קרוב אינפרא אדום (ניר) אור מגביר את הביטוי של דה מרקר של פונקצית מיטוכונדריאלי בעכבר שיווי המשקל החושי האפיתל

1Discipline of Physiology, University of Sydney, 2Discipline of Biomedical Science, University of Sydney
Published 3/14/2015
0 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





By clicking "Submit", you agree to our policies.

 

Summary

תפקוד לקוי של המיטוכונדריה הוא סימן היכר של הזדקנות תאית. מאמר זה משתמש בטיפול לא פולשני קרוב אינפרא אדום (ניר) כדי לשפר את התפקוד המיטוכונדריה בהאפיתל החושית שיווי המשקל עכבר ההזדקנות.

Cite this Article

Copy Citation

Zhang, L., Tung, V. W., Mathews, M., Camp, A. J. Near Infrared (NIr) Light Increases Expression of a Marker of Mitochondrial Function in the Mouse Vestibular Sensory Epithelium. J. Vis. Exp. (97), e52265, doi:10.3791/52265 (2015).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

אסטרטגיות להחלשת ירידה בתפקוד איזון עם עלייה בגיל הם לרוב מתמקדים על טיפולים פיזיים כוללים משימות איזון ופעילות גופנית. עם זאת, גישות אלה אינכם מתייחסים לגורמים הבסיסיים של ירידת איזון. באמצעות עכברים, את ההשפעה של אור אינפרא אדום קרוב (ניר) על חילוף החומרים של תאים באפיתל החושי שיווי המשקל הוערכה. הנתונים שנאספו מראה כי התערבות פשוטה ובטוחה זה עשויה להגן על תאים פגיעים אלה מההשפעות המזיקות של הזדקנות טבעית. mRNA היה שחולץ מן האפיתל המבודד ההיקפי שיווי המשקל החושי (ampullaris Crista והמקולה utricular) ועבד לאחר מכן לתוך ספריית cDNA. ספרייה זו ולאחר מכן נחקר לביטוי של נוגדי חמצון בכל מקום (SOD-1). ביטוי גנים נוגד חמצון היה אז בשימוש לכמת את חילוף החומרים תאיים. באמצעות משלוח transcranial של ניר בצעיר (4 שבועות) ומעלה (8-9 חודשים) עכברים, ומשטר טיפול קצר (90 שניות / יום במשך 5 דays), עבודה זו מצביעה על ניר לבד עשוי להיות מספיק כדי לשפר את התפקוד המיטוכונדריה בהאפיתל החושית שיווי המשקל. מאז אין כיום שיטות זמינות, זולות, לא פולשנית של טיפול כדי לשפר את תפקוד תא שיער שיווי המשקל, היישום של קרינת ניר חיצונית מספק אסטרטגית פוטנציאל כדי לנטרל את השפעת הזדקנות על חילוף חומרים בתאים אפיתל ביישום לוח החושי שיווי המשקל.

Introduction

ירידת ביצועי איזון ונפילות שלאחר מכן הם נפוצות, ותכונות למרבה הצער לעתים קרובות הגדרה של הזדקנות טבעית 1. ההשפעה של ירידה זו יכולה להיות גם פיזית וחברתית, ומפחית באופן משמעותי את איכות חיים של אנשים מבוגרים. בתגובה, טיפולים ושיקום פיזיים היו מוקד המחקר לנפילות, אך לא היו קשורים עם ירידה עקבית בשכיחות של נפילות חוזרות ונשנות. במקביל, עבודה חוקרת שינויים במערכת ההיקפית או מרכזית שיווי המשקל (המערכת אחראית ללשמור על איזון) היא נדיר, ואסטרטגיות טיפוליות פוטנציאל מיקוד מערכות אלה וסיבות הגורמות לחוסר איזון מוגבל.

מחקר שנערך לאחרונה על הפרעות ניווניות גיל הקשורים כוללים התנוונות הקשורות לגיל מקולרי 2-4, המודלים למחלת אלצהיימר 5-8, ומחלת פרקינסון 9-12 הראה השפעות נוירו של simple יישום לא פולשנית של אינפרא אדום הקרוב אור (ניר). יתר על כן, במערכת שיווי המשקל, ניר נעשה שימוש כדי להגדיל את הפעילות של תאי עצב הביא עיקריים שיווי המשקל במבחנה 13. בעוד המנגנון של אור ניר אינו מובן היטב, רוב המחקרים משתמשים בניר הציעו שניר מגרה IV המיטוכונדריה המורכב (מונואמין ג ציטוכרום) 14-17 כדי להקל על חילוף חומרים תאיים. בהאפיתל החושית שיווי המשקל צלחת subcuticular של תאים לי שיער סוג היא צפופה במיטוכונדריה 18 ובתור שכזו עשויה לייצג אתר של פעולה לטיפול בניר טיפולי.

כאן, משטר קצר, לא פולשנית טיפול בtranscranially מיושם ניר, שניתן להשתמש כדי למדוד את חילוף החומרים תאיים (ובמשתמע, פונקציה של המיטוכונדריה) בהאפיתל החושית שיווי המשקל העכבר מתואר. דן גם היא הכנה של האפיתל החושית שיווי המשקל והוא הראה כי ניר מגביר את הביטוי של ubiquitoשלנו נוגד חמצון (סופראוקסיד דיסמוטאז 1) בהאפיתל החושית - הראה בעבר להיות חשוב להישרדות תא שיער שבלול 19.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

הצהרת אתיקה: כל הנהלים המפורטים להלן אושרו על ידי האוניברסיטה של ​​ועדת האתיקה בעלי החיים סידני.

1. בעלי חיים

הערה: 1 ו -8 - עכברי 9 חודשים ישנים (C57 / BL6) התקבלו ממרכז המשאבים לבעלי החיים (פרת ', אוסטרליה). עכברים שוכנו במתקן Bosch מכרסם באוניברסיטת סידני.

  1. עכברי בית בכלובי עכבר סטנדרטיים ב12/12 hr מחזור אור / חושך עם גישה כלרצונך מזון ומים.
  2. עכברי Divide בכל קבוצת גיל לאינפרא אדום קרוב (ניר) שטופלו, או טיפול דמה קבוצות (שליטה) להשוואה.

2. קרוב אינפרא אדום (ניר) הקרנה ושאם טיפול

  1. לגלח את הפרווה באזור הראש והצוואר של העכבר עם מכונת גילוח חשמלי, ככל האפשר, כדי למנוע צמיחה מחודשת של שיער מהירה לפני השלמתו של משטר הטיפול. על מנת לשמור על הסטטוס-הפתוגן ללא של העכברים, להשתמש אתנול 70%לנקות מכשירים בין בעלי חיים גילוח וחיטוי וטרינרי F10 בין בעלי חיים מכלובים נפרדים. האם 2 זה - 3 ימים לפני תחילת טיפול ולכן בעלי החיים הם לא-מטופלים מעל.
  2. לרסן את העכבר על ידי הלחיצה על הקצה הפרוקסימלי של הזנב ולאפשר לו להירגע בכף העליונה מחד או ספסל כדי למזער את הלחץ שעלולה להוביל לתוצאות שווא.
  3. החזק את ניר (670 ננומטר) LED (דיודה פולטת אור) מכשיר 1 - 2 סנטימטרים מהאזור החשוף (מגולח) והפעל את ההתקן למשך 90 שניות (איור 1 א).
    הערה: שינוי הטמפרטורה כתוצאה מחשיפת 90 שניות נמדדה כ< 0.2 מעלות צלזיוס במי 100 מיליליטר.
  4. חזור על שלבים 2.2-2.3 לקבוצת טיפול דמה של בעלי חיים, אלא להשאיר את המכשיר כבוי (איור 1).
  5. חזור על שלבים 2.2-2.3 לקבוצת הטיפול החסומה-ניר של בעלי חיים, אלא לכסות את המכשיר בנייר אלומיניום.
  6. חזור על שלבים 2.2-2.5 יומיים בapproximatדואר 24 מרווחי שעות במשך 5 ימים רצופים.
  7. חלץ את האפיתל שיווי המשקל חושי (3 cristae והמקולה 1 utricular) משני האוזניים שבלאחר טיפול היום החמישי (ראה סעיף 3 להלן).

3. הפקת רקמות 20

  1. הכן 300 מיליליטר של מבוסס גליצרול מלאכותי נוזל השדרתי (ACSF) בהיקף של (מ"מ): 26 NaHCO 3, גלוקוז 11, 250 גליצרול, 2.5 KCl, 1.2 Nah 2 PO 4, 1.2 MgCl 2, ו -2.5 CaCl 2. לפני התוספת של CaCl 2, גז הפתרון עם carbogen (95% O 2, 5% CO 2) להקים pH של 7.4 ולהימנע ממשקעי סידן (עננות). צ'יל הפתרון במקפיא C -80 ° במשך 45 דקות כדי שslurry קרח נוצר.
  2. הכן את חיץ תמוגה בידוד RNA בmicrotubes בורג בראש שכותרתו (מפסיק הנפץ של עפעפיים כאשר לחץ צינור שינויים בין ההקפאה והפשרה בחנקן נוזלי) על פילהוראות היצרן או נהלי מעבדה רגילים. יש לי חנקן נוזלי מוכן בבקבוק דיואר אלומיניום.
    הערה: השתמש בבגדים וeyeware מגן בעת ​​טיפול בחנקן נוזלי. ודא שחנקן נוזלי משמש בחדר מאוורר היטב כנפח של צורת הגז שלה הוא כ -700 פעמים כי המצב הנוזלי שלה ויכול לגרום לחנק.
  3. עמוק לטשטש עכברים עם קטמין (400 מ"ג / קילוגרם) באמצעות הזרקה תוך הצפק. לאפשר לרפלקס האחורי-האיבר להתפוגג לחלוטין כסימן לכך שעכברים בהרדמה מלאה.
  4. לערוף עכברים עם מספריים נירוסטה חדים ולעשות חתך לאורך עור sagittal של הגולגולת באמצעות סכין גילוח (מעוגל # 22). בשלב זה ובכל רחבי הצעדים 3.5-3.9, לשמור על קמרון הגולגולת, מוח, ומכשירי שיווי המשקל הבסיסיים מגניב ככל האפשר על ידי יישום רגיל של ACSF קר כקרח על הרקמה.
  5. באמצעות הזרוע המחודדת של מספריים דפוס סטנדרטיים לעשות smalחתך l בגולגולת בLambda ולחתוך לאורך תפר sagittal.
  6. חלק בעדינות זרוע אחת של rongeurs רדוד מתחת לעצם הקודקודית שמירת הלהב הקרוב ככל האפשר אל פני השטח הנחות של העצם ללא גרירת המוח. בטוח ולהתרחק עצם הקודקודית רוחבי והעצם העורף בדיעבד, עד שהמוח חשוף.
  7. השתמש במרית נירוסטה קטנה ולהרים את המוח מקדמי והפוסות גולגולת אמצע לחשוף את עצב השמיעה ושיווי המשקל (CN VIII). Transect העצב כדי למנוע מתחים מיותרים על האקסונים הביא העיקריים שמעצבבים ישירות את תאי שיער שיווי המשקל.
  8. הסר את המוח בטוטו לאחר חיתוך רוחב של CN VIII.
  9. שים לב המבוך הגרמי המכיל את השבלול ואיברי שיווי המשקל ההיקפיים בהפוסות גולגולת האמצע. לעשות שני חתכים קטנים ליד כל מבוך גרמי, ולהסיר את כל המבנה על ידי לחיצה על התעלה חצי עגולה הקדמית ומושך מאוחר יותרברית.
  10. מייד לטבול במבוכים נכרתו בצלחת לנתח מכילה פתרון ACSF קר כקרח (כמתואר בשלב 3.1) ואילו מרוסס ברציפות עם carbogen.
  11. תחת סטראו, החזק את המבוך על ידי השבלול ולאבטח אותו לתחתית הצלחת עם מלקחיים.
    1. שימוש במלקחיים ישר קנס לגרד פתח קטן בעצמות מעל ampulla הקדמי תעלה חצי עגולה (SSC).
    2. בעדינות להגדיל פתיחה זו על ידי להגיע מייד מתחת לעצם ומצליף כלפי חוץ רחוק מampulla. נהג במשנה זהירות כאן לא לדחוף מלקחיים לתוך הפתח ולפגוע במבוך הקרומי השביר להלן. המשך בדרך זו עד utricle, הקדמי וampullae לרוחב כל חשופים. אם אפשר להסיר את ampulla האחורי גם.
  12. באמצעות מלקחיים עדינים, בעדינות להרים את utricle וampullae מהמבוך הגרמי עד שהם מנותקים לחלוטין. במידת האפשר, להחזיק אותםעל ידי תעלות בצורת חצי עיגול הקשורים בם כדי למנוע נזק לאפיתל החושי. במקרים מסוימים, החלק הפרוקסימלי של הצינור בצורת חצי עיגול הקרומי ייתכן שיהיה הצורך לגזור במספריים איריס לשחרר ampullae מהעצם.
  13. באופן מאובטח לתפוס את איברי שיווי המשקל בין קצה המלקחיים והמקום למאגר תמוגה הכין קודם לכן בשלב 3.2. מערבולת בעדינות את המלקחיים סביב במאגר כדי להבטיח איברי שיווי המשקל שמנותקים מהמלקחיים. בדקו זה המקרה על ידי הבאת המלקחיים תחת stereomicroscope.
    1. לדפוק על מכסה microtubule ולהקפיא את המדגם בחנקן נוזלי באופן מיידי.

4. הפקת RNA וRT-PCR

  1. עקוב שיטות סטנדרטי להפקת שליח RNA (mRNA) על פי הוראות יצרן או פרוטוקולי מעבדה מועדפים.
    הערה: ערכה מסחרית שנוצלה RNAs ספק לעזור לבודד תשואות קטנות של mRNA שימשה בזהפרוטוקול. כרכי elution תחתון ניתן להשתמש כדי להגדיל את הריכוזים סופיים של mRNA.
    הערה: בקרות שליליות "אין אנזים" (NECs) ובקרות "אין תבנית ה- DNA" (NTCs) גם יש להשלים כדי להבטיח תוקפו של השפעות שנצפו.
  2. ליישם שיטות סטנדרטית של שעתוק לאחור של mRNA ל- DNA משלים (cDNA) והגברה של גני המטרה 21-23.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

כדי להשוות את ההשפעה של טיפול בניר צעיר (4 שבועות) ומעלה (8-9 חודשים) עכברים מדדנו את הביטוי של סופראוקסיד דיסמוטאז נוגד חמצון 1 (SOD-1) בצעיר (n = 16) ומעלה (n = 20) עכברים שטופלו היו ניר, שטופל דמה, או חסום-ניר. איור 2 מראה גידול משמעותי בביטוי β-אקטין מנורמל SOD-1 של יותר מ פי 2 בבעלי חיים צעירים שטופל ניר בהשוואה לבעלי חיים שטופל בדמה צעיר (P <0.01) ובעלי חיים חסומים-ניר צעיר (p <0.01). בעלי חיים שטופלו ניר מבוגר הראו גם יותר מ 2-לקפל-רגולציה של SOD-1 בהשוואה לבעלי חיים מבוגרים חסומים-ניר (p <0.05).

איור 1
איור 1. ניר טיפול. () ניר LED מכשיר החזיק 1-2 סנטימטר מעל האזור המגולח על ראשו של העכבר למשך 90 שניות בכל יום במשך 5 ימים רצופים בגיד קרינהעכברי טד. (B) ניר LED מכשיר החזיק מעל עכברים שטופל בדמה באותה הדרך אבל עם המכשיר כבוי למשך 90 שניות. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 2
איור 2. ניתוח של ביטוי גנים SOD-1 לאחר 5 ימים רצופים של טיפול ניר (90 שניות / יום). האפיתל החושית שיווי המשקל היה לקצור ביום החמישי והגן נוגד חמצון ספציפי חקר לבאמצעות RT-PCR. גן SOD-1 מנורמל לβ-אקטין תחילת המחקר ובצפיפות שנערכה באמצעות v1.48 ImageJ. עד-רגולציה משמעותית (p <0.01) ביטוי SOD-1 נצפתה בבעלי חיים שטופלו ניר צעירים בהשוואה לשתי צעירים שטופל דמה ובקרות צעירות חסומות-ניר (4 שבועות). וגידול משמעותי (p60 #; 0.05) בביטוי SOD-1 נצפו גם בבעלי חיים מבוגרים שטופל ניר בהשוואה לבעלי חיים מבוגרים חסומים-ניר (8-9 חודשים). כל הגרפים מראים את שינוי הקיפול של ביטוי גנים SOD-1 לעומת השליטה טופל הדמה הצעירה. הנתונים מייצגים ממוצע ± SD. כל הנתונים נותחו באמצעות ANOVA חד-כיווני ומשמעות סטטיסטית נקבעה באמצעות ההשוואה מרובה של Tukey פוסט-הוק בדיקה. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

תוצאות הנציג המתוארות כאן מראות כי מסירה קצרה transcranial של אור ניר (90 שניות / יום למשך 5 ימים) מספיקה כדי להעלות את רמות ביטוי של נוגדי חמצון בעכברים מבוגרים בהשוואה לעכברים שטופל בדמה. בעוד חום הנפלט יכול לייצג מקור של המיטוכונדריה ו / או הפעלה עצבית, כפי שדווח לשיווי משקל החולדה afferents 24 - מדידת החום הנפלט על ידי ניר שלנו LED מכשיר היה <0.2 מעלות צלזיוס במשך 90 שניות, ובתור שכזו היא לא תגרום ל שינויים שתוארו כאן. יתר על כן, בניגוד לדו"ח הדגיש לעיל, טיפול ניר משמש כאן לא מיושם ישירות האפיתל החושית או נוירונים מביא שיווי המשקל, ובתור שכזו הוא גם לא סבירה שישפיע על תרמו ערוצים רגישים (למשל, TRPV4). לבסוף, העבודה קודמת תוך שימוש באותו מכשיר ניר באזורים אחרים במוח הראו כי חום לא היה המקור להבדלים שנצפו 7,9.

בעוד resu אלהLTS להראות עד-רגולציה של תגובות תאיות לסטרס החמצונים הקשורים בגיל ברמה הגנטית, זה לא ברור אם שינויים אלה באים לידי ביטוי נוסף ברמת החלבון, או חשוב מכך, בין אם הם באים לידי ביטוי בביצועי המאזן הכוללים של עכברים. בנוסף, עד-הרגולציה מוצגת לנוגד חמצון בכל מקום אחד. סביר להניח כי סמנים מרובים של חילוף חומרים תאיים מושפעים משטר טיפול זה. יתר על כן, מאז mRNA היה שחולץ ממנגנון שיווי המשקל בטוטו (כלומר, תאי שיער, תאי תמיכה, afferents ואפיתל כל הנוכחים שיווי המשקל) שלא ניתן להתייחס לשיער שיווי המשקל מסוים שינויים שנצפו בחילוף חומרים תאיים בתגובה לטיפול אור ניר תא או סוג הביא עיקרי. חשוב מכך, שימוש בmRNA מספיק ההכנה המתוארת ניתן לחלץ מעכבר אחד, כדי לאפשר מחקרי מתאם עתידיים בין חילוף חומרים תאיים וניתוח התנהגות של perfo המאזןrmance.

מכשיר העצמה הגבוה LED המשמש כאן פולט כ 5 J / 2 סנטימטר להיקף של 90 שניות treatment- 25 J של אנרגיה על פני 5 ימים. בעוד את היתרון של השימוש באור באורך הגל ארוך (כוללים ניר) הוא penetrance, זה לא יכול להניח כי 25 J מלא אור ניר מועבר להאפיתל החושית שיווי המשקל. בעכבר, אור חייב לחדור לפחות 1 מ"מ דרך שכבות של רקמות ועצמות רכות המגנות על מנגנון שיווי המשקל ההיקפי והמוח. בבני אדם זה משתרע על סנטימטרים. כך penetrance האור מייצגת הגבלה של הטכניקה המתוארת בכל הקשור לתרגום של אסטרטגיות טיפול אור ניר להגדרה הקלינית. מחקר שנערך לאחרונה עם זאת העסיק סיבים אופטיים כדי להעביר את אור ניר למבני מוח עמוקים כוללים גרעיני הבסיס 25, ואברי חישה כוללים השבלול 26. על בסיס זה ומיקומו של מנגנון שיווי המשקל ההיקפי סמוך לשבלול (וגישה קלינית אליו דרך תהליך הצדע), זה אפשרי להציע שבאדם, גירוי ישיר של האפיתל החושית שיווי המשקל יכול להיות מושגת באמצעות סיב אופטי קטן מופעל על ידי התקן חיצוני - דומה לשתל שבלול 27 .

ניתן לשנות כמה תנאים בפרוטוקול שתואר לעיל כדי להתאים לאינטרס של החוקר. ראשית, אורך הגל המשמש כאן (670 ננומטר) ניתן להאריך לכלול אורכי גל ארוכים יותר בטווח האינפרא אדום כפי שדווח בעבר במערכות חושיות אחרות ומודלים של בעלי חיים. שנית, יכולים גם להיות מגוונים משטרי טיפול, תלויים אם לטווח קצר או תגובה לטווח ארוך היא בשאלה. כאן משטר טיפול קצר מאוד נוצל, אבל זה יכול להיות מורחב לתקופות ארוכות, או משכי זמן קצרים עוד יותר למדוד את הדינמיקה של שינויי ניר מושרה.

האתגר העיקרי של פרוטוקול זה הוא לשמור על יכולת הקיום של הרקמהבמהלך חילוץ רקמות. בהתחשב בזמן הנדרש כדי להסיר את המבוך הגרמי, ולהסיר את המבוך הקרומי מזה, זה הוא קריטי להפחתת התמוטטות חילוף חומרים. זו מושגת על ידי רחצה ברקמת ACSF קר כקרח לאורך כל ההליך ומרוסס פתרון זה ברציפות עם carbogen. בנוסף, בסוף ההליך לנתיחה, ניוון רקמות יכול להפסיק עם השימוש בחנקן נוזלי כדי הבזק להקפיא הרקמה שחולצה. בעת צורך, הרקמה הקפואה יכולה להיות מופשרת וmRNA חילוץ לניתוח גנטי נוסף.

למרות שהשיטות שתוארו כאן אינן מתארות את ההשפעה המלאה של טיפול באור ניר על חילוף חומרים תאיים בהאפיתל החושית שיווי המשקל, בהמשך יישום אסטרטגיה זו יכול להיות שונה כדי לכלול סמנים הקשורים בגיל אחר של תפקוד המיטוכונדריה 28,29 ו / או מטבולים סלולריים עלבונות כגון היפוקסיה 30. סופו של דבר, את היכולת לתאר את vפרופיל המטבולי סלולארי estibular של עכבר בודד יאפשר החקירה של המתאמים בין ביצועי איזון ותהליכי subcellular במהלך הזדקנות, ואת ההשפעה של תרופות כוללים טיפול ניר.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

Acknowledgements

המחברים מבקשים להודות ד"ר פול ויטינג והגב 'ז'נבייב פונג על סיועם בחילוץ mRNA וPCR, ומאט גארנט ורודני וויליאמס זיכרון הקרן לתמיכה.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Quantum WARP 10 Quantum Devices 2070N030-A
Screw top microtubules Quality Scientific Plastics 520-GRD-Q
Ketamine Parnell, Alexandria Australia
Standard pattern scissors FST 14001-12
Carbon steel surgical blades #22 Livingstone SBLDCL 22
Friedman-Pearson rongeurs FST 16221-14
Stereo microscope Leica Microsystems A60S
Dumont #5 SF forceps FST 11252-00
Isolate II RNA Micro Kit Bioline BIO-52075

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Agrawal, Y., Carey, J. P., Della Santina,, C, C., Schubert, M. C., Minor, L. B. Disorders of balance and vestibular function in US adults: data from the National Health and Nutrition Examination Survey, 2001-2004. Archives of internal medicine. 169, 938-944 (2009).
  2. Bessho, K., et al. Effect of subthreshold infrared laser treatment for drusen regression on macular autofluorescence in patients with age-related macular degeneration. Retina. 25, 981-988 (2005).
  3. Olk, R. J., et al. Therapeutic benefits of infrared (810-nm) diode laser macular grid photocoagulation in prophylactic treatment of nonexudative age-related macular degeneration: two-year results of a randomized pilot study. Ophthalmology. 106, 2082-2090 (1999).
  4. Rodanant, N., et al. Predictors of drusen reduction after subthreshold infrared (810 nm) diode laser macular grid photocoagulation for nonexudative age-related macular degeneration. American journal of ophthalmology. 134, 577-585 (2002).
  5. De Taboada, L., et al. Transcranial laser therapy attenuates amyloid-beta peptide neuropathology in amyloid-beta protein precursor transgenic mice. Journal of Alzheimer's disease : JAD. 23, 521-535 (2011).
  6. Grillo, S. L., Duggett, N. A., Ennaceur, A., Chazot, P. L. Non-invasive infra-red therapy (1072 nm) reduces beta-amyloid protein levels in the brain of an Alzheimer's disease mouse model. TASTPM. Journal of photochemistry and photobiology. B, Biology. 123, 13-22 (2013).
  7. Purushothuman, S., Johnstone, D. M., Nandasena, C., Mitrofanis, J., Stone, J. Photobiomodulation with near infrared light mitigates Alzheimer's disease-related pathology in cerebral cortex - evidence from two transgenic mouse models. Alzheimer's researc., & therapy. 6, 2 (2014).
  8. Sommer, A. P., et al. 670 nm laser light and EGCG complementarily reduce amyloid-beta aggregates in human neuroblastoma cells: basis for treatment of Alzheimer's disease. Photomedicine and laser surgery. 30, 54-60 (2012).
  9. Moro, C., et al. Photobiomodulation preserves behaviour and midbrain dopaminergic cells from MPTP toxicity: evidence from two mouse strains. BMC neuroscience. 14, 40 (2013).
  10. Peoples, C., et al. Photobiomodulation enhances nigral dopaminergic cell survival in a chronic MPTP mouse model of Parkinson's disease. Parkinsonis., & related. 18, 469-476 (2012).
  11. Shaw, V. E., et al. Neuroprotection of midbrain dopaminergic cells in MPTP-treated mice after near-infrared light treatment. The Journal of comparative neurology. 518, 25-40 (2010).
  12. Ying, R., Liang, H. L., Whelan, H. T., Eells, J. T., Wong-Riley, M. T. Pretreatment with near-infrared light via light-emitting diode provides added benefit against rotenone- and MPP+-induced neurotoxicity. Brain research. 1243, 167-173 (2008).
  13. Rajguru, S. M., et al. Infrared photostimulation of the crista ampullaris. The Journal of physiology. 589, 1283-1294 (2011).
  14. Chung, H., et al. The nuts and bolts of low-level laser (light) therapy. Annals of biomedical engineering. 40, 516-533 (2012).
  15. Desmet, K. D., et al. Clinical and experimental applications of NIR-LED photobiomodulation. Photomedicine and laser surgery. 24, 121-128 (2006).
  16. Huang, Y. Y., Chen, A. C., Carroll, J. D., Hamblin, M. R. Biphasic dose response in low level light therapy. Dose-response : a publication of International Hormesis Society. 7, 358-383 (2009).
  17. Rojas, J. C., Gonzalez-Lima, F. Low-level light therapy of the eye and brain. Eye and brain. 3, 49-67 (2011).
  18. Vranceanu, F., et al. Striated organelle, a cytoskeletal structure positioned to modulate hair-cell transduction. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109, 4473-4478 (2012).
  19. Johnson, K. R., et al. Separate and combined effects of Sod1 and Cdh23 mutations on age-related hearing loss and cochlear pathology in C57BL/6J mice. Hearing research. 268, 85-92 (2010).
  20. Tung, V. W., Di Marco, S., Lim, R., Brichta, A. M., Camp, A. J. An isolated semi-intact preparation of the mouse vestibular sensory epithelium for electrophysiology and high-resolution two-photon microscopy. Journal of visualized experiments : JoVE. e50471 (2013).
  21. Kirby, J., Menzies, F. M., Cookson, M. R., Bushby, K., Shaw, P. J. Differential gene expression in a cell culture model of SOD1-related familial motor neurone disease. Human molecular genetics. 11, 2061-2075 (2002).
  22. Parry, S. N., Ellis, N., Li, Z., Maitz, P., Witting, P. K. Myoglobin induces oxidative stress and decreases endocytosis and monolayer permissiveness in cultured kidney epithelial cells without affecting viability. Kidney and Blood Pressure Research. 31, 16-28 (2008).
  23. Saee-Rad, S., et al. Analysis of superoxide dismutase 1, dual-specificity phosphatase 1, and transforming growth factor, beta 1 genes expression in keratoconic and non-keratoconic corneas. Molecular vision. 19, 2501-2507 (2013).
  24. Albert, E. S., et al. TRPV4 channels mediate the infrared laser-evoked response in sensory neurons. Journal of neurophysiology. 107, 3227-3234 (2012).
  25. Moro, C., et al. Photobiomodulation inside the brain: a novel method of applying near-infrared light intracranially and its impact on dopaminergic cell survival in MPTP-treated mice. Journal of neuroscience. 120, 670-683 (2014).
  26. Moreno, L. E., et al. Infrared neural stimulation: beam path in the guinea pig cochlea. Hearing research. 282, 289-302 (2011).
  27. Curthoys, I. S. A red thread as a guide in the vestibular labyrinth. The Journal of physiology. 589, 1241-1241 (2011).
  28. Chakrabarti, S., et al. Mitochondrial Dysfunction during Brain Aging: Role of Oxidative Stress and Modulation by Antioxidant Supplementation. Aging and disease. 2, 242-256 (2011).
  29. Petrosillo, G., De Benedictis, V., Ruggiero, F. M., Paradies, G. Decline in cytochrome c oxidase activity in rat-brain mitochondria with aging. Role of peroxidized cardiolipin and beneficial effect of melatonin. Journal of bioenergetics and biomembranes. 45, 431-440 (2013).
  30. Zhu, H., Sun, A., Zou, Y., Ge, J. Inducible metabolic adaptation promotes mesenchymal stem cell therapy for ischemia: a hypoxia-induced and glycogen-based energy prestorage strategy. Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology. 34, 870-876 (2014).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Video Stats