Хронический тромбоэмболических легочной гипертензии и оценка функции правого желудочка в Пятачка

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Noly, P. E., Guihaire, J., Coblence, M., Dorfmüller, P., Fadel, E., Mercier, O. Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet. J. Vis. Exp. (105), e53133, doi:10.3791/53133 (2015).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Оригинальный поросенок модель хронического тромбоэмболических легочной гипертензии (ХТЛГ), связанные с хронической правого желудочка (ПЖ) дисфункции описаны. Легочная гипертензия (ЛГ) индуцировали в 3-недельных поросят прогрессирующей обструкцией легочной сосудистого русла. Лигирование левой легочной артерии (ПА) была выполнена сначала через мини-торакотомии. Во-вторых, еженедельно эмболизации правой нижней легочной доли были сделаны в соответствии с методом флюороскопии с н-бутил-2-цианоакрилат в течение 5 недель. Среднее легочное артериальное давление (MPAP), измеренный ritght сердца катетеризация, постепенно увеличивалась, а также давление в правом предсердии и легочных сосудов сопротивлений (PVR) после 5 недель по сравнению с мнимым животных. Правого желудочка (ПЖ) структурная и функциональная перестройка были оценены трансторакальной эхокардиографии (диаметром RV, толщиной стенки ПЖ, систолического колесах функции). Р. эластичность и RV-легочной муфты были оценены давление-объем LoopsАнализ (ПВЛ) методом проводимости. Были выполнены также гистологическим исследованием легких и правого желудочка. Молекулярный анализ на колесах свежие ткани может быть выполнена путем многократных чрескожных биопсий эндомиокардиальной. Легочная болезнь микрососудов в обструкцией и беспрепятственным территорий изучали при биопсии легких с использованием молекулярных анализов и патологии. Кроме того, надежность и воспроизводимость была связана с рядом тяжести рН животных. Большинство аспектов человеческой болезни ХТЛГ были воспроизведены в этой модели, которая позволяет новые перспективы для понимания основных механизмов (митохондрий, воспаление) и новых терапевтических подходов (целевых, сотовые или генной терапии) перегруженного правого желудочка, но и легких микрососудистой Болезнь.

Introduction

Хронический тромбоэмболических легочной гипертензии (ХТЛГ) является подтипом легочной гипертензии (ЛГ) в связи с хроническим легочным кровать обструкции сосудов стойкими и организованных тромбов, связанных с одним или более острых легочных эмболий 1-3. Сочетание обструктивного и не обструктивной болезни микрососудов приводит к дополнительному увеличению легочного сосудистого сопротивления 4. Правый желудочек должны сначала адаптироваться с компенсированной гипертрофии поддерживать сердечный выброс. Без лечения, правый желудочек расширяется и не в течение долгого времени. В современную эпоху, PH остается прогрессивным и часто смертельным заболеванием, несмотря на использование современных методов лечения, направленных 5. Многие исследования показали, что правого желудочка (ПЖ) адаптация к перегрузке давления основным фактором, определяющим выживание у больных ЛГ. По этой причине, понимая механизмы, лежащие переход от адаптивных к неадекватному RV реконструкции является краеугольным камнем для лечения и развитмат ветствующую защитную эк новых методов лечения. Потому PH редко и отбор проб ткани практически неосуществимым в этих хрупких пациентов, экспериментальные исследования необходимы. Кроме того, доклинические исследования являются обязательными констатировать, что препарат с пользой в легочной сосудистой не вызывает RV обесценения.

На протяжении многих лет, различные экспериментальные модели PH и недостаточности ПЖ были разработаны с преимущества и ограничения 6,7. В фармакологических моделей мышей (Monocrotaline, SU5416, гипоксия), PH и недостаточность ПЖ происходят вторичный к массовому воспаления, ишемии или токсического стресса, что может вызвать несколько "стороны эффекты" и предвзятость в молекулярной анализа путей. Furthemore, Р. Эндомиокардиальная биопсии в мышиной модели должны быть очень сложным, не щадя животное. Хирургические модели в более крупных животных больше физиологическая, но не влияют на легочную сосудистую (полосы легочной артерии, системно-легочными шунта) или вызвать острое PH и фургоновF (острой легочной эмболии). Цель этой статьи заключается в описании оригинальную модель ХТЛГ в поросенка, который более представительным ХТЛГ патофизиологии. Это большая модель животного обеспечивает возможность многократного неинвазивных и инвазивных измерения, выполняемые, как правило, в клинической практике (катетеризация правых отделов сердца), чтобы следить за изменениями в легочной гемодинамики и функции ПЖ.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Этот протокол был одобрен местным комитетом по этике на экспериментах на животных и институциональной комитета по благосостоянию животных в нашем учреждении по. Все животные получали гуманного ухода в соответствии с «Принципами лабораторных животных", сформулированных "Руководстве по уходу и использованию лабораторных животных", подготовленный Институтом лабораторных животных ресурсов Национального общества медицинских исследований и и опубликованных Национальным Институты Здоровья (NIH публикации № 86-23, пересмотренная в 1996 году).

Общие соображения: Все животные должны относиться с уважением, в соответствии с правилами 3RS (Национальный центр для замены изысканность и уменьшения животных в исследовательских целях). Хирургические процедуры должны быть выполнены со строгим стерильности и таким же образом, что для человека. Все медицинские приборы должны быть стерильными.

1. Анестезия протокол

ПРИМЕЧАНИЕ: Большая Троицабыли использованы электронные поросят весом 20 кг (3-недель-старый). Легочная гипертензия был вынужден постепенно. Первый шаг заключался в левой легочной артерии (ПА) перевязка через левую торакотомии. Следующие шаги состояли из выполнения еженедельные эмболизации годовых в течение 5 недель. Все процедуры были выполнены под общим наркозом.

  1. Не кормить животных 12 ч до процедуры.
  2. Сделайте премедикацию из поросенка, выполните внутримышечные инъекции, используя 30 мг / кг кетамина гидрохлорид и aropine 0,05 мг / кг в мышцах шеи, 30 мин до процедуры. 8
  3. Когда свинья в отключке, вставить катетер в вену уха.
  4. Выполнение внутривенной болюс фентанила (0,005 мг / кг) и пропофол (2 мг / кг) перед интубацией. Вводят внутривенно в ушную вену Cisatracurium (0,3 мг / кг) и интубации свиньи (неселективный интубации с 7 французского зонда) 9.
  5. Поместите устройства непрерывного мониторинга на поросенка: непрерывный ЭКГ, Выдоха СО 2 и оксиметрии 8,9. Вставка артериальной поле катетер жидкости через сонную артерию под руководством Эхограф контролировать системного артериального давления 8-10.
  6. Поддержание общей анестезии с изофлуран (2%) в 100% добавка кислорода, непрерывной внутривенной инфузии фентанила (0,004 мг / кг) и пропофола (3 мг / кг).
  7. Добавить antibioprophylaxy с инъекцией Cefatoxine (1 г) и гентамицин (80 мг).
  8. Предотвращение внутрирегиональной оперативный и послеоперационные боли с впрыском нальбуфина (0,01 мг / кг) три раза в день
  9. Проверьте каждые 15 мин полноту анестезии: отсутствие движения, стабильной частоты сердечных, артериального давления, насыщения кислородом.
  10. Использование ветеринарной мази на глазах, чтобы предотвратить сухость под наркозом.

2. Лигирование артерии левой легочной

  1. Установите поросенка в левой боковой позиции лежа, брить оперативную зону и дезинфицировать кожу с alcoholiС решением. Используйте местную стерильное поле.
  2. Откройте сундук через небольшой боковой торакотомии слева (от 5 до 10 см) в пространстве 4-й межреберные "The. Не ходите в за кончик лопатки. Тщательно убрать легкое к диафрагме.
  3. После того, как идеально хирургическое окно, расположенное, убрать левую непарной вены и рассекают основной левой легочной артерии, прежде чем связывать его с нерассасывающегося 2/0 шелка.
    Примечание: Очень важно, чтобы не открыть перикарда.
  4. Закройте груди слой за слоем с рассасывающиеся швы. Используйте груди трубку, чтобы удалить пост оперативного пневмоторакс. Снимите трубку в груди сразу после экстубации для поросят.

3. Эмболизация артерии правой нижней доле легких

  1. После общей анестезии, положить поросенка в положении лежа на спине. Провести непрерывный мониторинг оксиметрии, выдоха CO 2, ЭКГ, значит системное артериальное давление (МПа) и среднего давления в легочной артерии (MPAP) В течение всей процедуры.
  2. Вставьте все катетеры чрескожно с эхографического руководством. Вставьте артериального 6 французский катетер в сонную артерию для мониторинга артериального давления и 8 французской оболочкой в ​​верхней полой вене через яремную вену (Выполните прокол 2 см выше надреза с suprasternal направлении под углом 45 °).
  3. Под флуороскопа, вставлять, через 8 Fr оболочкой, 5 французский катетер в ангиографической правой легочной артерии. Кончик катетера должен быть в сегментной нижней доли легочной артерии.
  4. Подготовка материала для эмболизации легочной артерии: 1 мл тканевого клея, содержащего мягкую N-бутил-2-Цианоакрилат добавляется 2 мл липидной контрастное вещество.
    ВНИМАНИЕ: Избегайте кожу или в глаза контакт с N-бутил-2-цианоакрилат.
  5. Когда ангиографических катетера хорошо позиционируется, вводят 0,2 мл 0,4 мл препарата в легочной артерии. Оценить переносимость эмболизации путем измеренияОтношение MPAP / мПа, что не должна превышать 0,5. Стоп эмболизации, если насыщение крови кислородом было <90% и / или мПа упала ниже 60 мм рт и / или сердечного выброса была менее 2 л / мин.
  6. Снимите ангиографического катетера и оболочки и выполнять цифровые сжатием в месте прокола.

4. Оценка гемодинамики

  1. После общей анестезии, положение поросенка в положении лежа на спине. Провести непрерывный мониторинг оксиметрии, выдоха CO 2, ЭКГ, системного артериального давления (МПа) и легочной артериального давления (MPAP) в течение всей процедуры.
  2. Проветривайте поросят с самым низким FiO 2, как это возможно в соответствии с насыщением кислородом (> 95%).
  3. Вставьте все катетер через кожу под руководством эхографического. Артериальная 6 Французский катетер в сонную артерию и 8 Французский оболочка вставляется в верхнюю полую вену (Выполните прокол 2 см выше надреза suprasternal с 45 °Направление угол).
  4. Вставьте 7 Французский Лебедь-Ганц катетера в багажнике легочной артерии. Оценка сердечного выброса методом разведения термо, с впрыском 10 мл солевого раствора при 4 ° С.
  5. Запишите следующие параметры: систолическое, диастолическое и среднее системное и легочное артериальное давление, частоту сердечных сокращений, насыщение кислородом, давление в правом предсердии, сердечный выброс.

5. Эхокардиографическое Оценка правый желудочек

  1. После общей анестезии, установить поросенка в положении лежа на спине и выполнять транс грудной эхокардиографию соответствии человека руководящие принципы для RV скрининга. Запись видео петли во время в конце выдоха паузы.

6. давления Объем Петли Оценка с проводимости методом

  1. После общей анестезии, установить поросенка в положении лежа на спине. Провести непрерывный мониторинг оксиметрии, выдоха CO 2, ЭКГ, системного артериального давления (МПа) илегочной артериального давления (MPAP) в течение всей процедуры.
  2. Вставьте артериального 6 французский катетер в правой или левой сонной артерии и ангиографические катетер в левом желудочке. Вставьте 9 французскую оболочку в верхней полой вене, 8-французски в правой или левой бедренной вены и артериальной PICCO катетер в правой или левой бедренной артерии. Вставьте все катетеры чрескожно под руководством эхографического.
  3. Выполните давление и объем калибровки проводимости зонда в соответствии с рекомендациями завода-изготовителя. Измерьте сопротивление в крови (Rho) путем отбора проб по 5 мл артериальной крови. Урожай 5 мл артериальной крови, де-воздушной шприц и заполнить зонд для измерения удельного сопротивления крови. 10-13.
  4. Вставьте проводимости катетер в правом желудочке через оболочку 9Fr в верхней veina вены. Поместите должным конец катетера с флюороскопии. Поместите конец катетера в вершине буровойHT желудочка и вставьте все как можно дольше в желудочке.
  5. Контроль качества петель. (Рисунок 6)
  6. Вставьте баллон длительного в нижней veina вены через бедренную вену. Поместите оконечность чуть ниже правого предсердия. Используйте флуороскопа.
  7. Запись давление-объем петли правого желудочка в базальном состоянии и в течение нижней полой вены окклюзии, как описано ранее 10-12. (Рисунок 7)

7. Эндомиокардиальная Биопсия правого желудочка

  1. После общей анестезии, положение поросенка в положении лежа на спине. Провести непрерывный мониторинг оксиметрии, выдоха CO 2, ЭКГ, системного артериального давления (МПа) и легочной артериального давления (MPAP) в течение всей процедуры.
  2. Вставьте через кожу в 10 французский оболочку в верхней полой вене. Вставьте 7 Французский Лебедь-Ганц (SG) зонд и длинный 7,5 французской катетера оболочку в правой Атримкм. Когда кончик зонда СГ хорошо помещается в правом желудочке (ПЖ), надуть шар СГ зонда, нажать долгосрочной оболочки катетера в колесах с баллоном. Выпустите шар и убрать SG зонда оставляя долго-оболочки катетера в колесах. Хорошая позиция кончика длинного-оболочка контролируется с помощью рентгеноскопии и эхокардиографии.
  3. Вставьте biotome в долгосрочной оболочки и выполнять Эндомиокардиальная биопсии под контролем рентгеноскопии, эхографического и контроля ЭКГ.

8. Общие соображения по уходу после операции

  1. После операции, экстубации поросенка только после восстановления спонтанных дыхательных функций.
  2. Для послеоперационного лечения, выполнить внутримышечной инъекции Cefatoxine (1 г) Die течение 5 дней и поставить appropieted обезболивание (Buprenorphin, внутримышечно инъекции примерно 0,01 мг / кг торгов в течение 10 дней.
  3. Не оставляйте животное, которое не претерпела операцию на компании других животных, пока полностью RECподготавливаемом.

9. Эвтаназия Метод

  1. Усыпить животных в последующие ситуациях; Конец экспериментов, потеря веса 15% и более в течение одной недели, unibability адекватно прокормить себя, анорексия, не поддается лечению инфекции, боль или другие didease, заболеваемость слишком тяжелыми: цианоз, одышка основным
  2. Во общей анестезии с sevoluorane 8%, вводят высокие дозы пропофола (0,5 мг / кг), связанный с летальной дозой хлорида калия (0,2 г / кг). Когда сердце останавливается в диастоле, harveste сердце и легких блок для того, чтобы сделать гистологическое исследование и молекулярной.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Технико-экономическое

Это поросенок модель хронического после эмболии легочной гипертензии была создана в нашей лаборатории в 2009-2010 гг. С 2011 года, мы использовали 70 поросят и мы провели 63 завершенных моделей. По нашему опыту, реализация этой модели требуется обучения.

Что касается смертности, мы наблюдали 5 внеплановых случаев смерти (7,1%), в основном в первой части нашего опыта. Два важных шагов были впервые, легочная эмболизация и во-вторых, Эндомиокардиальная биопсии. Четыре поросят умер от тяжелой острой правожелудочковой недостаточности после эмболизации легочной. Один поросенок умер от неизвестной причины. Что касается заболеваемости, 4 поросята (5,7%) имели большую сложность в процессе процедур.

Два поросят необходимо срочное перикарда дренаж во время процедуры биопсии эндомиокардиальной. Они требовали срочного pericardo-синтез из-за перфорации буровой установкиHT желудочковая бесплатно стену. Восстановление без осложнений во всех случаях. Поскольку использование эхографического руководством для выполнения биопсии Эндомиокардиальная, мы не наблюдали это осложнение больше.

Два других поросят разработали пиоторакс после перевязки легочной артерии, и они обязаны эвтаназии через 7 дней после операции де.

Мы использовали большие белые поросят со средней массой 20 кг. Все животные были мужчины и пришли из французского ферме (Gambais, Франция). Первые часы после операции, поросята были помещены в специальном помещении с кислородом и подогревом. Затем они были помещены в одиночку или с другом поросенка в 2 м 2 клетку.

Модель хронической легочной гипертензии в поросенка исполнилось 6 недель после левой легочной перевязки и 5 повторных эмболизаций (рисунок 1). Левый легочной артерии лигировали через небольшой боковой thoracotмики. Первый эмболизация правой нижней легочной артерии проводили через 5 дней. Эмболизации повторяются еженедельно в течение 5 недель, в среднем 3,2 ± 0,8 мл н-бутил-2-цианоакрилат на эмболизации. Воздействие на гемодинамику, сосудистую сеть легких и правого желудочка может быть описана следующим образом.

Фиктивные животные подвергались только левосторонней торакотомии без левой перевязки легочной артерии. Они не имеют эмболизации легочной артерии, но неоднократно претерпевала гемодинамики, эхокардиографических и гистологические оценки в то же время, как другие животные.

фигура 1
Рисунок 1. ХТЛГ дизайн модели на животных. В левой перевязки легочной артерии последовало повторного эмболизации нижней легочной артерии доли (A и D). МПУ перевязки (стрелка) проводили черезнебольшой левосторонней торакотомии (С). Эмболизации проводили с флюороскопии в неделю в течение 5 недель (B). Все эксперименты проводились под общим наркозом и чрескожных сосудистые доступы были использованы для эмболизации и измерения давления: (Е) чрескожная превосходит veina вены (звезда) и катетеризации правой сонной артерии. (F), 8Fr оболочка в правой бедренной вены (звезда) и артериальной термодилюции датчика оболочки в левой бедренной артерии. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Гемодинамические результаты

Среднее давление в легочной артерии (MPAP) постепенно увеличивалась после эмболизации выше 25 мм рт. Гемодинамические данные приведены в таблице 1. В правом предсердии давление, MPAP / соотношение MSAP и легочнойсосудистое сопротивление также увеличивается после повторных эмболизации. Индекс сердца отклонялись снижаться после нескольких эмболизации, отражая дисфункции ПЖ. Отношение MPAP / MSAP также постепенно увеличивается. Это соотношение не должно превышать 0,5 сразу после острой эмболии из-за повышенного риска смерти. По этой причине, эмболизации должен быть выполнен с максимум 2 мл на инъекцию. Реинжекция 1 мл может быть выполнена, если предыдущий был хорошо переносится гемодинамически. В этой модели, рН только прекапиллярных поскольку ДЗЛК не увеличивалась.

Таблица 1
Таблица 1. Гемодинамические данные 8 поросят моделей ХТЛГ HR: ЧСС.; MSAP: значит, системное артериальное давление; RAP: давление в правом предсердии; ЛПВП: систолическое давление в легочной артерии; PapD: диастолическое давление в легочной артерии; MPAP: среднее легочное артериальное давление; ДЗЛК: легочных капилляров клин нажмите Юр; СО: сердечный выброс; ДИ: сердечный индекс; ESV: систолический объем выброса; PVR: легочные сосудистое сопротивление.

Ремоделирование легочных артерий

Бронхиальная циркуляция гипертрофия отметил в левом легком, право нижней доле и по средостения плевры. В патологии, большие и многочисленные подслизистой бронхиальных артерий наблюдались в обструктивных легких (левого легкого и нижней доле правого легкого), что отражает увеличение ангиогенеза в этих территориях. (Рисунок 2) Сообщение обструктивная васкулопатия со средствами массовой информации гипертрофии был также найден в обструкцией территорий (левого легкого и правой нижней доле), в то время как переполнение васкулопатия наблюдалось в необструктивных территорий (правой верхней доле). (Рисунок 3) Патология также показали хроническую непроходимость правой нижней доли легочной артерии с помощью неразрешенного тромба N-бутил-2-цианоакрилат и фибрина.

т "> Рисунок 2
Рисунок 2. Ремоделирования сосудов в модели ХТЛГ. Интраоперационные виды, показывающие развитие бронхиальных артерий в левом легком и висцеральной плевры (а) и в средостении (звезда, В). Полная анатомия заготовленной правой нижней доле показывая нерешенные внутрисосудистых тромбов (C). Медиа гипертрофия малых легочных артерий видели в световой микроскопии (стрелка) (D). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 3
Рисунок 3. Сравнительный легочного сосудистого ремоделирования в Шам и ХТЛГ животных (гематоксилин эозином и окрашивание) Гистология от мнимого поросенка (А):. Тон легочной артерии (стрелка) и три микрососудов (круги) отображения тонкие стены и не гипертрофированные изменений не наблюдается. В ХТЛГ поросенка после 5 недель (В), легочные артерии (стрелка) в периферии верхней правой доли шоу медиальной утолщением. Тем не менее, микрососудов (кружки) на этой территории, присутствующие только очень незначительные изменения (масштабные линейки, 200 мкм). В большем увеличении (C), бронхиальных артерий (стрелки) из верхней правой доли (свободный край) появляются unremodelled и нормального размера в ХТЛГ поросенка в 5 недель (масштаб бар, 1000 мкм). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию из этой фигуры.

Ремоделирование правого желудочка

Значительное увеличение связано с гипертрофией правого желудочка и фиброза наблюдается после 6 недель (таблица 2 и рис4 и видео 1 и видео 2). Площадь на колесах, в правом предсердии (РА) площадь, диаметр RV увеличились после неоднократных эмболизаций. Толщина стенки на колесах, также увеличилось. Р. гипертрофия была подтверждена в световой микроскопии после сбора урожая сердца. В эхокардиографии, Tricsupid Annula Самолет систолическое Экскурсия (TAPSE) и правого желудочка Fractionnal Площадь Изменить (RVFAC) были снижены после 6 недель, отражающих дисфункцию ПЖ в этой модели. Функция колесах ухудшение было также установлено с PVL анализа с уменьшением желудочка-артериальной муфты (Таблица 3).

Расчет времени
Значения Т0 (МПУ перевязки) 6 недель
Р. площадь диастолы, см 2 4.5 ± 0.2 7.1 ± 0.9
Р. диаметр базальной, см 1.5 ± 0.8 3.7 ± 1.3
Р. толщина свободной стенки, см 0,3 ± 0,02 0,59 ± 0,04
Площадь РА, см 2 3.9 ± 0.4 5.9 ± 0.3
RVFAC,% 0,50 ± 0,03 25,0 ± 1,0
Р. TAPSE, см 1.6 ± 0.2 1.11 ± 0.07
ФВ ЛЖ,% 55,7 ± 4,9 52,2 ± 6,0

Таблица 2. колесах ремоделирования эхокардиография RVFAC: правого желудочка. Изменения дробно площадь; TAPSE: трехстворчатый кольцевой экскурсионного самолета; ФВ ЛЖ: фракция выброса левого желудочка.

Расчет времени
Значения Т0 (МПУ перевязки) 6 недель
Р. Ход работы, мм Hg.ml -1 579 ± 55 2248 ± 148
Р. эластичность, Эйс 0.33 ± 0.06 0,40 ± 0,06
Легочная артериальная эластичность, Еа 0,32 ± 0,05 0,51 ± 0,03
Р. связи, Эйс / Еа 1.33 ± 0.19 0.78 ± 1.0

Таблица 3. Функциональная реконструкция правого желудочка в давление-объем Петли анализ.

Рисунок 4
Рисунок 4. правого желудочка ремоделирование. Эхокардиография показала увеличение правого желудочка в четыре полости (A) и короткий парастернальной оси (B). Обратите внимание на сдвиг межжелудочковой перегородки и на сжатие левого желудочка. Колесах гипертрофии было подтверждено макроскопически (С) и с помощью световой микроскопии мас Ith увеличение поперечных оси кардиомиоцитов по сравнению с мнимой (D и E). Как показано в (H), отношение Фултон коррелирует со средним давлением в легочной артерии. Скорость фиброз колесах был увеличен в ХТЛГ животных по сравнению с ложной (F и G). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Фильм 1

Видео 1:. Трансторакальная 4 полостей и короткие взгляды оси, показывающие увеличение правого желудочка Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть это видео.

OAD / 53133 / 53133movie2.jpg "/>

Видео 2: Оперативная вид после средней стернотомию. Расширенных правый желудочек заполнить перикарда. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы смотреть это видео.

Для того, чтобы выполнить генетический и метаболический исследование, методика эндомиокардиальной биопсии правого желудочка была разработана в настоящей модели перегрузки хронической давления. Этот метод является безопасным и позволяет повторное свежий инфаркт выборки в наркозом поросят. Эхокардиографическое и рентгеноскопии управления снижает риск перфорации стенки на колесах с biotome. Длинный катетер техника хорошая стратегия, чтобы избежать травм трехстворчатый клапан (рис 5).

Рисунок 5
Рисунок 5. Эндомиокардиальная биопсии в модели ХТЛГ. (A </ STRONG>) 55 см яремной biotome это вставить в правом желудочке через чрескожная 7 Fr долго катетера оболочкой. Прогрессирование Щипцы контролируется с эхокардиографии (C) и рентгеноскопии (б) и инфаркт кусок 6mm3 извлекается (D). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 6
6. Соответствующее размещение проводимости зонда для PV петли оценку. (А) Поместите конец зонда на вершине правого желудочка под контролем методом флюороскопии (сплошной стрелкой). Вставьте минимум 3 сегментов в правом желудочке и зонд должен быть прямой лине. Вставьте окклюзии шар в нижней veina вены через бедренную вену. Конец баллона должен быть только в нужное записи атриумным (пунктирная стрелка) (*:. Интубации зонд; ** ЭКГ провод (В) Убедитесь, что сегменты объем зонда должна быть в фазе диастолы в систоле и а " хорошо фор петли на экране. (С) Пример плохой форме PV цикла из-за неправильного размещения сегментов объем в правом желудочке. (D) Пример плохой калибровки громкости. желудочков объемы негативы. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 7
Рисунок 7. Пример формы П. петли на базальной состоянии и во время низкого veina вены окклюзии с ложной (A и A ') и ХТЛГ поросенка (B & B и #8217;). П. петля в нормальном правого желудочка имеет форму треугольника, с более низким давлением и ценностей объем по сравнению с правым желудочком под легочной гипертензии. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Как и в человеческом клинической практике, уважение правил асептики из обязателен во всех хирургических процедур. В первоначальном ХТЛГ поросят модели, описанной О. Mercier и др., Левый лигирование легочной артерии проводили после открытия перикарда, через срединную стернотомию 14. Поскольку перикард осталась открыта, взаимодействие между правым желудочком и перикарда была нарушена и правой сердечной недостаточности была задержана. Побочное действие на RV расширения на сердечный выброс была продемонстрирована, будет значительно ниже, когда перикарда открыта 15. По этой причине, кажется, лучше не открывать перикарда на время оставил Звуковая перевязки. Несмотря на то, что это более технически сложных техника (уход должно быть уделено сохранению диафрагмального нерва и левое легкое) и, несмотря на проблемы контроля боли, боковая торакотомия оставили предложил наилучший подход для левой ПА перевязки вне перикарда. Как левой ПА ligatioп не приводит к увеличению MPAP, прогрессивный эмболизация правой нижней доле Звуковая было необходимо. Второй критический момент этой модели является риск массивного легочной эмболии после правой нижней доле Звуковая эмболизации. Максимальное инъекции 2 мл 2 мл N-бутил-2-цианоакрилат было сделано и гемодинамический толерантность была оценена между каждой инъекции. Отношение MPAP / мПа, не должна превышать 0,5. Кроме того, эмболизация ва sstopped если насыщение крови кислородом было <90% и / или мПа упала до 60 мм рт.ст. и / или сердечный выброс был под 2 л / мин.

Пять эмболизации обычно выполняют для каждой модели ХТЛГ. Количество и частота эмболизаций можно регулировать в соответствии с гарантированной тяжести индуцированного легочной гипертензии. Четыре дня между 2 последовательными эмболизаций было уважать за лучшего гемодинамического толерантности. Дополнительные эмболизации или больше времени наблюдение может повторить самые современные этапы ХТЛГ с тяжелой колесахотказ.

Эта модель не повторить происхождение болезни, но только последствия хронического легочного сосудистого обструкции. Там нет подсказки о патофизиологии свежих тромбов становится организованной и волокнистого материала внутрисосудистого, а не исчезают.

Это первая модель большого животного хронического PH, что является воспроизводимым в короткой рамой, позволяющей времени дальнейшее терапевтическое тестирование. Все животные увеличили MPAP выше 25 мм рт.ст. в течение 6 недель после начала эксперимента. Это воспроизводятся все морфологические, функциональные и биологические изменения заметны и в человеческих правого желудочков ХТЛГ. Кроме того, легочные микрососудистых поражений были воспроизведены в двух отдельных сосудистых территорий (против не препятствовали затруднен). По крайней мере, эта модель воспроизводится взаимодействие между поврежденной легочной сосудистой (окклюзии и реконструкции территорий) и правого желудочка.

Несколько physiologiческие исследования были основаны на этом оригинальным и неповторимым ХТЛГ модели 11,12,16. Это позволяет новые перспективы для понимания основных механизмов недостаточности ПЖ (митохондрий, воспаление) и новых терапевтических подходов (целевые, сотовые или генной терапии). Эта модель также может помочь, чтобы исследовать механизмы восстановления RV после хирургического лечения ЛГ. В самом деле, осталось реперфузии легких может быть выполнена, воспроизводя хирургического PA desobtruction и RV разгрузку. Взаимодействие между болезнью легких микрососудистой и правого желудочка будет цель дальнейших исследований, поскольку оба взаимозависимы и новая терапия должна быть направлена ​​на них обоих.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Нет конфликта интересов раскрывать.

Acknowledgments

Авторы благодарят команду в лаборатории хирургических исследований, Мари Lannelongue больницы, для оказания технической помощи и ухода за животными. VividE9 УЗИ система сердца (General Electric Medical System) была профинансирована за счет гранта от сердечно-vasculaire-Obésité Domaine D'intérêt Majeur (CODDIM трески 100158, RégionIle-де-Франс, Франция).

References

  1. Simonneau, G., et al. Updated clinical classification of pulmonary hypertension. J Am Coll Cardiol. 54, Suppl 1. S43-S54 (2009).
  2. Dartevelle, P., et al. Chronic thromboembolic pulmonary hypertension. Eur Respir J. 23, (4), 637-648 (2004).
  3. Hoeper, M. M., Mayer, E., Simonneau, G., Rubin, L. J. Chronic thromboembolic pulmonary hypertension. Circulation. 113, (16), 2011-2020 (2006).
  4. Galie, N., Kim, N. H. Pulmonary microvascular disease in chronic thromboembolic pulmonary hypertension. Proc Am Thorac Soc. 3, (7), 571-576 (2006).
  5. Humbert, M., et al. Survival in patients with idiopathic, familial, and anorexigen-associated pulmonary arterial hypertension in the modern management era. Circulation. 122, (2), 156-163 (2010).
  6. Guihaire, J., et al. Experimental models of right heart failure: a window for translational research in pulmonary hypertension. Semin Respir Crit Care Med. 34, (5), 689-699 (2013).
  7. Mercier, O., Fadel, E. Chronic thromboembolic pulmonary hypertension: animal models. Eur Respir J. 41, (5), 1200-1206 (2013).
  8. Kaiser, G. M., Heuer, M. M., Fruhauf, N. R., Kuhne, C. A., Broelsch, C. E. General handling and anesthesia for experimental surgery in pigs. J Surg Res. 130, (1), 73-79 (2006).
  9. Flegal, M. C., Kuhlman, S. M. Anesthesia monitoring equipment for laboratory animals. Lab Anim (NY). 33, (7), 31-36 (2004).
  10. Guihaire, J., et al. Right ventricular reserve in a piglet model of chronic pulmonary hypertension. Eur Respir J. (2014).
  11. Guihaire, J., et al. Right ventricular plasticity in a porcine model of chronic pressure overload. J Heart Lung Transplant. 33, (2), 194-202 (2014).
  12. Guihaire, J., et al. Non-invasive indices of right ventricular function are markers of ventricular-arterial coupling rather than ventricular contractility: insights from a porcine model of chronic pressure overload. Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 14, (12), 1140-1149 (2013).
  13. Kass, D. A., Yamazaki, T., Burkhoff, D., Maughan, W. L., Sagawa, K. Determination of left ventricular end-systolic pressure-volume relationships by the conductance (volume) catheter technique. Circulation. 73, (3), 586-595 (1986).
  14. Mercier, O., et al. Piglet model of chronic pulmonary hypertension. Pulm Circ. 3, (4), 908-915 (2013).
  15. Brooks, H., Kirk, E. S., Vokonas, P. S., Urschel, C. W., Sonnenblick, E. H. Performance of the right ventricle under stress: relation to right coronary flow. J Clin Invest. 50, (10), 2176-2183 (1971).
  16. Boulate, D., et al. Pulmonary microvascular lesions regress in reperfused chronic thromboembolic pulmonary hypertension. J Heart Lung Transplant. (2014).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics