Helsingfors Rat Mikrodäck Aneurysm Model

1Neurosurgery Research Group, University of Helsinki, Helsinki, Finland
Published 10/12/2014
0 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





By clicking "Submit", you agree to our policies.

 

Summary

Cite this Article

Copy Citation

Marbacher, S., Marjamaa, J., Abdelhameed, E., Hernesniemi, J., Niemelä, M., Frösen, J. The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model. J. Vis. Exp. (92), e51071, doi:10.3791/51071 (2014).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Experimentella saccular aneurysm modeller är nödvändiga för att testa nya alternativ kirurgisk och endovaskulär behandling och enheter innan de införs i klinisk praxis. Dessutom är experimentella modeller som behövs för att belysa den komplexa aneurysm biologi leder till bristning av saccular aneurysm.

Flera olika typer av experimentella modeller för saccular aneurysm har etablerats i olika arter. Många av dem kräver dock speciella färdigheter, dyr utrustning eller speciella miljöer, vilket begränsar deras utbredd användning. En enkel, robust och billig experimentell modell behövs som ett standardiserat verktyg som kan användas på ett standardiserat sätt i olika institutioner.

Den mikro råtta abdominal aortic aneurysm sidovägg modellen kombinerar möjligheten att studera både nya strategier endovaskulär behandling och den molekylära grunden för aneurysm biologi på ett standardiserat och billigtsätt. Standardiserade transplantat med hjälp av form, storlek och geometri skördas från en donator råtta fallande aorta och sedan transplanteras till en syngen mottagare råtta. De aneurysm är sys ände mot sida med kontinuerlig eller avbruten 9-0 nylonsuturer till infrarenala bukaortan.

Vi presenterar steg-för-steg instruktioner om förfaranden, information om nödvändig utrustning, och diskutera viktiga anatomiska och kirurgiska detaljer för framgångsrika mikro skapa en abdominal aortic aneurysm sidovägg hos råtta.

Introduction

Bristning av ett saccular cerebral artär aneurysm orsakar livshotande blödning som leder till stroke, bestående neurologiska skador eller dödsfall. Brott kan förhindras antingen genom mikrokirurgisk klippning eller endovaskulär aneurysm ocklusion. En medicinsk behandling för att förhindra aneurysm tillväxt och ruptur har ännu inte fastställts.

Experimentella modeller för saccular aneurysm behövs för att studera biologi arteriella aneurysm och för testning av nya terapeutiska apparater och strategier. För dessa ändamål har flera olika modeller i olika arter utvecklats och publicerats 1. Större aneurysm modeller i grisar, hundar och kaniner används företrädesvis för att testa endovaskulära innovationer i komplexa aneurysm arkitektur 1,2. Murina aneurysm modeller, å andra sidan, göra det möjligt att testa forskningsfrågor inom genmodifierade arter 3,4 och underlätta klargörande av aneurysm biologi på cellulär och molekylärnivå långt bättre än större arter 1. Även endovaskulär trans carotid och transhöft enhet utbyggnad är begränsad till större råttor (> 400-500 g) och stentar mindre än 2,0 mm och 1,5 mm i diameter 5,6, kan stentar även placeras genom direkt insättning i abdominal aortic segmentet hysande de experimentella aneurysmer. Tidigare arbete med hjälp av råttmikro abdominal aortic aneurysm sidoväggsmodell visat sin genomförbarhet inom test nya emboli enheter och dess användning i att studera den molekylära grunden för aneurysm biologi 3,7.

Många av de närvarande publicerade experimentella saccular aneurysm modeller kräver dyr utrustning, speciella miljöer (t.ex. sterila operationssalar med genomlysnings kapacitet), interventionell radiologi kompetens, eller användning av dyra arter. Dessa krav begränsar omfattande användning av dessa modeller, och leda till användning av olika modeller i olika laboratorier, vilka mÅkes jämförelser av data och meta-analys är svårt, om inte omöjligt. En enkel, robust och billig experimentell modell behövs som ett standardiserat verktyg som kan användas på ett standardiserat sätt i olika labb för att få jämförbara resultat från olika institutioner. För detta ändamål har vi skapat råttaortasidovägg saccular arteriella aneurysm modell.

Syftet med denna rapport är att presentera steg-för-steg instruktioner om förfaranden, information om nödvändig utrustning, samt att diskutera viktiga anatomiska och kirurgiska egenskaper för framgångsrika mikro skapa abdominal aortic aneurysm sidoväggs på råtta.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

OBS: Man Wistarråttor (genomsnittlig kroppsvikt: 356 ± 44 g, 10-14 veckor gamla) inhystes i djurrummet vid 22-24 ° C och tolv timmar ljus / mörker-cykel med fri tillgång till pellets kost, regelbunden kranvatten och även fått human vård i enlighet med institutionens riktlinjer. Experimenten granskades och godkändes av kommittén för djurskydd vid universitetet i Helsingfors, Finland.

OBSERVERA: I följande demonstration vår kirurgisk metod är som följer: Bedöva råtta viktanpassade subkutan injektion av medetomidin-hydroklorid (0,5 mg / kg) och intraperitoneal injektion av ketamin-hydroklorid (50 mg / kg). Test för bristen på en tå-nypa reflex för att bekräfta att råttan är helt sövd. Applicera ögonsalva, klipp operationsområdet, och rengör huden med desinfektionsmedel, till exempel klorhexidin, antingen alkohol eller vatten. Tvätta händerna, sätta på skyddskläder, en huvudlocket och ansiktetmask, och sterila operationshandskar. Ha en kirurgisk assistent stöd upprätthålla aseptiska kirurgi förhållanden och att dokumentera kirurgiska egenskaper (enligt tabell 1). Övervaka djup anestesi var 15 min under operationen genom att följa andningsfrekvens, hjärtfrekvens och reaktion på skadlig stimulering (tå nypa test). Subkutan injektion av buprenorfin (0,03 mg / kg) gavs för postoperativ analgesi och upprepas om så är nödvändigt varje 12 tim.

1 Maskinvara, Förbrukning och positionering

  1. Håll smådjurskirurgi rummet tyst, aseptisk och hålla rumstemperaturen vid 23 +/- 3 ° C. För att utföra det experimentella aneurysm operation följande minimal utrustning är nödvändig:
    1. Använd en bordsskiva operationsmikroskop perfekt utrustad med en assistent omfattning och digital mikroskopkamera. Använd ickeporös återanvändbara verksamhetsytan och rengöringsbart instrument yta för att skydda laboratoriebänk.
    2. Använd följande standard kirurgiska instrument: Kirurgiska saxar, vävnad pincett, mjukdelsspridare eller självhållande upprullningsdon och två Mosquito kirurgiska klämmor.
    3. Använd en grundläggande mikroinstrumentuppsättning som innehåller: Curved mikronål hållare, en böjd och två raka microforceps, och en rak eller böjd microscissor.
    4. Håll mikroinstrument i en njure skål fylld med steril koksaltlösning för att hålla instrumentet kladdar och ren under operation. Njuren skålen är vadderad med gummimatta eller en kirurgisk handske för att förhindra skada på spetsarna av de mikroinstrument. Se till att alla leveranser är sterila och proceduren utförs med aseptisk teknik enligt gällande rekommendationer för överlevnad kirurgi på försöksdjur
    5. Dessutom använder en kärlklämma applikator och tre atraumatiska tillfälliga kärlklämmor. Det är viktigt att klämmorna som används har en låg stängnings makt för att förhindra skador på den mycket tunna väggen i rått aorta. Förbereder även en linjal med halvmillimeterskala barer, en liten färgad gummidyna, och en kort trubbig nål.
    6. Placera råttorna i ryggläge, immobilisera både fram och baktassarna med kirurgtejp utan att tillämpa sträckning eller komprimering på huden, och böja ryggen med en tjock markör eller cautery penna genom att placera den under bråte regionen av ryggen. Det är viktigt att få så mycket ländrygg lordos som möjligt för att förbättra retroperitoneal exponering och tillgång till infrarenala aorta som underlättar mikro anastomos. Denna positionering rekommenderas för bukaorta aneurysm skapande men inte nödvändigt för thorax transplantat skörd.

2. Graft Skörd

  1. Under narkos, öppna brösthålan (start transplantat ischemi tid). Applicera en skadlig tå nypa för att bekräfta att råttan inte svarar innan du fortsätter med följande steg. Skär genom midventral bukväggen, identifiera membranet precis ovanför levern, och skär av bindväv vid botten av membranet för att tillåta åtkomst till bröstkorgen. Med stora saxar, trubbiga sidan nedåt, skär genom revbenen bara en centimeter till höger och vänster i bröstkorgen mittlinjen och öppna upp brösthålan. Lungorna mobiliseras till den högra sidan av hjärtat. Offra råttorna genom överdosering med intrakardiell injektion av ketamin hydrochloride.Pulmonary bålen, vänster vena subclavia, vänster hjärn vena cava, och azygous ven störa skörden av proximala aorta.
  2. Stjärt de framträdande nerver finns det en bra inkörsport för att starta dissektion av fallande bröstaortan använder mikro-sax och microforceps.
  3. Trace bröstaortan back från dorsala väggen i bröstkorgen uppåt till aortabågen genom försiktig trubbig retraktion och dissektion med Mosquito kirurgiska klämman.
  4. Clamp och sedan klippa venerna med en sax. Behåll klämmorna på venerna och använda som ett upprullningsdon att exponera det underliggande aortabågen.
  5. Placera ett icke absorber 6-0 siden ligatur strax ovanför den första interkostala artären lämnar aorta.
  6. Skär nedåtgående aorta strax under vänstra subclavia och sedan under ligaturen. Trimning kan utföras i syfte att få en vinkelrät standardiserad aneurysm geometri, eller om det behövs, för att få en specifik vinkel mellan axeln hos aneurysmen och aorta. Mät transplantatet i dess bredd och längd.
    OBS: Skördat transplantat kan antingen direkt transplanteras till mottagarråttor eller bearbetas ytterligare för att uppnå decellularisering av transplantatet väggen. Decellulariserad transplantat kan förvaras vid -4 grader Celsius fram till vidare implantation vid ett senare tillfälle (Figur 1). The decellularisering av aneurysmet vägg har visats predisponera aneurysmen för att förstora 11.

3. Graft decellularisering

  1. Freeze donatortransplantat i fosfatbuffrad saltlösning vid -4 ° C.
  2. Nästa dag, tina transplantaten, sköljdes med renat och avjoniserat vatten vid rumstemperatur, och inkubera under 10 h vid 37 ° C i 0,1% natriumdodecylsulfat.
  3. Slutligen tvätta natriumdodecylsulfat-behandlade grafter tre gånger med försiktig omrörning, refreeze i fosfatbuffrad saltlösning, och hålls vid -4 ° C fram till användning.

4. Aneurysm Creation

  1. Dissekering av bukaortan
    1. När djuret har nedsövd, klippa pälsen från operationsområdet och rengör huden med desinfektionsmedel. Test för bristen på en tå-nypa svar innan huden snitt. Starta snittet 1cm proximal till könsorganen in midventral läge (starta driften tid). Försiktigt separera huden från de underliggande musklerna. Avsluta dissektion 1-2 centimeter under bröstbenet.
    2. Försiktigt men bestämt dra upp de underliggande magmusklerna att undvika skador på de underliggande organen. Förläng längsgående snitt längs linea alba uppåt till xiphoid processen och slutar i kaudal riktning vid nivå av blåsan.
    3. Tryck försiktigt på blåsan för att tömma det för att underlätta tillgången till retroperitonealrummet.
    4. Flytta tunntarmen och den framstående blindtarmen till höger eller vänster. Identifiera tjocktarm nämligen den nedåtgående kolon på vänster botten av bukhålan.
    5. Skär ligamentet i mellan tunntarmen och den nedåtgående kolon i kranial riktning för att tillåta bredare exponering av den dorsala kroppsväggen. Placera en självhållande upprullningsdon att hålla tarmarna isär.
    6. Den idealiska platsen för end-to-side aneurysm anastomos is på nivån mellan njur och iliolumbar ådror. Den bukaorta ligger retroperitoneal inbäddade i fettvävnaden. Under dissektion särskilt uppmärksamma de parade nästan genomskinliga urinledare och testikel fartyg.
    7. Om det behövs ytterligare indragning av tarmarna, använda större gasbinda swappar. Ländryggen lordos induceras vid positionering genom att placera en diatermi penna eller liknande under den nedre baksidan av råttan, minskar avsevärt behovet av tarm dementi.
    8. Den ventrala ytan av den dorsala kroppsväggen är täckt med en tunn parietal peritoneum. När detta väl är öppnad, visualisera aorta just nedanför. Under noggrann skarpa och dissektion av bukaorta från närliggande stora vener tag bara adventitia att undvika skador på kärlväggen.
    9. Infrequently små lumbala artärerna uppkomma som segmentell kärlet från den dorsala ytan av den abdominala aortan och störa framställningen. Ligation och kapning av fartyget needed att undvika retrograd sipprar under aneurysm suturering. Användning av böjda mikro pincett kan underlätta ligatur placering i djupet.
  2. End-to-side anastomos
    1. Placera en färgad gummidyna under bukaorta och upholster den med en liten gaskompress. Avlägsna lös bindväv och adventitia på nivån för den planerade anastomos webbplatsen.
    2. Kläm bukaorta distalt om anastomosen först, sedan proximal (start aortakläm tid). Detta garanterar en fast fyllning av kärlet och underlättar efterföljande arteriotomi.
    3. Utför arteriotomin med antingen raka eller böjda mikro-sax. En mikro-pincett håller upp en mycket liten del av kärlväggen för att skära ut en elliptisk form.
    4. Spola artären ordentligt med koksaltlösning i båda riktningarna med hjälp av en trubbig spets nål.
    5. Placera de första två suturer i denna ände-till-sida anastomos på den proximala och distala änden av arteriotomin (start anastomos tid). Undvik att hålla i kärlväggen med mikro pincett när det är möjligt. Säkerställ att varje sutur placeras genom alla skikten av kärlväggen.
    6. Utför suturering antingen som kontinuerliga eller avbrutna suturer. Om avbruten suturering väljs sedan placera baksidan nio o`clock sutur först. Efterföljande suturer kan vara åtskilda med början intill den allra första sutur. Ta tag i adventitia noggrant. Undvik klämma / gripande av intima.
    7. När den bakre väggen är klar, kontrollera endoluminal delen av anastomos för felplacerade suturer. Utför samma procedurer i samma ordning på framsidan. Se till att den första av totalt tre knutar per sutur är fast men inte för hårt.
  3. Hemostas och Stängning
    1. Efter slutet på sidan anastomos är klar (slutet anastomos tid), skölj området med koksaltlösning och avlägsna den distala klämman först att möjliggöra återgång (slutaortakläm och slut transplantat ischemi timig).
    2. Om uppenbar blödning uppstår från backflöde en extra söm kan behövas (starttid för hemostas). Vid mindre sipprar, uppnå hemostas med lätt tryck över blödningsställe med en liten bit av en gasbinda pinne.
    3. Ta den proximala kärlklämman, skölj anastomos platsen en gång, och klipp av de återstående ändarna av ligatur vid aneurysm kupolen.
    4. Bekräfta öppenhet av aneurysmet genom observation av volymökning av aneurysm under topp arteriell pulsvågen. Bedöm distala buken pulsåder öppenhet genom direkt "mjölknings test".
    5. Ta bort plastarket och den lilla gaskompress under. Den pulserande blod virvel i den skapade aneurysm syns tydligt.
    6. Täck sutur linjer runt anastomosen med små bitar av fettvävnad eller Spongostan för ytterligare hemostas om små sipprar fortfarande finns kvar (sluttid för hemostas).
    7. Ta bort de mjukdels spridare och gasbinda kompresser.Placera de små tarmarna, blindtarmen och fettmassan tillbaka i sitt rätta läge.
    8. Stäng mittlinjen magmusklerna med hjälp av 5-0, 4-0 eller 3-0 resorberbara eller icke absorberbara suturer följt av huden sårtillslutning med kontinuerlig sutur teknik med 3-0 resorberbar polyfilament sutur (slut drifttid). Obs: I tolereras vår erfarenhet råttor resorberbara suturer huden bättre än icke-absorberbara monofilamentsuturer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

En pilotserie omfattade 14 råttor. Därefter totalt 84 djur som drivs i enlighet med den presenterade protokollet för flera forskningsprojekt mellan mars och september 2012. Extra 29 djur tjänade som donatorer för arteriella saccular transplantat. De återstående experiment utfördes med användning av förbehandlade transplantat skördats och lagrats från tidigare experiment med användning av råttor av samma kön, stam, vikt och ålder.

Kroppsvikt, total drifttid, aortakläm tid, tid för anastomos skapande, tid att hemostas efter anastomos skapande, transplantat ischemi tid och aneurysmmått vid tidpunkten för skapelsen (aneurysm bredd och längd) registrerades och extraheras från skrivna formulär med fallstudier . Alla egenskaper sammanfattas och visualiseras i Tabell 1 och Figur 1.

Med undantag av ett djur som genomgick en andra operation på grund av trombos av abdoPol aorta distalt om anastomosen platsen fanns det ingen periprocedural dödlighet eller sjuklighet. Genomsnittlig drifttid var mindre än 52 min (52 ± 12 min). Hos djur med transplantation av syngena aneurysm (n = 21) menar transplantat ischemi tiden var 29 ± 7 min. Sammantaget genomsnittliga aortaklämtiden var 25 ± 7 min. Aneurysm mått visade sig vara konstant med låg avvikelse på storlek (medelbredd 2,5 ± 0,2 mm och menar längd 3,8 ± 0,2 mm).

De insamlade uppgifterna gick beskrivande analys och visualisering med hjälp av statistisk programvara. Värden uttrycks som medelvärde ± standardavvikelse (SD) och 95% konfidensintervall (Cl).

Figur 1
Figur 1:. Icke decellulariserad eller decellulariserad Grafts Obehandlade infödda givartransplantat från bröstaortan omedelbart åter implanteras i mottagande råttor (1). Grafts varadecellulariserade behandlas med natriumdodekylsulfat (SDS) och lagrades vid -4 grad Celsius tills re-implantation (2). Den histologiska panelen visar längdsnitt genom en obehandlad (vänster) och decellulariseras (höger) transplantatväggen. Hematoxylin-eosin-färgning.

Figur 2
Figur 2: Kirurgiska egenskaper. Diagrammen visualisera fördelningen av enskilda datavärden (små svarta prickar), uppgifter medelvärde (fet lång bar) och standardavvikelse (felstaplar). Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Karaktäristik Medelvärde ± SD 95% KI övre - undre
Genomsnittlig kroppsvikt (gram) 363 47 350-373
Genomsnittlig drifttid (minuter) 50 11 48-53
Mean aortakläm tid (minuter) 25 7 23-27
Genomsnittlig anastomos (minuter) 18 6 16-19
Medeltid för hemostas (minuter) 2 2 2 - 3
Genomsnittlig transplantat ischemi (minuter) 29 7 26 - 32
Medel aneurysm bredd (mm) 2,5 0,2 2,4-2,5
Genomsnittlig aneurysm längd (millimeter) 3,7 0,5 3,5-3,8

Tabell 1: Kirurgiska egenskaper. SD = standardavvikelse; KI = konfidensintervall

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Framsteg i vår förståelse av den komplexa biologi saccular cerebral artär aneurysm beror på analys av epidemiologiska och kliniska data, kompletterade med laboratoriestudier på patientprover och experimentellt arbete i djurmodeller 3,12,13.

Små djur som råttan är till sin natur förknippat med lägre kostnader för experiment och bostäder, samt minskat behov av specialutrustning. En genomsnittlig total driftstid på mindre än 60 minuter för mikro skapa en sidovägg aneurysm hos råttor är mycket kortare än den tid som används för att skapa mer komplexa mikro venös påsen arteriell bifurkation aneurysm på kaniner och hundar 2,14,15. Fördelarna med låga kostnader och snabbare metoder för aneurysm skapande kan underlätta ledningen av studier med större antal experiment och efterföljande ökad statistisk styrka. Dessutom har nuvarande musmodeller genomförts framgångsrikt svara researc h frågor som behöver mer sofistikerade laboratoriemetodik, inklusive transgena djur 3,4. Vid användning av möss för skapande av sidoväggs aneurysm, att man behöver hålla i minnet att de nödvändiga avbruten 11-0 suturer kräver ytterligare mikro färdigheter. Prestanda för den presenterade aneurysm modellen i möss är också förknippad med högre dödlighet (30%, främst till följd av komplikationer i vätskebalans och anestesi och mindre diameter (0,5-1 mm) av musen aorta) 3.

Grundläggande principer för rått aneurysm modellen kan bemästras på kort tid. En introduktionskurs i gnagare mikrokirurgi rekommenderas för de forskare oerfarna utföra dissektioner och sutur tekniker enligt ett operationsmikroskop. Markerad viktiga steg i den presenterade protokollet kommer ytterligare förenkla förfarandet. Särskild försiktighet bör iakttas vid dissektion av bukaorta från närliggande stora ådror.

ntent "> Den lilla perifera kärldiameter en medelstor råtta gör trans carotid och transhöft endovaskulär enhet driftsättning svår 5,6. Däremot kan enheter även placeras genom direkt abdominal aortic insättning eller direkt placering i den experimentella aneurysm före utgången till-plats anastomos 7,16. Volumetriska förändringar i hals rester och aneurysm geometri kan vara uppföljning med seriella och icke-invasiv högfrekvent ultraljud, mikro-CT, eller hög upplösning magnetisk resonansangiografi 16. Tidigare experiment visade hög total öppna kärl av 92,5% vid en medianuppföljning på sex veckor efter skapelsen utan peri- eller inom procedur antikoagulation och antiaggregation 3,7,16. Med undantag för ett enda fall betydande tillväxt eller dilatation av de experimentella aneurysm observerades inte och ingen av dem brast 3.

Men om de skördade transplantat decellulariserad de aneurysm demonstrate en heterogena mönster av trombos, rekanalise, tillväxt, och eventuell bristning 11. Växande aneurysm i den senare studien visade markant adventitial fibros och inflammation, komplett vägg störningar och ökad neutrofil ackumulering i oorganiserade intraluminal tromb. På detta sätt modellen gör det möjligt att studera aneurysm tillväxt och bristning och kan potentiellt användas för att bedöma biologiska svar som induceras av embolisering enheter i växande och brottsbenägna aneurysm. Ingen av de tillgängliga aneurysm modeller som kan emboliseras helst representera en människa saccular cerebral artär aneurysm eller reproducera den exakta patobiologi bakom aneurysm bildning eller bristning.

Det är fortfarande en fråga för debatt i vilken utsträckning valet av transplantat (venös eller arteriell påse) och val av angioarchitecture (sidovägg eller bifurkation konstruktion) påverkar översättningen av resultat i klinisk praxis. Visst olika modeller är optimala för olikaändamål, och kan optimeras till en mycket hög nivå på vissa institutioner. Den presenterade modellen kommer inte att göra andra modeller föråldrade. Det kommer att förbli nödvändig för en utredare att välja från ett brett spektrum av olika tekniska modeller och djur det som passar bäst de experimentella mål, praktiska överväganden och laboratoriemiljö.

Dock bör vissa experiment helst utföras i en lika standardiserad modell i olika institutioner och labb, för att möjliggöra en bättre jämförelse av uppgifter och enheter eller behandlingar. Hittills finns det inga riktlinjer för standardiserade tester av utrustning för transluminal kirurgi innan klinisk tillämpning, och djurmodeller inte utnyttjas 1. Standardiserade modeller kommer att få betydelse när multicenter randomiserade prekliniska studier framträder även på detta forskningsområde.

Mikro aneurysm skapande möjliggör standardisering av transplantat ursprung, volym-till-öppning-förhållande, och moderfartygatt aneurysm långa axelvinkel. Den presenterade Tekniken syftar till att skapa standardiserade aneurysm med minimal variation i aneurysm dimension, plats och förhållande till moderartären. Denna höga grad av standardisering och de relativt låga kostnaderna gör modellen ett bra verktyg för att testa embolisering material och anordningar som sedan testas i andra mer komplicerade och dyrare modeller.

Sammanfattningsvis presenterade mikrosidoväggen rått aneurysm modellen är en snabb, prisvärd och konsekvent metod för att skapa experimentella aneurysm som är standardiserade genom storlek, form och geometrisk konfiguration av aneurysm i förhållande till moderartären.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna har inga ekonomiska eller kommersiellt intresse i något av de läkemedel, material, eller utrustning som används.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Medetomidine Any genericon
Ketamin Any genericon
Buprenorphine Any genericon
Phosphate buffered saline
Sodium dodecyl sulfate (0.1%)
3-0 resorbable suture Ethicon Inc., USA VCP824G
5-0 non absorbable suture Ethicon Inc., USA 8618G
6-0 non absorbable silk suture B. Braun, Germany C0761060
9-0 nylon micro suture B. Braun, Germany G1118471
Spongostan Ethicon Inc., USA MS0002
Operation microscope Leica , Germany M651
Digital microscope camera Sony, Japan SSC-DC58AP
Standard surgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.4
Microsurgical instruments B. Braun, Germany Multiple See protocol 1.5
Vascular clip applicator B. Braun, Germany FT495T
Temporary vascular clamps B. Braun, Germany FT250T
Graph Pad Prism statistical software  GraphPad Software, San Diego, California, USA V 6.02 for Windows

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Bouzeghrane, F., et al. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. AJNR Am J Neuroradiol. 31, 418-423 (2010).
  2. Marbacher, S., et al. Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques. AJNR. American journal of neuroradiology. 32, 772-777 (2011).
  3. Frosen, J., et al. Contribution of mural and bone marrow-derived neointimal cells to thrombus organization and wall remodeling in a microsurgical murine saccular aneurysm model. Neurosurgery. 58, 936-944 (2006).
  4. Marjamaa, J., et al. Mice with a deletion in the first intron of the Col1a1 gene develop dissection and rupture of aorta in the absence of aneurysms: high-resolution magnetic resonance imaging. at 4.7 T, of the aorta and cerebral arteries. Magn Reson Med. 55, 592-597 (2006).
  5. Oyamada, S., et al. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. The Journal of surgical research. 166-191 (2011).
  6. Lowe, H. C., James, B., Khachigian, L. M. A novel model of in-stent restenosis: rat aortic stenting. Heart. 91, 393-395 (2005).
  7. Marjamaa, J., et al. Occlusion of neck remnant in experimental rat aneurysms after treatment with platinum- or polyglycolic-polylactic acid-coated coils. Surg Neurol. 71, 458-465 (2009).
  8. with the support of the NC3Rs. Aseptic Technique in Rodent Surgery. Newcastle University. cited 2014 Oct 3] Available from: http://www.procedureswithcare.org.uk/aseptic-technique-in-rodent-surgery (2014).
  9. Bernal, J., et al. Guidelines for rodent survival surgery. Journal of investigative surgery : the official journal of the Academy of Surgical Research. 22, 445-451 (2009).
  10. Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. Principles of rodent surgery for the new. (2011).
  11. Marbacher, S., et al. Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model. Stroke. 45, 248-254 (2014).
  12. Frosen, J., et al. Remodeling of saccular cerebral artery aneurysm wall is associated with rupture: histological analysis of 24 unruptured and 42 ruptured cases. Stroke. 35, 2287-2293 (2004).
  13. Frosen, J., et al. Saccular intracranial aneurysm: pathology and mechanisms. Acta neuropathologica. 123-773 (2012).
  14. Ysuda, R., Strother, C. M., Aagaard-Kienitz, B., Pulfer, K., Consigny, D. A large and giant bifurcation aneurysm model in canines: proof of feasibility. AJNR Am J Neuroradiol. 33, 507-512 (2012).
  15. Sherif, C., et al. Microsurgical venous pouch arterial-bifurcation aneurysms in the rabbit model: technical aspects. Journal of visualized experiments : JoVE. (2011).
  16. Marjamaa, J., et al. High-resolution TOF MR angiography at 4.7 Tesla for volumetric and morphologic evaluation of coiled aneurysm neck remnants in a rat model. Acta Radiol. 52, 340-348 (2011).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Video Stats