بروتوكول لالفئران الإسكان في بيئة المخصب

1Department of Molecular Virology, Immunology, and Medical Genetics, and Comprehensive Cancer Center, The Ohio State University
Published 6/08/2015
0 Comments
  CITE THIS  SHARE 
Behavior
 

Summary

Cite this Article

Copy Citation

Slater, A. M., Cao, L. A Protocol for Housing Mice in an Enriched Environment. J. Vis. Exp. (100), e52874, doi:10.3791/52874 (2015).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Introduction

تخصيب البيئي (EE) هو النموذج التجريبي المستخدمة لاستكشاف الآثار المترتبة على البيئة المعقدة والصعبة التي لا نشدد على الحيوانات 1. EE هو أسلوب إيواء الحيوانات تتألف من زيادة المساحة، والنشاط البدني، والتفاعلات الاجتماعية، وهذا بدوره يزيد الحسية والإدراكية والحركية، والتحفيز الاجتماعي 2. كوخا، دوران العجلات، وعجلات الصحن، متاهات أنبوب، وغيرها من الأشياء في البيئة السكنية تعزيز هذا المعرفي الحسي والاجتماعي، وتحفيز السيارات عن طريق تشجيع الاستكشاف والتفاعل. تخطيط الكائنات في التغييرات الضميمة بانتظام لتقديم بيئة جديدة، والتي يضطر الفئران على التكيف. تقدم هذه الاستراتيجية التحديات خفيفة وموجزة التي تحفز استجابة تكيفية المفيدة، حميدة، وصحية، والمعروفة باسم eustress، في مقابل أكثر مكره، بيئة عدائية أو الضيق غير القادرة على التأقلم 3،4. من خلال تشجيع eustress والحد من الضائقة الضارة والفئرانتظهر مجموعة متنوعة من الظواهر مواتية.

EE هو نموذج تجريبي موثوق بها مع مجموعة واسعة من التطبيقات، في حين يجري تخلو من عناصر يعتقد تقليديا مرهقة ك 1. وقد درست آثار EE على القوارض لأكثر من نصف قرن. في 1960s في وقت مبكر وأظهرت الدراسات أن مستويات الكولين القشرية انخفضت وارتفعت مستويات الكولين تحت القشرية في الفئران التي تم إيواؤهم في بيئات مع زيادة المساحة المعيشية، وزيادة عدد من الفئران، ومجموعة متنوعة من الألعاب الخشبية، متاهات، ومنصات 5،6. بالإضافة إلى ذلك، يرتبط EE مع العديد من التغييرات على التكيف في الدماغ، والسلوك، والتمثيل الغذائي في الفئران من مختلف الأعمار والخلفيات الوراثية. ولذلك، EE هو نموذج مفيد لنطاق واسع من التجارب دراسة آثار البيئة على الفئران. ويمكن ملاحظة آثار EE في الفئران في أسرع وقت التعرض لمدة أسبوع، ويمكن ملاحظة ذلك في حيوانات قديمة قدم ثمانية عشر شهرا 7. EE في كثير من الأحيان شالحوار الاقتصادي الاستراتيجي في علم الأعصاب والسلوك العصبي التجارب لدراسة استعادة وظيفة والتعلم والذاكرة 2. وعلاوة على ذلك، EE له تأثير كبير على النمط الظاهري من مجموعة متنوعة من السموم التي يسببها والنماذج الحيوانية المعدلة وراثيا من الأمراض العصبية الإنسان بما في ذلك مرض هنتنغتون، ومرض الزهايمر ومرض باركنسون، الصرع، السكتة الدماغية، وأكثر من 2.

ومع ذلك، على مر السنين كان هناك تضارب مع تصميم تخصيب إجراء مقارنات بين الدراسات من مختلف المختبرات الصعبة. على سبيل المثال، كل دراسة من الدراسات حول آثار EE النسبية للأمراض العصبية البشرية المشار إليها أعلاه قد المعلمات في إثراء متفاوتة. دراسة عن مرض هنتنغتون تؤوي 4-6 الفئران في اقفاص كبيرة (44 × 28 × 12.5 سم 3) التي تحتوي على صناديق من الورق المقوى، والأنفاق، وصحائف، وكذلك الأجسام الخشبية والبلاستيكية التي تم تغييرها كل يومين 8،9. واحدة من الدراسات التي اجريت على مرض الزهايمر و# 8217؛ ق يضم 20 الفئران في قفص أكبر (1 م 3) التي تحتوي على عجلات 2 على التوالي، أنابيب بلاستيكية، وصناديق من الورق المقوى ومواد التعشيش التي تم تغييرها أو إعادة ترتيبها أسبوعيا 10. العديد من الاجهزة من EE تعنى بمواضيع مماثلة مثل الكائنات لتشغيل أو الاختباء في، ومع ذلك فإن عدد الفئران في السكن EE، الذين يعيشون في المنطقة، وفترة تغيير البيئة تختلف من ذلك بكثير.

وقد أدت تصاميم متناسقة من EE لتكرار فشل الآثار EE. لدينا بيانات عن السرطان والتمثيل الغذائي توحي معا أن الجمع بين التحفيز المنصوص عليها في بروتوكول الرصاص الإسكان مفصل EE التالية لكبير لمكافحة السرطان وتأثيرات مضادة للسمنة 14،15. ومع ذلك، والفرق من ضبط EE التي اعتمدتها مختبرات مختلفة قد تؤثر على نتائج EE، كما ينظر في واحدة فشل محاولة لإعادة إنتاج آثار EE على نمو الأورام السرطانية محددة زرعها في الفئران (11). يمكن أن تكون النتائج مختلفة ويرجع ذلك إلى عدة أسباب تتراوح جيئة وذهابام معدلات نمو مختلفة من الثقافات الخلايا السرطانية لنوع من المنظفات المستخدمة لتنظيف المعدات الإسكان 11. من أجل تكرار ما يلاحظ في تجاربنا، مطلوب تصميم معين من تربية التخصيب والحيوان. تفاصيل الإجراء التالي السكن EE التي من شأنها أن تسمح للباحثين آخرين بتقليد نموذج تخصيب فعال لدينا بنجاح.

Protocol

وقد تمت الموافقة على الإجراءات الموضحة أدناه من قبل لجنة المؤسسي رعاية الحيوان واستخدام (IACUC) من جامعة ولاية أوهايو.

1. إعداد المخصب البيئة قبل الفئران الإسكان

  1. تنظيف وصيانة الأدوات.
    1. تشغيل بن تخصيب كبير (120 سم × 90 سم × 76 سم) من خلال غسل القفص. ويتضمن مرفق الحيوان بروتوكول غسل قفص نموذجية 5-6 دورات الغسيل، وستكون الحلقة الأخيرة تصل إلى 82 درجة مئوية. غسل كله ينبغي أن تأخذ حوالي 40 دقيقة. الهواء الجاف سلة المهملات.
      1. إذا كان بن لتخصيب كبير وأية أدوات الإسكان الأخرى، لا يمكن أن ترسل من خلال غسل القفص، ثم رش والقضاء عليها من الداخل مع بن المطهرات مبيد الأبواغ باتباع إرشادات الشركة المصنعة. تمحو بن مع ماء الصنبور غارقة منشفة ورقية أو 30٪ من الإيثانول والجافة مع منشفة ورقية للتخلص من أي رائحة من مطهر السابق.
    2. استخدام بلاسأنابيب التشنج، كوخا مع نوع الصحن عجلات، وغيرها من مختلف بلاستيكية تشبه القفص اللعب في EE. غسل هذه الألعاب من خلال غسل القفص. إذا لم يكن لديك الوصول إلى متابعة خطوة غسل القفص 1.1.1.1.
    3. استخدام عجلات معدنية التوالي في EE. غسل العجلات من خلال غسل القفص. إذا كان الطلاء على عجلات يبدأ في التلاشي حتى أن عجلة تصبح صاخبة عند تشغيل هذه الحيوانات على ذلك، تطبق على كمية الفازلين صغيرة إلى حيث عجلة القيادة وأكسل الاتصال.
    4. استخدام سجلات خشبية في EE. تنظيف سجلات عن طريق إزالة أي فراش أو غيرها من الحطام باليد. ثم تعقيم سجلات بواسطة التعقيم لهم على دورة أو النسيج دورة الجافة، التي تصل إلى درجة حرارة 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.
    5. استخدام الأقفاص بين أبعاد 29 سم × 18 سم × 12.5 سم و 30.5 سم x 19 سم x 14 سم لعقد سلك التغذية والشرب rack.Cut حفرة لا يقل عن 5 سم وقطرها من القاع الأمامي من القفص ل الفئران إلى الدخول والخروج من من EE. تنظيف هذه الأقفاص التغذية من خلال غسل القفص.
  2. إعداد بيئة
    1. صب ¼ بوصة كوز الذرة الفراش الحيوانات المختبرية في بن تخصيب كبير. تغطية سطح الأرض بأكمله من بن لعمق 2-2.5 سم مع أغطية فراش.
    2. وضع اثنين أو ثلاثة سجلات في زاوية واحدة من سلة المهملات. سجلات مكان في الزاوية لعزل تبلغ مساحتها حوالي 1225 سم 2. في المنطقة المحجوزة من جذوع الأشجار، وضع ثلاثة كوخا مع عجلات الصحن على القمة. تأكد من أن العجلات ليست لمس جدران بن، سجلات، أو بعضها البعض، حتى لا يكون هناك مساحة كافية للعجلات تدور بحرية.
    3. قطعة معا أنابيب بلاستيكية بحيث فرع الأسلحة متعددة الخروج من قطعة ربط centeral. وضع هذه الأنابيب في منتصف بن.
    4. في ركنين من بن، ضع قفص التغذية واحدة كل مليئة نفس الفراش باسم بن، وثقب في الجزء الأمامي من القفص التغذية يجب أن تواجه نحو مركز بن. على رأس هذه الأقفاص تغذية الغذاء والمياه النظيفة الأسلاكيجب أن توضع لعقد الغذاء والماء. لا تضع أي غطاء على القفص. وضع الطعام والماء في أسلاك القفص.
    5. وضع ثلاث عجلات معدنية في سلة المهملات، ولكن ليس كل بجانب بعضها البعض. ثلاثة أنواع مختلفة من العجلات هي واحدة 11.5 سم عجلة، عجلة واحدة 20.5 سم، واحد عجلة 28 سم. ثم ضع 5/4 أكثر من البلاستيك تشبه القفص اللعب أو الأنفاق في جميع أنحاء بن تخصيب اليورانيوم.
    6. تغطية بن مع ورق الترشيح الدقيقة المعزل. استخدام مقاطع الموثق للقص ورقة الترشيح إلى سلة المهملات.
    7. الجدة مهم لEE. استخدام هذا الإعداد كإطار للEE وتختلف وضع أقفاص المذكورة أعلاه، والأشياء، ولعب لخلق بيئة جديدة للحيوانات.

2. الإسكان الحيوانات

  1. تربية الحيوانات للتجارب في المختبر السكن العادي وليس EE. اختياريا، وضع الحيوانات في EE في وقت مبكر من 21 يوما من العمر على الفطام. النمط الجيني والأذن لكمة / العلامة الحيوانات قبل EE الإسكان.
  2. عند وضعالحيوانات في بن تخصيب من قفص القياسية، ووضع القفص في سلة المهملات على جانبها حتى أن الحيوانات يمكن ان تتحرك بحرية من القفص القياسي لبن تخصيب اليورانيوم. لا تسمح للمواد التعشيش على أن يتم تحويلها إلى بن تخصيب اليورانيوم.
  3. بيت 10-20 الحيوانات من نفس العمر والجنس والسلالة الوراثية في EE.

3. الحفاظ على البيئة ومراقبة الفئران خلال الدراسات

  1. يوميا
    1. بهدوء مراقبة الحيوانات بحثا عن علامات المرض أو الشدة. إذا لزم الأمر، والتعامل مع بلطف الحيوانات لمواصلة تفقد الأوضاع الصحية. سجل ملاحظات غير طبيعية واستشارة فني صحة أو الموظفين البيطري إذا كانت الشروط يعرض الحيوانية التي تتطلب إزالة من التجربة.
    2. توفير العلاج الموضعي مع الثلاثي مرهم لمكافحة الحيوية للجروح صغيرة أو الجلبة. إذا كان يحتاج الحيوان إلى إزالتها بسبب مرض أو إصابة مزمنة، وإزالة الحيوانات من التجربة للقتل الرحيم. إذا كانت حيواناتتلبية معايير إزالة مبكرة للجنة الإشراف على رعاية الحيوان البحوث أو طبيب بيطري، لا عودة الحيوانات الى EE.
  2. مرتين في الأسبوع
    1. التحقق من مستويات العلف والماء. ضمان العلف والماء سوف تستمر لأيام 3-4 القادمة. انتصب تشغيل العجلات واللعب تخصيب بحيث أنها تنتشر بها ويمكن استخدامها من قبل الفئران. استبدال أي التي هي قذرة جدا.
  3. أسبوعيا
    1. استبدال زجاجات المياه بزجاجات المياه النظيفة. إعادة ترتيب الأجهزة التخصيب بطريقة يتبع الإعداد في القسم 1.2. بعد يختلف عن الإعداد للأسبوع الذي سبقه.
      ملاحظة: إذا كان تجربة تتطلب الحيوانات المراد إزالتها من بيئة غنية لنشاط (تسجيل وزن الجسم، وسحب الدم، اختبار السلوك، وما إلى ذلك) فمن الأفضل لإعادة ترتيب البيئة في حين أن الحيوانات بعيدا عن بن تخصيب اليورانيوم.
    2. تنظيف أقفاص التغذية في EE باليد أو إرسالها عن طريق غسل القفصعلى النحو المفصل في القسم 1.1.5. استبدال رفوف السلك الذي عقد في الغذاء والماء مع رفوف السلك نظيفة أيضا.
    3. اتبع التعليمات في القسم 2.2. عند وضع الحيوانات مرة أخرى في تخصيب اليورانيوم. بقعة تحقق بقية بن تخصيب كبيرة ونظيفة، وإذا لزم الأمر، من خلال شفط خارج القمامة القذرة ونشر أسفل الفراش نظيفة الجديد.
  4. كل أسبوعين
    1. أثناء تنفيذ تربية الأسبوعية، وتنظيف اللعب باليد أو ترسل عن طريق غسل القفص على النحو المفصل في القسم 1.1.2. إذا لزم الأمر، ووضع الفئران في قفص القياسية الدقيقة المعزل عن الوقت اللازم لتنظيف.
  5. شهريا
    1. تنظيف الغالبية العظمى من القمامة من خلال تحريك اللعب التخصيب وتغذية الأقفاص ويغرف من القمامة. استبدال القمامة جديدة. التأكد من وجود بوصة واحدة من الفراش في جميع المجالات من القفص. إذا لزم الأمر، ووضع الفئران في قفص القياسية الدقيقة المعزل عن الوقت اللازم لتنظيف.
  6. كل ثلاثةأشهر (أو في نهاية التجربة)
    1. إزالة جميع الفراش ولعب الاطفال ونظيفة وتعقيم بن تخصيب كما هو موضح في القسم 1.1.1. إذا كانت التجربة لا تزال مستمرة، مع استبدال أغطية فراش جديد، والتغذية أقفاص، تشكيلة من الألعاب ومن ثم العودة الفئران إلى سلة المهملات.
  7. تطهير بن تخصيب كامل أكثر من مرة كل ثلاثة أشهر إذا كان ذلك مطلوبا من قبل المؤسسة البحثية التي يوجد مقرها في EE. إذا كان ذلك ضروريا والحاويات تخصيب كبيرة أخرى متاحة، إعداد حاوية إضافية لتخصيب النحو المفصل في القسم 1.2. ونقل الحيوانات إلى الحاوية جديدة، في الوقت الذي يجري تنظيفها من سابقتها.

4. مراقبة ظروف السكن

  1. حيوانات المنزل في المجموعة الضابطة في أقفاص صغيرة المعزل الأبعاد 30.5 سم x 19 سم x 14 سم. تشمل رف سلك في القفص لعقد الغذاء وزجاجة المياه، وإذا لم يتم التوصيل القفص تصل إلى نظام ري أوتوماتيكي.
  2. تقديم نفس الفراش كوز الذرة في قفص السيطرة كما هو في EE. توفير 4 سم × 4 سم nestlet للفئران لجعل عش الخروج منها.
  3. استبدال و / أو تنظيف الأقفاص، وتغذية الأسلاك والغذاء والماء مرة واحدة في الأسبوع. الأقفاص ورفوف السلك نظيفة من خلال غسل القفص أو على النحو المفصل في القسم 1.1.1.1. تنظيف الأقفاص في كثير من الأحيان إذا الحيوانات التبول بشكل متكرر أكثر أو إذا كان تسرب مياه الشرب على الفراش.
  4. مراقبة صحة الحيوانات في صحيفة تحكم السكن. أؤكد الحيوانات لديها الكثير من الطعام والماء.
  5. منزل 3 ~ 5 الفئران من نفس الجنس في قفص الفأر العادي. لا توفر أي لعبة، أنبوب، أو قفص في القفص.
  6. قد توفر منشأة مخصصة للمختبرات الرعاية الصحة الحيوانية ومختبر الفنيين المؤسسي تربية لهذه السيطرة على الفئران.
  7. إبقاء الحيوانات على 12 ساعة ضوء / دورة الظلام كما هو للفئران في EE.

Representative Results

EE يؤثر عامل النمو التعبير، ويزيد من تكوين الخلايا العصبية والبقاء على قيد الحياة من الخلايا داخل الجهاز العصبي المركزي (CNS) 12،13. وقد أظهرت الدراسات الحديثة أن هذه التقنية من EE يؤدي إلى قمع ملحوظ من نمو السرطان في نماذج السرطان ثلاثة الماوس بما في ذلك سرطان الجلد B16، وسرطان القولون MC38 وAPC دقيقة / + الفأر الذي يحتوي على الطفرات سلالة الجرثومية وغير عرضة للتشكيل الورم الحميد عفوية في الأمعاء 14. النتائج في الشكل 2 تأكيد قمع نمو الورم القتامي B16 زرعها في الفئران التي تعرضت للêè لمدة 5 أسابيع (~ انخفاض 80٪ من كتلة الورم). وحتى لوحظ قمع نمو السرطان في الفئران عندما بدأ EE بعد أن تم إنشاء الورم 14. أدى EE بمزيد من تثبيط نمو سرطان الجلد في ارتفاع الدهون النظام الغذائي الناجم عن الفئران السمنة (~ انخفاضا بنسبة 70٪ من كتلة الورم) من ذلك في الفئران من الوزن الطبيعي (~ انخفاض 50٪ من كتلة الورم) 14. EE دائرة الهجرة والجنسية التغييرات توقيع uced في المؤشرات الحيوية في الدم بما في ذلك انخفاض قوي اللبتين، وانخفاض IGF-1، وزيادة مستويات اديبونيكتين 14.

وبالإضافة إلى ذلك، فإن هذا الأسلوب من EE يقلل السمنة، زيادة نفقات الطاقة، ويؤدي إلى مقاومة ضد النظام الغذائي الناجم عن السمنة، ويستحث الأبيض إلى البني التحول المظهري الدهون عن طريق تنشيط الغدة sympathoneural-خلية شحمية محور 15. كان ينظر إلى انخفاض في السمنة في وقت مبكر من ستة أيام تتعرض لEE (الشكل 3A، B)، وأكد مرة أخرى في حيوانات تعرضت لêè لمدة أربعة أسابيع (الشكل 3C، D). ومن المهم أيضا أن نلاحظ أنه واحد، لا يمكن أن تحسب على مكافحة السرطان وتأثيرات مضادة للسمنة المرتبطة EE حسب النشاط البدني وحده، واثنين، وآثار EE يمكن استنساخها من قبل overexpression من المستمدة من الدماغ عامل التغذية العصبية (BDNF ) في منطقة ما تحت المهاد 14،15.

2874fig1.jpg "/>
الشكل 1: المخصب البيئة بن إعداد بيئة غنية تبلغ مساحتها 120 سم × 90 سم وتضم اثنين من أقفاص تعديل، دوران العجلات، كوخا مع عجلات الصحن، الأنابيب البلاستيكية، وسجلات خشبية، وغيرها من الألعاب تخصيب البلاستيك.

الرقم 2
الشكل 2: بيئة المخصب يقلل من نمو الورم في C57BL / 6 الفئران الذكور كانت ثلاثة أسابيع الفئران الذكور القديمة منزل في EE أو أقفاص الرقابة لمدة 5 أسابيع قبل الورم التلقيح. B16 الأوزان الورم القتامي في 17 أيام بعد التلقيح من 10 5 خلايا لكل حيوان تحت الجلد فوق الجهة اليمنى (ن = 10 لكل مجموعة. ر -test الطالب، * p <0.05).

الشكل 3A
الشكل 3B
ق / ftp_upload / 52874 / 52874fig3c.jpg "/>
الشكل 3D
انخفاض المخصب البيئة السمنة في C57BL / 6 الفئران الذكور تعرضوا ثلاثة فئران عمرها أسبوع لEE؛: الرقم 3. مجموعة واحدة لمدة 6 أيام، وآخر لمدة أربعة أسابيع. (A) ستة أيام في EE انخفضت أوزان وحة الدهون (ن = 5 لكل مجموعة. ر -test الطالب، * p <0.05). (B) ستة أيام في EE انخفضت أوزان وحة الدهون بالنسبة للوزن الجسم (ن = 5 لكل مجموعة. ر -test الطالب، * p <0.05). (C) انخفضت أربعة أسابيع في EE الأوزان وسادة دهنية (ن = 5 لكل مجموعة. ر -test الطالب، * p <0.05). (D) انخفضت أربعة أسابيع في EE الأوزان وحة الدهون بالنسبة للوزن الجسم (ن = 5 لكل مجموعة. ر -test الطالب، * p <0.05). BAT: بني الأنسجة الدهنية، IWAT: الإربي الأنسجة الدهنية البيضاء، EWAT: بربخي الأنسجة الدهنية البيضاء،RWAT: خلف الصفاق الأنسجة الدهنية البيضاء.

Discussion

آثار قوية من EE على التعبير الجيني في الدماغ، انخفض السمنة ونمو السرطان في الفئران تعتمد بشكل كبير على قدرة الباحث على الحفاظ على البيئة الجديدة والتعامل مع الحيوانات بطريقة تعزز النشاط البدني والتفاعل الاجتماعي، والتحديات المعرفية، ولكن لا محنة الحيوانات. هناك نوعان من الخطوات الإجرائية أهم تذكر. أولا، تذكر أن تغيير موضع من اللعب، والأشياء، وأقفاص كل أسبوع. على الرغم من أن اللعب والأشياء قد تكون هي نفسها من الأسبوع السابق، والفئران ترى أن بيئة كما الرواية. تغيير اللعب والكائنات أنفسهم مع مختلف منها مرة كل أسبوعين. الثانية، تذكر للحفاظ على بيئة نظيفة. إذا لم يكن الفراش المتسخة الحصول على إزالتها، قد تكون زيادة مستويات النيتروجين الضغوطات للحيوانات.

بالإضافة إلى ذلك، هناك العديد من التقنيات لاحظ في هذا البروتوكول EE. استخدام مختلفة أو فريدة من نوعها اللعب ومختلفةومما يشجع تصاميم متاهات أنبوب من البلاستيك. البيئة يمكن أن يكون تحديا ولكن لا ينبغي أن تشكل خطرا على صحة الحيوانات. وعلاوة على ذلك، حذار من اللعب التي هي مختلة، وذلك لأن اللعب مختلة تزيد من خطر أطرافه الماوس الوقوع، أو قد تكون سامة للحيوانات إذا استهلكت عن طريق المضغ على ذلك. واحد ثابت لEE هو استخدام ثلاث عجلات الصحن على رأس كوخا، المحتبسة إلى ضربة زاوية أو جانب من بن بنسبة 2-3 السجلات. وكان هذا الإعداد على تشغيل الصحون وراء سجلات موجودة في جميع الدراسات تخصيب دينا. من حيث استخدام ووضع كائنات أخرى، وصفا للتخطيط أعلاه هو الطباعة الزرقاء التأسيسية لإعداد EE. الاختلاف في الإعداد لهذا الإطار التأسيسي للأنابيب بلاستيكية، تشغيل عجلات، تشغيل الصحون، وأقفاص والسجلات يجب توفير بيئة الرواية كافية لإنتاج النتائج المعلنة.

إذا كان يعمل مع الحيوانات المعدلة وراثيا التي لديها مرض السكري أو الأيضية الأخرىالأمراض، وإيلاء اهتمام وثيق للاستهلاك الغذاء والماء للتأكد من أن الحيوانات لا نفاد الغذاء والماء. إذا كانت الحيوانات لديها مرض السكري، وسوف التبول أكثر، لذلك قد تحتاج الفراش من السكن EE إلى أن يتم التحقق بقعة وتنظيفها على نحو أكثر تواترا. الأماكن في السكن EE التي تحتاج إلى الفراش إزالة معظم الأحيان هي الزوايا. تذكر أن ضبط العجلات وألعاب أخرى، بحيث يمكن استخدامها من قبل الحيوانات. الحيوانات قادرة على تشغيل عجلات الصحن في الفراش وطرق تشغيل عجلات أكثر. إذا كانت الحيوانات هم من الشباب، 3-5 أسابيع من العمر، لأنها قد حفر تحت أقفاص في EE والاختباء معا تحت الانقاض، وترك الباحث جاهل بما فيها الحيوانات. عند إزالة الفراش المتسخة، لتحل محل لعب الأطفال، أو تنظيف الأقفاص، يقترح وضع الحيوانات في قفص القياسية نظيفة حتى لا أؤكد لهم للخروج في حين ضبط البيئة المحيطة بهم. فمن الأسهل للحصول على كل الحيوانات في قفص واحد إذا كان لديهم عدد أقل من الأماكن لإخفاء في الحياة الفطريةironment. لذلك، إزالة اللعب قبل عزل الحيوانات في قفص يجعل العملية أسهل. وعلاوة على ذلك، لا تضع أكثر من 5-6 الحيوانات في قفص معيار واحد في انتظار لتنظيف أو تعديل بيئة EE الخاصة بهم. الحيوانات الذكور في EE يمكن أن تكون عدوانية لا سيما عندما يبدأ EE في مرحلة البلوغ. وبالتالي، فمن المهم أن نلاحظ البيئة لأي الحيوانات الجرحى أو القتلى.

وبالإضافة إلى ذلك، فإن عدد نموذجي من الحيوانات ونحن إيواء في EE لهذا الحجم الكبير من الحاوية 10-20 الفئران. ينبغي أن تؤخذ في عدد الحيوانات تستخدم غيرهم من الباحثين عن EE تختلف، وذلك باستخدام حوالي 10 أو أقل الفئران، وحجم القفص أو بن بعين الاعتبار عند تحديد عدد من الحيوانات إلى منزل في EE. يمكن وجود الكثير من الحيوانات التي تعيش في بيئة تؤدي إلى العدوان في ذكور الفئران. وكانت الفئران قمنا يضم في EE من C57BL / 6 الخلفيات. الفئران من سلالات أخرى قد تكون أكثر أو أقل عدوانية، أو أكثر عرضة للمشاكل الصحية فيهذا الإعداد EE. وينبغي مراعاة ذلك في تحديد خطة تربية للفئران وبيئة غنية.

أربعة أسابيع EE الإسكان كافية لإحداث انخفاض من السمنة، وانخفاض مستوى هرمون الليبتين، وتثبيط نمو سرطان الجلد B16. يعد EE يمكن أن يؤدي إلى آثار أقوى على عملية التمثيل الغذائي وتثبيط السرطان. إذا الفئران الخضوع لعمليات جراحية أثناء أو قبل التعرض لEE، قد يكون مقرها مع خيوط سليمة. أم لا الحيوانات تستجيب بشكل جيد لهذا الإعداد EE خاص مع الدبابيس الجراحية أو القسطرة سليمة لم يتم دراستها. وعلاوة على ذلك، نعمل حاليا على كيفية تأثير هذه EE معين عمر أو healthspan من الحيوانات تتراوح أعمارهم. وتشير البيانات الأولية إلى أن الإناث C57BL / 6 الفئران، 10 شهرا من العمر، الرد على êè بالمثل على الفئران الشابة. واحد الحد من السكن EE يتم استيعاب مثل بن واسع في الفضاء منشأة الحيوان، وتفضيلي في غرفة محددة بين الجنسين. الدراسات المستقبلية وبالتالي على ممثل المؤسسةالنظام الأوروبي للEE على نطاق أصغر، فضلا عن إيجاد اللعب التي هي سهلة التنظيف، تنظيف تحمل درجات الحرارة العالية وآمنة لصحة الحيوان، وتحسين تطبيقات EE في التمثيل الغذائي وأبحاث السرطان.

Disclosures

الكتاب تعلن أي تضارب في المصالح.

Acknowledgements

كان مدعوما من المعاهد الوطنية للصحة هذا العمل يمنح CA163640، CA166590، وAG041250 لLC.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Large enrichment bin (120 cm x 90 cm x 76 cm) Custom made. Custom made. Made of polypropylene. Edges of the bin are 1.5 cm thick.
Large enrichment bin alternative (120 cm x 110 cm x 76 cm) Global Industrial 155202 If necessary, this bin works as an alternative to the one above.
Habitrail Mini tubes Habitrail 62720; 62705; 62725; 62715; 62054 -
Plastic igloos with saucer wheels Bio Serv K3327; K3250 -
Metal Running Wheels Super Pet 61392; 61394; 61396 -
Manzanita Wood Gnawing Sticks, 3" Bio Serv W0016
Mouse Tunnels Bio Serv K3322 -
Mouse cages that go in the large EE bin. Lab Products Inc 10027 Mouse Cage -
Cage Klenz 180 Alkaline Cage Wash Detergent, Cage Klenz 250 Acid Detergent Steris Life Sciences 1K1802; 1K2502 These detergents are used in the cage wash for the toys, large enrichment bins, and cages.
Sporklenz Steris Life Sciences 6526Q8 Alternative sporicide/disinfectant to washing toys, bins, and cages in cage wash.
Bed-O-Cobs 1/4" bedding The Andersons, Inc. 4B Corn cob bedding is 1/4" in diameter.
Nestlets for control housed mice Ancare Cotton squares

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Cao, L., During, M. J. What is the brain-cancer connection. Annu. Rev. Neurosci. 35, 331-345 (2012).
  2. Nithianantharajah, J., Hannan, A. J. Enriched environments, experience-dependent plasticity and disorders of the nervous system. Nat. Rev. Neurosci. 7, 697-709 (2006).
  3. Milsum, J. H. A model of the eustress system for health/illness. Behav. Sci. 30, 179-186 (1985).
  4. Selye, H. Stress Without Distress. McClelland and Stewart. Toronto. (1974).
  5. Krech, D., Rosenzweig, M. R., Bennett, E. L. Effects of environmental complexity and training on brain chemistry. J. Comp. Physiol. Psychol. 53, 509-519 (1960).
  6. Rosenzweig, M. R., Krech, D., Bennett, E. L., Diamond, M. C. Effects of environmental complexity and training on brain chemistry and anatomy: A replication and extension. J. Comp. Physiol. Psychol. 55, 429-437 (1962).
  7. Frick, K. M., et al. Effects of Environmental Enrichment on Spatial Memory and Neurochemistry in Middle-Aged Mice. Learn. Mem. 10, (3), 187-198 (2003).
  8. Dellen, A., Blakemore, C., Deacon, R., York, D., Hannan, A. J. Delaying the onset of Huntington’s in mice. Nature. 404, 721-722 (2000).
  9. Spires, T. L., et al. Environmental enrichment rescues protein deficits in a mouse model of Huntington’s disease, indicating a possible disease mechanism. J. Neurosci. 24, (9), 2270-2276 (2004).
  10. Jankowsky, J. L., et al. Environmental enrichment mitigates cognitive deficits in a mouse model of Alzheimer’s disease. J. Neurosci. 25, (21), 5217-5224 (2005).
  11. Westood, J. A., Darcy, P. K., Kershaw, M. H. Environmental Enrichment does not impact on tumor growth in mice. F1000Research. 2, 140 (2013).
  12. Cao, L., et al. VEGF links hippocampal activity with neurogenesis, learning. Nat. Genet. 36, (8), 827-835 (2004).
  13. Young, D., Lawlor, P. A., Leone, P., Dragunow, M., During, M. J. Environmental enrichment inhibits sponta- neous apoptosis, prevents seizures and is neuroprotective. Nat. Med. 5, (4), 448-453 (1999).
  14. Cao, L., et al. Environmental and genetic activation of a brain-adipocyte BDNF/leptin axis causes cancer remission and inhibition. Cell. 142, (1), 52-64 (2010).
  15. Cao, L., et al. White to brown fat phenotypic switch induced by genetic and environmental activation of a hypothalamic-adipocyte axis. Cell Metab. 14, (3), 324-338 (2011).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Video Stats