척수 압축 부상의 보정 집게 모델

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McDonough, A., Monterrubio, A., Ariza, J., Martínez-Cerdeño, V. Calibrated Forceps Model of Spinal Cord Compression Injury. J. Vis. Exp. (98), e52318, doi:10.3791/52318 (2015).

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Abstract

쥐의 척수의 압축 손상은 척수 손상 (SCI) 및 척수 재생 치료의 연구를위한 귀중한 동물 모델입니다. 압축 부상 셉 캘리브레이션 모델은 SCI에 대한 편리한 저비용, 매우 재현성 동물 모델이다. 우리는 Plemel 등에 의해 발표 된 방법에 따라 수정 된 포셉 쌍을 사용 하였다. (2008)의 측 방향으로 0.35 mm의 간격으로 척수를 압축. 이 비디오에서는, 우리는 수정 된 집게와 척수의 압축 다음에 척수를 노출 지느러미 후궁 절제술을 시연 할 예정이다. 비디오, 우리는 또한 하반신 마비 실험 동물의 관리와 관련된 문제를 해결합니다. 이 상처 모델에서 감각 장애뿐만 아니라 장애 뒷다리 된 운동 기능을 나타내는 생쥐를 생산한다. 면역 조직 화학 방법에 의해 결정되는 바와 같이 또한, 부상이 방법은, SCI의 병리학 일관된 수차를 생성한다. 이 장해를보고 한 후EO, 시청자들은 손상 후 손상을 완화하기위한 SCI 및 / 또는 치료에 대한 연구에 대한 마우스의 다양한 심각도의 SCI 생산에 필요한 소모품 및 방법을 결정 할 수 있어야한다.

Introduction

SCI의 동물 모델은 척수 외상의 결과로서 데미지를 완화하기위한 치료 패러다임의 효능을 평가하기위한 유용한 도구이다. 실험적인 필요에 의해,이 모델은, 전위의 감각 행동에 재현 적자를 제공하는 정도가 다른 부상을 생산 조정, 그리고 그 손상 정도를 관찰 신경 학적 결손의 정도와 상관 관계를 보여 주어야합니다. 절개, 타박상 및 압축 1 : 별개의 부상의 기능 SCI의 세 가지 주요 유형이 있습니다. 간략하게, 절개 부상 척수에 열상이, 타박상 손상은 등쪽 척수인가 짧은 초점 힘으로부터 발생하고, 압축 부상 유해한 힘 척수에인가 될 때 발생하며, 또한 수있다 압박 손상이라고도합니다.

전체 절개 부상은 타박상하면서, 인간 세에 임상 적으로 드문D 압축 부상은 일반적이다. 압축 부상 예, 종양 또는 기타 유해한 압축 압축력 들면, SCI 의한 인간에서 발견되는 것과 유사한 결과를 생성하고, 도구의 간단한 배열을 사용하여 수행 될 수있다. 타박상 및 압축 부상 모두 압축력이며 모두 같은 cytoarchitectonic 해체 유사한 병리 적 기능을 갖는 것을 유사하고, 부상 1,4 유사한 내인성 반응을 불러 일으킨다. 타박상 손상 모델은 일반적으로 척주의 2,5,6 박힘 SCI 인한 인간의 경우와 유사한 방식으로 특수 장치를 사용 등쪽 척수이 힘을인가한다. 대조적으로, 압축은 등쪽에 부상 또는 측 방향으로 힘을 가하는 다양한 방법에 의해 생성 될 수있다. 압축 부상 방법 집게 7 동맥류 클립 2를 보정하거나, 척수에 직접 8 중량을 배치하는 것을 포함한다. 의 장점동맥류 클립들은 힘 (9)의 다른 양을 제공 할 수 있다는 것이다. 척수 직접 8의 등 표면에 가중치를 부가하는 방법이 크게 기인의 호흡에 의한 중량 움직임의 위치에 수술의 길이를 증가시키고, 불일치의 결과, 10 분에서 이루어져야 웨이트를 필요 동물. 이로 인해 타박상 부상 impactors로서 래트에서 사용하기 위해 특별히 설계 한 장치에서 동물을 얻으면 마우스의 작은 크기,하기 어려울 수도 있고, 일관성 부상 7 초래한다. 그러나 마우스는 SCI 연구에 매우 유용 등 쥐나 토끼 같은 큰 동물과는 달리, 형질 전환 균주의 넓은 범위에서 사용할 수 있습니다.

척수를 압축하도록 조정 집게를 사용 Plemel 방법은 중증도 및 신경 학적 결손 (7) 사이의 상관도가 높은 재현성 SCI를 생성한다. 이 수술 SCI 모델은중 금속 에폭시 또는 완전한 폐쇄를 방지하기 위해 다른 장애물에 의해 정의 된 거리에 떨어져 개최 수정 제 5 호 뒤몽 포셉 한 쌍을 사용하여 생성. 이 설계 간격은 보장이는 항상 여러 수술의 특정 폭에 가까운 다른 사용자가 집게. Plemel 방법의 장점은 교정 집게를 생성하는 재료를 쉽게 구입 특수 장비의 필요없이 실험실에서 조립 될 수 있다는 것이다. 이러한 집게 오토 클레이브 멸균의 다수의 라운드를 견딜 수 있으며, 별도의 장치의 부피가 부족 수술을 간소화.

이 비디오에서 우리는 압축 부상을 생성하기 위해 마우스 척수에 교정 포셉 한 쌍의 수술 적으로 사용하는 방법을 보여줍니다. 우리는 또한 수술 후 삶의 질을 향상시키고 사망률을 줄이기 위해 척수 손상 실험 동물의 관리와 관련된 고유 한 문제를 해결.

Protocol

모든 동물 절차 및 동물 관리 방법은 기관의 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 승인을 받아야한다.

1. 수술 준비

  1. 집게, 바나 가위, roungeurs, 견인기, 메스, 가위, 봉합, 피부 스테이플, Q-팁, 멸균 식염수, 수술 스폰지, 이소 플루 란 : 필요한 모든 수술 도구와 시약을 조립합니다. 준비 및 수술에 앞서 수술 도구의 전체 팩을 압력솥. 하나 이상의 마우스에 수술을 수행하는 경우, 준비하고 동물 당 도구를 하나의 패킷을 오토 클레이브, 또는 수술 도구의 하나의 패킷을 압력솥과 수술 사이에서 도구 살균 소독. 유리 비드 공구 terilizer가 그 사이 수술 (5 동물 후에 툴 다시 청소해야하고 사용 전에 멸균) 도구를 청소하는 데 사용되는 경우 일반적으로 멸균 도구 중 하나 팩 마우스 5 마리까지 사용할 수있다. instituti 해당 지역의 IACUC 관리자에게 문의하시기 바랍니다특정 가이드 라인에.
  2. 70 % 이소 프로필 알코올 물티슈 수술 부위를 소독. 멸균 필드가 수술 중 유지하기 위해 외과 용 드레이프를 설정합니다.
  3. 수술에 앞서 각 마우스의 무게를. 피하, 부 프레 노르 핀 0.05 mg / kg (체중)의 투여 량을 관리.
  4. 이소 플루 란 기계의 유도 챔버에 4 % 용량으로 이소 플루 란을 투여함으로써 동물을 마취.
  5. 동물 마취되면, 탈수를 방지 37 ° C에서 가열 패드에 동물을 설정하고, 마우스의 머리가 제대로 마취 콘에 위치해 있는지 확인하기 위해 눈에 연고를 적용합니다. (참고 : 열 화상의 원인이되지 않습니다 가열 원을 사용하여, 즉, 순환 담요, 뜨거운 물 병, 또는 이에 상응하는..)이 시점에서 동물에 2 % 이소 플루 란의 복용량을 관리 할 수 있습니다.
  6. 마우스의 의도 절개 위치 주위에 약 1cm를 등쪽 표면을 면도.
  7. 절개의 소독요오드 용액 (10 % 포비돈 - 요오드, 요오드 가능한 1 %)로 한 후, 70 % 이소 프로필 알코올로 세정 와이프 ​​ITE. 3 번 반복합니다.

2. 등쪽 척추 후궁 절제술

  1. 절개를하기 전에 동물이 제대로 발가락 또는 꼬리 핀치 방법을 사용하여 반사를 확인하여 마취되어 있는지 확인합니다.
  2. 메스 블레이드와 등쪽 척추를 따라 절개를 한 다음 다시 반사를 확인합니다. 제대로 도움 척추골 사이의 경계 같은 랜드 마크를 시각화하기 위해 다시 아치.
  3. 피부를 통해 잘라. 다시 척수에서 피부와 근막을 유지하기 위해 견인기를 삽입합니다. 척추를 덮고있는 근육을 노출 척수의 양쪽에있는 조직을 취소합니다.
    참고 : 외과 의사가 해부학에 대해 잘 알고 있어야합니다. 예를 들어, 견갑골 하부 T7 각도로 대응한다. 마우스의 척추의 자연스러운 곡선의 상단은 T12이고 기준점으로 사용될 수있다.
  4. 페이지로로퍼 조명, 척추골 사이의 공간을 결정한다. T10의 후방 끝을 찾아 척추 디스크 공간에 수직 근육과 근막을 잘라. T10의 극돌기 및 후방 얇은 판을 노출 충분히 잘라.
  5. 뾰족한 듀 # 5 포셉 쌍을 사용하여, 척수 작은 슬리버를 노출 라미 극돌기에서 조직의 일부를 제거한다. 필요한 경우, 척추를 안정시키기 위해 조직 집게를 사용합니다.
  6. 척추의 배 외측 측면을 따라 그냥 얇은 판 아래에 작은 바나 위의 쌍의 한 쪽을 삽입하여 후궁 절제술을 수행합니다.
    1. 작은주의 자르는은 척추 얇은 판의 측면을 극복 할 수 있습니다. 더 압력이 척수에 적용되지 않음을 확인합니다.
    2. 반대편에 반복합니다.
    3. 척수에 압력을 적용하지 않도록주의하면서, Q-팁 또는 수술 스펀지로 필요에 출혈이 정지되도록 약간 힘을 주어.
      주 : 젤 거품을 준비출혈이 제어 될 필요가 있다고하는 경우에 멸균 식염수에 침지.
    4. 절개가 이루어지고 나면, 척추의 등 측면을 들어 올려 부드럽게 어떤 조직 첨부 파일을 지 웁니다. 필요한 경우 출혈을 제어하는​​ 적절한 수단을 사용합니다.

3. 척수 압축

  1. roungeurs 후궁 절제술 또는 집게를 사용하여, 압축 부상 보정 포셉 척수의 양쪽에 놓다 수 있도록 척수의 측면은 척추 뼈 없는지 확인. 집게의 팔은 척추 운하의 바닥에 도달 할 수 있어야합니다 인접한 척수의 측면과 집게의 끝의 경막 외 공간에 배치 할 수 있어야합니다.
    1. 척수의 가시성이 좋은 확인합니다.
  2. 척수의 노출 된 부분의 중앙에 대략 5 포셉 보정 뒤몽 # 놓다. 리콜 그 힘의 무기PS 인접면에 경막 외 공간에 배치해야하고, 끝은 재현 부상을 생성하기 위해 척추 운하의 바닥에 접촉해야합니다.
  3. 스페이서를 연결할 때까지 조심스럽게 척수를 압축합니다. 15 초 동안 제자리에 잡아.
  4. 조심스럽게 압축력을 해제하고 척수에서 교정 집게를 제거합니다. 멸균 식염수는 상처가 폐쇄되기 전에 항상성을 회복하기 위해 사용되어야한다.

4. 상처 결산

  1. 조심스럽게 중단 또는 척수에 압력을인가하지 않도록주의하면서, 척수 근육 위에 층을 봉합.
  2. 상처를 통해 피부를 닫습니다 봉합 또는 스테이플 하나를 사용하십시오.
  3. 가스 마취제를 사용하는 경우, / 테이퍼 마취를 해제하기 시작합니다.
  4. 수술 중 및 동물 기면 부상에서 회복 수술 후 탈수 계정을 돕기 위해 10 g의 체중 당 락트산 신호기 0.1㎖를 관리. 이 솔루션은 warme해야주입하기 전에 체온에 D.
  5. 침구없는 새장에 마우스를 놓습니다. 나머지 절반은 RT 카운터에 놓여있는 동안 케이지를 제공하기 위해, 케이지 면적의 절반 패드되도록하는 방식으로 (1.1.5에서 설명) 가열 패드 위에 쉬어야 마우스 기후 옵션은 외래되면. "복구 케이지가"조용한 환경에 위치하도록주의하십시오. 이 마우스 침구 정규 케이지로 전송 될 수있는 시간에 의식을 회복 할 때까지 밀접 동물을 모니터.

5. 수술 후 케어

  1. 통증의 증상을 관리하는 데 필요한 수술 후 다음 수술 후 처음 3 일 동안 피하 프레 놀핀 매 12 시간 / kg 체중의 0.05 mg의 투여 량을 관리하며.
  2. 수술 후 5 일 - 제 3 락트산 벨소리 (10g 체중 피하 당 0.1 ㎖)의 복용량을 관리합니다. 이 복용량을 줄 때 / IFimal이 초기 기간의 외부 탈수의 흔적을 전시하기 시작합니다.
  3. 수동 회 크리 책략을 이용하여 동물의 방광을 표현한다. 부드럽게 방광의 위치를​​ 동물의 복부를 만져, 방광이 비어있을 때까지 완만 한 하향 압력을 적용합니다.
    1. 방광이 비어 있지 않거나 묻은 소변 또는 흐린 경우 10 일간 interperitoneal 통해 주입 Baytril 동물의 체중에 의해 50 ㎎ / kg을 투여.
  4. 자식 작용, 탈수, 과도한 체중 감소 (체중의 20 % 이상)의 흔적이 동물을 모니터한다. 동물이 이러한 증상이 발생하면 치료 방법에 관하여 즉시 수의사와 상담, 또는 IACUC의 지침에 따라 인도적인 방법으로 동물을 안락사하시기 바랍니다.
    1. 이동성 잘 수술 후 제한 될 수 있음을 감안할 때, 반드시 동물들이 음식과 물에 액세스 할 수 있도록 필요한 조치를 취합니다. 뿐만 아니라, 젖은 음식을 사전 패키지S 하이드로 겔은, 이러한 경우의 동물에게 제공 될 수있다.

6. 압축 손상으로 인한 조직 손상 평가

  1. 단계 1.41.5에 기재된 바와 같이 동물을 마취. 발가락 핀치 및 모니터링 각막 깜박임 반사에 의해 마취의 깊이를 확인합니다. 동물이 자극에 민감 경우 6.2 단계로 진행합니다.
  2. intracardial 관류 (10)을 수행합니다.
    1. 흉강 노출과 좌심실에 바늘을 삽입합니다. 빙냉 4 % 파라 포름 알데히드 (PFA)의 25 ㎖ - 15이어서 30 ㎖를 빙냉 인산염 완충 식염수 (PBS) - (20)와 기존의 유체를 세척.
  3. 척수를 제거합니다.
    1. 척수에 피부 지느러미를 잘라 척추의 길이를 둘러싼 초과 조직을 제거하다.
    2. 소비세 척추와 남아있는 조직을 절단. 후궁 절제술 그리고 난의 실제 수준njury 리브를 계산하여 확인할 수 있습니다.
    3. 꼬리 - 투 - 주동이의 방향으로 척추의 작은 부분을 대체 할 수 있군요 바나, 남은 가위와 집게를 사용합니다. 코드가 안전 제거를 허용하기에 충분히 노출 될 때까지 잘라 계속합니다. 절단 위치 및 프로세스의 시각화 입체경의 사용을 통해 용이하게 될 수있다.
  4. 4 % PFA에서 척수 조직을 놓습니다. 4 ℃에서 24 시간 동안이 솔루션에 포스트 수정에 조직을 허용합니다.
  5. 4 ° C에서 24 시간 동안 30 % 자당에서 배양하여 Cryoprotect 조직.
  6. OCT에서 조직을 포함합니다. 간단히, 30 % 자당 배양에서 조직을 가지고 초과 솔루션을 제거합니다. 빛 간섭 단층 가득 cryomold로 조직을 놓고 4 ° C에서 1 시간 동안 배양한다.
    1. 4 ° C에서 곰팡이를 제거, 조직의 방향 방향을 확인 (드라이 아이스에 1 시간 동안 사전 냉장) 2- 메틸 부탄의 얕은 접시에 금형을 넣어 OCT를 완전히 응고 할 수 있습니다. 즉시 또는 석재 사용하는 경우 드라이 아이스에 보관-80 ° C에서 다시.
  7. 저온 유지 장치를 사용하여 20 μm의 시상 부분으로 조직을 잘라. 슬라이드에 직접 마운트 조직. 사용할 때까지 -20 ℃에서 보관하십시오.
  8. 헤 마톡 실린 및 에오신 (H & E) 염색을 수행합니다.
    1. 간단히, 조직 (5 분, 2 회), 헤 마톡 실린 (2.5 분)와 얼룩을 재수, 물 (1 분, 2 회)로 세척.
    2. 50 %로 조직을 인큐베이션 한 후 70 % 에탄올 (3 분마다), 에오신 (45 초)으로 염색하고, 90 % (5 초), 95 % (5 초)에서 항온 탈수하고, 100 % 에탄올 (2 분) , 이소프로판올 (2 분).
    3. 자일 렌 (5 분, 3 회)와 지우기.
      참고 : H & E 염색 특정 조직의 두께 및 조건에 따라 달라집니다. 따라서, 표준화 실험 조직 샘플을 진행하기 전에 필요합니다.
  9. 얇은 Permount의 스트립 (~ 100 ㎛) 및 커버 슬립으로 조직을 커버. 유체의 적절한 분배를 보장하기 위해 커버 슬립의 모든면을 아래로 눌러. 슬라이드 O / N을 건조 시키십시오.
  10. 비스첨부 된 소프트웨어를 사용하여 디지털 현미경 이미지를 캡쳐하여 조직 절편을 ualize.

Representative Results

0.25 mm (N = 4), 0.35 mm (N = 4) 0.55 mm에서 척수 압박이어서 전술 한 바와 같이 - (30 그램 (25)) (N = 4)는 마우스 (12)에 후궁 절제술을 수행 하였다. 우리는 세에서 동물을 희생 (N = 6)과 일곱 (N = 6) 심장 내 관류 일 후 부상. 척수 척주로부터 제거하고, 조직을 준비하고, 전술 한 바와 같이 처리 하였다. 전체 척수의 이미지는 라이카 EZ4 디지털 현미경과 함께 제공되는 소프트웨어로 촬영되었다. 척수 섹션의 이미지는 올림푸스 디지털 현미경을 사용하여 소프트웨어와 함께 2 배의 배율로 촬영되었다.

우리는 척수 압축 압축 (그림 1)의 사이트에있는 진원지와 부상을 생산하는 것을 발견했다. 부상의 효과는 주동이와 꼬리 방향으로 몇 mm를 확장 할 수 있습니다. 스페이서들 사이의 거리가 감소로 부상의 정도는 증가 된 (0.25 mm> 0.35 mm>0.55 mm, 그림 2). 사흘 압축 후 부상의 진원지에서 혈액과 부상 후 7 일을 제시하지 않은 주변 지역이 있었다. 0.25 mm와 0.35 mm 압박은 캐비티 아니지만 0.55 mm 모델을 제작. 칠일 후에는 지느러미와 복부 백질은 주로 회색 물질의 조직이 매우 왜곡 된, 진앙에서 크기 감소 및 공동화 지속했다. 이 cytoarchitectonical 변경은 모터와 동물의 행동에 감각 변화로 번역되어 우리가 이전의 출판물 8 증명 등의 운동력이 기능에 대한 바소 마우스 규모 및 감각 기능의 프레이 머리와 에틸 클로라이드 테스트 적절한 테스트를 사용하여 평가.

그림 1
그대로 척수의 그림 1. 대표 이미지 전에 AF 모두터 부상. (A) 비 손상 척수. (B) 0.35 mm 압축 후 척수. 화살표는 부상의 경계를 나타냅니다. 별표 부상의 진원지를 indentifies. D = 지느러미, L = 측면. 스케일 바 :. 0.50 mm 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

그림 2
이전과 다양한 압축 폭에 압축 손상 후 마우스 척수 2. 대표 이미지를 그림. (A) 제어 척수 시상 부. (B) 0.35 mm SCI 칠일 후 압축 부상 수 (dpi)의 진원지에서 관상 부. (C, E, G) 3 dpi로 0.25의 폭 척수 시상 섹션 0.35 또는 0.55 mm. (D, F, H) H & E의 시상 부분 스테인드 척수7 (S) 0.25, 0.35 또는 0.55 mm의 폭 dpi로. 별표 부상의 진원지를 indentifies. 모든 섹션은 H & E 염색. D = 지느러미, L = 측면. 스케일 바 :. 1.25 mm 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

Discussion

SCI 모델의 선택은 인간의 경우 SCI 용 치료제의 효능을 결정하기 위해 실험을 설계하는 것이 중요하다. 이러한 실험은 결정적 데이터가 발생할 수 있습니다 변동성을 제한하는 것이 매우 재현 동물 모델을 필요로한다. 그들은 또한 정확하게 그들이 모델링 인간의 조건을 평가하는 임상 관련이 있어야한다. 이를 위해, 절개를 통해 압축 또는 contusive 부상을 선택하는 것은 임상 적으로 더 관련이있다 3. 그러나, 타박상 부상 impactors 중량 강하 장치는 비싸고 복잡한 기계의 사용을 필요로한다. 대조적으로, SCI의 보정 겸자 모델 일반적인 실험실 재료로부터 조립이 용이 포셉 변성 활용 및 수술은 척수를 노출하는 표준 등쪽 후궁 절제술 후 단 하나의 부가적인 단계를 필요로한다. 그러나,이 방법을 사용하여 하나의 단점은 항상 압축력으로, 횡 방향보다는 오히려 등쪽에 적용된다는 것이다가장 자주 방법은 타박상 모델 1, 2보다 조직의 큰 주동이의 - 꼬리 정도에 영향을 미칠 사용하여 생성 된 SCI (9), 및 압축 부상의 인간 임상의 경우에서 볼 수있다. 이 모델이 기술의 원조에 의해 증명되었으며, 미국, 재현성 SCI 7,11 생성하고, 마우스의 크기에 적합하다. 동물은 동물의 코호트가 같은 부상 심각도를 공유하는지 확인하기 위해 이러한 로코의 바소 마우스 규모와 프레이 헤어 시험과 행동 검사, 다수의를 사용하여 수술 및 치료 치료 후 평가하는 또한,이 부상 모델은 수 신경 학적 결손의 7,11-13. 이러한 기술들은 동일한 SCI 2,7- 대한 치료를 평가하는 데 사용되는 동물 모델에 대한 일반적인 조건을 충족 이슈를 연구 동안 동물에게 투여하는 치료의 효능을 평가하는 데 사용될 수있다.

교정 forcep 제조 방법손상 모델들에 대한 간단하고 다른 다양한 방법으로 달성 될 수있다. 우리는 Plemel (7)에 의해 발표 된, 스페이서 제 11 사용한, 또한 압축 장치를 만들기위한 쉬운 방법을 제공하지 단지 작은 나사를 사용하여 집게를 수정뿐만 아니라 중, 최종 압축 폭을 조정에 융통성을 허용 비교 연구에 대한 혜택을 누릴 수 있습니다. 집게를 만드는 옵션의 범위는 너무 오래 스페이서 (들)은 항상 같은 거리에 집게를 폐쇄 안정적인 수단을 제공하고 고압 증기 멸균과 살균을 견딜 수있는 거의 제한이 없습니다. 이 동영상에서 설명 수술 방법 그러나 그것은 후궁 절제술을 수행하고 척수가 늘어날 수있는 추가 압축력을 겪지 않도록 절차를 수행 한 후, 동물을 봉합 할 때에주의가 필요가, 사용자에 걸쳐 높은 재현성 부상 정도와 미래의 실험을 혼동. 적절한 훈련과 연습으로, 압축 부상의 보정 집게 모델은 인간 2,3,7에서 관찰 된 임상 사례를 모방 생쥐에서 SCI를 수행하기에 적합합니다. 때문에 부상의 심각도의 각기 다른 정도의 쥐를, 집게를 만드는 생산의 용이성을 쉽게 수행 할 수 있습니다. 이 형질 전환 마우스의 심각도의 각기 다른 정도의 SCI에 유전 적 영향을 관찰뿐만 아니라 쥐에 줄기 세포 이식의 효능을 평가하기 위해 큰 도움이 될 것입니다. 문헌 연구의 대부분은 일반적으로 인해 수술을 수행 할 더 쉽게 크기로 래트에서 수행되었다. 그러나이 비디오에 Plemel 등. (7)에 의해 출판 및 우리에 의해 기술 된 방법은 큰 쉽고 재현성 마우스에서 수행 될 SCI를 사용하도록 설정해야합니다.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Isoflurane machine Smiths Medical PM, Inc VCT302
Isoflurane Phoenix Pharmaceutical NDC: 66794-013-25
Dissecting Scope Seiler Precision Microscopes SSI 202/402
Germinator-500 (tool sterilizer) Thomas Scientific 3885A20
Puralube (eye ointment) Dechra NDC 17033-211-38
Scalpel handle (#3) Fine Science Tools 10003-12
Scalpel blade (#11) Fisher Scientific  08-914B
Retractor (Colibri) Fine Science Tools 17000-03
Friedman Pearson roungeur Fine Science Tools 16021-14
Vanna (Castroviejo) scissors Roboz RS-5658
Tissue forceps Fine Science Tools 11029-14
Laminectomy forceps (Dumont #2) Fine Science Tools 11223-20
Dumont #5 forceps Fine Science Tools 11252-20
Stapler Fine Science Tools 12031-07
Staples (wound clips) Reflex7 203-1000
Sutures Henry Schein 101-2636
Needles (30 G x ½) BD Biomedical 305106
Syringe (1 ml) BD Biomedical 309659
Baytril (enrofloxacin) Bayer NADA 140-913
Buprenex (buprenorphine) Cardinal Health NDC 12496-0757-1

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References

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