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Biology

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上皮細胞ライセートからのGSTタグ付き突然変異体のRhoタンパク質(GST-RhoAは(G17A))を使用してアクティブロー-GEFの親和性降水
 
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上皮細胞ライセートからのGSTタグ付き突然変異体のRhoタンパク質(GST-RhoAは(G17A))を使用してアクティブロー-GEFの親和性降水

Article DOI: 10.3791/3932-v 11:29 min March 31st, 2012
March 31st, 2012

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ここで紹介する方法が有効にGEFをするための高い親和性を有する変異体RhoAのGST融合タンパク質を利用することにより、培養細胞におけるRhoAの特定のGDP / GTP交換因子(GEF)の活性化に従うアッセイを説明しています。 GEFを、ウエスタンブロット法とデンシトメトリーにより定量によって検出された細胞溶解液から沈殿させる。

Tags

分子生物学、問題61、Rhoファミリー低分子量GTPase、グアニンヌクレオチド交換因子(GEFを)、アフィニティー沈殿アッセイ、大腸菌でのタンパク質の発現、GST-tagタンパク質、ビーズアッセイの精製
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