齧歯類網膜とリモート四肢虚血プレコンディショニングの保護効果に機能を評価するために電図を用いて、

Neuroscience

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Brandli, A., Stone, J. Using the Electroretinogram to Assess Function in the Rodent Retina and the Protective Effects of Remote Limb Ischemic Preconditioning. J. Vis. Exp. (100), e52658, doi:10.3791/52658 (2015).

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Abstract

Introduction

ERGは、光に応答して、網膜によって生成され、眼の角膜表面から記録された電位です。記録条件は、慎重に管理されている場合、ERGは、網膜機能を評価するための種々の方法で使用することができます。ここでは、「フラッシュERG」、網膜が全体野の背景に提示簡単な、明るいフラッシュにさらされたときに発生する電位を記録する方法を説明しました。全体野が均一に光を分散し、光のフラッシュがほぼ均一に全体の網膜に到達します。網膜は、暗い記録前適応、及び動物の記録のために準備されるように暗順応を維持し、ERGが得られた場合、ロッドと錐体光受容体の両方によって生成されます。

暗順応フラッシュERGは、次の2つの方法で分析された特徴的な波形を有しています。まず、ERG波形の初期および後期成分を区別し、神経細胞の配列に関連しています網膜中のAlの活性化。最古のコンポーネントは、短い待ち時間負に向かう可能性のある、A波( 図1)です。これは、b波と呼ばれ、正方向電位が続きます。 b波の立ち上がり位相が別の構成要素(振動電位またはOPS)と考えられている振動を示しています。 A波は、内顆粒層の細胞、およびアマクリン細胞による1のOPによってb波、光受容体によって発生すると考えられます。

刺激強度に基づいて、非常に薄暗いフラッシュへの対応は、暗順応閾値応答が可能であると呼ばれます。暗順応の閾値応答は、網膜神経節細胞2-4から生成されていると理解されます。第二に、フラッシュERGは明順応により分離することができる、または2つのフラッシュプロトコルによって棒状と円錐駆動コンポーネントに、以下に説明します。明所視条件下では、円錐集団が低いため、A波は、ラットでは検出可能ではなく、のOP及びb波であります5明確。その網膜高いコーン集団を持つ霊長類では、ロッド状と円錐経路の両方は、検出波6を発生させます。

多くの場合、フラッシュERGから抽出された2つの有用な尺度は、図2に示される典型的なフラッシュの応答と、 図1のように測定し、A-の振幅とb波である。感光体集団はdamagingly明るいへの曝露によって、例えば、低減された場合光、ERGのすべてのコンポーネントが低減されます。このような遠隔虚血プレコンディショニング(RIP)などの神経保護の介入は、A及びB波( 図3)の振幅を維持することによって検証することができます。要約すると、ERGの分析は、健康、光損傷を受けたとneuroprotected網膜の間の比較を可能にします。

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Protocol

このプロトコルは、シドニー大学の動物ケアのガイドラインに従っています。

1.メイキング電極

  1. 正極白金線直径1〜2ミリの短い(5 cm)の長さから(角膜に接触することになる1)を構築します。ループ直径が数mmにファッションを。あなたのアンプの入力段に到達するために十分な長さ、従来の鉛にこのループを接続します( 図4を参照)。
  2. 銀/塩化銀はまた、大会リードに接続直径1〜2ミリ、ペレット使用して(動物の口の中に移動します)負極を構成する( 図4参照)。
  3. (動物の臀部になります)を参照電極として、清潔な注射針(23 G)を使用し、また、適切な長さのリードに接続された( 図4参照)。
  4. 理想的には、(正のU 3つの電極を接続し、機器の製造業者によって提供される3つのリードケーブルを使用94;角膜、負→口、アンプへの臀部→参照)。

光刺激とERGセットアップの2の接続とキャリブレーション

  1. ダークにすることができる小型の記録実験室、作成(または見つけ)。赤製オーバーベンチ光または赤ヘッドランプのいずれかまたは両方を装備。
  2. セットアップ時に、ラットの目に到達する赤色光照度が1ルクスを超えていないことを確認するルクスメーターを使用してください。
    注:中性濃度フィルタは、ランプの明るさを減少させるために使用することができ、ランプ光源は、具体的に、赤色光を放出しなければなりません。光源は低い(可視)波長を放射する場合ダーク適応性が損なわれます。
  3. あなたが持っているであろう記録研究室に入るすべての迷光を封鎖(これは多くの場合、不透明なテープで永続性を必要とする)と、オーバーフィットするのに十分な大きさ、など薄暗い減光フィルタ(これはシートに購入することができます)、任意のコンピュータの画面を準備ラボ。
    注:迷光と画面の光がラットの眼の暗順応を害するのに十分です。
  4. データ集録ハードウェアにアンプを接続します。アンプに正、負の基準リード線を接続します。コンピュータとLED全体野電源ユニットは確実に接地源に接続されていることを確認してください。
    注:一部のラボでは、建物のグランドに接続され、接地点を専門にしています。水道管は、効果的な代替手段です。
  5. 研究品質の放射計とLED光源を調整します。動物の眼は実験中に配置される位置にあるメーターのセンサーを修正しました。
  6. フラッシュエネルギー、フラッシュ期間、フラッシュ間のフラッシュの繰り返しや時間の段階的な増加にフルフィールドERGプロトコルを実行するプログラム全体野のLEDは、設定をinterstimuls間隔(ISI)と呼ばれます。例えば、フルフィールドプロトコルについては、表1を参照してください。
    注:フルフィールドERGは、Bに繰り返し薄暗いが点滅から増加を点滅段階的な様式で右が点滅します。ツインフラッシュプログラムは、フルフィールドのプロトコルからの続き、ロッドとコーンの応答の分離を可能にします。

ERGの実験に3日前

  1. ダーク記録する前に12時間のSDラットを適応させます。これは、迷光が除去された後、記録研究室でこれを行うことが便利です。

ERG実験の4日目

  1. 録音中、穏やかに加熱される動物のためにアレンジ。私たちは、動物の頭部が全体野へのエントリで正しいポイントで休むことができるように構築された軽金属プラットフォームを使用しています。プラットフォームは、我々は水浴中で40℃に予熱した水をポンプこれを通してチューブを内蔵しています。
    注:経験は、これは37℃での動物のコア温度を維持することを示しています。
  2. 暗条件下でラットを計量。レコードの重みと正しいケタミン(60 mgの/ kg)およびキシラジンを構成する(5ミリグラム/ kg)の用量。ラットGENを抑えますTLYと腹腔内に麻酔薬を注入します。
  3. 注入時に注意してください。動物が無意識になると(通常は5分以内)軽く反射応答が存在するかどうかを確認するために、片足パッドをつまんで麻酔の深さを確認してください。なお、この反射は先に進む前に、存在しないか、または弱いまで待つのがベストです。
  4. 角膜へのアトロピンとproxmethacaineの別の一滴を適用します。
  5. 黒糸の10cmの長さをカットします。簡単な結び目でループ状にして、目の赤道上にループを滑ります。少し締め。影響は最小限の圧力で、やや前方眼球を描画することです。これは、まぶたから透明な角膜を保持します。
  6. カルボマー眼は角膜の表面に低下適用されます。カルボマーは、角膜表面上に残り、まぶたや顔の上にこぼれないようにします。
  7. 加熱されたプラットフォーム上に吸収性寝具を置きます。
  8. 全体野の開口部に推奨代わりに頭をベッド上の位置ラット、。
  9. 挿入int型直腸にernal温度プローブ。尾へのプローブコードをテーピングにより所定の位置に温度プローブを固定します。
  10. 皮下後脚に参照電極(23 G針)を挿入し、アンプに接続します。
  11. 口の中でしっかりと負極(銀/塩化銀ペレット)を配置します。これは口を滑らないようにするには、安定した面に接続するリード線を取り付けます。
  12. 角膜の中心の上に正極を配置します。マイクロマニピュレーターを用いて、電極を静かに角膜に触れることを確認してください。
  13. 37.5°C - チェック体温は37.0です。
  14. 動物が適切に配置され、電極が所定の位置にあるされたら、(暗順応を維持するために)、不透明な材料で、全体のセットアップ(全体野および動物)を羽織ります。我々は、柔らかい黒い布を使用しています。
  15. 取得ソフトウェアで事前収集サンプリングの5ミリ秒で100〜1000ミリ秒の収集時間で2 kHzのサンプリング·レートで設定します。 1〜1000のバンドパスフィルタを設定しますヘルツとそのサンプリングがフラッシュ以下〜250ミリ秒の期間をサンプリングするようにトリガされていることを確認します。
  16. 記録ベースラインを確認してください。これは、外来ノイズを含まないことが、いくつかのアンプのノイズや呼吸振動を表示する必要があります。
  17. ベースラインは外来ノイズを示している場合は、トラブルシューティングを開始します。ほとんどの問題は、電極の位置、またはアースに滑りに関連しています。録音は外来ノイズの自由であることを確認するためにファラデーケージを使用します。
  18. テストフラッシュ、0.4ログスコットcd.sm -2を実行します。 図2Aと同様のERG波形が表示されます。 (:-474±39μVとb波:1,512±160μV、N = 11波)当研究室では0.4ログスコットcd.sm -2フラッシュのための典型的な応答があります。
  19. ダーク10分間の再適応に動物を可能にします。これは、ベースラインを再確認するために、これらの10分を使用すると便利です。
  20. 安定した信号の次の確認は、録音を開始します。
  21. 記録セッションの終了時に、そのボディtemperatをチェックUREを維持しました。電極を取り外します。角膜へのカルボマーポリマーを再適用します。それは、動物のハウジングに戻る前に、完全なモバイルとアクティブになるまで動物が熱パッド上に回復することができます。

5.リモート虚血

  1. 覚醒または麻酔げっ歯類のいずれかでリモート虚血を実行します。
  2. 動物が麻酔されている場合は、膝の明確な、加熱されたプラットフォーム上に置く(上)と後肢の上部にわたって血圧計用カフをスリップ。
  3. 動物は処理さに慣れている場合には、麻酔なしでこの手順を実行することが可能です。これは、2人が必要です。一人は静かに動物を拘束し、第二は、血圧計用カフを適用し、血圧計を運営しています。
  4. 覚醒動物の場合、1後肢無料で、静かに動物をラップするために~15センチ×30〜50センチメートルタオルの一部を使用しています。その頭をホルダの腕や胴体、および場所の間に隠れてと、左前腕(例えば)に背に動物を置きますカフは、今説明しました。
  5. カフを収縮し、空気圧バルブが閉じていることを確認します。麻酔動物で160 mmHgのにカフをポンプと、覚醒動物における180 mmHgです。これは、収縮期血圧(通常は140 mmHgで160 mmHgのそれぞれ)を超えています。
  6. 必要に応じて手持ちのポンプを使用して、これらの圧力を維持します。
  7. 虚血のために計画された時間(私たちは、5分間の再灌流によって分離された5分の2ピリオドを使用)した後、空気圧バルブを緩めてカフ圧を収縮させます。
  8. フットパッドに接続されている皮膚の温度プローブを使用して、リモート虚血の効果を確認してください。皮膚温度は、典型的には、5分間かけて、32-30°Cから落下し、再灌流に回復します。

6.光損傷

  1. 光損傷の手順の前に、ラットが暗順応一晩であることを確認してください。
  2. (遅滞なく我々の実験で)肢虚血以下の適切な時間に、各動物をプレキシガラス箱の中に単独で配置され、WI床式の容器に目の水と食料。
    注:光誘起損傷は、アルビノ動物において行うことができます。
  3. 標準時間(通常は午前9時)に予め較正千ルクスの白色光に切り替え、24時間この状態を維持します。

7. ERGデータ抽出と分析

  1. ERGの平均波形を取得します。減算によって、非ゼロのベースラインの、正しい必要であれば。
  2. ベースラインと第一の電圧差として、(高刺激強度半ばで発表)は、A波の振幅を測定(<30ミリ秒の待ち時間)トラフ( 図1)。
  3. 典型的には80〜100ミリ秒( 図1)の待ち時間で発生する、次の波のa波と正のピークとの間の電圧差としてb波の振幅を測定します。
  4. 90 Hzの遷移帯域で、60-235ヘルツからデータをフィルタリングするために、フーリエ変換を用いて、振動電位を分離します
  5. A及びB波のピークの暗黙の時間(待ち時間)は、有用な測定( 図1)であることができます。ロッド応答を分離するために双子の点滅を使用します。混合応答(フラッシュ1)ロッド応答を分離する( 図2)からの錐体応答(フラッシュ2)を減算します。
  6. 個々の光強度を波およびb波の振幅を正規化(後処理/後処理ベースライン)、または治療群について平均。強度応答曲線は、フラッシュエネルギーに対してグループ振幅と誤差をプロットします。

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Representative Results

プロトコルは、 インビボでげっ歯類の網膜の視覚機能を測定することができます。 A波、光受容体の機能の測定値、及びb波、内網膜の機能の測定値は、 図1に注釈されています。

増加した光刺激を有するロッド支配ERG信号が増加すると、 図2(a)に示すように。 A波は〜0.4ログスコットのcd.sm -2および2.5ログスコットcd.sm -2(図示せず)での飽和までのA波の振幅が増加する時に明らかになります。ツインフラッシュパラダイムは、 図2Bに示すように、円錐ロッド単離反応に混入ERG信号を分離するために使用されてきました。

このERG記録技術は、神経保護の介入を確認するために使用することができます。ベースラインの記録は、光損傷の前には、 図3Aに見られる一週間を完了しました。 において実証波およびb波の振幅の両方を低減光損傷、UREの3B。リモート虚血プレコンディショニングは、 図3Cに見られるように、ERG振幅の損失を低減することができました。リモート虚血技術は、「ひざ」は、上記の止血帯の正しいアプリケーションに依存します。止血帯の不適切な適用は、 図3Dに見られるように、網膜への光損傷を防ぐことはできません。

図1
図1:暗順応ERGからA波とB波の測定を示すトレースは、時間に示すt0で指定された光の明るいフラッシュに暗順応眼の角膜から記録されています。 A波の振幅は最初のトラフ(赤い矢印)にベースラインから測定されます。 b波の振幅は次の正のピーク(青矢印)にA波の谷から測定されます。暗黙の時間(レイテンシ)は、刺激から測定されますトレース上の注目点にアーチファクト(T0)、このようなA波(角かっこ)の谷のように。 この図の拡大版を表示するには、こちらをクリックしてください。

図2
図2:増加フラッシュ強度とロッドとコーンの応答の分離と暗順応ERGの開発光の点滅を増やすに暗順応眼の角膜から記録されている示されたトレース A波は明るい強度で表示されます。 (A)1.4から0.4ログスコットのcd.sm -2を比較すると、ピークb波が飽和しているが、A波が成長し続けています。 (B)では、ツインフラッシュが重ね合わされます。 2 2.0ログスコットcd.sm -2点滅は500ミリ秒ISIによって分離されています。最初のフラッシュは、混合を生成し、応答(黒)であり、第2のフラッシュはコーンのみ応答(点線)を生成します。錐体応答を引くと、分離されたロッド応答(灰色)が得られる。 この図の拡大版を表示するには、こちらをクリックしてください。

図3
図3:ERG代表波形が(A)正常な網膜損傷光に曝露される前にRIPによる網膜光によって損傷(B)、(C)網膜馴化のためにここに示されている網膜の機能の尺度を提供し 、そして(D)網膜は非効率的RIPによって調整され、その後、損傷光にさらさ。同じフラッシュエネルギーは、各レコード(2.0ログcd.sm -2)のために使用しました。 Dのレコード圧力カフのための後肢に誤って配置し、虚血が確立しませんでした。光損傷は、ERG(B)の振幅を減少させ、RIPは減少を緩和します。 この図の拡大版を表示するには、こちらをクリックしてください。

図4
図4:ERG電極をクローズアップ電極は左から右に、示されて構築されます。角膜、口、その後、臀部の皮下に挿入された針に接続されたワニ口クリップで構成されている基準電極に配置される負極に接触する正極。 拡大版を表示するには、こちらをクリックしてくださいこの図の。

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Discussion

上記の暗順応フラッシュERG方法は、ラットの網膜機能を評価するための信頼できる方法です。 A波とB波の両方は、光損傷によ​​って減少しました。リモート虚血プレコンディショニングは、A波とB波の光損傷誘導減少を軽減します。網膜機能のこの保存は遠隔虚血プレコンディショニングは、低酸素症、虚血および運動8-10などの保護事前調整の他の形態に似ている、神経保護を誘導していることを示唆しています。記録設定、光刺激のパラメータ、および動物の状態 - 記録されたERG信号は因子3組によって決定されます。

録音セットアップ

電極が誤って配置された場合ERGは振幅が低減されるか、準備が不完全11を接地されています。近くの電気機器の正しい接地記録のノイズを低減するために、重要です。大きなノイズはファラッドを解決しない場合は、AYケージを使用する必要があります。正極はしっかりERGフルフィールドプロトコルを開始する前に、完了時にチェックの付いている位置の確認と、角膜の中心に位置する必要があります。なお、この電極接点のみが角膜重要です。まぶたあるいはウィスカーとの接触は、信号振幅を減少させることができます。緩い綿の糸は、正極に触れることから瞼を防ぐために、このプロトコルで使用されています。一部の研究者は、信頼性の高いコンタクト12に接触 、眼瞼の防止を確実にするために埋め込 ​​まれた正電極とコンタクトレンズを開発しました。

光刺激を設定します

我々が使用した刺激は、LED光源から、広域スペクトルの白色光を提供します。他の光源は、光刺激11間の比較のためにウェイマスとVingrysを参照して、このようなキセノンストロボ照明とハロゲン照明などの光刺激として適切です。 LEDライトの利点は、しかし、私は各フラッシュとそのエネルギーの持続時間は、容易にプログラム可能であり、急速に光強度の広い範囲でリセットするようです。我々は、しきい値から暗順応げっ歯類の範囲で飽和する(最大応答を生成する)(ジャスト検出可能な応答を生成する)段階的なエネルギーの点滅、のセットを開発しました。

試行錯誤によって、我々はフラッシュへの応答の振幅は同じ強度の先行フラッシュとは無関係であることを確認した間隔(ISIS)刺激間確立されています。フラッシュ明るく、長いISIは、この独立性のために必要。

また、試行錯誤によって、私たちはクリーンな信号を提供するために、各エネルギーで必要な応答の最小数を確立しています。アベレージ以上の応答は、常にクリーンな信号を提供します。エネルギーシリーズは迅速に完了することができるように、私たちは(私たちのプロトコル11分で)の最小値を使用します。迅速な完了が原因で麻酔状態と同種の変化にばらつきを低減します必要に応じて他の変数のためのWS時間は、検討します。

動物の状態

動物の生理機能のいくつかのパラメータを最適化し、得られたERG記録を標準化するために重要です。

温度

A波信号は、外部セグメントにおけるGタンパク質共役光伝達カスケードの光誘導性活性化から生成されます。このカスケードの原動力であり、すべての酵素反応のような、温度依存13,14。麻酔下のげっ歯類は、低体温症の傾向があると記録を通して37.5°Cのコア温度を維持するために外部加熱を必要とします。体温が1〜2°C以上になると、A波およびb波の振幅は減少し、その待ち時間は15を増加させます。

麻酔

安定したERG記録が動かされる動物を必要とします。神経筋遮断薬およびanaesthetIC剤は無意識と静止状態を達成するために、ERG実験に使用されています。ラットのみ16-20覚醒ERG記録の5つのレポートがありました。これらの研究では、電極は、外科的に頭蓋骨に予め注入され、これらの研究の両者はERG 17,20に麻酔の効果を試験しました。

ERG記録のために使用される最も一般的な麻酔薬は、(我々の実験で60mgのケタミンの/ kgおよびキシラジンを5mg / kgのが使用されている)、ケタミンとキシラジンの組み合わせとなっています。これは、ガス状の麻酔などイソフルラン及びハロタンよりERG少ない影響し、高い回収率17,21,22と、比較的非毒性であることが判明しました。このアプローチは、〜40分間動物不動を維持します。半分の用量は同様の期間、記録条件を拡張するために使用することができます。チャンによる研究は、直接とし、麻酔なしでERGを比較し、ケタミン - キシラジンは、測定可能A-およびB-の振幅と待ち時間を乱すないことを示しました波17。ほとんどの研究者は、麻酔薬の条件を標準化した後、実験パラメータをテストします。麻酔薬のいくつかの効果が完全に無視することはできません。

目の環境

目の生理機能は、ERG記録を最適化し、標準化するために、メンテナンスを必要とします。生徒は、標準的なサイズである必要があります。これは散瞳で達成された点眼剤として、最大の拡張を実現するために、適用されます。げっ歯類では、アトロピンまたはフェニレフリンは、23を使用されています。角膜の水和を記録する前に、カルボマーポリマーを適用することによって維持されています。これはまた、正極と角膜との間の電気伝導度を安定させます。角膜が脱水になると、角膜瘢痕および白内障形成が24を発生することがあります。白内障の形成は、マウス25でより一般的であり、角膜の水和を維持するための様々な方法は、水性液体の一定の流れを含む、マウスERG記録に使用されていますかカスタムメイドの接触スタイル電極角膜表面12時とトラップ水和。

網膜の適応状態

これは主要な変数です。上記のプロトコルは、網膜が暗順応、その最も敏感な状態にあることを保証するために設計されています。理想的には、着色されたラットは、このようなSDラットなどの非着色動物、一方で完全に暗順応こと5時間26の最小値を必要とするように暗いハウジングの3時間を要しました。これは、暗順応ERG記録は12時間、一晩、動物を適応させるための標準的な方法です。光の部分的または完全な適合を容易かつ迅速に全体野刺激標準強度の背景光をオンにすることによって達成することができます。明順応した後、しかし、完全な暗順応を達成するために時間がかかります。したがって、細心の注意の提案は目を記録する前に光に誤って露出していないことを確認します。

ERG記録技術は、以下によって制限されています決定する因子( すなわち、ERG&刺激セットアップ)とERG検査の研究者の習熟度以上。経験の浅い研究者らは、可変ERG記録を持っている可能性があります。差異は、視覚機能の低下や利益などの結果を、比較するために十分な大きさのサンプルサイズを作成することによって減少させることができます。あるいは、ERG記録は、ベースラインの記録及び後処理記録の間で正規化することができます。正規化されたデータは、グループ化して分析することができます。 ERGデータを提示する場合は、グループデータと代表的な波形を表示する標準的な方法です。

上記のすべては、注意深く制御された場合、ERGの振幅は、網膜の機能状態の尺度です。 ERGは、一貫して光損傷または遺伝的に誘導された変性27,28によって生じる感光層の枯渇によって振幅が低減される逆に、RIPのような介入の保護効果は、AMPLで検出することができますERG 29のitude。 ERGはまた、網膜8-10,30に虚血プレコンディショニング、低酸素プレコンディショニング、運動、食事のサフランの保護効果を実証する中で使用されています。

動力学モデリングの感光体における光伝達の既知の生理学的事象に基づいているが、ロドプシンの光伝達カスケードの力学の知識を成長し、網膜のシナプス結合の、ERGの世代のモデルの開発、および洗練されたERG波形分析を奨励してきたことは可能です、内側の網膜回路31の我々の理解。例えば、A波の運動モデルは、光情報伝達の際に発生する生化学的な手順に基づいてモデルを適合することは、ピーク応答、タイミング遅延及び感度14などのモデルパラメータの比較を可能にしています。

モデルの欠点は、網膜circuitrに関する仮定に依存しているということですyは、唯一の前提条件が許す限り有益であることができます。この欠点を踏まえて、A波動力学モデルは、最近、波のダイナミクス32を省略し過ぎのために批判されています。光受容体変性の研究において、ERG波形解析は、典型的には、異なる理由のために実行されません。光受容体の変性は、視覚機能、その結果、波およびb波のパラメータのさらなる分析を保証するものではなく、8,9,27,30の劇的な損失で、その結果、多くの場合、厳しいです。いずれにしても、A波とB波のERGモデリングは、多くのげっ歯類の研究における標準的な慣行とERGモデルの詳細情報として採用されている、波のため、b波とOPSがフッドによる研究、およびレビューで見つけることができますウェイマスとVingrys、フリッシュマン、およびWachtmeister 11,32-34による記事。

要約すると、提示暗順応ERGの方法は、神経保護の介入のとない網膜変性の間に測定可能な差異を記録することができます遠隔虚血プレコンディショニングとしてUCH。信頼性の高いERG記録に不可欠な要素が記載されています。感光体と内側の網膜機能のERG測定は、網膜の変性、および視覚機能の、遺伝様々なバイオ医薬品および薬理学的介入の効果を研究する研究者のために有用です。

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Disclosures

ジョナサン·ストーンは、CSCM Pty Ltdのディレクターであります

Acknowledgements

著者らは、げっ歯類の監視、取り扱いや実験で夫人シャロンSpanaの支援を感謝しています。博士課程の資金援助は、ビジョンに優秀シドニー大学とオーストラリア研究センターにより提供されています。

Materials

Name Company Catalog Number Comments
PC computer
Powerlab, 4 channel acquistion hardware AD Instruments PL 35044 Acquistion of ERG
Animal Bio Amp AD Instruments FE 136 Amplifier for ERG
Lab chart AD Instruments Signal collection software
Ganzfield Photometric solutions FS-250A Light stimulus
Ganzfield operating system Photometric solutions
Research Radiometer International light technologies ILT-1700 calibrate light series
Lux meter LX-1010B check red light illumanation
Excel Microsoft
Lead wires AD Instruments Connect postive, negative ground electrodes to amplifier
Lead wires - alligator AD Instruments ground ganzfield and acquistion hardware to computer
Platinum wire 95% A&E metals postive electrode
Mouth electrode Ag/AgCl Pellet SDR E205 negative electode
26 G needle BD ground electode
Water pump
Water bath
Tubing
Homeothermic blanket system with flexible probe Harvard Appartus 507222F
Atropine 1% w/v Bausch & Lomb topical mydriasis
Proxmethycaine 0.5% w/v Bausch & Lomb topical anaesthetic
Visco tears eye drops Novartis carbomer polymer
Thread retract eye lid
Tweezers
Reusable adhesive Blu tac Dim red headlamp. Affix electrodes
Absorbent bedding
Ketamil - ketamine 100 mg/ml - 50 ml Troy Laboratories Pty Ltd dissociative
Xylium - Xylazine 100 mg/ml - 50 ml Troy Laboratories Pty Ltd muscle relaxant
Scale

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Comments

3 Comments

  1. The article is very helpful to setup ERG to discriminate cone and rod electrical contributions. Could you please, let me know how can I access TABLE1 that it is mentioned in the article.

    Reply
    Posted by: Marcelo N.
    April 14, 2016 - 2:00 PM
  2. Hi Marcelo,

    Below is a link to table 1 as a pdf file. Not the voltages used were based on our calibration, and you may need to adjust your voltage settings to reach equivalent light intensities.
    http://tiny.cc/he5vay

    Reply
    Posted by: Alice B.
    April 17, 2016 - 10:18 PM
  3. Thank you very much.

    Reply
    Posted by: Marcelo N.
    April 18, 2016 - 10:19 AM

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