भड़काने अवसादग्रस्तता लक्षण, व्यवहार में बदलाव और कृन्तकों में नकारात्मक स्वास्थ्य परिणामों के लिए एक अप्रत्याशित जीर्ण हल्के तनाव प्रोटोकॉल

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Frisbee, J. C., Brooks, S. D., Stanley, S. C., d'Audiffret, A. C. An Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Instigating Depressive Symptoms, Behavioral Changes and Negative Health Outcomes in Rodents. J. Vis. Exp. (106), e53109, doi:10.3791/53109 (2015).

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Abstract

पुरानी, ​​अनसुलझे तनाव नैदानिक ​​अवसाद के विकास के लिए एक बड़ा जोखिम कारक है। तनाव प्रेरित अवसाद के कई प्रीक्लीनिकल मॉडल सूचित किया गया है, वहीं अप्रत्याशित पुरानी हल्के तनाव (UCMS) प्रोटोकॉल ऐसे anhedonia, बदल संवारने व्यवहार के रूप में आमतौर पर नैदानिक ​​अवसाद के साथ जुड़े व्यवहार के लक्षण, उत्प्रेरण के लिए एक स्थापित translationally प्रासंगिक मॉडल है, और लाचारी सीखा कृन्तकों में। UCMS प्रोटोकॉल भी शारीरिक (ई .g।, Hypercortisolemia, उच्च रक्तचाप) और तंत्रिका संबंधी लाती नैदानिक ​​अवसाद के साथ जुड़े रहे हैं कि परिवर्तन (जैसे, anhedonia, लाचारी सीखा)। महत्वपूर्ण बात है, UCMS प्रेरित अवसादग्रस्तता लक्षण जीर्ण के माध्यम से ameliorated जा सकता है, लेकिन आम SSRIs के साथ, तीव्र उपचार नहीं। जैसे, UCMS प्रोटोकॉल भारी तनाव प्रोटोकॉल या अधिक चरम तनाव का उपयोग कि प्रोटोकॉल पर कई लाभ प्रदान करता है। हमारी प्रोटोकॉल 7 अलग stre के लिए यादृच्छिक, दैनिक जोखिम के शामिलssors: नम बिस्तर, बिस्तर के हटाने, पिंजरे झुकाव, प्रकाश / अंधेरे चक्र में परिवर्तन, सामाजिक तनावों, उथले पानी से स्नान, और शिकारी / बदबू आ रही है लगता है। 8 सप्ताह के लिए 3-4 घंटे दैनिक इन हल्के तनाव को कृन्तकों subjecting द्वारा, हम महत्वपूर्ण व्यवहार में बदलाव और हृदय प्रणाली के लिए खराब स्वास्थ्य के परिणामों दोनों प्रदर्शित करता है। इस दृष्टिकोण के साथ ही नए संभावित चिकित्सीय एजेंट या हस्तक्षेप रणनीतियों के परीक्षण के लिए, पुरानी तनाव प्रेरित अवसाद के साथ जुड़े, मस्तिष्क संबंधी व्यवहार, और शारीरिक परिवर्तन का गहराई से पूछताछ के लिए अनुमति देता है।

Introduction

अवसाद मानसिक बीमारी वर्तमान में दुनिया भर में विकलांगता और बीमारी के बोझ का एक प्रमुख कारण के रूप में मान्यता प्राप्त है कि एक जटिल मस्तिष्क संबंधी विकार है। एनआईएमएच अमेरिकियों की लगभग 12% पुरुष 1 बनाम प्रभावित दो बार के रूप में कई महिलाओं के साथ, नैदानिक ​​अवसाद से ग्रस्त है कि रिपोर्ट। अकेले अमेरिका में, अवसाद डॉलर प्रत्यक्ष स्वास्थ्य देखभाल की लागत के अरबों के लिए खातों और (आय को कम कर दिया है और उत्पादकता खो) अप्रत्यक्ष लागत में एक अनुमान के अनुसार $ 193,000,000,000 अधिक 2। अवसाद के लक्षण anhedonia, वजन और नींद चक्र में परिवर्तन, शारीरिक गतिविधि और व्यक्तिगत स्वच्छता, निराशा या अपराध, और / या मौत या आत्महत्या के reoccurring विचारों की भावनाओं में कमी आई है। पिछले दशक के दौरान, महामारी विज्ञान और नैदानिक ​​अध्ययन अवसाद हृदय रोग (सीवीडी) रुग्णता और मृत्यु दर 3 के लिए एक स्वतंत्र जोखिम कारक है, और एक सहित हृदय विकृतियों के और अधिक गंभीर रोग का निदान, के भविष्य कहनेवाला संकेत दिया है किtherosclerosis, चाहे प्रकट सीवीडी 4 की पूर्व इतिहास की उच्च रक्तचाप, रोधगलन, और कोरोनरी धमनी रोग,। बढ़ती व्यापकता और अवसाद के प्रतिकूल सार्वजनिक स्वास्थ्य प्रभाव के बावजूद, इस रोग के एटियलजि और संबंधित पैथोफ्य्सिओलोजी बुरा समझा जाता है और विभिन्न कारकों के कारण (जैसे, आनुवंशिक, जैविक और पर्यावरण के घटकों) के विकार की विविधता के लिए नैदानिक ​​निदान मुश्किल बना दिया है परिभाषित करते हैं।

साक्ष्य हल न होनेवाला मानसिक तनाव अवसादग्रस्तता बीमारियों के विकास के लिए एक प्रमुख योगदान कारक है और यह भी कारण भाग में व्यवधान और 5,6 अक्ष (एचपीए) हाईपोथेलेमिक पिट्यूटरी-अधिवृक्क का अनियंत्रण करने के लिए एक शक्तिशाली रोगजनक कारक जोड़ने अवसाद और सीवीडी, हो सकता है कि इंगित करता है। एचपीए धुरी की शिथिलता सहित अवसाद में मनाया व्यवहार और शारीरिक परिवर्तन और कई सीवीडी जोखिम कारकों के विकास से जोड़ा गया है कि एक प्रमुख तंत्र हैdyslipidemia, मोटापा, मधुमेह और 7। अवसाद के कई प्रीक्लीनिकल मॉडल नैदानिक ​​अवसाद की बदल एचपीए धुरी गतिविधि विशेषता के तंत्र को दोहराने की कोशिश में विकसित किया गया है; इस तरह के मॉडल पशुओं में पुराने और तीव्र तनाव से जुड़े, व्यवहार तंत्रिका विज्ञान, और शारीरिक परिवर्तनों की जांच के लिए एक मान्य साधन उपलब्ध कराते हैं। रोग का एक पशु मॉडल की वैधता मॉडल के डिजाइन और संरचनात्मक, neurophysiological पुनरावृत्ति करने के लिए अपनी क्षमता है, और मानव रोग में मनाया व्यवहार सुविधाओं के एटियलजि और प्रगति की प्रासंगिकता पर आधारित है। इसके अलावा, (जैसे SSRIs के रूप में) उपचार के लिए प्रीक्लीनिकल प्रतिक्रियाओं नैदानिक ​​सेटिंग में मनाया उन लोगों के लिए इसी तरह के परिणाम उपज चाहिए।

तनाव प्रेरित अवसाद के कई पशु मॉडल वर्तमान में इस तरह सीखा लाचारी, प्रारंभिक जीवन तनाव, और सामाजिक हार तनाव के रूप में, अनुसंधान के क्षेत्र में उपयोग किया जाता है। हालांकि, इन मॉडलों में से प्रत्येक निहित नुकसान हैकि उनकी अनुवादकीय प्रभावकारिता 8 कम। पिछले दशकों के भीतर, अप्रत्याशित जीर्ण हल्के तनाव (UCMS) प्रोटोकॉल कृन्तकों 9 में अवसाद के pathophysiology के अध्ययन के लिए सबसे translationally प्रासंगिक मॉडलों में से एक के रूप में उभरा है। यह मॉडल तनाव को पुरानी जोखिम तनाव प्रतिक्रिया प्रणाली बाधित और अंततः अवसादग्रस्तता विकारों का विकास होता है कि मौलिक अवधारणा पर आधारित है। UCMS प्रोटोकॉल के दौरान, जानवरों के लिए एक दैनिक आधार पर हल्के पर्यावरण और सामाजिक तनाव की एक यादृच्छिक श्रृंखला के लिए सामने आ रहे हैं। मानव स्थितियों के लिए इस मॉडल की प्रासंगिकता को बढ़ाती है एक महत्वपूर्ण कारक अनिश्चितता और तनाव के uncontrollability के उच्च डिग्री, साथ ही वे पेश कर रहे हैं, जिस पर समय में निहित है। इसके अतिरिक्त, UCMS प्रोटोकॉल के बजाय प्रारंभिक जीवन या आक्रामक शारीरिक उत्तेजनाओं पर भरोसा कर के, केवल हल्के तनाव का उपयोग करता है। UCMS जोखिम की अवधि के दौरान, अवसादग्रस्तता व्यवहार को विकसित करने और क्लीन करने के लिए तुलना कर रहे हैंराजनैतिक लक्षण, पुरस्कार (anhedonia), शारीरिक गतिविधि और खोजी व्यवहार (लाचारी और निराशा), कोट राज्य की गिरावट और बदल यौन गतिविधि 10 में परिवर्तन करने के लिए जवाबदेही में कमी आई सहित। लगभग सभी अवसाद के प्रत्यक्ष लक्षण इस मॉडल का उपयोग कर सूचित किया गया है, और अध्ययनों से इन व्यवहार तनाव की समाप्ति के बाद कई हफ्तों के लिए जारी रहती है कि प्रदर्शन किया है। बारीकी से मानव में इन एजेंटों के नैदानिक ​​कार्रवाई और चर प्रभावकारिता दर्पण है कि चिकित्सीय सुधार के समान स्नायविक प्रभाव का सुझाव दे, इसके अलावा, इन UCMS प्रेरित अवसादग्रस्तता व्यवहार धीरे-धीरे पुरानी द्वारा श्रद्धेय जा सकता है, लेकिन विशेष रूप से antidepressants के साथ नहीं तीव्र, उपचार 11,14- 18। यहाँ, हम UCMS प्रोटोकॉल का विस्तृत विवरण की रिपोर्ट और चूहों में विशिष्ट व्यवहार और नाड़ी परिणामों का वर्णन है।

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Protocol

नीचे वर्णित सभी प्रक्रियाओं की समीक्षा की और पश्चिम वर्जीनिया विश्वविद्यालय के स्वास्थ्य विज्ञान केंद्र में संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया है।

पशु मॉडल की 1. चयन

नोट: UCMS मॉडल में सबसे अधिक इस्तेमाल प्रजातियों Sprague Dawley, और Wistar चूहों और / BALB मुख्य न्यायाधीश माउस शामिल हैं; अन्य murine मॉडल सीमित प्रभावकारिता से पता चला है (डीबीए / 2, C57BL / 6)। प्रजातियों के बीच व्यापक रूप से भिन्न है और अध्ययन 11,14,15 के परिणामों को प्रभावित करने वाले महत्वपूर्ण कारक हो दिखाया गया है पर्यावरण के तनाव के लिए आनुवंशिक पृष्ठभूमि और संवेदनशीलता के रूप में हालांकि, सावधानी से विचार करने, विशेष रूप से माउस या पसंद का चूहा तनाव को दी जानी चाहिए, 19।

  1. उचित उम्र के जानवरों का उपयोग इस प्रोटोकॉल घास का मैदान पर ले जाता है (वांछित समापन बिंदु एक 17 सप्ताह पुरानी चूहे में मूल्यांकन किया जा रहा है जैसे, तो चूहों की उम्र के ~ 9 सप्ताह में UCMS प्रोटोकॉल शुरू करनी चाहिए)सेंट 7-9 हफ्तों के लिए पूरी तरह से अवसादग्रस्तता लक्षणों प्रेरित करने के लिए।
  2. भोजन और (अन्यथा विशिष्ट प्रोटोकॉल द्वारा अपेक्षित जब तक) मानक चाउ उपलब्ध यथेच्छ साथ IACUC को मंजूरी दे दी पिंजरों और सुविधाओं में UCMS के दौर से गुजर एकल-घर पशुओं।
  3. नियंत्रण किसी भी संभव अज्ञात पर्यावरण के तनाव के प्रभाव को कम करने के लिए कम से कम गतिविधि के साथ एक शांत कमरे में रखे जाते हैं सुनिश्चित करने के लिए विशेष ध्यान रखना।

2. अप्रत्याशित जीर्ण हल्के तनाव प्रोटोकॉल

नोट: UCMS के दौर से गुजर पशु UCMS जोड़तोड़ के लिए प्रयोग किया जाता है एक साफ कमरे के लिए (> प्रति सप्ताह 5 दिन) दैनिक जाया जाता है। पशु 1 या प्रत्येक दिन नीचे सूचीबद्ध तनाव के 2 को उजागर कर रहे हैं। तनाव एक यादृच्छिक समय पर प्रदर्शन कर रहे हैं, और प्रत्येक तनाव (देखें तालिका 1) 3-4 घंटे की एक न्यूनतम के लिए किया जाता है।

  1. 10-20 आस्ट्रेलिया गिरने से बिस्तर गीला हो जाना। प्रत्येक मानक पिंजरे में की साफ पानी। तदनुसार के आकार के पानी की मात्रा समायोजित करेंपूरी तरह से बिस्तर गीला हो लेकिन नहीं करने के क्रम में पिंजरे पानी की पूलिंग पैदा करने के लिए। 3-4 घंटे के लिए नम पिंजरे में जानवरों रहते हैं।
  2. जानवरों के एक खाली पिंजरे (उथले स्नान, पिंजरे झुकाव) की आवश्यकता होती है एक और तनाव में transitioned या नए सिरे से बिस्तर के साथ एक साफ पिंजरे में रखा जाता है, जिसके बाद 3-4 घंटे के लिए प्रत्येक पिंजरे से बिस्तर निकालें।
  3. 3-4 घंटे के लिए (बिस्तर के बिना) लगभग 45 डिग्री झुकाव पिंजरों। पिंजरों जानवर पिंजरे में चारों ओर कदम के रूप में रहेगी जगह है कि एक तगड़ा वस्तु के साथ झुका जा सकता है।
  4. 8 घंटे के लिए स्थायी 30 मिनट अवधि की successions में सामान्य 12 घंटा / 12 घंटा / प्रकाश अंधेरे चक्र में परिवर्तन। के बाद, सामान्य चक्र के लिए जानवरों वापसी।
  5. 3 घंटे के लिए हटा दिया गया है कि एक पड़ोसी जानवर के पिंजरे की है कि अपने घर पिंजरे से प्रत्येक जानवर स्थानांतरण।
  6. प्रत्येक पिंजरे से सभी बिस्तर निकालें और लगभग 4 घंटे के लिए चूहों के लिए ~ चूहों या के लिए ~ की गहराई तक 0.5 इंच 0.25 इंच पानी जोड़ें। Hypotherm कम करने के लिए आर टी की अपेक्षा अधिक गर्म है कि पानी (~ 30 डिग्री सेल्सियस) का प्रयोग करेंआइए संभावित। साफ पिंजरों में स्थान से पहले पानी जोखिम के समापन पर एक नरम तौलिया के साथ संक्षिप्त सूखी जानवरों।
  7. शिकारी के लिए पशुओं को बेनकाब बदबू आ रही है / 3-4 घंटे के लिए पिंजरे में एक प्राकृतिक शिकारी प्रजातियों से फर या मूत्र (10-20 एमएल) के बेतरतीब ढंग से वितरित नमूना टफ्ट्स जोड़कर लगता है। वैकल्पिक रूप से, लगाकर गुर्राता या 3 घंटे के लिए पिंजरों के करीब निकटता में प्राकृतिक शिकारी प्रजातियों से हिंसक शोर खेलते हैं।
  8. प्रत्येक दैनिक तनाव की अवधि के अंत में, स्वच्छ पिंजरों में सभी जानवरों जगह और आवास की सुविधा के लिए उन्हें वापस।

3. पशु निगरानी / ग्रूमिंग स्कोर

  1. पशु चिकित्सा उपचार की आवश्यकता हो सकती है कि घाव या घावों के विकास के लिए दैनिक प्रत्येक जानवर का निरीक्षण किया। पशु चिकित्सक की सहमति पर UCMS प्रोटोकॉल में जारी रख सकते हैं हल्के चोटों कि विकसित पशु।
    1. कोट संवारने के मूल्यांकन में प्रशिक्षित दो जांचकर्ताओं प्रत्येक जानवर का निरीक्षण किया और 0-1 के पैमाने पर एक साप्ताहिक कोट स्कोर आवंटित। इस स्कोर को रोकते हैव्यक्तिगत स्कोर बताए द्वारा खनन (0-, स्वच्छ 1-गंदे) 8 शरीर regions- सिर, गर्दन, पृष्ठीय कोट, उदर कोट, पूंछ, आगे के हाथ, हिंद अंग है, और जननांग क्षेत्र से प्रत्येक के लिए। एक ही जांचकर्ताओं कोट स्कोर के बताए में निरंतरता बनाए रखने के लिए UCMS प्रोटोकॉल भर में इस कार्य को करने के लिए कर रहे हैं।
    2. (यानी,> 15%) शरीर के वजन में तेजी से कमी का अनुभव करता है कि किसी भी जानवर पशु चिकित्सा स्टाफ को सूचित किया जाना चाहिए और प्रोटोकॉल से हटा दिया जाना चाहिए।

4. व्यवहार परीक्षण और परिणाम माप

नोट: मूल्यांकन के लिए कई तरीकों कृन्तकों में UCMS प्रोटोकॉल से व्यवहार में बदलाव यों इस्तेमाल किया जा सकता है।

  1. संचयी कोट ग्रूमिंग स्कोर।
    1. ऊपर वर्णित है, एक साप्ताहिक कोट संवारने स्कोर प्रत्येक जानवर के लिए सौंपा है।
  2. सुक्रोज स्पलैश टेस्ट:
    1. बिस्तर को रोकने के लिए एक कपास पैड या तौलिया के साथ लाइन में खड़ा एक साफ पिंजरे में पशु रखेंअपने कोट का पालन करने से। प्रत्येक पशु के सिर और पृष्ठीय कोट पर एक 10% sucrose के समाधान स्प्रे और 5 मिनट के लिए कुल संवारने व्यवहार रिकॉर्ड है।
    2. (चाट या scratching द्वारा फर की सफाई के रूप में परिभाषित) गतिविधि को संवारने और आवृत्ति (एक विशेष शरीर के अंग को संवारने के समय की संख्या) विलंबता (पहली स्प्रे और संवारने की दीक्षा के बीच निष्क्रिय समय) द्वारा मापा जाता है।
  3. सुक्रोज पसंद टेस्ट:
    1. 1% sucrose के समाधान के लिए पीने के लिए जानवरों की आदत डालना (w / v) 72 घंटा परीक्षण से पहले और उसके बाद दो बोतलें (विभिन्न बोतलों में नल का पानी बनाम 1% sucrose के समाधान) के लिए जोखिम प्रदान करते हैं। आदी होना के बाद, 3 घंटे के लिए sucrose के समाधान और नल के पानी को जी भरकर उपयोग के साथ जानवरों प्रदान करते हैं। 100 × [(सूक्रोज खपत) / (पानी की खपत + सुक्रोज की खपत)]: 3 घंटा रिकॉर्ड sucrose के समाधान की खपत की मात्रा और पानी के नल और के रूप में सुक्रोज वरीयता की गणना करने के बाद।
  4. पूंछ निलंबन टेस्ट (केवल चूहों):
    1. रचिपकने वाला टेप (पूंछ की नोक से 2 सेमी) का उपयोग कर एक स्थिर रॉड (मंजिल से 20 सेमी) से पूंछ से चूहों खर्च करते हैं। 5 मिनट से अधिक रिकार्ड गतिहीनता समय। वे निष्क्रिय है और पूरी तरह स्तब्ध लटका केवल जब चूहे स्थिर माना जाता है।
  5. मजबूर तैरना परीक्षण:
    1. एक कंटेनर में रखें जानवरों (~ चूहों के लिए 15-20 सेमी व्यास; ~ चूहों के लिए 55-60 सेमी व्यास) 26 ± 0.5 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पानी से भरा है। गतिशीलता की पहली बाउट और 5 मिनट के परीक्षण अवधि के दौरान स्थिर बिताए समय के लिए विलंबता रिकॉर्ड। एक परीक्षण के अंत में, सूखे तक एक शोषक कागज तौलिया द्वारा कवर सामान्य बिस्तर के साथ एक हीटिंग पैड (30-35 डिग्री सेल्सियस) पर एक होल्डिंग पिंजरे में गीला जानवरों की जगह।
  6. बुलंद प्लस भूलभुलैया:
    1. प्रत्येक जानवर के 5 मिनट के लिए स्वतंत्र रूप से भूलभुलैया का पता लगाने के लिए अनुमति दें। प्रत्येक हाथ में रिकार्ड कुल प्रविष्टियों, और कुल समय एक प्राथमिकताओं मानदंड 20 के अनुसार, प्रत्येक शाखा में बिताया।
  7. Locomoटो गतिविधि:
    1. समग्र आंदोलन, ठीक आंदोलनों, पालन आंदोलनों, और निष्क्रियता, दोनों तीव्र (30 मिनट) के लिए और / या पुरानी (12 घंटे) समय अवधि के रूप में परिभाषित रिकार्ड गतिविधि का स्तर,। एक पर्यवेक्षक या पोस्ट-हॉक replaying और कैमरे के फुटेज का विश्लेषण करके द्वारा वास्तविक समय में (स्थिरता को बनाए रखा जाना चाहिए, हालांकि) अलग-अलग वातावरण पर निर्भर करता है, घर पिंजरे या एक उपन्यास वातावरण का उपयोग यह मत करो।

UCMS प्रोटोकॉल का 5. विस्तार / रूपांतर

  1. (जल्दी शुरू की तो) UCMS प्रेरित परिणामों के विकास को कुंद करने के लिए या तो या (देर से शुरू की तो) की स्थापना की UCMS प्रेरित परिणामों की गंभीरता को उल्टा करने के लिए अपनी क्षमता का अध्ययन करने के लिए उचित चिकित्सीय एजेंटों या चुनौतियों प्रशासन। इस व्यक्ति प्रयोगशाला या प्रोटोकॉल 11 पर निर्भर है।

6. अंतिम परिणाम आकलन

  1. UCMS प्रोटोकॉल और व्यवहार परीक्षण के समापन के बाद, बाद के अनुभव में पशुओं का उपयोगविशिष्ट परिकल्पना, उद्देश्य या व्यक्तिगत प्रयोगशाला के लक्ष्यों को संबोधित करते कि एक तरह से iments।
    नोट: उदाहरण के रूप में, इस पुराने तनाव को हृदय, भड़काऊ या अंत: स्रावी प्रतिक्रियाओं शामिल कर सकते हैं। वैकल्पिक रूप से, उपचारात्मक उपायों उनके प्रभाव और यंत्रवत आधार का मूल्यांकन करने के लिए इस बिंदु पर पेश किया जा सकता है।

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Representative Results

UCMS प्रक्रिया के बाद एक सप्ताह के लिए निर्धारित समय से एक उदाहरण तालिका 1। हर सप्ताह में दिखाया गया है, तनाव अभिनंदन को रोकने के लिए और प्रत्येक दिन तनाव चुनौती की अनिश्चितता सुनिश्चित करने के लिए यादृच्छिक थे।

व्यवहार की तरह अवसाद के उपाय

UCMS के 8 सप्ताह के बाद, उनके गैर-जोर दिया नियंत्रण उपभेदों के सापेक्ष चिरकाल जोर दिया कृन्तकों में दोनों व्यवहार और शारीरिक परिणामों के लिए महत्वपूर्ण परिवर्तन कर रहे थे। UCMS निम्नलिखित लक्षणों की तरह अवसादग्रस्तता की विकास कोट स्कोर, सूक्रोज छप परीक्षण, और पूंछ निलंबन के माध्यम से मूल्यांकन किया गया था (केवल चूहों, 12,13 संदर्भ)। कोट संवारने के स्कोर में एक प्रगतिशील गिरावट सब UCMS जानवरों (चित्रा 1, एक पैनल) में मनाया गया था, और इस गतिविधि को संवारने में कमी आई चलता कोट की शारीरिक स्थिति में गिरावट के रूप में चिह्नित। यह व्यवहार करने के लिए प्रेरणा की कमी या पी में ब्याज की हानि के समानांतर सकता हैइस तरह के कम से कम व्यक्तिगत देखभाल के रखरखाव के रूप में रोजमर्रा के कार्यों, erforming।

UCMS जानवरों को भी दूल्हे के लिए एक बढ़ा विलंबता प्रदर्शन किया और सुक्रोज छप परीक्षण (चित्रा 1, पैनलों बी और सी) में कुल संवारने समय कम कर दिया। बढ़ समय में कमी आई समय के साथ साथ व्यवहार संवारने आरंभ करने के लिए कम प्रेरणा और आत्म उत्तेजक व्यवहार में गिरावट, या खुशी के लिए कम संवेदनशीलता के साथ जुड़ा हुआ है संवारने बिताया। यह अवसाद का मूल लक्षण है, anhedonia का प्रतिनिधि है। इसके अलावा, चूहों में पूंछ निलंबन परीक्षण के दौरान गतिहीनता समय में एक महत्वपूर्ण वृद्धि हुई थी। जैसा कि पहले कहा, इस व्यवहार लक्षण की तरह एक और अधिक गंभीर अवसादग्रस्तता का प्रतिनिधित्व कर अधिक से अधिक गतिहीनता के साथ व्यवहार निराशा का एक उपाय है।

शारीरिक परिवर्तन के उपाय

एमएपी काफी UCMS प्रोटोकॉल का एक परिणाम के रूप में पदोन्नत किया जा सकता है, लेकिन यह लगातार नहीं मनाया जाता है ( (चित्रा 2) की तुलना में UCMS / BALB मुख्य न्यायाधीश चूहों की महाधमनी के छल्ले में मनाया गया। पा लिया फैलनेवाली प्रतिक्रियाओं की दिशा में इस वृद्धि की पारी हृदय रोग के विकास के लिए खतरा बढ़ के नैदानिक ​​मामलों में मनाया जाता है।

UCMS चूहों कोर्टिसोल, पुरानी शारीरिक तनाव का एक मार्कर, और nitrotyrosine, पुरानी ऑक्सीडेटिव तनाव (तालिका 2) के एक मार्कर के प्लाज्मा स्तर में वृद्धि हुई प्रकट।

इसके अतिरिक्त, UCMS चूहों समर्थक भड़काऊ मार्कर टीएनएफ-α और एमसीपी -1 का काफी ऊंचा स्तर से पता चला। साथ में, इन परिणामों पर बल दिया जानवरों UCMS के 8 सप्ताह (तालिका 2) के बाद एक pathophysiological रोग प्रोफाइल को विकसित कि सुझाव।

सेक्स के साथ विचलन

हाल ही में सबूत एक पर्याप्त मात्रात्मक divergen है कि वहाँ का सुझाव दिया गया हैनर और मादा चूहों (13) के बीच UCMS के लिए प्रतिक्रियाओं में सीई। विशेष रूप से, डेटा उम्र से मिलान पुरुषों के रूप में समान UCMS प्रोटोकॉल के संपर्क में मादा चूहों, ऊंचा कोर्टिसोल, nitrotyrosine का स्तर और सूजन के मार्कर के साथ पुरुषों (3 टेबल और चित्रा 3), की तुलना में प्रोटोकॉल के लिए और अधिक गंभीर व्यवहार प्रतिक्रियाओं है कि विकास का सुझाव ।

हालांकि, UCMS प्रोटोकॉल के बाद लिंगों के बीच इस विचलन के बावजूद, एक परिणाम के रूप में विकसित करता है कि Vasculopathy जोरदार endothelial समारोह का एक बेहतर रखरखाव, सुझाव पुरुषों की तुलना में समझौता माहौल के बावजूद, महिला सेक्स में पा लिया प्रतीत होता है (चित्रा 4)

आंकड़े 1 और 3 के लिए, परिणाम के रूप में उपयुक्त एनोवा के आवेदन और टी परीक्षण के साथ, ऊपर वर्णित तकनीक का उपयोग कर प्राप्त किया गया। आंकड़े 2 और 4 के लिए, परिणाम यू प्राप्त किया गया पूर्व vivo महाधमनी रिंग तैयारी में एकाग्रता प्रतिक्रिया रिश्तों को गाते हैं। घटता घटता के निचले सीमा के लिए उचित रूप से एनोवा और टी परीक्षण के साथ, एक तीन पैरामीटर रसद समीकरण के साथ फिट किया गया। विवरण के लिए संदर्भ 12,13 देखें।

चित्र 1
चूहे में UCMS के आठ सप्ताह के बाद चित्रा 1. अवसादग्रस्तता लक्षण। डेटा कोट स्थिति (एक पैनल), विलंबता (पैनल बी) और आवृत्ति एक 10% sucrose के समाधान स्प्रे निम्नलिखित चेहरे को संवारने की (पैनल सी), और कुल के लिए प्रस्तुत कर रहे हैं नियंत्रण और UCMS चूहों के लिए पूंछ निलंबन परीक्षण (पैनल डी) के दौरान गतिहीनता की अवधि। * Control.Please बनाम पी <0.05 जानकारी के लिए 12 संदर्भ देखें।दुबला "> यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
UCMS। डेटा के आठ सप्ताह के बाद चूहों से methacholine चित्रा 2 vasodilator जवाब कम = 33.6 ± 4.4 बाध्य नियंत्रण की शर्तों के तहत चूहों (नियंत्रण कम = 10.3 ± 2.4% बाध्य) और लगाया UCMS प्रोटोकॉल का आठ सप्ताह के निम्न (UCMS के लिए प्रस्तुत कर रहे हैं %)। * नियंत्रण चूहों से इलाज संवहनी छल्ले में प्रतिक्रियाओं बनाम पी <0.05। पुन: मुद्रित अनुमति के साथ संदर्भ में 12 से। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र तीन
अवसादग्रस्तता लक्षणों Fol में चित्रा 3. मतभेदनर और मादा चूहों। डाटा में UCMS के आठ सप्ताह lowing कोट स्थिति (ए), विलंबता (बी) और एक 10% sucrose के समाधान स्प्रे निम्नलिखित चेहरे को संवारने की आवृत्ति (सी), और के दौरान गतिहीनता की कुल अवधि के लिए प्रस्तुत कर रहे हैं नियंत्रण और UCMS चूहों के लिए पूंछ निलंबन परीक्षण (डी)। * पी <सेक्स में नियंत्रण बनाम 0.05; † पी <UCMS-पुरुष बनाम 0.05। पुन: मुद्रित अनुमति के साथ संदर्भ में 13 से। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 4
UCMS के आठ सप्ताह के बाद नर और मादा चूहों से vasodilator जवाब में चित्रा 4. अंतर। महाधमनी के छल्ले के फैलनेवाली पेशी प्रतिक्रियाओं को बढ़ाने के concentratio कोmethacholine (ऊपरी पैनल) और नियंत्रण की शर्तों के तहत चूहों से सोडियम nitroprusside (कम पैनल) की और UCMS के आठ सप्ताह के बाद एनएस। * पी <सेक्स में नियंत्रण बनाम 0.05; † पी <UCMS-पुरुष बनाम 0.05। पुन: मुद्रित अनुमति के साथ संदर्भ में 13 से। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

रविवार सोमवार मंगलवार बुधवार गुरूवार शुक्रवार शनिवार
तनाव 1 / प्रकाश अंधेरे में परिवर्तन सामाजिक तनाव कोई बिस्तर नम बिस्तर प्रकाश / अंधेरे में परिवर्तन शिकारी ध्वनियों सामाजिक तनाव
तनाव 2 / प्रकाश अंधेरे में परिवर्तन केज टिल्ट उथले स्नान पिंजराझुकाव सामाजिक तनाव उथले स्नान

टेबल अप्रत्याशित पुरानी हल्के तनाव (UCMS) प्रोटोकॉल के लगाने के लिए 1. दो नमूना सप्ताह।

नियंत्रण UCMS
मास (छ) 31 ± 2 29 ± 4
एमएपी (एमएमएचजी) 84 ± 5 93 ± 4
इंसुलिन प्लाज्मा (एनजी / एमएल) 1.3 ± 0.2 3.9 ± 0.6 *
ग्लूकोज रक्त (एमजी / डीएल) 102 ± 8 104 ± 7
Cholesterolplasma (एमजी / डीएल) 75 ± 8 81 ± 8
ट्राइग्लिसराइड्स प्लाज्मा (एमजी / डीएल) 102 ± 8 128 ± 10 * </ टीडी>
Nitrotyrosine प्लाज्मा (एनजी / एमएल) 17 ± 2 27 ± 4 *

माउस समूहों के बीच तालिका 2 आधारभूत विशेषताओं नियंत्रण की शर्तों के तहत और UCMS के 8 सप्ताह के बाद। सभी चूहों 17-18 सप्ताह के आयु वर्ग के हैं। * पी ​​<नियंत्रण बनाम 0.05। संदर्भ 12 से संशोधित।

नर महिलाओं UCMS-पुरुषों UCMS-मादा
मास (छ) 29 ± 2 28 ± 3 30 ± 3 29 ± 4
एमएपी (एमएमएचजी) 87 ± 4 91 ± 4 94 ± 5 90 ± 5
इंसुलिन प्लाज्मा (एनजी / एमएल) 1.1 ± 0.3 1.2 ± 0.4 4.1 ± 0.7 * 4.5 ± 0.5 *
ग्लूकोज रक्त (एमजी / डीएल) 82 ± 7 80 ± 8 94 ± 8 101 ± 10
कोलेस्ट्रॉल प्लाज्मा (एमजी / डीएल) 71 ± 7 68 ± 8 78 ± 6 77 ± 10
ट्राइग्लिसराइड्स प्लाज्मा (एमजी / डीएल) 94 ± 6 101 ± 8 109 ± 8 116 ± 12
Nitrotyrosine प्लाज्मा (एनजी / एमएल) 12 ± 3 11 ± 4 29 ± 5 * 36 ± 6 *
कोर्टिसोल प्लाज्मा (पीजी / एमएल) 12 ± 3 14 ± 4 29 ± 5 * 44 ± 4 *
टीएनएफ-एक प्लाज्मा (पीजी / एमएल) 2.3 ± 0.3 2.0 ± 00.2 4.1 ± 0.4 * 6.4 ± 0.4 * †
एमसीपी -1 प्लाज्मा (पीजी / एमएल) 2.8 ± 0.3 3.3 ± 0.5 10.2 ± 1.0 * 14.8 ± 1.3 * †

पुरुष और नियंत्रण परिस्थितियों में महिला माउस समूहों और UCMS के 8 सप्ताह के निम्न के बीच तालिका 3. आधारभूत विशेषताओं। सभी चूहों 17-18 सप्ताह के आयु वर्ग के हैं। * पी <नियंत्रण बनाम 0.05। संदर्भ 13 से संशोधित।

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Temporary animal cages with lids Provided by your animal care facility
Rodent bedding Provided by your animal care facility
Predator fur or urine Provided by your animal care facility
Rodent cage drinking bottles Provided by your animal care facility
1,000 ml graduated cylinder variable variable This is optional.  Any container from which a known quantiity of water can be poured will be appropriate
Wooden blocks cut from 2x4 variable variable 8 inch sections are cut to facilitate cage tilt procedures
Soft paper towels Provided by your institution
Small spray bottle  Walmart 100-200 ml volume is sufficient, used for sucrose splash test
Medium (mice) or large (rats) plastic tubs for swim testing Walmart variable Should be of sufficient depth that the animals cannot touch bottom (e.g., 2 feet)

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References

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