एक एकल उपयोग वायवीय bioreactor प्रणाली का उपयोग स्तनधारी कोशिकाओं की खेती

Bioengineering
 

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Obom, K. M., Cummings, P. J., Ciafardoni, J. A., Hashimura, Y., Giroux, D. Cultivation of Mammalian Cells Using a Single-use Pneumatic Bioreactor System. J. Vis. Exp. (92), e52008, doi:10.3791/52008 (2014).

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Abstract

Introduction

निलंबन में विकसित कोशिकाओं है कि, समुच्चय के रूप में विकसित कोशिकाओं है कि, और कोशिकाओं एक सब्सट्रेट के लिए लंगर बढ़ने कि: स्तनधारी कोशिकाओं लाइनों उनके विकास विशेषताओं के आधार पर तीन श्रेणियों में वर्गीकृत किया जा सकता है. इस वीडियो में प्रदर्शन हवा पहिया बायोरिएक्टर कोशिकाओं के सभी तीन प्रकार विकसित करने में सक्षम है, इस वीडियो सूक्ष्म वाहकों पर लंगर निर्भर कोशिकाओं को विकसित करने के लिए बायोरिएक्टर के उपयोग का प्रदर्शन करेंगे. कोशिकाओं को खुद के उत्पाद हैं - जहां लंगर निर्भर स्तनधारी कोशिकाओं अधिक कोशिकाओं के उत्पादन के उद्देश्य के लिए विकसित किया जा सकता है. उदाहरण के लिए, मानव अस्थि मज्जा व्युत्पन्न mesenchymal स्टेम सेल वर्तमान में कोशिकाओं कटाई और रोगग्रस्त ऊतकों में उन्हें इंजेक्शन लगाने के उद्देश्य से खेती की जा रही है. इस वीडियो में प्रदर्शन वायवीय बायोरिएक्टर इस आवेदन के लिए इस तरह के mesenchymal स्टेम कोशिकाओं के उत्पादन के लिए उपयुक्त साबित हो गया है (सेरा एट अल., व्यक्तिगत संचार, 2013).

एंकोरेज रवानगीendent स्तनधारी कोशिकाओं को आम तौर पर इस तरह वे एक विशेष इलाज विकास सतह 1 का पालन करना है, जहां सेल संस्कृति प्लेटों, सेल संस्कृति बोतल, या रोलर की बोतलें, के रूप में 2 डी संस्कृति वाहिकाओं में छोटे पैमाने पर बड़े हो रहे हैं. अधिक कोशिकाओं वांछित रहे हैं, प्लेटों या बोतल अधिक या बड़े जहाजों का उपयोग करके बढ़ाया जा सकता है. हालांकि, अधिक लागत प्रभावी लंगर निर्भर कक्षों की बड़ी मात्रा की खेती, सेल लगाव के लिए सतह क्षेत्र को बढ़ाने के लिए सूक्ष्म वाहक बुलाया छोटे ठोस मोती का उपयोग करके पूरा किया जा सकता है. सेल की कुर्की विशेषताओं पर निर्भर करता है, सूक्ष्म वाहकों के कई अलग अलग प्रकार के ऐसे लेपित dextran, पेप्टाइड, या कोलेजन के रूप में, व्यावसायिक रूप से उपलब्ध हैं. माइक्रो वाहक सेल के विकास के लिए एक बड़ा सतह क्षेत्र प्रदान करने मात्रा अनुपात करने के लिए एक बड़े सतह क्षेत्र है; और सूक्ष्म वाहक कोशिकाओं बायोरिएक्टर सिस्टम 2 में उच्च घनत्व को खेती करने की अनुमति देता है जो आंदोलन के साथ निलंबन में बनाए रखा जा सकता है. Biorea के वर्तमान, प्रकारपक्षपाती कोशिकाओं सूक्ष्म वाहकों पर हो रहे हैं जहां ctors सेल लेपित सूक्ष्म वाहकों के निलंबन को बनाए रखने के लिए अक्षीय impellers जो प्रयोग स्पिनर बोतल और उभारा टैंक प्रणाली, शामिल हैं.

कई कारकों ऑक्सीजन तनाव, कतरनी तनाव, सतह मैट्रिक्स, और पोषक तत्व और metabolite सांद्रता सहित कोशिकाओं की सफल खेती के लिए महत्वपूर्ण हैं. बायोरिएक्टर का उपयोग वास्तविक समय विकास की स्थिति की निगरानी और काफी कम उत्पादन लागत 1 की क्षमता के लिए अनुमति देता है. सहित इन विट्रो सेल खेती, उभारा निलंबन, घूर्णन दीवार पोत, खोखला फाइबर, एक घुमाव मंच पर बैग बायोरिएक्टर, और द्रवीकृत बिस्तर सिस्टम 3 के लिए कई आम बायोरिएक्टर डिजाइन कर रहे हैं. इन पद्धतियों में से कई इस तरह के उच्च लागत, पोषक एकाग्रता ढ़ाल, hydrodynamic कतरनी, सेल एकत्रीकरण, और कठिनाई नमूने में, निगरानी, ​​और नियंत्रित सीईएल के रूप में, सेल खेती के लिए अद्वितीय वर्तमान समस्याओं और -Up पैमाने परएल पैमाने अप.

विभिन्न पक्षपाती सेल लाइनों वायरल टीकों के उत्पादन में या जीन थेरेपी अनुप्रयोगों के लिए वायरल वैक्टर के उत्पादन के लिए है, या तो वायरस के उत्पादन में किया जाता है. इस वीडियो में, एकल उपयोग साँस (एयर व्हील) बायोरिएक्टर प्रणाली का उपयोग करते हुए, हम मानव फेफड़ों कार्सिनोमा कोशिकाओं (A549) एक oncolytic adenovirus के उत्पादन के लिए माइक्रो कैरियरों पर कोशिकाओं की संस्कृति का प्रदर्शन. वायवीय बायोरिएक्टर डिजाइन बायोरिएक्टर के तल में sparged गैस की उछाल के द्वारा संचालित है कि एक ऊर्ध्वाधर आंदोलन पहिया का उपयोग करता है. इस कोमल सरगर्मी विधि hydrodynamic कतरनी बलों सीमा है, लेकिन अभी भी इष्टतम मध्यम और सेल 4 मिश्रण सुनिश्चित करता है. उभारा टैंक रिएक्टर की तुलना में, वायवीय रिएक्टर भी उच्च मात्रा एयर व्हील बायोरिएक्टर प्रणाली (चित्रा 1) के साथ कम दीवार कतरनी तनाव है. उभारा टैंक बायोरिएक्टर के विपरीत, इस एकल उपयोग रिएक्टर की खड़ी प्ररित करनेवाला गैस के बुलबुले की एक धारा के भीतर से बदल गया हैकोमल और वर्दी मध्यम मिश्रण (चित्रा 2) के लिए अनुमति देता है जो पोत,.

Protocol

1 लॉगइन

  1. Bioreactor को सत्ता. लॉगइन पेज खोलने के लिए कहीं भी क्लिक करें. उपयोगकर्ता नाम चुने और पासवर्ड दर्ज करें और "लॉगिन" पर क्लिक करें.

2 अंशांकन

  1. पीएच सेंसर (पूर्व autoclaving को 2 अंक) जांचना.
  2. पीएच सेंसर का निरीक्षण किया और सेंसर टिप इलेक्ट्रोलाइट समाधान से भर जाता है की पुष्टि करें. पीएच अंशांकन समाधान (इलेक्ट्रोलाइट) पीएच 4 और पीएच 7 के साथ दो बीकर तैयार है और आसुत जल से उपलब्ध एक धोने की बोतल है.
  3. पीएच सेंसर पीएच केबल कनेक्ट करें. हैलो इंटरफेस पर "प्रक्रिया" टैब पर जाएँ और "जांच" पर क्लिक करें. अंशांकन समाधान अस्थायी क्षेत्र में बफर तापमान दर्ज करें.
  4. बफर 1 (पीएच 4) में पीएच सेंसर प्लेस और "शून्य" क्षेत्र में मान दर्ज करें. स्थिर करने के ग्राफ के लिए प्रतीक्षा करें और "जांचना 1" बटन पर क्लिक करें. आसुत जल के साथ पीएच सेंसर कुल्ला.
  5. बफर में जगह सेंसर 2 (पीएच 7). बफर लिखें"काल" क्षेत्र में 2 मूल्य. स्थिर और 2 बटन जांचना क्लिक करने के ग्राफ के लिए प्रतीक्षा करें.
  6. "सहेजें" तो "बंद" पर क्लिक करें क्लिक करें.
  7. घुलित आक्सीजन (डीओ) सेंसर जांचना.
  8. क्या सेंसर सुनिश्चित कई घंटे के लिए सिस्टम से जोड़ा जा रहा द्वारा ध्रुवीकरण कर दिया गया है. हैलो इंटरफेस पर "प्रक्रिया" टैब पर नेविगेट करें और जांच पर क्लिक करें. "एक करना" बटन पर क्लिक करें.
  9. क्या सेंसर डिस्कनेक्ट और "शून्य" क्षेत्र में 0 दर्ज करें. स्थिर और "जांचना 1" बटन पर क्लिक करने के ग्राफ के लिए प्रतीक्षा करें.
  10. क्या सेंसर जोड़ने और "अवधि" क्षेत्र में 100 दर्ज करें. स्थिर और "जांचना 2" बटन क्लिक करने के ग्राफ के लिए प्रतीक्षा करें.
  11. "सहेजें" फिर "बंद" पर क्लिक करें क्लिक करें.

3 आटोक्लेव और स्थापित सेंसर और अभिकर्मक वेसल्स

  1. Autoc में अंशांकन, जगह सेंसरों और थर्मल अच्छी तरह से करने के बादनहाना पाउच और 121 डिग्री सेल्सियस, 15 साई पर 30 मिनट के लिए आटोक्लेव.
  2. 70% isopropyl शराब (आईपीए) और जैविक सुरक्षा कैबिनेट के लिए स्थानांतरण पाउच (बीएससी) के साथ आटोक्लेव पाउच sanitize. पोत के बाहरी पैकेजिंग निकालें.
  3. 70% आईपीए के साथ भीतरी पैकेजिंग को स्वच्छ और जैविक सुरक्षा कैबिनेट (बीएससी) के लिए पोत हस्तांतरण. भीतरी पैकेजिंग निकालें और शिपिंग के दौरान दिए गए नुकसान के लिए पोत और ट्यूबिंग का निरीक्षण किया.
  4. पीएच स्थापित करने और दो सामने बंदरगाहों में सेंसर करना. वापस छोड़ दिया बंदरगाह के लिए थर्मल अच्छी तरह से स्थापित करें. सेंसर टोपी खोलें.
  5. सेंसर बंदरगाह के माध्यम से सेंसर गाइड. पोर्ट में कसकर सेंसर थ्रेड.
  6. बीएससी के बाहर पोत स्थानांतरण.
  7. पोत आस्तीन बाहर करना और पीएच सेंसर केबल रखता है और कुछ भी नहीं आस्तीन में है कि जाँच करें. पहला, आस्तीन में पैर पोत स्लाइड.
  8. ध्यान से पोत थर्मल कुएं में तापमान सेंसर फिट. जहाज के नीचे हीटर के खिलाफ टिकी हुई है कि सुनिश्चित करें.
  9. निकालेंट्यूबिंग उनके बैग से सेट. बायोरिएक्टर नियंत्रण इकाई पर इसी कनेक्टर्स और पंप करने के लिए ट्यूबिंग पर मैच रंग कोडिंग.
  10. अपने गैस आउटलेट में कनेक्टर दबाकर मुख्य गैस लाइन को स्थापित करें. गैस आउटलेट में कनेक्टर दक्षिणावर्त घुमा द्वारा सूक्ष्म गैस लाइन को स्थापित करें. निकास फिल्टर ट्यूबिंग स्थापित करें:
  11. फिल्टर ओवन खोलें. इसके ट्यूबिंग फिल्टर करने के लिए और ओवन के बाहर दो हुक के माध्यम से चला जाता है तो यू चैनल पर निकास फिल्टर सुरक्षित.
  12. ट्यूबिंग धारक में कंडेनसर बैग से ट्यूबिंग स्थापित करें. दरवाजा बंद कर दें.
  13. अगले बायोरिएक्टर नियंत्रण इकाई को रूट अलावा लाइनों ए और बी, दोनों मीडिया लाइनों, और क्या सेंसर के पीछे और बेंच पर फसल लाइन.
  14. डीओ और पीएच सेंसर करने के लिए केबल कनेक्ट.

4 जोड़ना मध्यम और लघु वाहक

  1. "कार्रवाई" टैब पर नेविगेट करें और क्लिक करें कंप्यूटर इंटरफेस पर "नियंत्रण पंप्स".
  2. एक Steri पर्चाएक अप्रयुक्त मध्यम अलावा लाइन (1 नारंगी बैंड) और ट्यूबिंग वेल्डिंग या Luer फिटिंग का उपयोग करके मध्यम बोतल / बैग स्रोत के बीच ले कनेक्शन.
  3. पर मीडिया पंप चालू करने के लिए स्लाइडर क्लिक करें. मीडिया माध्यम के अलावा वांछित राशि के बाद बंद पंप चालू करने के लिए स्लाइडर क्लिक करें.
  4. आरटी पर 3 घंटे के लिए, Ca 2 में 2 मिलीग्राम + मुक्त पीबीएस microcarrier मोती रखें.
  5. धो सीए 2 +, 2 मिलीग्राम + मुक्त पीबीएस के साथ कई बार मोती.
  6. 115 डिग्री सेल्सियस, 15 साई पर 15 मिनट के लिए आटोक्लेव.
    नोट: इस प्रयोग में 3 जी / एल (सूखी वजन) जोड़ें.
  7. , हाइड्रेटेड धोया और मध्यम कदम 4.1 में जोड़ा गया है उसी तरह से रिएक्टर में autoclaved गया है कि सूक्ष्म वाहकों में पंप.

5 संतुलन और एक अंक की कैलिब्रेशन DO

  1. ऑटो के लिए नियंत्रक सेट और वांछित setpoints दर्ज करें. इधर, आंदोलन सेट प्वाइंट (सपा) = 15 आरपीएम, तापमान सपा = उपयोग 37.0 डिग्री सेल्सियस, पीएच = 7.2, = 100% है. पी के लिए प्रतीक्षा करेंarameters संतुलित करना.
  2. सेंसर की पुष्टि पूरी तरह से ध्रुवीकृत है. क्या वर्तमान मूल्य की पुष्टि स्थिर हो गया है.
  3. "प्रक्रिया" टैब पर जाएँ और "जांच" पर क्लिक करें. "एक बिंदु" पर क्लिक करें, "एक" पर क्लिक करें.
  4. "अवधि" क्षेत्र में '100' लिखें. , क्लिक करें "सहेजें" और "बंद" क्लिक "जांचना 1" बटन पर क्लिक करें:

6 एक भागो शुरू

  1. प्रक्रिया टैब पर जाएँ. "बैच" क्लिक करें. एक बैच नाम 16 वर्ण या उससे कम में प्रवेश करने पर स्क्रीन कीबोर्ड या एक बाहरी कीबोर्ड का प्रयोग करें.
  2. परदे पर कुंजीपटल के "छिपाएँ" बटन पर क्लिक करें. "बैच प्रारंभ" ओवरले में "शुरू" पर क्लिक करके पुष्टि क्लिक करें.

7 कोशिकाओं के साथ टीका लगाना

  1. वेल्डिंग द्वारा एक अप्रयुक्त मध्यम अलावा लाइन (1 नारंगी बैंड) के बीच एक बाँझ कनेक्शन और सेल बोतल / बैग स्रोतLuer फिटिंग का उपयोग ट्यूबिंग या.
  2. पंप और पोत के बीच ट्यूबिंग ओर तीर अंक तो मीडिया पंप में ट्यूबिंग की सिलिकॉन अनुभाग स्थापित करें.
  3. ट्यूबिंग दबाना जाँचें खुला है और अपने branched ट्यूबिंग दबाना बंद कर दिया है. पर मीडिया पंप बारी है और कोशिकाओं को जोड़ने के बाद "बंद" पर क्लिक करने के लिए स्लाइडर क्लिक करें.
  4. "प्रक्रिया" टैब पर जाएँ और "नियंत्रण पंप्स" पर क्लिक करें.

8 सैम्पलिंग

  1. के रूप में अक्सर संस्कृति पर नजर रखने के रूप में वांछित inoculating और बाद निम्न तरीके से संस्कृति से एक नमूना आकर्षित:
  2. "कार्रवाई" टैब पर जाएँ और "नमूना ले" पर क्लिक करें. नमूना पंप में नमूने ट्यूबिंग प्लेस और परदे पर निर्देशों के अनुसार नमूने पानी निकलने की टोंटी में हेरफेर.
  3. इन नमूनों पर कम से कम एक दैनिक सूक्ष्म अवलोकन और सेल गणना कार्य करें.
  4. कोशिकाओं इस ग में वांछित घनत्व, तक पहुँच चुके हैं1.2 x 10 6 कोशिकाओं / एमएल एएसई, एक वायरस inoculum के अलावा के साथ कोशिकाओं को संक्रमित.
  5. Aseptically एक 20 मिलीलीटर सिरिंज से inoculum जोड़ने, और रिएक्टर पर स्पेयर अलावा बंदरगाहों में से एक के लिए सिरिंज कनेक्ट. सिरिंज सवार पर दबाकर रिएक्टर को inoculum का परिचय.
  6. नमूना जारी रखें और adenovirus intracellular कण एकाग्रता के लिए संस्कृति का विश्लेषण.

Representative Results

चित्रा 3 में, बायोरिएक्टर रन की दीक्षा के लिए मानकों दिखाए जाते हैं. यह आंकड़ा तापमान, भंग ऑक्सीजन, पीएच और आंदोलन के मानकों की स्थापना करने से पहले स्क्रीन दिखाता है. मापदंडों सेट कर रहे हैं एक बार, रन मापदंडों लगातार निगरानी कर रहे हैं और समायोजन आवश्यक शर्तों को बनाए रखने के लिए किया जा सकता है. सॉफ्टवेयर समस्याओं के आसान पहचान के लिए अनुमति देता है कि एक निरंतर readout पैदा करता है. DMEM 10% FBS, SAFC एंटी फोम सी के 250 पीपीएम, 2 मिमी एल glutamine और 3 जी / सूक्ष्म वाहकों के एल युक्त 2.5 एल का उपयोग कर इस प्रयोग में, प्रणाली इतनी प्रतिशत ऑक्सीजन 50% है, स्थिर है तापमान 37 डिग्री सेल्सियस है, और पीएच 7.2. रिएक्टर 7 एक्स 10 4 कोशिकाओं / एमएल (या / सूक्ष्म वाहक 10 कोशिकाओं) के एक एकाग्रता में A549 कोशिकाओं के साथ inoculated है. इस दौड़ के लिए चुना मापदंडों 2 घंटा (चित्रा 4) के भीतर सूक्ष्म वाहक का पालन कोशिकाओं के बहुमत में हुई. 12 घंटे बाद, कोशिकाओं राक्षसों हैं(चित्रा 5) सपाट और सूक्ष्म वाहक सतह पर फैल की trating संकेत. 24 घंटा तक, सूक्ष्म वाहक (चित्रा 6) कोशिकाओं के बिना कोई सूक्ष्म वाहक और सूक्ष्म कैरियरों पर कोशिकाओं का कोई बड़े clumps के साथ कोशिकाओं की एक अपेक्षाकृत भी वितरण किया है. A549 कोशिकाओं द्वारा सूक्ष्म वाहक उपनिवेशवाद का प्रतिशत 24 घंटा और उसके बाद 90% (चित्रा 7) से 75% है. कोशिकाओं 48 घंटा (चित्रा 8) के बाद ~ 1 मिलियन कोशिकाओं / एमएल के लिए तेजी से बढ़ने के लिए जारी रखा. 50 घंटा में oncolytic adenovirus (2 X 10 8 virions / एमएल) की एक खुराक से संक्रमण के बाद, घनत्व मिलीलीटर 1.2 मिलियन कोशिकाओं / की वृद्धि हुई और फिर अपघट्य संक्रमण प्रगति के रूप में कम करने के लिए शुरू किया. वायरल inoculum के ~ 10,000 गुना प्रवर्धन थी.

पिछले प्रयोगों में, हम गैस के प्रवाह की निगरानी और समायोजन सेल के विकास (अप्रकाशित डेटा) को अधिकतम करने के लिए महत्वपूर्ण है कि मिल गया है. तेजी से बढ़ कोशिकाओं में ऑक्सीजन की व्यवस्था के साथ व्यय कर सकते हैं शून्य पर गिर डीओ स्तर. कोशिकाओं को विकसित करने के लिए जारी रखा है, यह एक बहुत धीमी दर पर था. यह मॉनिटर और लघुगणक विकास के चरण के दौरान सेल की मांग को पूरा करने के लिए ऑक्सीजन का प्रवाह को समायोजित करने के लिए महत्वपूर्ण है. प्रत्येक रन दैनिक सेल गिनती के साथ पीएच, मत करो, और तापमान की तुलना द्वारा इष्टतम विकास के लिए विश्लेषण किया जा सकता है.

चित्रा 1
विभिन्न रिएक्टर मात्रा में दीवार कतरनी बलों को मापने के एक दोषी टैंक बायोरिएक्टर साथ तुलना वायवीय bioreactor प्रणाली (पीबीएस) की संख्या 1 तरल गतिकी.

चित्रा 2
चित्रा 2 वायवीय एयर व्हील रिएक्टर प्ररित करनेवाला.

52008 / 52008fig3highres.jpg "/>
बायोरिएक्टर रन आरंभ करने के लिए मापदंडों के 3 वायवीय एयर व्हील सॉफ्टवेयर स्क्रीन शॉट लगाने.

चित्रा 4
A549 कोशिकाओं 2 घंटे बाद टीका के साथ चित्रा 4 माइक्रो वाहक बसाना. (टूटने सूक्ष्म वाहक व्यास ~ 180 माइक्रोन.) यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.

चित्रा 5
5 चित्रा 12 घंटा संस्कृति की दीक्षा के बाद, A549 कोशिकाओं, संलग्न सपाट, और सूक्ष्म वाहकों पर फैल रहे हैं.5highres.jpg "लक्ष्य =" _blank "> इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.

चित्रा 6
संस्कृति में 24 घंटे के बाद कोशिकाओं के साथ लेपित चित्रा 6 माइक्रो वाहक. इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.

चित्रा 7
A549 कोशिकाओं द्वारा सूक्ष्म वाहक उपनिवेशवाद का आंकड़ा 7 प्रतिशत टीकाकरण के बाद.

चित्रा 8
8 चित्रा adenovir साथ संस्कृति पूर्व में व्यवहार्य A549 कोशिकाओं की संख्या और बाद संक्रमणहमें. वायरल संक्रमण कदम 50 घंटे में हुई है.

Discussion

इस एकल उपयोग बायोरिएक्टर प्रणाली का उपयोग करने के लिए अपेक्षाकृत आसान है और रिएक्टर निगरानी और विश्लेषण के लिए वास्तविक समय विश्लेषिकी प्रदान करता है. यह बहुत अच्छी तरह से 30 लाख से अधिक कोशिकाओं / एमएल तक पहुँचने सेल घनत्व के साथ स्तनधारी और कीट सेल संस्कृति के लिए अनुकूल है. A549 कोशिकाओं इस रिपोर्ट 11 में वर्णित के अलावा, हम के रूप में अच्छी तरह से बायोरिएक्टर में एस एफ -9 कीट कोशिकाओं हो गए हैं. वायवीय हवा पहिया द्वारा प्रदान की कोमल मिश्रण कोशिका क्षति को कम करता है. इस रिएक्टर स्थापित करने के लिए जब कई कदम महत्वपूर्ण हैं. सबसे पहले, उचित पीएच अंशांकन और सेंसर संस्कृति के इष्टतम निगरानी के लिए और पीएच या प्रणाली में ऑक्सीजन समायोजित करने के लिए अभिकर्मकों के अलावा के लिए महत्वपूर्ण रहा है. दूसरा, अभिकर्मक और बीज की बोतलें भरी और luer संलग्नक इस तरह के एक बीएससी के रूप में एक बाँझ वातावरण में किया जाना चाहिए. अभिकर्मक बोतलें बाँझ वातावरण से बाहर स्थानांतरित कर रहे हैं एक बार, बायोरिएक्टर फ़ीड लाइनों के कनेक्शन माइक्रोबियल संक्रमण से बचने के लिए सावधानी से किया जाना चाहिए.

एकल उपयोग वायवीय बायोरिएक्टर प्रणाली की कोशिकाओं, अनुसंधान और biotherapeutics, टीकों के क्षेत्र में नैदानिक ​​अनुप्रयोगों के कई को पूरा करने के लिए स्टेम क्षमता, और व्यक्तिगत चिकित्सा 4 है. इसके अलावा, इस प्रणाली का लचीलापन बैच, फेड बैच, छिड़काव, और अभिकर्मक आधारित बायोरिएक्टर अनुप्रयोगों 5 के लिए अनुमति देता है. अंत में, एकल उपयोग डिस्पोजेबल बायोरिएक्टर प्रणाली poten हैबड़े पैमाने पर औद्योगिक उत्पादन की जरूरतों को पूरा करने के लिए और दिशा निर्देशों और राष्ट्रीय और अंतरराष्ट्रीय नियामक एजेंसियों 6-10 की सिफारिशों का पालन करने के लिए TiAl.

Disclosures

लेखक डी गिरौक्स और वाई Hashimura इस लेख में इस्तेमाल अभिकर्मकों और उपकरणों का उत्पादन है कि पीबीएस बायोटेक के कर्मचारी हैं.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
PBS 3  PBS
Single Use Assembly PBS
Human Lung Carcinoma Cells (A549) ATCC CCL-185
DMEM High Glucose Medium
Fetal Bovine Serum
Trypsin EDTA, 0.25%
Cytodex 1 Microcarriers GE 3781
Antifoam C Sigma A8011

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References

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