Een methodologische aanpak van niet-invasieve Assessments van de vaatfunctie en morfologie

Medicine
 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Sandoo, A., Kitas, G. D. A Methodological Approach to Non-invasive Assessments of Vascular Function and Morphology. J. Vis. Exp. (96), e52339, doi:10.3791/52339 (2015).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Introduction

Het endotheel is de binnenste bekleding van het vaatstelsel en is betrokken bij het handhaven van vasculaire homeostase via de regulatie van een veelheid aan vasoactieve processen. Verstoring van deze processen kan het schip naar atherosclerose vatbaar en verhogen het risico op hart- en vaatziekten (HVZ) 1. Perifere endotheelfunctie is een goede indicator van de vroege afwijkingen in de vaatwand 2. Daarnaast zijn maatregelen van perifere endotheelfunctie is aangetoond coronaire endotheelfunctie 3-5 weerspiegelen, en als zodanig als goede voorspellers van cardiovasculaire ziekten 6-9 beschouwd. Dit is misschien niet verwonderlijk gezien het feit dat atherosclerose wordt nu in grote lijnen op prijs gesteld om een systemische aandoening 10 zijn. Evaluaties van perifere endotheelfunctie typisch kwantificeren vaatverwijdende respons van het vaartuig naar een specifieke stimulus, met een verzwakking van vertragingsgedrag reactie indicatief endothelialedisfunctie 11, en ​​kan worden gemeten in verschillende vasculaire bedden. Evaluaties van geavanceerde structurele veranderingen in het vat kan worden gekenmerkt door echografisch onderzoek van de intima-media dikte.

In de microcirculatie, kan laser Doppler flowmetry (LDF) en Laser Doppler imaging (LDI) met iontoforese van vaatverwijdende agonisten nuttige informatie over microvasculaire perfusie 12 bieden. Beide technieken meten van de Doppler verschuiving gecreëerd door verstrooid licht van bewegende rode bloedcellen. Perfusie wordt weergegeven als bloed flux dan bloedstroom (ml / min), met bloed flux reflecterende gemiddelde rode bloedcel snelheid en concentratie. Meting van bloed flux lineair verband met de werkelijke bloedstroom 13. De beoordeling van LDI biedt aanzienlijke voordelen ten opzichte van LDF, want in tegenstelling tot LDF, kan LDI scannen over een uitgestrekt gebied dus goed voor heterogeniteit in de doorbloeding van de huid en het verhogen van de reproduceerbaarheid van de techniek12.

De stimulans voor het verhogen van bloed flux tijdens LDI worden geleverd door iontoforese van vaatverwijdende agonisten acetylcholine (ACh) en natrium (SNP), die endotheel-afhankelijke en endotheel-onafhankelijke functie te beoordelen respectievelijk in de huid met behulp van een zwakke elektrische stroom 14. Eenmaal door de huid, ACh bindt aan cel muscarine receptoren loslaten van de vaatverwijdende stikstofmonoxide (NO) endotheel. Het gebruik van SNP activeert direct gladde spiercellen receptoren om maximale vasodilatatie van het vat en behandeling van gladde spieren integriteit 15. Er is enige onzekerheid over de vraag of ACh-gemedieerde dilatatie gaat NO helemaal niet, als ACh niet-NO studierichtingen zoals-cycloxygenase gemedieerde paden 12 kan stimuleren. Desalniettemin hebben we eerder gemeld dat ACh en SNP responsen geremd in patiëntenpopulaties verhoogd risico op CVD 16 en dat de oefening interventies bekend NO b verbeterenioactivity verbeteren ook de ACh-gemedieerde bloed flux met behulp van LDI 17. Het voertuig voor het vervoer van de stoffen in de huid microvessels bevatten vaak natriumchloride of gedemineraliseerd water 18,19. Microvasculaire endotheliale functie kan worden gekwantificeerd met behulp van verschillende benaderingen, met cutane vasculaire geleiding - een product van flux gedeeld door arteriële druk, gebruikt in studies waarbij de bloeddruk kan veranderen in de loop van de studieduur (dwz, tijdens het sporten of anti-hypertensieve behandeling) 12. Een andere veel gebruikte kwantificering is om het gebied te berekenen onder de curve voor bloed flux of express de procentuele stijging van de flux van de uitgangswaarde. Het is belangrijk op te merken dat er geen vastgestelde richtlijnen voor de presentatie van de gegevens, maar de onderzoekers moet een aanpak die goede reproduceerbaarheid blijkt benutten.

In de grote schepen, flow-gemedieerde dilatatie (MKZ) en glyceryl-trinitrate gemedieerde dilatatie (ATN) worden uitgevoerd om ezelss endotheel-afhankelijke en endotheel-onafhankelijke functie van respectievelijk 20. MKZ wordt gewoonlijk uitgevoerd in de slagader waar een manchet wordt gebruikt om arteriële bloedstroom gedurende 5 min afsluiten uitgevoerd; afgifte van de manchet veroorzaakt een plotselinge toename van de bloedstroom (reactieve hyperemie) via de brachiale slagader waardoor shear stress gemedieerde dilatatie van het vat. De baseline en post-manchet vrijlating diameter worden gekwantificeerd door echografie van het schip met daarop evaluaties van de diameter vat uitgevoerd handmatig 20 of met behulp van geautomatiseerde edge detectie software 21,22. Het gebruik van GTN wordt gecontroleerd of afwijkingen in vasodilatatie door een verlies in gladde spiercel integriteit of verminderde afgifte van NO uit de endotheelcellen 23. MKZ en GTN worden uitgedrukt als de procentuele toename in post-stimulus diameter vaartuig ten opzichte van de basislijn diameter.

De juiste beoordeling van MKZ een aantal vereistbelangrijke overwegingen in het studieprotocol 24,25. De duur van de manchet occlusie moet zorgvuldig worden getimed; 5 min van manchet occlusie is voldoende voor NO-gemedieerde dilatatie tijdje langer manchet occlusie resultaten in niet-NO-gemedieerde dilatatie 26. Ook de plaatsing van de afsluitende manchet om de pols en distaal van de ultrasone sonde beroept voornamelijk NO gemedieerde dilatatie, terwijl manchet plaatsing op de bovenarm en proximaal van de sonde slechts gedeeltelijk stimuleert NO 27. Het is ook belangrijk om de piek dilatatie volgende manchet deflatie over een langere periode van tijd, zoals het meten van de piek diameter binnen de eerste 60 sec na cuff deflatie onderschatten MKZ door 25 te meten - 40% 28. Inderdaad, gedurende 180 sec waarschijnlijk voldoende in echt piek diameter zijn, waarbij de meeste piekwaarden optreden binnen de eerste 120 sec 28.

De stimulans voor MKZ betrekkens de productie van schuifspanning, die specifiek endotheliale receptoren activeert om NO 29. Echter, kan schuifspanning ook activeren verscheidene andere vasoactieve factoren (waarvan sommige vasoconstrictie veroorzaken) 30, waardoor het noodzakelijk dat de opgeroepen schuifspanning stimulus reflecteert vasodilatatie van geen routes 26. Het is ook belangrijk om rekening te houden de schuifspanning stimulus tijdens MKZ, met berekening van afschuifsnelheid (snelheid / diameter) dienen als een adequate mate van afschuifspanning, maar niet noodzakelijkerwijs reflecterende piekstroom 31. Recente fysiologische aanbevelingen suggereren dat de shear stress profiel altijd moet worden gekarakteriseerd als ultrasound systemen maken het mogelijk gelijktijdige meting van polsgolfsnelheid en actieve B-modus beeldvorming in duplex modus 25.

Beoordeling van de halsslagaders behulp B-mode echografie kan informatie over de carotis intima-media dikte (IMT) bieden, en was de eerste described in 1986 door Pignoli en collega's 32. Beoordeling van cIMT weerspiegelt proliferatie van gladde spiercellen in de intima van het vat en is een bruikbare voorspeller van klinische gebeurtenissen in vroege atherosclerose 33. Carotis echografie kunnen vaak voorspellen arteriële structuur beter dan vergelijkbare technieken (zoals magnetische resonantie beeldvorming of radiografische evaluaties) 34. Bovendien cIMT associeert met een aantal klassieke CVD risicofactoren zoals vergrijzing, hypertensie en dyslipidemie 35. Wijzigingen in de wanden van de halsslagader worden meestal geïnitieerd door een verlaging van NO biobeschikbaarheid waarin ontsteking bevordert in het vat 36. De halsslagader, interne halsslagader en carotisbifurcatie punten kan worden bepaald cIMT, zoals elke site soortgelijke voorspellen cardiovasculaire gebeurtenissen 37.

In de huidige manuscript, bieden we gedetailleerde methodologie voor beoordeling van microvascular functie van het endotheel (LDI met iontoforese), grote schip functie van het endotheel (MKZ en ATN) en vasculaire morfologie (IMT). Atherosclerose is een meertraps proces dat begint met endotheeldisfunctie en eindigt met focale atherosclerotische laesies in de grote slagaders. De reden voor de keuze van de bovengenoemde evaluaties is dat ze weerspiegelen de verschillende stadia van atherosclerose en helpen verklaren de heterogeniteit van de vasculatuur 38. Verder hebben we eerder aangetoond dat in een populatie van patiënten met een verhoogd risico op hart- en vaatziekten, microvasculaire endotheliale functie was onafhankelijk van groot schip endotheelfunctie 39, en functionele evaluaties waren onafhankelijk van structurele evaluaties van het vaatstelsel 40. Daarom kan globale beoordeling van de vasculatuur helpen om de verschillende stadia van atherosclerose ontcijferen.

Protocol

OPMERKING: Het protocol volgt richtlijnen van Human Research Ethics Committee Dudley Groep NHS Foundation Trust. Voer alle beschreven technieken in een temperatuur gecontroleerde laboratorium (21-22 ° C), met stabiele verlichting en afwezigheid van geluid. Vraag individuen ondergaan assessments te onthouden van eten, drinken, roken en lichaamsbeweging 12 uur voorafgaand aan de test. Achterhouden vasoactieve medicatie voor ten minste 12 uur, indien nodig.

1. Laser Doppler Imaging met Iontoforese

  1. Schakel Laser Doppler Imager (LDI) en laat de scanner automatisch stabiliseren voor ongeveer 30 min. Start de LDI-software en klik op 'waardering' (home-scherm van de software zal dan worden getoond). Op het startscherm, selecteert u 'Ionto Protocol' op de taakbalk zich aan de bovenkant van het venster.
  2. Handmatig invoeren van het protocol (het protocol dat gebruikt wordt in ons laboratorium gaat om een ​​totaal van 13 sblikjes, elektrische stroom voor iontoforetische geneesmiddelafgifte set van aftasten 2 scannen 11 bij een spanning van 30 uA). Stel scan 1 als een baseline scan zonder elektrische stroom, en scannen 12 & 13 als herstel scans ook zonder elektrische stroom. Klik op OK om de instellingen te bevestigen en terug te keren naar het startscherm.
  3. Vraag deelnemer om te ontspannen in een semi-liggende stoel met hun onderarm rustend 90 graden op een comfortabel, stevig kussen, en plaats een zwarte mat onder de onderarm.
    OPMERKING: De mat helpt om artefact metingen gegenereerd door achtergrond oppervlakken rondom het weefsel te beperken. Het is belangrijk dat de deelnemers arm stevig vastgebonden aan het kussen zodat er geen beweging en bijbehorende artefacten.
  4. Sluit de bedrade stekkers aan het andere einde van elke perspex kamer naar de iontoforese controller. Sluit de kamer met een dosis 2,5 ml 1% acetylcholine (ACh) aan de anodale aansluiting van de iontoforese controller, en sluit de tweede kamer met daarinEen dosis 2,5 ml 1% natrium-nitroprusside (SNP) aan het kathodische verbinding. Meng beide middelen in de kamer met behulp van 0,5% zoutoplossing. Sluit de twee kamers aan de volaire aspect van de deelnemer rechter onderarm met behulp van dubbelzijdige zelfklevende elektroden.
  5. Bedek de kamers van 32 mm dekglaasjes om lekkage van vloeistof te voorkomen.
  6. Voordat u begint met het scannen, opent u het venster 'Scanner Setup' op de linker bovenhoek van het beginscherm. Selecteer het tabblad 'Video en Distance' en selecteer de functie 'auto afstand' om de afstand van de scanner hoofd van de deelnemers onderarm te meten.
    1. Na afloop van de meting automatisch afstand, selecteer het tabblad 'Image Scan' en bepaal het gebied dat moet worden gescand door te klikken op de knop 'Mark' in de rechterbenedenhoek van het venster. Indien nodig, verander de grootte van het gebied van belang door het handmatig invoeren van de grootte van het scangebied in de 'Scan Area &# 8217; sectie in de buurt van de bovenkant van het venster. Zorg ervoor dat het gebied van belang ook de diameter van elk van de iontoforese kamers en is groot genoeg om variabiliteit huid bloedstroom beperken.
  7. Na afronding van de beoordeling, sparen de data file. Open het bestand met behulp van LDI beeldanalyse software om metingen van perfusie te voeren.
    1. Klik op 'Afbeelding Review' op de belangrijkste software-venster en open het beeld dat moet worden geanalyseerd.
    2. Gebruik de software af te bakenen een gebied van belang rond de buitendiameter van elke kamer. Pas de regio van belang, zodat het goed past op het gebied waar de kamers aanwezig waren. Klik vervolgens op het pictogram 'statistieken' en een kolom met de mediaan perfusie eenheden voor elke kamer wordt weergegeven. Let op de basislijn perfusie eenheid, evenals de hoogste perfusie eenheid uit elk van de voorafgaande 12 scans per kamer.
      OPMERKING: Deze analysemethode isspecifiek voor ons laboratorium; echter kunnen andere methoden worden toegepast om gegevens van de LDI scan drukken. Voor een uitgebreid overzicht verwijzen wij u naar de richtlijnen van Roustit en Cracowski 12.
  8. Om procentuele verandering in perfusie in reactie op ACh en SNP berekenen, aftrekken basislijn perfusie van de piek perfusie, delen door basislijn perfusie en vervolgens vermenigvuldigen met 100.
    LET OP: In ons lab, veranderingen in de perfusie ten opzichte van de uitgangssituatie hebben aangetoond goede intra-observer variatiecoëfficiënt voor ACh (7%) en SNP (6%).

2. Flow-gemedieerde dilatatie en Glyceryltrinitraat-gemedieerde dilatatie

  1. Schakel de Doppler-echografie-apparaat en PC netwerk met vasculaire beeldanalyse (VIA) software.
    OPMERKING: VIA software vangt live beeld (25 beelden per seconde) en informatie over de diameter vaartuigen en de kwaliteit van de vasculaire grenzen gedetecteerd door de ultrasone machine. Othaar softwarepakketten beschikbaar die extra functies en instellingen kunnen bevatten. Het is raadzaam om handleidingen te raadplegen voor specifieke software.
  2. Vraag deelnemer om te ontspannen in een semi-ligfiets fauteuil en plaatsen hun arm op een comfortabele kussen uit aan hun kant, maar het niveau van het hart. Plaats een bloeddruk manchet om de pols van de deelnemer.
    OPMERKING: De patiënt moet worden gevraagd om hun arm zo stil mogelijk te houden om beweging artefacten te voorkomen tijdens de meting.
  3. Bevestig de lineaire array transducer uit de echografie-machine in een stereotactische klem en draai de klem met behulp van de vleugelmoeren zodat de ultrasone transducer blijft in een vaste positie.
    OPMERKING: De klem zorgt dat de ultrasone transducer stabiel blijft wanneer het bloedvat bevindt.
  4. Op de echo machine, blader naar het 'Menu' en zet de scan frequentie van 5 MHz en optimaliseren van de diepte (de aanbevolen diepte-instelling is3,5 cm) en gain-instellingen op de echo machine. Pas de gain instellingen zorgen voor symmetrische helderheid van de nabije en verre wand van het vat.
  5. Met behulp van de lineaire array transducer, zoekt de slagader die meestal wordt gevonden 2-10 cm boven de antecubitale fossa in de lengterichting aftastvlak. Maak eventuele aanpassingen van de beeldkwaliteit in dit stadium te verduidelijken. Om u te helpen identificeren van de slagader, zet de kleur Doppler te helpen tonen pulserende arteriële doorbloeding en onderscheiden van continue veneuze bloedstroom. Bekijk de slagader horizontaal over het scherm; zij moeten als twee vaste evenwijdige lijnen, gescheiden door een lege ruimte tussen de lijnen die het lumen van het vat vormt.
  6. Om de VIA software om vatdiameter automatisch opnemen, gebruikt u de cursor naar een vooraf bepaalde regio van belang voor het opsporen en volgen van de voorste en achterste wanden van de slagader te markeren.
    OPMERKING: De grootte van de regio van belang kan zijnverhoogd of verlaagd met behulp van de 'x' en 'y' knoppen op het hoofdscherm van het programma.
  7. Klik op 'Start' op de VIA-software en het imago van de slagader gedurende 2 minuten. Na deze, druk op 'Pomp' op de VIA-software en tegelijkertijd blazen de bloeddruk manchet geplaatst rond de pols te drukken suprasystolic (meestal boven de 220 mmHg) gedurende 5 minuten.
    Opmerking: bij de pols manchet te occluderen bloedtoevoer naar de kant.
  8. Na 5 min leeglopen van de bloeddrukmanchet reactieve hyperemie die in een gezonde vat, zal NO gemedieerde vasodilatatie stimuleren induceren.
    OPMERKING: Extra dilatatie kunnen zich tot 180 sec na manchet deflatie, dus is het raadzaam om verder opnemen vasculaire diameters gedurende 3 minuten na deflatie van de manchet.
  9. Na 10 min rusttijd opnieuw zoek de slagader met de lineaire array transducer en registratie van een 2 min nulmeting diameter op dezelfde wijzeals stap 2.7.
  10. Vraag de deelnemer in een 500 ug sublinguaal glyceryl-(GTN) tablet plaats onder hun tong en blijven de brachiale slagader diameter meten nog eens 5 min. Na deze periode vraagt ​​de deelnemer aan de GTN tablet eruit en monitoren van de deelnemer om te zorgen dat ze geen nadelige effecten op de drug te ervaren.
  11. Het uitvoeren van alle analyse van gegevens offline. Vijfentwintig datapunten zijn beschikbaar voor elke seconde van de beoordeling; Sluiten gegevens in één seconde tijdperken in Microsoft Excel. De gegevens te exporteren naar een digitaal signaal analyse pakket en filter met een 3 sec voortschrijdend gemiddelde filter.
  12. Vestigen de basislijn diameter van de 120 sec van gegevens voorafgaand aan de manchet-inflatie. Inspecteer de basislijn regio en sluiten artefacten. Het gemiddelde van de resterende basislijn regio's om de basislijn diameter produceren.
  13. Voor de flow-gemedieerde dilatatie (MKZ) analyse, gebruik maken van de software om de post cuff- automatisch te scannendeflatie regio voor de piek dilatatie en gebruik de cursor naar deze piek voor visuele inspectie te markeren. Als de piek is verkeerd geïdentificeerd, gebruikt u de cursor naar een kleiner gebied waarbinnen de piek dan kon worden geïdentificeerd selecteren. Noteer de piekwaarde als piek diameter.
  14. Voor de GTN gegevens, nemen een identieke procedure aan die gebruikt met MKZ, behalve zoek naar piek verwijding in de regio na de 5 min van toediening van het geneesmiddel.
  15. MKZ% en GTN% te berekenen, aftrekken basislijn diameter van de piek diameter, delen door basislijn diameter en vervolgens te vermenigvuldigen met 100.
    LET OP: In ons laboratorium, de intra-observer variatiecoëfficiënt is 11% voor MKZ, en 12% voor GTN.

3. intima-media dikte

  1. Vraag deelnemer om comfortabel te liggen op een bed, en leg een kussen onder het hoofd naar steun aan de nek te bieden.
  2. Sluit het elektrocardiogram (ECG) leidt tot de Doppler-echografie en bevestig ze op de patient ledematen. Slechts een basis ECG spoor vereist, dus plaats de juiste draden aan de linker en rechter arm en de linker enkel.
  3. Bereid de echografie machine door te bladeren door het 'menu' en het instellen van de scan frequentie 10 MHz en het optimaliseren van de diepte (de aanbevolen diepte-instelling is 3 - 4 cm) en gain-instellingen. Pas de gain instellingen zorgen voor symmetrische helderheid van de nabije en verre wand van het vat.
  4. Ja deelnemers hun hoofd iets schuin naar links en met de lineaire array transducer, scant de rechter halsslagader langs alle secties (gemeenschappelijke, interne en externe carotis) met de longitudinale scanvlak de aanwezigheid van plaques te identificeren. Spaar beelden die enig bewijs van plaque te geven. Om u te helpen identificeren van de slagader, kijk voor een splitsingspunt in het vat, als dit toont de gemeenschappelijke halsslagader bifurcating in de interne en externe halsslagaders.
  5. Voor het meten of intima-media dikte (IMT), bereiken minstens 3 afbeeldingen van een deel van de halsslagader dat vrij is van plaque en 1 cm proximaal van de carotisvork. Bereik alle beelden bij de piek van de R-golf van het ECG het samenvalt met ventriculaire diastole en het punt waarop het vaartuig in de minste hoeveelheid schuifspanning.
  6. Herhaal de stappen 3.4 en 3.5 in de linker halsslagader. Vraag de deelnemers om hun hoofd een beetje schuin naar rechts voor deze meting.
  7. Om te helpen bij het bereiken van duidelijke beelden van de nabije en verre wanden voorzichtig manipuleren van de ultrasone sonde in de beoordeling te zorgen het vaartuig loodrecht op de ultrasone bundel. Dit te bereiken door subtiel kantelt en draaiing van de omzetter, samen met kleine aanpassingen aan de op de proximaal-naar-distaal hoek (hiel-teen beweging) van de probe druk.
  8. Uit te voeren analyse van de beelden zaken off line gebruik Artery Measurement Software (AMS) naar de vasculaire Boun detecterenDary volgens de lijnen van Pignoli. Laad de afbeelding te analyseren, en vervolgens met behulp van de cursor, maak een regio van belang in een deel van het schip, dat vrij is van plaque. Klik op 'sporen' van de software en noteer de waarden die worden weergegeven op het scherm voor cIMT en lumendiameter.
    OPMERKING: nauwkeurige metingen kan alleen worden verkregen uit de muur, dus negeer lezingen uit de buurt van de muur.
  9. Neem drie metingen per zijden en gemiddelde die het gemiddelde cIMT geven de rechter en linker halsslagaders afzonderlijk. Verdere het gemiddelde van de cIMT van beide kanten om de algehele cIMT geven.
    OPMERKING: De intra-observer variatiecoëfficiënt voor deze techniek in ons laboratorium is 9%.
  10. Voeren meten van plaque met behulp van dezelfde software door het handmatig markeren van de plaque met behulp van de cursor. Klik op 'classificeren' op AMS om automatisch berekenen van de echogeniciteit van de plaque en de rang volgens zijn gevoeligheid voor breuk. Klikop het raam "Plaque Kenmerken" om deze informatie te zien.

Representative Results

Laser Doppler Imaging met Iontoforese

De mediane bloed flux eenheden volgens de laser Doppler scans van een gezonde vrouw van middelbare leeftijd vrij van CVD worden getoond in Figuur 1. Er was een duidelijke toename van de mediane bloed flux zowel ACh en SNP. Baseline bloed flux was 48 perfusie eenheden voor ACh, en 67 perfusie eenheden voor SNP. Extra bloed flux in reactie op ACh was 455 perfusie eenheden en SNP 446 perfusie eenheden. Dit leverde een 831% en 566% toename van de perfusie (ten opzichte van baseline) voor ACh en SNP respectievelijk. De waarden die worden aangeboden zijn zeer afhankelijk van het gebruikt om de huid bloed flux te onderzoeken, samen met omgevingsfactoren apparatuur.

Flow-gemedieerde dilatatie en Glyceryltrinitraat-gemedieerde Dilation

Figuur 2 toont de baseline en piek diameters voor MKZ en GTN evaluaties vanuit een gezonde jonge man vrij van HVZ. Debasislijn diameter van de slagader was 3,0 mm voor de MKZ en GTN assessments. De piek diameter in het MKZ test was 3,3 mm, terwijl voor de GTN beoordeling was 3,9 mm, die respectievelijk overeenkomt met een stijging van 10 en 30% van de bloedstroom ten opzichte van de basislijn.

Intima-media dikte

Figuur 3 toont de linker halsslagader van een gezond individu. Berekening van cIMT waarden wordt uitgevoerd met behulp van geautomatiseerde randdetectie software. De cIMT in de muur was 0.83mm en het lumen diameter van het vat was 7.71mm. De resultaten voor de rechter halsslagader in dezelfde persoon zijn 0.87mm voor cIMT en 7.80mm het lumen diameter. Wanneer het gemiddelde van de lectuur van beide kanten, cIMT was 0,85 mm, en lumendiameter was 7.76mm.

Figuur 1
Figuur 1. Changes in bloed flux reactie laser Doppler beeldvorming met iontoforese. Na voltooiing van een basislijn scannen uitgangsbloeddruk flux te meten, 10 scans (scan 1 tot 10) met iontoforese van ACh en SNP met 30 pa elektrische stroom uitgevoerd. Volgende iontoforese, werden 2 herstel scans uitgevoerd. ACh = acetylcholine; SNP = natriumnitroprusside.

Figuur 2
Figuur 2. Flow-gemedieerde en nitroglycerine-gemedieerde dilatatie. De grafiek toont de basislijn diameter en een duidelijke stijging van de maximale diameters na toepassing van de flow-gemedieerde en glyceryl-trinitrate gemedieerde dilatatie stimuli. MKZ = flow-gemedieerde dilatatie; GTN = glyceryl-trinitraat gemedieerde dilatatie.

Figuur 3
Figuur 3. echografie van de halsslagader. Een echo van de linker halsslagader wordt getoond met een regio van belang geplaatst 1 cm vanaf de carotisvork (punt van splitsing). Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken .

Discussion

De onderhavige manuscript geeft de methode van verscheidene afzonderlijke beoordeling van vasculaire functie en morfologie die in het perifere vaatstelsel kan worden uitgevoerd. Elke evaluatie geeft informatie over de verschillende stadia van atherosclerose, en helpen om de vasculaire profiel van de verschillende vasculaire gebieden te karakteriseren.

We hebben eerder gemeld dat microvasculaire endotheliale functie onafhankelijk van grote vaten endotheelfunctie in een populatie van reumatoïde artritis patiënten met een verhoogd risico op CVD 39. Bovendien, evaluaties van de vaatfunctie en morfologie waren ook onafhankelijk van elkaar in dezelfde groep patiënten en bij patiënten met HVZ 40,41. Deze bevindingen kunnen worden verklaard door de heterogeniteit en de structuur van endotheelcellen in verschillende vasculaire gebieden 38, evenals een mogelijke vertraging van progressie functionele veranderingen morfologischeAfwijkingen in het vat. Een studie van Hashimoto en collega's 42 bleek dat verschillende deelnemers met atherosclerose MKZ-waarden, maar normale cIMT waarden gedaald. Deze bevindingen suggereren dat behandeling van subklinische atherosclerose behulp van verschillende methoden is belangrijk het mondiale effecten van CVD ontcijferen.

Het belang van de microvasculatuur in gezondheid en ziekte krijgt steeds meer aandacht in de medische literatuur. De haarvaten vormen een veel groter oppervlak dan grote schepen waardoor ze belangrijke doelstellingen voor schade als gevolg van schadelijke stimuli 43. Er is verondersteld dat microvaatjes de primaire bron van ontstekingsmediatoren die het endotheel van de grotere schepen leidt tot letselvorming 43 infiltreren kunnen zijn. Bij type II diabetes, microvasculaire ziekte vooraf meestal grote schipziekte 44, en in andere populaties met een verhoogd risico voor CVD zoals reumatoïde Arthritis, ingrepen die de CVD risico te verminderen verbeteren microvasculaire, maar niet groot schip, endotheelfunctie 45,46. Tezamen suggereren deze bevindingen dat het onderzoek van microvasculaire functie kunnen helpen bij de complexe mechanismen atherosclerose initiëren.

In het huidige werk, de beoordeling van microvasculaire endotheliale functie werd uitgevoerd met behulp van LDI met iontoforese van vasoactieve middelen. Verschillende andere evaluaties kunnen worden gebruikt om microvasculaire functie zoals nailfold capillaroscopy en veneuze occlusie plethysmografie beoordelen. De eerstgenoemde beoordeling geeft informatie slechts microvasculaire morfologie, terwijl de laatste is tijdrovend en in sommige protocollen invasieve door toediening intra- brachialis vasoactieve middelen 1. Daarentegen LDI biedt een eenvoudige, tijd-efficiënte aanpak microvasculaire perfusie huid bloedvaten te meten in reactie op vasoactieve agentia die toegediend non-invastend. De meting van de doorbloeding van de huid heeft opgedaan brede acceptatie in de literatuur te gebruiken omwille van de toegankelijkheid en de sterke correlatie met gevestigde CVD 12. Bovendien is het voordeel van LDI boven andere Doppler technieken zoals laser Doppler flowmetry, is dat het gelijktijdig scannen meerdere punten in een bepaald gebied en derhalve vertegenwoordigen cellulaire bewegingsartefacten en plaatselijke verschillen huid bloedstroom, die beide kunnen beïnvloeden de perfusie van het schip 47,48.

Ondanks de duidelijke voordelen van iontoforese is belangrijk op te merken dat de huidige geïnduceerde vasodilatatie (CIV) van iontoforese kan de effecten van de vasoactieve middelen vooral bij de kathode verwarren. De keuze van het voertuig voor geneesmiddelafgifte kan helpen om dit effect te verminderen, met 0,5% natriumchloride (zoals in het huidige protocol) doeltreffend beperken CIV 18. Verder gebruik van de grotere kamers diameter en lage elektrische curhuur (zoals gebruikt in de onderhavige protocol) Alle helpen CIV 18 verminderen. Toepassing van een controleplaats wordt ook aanbevolen 12. Biologische en gedragsmatige factoren kunnen invloed hebben op de betrouwbaarheid en reproduceerbaarheid van de techniek. Zo hebben circadiane variatie en roken aangetoond microvasculaire endotheel 49,50 beïnvloeden. Strikte opname-omstandigheden moeten worden nageleefd om nauwkeurige resultaten te verkrijgen en gevestigde richtsnoeren moeten worden gevolgd bij het ​​ontwerpen van protocollen 12.

Meting van MKZ en GTN-gemedieerde dilatatie geeft informatie over endotheliale dysfunctie in de grote bloedvaten, en wordt veel gebruikt in de niet-invasieve vasculaire onderzoek. De MKZ-techniek zorgt surrogaat informatie over NO biobeschikbaarheid en is een nuttige prognostische marker van cardiale gebeurtenissen in verschillende klinische populaties 7-9. In het huidige werk, het protocol gepresenteerd rekeningen voor veel van de factoren diezijn noodzakelijk voor een adequate stimulering van NO-gemedieerde vasodilatatie 25. Zo werd de afsluitende manchet distaal geplaatst om de ultrasone sonde en om de pols 27 wordt de duur van ischemie was 5 min en 26 voldoende tijd liet het "echte" piek diameter opnemen volgende reactieve hyperemie 28. Helaas heeft het protocol niet onder karakterisering van de shear stress profiel als de automatische rand detectie software gelijktijdig opnemen van het schip diameter en polsgolfsnelheid signaal niet toe te staan. De berekening van afschuifspanning integraal nauwkeurige meting MKZ 26 en we aanbevolen waar mogelijk, vasculaire groepen combineren software waarmee dergelijke metingen te verrichten.

Evaluaties van MKZ en-GTN gemedieerde dilatatie zijn ook gevoelig voor het milieu en biologische variaties 24, zoals kleine veranderingen in de vasculaire diameterontlokken grote MKZ / GTN reacties. Bijvoorbeeld, typisch MKZ waarden voor gezonde vrijwilligers variëren 5-10% 51, wat overeenkomt met een 0,25 - 0.5mm arteriële diameter voor een slagader met een diameter van 5 mm. Gezien deze kleine veranderingen in de arteriële diameter, moet aandacht worden besteed aan de technische en biologische factoren die de meting kunnen beïnvloeden. Inderdaad kan MKZ worden beïnvloed door diverse biologische en gedragsmatige factoren zoals sympathische 52, slaapgebrek 53, cafeïne consumptie 54, rokende 55, antioxidanttherapie 56 en tijd 57. Daarom is het belangrijk om te controleren voor deze factoren gebruik van de informatie van gevestigde richtlijnen 24,25.

Evaluatie van geavanceerde maar subklinische atherosclerose werd gedaan met behulp van cIMT. De techniek is gebruikt in verschillende klinische populaties en geeft gedetailleerd arteriële structure vergelijking met meer geavanceerde technieken zoals magnetische resonantie 34. Zoals bij de andere vasculaire technieken gemeten cIMT vereist een zorgvuldige afweging van technische factoren die de meting beïnvloeden. Algemeen moeten cIMT worden uitgevoerd gebieden vrij van plaque in de muur van de halsslagader. Vergelijkbaar met MKZ, meting van cIMT wordt uitgevoerd met behulp van hoge-resolutie echografie en dus is zeer gebruiksvriendelijk afhankelijk. Gemeld variatiecoëfficiënt (CofV) range 2,4-18,3% 58, terwijl het voor MKZ is 1-84% 59. Zelfs wanneer beide technieken worden uitgevoerd door bevoegde ultrasonographers externe factoren goed gecontroleerde, blijft er een grote CofV 58,60,61. Een reden hiervoor kan zijn dat analyse van vasculaire grenzen worden uitgevoerd met handmatige methoden 60,61. Een dergelijke analyse kan de betrouwbaarheid verminderen als beeldvorming artefacten zoals valse grenzen, het geluid van de ultrasound sein, en verstoring van schepen kan invloed hebben op de interpretatie van het beeld 22.

Recente ontwikkelingen in continue geautomatiseerde edge-detectie software zijn sterk verbeterd de detectie van vaatwand grenzen 21,22. In de onderhavige studie werd VIA software waarmee de slagader diameter meten, terwijl AMS werd gebruikt voor het detecteren cIMT. Het gebruik van deze software vermindert operator afhankelijkheid, maar bij AMS, zekere exploitantcontrole nog beschikbaar in situaties waarin de beeldkwaliteit slecht 62 zijn. Laboratoria die gebruik maken van geautomatiseerde edge detectie software in het algemeen de neiging om laag CofV 58,63,64 hebben, dus moet het doel van alle vasculaire onderzoekslaboratoria om geautomatiseerde meting van vasculaire grenzen op te nemen met het oog op de nauwkeurigheid van de resultaten te waarborgen. Het is ook een goede gewoonte om de resultaten van de reproduceerbaarheid studies voor specifieke protocollen te melden bij het publiceren studie resultaten.

09/06, nog steeds een gebrek aan studies naar het verband tussen armen endotheelfunctie en cardiovasculaire resultaten onderzocht zoals myocardiaal infarct en beroerte. Verdere prospectieve studies zijn nodig om deze problemen aan te pakken. Een andere beperking is het gebruik van menselijke operators om de evaluaties uit te voeren en het verrichten van de analyse. Dit introduceert een potentiële bron van vooringenomenheid; dit kan echter worden beperkt door verblinden de exploitant de resultaten of zodat de lezer verschilt van de operator. Hetis eveneens belangrijk dat de lezer volgens een gestandaardiseerd protocol voor gegevensanalyse, zodat alle gegevens consistent geanalyseerd.

Samengevat, de huidige manuscript geeft gedetailleerde informatie over de methodologische stappen die nodig zijn om met succes evaluaties van microvessel en groot schip endotheelfunctie evenals vasculaire morfologie van de perifere circulatie te voeren. Indien samen gebruikt, de evaluaties verschaffen globale informatie over de verschillende stadia van atherosclerose. Verdere prospectieve studies naar het potentieel diagnostische rol van deze technieken worden gerechtvaardigd.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Laser Doppler Imager Moor Instruments, Devon, UK moorLDI2
Iontophoresis Controller Moor Instruments, Devon, UK MIC2
Miochol-E 20 mg Novartis UK Prescribed by physician Acetylcholine for endothelium-dependent function
Nitroprussiat Fides 50 mg Rottapharm Spain Prescribed by physician Sodium nitroprusside for endothelium-independent function
Doppler Ultrasound Siemens PLC, Camberley UK Accuson Antares
Glyceryl Trinitrate 500 mcg Alpharma, Barnstaple, UK Prescribed by physician

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Sandoo, A., Veldhuijzen van Zanten, J. J. C. S., Metsios, G. S., Carroll, D., Kitas, G. D. The endothelium and its role in regulating vascular tone. The Open Cardiovascular Medicine Journal. 4, 302-312 (2010).
  2. Lerman, A., Zeiher, A. M. Endothelial Function: Cardiac Events. Circulation. 111, (3), 363-368 (2005).
  3. Anderson, T. J., et al. Close relation of endothelial function in the human coronary and peripheral circulations. Journal of American College of Cardiology. 26, (5), 1235-1241 (1995).
  4. Takase, B., et al. Close relationship between the vasodilator response to acetylcholine in the brachial and coronary artery in suspected coronary artery disease. International Journal of Cardiology. 105, (1), 58-66 (2005).
  5. Khan, F., Patterson, D., Belch, J. J., Hirata, K., Lang, C. C. Relationship between peripheral and coronary function using laser Doppler imaging and transthoracic echocardiography. Clinical Science.(Lond). 115, (9), 295-300 (2008).
  6. Rossi, R., Nuzzo, A., Origliani, G., Modena, M. G. Prognostic role of flow-mediated dilation and cardiac risk factors in post-menopausal women). Journal of American College of Cardiology. 51, (10), 997-1002 (2008).
  7. Brevetti, G., Silvestro, A., Schiano, V., Chiariello, M. Endothelial dysfunction and cardiovascular risk prediction in peripheral arterial disease: additive value of flow-mediated dilation to ankle-brachial pressure index. Circulation. 108, (17), 2093-2098 (2003).
  8. Gokce, N., et al. Predictive value of noninvasively determined endothelial dysfunction for long-term cardiovascular events in patients with peripheral vascular disease. Journal of American College of Cardiology. 41, (10), 1769-1775 (2003).
  9. Jadhav, U. M., Sivaramakrishnan, A., Kadam, N. N. Noninvasive assessment of endothelial dysfunction by brachial artery flow-mediated dilatation in prediction of coronary artery disease in Indian subjects. Indian Heart Journal. 55, (1), 44-48 (2003).
  10. Ross, R. Atherosclerosis - an inflammatory disease. The New England. Journal of Medicine. 340, 115-126 (1999).
  11. Celermajer, D. S., Sorensen, K. E., Bull, C., Robinson, J., Deanfield, J. E. Endothelium-dependent dilation in the systemic arteries of asymptomatic subjects relates to coronary risk factors and their interaction. Journal of American College of Cardiology. 24, (6), 1468-1474 (1994).
  12. Roustit, M., Cracowski, J. L. Assessment of endothelial and neurovascular function in human skin microcirculation. Trends in Pharmacological Sciences. 34, (7), 373-384 (2013).
  13. Ahn, H., Johansson, K., Lundgren, O., Nilsson, G. E. In vivo evaluation of signal processors for laser Doppler tissue flowmeters. Medical & Biological Engineering & Computing. 25, (2), 207-211 (1987).
  14. Kalia, Y. N., Naik, A., Garrison, J., Guy, R. H. Iontophoretic drug delivery. Advanced Drug Delivery Reviews. 56, (5), 619-658 (2004).
  15. Morris, S. J., Shore, A. C. Skin blood flow responses to the iontophoresis of acetylcholine and sodium nitroprusside in man: possible mechanisms. Journal of Physiology. 496, (Pt 2), 531-542 (1996).
  16. Sandoo, A., Veldhuijzen van Zanten, J. J. C. S., Metsios, G. S., Carroll, D., Kitas, G. D. Vascular function and morphology in rheumatoid arthritis: a systematic review). Rheumatology. 50, (11), 2125-2139 (2011).
  17. Metsios, G. S., et al. Individualised exercise improves endothelial function in patients with rheumatoid arthritis. Annals of Rheumatic Diseases. 73, (4), 748-751 (2014).
  18. Ferrell, W. R., et al. Elimination of electrically induced iontophoretic artefacts: implications for non-invasive assessment of peripheral microvascular function. Journal of Vascular Research. 39, (5), 447-455 (2002).
  19. Khan, F., Newton, D. J., Smyth, E. C., Belch, J. J. F. Influence of vehicle resistance on transdermal iontophoretic delivery of acetylcholine and sodium nitroprusside in humans. Journal of Applied Physiology. 97, (3), 883-887 (2004).
  20. Celermajer, D. S., et al. Non-invasive detection of endothelial dysfunction in children and adults at risk of atherosclerosis. Lancet. 340, (8828), 1111-1115 (1992).
  21. Sidhu, J. S., Newey, V. R., Nassiri, D. K., Kaski, J. C. A rapid and reproducible on line automated technique to determine endothelial function. Heart. 88, (3), 289-292 (2002).
  22. Sonka, M., Liang, W., Lauer, R. M. Automated analysis of brachial ultrasound image sequences: early detection of cardiovascular disease via surrogates of endothelial function. IEEE Transactions on Medical Imaging. 21, (10), 1271-1279 (2002).
  23. Vallance, P., Collier, J., Moncada, S. Effects of endothelium-derived nitric oxide on peripheral arteriolar tone in man. Lancet. 2, (8670), 997-1000 (1989).
  24. Corretti, M. C., et al. Guidelines for the ultrasound assessment of endothelial-dependent flow-mediated vasodilation of the brachial artery: A report of the International Brachial Artery Reactivity Task Force. Journal of American College of Cardiology. 39, (2), 257-265 (2002).
  25. Thijssen, D. H., et al. Assessment of flow-mediated dilation in humans: a methodological and physiological guideline. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 300, (1), H2-H12 (2011).
  26. Mullen, M. J., et al. Heterogenous Nature of Flow-Mediated Dilatation in Human Conduit Arteries In Vivo : Relevance to Endothelial Dysfunction in Hypercholesterolemia. Circulation Research. 88, (2), 145-151 (2001).
  27. Doshi, S. N., et al. Flow-mediated dilatation following wrist and upper arm occlusion in humans: the contribution of nitric oxide. Clinical Sciences.(Lond). 101, (6), 629-635 (2001).
  28. Black, M. A., Cable, N. T., Thijssen, D. H., Green, D. J. Importance of measuring the time course of flow-mediated dilatation in humans). Hypertension. 51, (2), 203-210 (2008).
  29. Traub, O., Berk, B. C. Laminar Shear Stress : Mechanisms by Which Endothelial Cells Transduce an Atheroprotective Force. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 18, (5), 677-685 (1998).
  30. Pyke, K. E., Tschakovsky, M. E. The relationship between shear stress and flow-mediated dilatation: implications for the assessment of endothelial function. The Journal of Physiology Online. 568, (2), 357-369 (2005).
  31. Pyke, K. E., Dwyer, E. M., Tschakovsky, M. E. Impact of controlling shear rate on flow-mediated dilation responses in the brachial artery of humans. Journal of Applied Physiology. 97, (2), 499-508 (2004).
  32. Pignoli, P., Tremoli, E., Poli, A., Oreste, P., Paoletti, R. Intimal plus medial thickness of the arterial wall: a direct measurement with ultrasound imaging. Circulation. 74, (6), 1399-1406 (1986).
  33. Corrado, E., et al. Endothelial dysfunction and carotid lesions are strong predictors of clinical events in patients with early stages of atherosclerosis: a 24-month follow-up study. Coronary Artery Disease. 19, (3), 139-144 (2008).
  34. Touboul, P. J., et al. Mannheim carotid intima-media thickness and plaque consensus (2004-2006-2011). An update on behalf of the advisory board of the 3rd, 4th and 5th watching the risk symposia, at the 13th, 15th and 20th European Stroke Conferences, Mannheim, Germany, 2004, Brussels, Belgium, 2006, and Hamburg, Germany, 2011. Cerebrovascular Disease. 34, (4), Mannheim, Germany. 290-296 (2012).
  35. Oren, A., Vos, L. E., Uiterwaal, C. S. P. M., Grobbee, D. E., Bots, M. L. Cardiovascular Risk Factors and Increased Carotid Intima-Media Thickness in Healthy Young Adults: The Atherosclerosis Risk in Young Adults (ARYA) Study. Archives of Internal Medicine. 163, (15), 1787-1792 (2003).
  36. Wohlin, M., et al. Both cyclooxygenase- and cytokine-mediated inflammation are associated with carotid intima-media thickness. Cytokine. 38, (3), 130-136 (2007).
  37. Iglesias del, S. a, Bots, M. L., Grobbee, D. A., Hofman, A., Witteman, J. C. Carotid intima-media thickness at different sites: relation to incident myocardial infarction; The Rotterdam Study. European Heart Journal. 23, (12), 934-940 (2002).
  38. Aird, W. C. Phenotypic heterogeneity of the endothelium: II. Representative vascular beds. Circulation Research. 100, (2), 174-190 (2007).
  39. Sandoo, A., Carroll, D., Metsios, G. S., Kitas, G. D., Veldhuijzen van Zanten, J. J. The association between microvascular and macrovascular endothelial function in patients with rheumatoid arthritis: a cross-sectional study. Arthritis Research and Therapy. 13, (3), R99 (2011).
  40. Sandoo, A., Hodson, J., Douglas, K. M., Smith, J. P., Kitas, G. D. The association between functional and morphological assessments of endothelial function in patients with rheumatoid arthritis: a cross-sectional study. Arthritis Research and Therapy. 15, (5), R107 (2013).
  41. Rohani, M., Jogestrand, T., Kallner, G., Jussila, R., Agewall, S. Morphological changes rather than flow-mediated dilatation in the brachial artery are better indicators of the extent and severity of coronary artery disease. Journal of Hypertension. 23, (7), 1397-1402 (2005).
  42. Hashimoto, M., et al. Correlation between flow-mediated vasodilatation of the brachial artery and intima-media thickness in the carotid artery in men. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 19, (11), 2795-2800 (1999).
  43. Stokes, K. Y., Granger, D. N. The microcirculation: a motor for the systemic inflammatory response and large vessel disease induced by hypercholesterolaemia. Journal of Physiology. 562, (Pt 3), 647-653 (2005).
  44. Krentz, A. J., Clough, G., Byrne, C. D. Vascular disease in the metabolic syndrome: do we need to target the microcirculation to treat large vessel disease). Journal of Vascular Research. 46, (6), 515-526 (2009).
  45. Sandoo, A., et al. Anti-TNFalpha therapy may lead to blood pressure reductions through improved endothelium-dependent microvascular function in patients with rheumatoid arthritis. Journal of Human Hypertension. 25, (11), 699-702 (2011).
  46. Sandoo, A., van Zanten, J. J., Toms, T. E., Carroll, D., Kitas, G. D. Anti-TNFalpha therapy transiently improves high density lipoprotein cholesterol levels and microvascular endothelial function in patients with rheumatoid arthritis: a pilot study. BMC. Musculoskeletal Disorders. 13, 127 (2012).
  47. Wardell, K., Jakobsson, A., Nilsson, G. E. Laser Doppler perfusion imaging by dynamic light scattering. The IEEE Transactions on Biomedical Engineering. 40, (4), 309-316 (1993).
  48. Line, P. D., Mowinckel, P., Lien, B., Kvernebo, K. Repeated measurement variation and precision of laser Doppler flowmetry measurements. Microvascular Research. 43, (3), 285-293 (1992).
  49. Elherik, K., Khan, F., McLaren, M., Kennedy, G., Belch, J. J. F. Circadian variation in vascular tone and endothelial cell function in normal males. Clinical Science. 102, (5), 547-552 (2002).
  50. Pellaton, C., Kubli, S., Feihl, F., Waeber, B. Blunted vasodilatory responses in the cutaneous microcirculation of cigarette smokers. American Heart Journal. 144, (2), 269-274 (2002).
  51. Moens, A. L., Goovaerts, I., Claeys, M. J., Vrints, C. J. Flow-Mediated Vasodilation: A Diagnostic Instrument, or an Experimental Tool. Chest. 127, (6), 2254-2263 (2005).
  52. Hijmering, M. L., et al. Sympathetic activation markedly reduces endothelium-dependent, flow-mediated vasodilation. Journal of the American College of Cardiology. 39, (4), 683-688 (2002).
  53. Takase, B., Akima, T., Uehata, A., Ohsuzu, F., Kurita, A. Effect of chronic stress and sleep deprivation on both flow-mediated dilation in the brachial artery and the intracellular magnesium level in humans. Clinical Cardiology. 27, (4), 223-227 (2004).
  54. Papamichael, C. M., et al. Effect of coffee on endothelial function in healthy subjects: the role of caffeine. Clinical Sciences(Lond). 109, (1), 55-60 (2005).
  55. Lekakis, J., et al. Effect of acute cigarette smoking on endothelium-dependent brachial artery dilatation in healthy individuals). Americal Journal of Cardiology. 79, (4), 529-531 (1997).
  56. Engler, M. M., et al. Antioxidant Vitamins C and E Improve Endothelial Function in Children With Hyperlipidemia: Endothelial Assessment of Risk from Lipids in Youth. Circulation. 108, (9), 1059-1063 (2003).
  57. Etsuda, H., et al. Morning attenuation of endothelium-dependent, flow-mediated dilation in healthy young men: possible connection to morning peak of cardiac events. Clinical Cardiology. 22, (6), 417-421 (1999).
  58. Kanters, S. D., Algra, A., van Leeuwen, M. S., Banga, J. D. Reproducibility of in vivo carotid intima-media thickness measurements: a review. Stroke. 28, (3), 665-671 (1997).
  59. West, S. G., et al. Biological correlates of day-to-day variation in flow-mediated dilation in individuals with Type 2 diabetes: a study of test-retest reliability. Diabetologia. 47, (9), 1625-1631 (2004).
  60. Roos, N. M., Bots, M. L., Schouten, E. G., Katan, M. B. Within-subject variability of flow-mediated vasodilation of the brachial artery in healthy men and women: implications for experimental studies. Ultrasound in Medince and Biology. 29, (3), 401-406 (2003).
  61. Tyldum, E. V., Madssen, E., Skogvoll, E., Slordahl, S. A. Repeated image analyses improves accuracy in assessing arterial flow-mediated dilatation. Scandinavian Cardiovascular Journal. 42, (5), 310-315 (2008).
  62. Liang, Q., Wendelhag, I., Wikstrand, J., Gustavsson, T. A multiscale dynamic programming procedure for boundary detection in ultrasonic artery images. The IEEE Transactions on Biomedical Engineering. 19, (2), 127-142 (2000).
  63. Hijmering, M. L., et al. Variability of flow mediated dilation: consequences for clinical application. Atherosclerosis. 157, (2), 369-373 (2001).
  64. Woodman, R. J., et al. Improved analysis of brachial artery ultrasound using a novel edge-detection software system. Journal of Applied Physiology. 91, (2), 929-937 (2001).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics