Vurdering af virksomhedens rentabilitet for Human Fat Injektion i nøgne mus med Micro-Computed Tomography

* These authors contributed equally
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Atashroo, D. A., Paik, K. J., Chung, M. T., McArdle, A., Senarath-Yapa, K., Zielins, E. R., Tevlin, R., Duldulao, C. R., Walmsley, G. G., Wearda, T., Marecic, O., Longaker, M. T., Wan, D. C. Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography. J. Vis. Exp. (95), e52217, doi:10.3791/52217 (2015).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Lipotransfer er et afgørende redskab i kirurgens armamentarium til behandling af bløddele underskud på hele kroppen. Fedt er den ideelle blødt væv fyldstof, som det er let tilgængelige, let opnås, billig, og i sagens natur biokompatible. 1 Men på trods af sin spirende popularitet, er fedt podning hæmmet af uforudsigelige resultater og variable transplantatoverlevelse, med offentliggjorte frafald spænder overalt fra 10 -80%. 1-3

For at lette undersøgelser af fedt podning har vi derfor udviklet en dyremodel, der giver mulighed for real-time analyse af injiceret fedt volumen tilbageholdelse. Kort fortalt er et lille snit foretages i hovedbunden af ​​en CD-1 nøgne mus og 200-400 pi af forarbejdet lipoaspirate placeres over kraniet. Hovedbunden er valgt som modtager stedet på grund af sin mangel på native subkutant fedt, og på grund af den fremragende baggrund kontrast billede af hovedskallen, som hjælper ianalyseprocessen. Micro-computertomografi (mikro-CT) anvendes til at scanne transplantatet ved baseline og hver anden uge derefter. De CT-billeder er rekonstrueret, og en billeddannende software bruges til at kvantificere graft mængder.

Traditionelt teknikker vurdere fedt graft volumen har nødvendiggjort euthanizing undersøgelsen dyr til at give bare en enkelt vurdering af graft vægt og volumen af fysisk måling ex vivo. Biokemiske og histologiske sammenligninger har ligeledes krævet undersøgelsen dyr, der skal aflives. Denne beskrevne imaging teknik har den fordel at visualisere og objektivt kvantificere volumen ved forskellige tidspunkter efter den første podning uden at ofre undersøgelsen dyr. Teknikken er begrænset af størrelsen af ​​implantatet i stand til at blive injiceret som større transplantater risiko hud og fedt nekrose. Denne metode har nytte for alle studier, der evaluerer fedt graft levedygtighed og fastholdelse volumen. Det er især velegnet til providing en visuel repræsentation af fedt transplantater og efter ændringer i volumen over tid.

Protocol

BEMÆRK: Eksperimentelle protokoller og patientens samtykke formularer for at opnå fedt blev gennemgået og godkendt af Stanford University Institutional Review Board (Protokol # 2188). Alle dyreforsøg blev godkendt af Stanford administrative panel for Laboratory Animal Care (Aplac) i henhold til protokol # 9999. Alle forsøg blev udført med streng overholdelse dyr sikkerhed og humane retningslinjer pleje.

1. Fat Høst

  1. Brug af Coleman procedure 17-19, få human fedtvæv fra underlivet, flanke, og / eller lår regioner af raske kvindelige patienter, som gennemgår elektiv fedtsugning.
  2. At behandle lipoaspirate til podning, begynde ved at tillade fedt at nøjes med 30 min.
  3. Lipoaspirate typisk liggende i tre lag, med olie på toppen, fedt i midten, og blod i bunden. Aspirer og kassér den øverste olie lag og det nederste blod lag.
  4. For yderligere at fjerne eventuelt resterende tumescent væske eller cellerester, centrifugeres fedt i 5 minutter ved 350 xg og 4 ° C, og udsuge nederste vandige lag.
  5. Beregn mængden af ​​fedt nødvendig til podning, hvilket giver 20% levering fejl og overføre den ønskede mængde fedt til 50 ml konisk (s). Multiplicer 400 med antallet af mus i undersøgelsen for at opnå mikroliter fedt nødvendig for podning.
  6. På dette tidspunkt, hvis udførelse Cell Assisted Lipotransfer 20,21, sted volumen af fedt til podning på is. Derefter høste adipøst afledte stromaceller (ASC) fra det resterende fedt ved hjælp af standard teknikken beskrevet af Zuk et al 22.

2. fedt podning

  1. Få kvindelige, homozygot CD-1 nøgne mus for eksperimentel undersøgelse. Vælg mus mellem 8-12 ugers alderen.
  2. For at inducere anæstesi, sted mus i en knockdown kasse med 2,5% isofluran / oxygenblanding på 2 l / min til ca. 10 min. Bemærk venligst, at anbefalede isoflurane dosis varierer med musestamme.
  3. Når respirationsraten af ​​musen er aftaget, bekræfter tilstrækkelig sedation med en tå knivspids. Påfør veterinære smøring oftalmisk salve til begge øjne med musen.
  4. Hvis musen ikke vige tilbage som reaktion på tå knibe, det bekræfter en tilstrækkelig plan anæstesi. Placer musens næse i en næsekeglens leverer 2,5% isofluran / ilt blanding ved 1-2 L / min. Hvis musen trækker fra tå knibe, vende tilbage til knockdown kasse og retest efter 5 min.
  5. Opsætning sterile område under musen og derefter sterilisere hovedbund med 2,5% povidon-iod efterfulgt af 70% ethanol opløsning. Gentag to gange mere.
  6. Placer operationsafdækningsstykker over musen og være omhyggelig med at opretholde sterile område. Sterile instrumenter, handsker og værnemidler skal bruges på alle tidspunkter.
  7. Hvis fedt volumen skal podes var tidligere placeret på is, tillader fedt først tilpasse sig RT før levering.
  8. Udskyde en 1 ml luer-lock sprøjte med 1 mlfedt.
  9. Et 14 g, 8 cm lang fedt podning kanyle til enden af ​​sprøjten.
  10. Prime systemet ved at trykke sprøjtestemplet indtil mellem 200 og 400 pi af fedt tilbage i sprøjten. Mens nedtrykning sprøjtestemplet bekræfte at kanylen helt har fyldt med fedt ved at observere fedt forlader den distale kanyle hul.
  11. Ved hjælp af fine tænger, løft ryghuden i midterlinjen overliggende caudale-meste aspekt af kraniet. Lav en 1,5 mm skåret i huden ved hjælp af fine sakse.
  12. Placer et enkelt 6-0 nylonsutur gennem midten af ​​snittet, der vil senere blive brugt til at bringe sårkanterne sammen efter podning udføres. Bind ikke suturen.
  13. Lav en subkutan lomme i kraniet ved at indsætte kanylen gennem huden indsnit og passerer kanylen frem og tilbage i et vifteformet mønster over kraniet for at frigøre eventuelle bindevævsceller vedhæftninger til overliggende hud.
  14. Når lommen er blevet oprettet, skal du placere cannula i midterlinjen af ​​musen direkte over kraniet, indtil spidsen ligger ved rostralt længst aspekt af lommen, som skal være lige bag en linje trukket mellem øjnene. (Figur 1A)
  15. Injicer langsomt fedtet i en retrograd måde fremme stemplet, mens du trækker kanylen tilbage. Ved hjælp af pincet, bringe sårkanterne sammen og løfte dem op for at holde noget fedt lække ud af lommen.
  16. Bind suturen, der tidligere var placeret, og sørg for, at den første knude ligger let mod huden. Bind yderligere tre firkantede knob og skære sutur med en 3 mm hale. (Figur 1B)
  17. Bekræft med visualisering og manuel palpation, at lommen ikke er overfyldt, og huden overliggende lommen er ikke anspændt. Hvis lommen er blevet overfyldt, klippe suturen og fjern alt fedt fra i lommen. Vask lommen med phosphatbufret saltvand (PBS) pH 7,4 og re-injicere et mindre volumen af ​​fedt.
  18. Fjern musen fra ennesthesia og sted på ryggen eller siden i en ren bur af sig selv. Overvåg dyret for regelmæssig vejrtrækning, normale bevægelser, manglende blødning, og tegn på smerte eller lidelse. Administrer buprenorphin 0,1 mg / kg subkutant hver 6 timer i op til 48 timer, hvis dyret er i smerte.
  19. Sørg for, at dyret er vågnet op i tilstrækkelig grad til at opretholde brystleje før du forlader det. Placer ikke dyr i et bur med andre dyr, indtil det er fuldt tilbagebetalt.
  20. Efter 4 timer, sikre, at dyret er i stand til at spise og drikke, flytte og trække vejret normalt, og at der ikke er nogen blødning fra operationsstedet. Returnere den til pasning af dyr facilitet.

3. Mikro-CT

  1. Scan mus til baseline volumen med postoperativ dag 3, og derefter gentage scanninger ved postoperative uger 2, 4, 6 og 8.
  2. Når billeddannelse musene på hvert tidspunkt, skal du følge før og efter proceduremæssige sedation og dyrs pleje retningslinjer som skitseret tidligere i Sterritoriale beskæftigelsespagter 2,2-2,4 og 2,17-2,19.
  3. Udfør scanninger på en mikro-CT-scanner med en rekonstruktion voxel størrelse på 100 um eller bedre.
  4. Med en top røntgen kilovoltage på 80 kVp og en anode strøm på 450 uA, administrere en ration dosis på ca. 5 centiGy under en 9 min scanning til hver mus. Bemærk, at disse værdier variere afhængigt af scanning protokollen.
  5. Før udførelse af den første scanning, skal du kalibrere mikro-CT med en billeddannende fantom, der skelner mellem luft, vand, og knogle intensitet.
  6. Placer fire mus i scanneren i den ventrale position med to mus på toppen og to i bunden. En scanning seng kan nemt konstrueres ved anvendelse af 60 ml sprøjter til at holde musen kroppen og 10 ml sprøjter som næse kegler. 23
  7. Oprethold mus under anæstesi med en isofluran / oxygenblanding på 1-2 l pr min 2,5%.
  8. Bekræft med spejder billede at hele kraniet på musen, fra næse til første halshvirvel, og fra toppen af ​​kraniet til bunden af ​​skull, skal afbildes.

4. Micro-CT Analyse

  1. Åbn rekonstruerede billeder med en mikro-CT imaging analyse software, der tillader oprettelsen af ​​områder af interesse (ROI s) ved at vælge voxler hjælp af tærskler for pixel intensitet. Software giver også oprettelsen af ​​3D overflader gennem interpolation af udvalgte voxels, og for volumen analyse.
  2. Start med at indlæse de rekonstruerede CT-billeder i todimensionale (2D) coronal, aksial og sagittale visninger. (Figur 2A)
  3. Brug af aksiale skive som en guide, navigere til den sagittale udsnit, der svarer til den længst til venstre aspekt af fedtet graft. Vælg en øvre og nedre grænse for pixel intensitet, der indfanger alle voxel svarer til fedt graft, men udelukker det omgivende væv og knogler. (Figur 2B)
  4. Definer en ROI i sagittalbillede der svarer til den fedt transplantat under anvendelse af tidligere definerede pixelintensitet tærskler. REPEAT denne procedure hver femte sagittal skive, navigation indtil den yderste højre del af implantatet er nået. (Figur 2C)
  5. Interpoler udvalgte voxels fra alle 2D ROI'er i en enkelt, kombineret 3D ROI. (Figur 2D)
  6. ROI volumen Record beregnet af softwaren.
  7. Render 3D isosurface at visualisere det endelige fedt graft volumen. (Figur 2E)
  8. I efterfølgende analyser, sørg for at holde den maksimale pixel intensitet og minimum tærskelværdier de samme som dem, der anvendes til analysen af ​​udgangssituationen.

5. Fat Harvest

  1. Efter mus er blevet scannet for uge 8 24,25 tidspunkt, bedøver de mus som tidligere beskrevet ovenfor i trin 2,2-2,4 og 2,17-2,19.
  2. Efter Aplac retningslinjer aflive musene ved at adskille deres rygsøjler.
  3. Placer musen i operationsfeltet. Ved hjælp tenotomy saks, forsigtigt åbne lommen og dissekere than overliggende hud og bindevæv vedhæftede væv fra fedt graft.
  4. På dette tidspunkt, kan det hjælpe at udskære et plaster på den overliggende dorsale hud for at hjælpe til ekstraktion af implantatet. (Figur 3A)
  5. Let opretholde trækkraft på transplantatet med pincet og slå graft fra side til side for at visualisere hinanden følgende punkter af spænding, der skal frigives med en saks.
  6. Holde sig så tæt til transplantatet som muligt, når udskære at minimere bindevæv taget med graft. (Figur 3B)
  7. Efter udtagelse graft, måle massen på en tareret skala, der er en målenøjagtighed på 0,01 gram.
  8. Beregn rumfanget af fedtet transplantat ved hjælp af den målte masse værdi og den gennemsnitlige tæthed af human fedt (0,9 g / ml) som en omregningskurs.
  9. Sammenlign beregnede mængde fedt graft, der opnås ved hjælp af mikro-CT.
  10. Fat transplantater kan bearbejdes til histologi eller yderligere analyse, hvis nødvendigt.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Fat transplantater faldt gradvist i volumen i løbet af studiet, hvilket resulterer i 62,2% gennemsnitlig overlevelse ved uge 8. (figur 4A) 24 Ved afslutningen af uge 8 scanningen blev hver fedt transplantat ekstraheret i et enkelt stykke. En Wilcoxan rang sum test blev anvendt til at sammenligne forskellen mellem volumen målinger af fedt transplantater fremstillet ved enten micro-CT eller beregnes ud fra fysisk masse. Ingen signifikant forskel blev konstateret mellem disse to metoder (tosidet p-værdi = 0,9362). (Figur 4B)

Med 5 centiGy pr scanning og fem scan tidspunkter, hver mus modtog ikke mere end i alt 25 centiGy løbet af undersøgelsen. I overensstemmelse med dette, ingen af ​​musene viste nogen grov bevis for kutane stråling forbrændinger.

Figur 1
Figur 1. (A) (B) nøgne mus efter endt fedt podning med en enkelt nylonsutur bruges til at bringe såret kanterne sammen. Lommen er blevet fyldt, men er ikke spændt.

Figur 2
Figur 2. (A) De rekonstruerede billeder oprindeligt vises i aksial, koronal og sagittale visninger. (B) Ved hjælp af aksiale visning som en guide til at navigere til venstre mest aspekt af implantatet på sagittale visning. Indstilling af en tærskel for pixel intensitet, så alle voxel vælges inden tærsklen interval vil repræsentere fedtvæv, således give mulighed for afgrænsning af fedt graft volumen. (C) ROI definerede på sagittalbillede starter ved venstre mest aspekt af implantatet og fortsatte nogensindey femte skive flytter til den anden ende af transplantatet. (D) Alle valgte voxels fra 2D ROI'er interpoleret til et enkelt 3D ROI. (E) en tredimensional overflade blev oprettet ved hjælp cubic-spline interpolation at visualisere den samlede fedt graft mængder .

Figur 3
Figur 3. (A) Fat graft før eksplantation med dorsale plaster på huden fjernet. (B) Fat graft efter eksplantation.

Figur 4
Figur 4. (A) Micro-CT volumetrisk analyse viste gradvise tab af fedt graft volumen over otte uger. (B) Endelige fedt graft mængder, målt ved mikro-CT, svarede nøje til mængder beregnet ud fra masserne af eksplanteret fedt transplantats. Den gennemsnitlige tæthed af human fedt (0,9 g / ml) blev anvendt som en vekselkurs.

Tabel 1
Tabel 1. Beregnet Micro-CT Volume vs. faktisk målte Fat bind 24

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Indtil dette punkt har de fleste forskere påberåbt sig ikke-billeddannende modaliteter til at kvantificere den langsigtede overlevelse af fedt transplantater, men disse metoder kræver det offer af undersøgelsen af dyr og giver kun en enkelt måling. 3,10-12 Vores undersøgelse repræsenterer en forbedret analysemetode, der tillader objektiv, real-time kvantificering af fedt transplantatoverlevelse i en musemodel.

Kritisk i denne proces er at sikre, at tilstrækkeligt immunkompromitterede mus anvendes til undersøgelse, da dette forhindrer transplantatafstødning, som ville forekomme, hvis der anvendes mus med intakte immunforsvar. Bevarelse fedt integritet er kritisk under høsten, forarbejdning, og placering faser af podning. I overensstemmelse med traditionelt anerkendte standarder, bør fedt podning opnås ved sugning assisteret fedtsugning (SAL). Under anbringelsen skal fedt injiceres ved en konstant strømningshastighed ikke hurtigere end 0,5 ml / sek. En 14 gauge kanyle foretrækkes til podning ina mus, men kanyler større diameter kan anvendes uden nogen skade på fedt. Mindre kanyler og nåle-især dem smallere end 16 gauge-afskrækkes under placering, da de kan forårsage fedt sammenbrud på grund af øget forskydningsspænding. Selvom vi beskrive vores foretrukne teknik til behandling af ovenstående som helst kombination af sedimentering, centrifugering og / eller filtrering kan anvendes, så længe olie- og blodprodukter lag er tilstrækkeligt adskilt fra fedtet før podning.

Fat transplantater bør være mindst 200 pi i størrelse for at minimere variansen i resultaterne som følge af den usammenhængende karakter af fedt podning. Større podninger op til 400 pi i størrelse, kan anvendes, men over denne mængde, kan nedsat vaskulær forsyning og overdreven spænding i huden resulterer i fedt og hud nekrose. I sidste ende vil maksimalt fedt graft størrelse bestemmes ved overfladeareal og volumen af ​​lommen. For at øge mængden af ​​en graft, der kan leveres sikkert, den pobedrives via køretøjets kan udvides med mere omfattende dissektion. Imidlertid kan dette sted fedt ud over grænserne for toppen af ​​kraniet, hvilket vil gøre kontrasten mellem implantatet og omgivende væv mindre klar. Derfor vil efterfølgende voxel udvælgelse blive vanskeligere.

Hvis indledende hudincision er lille nok, kan en sutur ikke nødvendigt, så længe fedt forbliver indeholdt og ses ikke siver ud af lommen. Hvis en sutur placeres, skal man passe på ikke at binde den første knude for stramt, ellers kan hudskader forekomme. En ikke-absorberbar monofilament sutur såsom nylon foretrækkes, da det begrænser den inflammatoriske reaktion og er mindre tilbøjelige til at havnen infektion. Re-epitelialisering af snittet vil forekomme inden for 24 til 48 timer postoperativt, og suturen kan fjernes på dette tidspunkt. Absorberbare og flettede suturer bør ikke anvendes. Hud bør altid behandles med den mindste kraft nødvendig, og kirurgen skal sørge for ikke at knuse hudenmens du holder op sårkanterne.

Afhængigt af efterforskerne 'imaging analyse software, kan det nøjagtige forhold mellem pixel intensitet og tætheden af ​​væv variere. Efterforskere skal vælge pixel intensitet tærskler for at opnå en maksimal og minimal område, der mest præcist adskiller fedt transplantat fra det omgivende væv. De samme maksimum og minimum tærskelværdier bør anvendes under al volumen analyser at bevare sammenhængen.

Der er flere metoder til at vælge graft volumen når pixelintensitet tærskelværdier er blevet indstillet. Selvom vi finder male med en pensel værktøj i sagittale opfattelse bedst i vores hænder, andre voxel udvælgelsesmetoder skabe en ROI kan bruges som tegning med spline værktøjet eller maling i aksial visning. Det er at foretrække, hvis en enkelt person udfører alt volumen analyser så konsekvent som muligt for at mindske målingsfejl.

Den ikke-invasive karakter af denne metode og tidstro visualisering af graft evolution giver betydelige fordele i forhold til traditionelle teknikker. Men denne teknik er begrænset i sin evne til at identificere levedygtighed og sundhed rest transplantater. Desuden kan det ikke påvise relative revaskularisering af transplantater. Selvom ændringer i udseende og graft tæthed kan antyde fedt nekrose, infektion, cystedannelse eller likvefaktion, er det vanskeligt at drage præcise konklusioner af mikro-CT alene.

Vi håber, at denne teknik vil tjene som et fundament, som kan gennemføres fremtidige undersøgelser for bedre at forstå de forårsagende faktorer i fedt transplantatoverlevelse og tab. Variationer over dette tema kan belyse den rolle, som stamceller, vækstfaktorer, cytokiner, gener og celleoverflademarkører spille i den endelige konservering af fedt graft volumen. Med denne forbedrede værktøj til at teste kontrasterende hypoteser, ser vi frem til en bedre forståelse af fedt overførsel, der transformerms en lunefuld teknik til behandling af blødt væv underskud i en mere forudsigelig én.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

Denne undersøgelse blev støttet af Oak Foundation, Hagey Laboratorium for Pediatric regenerativ medicin, og National Institute of Health, Grants NIHR21DE019274, NIHR01DE019434, NIHR01DE021683 og NIHU01HL099776 til MTLDCW blev støttet af ACS Franklin H. Martin Faculty Research Fellowship, den Hagey Laboratorium for Pediatric regenerativ medicin, og Stanford University Child Health Research Institute Fakultet Scholar Award. Micro-CT blev udført på Stanford Center for Innovation i In Vivo Imaging.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
SAL lipoaspirate
Centrifuge Beckman Coulter, Inc., Pasadena, CA
50 ml conical tubes BD Biosciences, San Jose, CA
CD-1 nude mice (Crl:CD1-Foxn1nu) Charles River Laboratories, Inc., Wilmington, MA
Isoflurane Henry Schein, Dublin, OH
2.5% Betadine Purdue Pharma, L.P., Stamford, CT
70% Ethanol solution  Gold Shield, Hayward, CA
1cc luer-lock syringe BD Biosciences, San Jose, CA
14 gauge cannula Shippert Medical, Centennial, CO
Forceps Fine Science Tools, Heidelberg, Germany
Tenotomy scissors Fine Science Tools, Heidelberg, Germany
6-0 nylon suture Ethicon, Blue Ash, OH
Phosphate buffered saline Gibco, Carlsbad, CA
micro-CT scanner  Siemens Healthcare, Pleasanton, CA
Phantom  TriFoil Imaging, Northridge, CA
Imaging analysis software IRW, Siemens Healthcare, Pleasanton, CA
Scale  Mettler-Toledo International, Inc., Columbus, OH

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gir, P., et al. Fat grafting: evidence-based review on autologous fat harvesting, processing, reinjection, and storage. Plast Reconstr Surg. 130, (1), 249-258 (2012).
  2. Kaufman, M. R., et al. Autologous fat transfer national consensus survey: trends in techniques for harvest, preparation, and application, and perception of short- and long-term results. Plast Reconstr Surg. 119, (1), 323-331 (2007).
  3. Smith, P., et al. Autologous human fat grafting: effect of harvesting and preparation techniques on adipocyte graft survival. Plast Reconstr Surg. 117, (6), 1836-1844 (2006).
  4. Eppley, B. L., Dadvand, B. Injectable soft-tissue fillers: clinical overview. Plast Reconstr Surg. 118, (4), 98e-106e (2006).
  5. Yarborough, J. M. The treatment of soft tissue defects with injectable collagen. Am J Med Sci. 290, (1), 28-31 (1985).
  6. Baumann, D. P., Butler, C. E. Soft tissue coverage in abdominal wall reconstruction. Surg Clin North Am. 93, (5), 1199-1209 (2013).
  7. Tukiainen, E. Chest wall reconstruction after oncological resections. Scand J Surg. 102, (1), 9-13 (2013).
  8. Zan, T., et al. Surgical treatment of facial soft-tissue deformities in postburn patients: a proposed classification based on a retrospective study. Plast Reconstr Surg. 132, (6), 1001e-1014e (2013).
  9. Bucky, L. P., Percec, I. The science of autologous fat grafting: views on current and future approaches to neoadipogenesis. Aesthet Surg J. 28, (3), 313-321 (2008).
  10. Lee, J. H., et al. The effect of pressure and shear on autologous fat grafting. Plast Reconstr Surg. 131, (5), 1125-1136 (2013).
  11. Kirkham, J. C., et al. The impact of liposuction cannula size on adipocyte viability. Ann Plast Surg. 69, (4), 479-481 (2012).
  12. Medina, M. A., et al. 3rd et al. Polymer therapy: a novel treatment to improve fat graft viability. Plast Reconstr Surg. 127, (6), 2270-2282 (2011).
  13. Horl, H. W., Feller, A. M., Biemer, E. Technique for liposuction fat reimplantation and long-term volume evaluation by magnetic resonance imaging. Ann Plast Surg. 26, (3), 248-258 (1991).
  14. Har-Shai, Y., Lindenbaum, E. S., Gamliel-Lazarovich, A., Beach, D., Hirshowitz, B. An integrated approach for increasing the survival of autologous fat grafts in the treatment of contour defects. Plast Reconstr Surg. 104, (4), 945-954 (1999).
  15. Fontdevila, J., et al. Assessing the long-term viability of facial fat grafts: an objective measure using computed tomography. Aesthet Surg J. 28, (4), 380-386 (2008).
  16. Meier, J. D., Glasgold, R. A., Glasgold, M. J. Autologous fat grafting: long-term evidence of its efficacy in midfacial rejuvenation. Arch Facial Plast Surg. 11, (1), 24-28 (2009).
  17. Coleman, S. R. Structural fat grafts: the ideal filler. Clin Plast Surg. 28, (1), 111-119 (2001).
  18. Coleman, S. R. Structural fat grafting: more than a permanent filler. Plast Reconstr Surg. 118, (3 Suppl), 108S-120S (2006).
  19. Pu, L. L., Coleman, S. R., Cui, X., Ferguson, R. E., Vasconez, H. C. Autologous fat grafts harvested and refined by the Coleman technique: a comparative study. Plast Reconstr Surg. 122, (3), 932-937 (2008).
  20. Matsumoto, D., et al. Cell-assisted lipotransfer: supportive use of human adipose-derived cells for soft tissue augmentation with lipoinjection. Tissue Eng. 12, (12), 3375-3382 (2006).
  21. Yoshimura, K., Suga, H., Eto, H. Adipose-derived stem/progenitor cells: roles in adipose tissue remodeling and potential use for soft tissue augmentation. Regen Med. 4, (2), 265-273 (2009).
  22. Zuk, P. A., et al. Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies. Tissue Eng. 7, (2), 211-228 (2001).
  23. Habte, F., et al. Impact of a multiple mice holder on quantitation of high-throughput MicroPET imaging with and without Ct attenuation correction. Mol Imaging Biol. 15, (5), 569-575 (2013).
  24. Chung, M. T., et al. Micro-computed tomography evaluation of human fat grafts in nude mice. Tissue Eng Part C Methods. 19, (3), 227-232 (2013).
  25. Thanik, V. D., et al. A murine model for studying diffusely injected human fat. Plast Reconstr Surg. 124, (1), 74-81 (2009).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics