Visualisere Proteiner og makromolekylære Komplekser af negative Stain EM: fra Grid Forberedelse til Image Acquisition

Visualisere protein prøver ved negativ farvning elektronmikroskopi (EM) er blevet en populær strukturel analyse metode. Det er nyttigt for kvantitativ strukturel analyse, såsom beregning af en 3D-rekonstruktion af molekyler blev undersøgt, og også for kvalitativ undersøgelse af kvaliteten af ​​protein præparater. I denne artikel præsenterer vi detaljerede protokoller for at forberede EM gitre, farvning prøven og visualisere prøven i et elektronmikroskop. Nybegyndere kan følge disse protokoller nemt og til at udnytte negative pletten EM som en rutine assay, ud over andre biokemiske assays, for at vurdere deres protein prøver.