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Un protocollo per la valutazione funzionale del Whole-Protein Saturazione mutagenesi biblioteche Utilizzando High-Throughput Sequencing
 
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Un protocollo per la valutazione funzionale del Whole-Protein Saturazione mutagenesi biblioteche Utilizzando High-Throughput Sequencing

Article DOI: 10.3791/54119-v 11:36 min July 3rd, 2016
July 3rd, 2016

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Vi presentiamo un protocollo per la valutazione funzionale delle biblioteche unico sito di saturazione di mutagenesi complete di proteine ​​che utilizzano high-throughput sequencing. È importante sottolineare che questo approccio utilizza coppie di primer ortogonali al multiplex di costruzione di biblioteche e sequenziamento. Risultati rappresentativi utilizzando TEM-1 β-lattamasi selezionato ad un dosaggio clinicamente rilevante di ampicillina sono forniti.

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Biologia Molecolare Numero 113 mutagenesi saturazione mutagenesi generazione di sequenziamento di prossima alta sequenziamento di throughput TEM-1 beta-lattamasi la resistenza agli antibiotici primer ortogonali
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