek için güçlü olmak araştırma yapmanın önemli bir parçasıdır. Fareler ve sıçanlar ile güvenle ve insanca çalışma taşıma ve bağlama yöntemleri temel bir yetkinlik gerektirir. Bu makalede, güvenli hayvanların işlemek için gerekli temel ilkeleri sunacak. Özel olarak tasarlanmış emniyet nesneleri Tek elle, iki elle, ve kısıtlama izah edilecektir. Genellikle, hayvanlar araştırma ya da kullanım içindir bir başka kısmı farelerde ve sıçanlarda için bileşiklerin etkili uygulanmasıdır. Muhtemel uygulama yollarının çok sayıda (sadece hayvanın boyutu ve organlar ile sınırlandırılmıştır) olmasına rağmen, pek çok araştırma içinde düzenli olarak kullanılmaz. Bu video, damar içi, kas içi, deri altından, ağızdan sonda ile dahil olmak üzere, daha çok yaygın yolları, çeşitli gösterecektir. Bu makalenin amacı, temel emniyet ve madde uygulama yolları için bu teknikleri ile yabancı bir izleyicinin ortaya koymaktır. Bu videoSizin tesiste eğitim-eller gerekli yerine gelmez, ama bu eğitimi güçlendirmek ve desteklemek içindir.

Protocol

1. Güvenli Tutma ve Hayvanların Nazik Taşıma Deneysel Prosedürler önemli bir parçasıdır

  1. Bu video kurum tarafından sağlanan uygulamalı eğitim için bir ek olarak tasarlanmıştır.
  2. Her zaman herhangi bir deneysel prosedür başlamadan önce IACUC veya etik kurul onayı yerinde olduğundan emin olun.
  3. Bir protokol üzerinde çalışan her kişi o protokol için onaylanmış prosedürlerin ayrıntıları ve onlar üzerinde çalıştığınız herhangi bir diğerleri bilmeli.
  4. Güven ile kemirgen yaklaşın ve yavaşça hayvanlar ele, ama sıkıca. Çok-kaba işleme ve geçici yaklaşımları Hem işleyicisi veya hayvana yaralanmalar ısırıkları veya çizikler oluşabilir.
  5. Hayvanları tutarken, kazara serbest bırakılan veya hayvanın olasılığı her zaman vardır. Bu işlemlerin çoğu en hayvan bırakılan ya da kaçar, bu yaralı olmayan ve kolaylıkla yeniden elde edilebilecek şekilde bir çalışma yüzeyi üzerinde gerçekleştirilir. Sizin kurumların izleyinzeminle temas hayvanlar ile ilgili odaklanılmaktadır: Kurumsal politikalar.
  6. Bu kuyruk bir cildinin serbestleştirilmesinden yaralanmaya neden olabileceğinden, kuyruk ucu ile hayvanlar tutmayınız. Büyük sıçanlar veya hamile fareler ile özellikle dikkatli olun. Her zaman kuyruk kaldırma gibi vücudu desteklemek için diğer elinizi kullanın.
  7. Enjeksiyonlar verirken Keskin iğne iyi çalışır. Laboratuvar kemirgenler için iğneler bazen çoklu enjeksiyonlar için kullanılmasına rağmen, bu nedenlerle bir dizi, küçük göstergesi sık iğne donuk çabuk aracı kullanılan olduğu en için tavsiye edilmez.
  8. Isırıldı veya çizilmiş olmak her zaman hayvanlar ile çalışan bir olasılık. Bir madde veya insanlarda yaralanmalara neden olabilecek bulaşıcı bir ajan ile çalışıyorsanız, duman davlumbaz veya biyogüvenlik kabinleri ekstra önlemler, böyle manipüle hayvanlar veya ajanları alır.
  9. Bir prosedür başlamadan önce işleme için Nazik yaklaşımlar ve alışma az işleme tarafından vurgulanmaktadır hayvanlarda ödeyebilirsiniz.
  10. Bileşik yönetim denemeden önce Uygulama kısıtlama ve deney hayvanları önce hayvanları kontrol etmek için maddeler tatbik uygulama.
  11. Bu teknikler Pratiği düzenli güven ve güven sonuçları daha iyi yol tutuşu, daha az stresli hayvanlar, ve daha iyi bilimsel sonuçlar aşılamaktadır.
  12. Hayvan inatçı ise herhangi bir işleme tekniği ile, farklı bir tekniği deneyin. Hayvan (ve işleyici) ayrıca kafesine geri hayvan koyarak ve daha sonra tekrar çalışıyor yararlanabilir.

2. Manuel Restraint

  1. Tek elle fareyi bağlama
    1. Kuyruk tabanı tarafından bir fare kaldırın ve kafes kapak, tel çubuk üst kafesine veya benzeri sert bir yüzeye koyun.
      1. Bir elle fareyi bağlama genellikle kullanım için ücretsizdir dominant el bırakarak, baskın olmayan elle yapılır.
      2. Alternatif bir yöntem teknisyen önkol konumlandırmak için kapsayan kendi laboratuvar önlüğü veya üniforma kol kullanmanıza olanak verirkısıtlama öncesinde hayvan.
    2. Hafifçe kuyruk geri çekerken, 3. ve 4. parmak arasında kuyruk tabanı sıkıştırın. Bu dört pençeleri ile yüzeyi kavrayarak ve ileriye çekmek için fare neden olacaktır.
      1. Onların kuyruk tarafından onların bütün vücut ağırlığı askıya özellikle kuyruk ucu farelerde tutmayın. Bu kuyruk derisi kayıyor olan bir cildinin serbestleştirilmesinden yaralanmaya neden olabilir.
    3. Sonraki sıkıca kuyruk tutan aynı elle ense tarafından fare tutun. Kafa tabanına yakın parmağı ve başparmak ile kavrayın ve orta ve yüzük parmakları birleştirerek fare geri kavramak uzatmak.
      1. Dönerek veya kısıtlama dışarı büküm gelen fare önlemek için boynunuza cilt, yeterli basınç veya sıkılık uygulamak için, ama çok sıkı hayvan nefes alamaz cilt çekmeyin emin olun.
      2. Baş kontrolü çok önemlidir. Eğerfare başını taşıyabilirsiniz, bu işleyici parmakları ulaşabilir ve ısırabilir. Acemi işleyicileri yerine kafatasının arkasına doğru yerine, geri aşağı çok uzakta fareyi kavramak bu durum oluşabilir.
  2. Fare kısıtlama iki elle
    1. Kafes kapağı, tel çubuk kapakta veya pürüzlü yüzey üzerindeki kuyruk ve yer tabanı tarafından bir fare kaldırın.
      1. Alternatif bir yöntem teknisyen öncesinde desteğinin hayvan konumlandırmak için önkol kapsayan kendi laboratuvar önlüğü veya üniforma kol kullanmanıza olanak verir.
    2. Kuyruk hafifçe geriye doğru çekin ve fare dört pençeleri ile yüzeyi kavrayarak ve ileriye doğru çekecektir.
    3. Daha sonra, diğer yandan hızlı bir şekilde ve sıkıca (yukarıdaki tek elle tutma bakınız) ensesinden ile fare kavramak.
    4. Bir yandan kuyruk ve diğer berduş, fare kaldırın ve avuç içi ve ense tutan elin 3. veya 4. parmak arasındaki kuyruk tabanı sokun.
      1. Tek elle yönteminde olduğu gibi, sıkıca kıvırma ya da o kadar sıkı bir şekilde nefes hayvan anlamına kavrama değil iken dönmesini önlemek için fare ense kavramak.
      2. Fare Eksfoliyant dirençli ise, farenin sırtına hafif basınç taraftan daha iyi kavramak için yukarı taşımak için izin verebilirsiniz.
  3. Sıçan kısıtlama; Eksfoliyant
    1. Sıçan Eksfoliyant genellikle iki elle kullanılan ve sadece daha küçük sıçanlarda gerçekleştirilir. Sıçanlar fareler daha Eksfoliyant az kabul eden, ancak bazı kan toplama durumlarda yararlıdır çünkü sık kullanılan bir teknik değildir.
    2. Dominant olmayan el ile kuyruk sıçan kavrayın ve pürüzlü bir yüzeye (fareler için yukarıda açıklandığı gibi) hafifçe geriye doğru çekin.
      1. Ucuna yakın kavradı eğer sıçan kuyruğu cilt kapalı gelebilir gibi, kuyruk üssü yakınlarında kavramak için dikkatli olun.
    3. Sıkıca elinde kuyruk tutun ve arkadan sıçan ense yaklaşım.
      1. Examp içinle, sıçan kuyruğu işleyicileri 'sol elinde ise, sağ eli ile ense ona burun sıçan yaklaşım yok. Bunun yerine, sol elin uzanıp, ve arkadan ense yaklaşım.
    4. , Sıçan arkasına hafif basınç uygulayın kürek kemikleri üzerinde, daha sonra yakın parmaklar ve avuç arasındaki kafatası tabanına ense kavramak.
    5. Kafa kontrolü sokması önlemek için önemlidir. Sıçan ısırığı ciddi yaralanmalara neden olabilir.
    6. Bu şekilde bağlanmış olduğunda sıçanlar seslendirmek olabilir.
  4. Sıçan kısıtlama; omuz kavrama üzerinde
    1. Dominant elin ile kuyruk sıçan kavrayın ve pürüzlü bir yüzeye (fareler için yukarıda açıklandığı gibi) hafifçe geriye doğru çekin.
      1. Alternatif bir yöntem teknisyen öncesinde desteğinin hayvan konumlandırmak için önkol kapsayan kendi laboratuvar önlüğü veya üniforma kol kullanmanıza olanak verir.
      2. , Kuyruk üssü yakınlarında kavramak için dikkatli olun sıçan kuyruğu cilt caucuna yakın kavradı eğer n dökülmek.
    2. Arkadan yaklaşırken, sıçan sırt üzerine baskın olmayan elle yerleştirin.
    3. Yüzük parmağı, serçe, ve başparmak ile toraks etrafında sıçan kavrayın. Sıçan baş parmağı ve orta parmak arasında olmalıdır.
      1. Toraks sıkıştırmak etmeyin.
    4. Vücut işleyicisi karşı stabilize ise sıçan, bir yandan bu şekilde tutulabilir.
  5. Sıçan kısıtlama; omuzlar kavrama altında
    1. Dominant elin ile kuyruk sıçan kavrayın ve pürüzlü bir yüzeye (fareler için yukarıda açıklandığı gibi) hafifçe geriye doğru çekin.
      1. Alternatif bir yöntem teknisyen öncesinde desteğinin hayvan konumlandırmak için önkol kapsayan kendi laboratuvar önlüğü veya üniforma kol kullanmanıza olanak verir.
      2. Ucuna yakın kavradı eğer sıçan kuyruğu cilt kapalı gelebilir gibi, kuyruk üssü yakınlarında kavramak için dikkatli olun.
    2. R üzerinde non-dominant elden yerleştirinde arkadan yaklaşıyor, geri döndü.
    3. Sağ omuz bıçakları altında, göğüs çevresinde sıçan kavrayın. Rat Dirseklerinizi hafifçe başparmak ve işaret parmağı ile itti olmalıdır.
      1. Dirseklerinizi ısırma engelleyen, sıçan çene altında geçmelidir.
      2. Toraks sıkıştırmak etmeyin.
    4. Vücut işleyicisi karşı stabilize ise sıçan, bir yandan bu şekilde tutulabilir.
  6. Decapicone
    1. Bir Decapicone bir ucunda bir deliği olan ince plastik bir esnek, koni şeklindeki bir parçasıdır. Delik vücudun geri kalan yani fare veya sıçan burun deliği kendi çıkabilir yeterince küçük olduğu, ancak.
    2. Hayvan dizginlemek için, uygun büyüklükte bir Decapicone içinde fare veya sıçan yerleştirin.
    3. Onun burun Decapicone delikten çıkana kadar ileri hayvan itin.
    4. Ya kuyruk etrafında kapalı çanta tutun, ya da koni hayvan mühür için büküm kravat kullanabilirsiniz.
    5. AdvantaBir Decapicone ge ince plastik malzeme ile enjeksiyon için izin vermesidir.
    6. Dezavantaj malzeme nefes etmez ve hayvanlarda aşırı ısınmış olabilir olmasıdır. Sadece sürece yordamı gerçekleştirmek için alır gibi bir Decapicone bir hayvan tutun.
  7. Rijit / Akrilik plastik süzgeç
    1. Plastik sınırlama cihazları, hayvanın kuyruk erişilmesi gereken zaman özellikle kullanışlıdır.
    2. Bunlar ticari olarak satın alınabilir ya da laboratuarda yapılan edilebilir.
    3. Boyutu ölçülü olması hayvan için uygun olmalıdır - hayvan kısıtlama etrafında çevirmek mümkün olmamalıdır.
    4. Önce yavaşça da aygıtın açılışında, baş ilk olarak, serbest, hayvan frenleyici ile kısıtlama cihaz içinde hayvan yerleştirin.
      1. Bu kemirgenler çoğunlukla bir tüp gibi, güvenli bir yapıya karıştırmak gibi, kafes üzerinde yukarı yönlü cihaz hedefliyoruz yardımcı olabilir.
    5. Ucundaki kapak yerleştirinCihaz, dikkatli olmak hayvanın kuyruğu, ayakları veya testislerde zarar vermemek.
    6. Hayvanların aşırı ısınabilir yana restrainers harcanan zamanı en aza indirin.
  8. Hayvanlar küçük bir havlu sarma tarafından gibi ve diğer şekillerde, ölçülü olabilir, ya da sadece bir hayvan üzerinde el ile çukurluğu. Teknikler ve hayvan işçinin ihtiyaçlarını karşılamak üzere ayarlanabilir. Daima ısırıkları ve çizikler önlemek ve yükseklikleri kazayla sürüm veya düşme hayvan sabitlemek için dikkat çekmek.

3. Bileşik İdaresi Yöntemleri

  1. Bu ayrıntılı bir liste ve diğer yolları mümkündür anlamına gelmiyor. Bu protokol en sık kullanılan yolları göstermek istiyor. Diğer yolları hayvan ve sonrası yönetim ağrı kesici anestezi gerekebilir.
  2. Ne olursa olsun yönetim yöntemi kullanıldığında, tüm malzemeler hayvan frenleyici önce hazır olduğundan emin olun.
  3. Sulu malzemeleri, petrol-üs olarak kalın malzeme, daha enjekte etmek kolaydırd bileşikler. Daima şırınga iğne yerini değiştirmemek önlemek için çok yavaş kalın bileşikleri enjekte.
  4. Genel iğne ve şırınga kullanımı konuları.
    1. Saklayın ve düzgün şırınga ve iğneler atmayın.
    2. Eğer uygulama şırınga kullanımı ve bir hayvan enjekte denemeden önce enjekte, şırıngalar ve iğneler kullanarak yeni iseniz. İdeal olarak, güvenle hayvan kısıtlama için diğer bırakarak, tek elle şırınga ve iğne işlemek mümkün olacak. Kararlı bir yandan doku hasarı en aza indirir iğne hareketini en aza indirir.
    3. İğneler bir nokta, bir eğim, bir şaft ve bir hub var. Şırıngalar, bir ucu, bir namlu, ve bir piston (Şekil 1 a ve b) sahiptir.
    4. İğneler kalınlığı ve uzunluğu ile boy vardır. Daha büyük olan ölçü numarası, daha küçük iğneyi. Küçük iğneler donukluk çok yatkındır (ucunda oluşturan bir çapak) ve delme çoklu doz flakon (Şekil 1 c) kullanılmamalıdır. Her zaman tercihbileşik yönetmek için çalışacak kısa iğne.
    5. Iğne göbeği ile şırınga ucuna bağlanır. Bazı şırıngalar ipuçları kilitleme var. Daima şırınga güvenli iğne takılı olduğundan emin olun.
    6. İğneler iyi özellikle intravenöz enjeksiyon için, yukarı eğim ile hayvan sokulur.
    7. Elle iğne recap Asla. Bu iğne yaralanmaları sık görülen bir nedenidir. Etiketlenmiş kaplar içinde düzgün iğne ve şırınga imha edin. Iğneler özetledi gerekiyorsa, aygıtlar (Şekil 1 d) mevcuttur.
  5. İntranazal (IN)
    1. Yukarıda tarif edildiği gibi hayvan kısıtlamaktadır.
    2. Bir şırınga ya da pipet kullanarak, hayvanın burun delikleri de inhale edilecek malzeme küçük bir miktar.
    3. Burun kaybolmak üzere malzeme için izleyin.
    4. İstenilen ses idare edene kadar gerektiği kadar tekrarlayın.
  6. Intramusküler (IM)
    1. Inci engelleyinYukarıda açıklandığı gibi e hayvan. Hayvanın arka bacakları biri özgür ve enjeksiyon için stabilize olduğundan emin olun. Restraint iki kişi alabilir. Hayvan enjeksiyon sırasında tekme Eğer, iğne kas hasarına neden olur.
    2. Iğne, hayvanın derisi ile dik şekilde yerleştirilmelidir. Bir uygun ölçekli şırınga ve iğne kullanarak, yaklaşık konik derin iğne takın ve hayvanın kuadriseps (uyluğun ön) veya lateral uyluk kas kütlesi içine malzeme enjekte.
    3. Bu siyatik sinirine zarar mümkün olduğu gibi posterior kas kütlesi içine enjekte etmeyin.
    4. Hayvanlar birden İM enjeksiyonlar, alternatif bacaklar almak iseniz.
  7. Intraperitoneal (IP)
    1. Yukarıda tarif edildiği gibi hayvan kısıtlamaktadır.
    2. Enjeksiyon için karın açığa yere doğru hayvanın burun İpucu.
    3. Hayvanın orta hat bulun ve zihinsel kadranda (Şekil 2) karın bölün. Altkadran, özellikle hayvanın sağ alt kadranda, intraperitoneal için uygun bölgelerdir.
      1. Sağ alt kadranda anatomik önemli yapıların olmaması nedeniyle seçilmiştir.
    4. Bir uygun ölçekli şırınga ve iğne kullanarak, hayvanın içine malzeme enjekte.
    5. Hayvanların tekrarlayan IP enjeksiyonları almak iseniz, enjeksiyon yerinde alternatif.
  8. Subkutan (SC, SQ)
    1. Yukarıda tarif edildiği gibi hayvan kısıtlamaktadır. Hayvan yeterince gevşek deri harekete geçirilmesi, böylece ölçülü olması gerekir.
    2. Hayvanlar SC enjeksiyon sonrası rutin ele alınması ise, (boyun ense) ense kullanmayın. Bunun yerine, dorsal kıç veya kanadında deri kullanın. Hayvanlar birden SC enjeksiyon, enjeksiyon alternatif siteler almak iseniz.
    3. Cilt kavrayın ve yavaşça bir "çadır" yapma, yukarı doğru çekin.
      1. Enjeksiyon yalnız yapıyorsanız, iğne takın ve hafifçe tent cilde iğne subkutan uzayda olduğunu teyit etmek için iğne ile yukarı.
    4. Bir uygun büyüklükte bir şırınga ve iğne kullanarak, çadır deri içine 30-45 ° 'lik açıyla iğne yerleştirin ve malzeme enjekte edilir. Cildi yukarı tutarak parmak arası ve uzak paralel enjekte.
    5. Enjeksiyon başarılı ise, deri altına, küçük bir şişme görülecektir.
    6. Enjeksiyondan sonra, malzemenin geri akışı önlemek için hafif bir baskı uygulayın.
  9. İntradermal (ID)
    1. Intradermal enjeksiyonu, hayvanlarda sıklıkla derinin görülebilir ki tıraş edilmiştir.
    2. Birden çok intradermal enjeksiyon için hayvanın Tutucu zor olabilir. Bu durumda, kimyasal sedasyon gerekli olabilir. Kimlik enjeksiyonlar için siteler SC için olanlarla aynıdır.
    3. 15-30 ° açıyla cilde bir uygun büyüklükte iğne takın. İğne çok uzak eklenmez ve enjeksiyon yeniden görüşmek gerekirdirenç.
      1. Alternatif bir yaklaşım, yavaşça enjeksiyon bölgesine bitişik deri tutam ve bir çok sığ bir açıyla iğne yerleştirmektir. Bu enjeksiyon işlemi sırasında hareket etmelerini engeller çünkü bu fareler de yararlıdır.
    4. Enjeksiyon başarılı ise, bir küçük bleblemeye görülecektir. Bu çevreleyen deri daha solgun olacaktır.
    5. Enjeksiyondan sonra, malzemenin geri akışı önlemek için hafif bir baskı uygulayın.
  10. Damar içi (IV)
    1. Sol ve sağ lateral kuyruk damarından fare ve sıçanlarda kullanılan en yaygın vasküler erişim yolu vardır.
    2. Diğer vasküler erişim yolları fare ve sıçanlarda mümkündür, ancak genellikle sedasyon ve enjeksiyon sonrası ağrı gerektirir.
    3. Bir kuyruk damarından enjeksiyon için, bir plastik ya da Decapicone kemirgen süzgeç da hayvan kısıtlamaktadır.
    4. Bir lamba altında, ya da korunan bir ısıtma cihazı ile ilgili hayvanın kuyruk yerleştirin. Bu kolay enjeksiyon için izin, vazodilatasyon teşvik edecektir.
      1. Hayvan aşırı etmeyin.
      2. Büyük erkek sıçanlar için kuyruk off kepeklerden temizlik damarın daha iyi görüntülenmesi için izin verebilir. Deri aşınmadığındn böylece temizleme yumuşak olmalıdır.
    5. Dominant olmayan el ile ucu ile hayvanın kuyruk tutun. Bu kuyruk düzeltmek olacaktır.
    6. Kuyruk Döndür ¼ kolay enjeksiyon için dorsal kuyruk damarları yerleştirmek için açın. Hayvan iki lateral kuyruk damarlar ve ventral kuyruk arter (Şekil 3).
    7. 15-20 ° açıyla iğne ile kuyruk yaklaşın. Kuyruk distal kısmında başlayın.
      1. Damarlar sığ ve iğne kadar konik ötesinde sokulmamalıdır.
      2. Enjeksiyon gibi distal olarak mümkün olduğu kadar başlamış ise, ilk olarak başarısız denemelisiniz, enjeksiyon girişimi için daha fazla hasar görmemiş damar vardır.
    8. Materyal enjekte. Başarılı bir enjeksiyon olmayan damar giren malzeme ile sonuçlanacaktırdirenci ve enjeksiyon süresince kuyruk ven beyazlaşma.
      1. Bu damar çökecek gibi, enjeksiyondan önce aspire etmeyin.
      2. Enjeksiyonundan sonra Damara sitede Nazik basınç kanamayı önlemek olacaktır.
    9. Başarısız bir enjeksiyon olarak, malzeme kolaylıkla akışkan değildir. Bunun yerine, kuyruk derisi mazur olur ya da hiç malzeme enjekte edilebilir değildir.
  11. Intragastrik idaresi (oral gavaj)
    1. Sadece ölçülü, uyanık hayvanlar üzerinde gavaj gerçekleştirin. Anestezi veya sedasyon aspirasyon riski (malzeme yanlışlıkla akciğerlere kaçma) artırır.
    2. Kullanım için uygun boyutta bir ağızdan beslenmeye iğne seçin. Bu iğneler trakea içine onların geçişini önlemek için sonunda topu ipuçları var.
    3. Gerekli Boy ölçülü hayvan tutan ve ağız köşesinden ölçerek belirlenebilir. Besleme iğne topu ucu hayvanın son kaburga (<ulaşması gerekirstrong> Şekil 4). İğne aralığı hayvanın ağırlığı tarafından belirlenmektedir.
    4. Kafasını ve bir vücut düz, yatay çizgi halinde olacak şekilde hayvan kısıtlamaktadır. Bu besleme iğne daha kolay geçiş sağlayan, özofagus düzeltiyor.
    5. Dil üzerine, hayvanın ağzı içine iğne ucu top yerleştirin. Iğne yerleştirildikten sonra, damak karşı hafifçe bastırarak, iğne ve şırınga getirmek, hayvan burnu tavana doğru yani.
      1. Sıçanlarda iğne bu boğazın arka geçerken biraz yönlendirilmesi için gerekebilir. Iğne herhangi bir gerginlik konumunu ayarlamak için ihtiyaç gösterir
    6. Önceden belirlenmiş bir mesafeye ulaşılana kadar iğne geçmek için devam edin. Iğne kolayca geçmelidir ve hayvan gasp ya boğması olmamalıdır.
    7. Madde uygulayın. O mideye akmalıdır. Direnç veya hayvan soluk soluğa, şoklar, veya maviye dönerek varsa, derhal durunuz ve ihtiyaç kaldırabilirsinizle. Aspire edilen hayvanlar yönetilen bileşik bağlı olarak, ötenazi gerektirebilir.

4. Temsilcisi Sonuçlar

Hayvanların doğru ele alındığında, hayvan ve işleyicisi hem de minimum stresle vardır. Eylemciler ısırıldı veya çizilmiş ve hayvanların insanca ve yetkin işlenir alamadım. Bileşikler dokuya en az zarar ile ve mümkün olduğu kadar küçük hayvan için rahatsızlık gibi uygun yolla uygulanır.

Araştırmacılar küçük bir doldurulmuş hayvan ile çalışan, hayvanlar taşıma için yeni iseniz yararlı olabilir. Bu tür Koken sıçan gibi bazı teknikler kullanılabilir hayvan simülatörler da vardır. Birçok araştırmacı için, hayvanlar üzerinde çalışmaya başlamadan önce iğne ve şırınga ile aşinalık kazanmak için küçük bir şans var. Bir iğne ve şırınga Temsilcisi parçaları Şekil 1A ve 1B gösterilmektedir. İlk kez hayvanlara enjekte etmeden önce,hayvanları ile çalışmaya başlamadan önce enjekte uygulamaya yararlı olabilir. Örneğin 28 ve 30 g kadar çok ince iğneler, hasar kolaydır. Çok kullanımlı şişelerden maddelerin çekilmesi halinde, enjeksiyon için daha küçük çaplı bir iğne ile değiştirmek sonra bu amaç için daha büyük bir iğne kullanımı ile. Bir burred iğne Şekil 1C görülür. Bu tür elle kullanılan iğneler recapping olarak değil iğne ile çalışırken Temel güvenlik önlemleri alınmalıdır. Şekil 1D kullanımda bir iğne recapper gösterir. Bu kan bir iğne aracılığıyla basıldığında görülen hemoliz olmadan bir şırınga, örneğin, ekspres kan iğneleri kaldırmak gerekir araştırmacılar için değerli olabilir.

Şekil 2 ve 3 enjeksiyon için hedef gösteren, karın içi enjeksiyon ve kuyruk yapısı için tipik görülecek göstermektedir. Şekil 4, gavaj iğnelerin uygun boyutlandırma örnekleri sağlar. Gavaj iğneler bir ağzından ulaşmalıdırson kaburga altında sağa nimal.

Şekil 1
Şekil 1. A) İğne ve B) şırınga parçalar etiketli. C) bir çoklu kullanım şişeye iğnenin tekrar yerleştirilmesi nedeniyle iğne üzerinde Burr. Kullanımı D) İğne recapper.

Şekil 2,
Şekil 2. Ventral karın Çeyrekte. Sadece tercihen alt iki kadran, sağ alt kadranda enjekte.

Şekil 3
Şekil 3. Kesitinde kuyruk şematik, kemikli ve tendenous yapılara arter ve venler arasındaki ilişkiyi gösteren.

Şekil 4,
Şekil 4,. Gavaj iğne sıçanlarda boyutlandırma. A) Gavaj iğne çok long. B) Uygun boyutlarda gavaj iğnesi. C) çok kısa Gavaj iğne ölçümü, D) uygun gavaj iğne boyutunu belirlemek için son kaburga için palpasyonunu.

Fare Sıçan
Rota Tavsiye edilen hacim Iğne Önerilen kalınlığı ve uzunluğu Tavsiye edilen hacim Iğne Önerilen kalınlığı ve uzunluğu
İntranazal 1 5-25 ul N / A 5-25 ul N / A
İntramüsküler 1,2 0.00005 ml / g <23 g, 0,5-0,75 0.1 ml / kg ' <21 g, 0.5 içinde 0.75
Intraperitoneal 1,2 0.02 ml / g <21 g, 0,75 ile 1 10 ml / kg ' <21 g, 0,75 ile 1
Subkutan 1,2 0.01 ml / g <22 g, 0,5 ile 1 5 ml / kg ' <22 g, 0,5 ile 1
İntradermal 1 0.05-0.1 ml De <26 g, 0.5 0.05-0.1 ml De <26 g, 0.5
İntravenöz 1,2 0.005 ml / g -0.025 ml / g * <25 g, 0,75-1 5 ml/kg-20 ml / kg * <23 g, 0,75-1
Oral gavaj 1,2 0.01 ml / g 20-22 g besleme iğnesi 5-10 ml / kg ' 16-20 g besleme iğnesi

* İlk sayısı yaklaşık 1 dakika içinde intravenöz bolus olarak verilen hacmidir. İkinci hacmi 5-10 dakika içinde yavaş infüzyon şeklinde verilebilir hacmidir.

Discussion

Bu protokol araştırmacı imkan sağlanan eğitim eller tamamlayacak yapısındaki hayvan işleme ve madde yönetimine bir giriş olarak görülmelidir. Kullanılacak ve maddenin uygulama yolları araştırma protokolü veya etik kurul protokolü yazılırken deney tasarımında dikkate alınması gereken kısıtlama anlamına gelir.

Hayvan ilgili prosedürler Eğitim araştırma başarısı için hayati önem taşımaktadır. En deneyleri gerçekleştirmek için, hayvanlar araştırma personeli tarafından ele alınması gerekir ve daha iyi hayvan taşıma, daha az hayvansal 3 vurguladı. Nazik insan temas için hayvanların Accustoming stresi azaltmak ve hayvanların daha uysal araştırma konuları 4,5 yapabilirsiniz. Taşıma stres araştırmaları 6 bazı türleri etkilediği gösterilmiştir ve bu da diğerleri etkileyen mümkün olmuştur. Kemirgenler Restraint (geçici bir dikkatli ile gerçekleştirilebilir, ama hakimiyet olmalıdırkavrama kemirgen ve işleyicisi yaralanmasına neden muhtemeldir) ve pratik olan en kısa süre olmalıdır. Tutucu yöntemler genellikle hayvanın boyutuna bağlı olarak seçilir ya da erişim talep edilmektedir. Örneğin, mümkün olmasına rağmen, berduş tarafından erişkin sıçanlarda işleme, genellikle işleyicisi deneyimsiz, özellikle sıçan güçlü direnç ile karşılanır. Elle bir fare veya sıçan Holding kuyruk damarları erişimi zor ve bir emniyet cihazı sık hala mümkün olduğu kadar hayvan tutmak için seçilir yapabilirsiniz.

Araştırmacılar hayvanların ele alındığında, genellikle daha fazla çalışma için bir bileşik veya biyolojik yönetmek için arıyorlar. Maddelerin Tatbikat yolu, belirli bir deney için emme, biyoyararlılık ve uygunluk etkileyebilir. Çeşitli yolları ile aşinalık araştırma için mümkün olan en iyi şekilde kendi madde yönetmek yeteneği ile araştırmacılar vermelidir. Bir maddenin hızlı emilim teşvik Örneğin, bir rotaAraştırmacı yavaş etkili şekilde madde yönetmek istiyorsa, böyle bir intravenöz veya intraperitoneal olarak kullanılmamalıdır. Hacim, ekipman, ve çözünen için bu teknikler ve bazı hususlar arasında Yeni incelemeler Turner ve diğerleri tarafından iki belge de bulunabilir. 1.7

Maddelerin laboratuar fareleri uygulanacaksa zaman, dikkate ekipman ve maddenin (Tablo 1'de) hacmi uygun büyüklükte verilmelidir. Uygun büyüklükte olmayan ekipman ya da büyük hacimli rahatsızlık, yaralanma ya da hayvan ölümüne neden olabilir. Genellikle, parenteral madde araştırma hedefleri (yani, bakteriyel çalışmaları) bu imkansız kılacak durumlar dışında, sterildir. Bileşikler ve biyolojik hayvan üzerinde en az etkiye sahip olan bir çözünmüş madde ya da araç içinde olmalıdır. Bir fizyolojik pH (7.3 -7.4), özellikle deri altı, kas içi, ve intrape için, genellikle iyi kabul görmüş birritoneal yolları. Bu yoldan uygulanan maddeler Non-fizyolojik pH seviyeleri ağrı veya nekroz ve doku hasarına neden olabilir. PH daha geniş aralıkları intragastrik ve intravenöz yolları 7 ile tolere edilir. Küçük Kemirgenlerde başka bir önemli husus oda sıcaklığında sıvılarının büyük miktarlar verildiği takdirde soğuk olasılığıdır. Sıvıların, özellikle bir hasta destek hayvan, intravenöz veya intraperitonal edilmektedir, bunlar vücut sıcaklığında (37 ° C) kadar ısıtıldı olmalıdır.

Bu protokol tartışılan uygulama yolları usta basit ve genel anestezi gerektirmeyen, genellikle birçok araştırma programlarında kullanılan olanlardır. Kullanım yolları neredeyse sonsuz bir çeşitlilik intrakranial, intratekal, epidural, intratrakeal, intraosseöz ve adına intraartiküler ama birkaç dahil olmak üzere, ancak mümkündür. İdarenin bu özel rotalar Eğitim insanların wh aranmalıdıro rota ve iyi sonuçlar ile geniş deneyime sahip.

Intratrakeal damlatma göre yöntem; Kemirgenlerde, intranazal yol genellikle daha fazla "doğal" yoluyla akciğerlere ortaya maddeleri incelemek için kullanılır. Fare ve sıçanlar hatta bilinçli hayvanlarda, zor değil bu yüzden onları sıvı çok az miktarda nefes inducing, zorunlu burun solunumu vardır. Burun mukozası kan damarları, bazı maddelerin burun içi uygulama ile iyi beslenmesi nedeniyle intravenöz benzer olabilir. O emilimini tehlikeye atabilir gibi bu güzergah, ancak rinitli hayvanlarda tavsiye edilmez. Intranazal yoldan büyük miktarlarda yönetmek için girişimler nefes darlığı ya da hayvan boğulması neden olabilir.

Kas içine enjeksiyon maddelerin hızlı emilim sağlar. İntramüsküler enjeksiyonlar fareler ve küçük boyutu ve buna bağlı küçük kaslar nedeniyle farelerde zor olabilir. Bunlar, arka bacak gerçekleştirilirs. Siyatik sinirin hasar potansiyeli nedeniyle, kuadriseps femoris seçim kastır.

Subkütan, intradermal deri yollarının her ikisi de dahil olsa da, subkutan vs deri yerleştirilen maddelerin biyo-sağlanabilirlik arasındaki farklılıklar vardır. Subkutan uygulama genellikle intravenöz veya intraperitoneal gibi diğer rotaları, daha yavaş emilimini, bir "biriktirme" rota olarak kabul edilir. Intradermal uygulama maddeler tipik olarak, bu gibi adjuvant antijen karışımları gibi imüno-uyarıcı maddenin çok küçük miktarlarda kullanılmaktadır. Her iki durumda da, uygulanan maddenin fizyolojik pH ve tahriş edici olmayan olmalıdır. Bu kemirgen kısıtlayıcı için yaygın olarak kullanılan bir yer olduğu için, intradermal ya da deri altı enjeksiyonlar, ense da yapılmamalıdır.

İntravenöz ve intraperitoneal genellikle kemirgenlerde eşdeğer olarak kabul edilir. Doz İntravenöz yolları daha r verinBileşiklerin apid alımı, ancak, periton içi uygulama oral uygulama için yaklaşık 8 eşdeğer olarak kabul edilmelidir ise. Yanlış tamponlu eğer ağrıya neden olabilir gibi Bakımı bileşikler uygulanan intraperitoneal ile alınmalıdır. Kemirgenlerde intravenöz bolus uygulama ortak yol kuyruk damarlar üzerinden gerçekleşir. Bir maddenin kronik intravenöz olarak arzu edilirse, venöz veya arteriyel kanül implantasyonu dikkate alınmalıdır. Intravenöz maddeler aseptik teslim edilmeli ve intravenöz yönetmek için güvenli olduğu gösterilmelidir. Örneğin, hemoliz, tromboz veya vaskülit indükleyebilir maddelerin intravenöz için uygun değildir.

Mide içi ya da oral gavaj yol, genellikle insanlarda bir ortak yol dozaj taklit etmek için kullanılır. Yiyecek veya su ve oral uygulama ile karşılaştırıldığında, aynı zamanda maddelerin tam doz için izin verir. Bileşikleriningavaj yoluyla uygulanmıştır hayvanın beslenen / aç karnına yanı sıra, bileşik ya da biyolojik çözünen ya da araca göre değişir. Gavaj veya besleme iğneleri kullanılan hayvan için uygun büyüklükte olmalıdır, ve gavaj yoluyla tek kullanımlık iğneler pratik olmadığı takdirde, hayvanlar arasında temizlenmesi gerekir. Gavaj kaynaklanan yaralanmalar nadir değildir ve akciğer veya mide veya yemek borusu yırtılması halinde madde birikimi bulunmaktadır. Eğitim tecrübeli bir parti tarafından denetlenir ve uyanık hayvanlara gavaj önce anestezi altındaki hayvanlarda (ötenazi olacaktır), sonra ilk ötenazi hayvanlar üzerinde yapılmalıdır çalışılır. Uyanık hayvanlar üzerinde ilk gavaj girişimleri prosedürü ters giderse yaralanmasına neden olmaz gibi tuzlu gibi ortalama büyüklükte hayvan ve bir maddenin küçük miktarlarda, içermelidir. Hayvan yakından gavaj ve ötenazi gerekirse sonra, mavi, kanama veya aşırı salivasyon dönüm gibi nefes nefese gibi sıkıntı belirtileri, değerlendirilmesi gerekir. Eğer euthanasia hayvan gavaj prosedürün neden başarısız olduğunu belirlemek için necropsied olmalıdır, gereklidir.

Disclosures

Yazarlar Charles Nehri çalışanlarıdır.

Acknowledgments

Burada sunulan araştırma Charles River tarafından desteklenmiştir.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Needles Various Various Needles are sold by both gauge and length. Check both before ordering.
Syringes Various Various Always choose an appropriate size for the volume to be administered.
DecapiCones Braintree Scientific DC-200, DCL-120, MDC-200 Available in mouse and rat sizes.
Rodent restrainer Harvard Apparatus, Braintree Scientific, Plas-Labs, others Available in clear Plexiglas, adjustable plastic, and sized for mice and rats.
50 ml conical tube Various
Feeding needles VWR, Popper and Sons Various Fit the needle gauge and length to the animals as described above. Both disposable and reusable feeding needles are available.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613 (2011).
  2. Diehl, K. H. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. J. Appl. Toxicol. 21, 15-23 (2001).
  3. Hurst, J. L., West, R. S. Taming anxiety in laboratory mice. Nat. Methods. 7, 825-826 (2010).
  4. Maurer, B. M., Döring, D., Scheipl, F., Küchenhoff, H., Erhard, M. H. Effects of a gentling programme on the behaviour of laboratory rats towards humans. Appl. Anim. Behav. Sci. 111, 329-341 (2008).
  5. Cloutier, S., Newberry, R. C. Use of a conditioning technique to reduce stress associated with repeated intra-peritoneal injections in laboratory rats. Appl. Anim. Behav. Sci. 112, 158-173 (2008).
  6. Romanovsky, A. A., Kulchitsky, V. A., Simons, C. T., Sugimoto, N. Methodology of fever research: why are polyphasic fevers often thought to be biphasic. Am. J. Physiol. 275, 332-338 (1998).
  7. Turner, P. V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., Brabb, T. Administration of substances to laboratory animals: equipment considerations, vehicle selection, and solute preparation. JAALAS. 50, 614-627 (2011).
  8. Lukas, G., Brindle, S. D., Greengard, P. The route of absorption of intraperitoneally administered compounds. J. Pharmacol. Exp. Ther. 178, 562-564 (1971).
  9. AALAS. Laboratory Mouse Handbook. AALAS. (2009).
  10. AALAS. LAT Training Manual. AALAS. (2009).
  11. AALAS. LATg Training Manual. AALAS. (2009).
  12. Barnett, S. W. Manual of Animal Technology. Wiley-Blackwell. 440 (2007).
  13. Baumans, V., Pekow, C. A. Handbook of Laboratory Animal Science. Hau, J., Schapiro, S. J. 1, CRC Press. 401-446 (2010).
  14. Bogdanske, J. J., Hubbard-Van Stelle, S., Riley, M. R., Schiffman, B. M. Laboratory Mouse Procedural Techniques. CRC Press. (2011).
  15. Danneman, P., Suckow, M. A., Brayton, C. The Laboratory Mouse. CRC Press. (2000).
  16. Sharp, P. E., La Regina, M. C. The Laboratory Rat. CRC Press. (1998).

Comments

7 Comments

  1. Hi,
    What is the possibility that I could request a DVD of the mouse handling training video. I will use it for training purposes at uconn.
    Thank you
    Janet

    Reply
    Posted by: Janet T.
    October 25, 2012 - 8:17 AM
  2. Hello Janet,

    Thank for viewing the video article and we're delighted to hear you found it to be helpful.

    Our goal is to provide the video via joVE so it can be accessed from any site as needed. You can certainly link directly to the article for your internal trianing needs, but at this time we are not offering the video in other formats including DVD/CD. If that changes, I have your contact inforamation and will follow up with you.

    Regards

    Elton

    Reply
    Posted by: Elton M.
    October 26, 2012 - 12:35 PM
  3. This video is a great tool for the training of technicians and graduate students. It is accessible and easy to follow for people that are more comfortable with visual training.

    Reply
    Posted by: Rana S.
    January 30, 2014 - 1:25 PM
  4. I can not download this video what is the problem ?

    Reply
    Posted by: maryam s.
    June 10, 2014 - 1:28 AM
  5. please send me this video to my email .i can not download it

    Reply
    Posted by: maryam s.
    June 10, 2014 - 1:29 AM
  6. How do i download the video?It is great for teaching purposes.

    Reply
    Posted by: Dotte Chegu A.
    September 12, 2014 - 3:39 AM
  7. Hi,
    I have seen your video administration in rodents by different routes and handling. Really, I found it very useful in my work and thanks a lot. In the video you have shown administration for all the routes except Intra-articular route. Intra-articular drug injection is very important for my studies could you please update that video also. It would be very helpful for me.

    Thanks and regards
    Mukesh Dhanka

    Reply
    Posted by: Mukesh D.
    September 9, 2016 - 10:21 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics