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Précipitation par affinité des actifs des Rho GEF l'aide d'un TPS-étiqueté Mutant Rho protéines (TPS-RhoA (G17A)) à partir de lysats cellulaires épithéliales
 
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Précipitation par affinité des actifs des Rho GEF l'aide d'un TPS-étiqueté Mutant Rho protéines (TPS-RhoA (G17A)) à partir de lysats cellulaires épithéliales

Article DOI: 10.3791/3932-v 11:29 min March 31st, 2012
March 31st, 2012

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La méthode présentée ici décrit un dosage de suivre l'activation de RhoA facteurs spécifiques de change GDP / GTP (GEF) dans les cellules cultivées en faisant usage d'une protéine mutante RhoA fusion GST qui a une forte affinité pour GEFs activés. GEF sont précipités à partir de lysats cellulaires, détectées par Western blot et quantifiée par densitométrie.

Tags

Biologie moléculaire Numéro 61 GTPases de la famille Rho petites facteur d'échange guanine-nucléotide (GEF) essai de précipitation d'affinité l'expression de protéines dans E. coli purification de la TPS-protéine marquée le dosage des microbilles
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