माउस लघु और लंबी अवधि के लोकोमोटर गतिविधि वीडियो ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर द्वारा विश्लेषण

Behavior

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Summary

हरकत गतिविधि (LMA) चूहों में व्यवहार का एक सरल और आसानी से प्रदर्शन माप है. वीडियो ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर (VTS) और LMA के युग्मन LMA विश्लेषण का मार्गदर्शन, लाइन पार विधि के साथ तुलना में, खासकर जब विशिष्टता और संवेदनशीलता के सुधार के लिए अनुमति देता है. इसके अतिरिक्त VTS माउस LMA के दीर्घकालिक नज़र रखने की अनुमति देता है.

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York, J. M., Blevins, N. A., McNeil, L. K., Freund, G. G. Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software. J. Vis. Exp. (76), e50252, doi:10.3791/50252 (2013).

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Abstract

हरकत गतिविधि (LMA) चूहों और अन्य कृन्तकों में व्यवहार का एक सरल और आसानी से प्रदर्शन माप है. वीडियो ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर (VTS) में सुधार यह पुस्तिका स्कोरिंग के साथ लाइन क्रॉसिंग विधि की तुलना में जब नाटकीय रूप विशिष्टता और संवेदनशीलता में सुधार, LMA परीक्षण करने के लिए मिलकर करने की अनुमति दी है. इसके अलावा, VTS उच्च throughput प्रयोग के लिए सक्षम बनाता है. खुले मैदान परीक्षण (ओ एफ टी) के लिए इस्तेमाल स्वचालित वीडियो पर नज़र रखने के लिए भी इसी तरह, LMA परीक्षण अद्वितीय है कि यह चूहों उनके घर पिंजरे में रहने के लिए अनुमति देता है और प्रकाश अंधेरे का सक्रिय चरण के दौरान उज्ज्वल प्रकाश के anxiogenic प्रोत्साहन का उपयोग नहीं करता चक्र. अब आंदोलन अध्ययन (बजे दिन) अक्सर इस्तेमाल ट्रांसमीटरों और बायोटेलीमेट्री प्रत्यारोपित किया है, जबकि परंपरागत रूप से, LMA, समय (मिनट) का संक्षिप्त अवधि के लिए इस्तेमाल किया गया है. वास्तविक समय पर नज़र रखने के विकल्प के साथ, लंबी, अल्पकालिक LMA परीक्षण की तरह, अब वीडियोग्राफी का उपयोग किया जा सकता है. लंबे समय तक LMA परीक्षण एक विशेष आवश्यकता, लेकिन भोजन और पानी (जो आमतौर पर पिंजरे शीर्ष पर तैनात है) वीडियोग्राफी बाधा डालती नहीं है कि इतनी आसानी से पिंजरे का निर्माण किया. महत्वपूर्ण बात है, वीडियोग्राफी और VTS मुश्किल या रेखा को पार करने और / या बायोटेलीमेट्री साथ मापने के लिए अव्यावहारिक हैं कि इस तरह के माउस आंदोलन के पथ के रूप में मानकों,, की मात्रा का ठहराव के लिए अनुमति देता है. संक्षेप में, VTS के लिए युग्मित LMA परीक्षण माउस आंदोलन का एक और अधिक पूर्ण विवरण और समय की एक विस्तारित अवधि में हरकत की जांच करने की क्षमता देता है.

Protocol

1. अल्पकालिक LMA सेट अप और प्रक्रिया

  1. अल्पकालिक LMA पिंजरे की स्थापना
    1. एक एकल रखे माउस के घर पिंजरे के भीतर अल्पकालिक LMA का परीक्षण करें. VTS पर निर्भर छवि विश्लेषण की सुविधा के लिए, माउस रंग (सफेद चूहों और काले चूहों के लिए हल्के रंग के बिस्तर के लिए यानी काले रंग का बिस्तर) के साथ उच्च विपरीत में बिस्तर का उपयोग करें.
    2. अल्पकालिक LMA परीक्षण के दौरान, 11 एक्स ¼ व्यास छेद में उचित वेंटीलेशन का समर्थन करने के साथ Plexiglas में स्पष्ट ¼ के साथ पिंजरों को कवर किया.
  2. अल्पकालिक LMA परीक्षण के कमरे
    1. वे कम से कम 24 घंटे 8 को आदत किया गया है, जिसमें एक स्वच्छ वातावरण में चूहों का परीक्षण करें.
    2. परीक्षण पर्यावरण रोशन करने के लिए, लाल बल्बों (<125 lumens) के साथ पौधा दबाना रोशनी का उपयोग करें. वीडियोग्राफी के लिए पहले, Plexiglas के पिंजरे में सबसे ऊपर से चमक या प्रतिबिंब को दूर करने के लिए रोशनी का कोण और स्थिति को समायोजित.
    3. कमरे में शोर निकालें या बचने70 डीबी से ऊपर. रुक - रुक कर पृष्ठभूमि शोर माउस परीक्षण के दौरान अपरिहार्य है अगर एक सफेद शोर जनरेटर का प्रयोग करें.
    4. पिंजरों पिंजरे बिस्तर को कसाई या समान रंग की प्रयोगशाला बेंच कागज के साथ परीक्षण के कमरे में रखा जाता है जिस पर परीक्षण सतह कवर, मामले में पिंजरे फर्श वीडियोग्राफी के दौरान सामने आ रहा है.
  3. अल्पकालिक LMA वीडियोग्राफी
    1. केंद्र और परीक्षण के कमरे में रिकॉर्डिंग के क्षेत्र के ऊपर स्मृति के कम से कम 120 GB के साथ एक छत पर चढ़कर रात दृष्टि सक्षम वीडियो कैमरा जगह. वीडियो कैमरा दृश्य फ्रेम (Noldus सूचना प्रौद्योगिकी (Leesburg VA) के द्वारा जैसे Ethovision एक्सटी 7 एक साथ वास्तविक समय में 8 चूहों को ट्रैक कर सकते हैं) के भीतर भी कई पिंजरों रखकर इस्तेमाल किया VTS के संकल्प की क्षमता अधिक नहीं है.
  4. अल्पकालिक LMA परीक्षण प्रक्रिया
    1. प्रकाश चक्र के अंधेरे / सक्रिय चरण के दौरान अल्पकालिक LMA का परीक्षण करें. प्रकाश चक्र के सापेक्ष समय वें है सुनिश्चित करेंसभी समूहों में एक ही ई, ​​LMA अंधेरे चक्र 1 के शुरुआती और बाद के समय के दौरान अधिक गतिविधि के साथ एक सांध्यकालीन पैटर्न, इस प्रकार है. कम से कम कर रहे हैं LMA में अस्थायी मतभेद के संभावित प्रभाव को सुनिश्चित करने के लिए रिकॉर्ड चूहों के प्रत्येक समूह में दोनों प्रयोगात्मक और नियंत्रण विषयों को शामिल करें.
    2. व्यक्तिगत रूप से घर और जलवायु के अनुकूल बनाना चूहों में कम से कम 24 LMA परीक्षण 8 के शुरू होने से पहले घंटे.
    3. सीधे कैमरे के तहत पिंजरे डिवाइडर और पिंजरों (व्यक्तिगत चूहों युक्त) रखें. इस माउस को देखते हुए (माउस बिल / घोंसले के शिकार सामग्री के साथ ही शामिल किया गया है जैसे) बाधा डालती है और VTS सटीकता के साथ हस्तक्षेप कर सकता है, पिंजरों से सभी नेस्टिंग / संवर्धन सामग्री निकालें. दर्ज की गई प्रत्येक पिंजरे पर एक स्पष्ट Plexiglas के ढक्कन रखें.
    4. एक साथ कई पिंजरों videoing जब, संकल्प चुना VTS के साथ संगत है सुनिश्चित करें. VTS विश्लेषण को कम करने के लिए, (यानी ऊपरी दाहिने हाथ कोने) प्रत्येक विभक्त भीतर हूबहू पिंजरों की स्थिति.
    5. रिकॉर्डिंग शुरू करें. कोई अतिरिक्त गैर वीडियो प्रलेखन के स्वतंत्र वीडियो की समुचित पहचान सुनिश्चित करने के लिए सभी प्रासंगिक प्रयोगात्मक जानकारी पहचानती है एक स्लेट के साथ एक वीडियो शुरू करो. LMA परीक्षण (5-10 मिनट) की अवधि को ट्रैक करने के लिए एक टाइमर या स्टॉपवॉच का प्रयोग करें. समय की जानकारी खो दिया है, वीडियो रिकॉर्ड से यह ठीक हो.
    6. अल्पकालिक LMA विधि का उपयोग दोहराया उपायों के लिए, चूहों गैर माप अंतराल के दौरान भोजन और पानी के लिए उपयोग की अनुमति देते हैं.
    7. परीक्षण के दौरान, चूहों की दृष्टि से इतनी के रूप में एक बाहरी दृश्य संकेत के रूप में कार्य करने के लिए नहीं किसी भी प्रयोगकर्ताओं बाहर रहते हैं.
    8. परीक्षण समाप्त हो गया है, वापसी / नेस्टिंग / संवर्धन सामग्री की जगह, चिंता की तरह व्यवहार 8 के विकास के लिए क्षमता को कम करने के लिए.
  5. अल्पकालिक LMA विश्लेषण
    1. परीक्षण सत्र से इस्तेमाल VTS साथ संगत एक अभिलेखीय मीडिया के लिए वीडियो रिकॉर्डिंग की दुकान. Ethovision एक्सटी 7, एक हार्ड ड्राइव डिस्क के लिए (HDD) के लिए किया जाता है.
    2. वास्तविक समय में वीडियो का विश्लेषण करने, उसके संबंधित मीडिया प्लेयर का उपयोग VTS में वीडियो फिर से खेलना. चित्रा 1 में, पता लगाने चर थे: 2 सेमी / सेक ट्रैकिंग शुरू होता है, 1.75 सेमी / सेक कि ट्रैकिंग.
    3. प्रारंभ में, ट्रैकिंग के लिए ब्याज की क्षेत्र (आरओआई) के रूप में पूरे पिंजरे मंजिल चुनें. ऐसे thigmotaxis के आकलन के रूप में उन्नत विश्लेषण के लिए, कई इंट्रा पिंजरे ROIs बना.
    4. उच्च throughput अध्ययन के लिए, व्यक्ति सभी पिंजरे मंजिल ROIs के साथ एक साथ वीडियो भीतर सभी पिंजरों का विश्लेषण.
    5. कुल दूरी, (सेमी) आंदोलन का वेग (सेमी / सेक) और आंदोलन की अवधि (सेकंड) ले जाया गणना करने के लिए VTS का प्रयोग करें. Ethovision एक्सटी 7 के लिए, भंडारण और अतिरिक्त विश्लेषण के लिए माइक्रोसॉफ्ट एक्सेल में उत्पन्न डेटा निर्यात.

2. लंबे समय तक LMA परीक्षण सेट अप और प्रक्रिया

  1. लंबे समय तक LMA परीक्षण पिंजरे निर्माण
    1. कम अंत दीवार में एक 5.5 सेमी व्यास छेद काटेंएक मानक माउस पिंजरे की. जस्ती इस्पात जाल में ¼ के साथ छेद के लिए एक कवर बनाएँ. भोजन करने के लिए माउस का उपयोग की अनुमति के उद्घाटन में कई साढ़े बनाने, जाल काट दिया. तेज किनारों को दूर करने के लिए किसी भी कटौती जाल पालिश.
    2. सीधे 5.5 सेमी खोलने को कवर करने के लिए इस्तेमाल जाल से जुड़े एक बाहरी हॉपर बनाने के लिए अतिरिक्त जाल का प्रयोग करें. छेद को कवर करने के लिए इस्तेमाल जाल को हॉपर कनेक्ट, और एल्यूमीनियम rivets का उपयोग कर पिंजरे में विधानसभा देते हैं.
    3. एक मानक 50 मिलीलीटर शंक्वाकार (कोर्निंग) और कोई ड्रिप sipper ट्यूब की प्रविष्टि (स्टेडियम शुद्ध सिस्टम) के लिए अनुमति देने के लिए ज्यादा drilled है कि एक 1 छेद रबर डाट (फिशर) से एक पानी की बोतल का निर्माण. वेल्क्रो टेप के साथ पिंजरे (3) के लिए पानी की बोतल को सुरक्षित और जाल कवर खोलने के माध्यम से sipper ट्यूब डालने.
    4. लंबी अवधि के LMA परीक्षण के दौरान, 11 एक्स ¼ व्यास छेद में उचित वेंटीलेशन का समर्थन करने के साथ Plexiglas में स्पष्ट ¼ के साथ पिंजरों को कवर किया.
  2. लंबे समय तक LMA परीक्षण के कमरे
    1. की स्थापना की लंबी अवधि LMA परीक्षण कमरे अल्पकालिक LMA के लिए समान है. प्रक्रिया के लिए खंड 1.2 देखें.
  3. लंबे समय तक LMA वीडियोग्राफी
    1. केंद्र और सीधे परीक्षण के कमरे में रिकॉर्डिंग के क्षेत्र के ऊपर एक पीसी से जुड़ा हुआ एक छत पर चढ़कर अवरक्त, सुरक्षा शैली, कैमरा जगह. केवल (जैसे Ethovision एक्सटी 7 एक साथ वास्तविक समय में 8 चूहों को ट्रैक कर सकते हैं) का उपयोग किया VTS की क्षमता के भीतर व्यक्तिगत पिंजरे संकल्प में एक बार के परिणाम में पिंजरों की संख्या रिकॉर्ड है.
  4. लंबे समय तक LMA परीक्षण प्रक्रिया
    1. प्रकाश चक्र के अंधेरे / सक्रिय चरण के दौरान लंबे समय तक LMA का परीक्षण करें. LMA अंधेरे चक्र 1 के शुरुआती और बाद के समय के दौरान अधिक गतिविधि के साथ एक सांध्यकालीन पैटर्न निम्नानुसार प्रकाश चक्र के सापेक्ष समय, सभी समूहों में एक ही है सुनिश्चित करें. दर्ज चूहों के प्रत्येक समूह में दोनों प्रयोगात्मक और नियंत्रण विषयों की क्षमता के न्यूनतम सुनिश्चित करने के लिए टेस्टLMA में अस्थायी मतभेदों का प्रभाव.
    2. व्यक्तिगत रूप से घर और कम से कम 24 घंटे के लिए संशोधित पिंजरों में परीक्षण चूहों acclimate.
    3. सीधे कैमरे के तहत पिंजरे डिवाइडर और पिंजरों (व्यक्तिगत चूहों युक्त) रखें. माउस की दृष्टि से एक अबाधित सुनिश्चित करने के लिए पिंजरों से सभी नेस्टिंग / संवर्धन सामग्री निकालें. घोंसले के शिकार सामग्री में burrowing माउस माउस को ट्रैक करने VTS की क्षमता के साथ हस्तक्षेप करेगा. दर्ज करने के लिए पिंजरों में से प्रत्येक पर एक स्पष्ट Plexiglas के ढक्कन रखें.
    4. एक बार में कई पिंजरों जब रिकॉर्डिंग, संकल्प चुना VTS के साथ संगत है सुनिश्चित करें. प्रत्येक विभक्त भीतर हूबहू VTS विश्लेषण, स्थिति पिंजरों को कम करने के लिए (यानी ऊपरी दाहिने हाथ कोने).
    5. लंबे समय तक LMA परीक्षण आम तौर पर वास्तविक समय में विश्लेषण किया है, और एक वीडियो रिकॉर्ड आमतौर पर नहीं बनाई गई है. एक वीडियो रिकॉर्ड एक माध्यमिक कैमरा का उपयोग करके या प्राथमिक कैमरा से जुड़ा हुआ एक डीवीडी रिकॉर्डर के माध्यम से दर्ज किया जा सकता है. व्यक्ति की विस्तृत रिकॉर्ड रखने के लिए सुनिश्चित करेंमाउस और समूह जानकारी.
    6. वास्तविक समय विश्लेषण के लिए VTS सेट करें. पूरे पिंजरे मंजिल पर नज़र रखने के लिए रॉय घेरना चाहिए. दर्ज की जा रही सभी पिंजरों के लिए ROIs के सेट करें. कुल दूरी, (सेमी) आंदोलन का वेग (सेमी / सेक) और आंदोलन की अवधि (सेकंड) ले जाया गणना करने के लिए VTS का प्रयोग करें. चित्रा 2 में, पता लगाने चर थे: 2 सेमी / सेक ट्रैकिंग शुरू होता है, 1.75 सेमी / सेक कि ट्रैकिंग.
    7. माउस दीर्घकालिक LMA की रिकॉर्डिंग शुरू. विश्लेषण कंप्यूटर के साथ जुड़े घड़ी के माध्यम से लंबे समय तक LMA परीक्षण की अवधि की निगरानी करें.
    8. परीक्षण के दौरान, चूहों की दृष्टि से इतनी के रूप में एक बाहरी दृश्य संकेत के रूप में कार्य करने के लिए नहीं सभी प्रयोगकर्ताओं के बाहर रहते हैं.
    9. परीक्षण समाप्त हो गया है, वापसी / नेस्टिंग / संवर्धन सामग्री की जगह, चिंता की तरह व्यवहार 8 के विकास के लिए क्षमता को कम करने के लिए.
  5. लंबे समय तक LMA विश्लेषण
    1. लंबे समय तक LMA विश्लेषण एक वीडियो रिकॉर्ड की पीढ़ी के बिना वास्तविक समय में होता है. Ethovision एक्सटी 7 का उपयोग अगर, भंडारण और विश्लेषण के लिए Microsoft Excel में डेटा निर्यात करें.
    2. लंबी अवधि के LMA के लिए एक वीडियो रिकॉर्ड उत्पन्न करने के लिए, एक माध्यमिक कैमरा का उपयोग करें. माध्यमिक कैमरा संभावित लंबा रिकॉर्डिंग (ओं) को स्टोर करने के लिए पर्याप्त पर्याप्त भंडारण क्षमता है सुनिश्चित करें.

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Representative Results

एक दोहराया उपायों से परिणामों का एक उदाहरण है, अल्पकालिक LMA परीक्षण चित्रा 1 में दिखाया गया है. यह आंकड़ा lipopolysaccharide (LPS) प्रशासन के बाद, चूहों तेजी परिवेश पर्यावरण caging (एईसी) 6 में रखे चूहों की तुलना में अल्पकालिक हरकत गतिविधि की वसूली व्यक्तिगत Caging संवातित (IVC) में रखे कि दिखाता है. हरकत गतिविधि की प्रारंभिक नुकसान LPS के इंजेक्शन समूहों के बीच समान है, बेसल LMA के लिए वसूली IVC रखे चूहों में अधिक तेजी से है के रूप में आंदोलन का वेग (चित्रा 1 बी) और आंदोलन (चित्रा -1 सी) की अवधि थी. इस अल्पकालिक LMA परीक्षण के साथ एक दोहराया उपायों मॉडल के उपयोग के विभिन्न समूहों के बीच समय के साथ अवलोकन और वसूली की तुलना की अनुमति देता है.

एक लंबे समय तक LMA परीक्षण उदाहरण चित्रा 2 में दिखाया गया है. यह आंकड़ा 2 अलग लेकिन लगातार दिन भर में दैनिक परीक्षण के 12 घंटे के दौरान माउस हरकत को दर्शाता है. कोई महत्वपूर्ण diffe दूरी में rence आंदोलन (चित्रा 2b) या आंदोलन (चित्रा 2c) की अवधि के वेग इन 2 दिनों (अप्रकाशित पायलट डेटा) के बीच पाया गया, (चित्रा 2) ले जाया गया. एक छोटा सा नमूना आकार के कारण त्रुटि का एक महत्वपूर्ण राशि है, जबकि इन परिणामों दीर्घकालीन हरकत के अध्ययन के लिए संभावित प्रत्यारोपित की आवश्यकता के बिना निष्पादित करने की अनुमति देता है, संगत और repeatable डेटा लगातार दिन के कोर्स पर उत्पन्न किया जा सकता है कि उदाहरण देकर स्पष्ट करना ट्रांसमीटरों और बायोटेलीमेट्री. Underpowered हालांकि, दूरी में 2 दिन का अंतर बनाम 1 दिन आंदोलन की अवधि (चित्रा 2c) में और नहीं वेग में एक अंतर (चित्रा 2 बी) के लिए एक विषमता के कारण प्रतीत होता है (चित्रा 2) ले जाया गया.

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चित्रा 1. एईसी या IVC के आवास से या तो LPS प्रेरित परिवेश पर्यावरण caging (एईसी) में रखे चूहों में हरकत गतिविधि के नुकसान और व्यक्तिगत Caging संवातित (IVC). समूह रखे चूहों (पिंजरे प्रति 4) व्यक्तिगत रूप से अल्पकालिक LMA के शुरू होने से पहले रखे थे परीक्षण. चूहे LPS (100 ग्राम / किग्रा) के साथ इंजेक्शन और (एक) दूरी (ख) आंदोलन (सेमी / सेक) और आंदोलन (ओं) (ग) की अवधि का वेग संकेत समय पर मूल्यांकन किया गया, (सेमी) ले जाया गया. परिणाम प्रतिशत आधारभूत (पूर्व LPS) LMA के रूप में व्यक्त कर रहे हैं, ± SEM n = 6 मतलब है. दूरी मुख्य प्रभाव चले गए: समय (एफ (3,77) = 13.08, पी <0.01), आवास के प्रकार (एफ (1,77) = 3.69, पी = 0.06); समय एक्स आवास प्रकार बातचीत (एफ (3,77) = 3.31, पी = 0.02). आंदोलन का वेग मुख्य प्रभाव: समय (एफ (3,77) = 13.08, पी <0.01), आवास के प्रकार (एफ (1,77) = 3.69, पी = 0.06); समय एक्स hous आईएनजी प्रकार बातचीत (एफ (3,77) = 3.31, पी = 0.0243). आंदोलन की अवधि मुख्य प्रभाव: समय (एफ (3,77) = 12.92, पी <0.01), आवास के प्रकार (एफ (1,77) = 0.69, पी = 0.41); समय एक्स आवास प्रकार बातचीत (एफ (3,77 ) = 3.26, पी = 0.03). आम सुपरस्क्रिप्ट पत्र के बिना व्यक्ति समय अंक के भीतर बार्स (पी <0.05) काफी अलग हैं. मस्तिष्क बिहेव: # से पुनर्प्रकाशित. और Immun., 26 (6), न्यूयॉर्क, जेएम, एट अल., व्यक्तिगत रूप से हवादार पिंजरों Elsevier से अनुमति के साथ, hematologically और behaviorally जीर्ण कम ग्रेड हाइपोक्सिया प्रभावित चूहों, 951-958, कॉपीराइट 2012 कारण. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .

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चित्रा 2. माउस दीर्घकालिक LMA. समूह रखे चूहों (पिंजरे प्रति 4) व्यक्तिगत रूप से लंबे समय तक LMA परीक्षण के शुरू होने से पहले रखे थे. चूहे LMA 12 घंटा (1 दिन) के लिए वास्तविक समय में विश्लेषण किया गया था, और 1 दिन बाद ही चूहों दिन (2) में. परिणाम (क) कुल दूरी, (सेमी x 1000) ले जाया गया है के रूप में व्यक्त किया जाता है (ख) आंदोलन (सेमी / सेक) और (ग) के आंदोलन की अवधि (सेकंड x 1000) का मतलब ± SEM n = 4 (कोई महत्वपूर्ण अंतर का वेग 0 और 24 घंटे) के बीच (अप्रकाशित पायलट डेटा).

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Discussion

चूहों में बीमारी के लक्षण सुस्ती, सामाजिक और पर्यावरणीय परिवेश में ब्याज की हानि, बीमारी और आहार 2-3 शामिल हैं. चूहों और अन्य कृन्तकों में, LMA प्रतिरक्षा सक्रियण 4-5 के बाद बीमारी का मूल्यांकन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इसके अतिरिक्त, दीर्घकालिक LMA दैनिक व्यवहार या नींद / जगा पैटर्न में गड़बड़ी में उपचार प्रेरित परिवर्तन का विश्लेषण की अनुमति, एक 24 घंटे (या अधिक) की अवधि में आंदोलन को ट्रैक करने की क्षमता प्रदान करता है. यह गैर इनवेसिव, आसानी से एक दोहराया उपाय या निरंतर साधन के रूप में प्रदर्शन और न्यूनतम confounding है है के बाद से LMA बीमारी के लिए अन्य परीक्षण पर कई लाभ प्रदान करता है. कई पिंजरों दर्ज / एक साथ विश्लेषण किया जा सकता है क्योंकि अन्य तरीकों और प्रणालियों (जैसे Phenotyper, Intellecage, photobeam सिस्टम), VTS साथ LMA विश्लेषण के साथ तुलना में अपेक्षाकृत सस्ती है. यहाँ उपयोग नहीं है, पालन और दीवार चढ़ाई की तरह LMA गतिविधियों के अतिरिक्त विश्लेषण के उपयोग के माध्यम से प्राप्त किया जा सकता हैएक पक्ष पर लगे कैमरे. VTS के साथ, LMA अनुकूलनीय उच्च throughput है. VTS भी अवधि, दूरी, गति और पथ 5 के निर्धारण सहित आंदोलन की एक अधिक संपूर्ण परीक्षा के लिए अनुमति देता है. यह चिंता व्यवहार underlies के बाद पथ ट्रैकिंग विशेष रूप से शक्तिशाली है.

इसके कई फायदे के बावजूद, VTS साथ LMA के लिए एक संभावित ख़तरा निहित अप करने के लिए अलगाव / चूहों की एकल आवास (और संभवतः से अधिक) 24 घंटे है. सामाजिक अलगाव एक तनाव प्रतिक्रिया और आक्रामकता जब लंबे समय तक 11 पैदा कर सकते हैं. जांचकर्ता इस सीमा के बारे में पता होना चाहिए और उचित प्रयोगात्मक नियंत्रण और परिणाम व्याख्या सुनिश्चित करने के लिए कदम उठाने चाहिए.

सभी व्यवहार परीक्षण के दौरान, माउस LMA, पूर्व प्रयोगात्मक विचार करने के लिए करीब ध्यान सहित अनुरूप परिणाम प्राप्त करने के लिए महत्वपूर्ण है. परीक्षण कमरे और परीक्षण पिंजरे वातावरण के अभ्यस्त आवश्यक है. न्यायपालिका शोर, प्रकाश और ध्वनि खासकर interfe हैंवे 7-8 एक डराना प्रतिक्रिया और / या चिंता व्यवहार उत्तेजित हो सकता है के रूप में अंगूठी. आदर्श रूप में, LMA परीक्षण हानिकारक odors को (विशेष रूप से प्राकृतिक शिकारी odors को) से मुक्त तापमान और आर्द्रता नियंत्रित वातावरण में हो जाना चाहिए. समय (दिन) की विस्तारित अवधि के लिए पशुओं के आवास के लिए अनुमति देता है कि एक निश्चित व्यवहार परीक्षण सूट वांछनीय है. दोहराया परीक्षण उम्र बढ़ने या पुराने रोगों के अध्ययन में बहुत उपयोगी है क्योंकि जानवरों की देखभाल की सुविधा के लिए चूहों वापसी करने की क्षमता फायदेमंद है.

लगभग सभी तरह के परीक्षण माउस आंदोलन की आवश्यकता है, क्योंकि अंत में, LMA परीक्षण लगभग सभी अन्य व्यवहार परीक्षण के साथ संयोजन के रूप में किया जाना चाहिए. अनुभूति के लिए LMA प्रभावों का परीक्षण (बार्न्स भूलभुलैया, वाई भूलभुलैया, टी भूलभुलैया, उपन्यास वस्तु मान्यता), व्यवहार (शून्य भूलभुलैया, खुले मैदान), खुशी की मांग (पहिया चल रहा है), अवसादग्रस्तता की तरह व्यवहार (सूक्रोज / चीनी का वरीयता चिंता की तरह परेशान ) और बीमारी (सामाजिक वापसी और burrowing) 8-9. लघु और एल परीक्षण करकेकाफी बाद में व्यवहार परीक्षण को प्रभावित नहीं करते हुए ong अवधि LMA, माउस उप उपभेदों, जीनोटाइप और रोग / हस्तक्षेप मॉडलों के बीच 10 प्ररूपी मतभेद तेजी से मूल्यांकन किया जा सकता है. महत्वपूर्ण आंदोलन मतभेद की पहचान कर रहे हैं इसके अलावा, उचित उपाय वे प्रेरित निहित घालमेल द्वारा सीमित कर रहे हैं कि और अधिक जटिल व्यवहार परीक्षण के लागू होने से पहले लिया जा सकता है.

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Disclosures

लेखक ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा.

Acknowledgments

समर्थन: इस शोध के राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (DK064862, NS058525 और GGF को AA019357) द्वारा समर्थित किया गया था.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Video camera Sony HDR-XR500V Other, similar video cameras may work as well. The file storage format (codec/container) must be compatible with the VTS used. It is recommended when initially establishing a VTS to choose the VTS first and work with the vendor in choosing an appropriate camera, especially with respects to file format and video resolution compatibility.
Opaque cage dividers Custom fabricated based on specific cage dimensions. To facilitate image analysis, dividers should be of a similar color to the cage bedding. Structurally fixed dividers are preferrable because they speed setup between multi-mice experiments, such as those involving repeated measurements. Sturdy transportable cage dividers can be constructed of 1/2 inch opaque plastic and joined via a series of cross laps.
Light or Dark bedding (opposite of mouse coat color) Available from several laboratory animal supply distributors, depending on location.
Clear Plexiglas cage tops Custom fabricated based on cage dimensions.
Automated video tracking software (EthoVision XT 7) Noldus Information Technology A variety of VTS manufacturers exist, use of other software may suffice.
PC Dell Inc. See VTS software providers minimum PC .requirements
White noise generator Dohm DS A variety of white noise generators are available, depending on need.
Brooder clamp lights with red light bulbs Several sizes and styles available. Number required depends on room size/lighting needs. Do not exceed 125 lumens in the testing room.
Lab bench or butcher paper Paper should match or be very similar in color to the cage bedding.

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References

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