Iskiasnerven infiltration Model af neuropatisk smerte i mus

Medicine
 

Summary

Neuropatisk smerte er en følge af en læsion eller sygdom, der påvirker somatosensoriske system. Den "manchet model" for neuropatisk smerte i mus består af implantation af en polyethylen-manchet omkring de vigtigste gren af ​​iskiasnerven. Mekanisk allodyni testes ved von Frey filamenter.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Yalcin, I., Megat, S., Barthas, F., Waltisperger, E., Kremer, M., Salvat, E., Barrot, M. The Sciatic Nerve Cuffing Model of Neuropathic Pain in Mice. J. Vis. Exp. (89), e51608, doi:10.3791/51608 (2014).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Neuropatisk smerte opstår som følge af en læsion eller en sygdom, der påvirker somatosensoriske system. Dette syndrom resultater fra utilpasset ændringer i sårede sensoriske neuroner og langs hele nociceptive pathway inden for det centrale nervesystem. Det er normalt kronisk og udfordrende at behandle. For at studere neuropatisk smerte og dens behandlinger har forskellige modeller er udviklet i gnavere. Disse modeller stammer fra kendte ætiologier, og dermed gengive perifere nerveskader, centrale skader, og metaboliske-, infektionssygdomme-eller kemoterapi-relaterede neuropatier. Murine modeller af perifer nerveskade ofte målrette iskiasnerven, der er let at få adgang til og tillader nociceptive test på bagpoten. Disse modeller er afhængige af en kompression og / eller en sektion. Her er den detaljerede procedure for "manchet model" for neuropatisk smerte i mus kirurgi beskrevet. I denne model, en manchet af PE-20 polyethylenslange af standardiserede længde (2 mm) er ensidigt implanted omkring de vigtigste gren af ​​iskiasnerven. Den inducerer en langvarig mekanisk allodyni, dvs., En nociceptive reaktion på en normalt ikke-nociceptive stimulus, der kan evalueres ved hjælp af von Frey filamenter. Udover de detaljerede kirurgi og testprocedurer, er interessen for denne model for studiet af neuropatisk smerte mekanisme for studiet af neuropatisk smerte sensoriske og anxiodepressive aspekter, og til studiet af neuropatisk smerte behandlinger også drøftet.

Introduction

Neuropatisk smerte er normalt kronisk og opstår som følge af en læsion eller en sygdom, der påvirker somatosensoriske system. Utilpasset ændringer i sårede sensoriske neuroner og langs hele nociceptive pathway i det centrale nervesystem deltager i dette komplekse syndrom. Forskellige modeller er blevet udviklet i gnavere til undersøgelse af neuropatisk smerte og dens behandlinger 1-3.

Baseret på kendte etiologies, modeller af neuropatisk smerte sigte på at efterligne polyneuropati observeret i diabetes, skader på perifere nerver, de centrale skader, trigeminus neuralgi, de neuropatier træk til kemoterapi, det postherpetisk neuralgi, osv. forskellige modeller af perifer nerveskade i gnavere fokus på iskiasnerven. Disse modeller afhænger af en kompression og / eller en del af denne nerve. Faktisk iskiasnerven giver relativt let operation og giver mulighed for tests baseret på potetilbagetrækning reflekser. Den models på kronisk nerve kompression omfatter for eksempel: den kronisk konstriktion (CCI) 4,5, iskiasnerven infiltration 6-9, delvis iskiasnerven ligatur (PSL) 10, spinalnerven ligatur (SNL) 11, eller den fælles peronealnerve ligatur 12. Modeller benævnt "skånet nerveskade" (SNI) er også meget udbredt. De består af en stram ligatur og axotomi af to ud af de tre terminale grene af iskiasnerven, mens den tredje gren er intakt 13-15. De forskellige modeller af neuropatisk smerte, der er rettet mod iskiasnerven, resultere i en kronisk mekanisk allodyni (en nociceptive respons på et normalt ikke-nociceptive stimulus) på den forurettede bagpote.

Her er den detaljerede procedure for "manchet model" for neuropatisk smerte i mus kirurgi beskrevet. Den består i implantation af en polyethylen-manchet omkring de vigtigste gren af iskiasnerven 6-9. The anvendelse af von Frey-filamenter er også beskrevet. Disse filamenter tillader at vurdere den mekaniske allodyni som er en langvarig nociceptive symptom til stede i denne model.

Protocol

Protokoller er blevet godkendt af "Comité d'ETHIQUE en matière d'eksperimentering animale de Strasbourg" (CREMEAS).

1.. Baseline Måling af Paw Tilbagetrækning Tærskler

  1. Lad mus for at vænne til dyrefaciliteternes i mindst 10 dage til 2 uger før indledning af testprocedurer.
  2. Vænne musene til von Frey test opsætning og til von Frey procedure, der er beskrevet i afsnit 4.
  3. Før operationen, evaluere potetilbagetrækning tærskler mekaniske med von Frey filamenter som beskrevet i afsnit 4.3. Bemærk: Gentag proceduren på forskellige dage, indtil der opnås mindst tre stabile hinanden følgende værdier for tærskelværdier potetilbagetrækning.
  4. Tildel mus til de forskellige eksperimentelle grupper, således at disse grupper ikke i første omgang er forskellige for tærskelværdier tilbagetrækning pote.

2.. Surgery Procedure for Cuff Implantatipå

  1. Dyret nøjagtighed. Bemærk: Mus kropsvægt bør være over 20 g for manchetten indsættelse nedenfor beskrevne procedure.
  2. Bedøve dyr med en intraperitoneal injektion af 4 ml / kg af en blanding af ketamin (17 mg / ml) og xylazin (2,5 mg / ml) i 0,9% NaCl, der indeholder omkring 45 min af anæstesi.
  3. Kontroller fraværet af paw reflekser ved at knibe en bagpote med pincet og kontrollere fraværet af øjet reflekser til at sørge for, at dyret er fuldt bedøvet.
  4. Barbere højre ben fra knæet til hoften ved hjælp af en elektrisk barbermaskine.
  5. Anvend beskyttende øje flydende gel til øjnene med en vatpind.
  6. Placer dyret på sin venstre side, og placer højre bagben på en lille pude og opretholde den rette bagben til puden med tape.
  7. Desinficer kirurgi felt med klorhexidin og 70% ethanol ved hjælp af gaze eller vatpind.
  8. Find lårbenet ved hjælp af pegefingeren og foretage enindsnit på ca 0,5 cm, parallelt til lårbenet og ca 1,5 mm anterior til lårbenet.
  9. Adskil musklerne tæt på lårbenet med to autoklaverede pinde. Bemærkninger: Aldrig skære musklen. Normalt muskel lag adskilles nemt uden blødning og iskiasnerven er så synlige. I tilfælde af blødning, skal du bruge en steril vatpind til at absorbere blodet.
  10. Sæt to autoklaveres pinde under iskiasnerven at eksponere sin største filial, og fugter nerve med en steril fysiologisk opløsning (0,9% NaCl).
  11. Hold forberedte steril 2 mm sektion af split PE-20 polyethylenslange (manchet), 0,38 mm ID / 1,09 mm OD, med hjælp fra en spids stål stok og en bulldog klemme.
    1. Sæt den spidse stål stick i manchetten, som let vil åbne den.
    2. Brug af manchetten sideåbning indsætte bulldog ved den ene ende af manchetten og parallelt med manchetten. Drej bulldog (180 °), så at det vil holde manchetten afside, der er modsat den laterale åbning. Luk bulldog, og fjern den spidse stål pind. Bemærk: Den rotation er gjort for at tillade at holde-på manchetten i en optimeret position for indsættelsen, er bulldog klemme også bidrage til at opretholde manchetten delvist åbent. Modellen og størrelsen af ​​bulldog klemme er afgørende for dette trin af proceduren.
  12. Har en anden eksperimentator holde de to pinde under nerve og forsigtigt adskille pinde til at lette adgangen til en sektion af iskiasnerven, der er omkring 4 mm lang.
  13. Sæt 2 mm manchet omkring den centrale gren af ​​iskiasnerven, begyndende ved at indsætte den del af manchetten, der er distalt for bulldog omkring den del af nerven, der er proximalt til hoften.
  14. Luk manchetten forsigtigt ved at lægge pres på sine to distale sider med tang, uden at klemme eller ændre form af røret. Drej manchetten for at sikre, at det er lukket korrekt.
  15. Sy barberet hudlag with kirurgiske knuder.
  16. Anbring musen på sin venstre side i et rent hjem bur. Hold det under varmelampe indtil musen er vågen.
  17. Tilføj ekstra vand og placere nogle chow direkte i hjemmet bur.

3.. Surgery Procedure for Sham Controls

  1. Anvende den samme kirurgi procedure som beskrevet ovenfor fra trin 2.1 til trin 2.9, så følg med trin 2,15-2,17. For snydekontroller, udelade trin 2,10-2,14, som kun vedrører manchetten indsættelse.

4.. Von Frey Testing

  1. Placer mus i klare individuelle kasser (7 cm x 9 cm x 7 cm) med huller, på en forhøjet perforeret plade af glat rustfrit stål (1 mx 50 cm, 5 mm cirkel perforeringer med 2,5 mm mellem perforeringstyper grænser). Bemærk: Op til 12 mus kan samtidigt testet på denne opsætning. Opererede dyr kan testes dagen efter operationen. Dog er 3 dages opsving anbefales at mindske den post-kirurgi overfølsomhed observeret isnydekontroller.
  2. At dyrene kan vænne i 15 min før testning.
  3. Påfør von Frey-filamenter til fodsålsoverfladen af ​​hver bagpote i en serie af stigende kræfter. Bemærkninger: von Frey-filamenter er plast hårene af kalibrerede diametre. De er 5 cm lang og er fastsat på håndholdte applikatorer. Hastigheden af endeløse program, kan graden af bøjning og varigheden af anvendelsen påvirke tærskelværdier, der er opnået med denne test 3. Med den nuværende procedure i mus, de filamenter, der er den mest anvendte er 0,16, 0,4, 0,6, 1, 1,4, 2, 4, 6, 8 og 10 g.
    1. Anvende den valgte endeløse at den plantare overflade af den venstre pote, indtil filamentet bare bøjer. Gentag proceduren 3-5 gange i træk, og derefter gøre det samme til højre pote. Når tråden er blevet testet på begge poter, teste næste dyr. Noter: Undgå pote laterale grænser, som kan være mere følsomme. Den forventede reaktion er en potetilbagetrækning, pludselig at blinke eller pote slikker. Betragt reaktionen som positiv, hvis mindst tre forventede svar observeres ud af fem forsøg. En given pote altid testet tre gange, men den fjerde og femte forsøg er kun ske, hvis 1 eller 2 svar (r) var (var) observeret i de første tre prøver. I C57BL/6J-mus, starte præoperativ test med 1,4 g glødetråd. Efter operationen, start af forsøgene med 0,4 g glødetråd. Hvis en positiv reaktion er observeret med den først testet glødetråd, teste en glødetråd af lavere styrke (i stedet for større) ved trin 4.3.2.
    2. Anvend samme glødetråd til de næste dyr, i henhold til proceduren 4.3.1. Når alle dyr testes, starte igen på det første dyr med den næste filamenter af større kraft. Gentag proceduren, indtil alle mus giver et positivt svar. Bemærkninger: Test hvert dyr, indtil to på hinanden følgende filamenter give et positivt svar. Overvej gram værdien af ​​den lavere glødetråd, der gav en positiv respons som pote Vidhdrawal tærskel for dette dyr.

Representative Results

Dataene er udtrykt som middelværdi ± SEM. Statistiske analyser blev udført ved hjælp af multi-faktor variansanalyse (ANOVA) eller uparrede t-test i overensstemmelse med den eksperimentelle design. For disse analyser blev Sham og Cuff kirurgi grupper såvel som saltvand vs medicinsk behandling betragtes som mellem-gruppe faktorer. Når det er relevant, blev gentagne målinger analyser bruges til Tidsforløbet data. De post-hoc-sammenligninger blev udført under anvendelse af Duncan-testen. Statistisk signifikans blev behandlet på p <0,05.

Når du bruger de procedurer, der er beskrevet ovenfor, manchet implantation resulterer i en ipsilateral allodyni som illustreret i figur 1.. Når musen er vant til testproceduren, værdierne for potetilbagetrækning tærsklerne i von Frey testen forbliver stabile over tid og er ikke påvirkes af den kirurgiske procedure per se, som illustreret i Sham dyr. Det bør dog værebemærkes, at en forbigående post-kirurgisk allodyni normalt kan observeres i Sham mus. Når en sådan allodyni er til stede, svaret potetilbagetrækning vender tilbage til baseline efter et par dage efter operationen. I Cuff mus ipsilaterale allodyni er allerede til stede på den første dage efter operationen og er opretholdt i mere end 2 måneder (se 9 og figur 1; F8, 344 = 29,5, p <0,001). Manchetten-induceret allodyni forbliver ipsilaterale i C57BL/6J-mus når det måles ved von Frey testen som beskrevet ovenfor, men under andre forhold en tilstedeværelse af allodyni på den kontralaterale pote også kan observeres 8. De absolutte værdier for baseline er normalt mellem 4 og 6 g i C57BL/6J-mus, men test-protokollen kan påvirke disse værdier.

Tricykliske antidepressiva er blandt kliniske first-line behandling for neuropatisk smerte. I denne model det tricykliske antidepressive lægemiddel nortriptylin (5 mg / kg, intraperitonealt, to gange om dagen) relieves den neuropatisk allodyni efter omkring 2 ugers behandling, som illustreret i figur 2 (F7, 91 = 15,3, p <0,001, post-hoc: (CuffNor = Sham)> CuffSal på p <0,001 om dage 29-34). Ved denne dosis er observeret nogen akut smertestillende virkning af antidepressive 16,17. At efterligne varig smertelindring, der er til stede i patienter, der tager sådanne lægemidler, kan musene testet før morgen lægemiddelindgivelse snarere end efter. En sådan procedure giver mulighed for vurdering af en langvarig effekt primet af tidligere dages behandling. I dette tilfælde kræver det 1 til 2 ugers behandling for at observere en varig lindring af neuropatisk allodyni. Når behandlingen afbrydes, er et tilbagefald sædvanligvis observeret inden for 3 til 4 dage 18. Udover nogle antidepressiva, gabapentinoids er de andre først-choice behandlinger for neuropatisk smerte. Gabapentin har en akut og forbigående smertestillende handling i denne model 16, men det viser også en forsinket og lon g varig antiallodynisk handling, når teste dyr hver dag før lægemiddelindgivelse (figur 3, p <0,001). Denne handling er hurtigere end med antidepressiv medicin.

Figur 1
Potetilbagetrækning tærskler figur 1. Mekanisk i manchetten model af neuropatisk smerte hos mus. Voksen mand C57BL/6J-mus blev vænnes til von Frey proceduren, indtil en stabil basislinie er opnået (baseline er repræsenteret på punkt 0 på grafen). Begge poter blev testet. Manchetten mus viser ipsilateral mekanisk allodyni som fremgår af de potetilbagetrækning tærskler sænkes (n = 10 per gruppe).

tp_upload/51608/51608fig2.jpg "/>
Figur 2. Forsinket antiallodynisk virkning af et tricyklisk antidepressivt middel. Efter to uger efter kirurgi modtog mus intraperitoneal behandling to gange dagligt (morgen og aften) med enten 0,9% NaCI eller 5 mg / kg nortriptylin-hydrochlorid (n = 5 eller 6 pr gruppe ). Von Frey testen blev udført før morgen behandling. Med denne fremgangsmåde er der observeret en forsinket antiallodynisk virkning af nortriptylin, som kræver omkring 12 dages behandling.

Figur 3
Figur 3. Antiallodynisk virkning af et gabapentinoid. Efter tre uger efter kirurgi modtog mus intraperitoneal behandling to gange dagligt (morgen og aften) med enten 0,9% NaCI eller 10 mg / kg gabapentin (n = 5 pr gruppe). Von Frey testen blev gjort før morgen behandleling. Med denne fremgangsmåde, er observeret en forsinket og varig antiallodynisk handling gabapentin. Data er præsenteret før påbegyndelse af behandlinger, og på den 6. dag af behandlinger.

Discussion

Den "manchet" model blev oprindeligt udviklet i rotter for at opnå en standardiseret og reproducerbar kronisk konstriktion skade med implantation af flere manchetter omkring iskiasnerven 6. Det blev derefter modificeret til at implantere en enkelt manchet 7,8, selv om nogle forskergrupper stadig bruge flere manchet indsættelse 19-22. Det blev derefter tilpasset til mus 9,23, som åbnede mulighed for at bruge transgene dyr. Manchetten er normalt 2 mm lang, men andre længder er også blevet anvendt i rotter 22. Den polyethylentubing afhænger af arten: PE-20 i mus 9 og PE-60 24,25 eller PE-90 7,8,26,27 i rotter.

Den mekaniske allodyni måles med von Frey hår. I denne test kan de absolutte værdier for grænseværdier potetilbagetrækning afhænge af overfladen, hvor dyret står 28 eller på varigheden af endeløse bøjning 3, men disse faktorer ikkepåvirke påvisning af neuropatisk allodyni.

Den "manchet"-modellen er af interesse for studiet af neuropatisk smerte mekanismer. Det blev brugt til at studere morfologiske ændringer i myelinerede og umyelinerede fibre 6,29 og funktionelle ændringer i sensoriske neuroner, primære afferenter og spinale neuroner 19,21,22,30-35. Det tilladt demonstration at glial aktivering og en central skift i neuronal anion gradient deltage i ændringer i aktiviteten og i svarene fra spinale nociceptive neuroner og i neuropatisk allodyni 24,36-38. Indflydelsen af glutamatreceptorer 7,39-41, af opioidreceptorer 16,42-45 og nikotinreceptorer 46 blev også undersøgt i denne model.

En anden interesse i modellen er dens reaktion på de nuværende behandlinger af neuropatisk smerte, dvs., Gabapentinoids og antidepressiva. Svarende til kliniske observationer: gabapentinoids vises både enn akut kortvarig smertestillende indsats på høj dosis og en forsinket vedvarende lindre handling, der er observeret efter et par dages behandling, tricykliske antidepressiva og selektive serotonin og noradrenalin reuptake hæmmere har nogen akut smertestillende effekt ved relevant dosis, men de viser en forsinket vedvarende lindre handling, der kræver 1 til 2 ugers behandling, samt den selektive serotonin reuptake inhibitor fluoxetin er ineffektiv 16. Modellen er således hensigtsmæssigt at undersøge den molekylære mekanisme bag disse behandlinger 16-18,44,45,47, der kan afsløre nye terapeutiske mål for at teste patienter 48-51.

Endelig modellen tillader også undersøgelse af anxiodepressive konsekvenser af neuropatisk smerte. Klinisk disse konsekvenser påvirke omkring en tredjedel af neuropatisk smerte patienter, men er præklinisk mindre studerede end de sensoriske aspekter af smerte. I denne model, en tidsafhængig udvikling af angst-lignende og depressive-lignende fænotyper er til stede 52 og den tilhørende mekanisme kan således blive behandlet.

De standardiserede manchetter og procedurer i denne musemodel af neuropatisk smerte resultere i lav interindividuel variation til mekanisk allodyni. Muligheden for at anvende genmodificerede dyr 17,18,44-47,52, langvarige allodyni, reaktionen på klinisk anvendte behandlinger, og den tidsafhængige udvikling af anxiodepressive symptomer gør denne model egnet til undersøgelse af de forskellige aspekter og konsekvenser af neuropatisk smerte og dens behandlinger, som allerede har bragt værdifulde oplysninger til dette forskningsfelt.

Disclosures

Forfatterne erklærer, at de ikke har nogen konkurrerende finansielle interesser.

Acknowledgments

Dette arbejde blev støttet af Centre National de la Recherche Scientifique (kontrakt UPR3212), University of Strasbourg, og med en NARSAD Young Investigator Grant fra Brain & Behavior Research Foundation (til IY). Publikationer understøttes af Neurex netværket (Program Interreg IV Øvre Rhin).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
PE-20 polyethylene tubing Harvard Apparatus PY2-59-8323 Splitted before surgery
Ketamine Centravet IMA004
Xylazine HCl Sigma X1251 Freshly prepared before surgery
Ocry-gel Centravet
Pliers FST 11003-12 52.5 mm straight
Bulldog clamp FST p130 18038-45
Perforated plate CTTM
von Frey filaments Bioseb NC-12775

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Colleoni, M., Sacerdote, P. Murine models of human neuropathic pain. Biochim. Biophys. Acta. 1802, 924-933 (2010).
  2. Jaggi, A. S., Jain, V., Singh, N. Animal models of neuropathic pain. Fundam. Clin. Pharmacol. 25, 1-28 (2011).
  3. Barrot, M. Tests and models of nociception and pain in rodents. Neuroscience. 211, 39-50 (2012).
  4. Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33, 87-107 (1988).
  5. Austin, P. J., Wu, A., Moalem-Taylor, G. Chronic constriction of the sciatic nerve and pain hypersensitivity testing in rats. J. Vis. Exp. (61), (2012).
  6. Mosconi, T., Kruger, L. Fixed-diameter polyethylene cuffs applied to the rat sciatic nerve induce a painful neuropathy: ultrastructural morphometric analysis of axonal alterations. Pain. 64, 37-57 (1996).
  7. Fisher, K., Fundytus, M. E., Cahill, C. M., Coderre, T. J. Intrathecal administration of the mGluR compound, (S)-4CPG, attenuates hyperalgesia and allodynia associated with sciatic nerve constriction injury in rats. Pain. 77, (1998).
  8. Pitcher, G. M., Ritchie, J., Henry, J. L. Nerve constriction in the rat: model of neuropathic, surgical and central. 83, 37-46 (1999).
  9. Benbouzid, M., et al. Sciatic nerve cuffing in mice: a model of sustained neuropathic pain. Eur. J. Pain. 12, 591-599 (2008).
  10. Seltzer, Z., Dubner, R., Shir, Y. A novel behavioral model of neuropathic pain disorders produced in rats by partial sciatic nerve injury. Pain. 43, 205-218 (1990).
  11. Kim, S. H., Chung, J. M. An experimental model for peripheral neuropathy produced by segmental spinal nerve ligation in the rat. Pain. 50, 355-363 (1992).
  12. Vadakkan, K. I., Jia, Y. H., Zhuo, M. A behavioral model of neuropathic pain induced by ligation of the common peroneal nerve in mice. J. Pain. 6, 747-756 (2005).
  13. Decosterd, I., Woolf, C. J. Spared nerve injury: an animal model of persistent peripheral neuropathic pain. Pain. 87, 149-158 (2000).
  14. Shields, S. D., Eckert, W. A., Basbaum, A. I. Spared nerve injury model of neuropathic pain in the mouse: a behavioral and anatomic. 4, 465-470 (2003).
  15. Richner, M., Bjerrum, O. J., Nykjaer, A., Vaegter, C. B. The spared nerve injury (SNI) model of induced mechanical allodynia in mice. J. Vis. Exp. (54), (2011).
  16. Benbouzid, M., et al. Chronic, but not acute, tricyclic antidepressant treatment alleviates neuropathic allodynia after sciatic nerve cuffing in mice. Eur. J. Pain. 12, 1008-1017 (2008).
  17. Yalcin, I., et al. Β2-adrenoceptors are essential for desipramine, venlafaxine or reboxetine action in neuropathic pain. Neurobiol. Dis. 33, 386-394 (2009).
  18. Yalcin, I., et al. Β2-adrenoceptors are critical for antidepressant treatment of neuropathic pain. Ann. Neurol. 65, 218-225 (2009).
  19. Balasubramanyan, S., Stemkowski, P. L., Stebbing, M. J., Smith, P. A. Sciatic chronic constriction injury produces cell-type-specific changes in the electrophysiological properties of rat substantia gelatinosa neurons. J. Neurophysiol. 96, 579-590 (2006).
  20. Ikeda, T., et al. Effects of intrathecal administration of newer antidepressants on mechanical allodynia in rat models of neuropathic pain. Neurosci. Res. 63, 42-46 (2009).
  21. Thakor, D. K., et al. Increased peripheral nerve excitability and local NaV1.8 mRNA up-regulation in painful neuropathy. Mol. Pain. 5, 14 (2009).
  22. Zhu, Y. F., Wu, Q., Henry, J. L. Changes in functional properties of A-type but not C-type sensory neurons in vivo in a rat model of peripheral neuropathy. J. Pain Res. 5, 175-192 (2012).
  23. Cheng, H. Y., et al. DREAM is a critical transcriptional repressor for pain modulation. Cell. 108, 31-43 (2002).
  24. Zhang, J., De Koninck, Y. Spatial and temporal relationship between monocyte chemoattractant protein-1 expression and spinal glial activation following peripheral nerve injury. J. Neurochem. 97, 772-783 (2006).
  25. Beggs, S., Liu, X. J., Kwan, C., Salter, M. W. Peripheral nerve injury and TRPV1-expressing primary afferent C-fibers cause opening of the blood-brain. Mol. Pain. 6, 74 (2010).
  26. Vachon, P., Massé, R., Gibbs, B. F. Substance P and neurotensin are up-regulated in the lumbar spinal cord of animals with neuropathic. 68, 86-92 (2004).
  27. Aouad, M., Petit-Demoulière, N., Goumon, Y., Poisbeau, P. Etifoxine stimulates allopregnanolone synthesis in the spinal cord to produce analgesia in experimental mononeuropathy. Eur. J. Pain. 18, 258-268 (2014).
  28. Pitcher, G. M., Ritchie, J., Henry, J. L. Paw withdrawal threshold in the von Frey hair test is influenced by the surface on which the rat stands. J. Neuroci. Methods. 87, 185-193 (1999).
  29. Beaudry, F., Girard, C., Vachon, P. Early dexamethasone treatment after implantation of a sciatic-nerve cuff decreases the concentration of substance P in the lumbar spinal cord of rats with neuropathic. Can. J. Vet. Res. 71, 90-97 (2007).
  30. Pitcher, G. M., Henry, J. L. Cellular mechanisms of hyperalgesia and spontaneous pain in a spinalized rat model of peripheral neuropathy: changes in myelinated afferent inputs implicated. Eur. J. Neurosci. 12, 2006-2020 (2000).
  31. Pitcher, G. M., Henry, J. L. Nociceptive response to innocuous mechanical stimulation is mediated via myelinated afferents and NK-1 receptor activation in a rat model of neuropathic pain. Exp. Neurol. 186, 173-197 (2004).
  32. Pitcher, G. M., Henry, J. L. Governing role of primary afferent drive in increased excitation of spinal nociceptive neurons in a model of sciatic neuropathy. Exp. Neurol. 214, 219-228 (2008).
  33. Lu, V. S., et al. Brain-derived neurotrophic factor drives the changes in excitatory synaptic transmission in the rat superficial dorsal horn that follow sciatic nerve injury. J. Physiol. 587, 1013-1032 (2009).
  34. Ruangsri, S., Lin, A., Mulpuri, Y., Lee, K., Spigelman, I., Nishimura, I. Relationship of axonal voltage-gated sodium channel 1.8 (NaV1.8) mRNA accumulation to sciatic nerve injury-induced painful neuropathy in rats. J. Biol. Chem. 286, 39836-39847 (2011).
  35. Zhu, Y. F., Henry, J. L. Excitability of AΒ sensory neurons is altered in an animal model of peripheral neuropathy. BMC Neurosci. 13, 15 (2012).
  36. Coull, J. A., et al. Trans-synaptic shift in anion gradient in spinal lamina I neurons as a mechanism of neuropathic pain. Nature. 424, 938-942 (2003).
  37. Coull, J. A., et al. BDNF from microglia causes the shift in neuronal anion gradient underlying neuropathic pain. Nature. 438, 1017-1021 (2005).
  38. Keller, A. F., Beggs, S., Salter, M. W., De Koninck, Y. Transformation of the output of spinal lamina I neurons after nerve injury and microglia stimulation underlying neuropathic. 3, 27 (2007).
  39. Fundytus, M. E., Fisher, K., Dray, A., Henry, J. L., Coderre, T. J. In vivo antinociceptive activity of anti-rat mGluR1 and mGluR5 antibodies in rats. Neuroreport. 9, 731-735 (1998).
  40. Fundytus, M. E., et al. Knockdown of spinal metabotropic glutamate receptor 1 (mGluR(1)) alleviates pain and restores opioid efficacy after nerve injury in rats. Br. J. Pharmacol. 132, (1), 354-367 (2001).
  41. Coderre, T. J., Kumar, N., Lefebvre, C. D., Yu, J. S. Evidence that gabapentin reduces neuropathic pain by inhibiting the spinal release of glutamate. J. Neurochem. 94, 1131-1139 (2005).
  42. Kabli, N., Cahill, C. M. Anti-allodynic effects of peripheral delta opioid receptors in neuropathic pain. Pain. 127, 84-93 (2007).
  43. Holdridge, S. V., Cahill, C. M. Spinal administration of a delta opioid receptor agonist attenuates hyperalgesia and allodynia in a rat model of neuropathic pain. Eur. J. Pain. 11, 685-693 (2007).
  44. Benbouzid, M., et al. Δ-opioid receptors are critical for tricyclic antidepressant treatment of neuropathic allodynia. Biol. Psychiatry. 63, 633-636 (2008).
  45. Bohren, Y., et al. µ-opioid receptors are not necessary for nortriptyline treatment of neuropathic allodynia. Eur. J. Pain. 14, 700-704 (2010).
  46. Yalcin, I., et al. Nociceptive thresholds are controlled through spinal Β2-subunit-containing nicotinic acetylcholine receptors. Pain. 152, 2131-2137 (2011).
  47. Bohren, Y., et al. Antidepressants suppress neuropathic pain by a peripheral Β2-adrenoceptor mediated anti-TNFα mechanism. Neurobiol. Dis. 60, 39-50 (2013).
  48. Choucair-Jaafar, N., Yalcin, I., Rodeau, J. L., Waltisperger, E., Freund-Mercier, M. J., Barrot, M. Β2-adrenoceptor agonists alleviate neuropathic allodynia in mice after chronic treatment. Br. J. Pharmacol. 158, 1683-1694 (2009).
  49. Yalcin, I., et al. Chronic treatment with agonists of Β2-adrenergic receptors in neuropathic pain. Exp. Neurol. 221, 115-121 (2010).
  50. Cok, O. Y., Eker, H. E., Yalcin, I., Barrot, M., Aribogan, A. Is there a place for Β-mimetics in clinical management of neuropathic pain? Salbutamol therapy in six cases. Anesthesiology. 112, 1276-1279 (2010).
  51. Choucair-Jaafar, N., et al. Cardiovascular effects of chronic treatment with a Β2-adrenoceptor agonist relieving neuropathic pain in mice. Neuropharmacology. 61, 51-60 (2011).
  52. Yalcin, I., et al. A time-dependent history of mood disorders in a murine model of neuropathic pain. Biol. Psychiatry. 70, 946-953 (2011).

Comments

2 Comments

  1. Hi,
    nice video :-) Could you please explain how you split the cuff-tubes? Any tips and tricks?

    Regards,
    Mette

    Reply
    Posted by: Mette R.
    April 21, 2015 - 5:45 AM
  2. Hi,

    If I had to guess, I would say its pretty much straight forward, just shove a fine cutter into the tube, and cut it.

    However, i'm posting here so i would be notified in case they answer with a different method

    Regards,

    Tom

    Reply
    Posted by: Tom S.
    May 7, 2015 - 4:21 AM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics