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पूरे रक्त में तेजी से प्वाइंट की देखभाल enoxaparin anticoagulant प्रभावकारिता की परख

Medicine
 

Summary

कम आणविक वजन हेपरिन, enoxaparin द्वारा एक तेजी से रक्त जमावट के निषेध के मात्रात्मक परख का प्रदर्शन. enoxaparin के योगदान हेपरिनेज़ साथ पाचन के माध्यम से अपने प्रभाव को हटाने के द्वारा मूल्यांकन किया है. परख का विस्तृत वर्णन हमारे प्रकाशित समाचार पत्र में विस्तृत है.

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Inchiosa Jr., M. A., Pothula, S., Kubal, K., Sanchala, V. T., Navarro, I. Rapid Point-of-Care Assay of Enoxaparin Anticoagulant Efficacy in Whole Blood. J. Vis. Exp. (68), e3852, doi:10.3791/3852 (2012).

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Abstract

Protocol

1. हेपरिनेज़ पुनर्गठन

  1. Lyophilized मैं हेपरिनेज़ वाणिज्यिक शुद्ध प्रोटीन की 1 ग्राम युक्त शीशियों में प्राप्त किया जाता है (सीमेंस, Newark डेलावेयर, DadeHepzyme रेफरी B4240-10). प्रोटीन खारा के 0.25 मिलीग्राम (0.9% NaCl) में भंग कर रहा है.

2. रक्त के नमूनों का संग्रह

  1. दो रक्त नमूने निर्वात द्वारा सोडियम साइट्रेट (0.3 मिलीलीटर 0.109M, 3.2%) में तैयार कर रहे हैं Vacutainer ट्यूब (; फ्रेंकलिन Lakes, NJ Becton Dickinson); buffered ट्यूबों दोनों पूर्व enoxaparin का एक ज्ञात एकाग्रता के साथ बालीदार, रक्त की मात्रा है कि तैयार की है 2.7 मिलीलीटर. कुल सामग्री तो 3.0 मिलीलीटर है.

3. हेपरिनेज़ पाचन

  1. हेपरिनेज़ शीशी है कि एक सिरिंज (शीशी के 80%, लगभग 0.2 मिलीग्राम प्रोटीन का 0.8 ग्राम) में aspirated जा सकता है की संपूर्ण सामग्री, एक Vacutainer ट्यूब को सौंप दिया है, नमक की 0.2 मिलीलीटर (0.9% NaCl) से जोड़ा जाता है 2 ट्यूब, जो basel के रूप में कार्य करता हैenoxaparin प्रभाव के उन्मूलन से पहले ine राज्य.
  2. दोनों Vacutainer ट्यूबों Hemochron तंत्र के thermostated कुओं में 5 मिनट की अवधि के लिए रखा जाता है. (हेपरिनेज़ के साथ एक 5 मिनट पाचन समय की पर्याप्तता हमारे पहले प्रकाशित काम में स्थापित किया गया था 1.)

4. थक्के Assays

  1. हेपरिनेज़ ऊष्मायन के अंत में, खून की 2.0 मिलीलीटर परख कारतूस को सौंप दिया है. मां ट्यूब के मामले में, यह 250 मिमी 2 CACL 0.1 मिलीग्राम जमावट आरंभ के साथ पूर्व से भरे है. वाणिज्यिक aPTT परख कारतूस (A104) पूरे रक्त में थक्के आरंभ कि Vacutainer anticoagulant के रूप में सोडियम साइट्रेट युक्त ट्यूबों में तैयार किया गया है के लिए बनाया गया है.
  2. Hemochron तंत्र रक्त जमावट के पूरा होने का संकेत है और सेकंड में थक्के बार को बरकरार रखता है. थक्के बार हेपरिनेज़ का इलाज नमूना और आधारभूत नमूना के बीच में अंतर, थक्के ती से विभाजितमुझे आधारभूत नमूने के लिए प्रतिशत कमी enoxaparin के उन्मूलन से उत्पन्न पैदावार. नीचे के रूप में चर्चा की, मजबूत रैखिक correlations विरोधी Xa chromgenic परख द्वारा किया गया है enoxaparin मापा सांद्रता के साथ संबंध के लिए थक्के समय में प्रतिशत की कमी और पूरे रक्त का नुकीला नमूनों में enoxaparin की एकाग्रता, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से के बीच के संबंधों के लिए प्राप्त गतिविधि. Enoxaparin एकाग्रता की विरोधी Xa assays एक वर्णजनीय दो चरण परख के लिए एक वाणिज्यिक किट (; Aniara, मेसन, OH BIOPHEN) के साथ आयोजित किया गया.

Representative Results

चित्रा 1 थक्के समय में प्रतिशत की कमी के बीच संबंधों के लिए परिणाम enoxaparin का नुकीला सांद्रता (0.2, 0.4 और 1.0 विरोधी Xa मिलीग्राम प्रति आइयू) की एक श्रृंखला के लिए हेपरिनेज़ साथ enoxaparin के उन्मूलन के बाद प्रस्तुत करता है. परिणाम दोनों मां और aPTT परख कारतूस के लिए प्रस्तुत कर रहे हैं. विरोधी Xa गतिविधि के वर्णजनीय परख से enoxaparin मापा सांद्रता भी प्रत्येक भूखंड के भुज में शामिल हैं.

चित्रा 2 बनाम विरोधी Xa गतिविधि वर्णजनीय उपाय थक्के समय में प्रतिशत की कमी के रूप में एक ही डेटा के भूखंडों को प्रस्तुत करता है.

उच्च सांख्यिकीय significances साथ मजबूत रैखिक correlations, सभी चार संबंधों के लिए पाए गए.

चित्रा 1
चित्रा 1 enoxaparin contr की देखभाल determinations प्वाइंट की.ibution बालीदार पूरे रक्त के थक्के बार हेपरिनेज़ साथ ऊष्मायन के बाद थक्के समय का प्रतिशत परिवर्तन (छोटा) के आधार पर करने के लिए. बालीदार enoxaparin सांद्रता पूरे रक्त जोड़ा और मापा विरोधी Xa प्लाज्मा सांद्रता (कोष्ठक में ± एसई, मतलब) प्रत्येक ग्राफ के भुज में रखा जाता है. थक्के समय में सभी प्रतिशत परिवर्तन का मतलब है और एसई के रूप में प्रस्तुत कर रहे हैं, के साथ सेकंड में थक्के समय के औसत छोटा करने के साथ. डेटा एक ही रोगी से धराशायी लाइनों से जुड़े हुए हैं. चार साजिश में तारों के साथ पहचान के रोगियों के लिए डेटा (मां परिणाम) साजिश बी में चार रोगियों (aPTT assays) के रूप में वही कर रहे हैं. परिणामों के सभी एकल determinations का प्रतिनिधित्व करते हैं. Pearson सहसंबंध गुणांक थे r 0.869 = (= पी 1.9 -5 x 10) और आर 0.916 = (पी 2.8 = 10 एक्स -5), मां और aPTTassay के साथ संबंधों के लिए क्रमशः. Inchiosa एट अल से अनुमति के साथ Reproduced 1.


. चित्रा 2 प्रतिशत थक्के बार में बिंदु का देखभाल आंकड़े 1 ए और बी में दिखाया assays में परिवर्तन के परिणाम प्लाज्मा विरोधी कारक Xa सांद्रता के खिलाफ प्लॉट किए जाते हैं, मां के परिणाम, बी, aPTT assays. परिणामों के सभी एकल थक्के समय assays और विरोधी कारक Xa सांद्रता के एक determinations से हैं. 1 Pearson सहसंबंध गुणांक r थे 0.910 = (= पी 2.5 -6 x 10) और आर 0.922 = (पी 2.0 = 10 एक्स -5) मां और aPTT परख के साथ संबंधों के लिए, क्रमशः से Inchiosa एट अल अनुमति के साथ Reproduced.

Discussion

Enoxaparin प्रभावकारिता के इस परख एक इनवेसिव प्रक्रिया है कि रक्तस्राव या रक्तगुल्म की विकास की एक परिचर जोखिम है प्रदर्शन के रिश्तेदार सुरक्षा का निर्धारण करने के लिए एक महत्वपूर्ण विकल्प के रूप में सेवा कर सकता है. यह विशेष महत्व का हो सकता है जब एक एपीड्यूरल इंजेक्शन माना जा रहा है. दिशा निर्देशों के बहुमत enoxaparin और एक आक्रामक प्रक्रिया की दीक्षा के इंजेक्शन के बीच एक 12 घंटे की प्रतीक्षा अवधि 5 गुर्दे हानि, मोटापा और गर्भावस्था की सिफारिश enoxaparin की dosing आवश्यकताओं को प्रभावित कर सकते हैं 6,7 परख के बाद से एक 10 के भीतर पूरा किया जा सकता है. मिनट की अवधि, यह भी एक क्लिनिक या चिकित्सक के कार्यालय है, जहां यह रोगियों जो शिरापरक thromboembolism के विकास के जोखिम में हैं एंटिकोगुलेशन की पर्याप्तता पर जानकारी प्रदान करेगा में इस्तेमाल किया जा सकता है. तत्काल खुराक समायोजन, स्थापित किया जा सकता है, के रूप में की जरूरत है.

प्लाज्मा में enoxaparin एकाग्रता एक वर्णजनीय से मापा जा सकता हैssay की जमावट कारक, Xa के निषेध की हद तक. बहरहाल, यह केवल 6-8 अपनी एकाग्रता, अपनी anticoagulant प्रभावकारिता है, जो व्यक्ति के रोगियों के बीच व्यापक रूप से भिन्न होता है विशेष रूप से नहीं. पैदावार

हमारे अध्ययन enoxaparin साथ ही किए गए. हालांकि, यह अनुमान किया जा सकता है कि परख किसी भी LMWH कि अपमानित हेपरिनेज़ मैं यह पहले से ही dalteparin nadroparin, और tinzaparin के लिए मामला हो जाना जाता है है के लिए लागू किया जा सकता है 9-11 हम की सुविधाओं के संबंध में परख डिजाइन Hemochron थक्के समय साधन. साधन अपेक्षाकृत सस्ती है, भी, डिस्पोजेबल रक्त संग्रह ट्यूबों, हेपरिनेज़ ampoule, और परख कारतूस एक रोगी के लिए एक विश्लेषण है को पूरा करने के लिए लगभग 15 अमरीकी डॉलर है. इस प्रकार, यह विभिन्न नैदानिक ​​सेटिंग में anticoagulant की स्थिति की निगरानी के लिए उपयुक्त हो सकता है की उम्मीद होगी.

Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है.

Acknowledgments

जांच केवल विभागीय और संस्थागत संसाधनों से समर्थन के साथ बाहर गए थे. जमावट तंत्र (Hemochron 801) निर्माता से दायित्व के बिना उधार दिया था. परख कारतूस अपने खुदरा कीमत पर खरीदे गए थे. वीडियो में परिचयात्मक आंकड़ा Sanderink, एट अल से संशोधित किया गया था 12. वीडियो (हेपरिनेज़ पाचन समय पाठ्यक्रम) में 2 आंकड़ा Inchiosa एट अल से अनुमति के साथ reproduced किया गया था. 1

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Hepzyme Siemens AG B4240 heparinase I
"MAA" cartridge Technidyne FTK-ACT modified by kaolin removal
aPTT cartridge Technidyne A104

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References

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