Continue IV Infusion is de keuze behandeling Route voor arginine-vasopressine Receptor Blocker conivaptan in Muizen op de studie-Stroke opgeroepen hersenoedeem

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Zeynalov, E., Jones, S. M., Elliott, J. P. Continuous IV Infusion is the Choice Treatment Route for Arginine-vasopressin Receptor Blocker Conivaptan in Mice to Study Stroke-evoked Brain Edema. J. Vis. Exp. (115), e54170, doi:10.3791/54170 (2016).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Beroerte is een van de belangrijkste oorzaken van morbiditeit en mortaliteit in de wereld. Stroke wordt bemoeilijkt door hersenoedeem en andere pathofysiologische gebeurtenissen. Een van de belangrijkste spelers in de ontwikkeling en evolutie van beroerte opgewekte hersenoedeem is het hormoon arginine-vasopressine en zijn receptoren, V1a en V2. Onlangs heeft de V1a en V2-receptor blokker conivaptan het aantrekken van de aandacht als een potentieel geneesmiddel voor hersenoedeem te verminderen na een beroerte. Echter diermodellen die conivaptan toepassingen de beroerte onderzoek moeten worden aangepast op basis van mogelijke toedieningswegen. Hier de resultaten van 48 uur continue intraveneuze (IV) vergeleken met intraperitoneale (IP) conivaptan behandelingen na experimentele beroerte bij muizen. We ontwikkelden een protocol waarin de middelste cerebrale slagader occlusie met catheter installatie werd gecombineerd in de halsader voor IV behandeling van conivaptan (0,2 mg) of voertuig. Verschillende cohorten dieren werden behandeld met 0,2mg bolus van conivaptan of voertuig IP per dag. Experimenteel-takt opgeroepen hersenoedeem werd geëvalueerd in muizen na continue IV en IP-behandelingen. Vergelijking van de resultaten bleek dat de continue intraveneuze toediening van conivaptan vermindert post-ischemische hersenoedeem bij muizen, in tegenstelling tot de IP toediening van conivaptan. Concluderen we dat ons model kan worden gebruikt voor toekomstige studies conivaptan toepassingen in de context van een beroerte en hersenoedeem.

Protocol

De experimenten werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen van de National Institutes of Health voor de verzorging en het gebruik van dieren in het onderzoek uitgevoerd en goedgekeurd door de Zweedse Medical Center Animal Care en gebruik Comite. Alle procedures werden uitgevoerd met de juiste aseptische technieken. Proefdieren gebruikt voor de studie waren mannen, 3 maanden oud, wild-type C57 muizen met een lichaamsgewicht van 25-27 g.

1. In Vivo Stroke Inductie

  1. Pre-coat het filament met Dental Resin Voorafgaand aan de operatie.
    1. Snij een 12 mm lang stuk van de gloeidraad van een 7-0 nylon hechtdraad. Meng 2 delen van het hars met 1 deel van de harder, en vervolgens onmiddellijk dompel de punt van het filament in het mengsel op ongeveer 1/3 van de gehele lengte bedekken. Verwijder het snel en controleer of deze is bedekt met een glad oppervlak coat van tandheelkundige hars.
    2. Lucht drogen het filament 2 uur voor gebruik.
  2. Plaats de muis in eenn anesthesie inductie kamer (2 L volume), en zet de stroom van 1,5% isofluraan in 25% zuurstof verrijkte kamer lucht bij 2 L / min in te gaan op de kamer.
  3. Laat de muis in de inductie kamer blijven totdat volledig verdoofd, 8 zoals bepaald door een gebrek aan respons op staartknijptest.
  4. Plaats de muis op de operatietafel met een verwarmd kussen, en zet de isofluraan concentratie op 1% voor het onderhoud van de anesthesie spontaan geleverd via de neuskegel.
  5. Klem haar op de voor- en achterkant van de nek, en spuit de hals met alcohol. Solliciteer veterinaire oogzalf aan beide ogen.
  6. Om continu te controleren lichaamstemperatuur, gebruik dan een rectale temperatuur sensor is aangesloten op de digitale vertoning tijdens de operatie.
  7. Plaats de muis in rugligging, gelden povidonjood 10% scrub oplossing voor desinfectie, dek af met een steriel laken, en vervolgens een middellijn incisie langs de hals met een maat 10 chirurgische scalpel.
  8. <li> Tijdelijk ligeren de linker gemeenschappelijke halsslagader (CCA) met 6,0 zijden hechtdraad.
  9. Plaats een andere band op de linker externe halsslagader (ECA).
  10. Plaats een microvasculaire clip op de interne halsslagader (ICA).
  11. Snij een klein gaatje op de externe halsslagader met microvasculaire schaar. Plaats een filament gemaakt 7-0 nylon hechtdraad bedekt met tandheelkundige hars in de opening van de Europese Rekenkamer, en vooraf te cephalically, terwijl het verwijderen van de clip, tot u weerstand voelt (ongeveer 5-7 mm vanaf het splitsingspunt van het CCA).
  12. Plaats een tijdelijke gelijkspel op de interne halsslagader om het filament vast te zetten. Middels de tekening Figuur 1A. Sluit de huid met zijden hechtdraad en infiltreren gewikkeld op de voorzijde van de hals met 0,2 ml 0,5% bupivacaïne, zoals in stap 2,6.
  13. Laat de muis te ontwaken uit narcose en weer bij bewustzijn in een herstel kamer voor 60 min. Laat de dieren niet onbeheerd achter te laten totdat het weervoldoende bewustzijn borstbeen recumbence handhaven.
  14. Test de muis voor het tekort scoren neurologische (NDS) als volgt: 0 = normale motorische functie, 1 = buiging van de romp en van de contralaterale voorpoot op de laadklep, 2 = cirkelen om de contralaterale kant, maar normale houding in rust, 3 = leunt aan contralaterale side in rust, 4 = geen spontane motorische activiteit. 4,9
    1. Voor de NDS testen, til de muis bij de staart en leg ze op een vlakke ondergrond ter observatie (2-3 min). Als alternatief, in acht muizen in het herstel kamer. Uitsluiten muizen die NDS lager is dan 2 uit het experiment vertonen als gevolg van onvoldoende occlusie van de MCA.
      Opmerking: Laser Doppler flowmetrie techniek kan worden gebruikt om MCA occlusie bevestigen 9-11.
  15. Opnieuw verdoven van het dier na 60 minuten herstel in de inductie kamer zoals hierboven beschreven, opnieuw steriliseren voorgaande incisie met 10% povidonjood scrub oplossing en open de wond op devoorzijde van de hals door te snijden en het verwijderen van de zijden hechtdraad.
  16. Om de draad van de Europese Rekenkamer te verwijderen Voer de volgende stappen:
    1. Plaats een microvasculaire clip op de ICA. Ontbindt de hechting op het ICA en trek de draad eruit terwijl clip geopend.
    2. Sluit de clip en plaats een gelijkspel op de Europese Rekenkamer proximaal aan de snede.
    3. Verwijder de clip en verwijder de ligatuur van de CCA bloedstroom naar de hersenen te herstellen. Middels de tekening, figuur 1B.

2. Installatie van de IV katheter in de halsader voor continue 48 uur Behandeling

Opmerking: Ga verder met de installatie van de katheter onmiddellijk na de stap 1.16.3 zonder ontwaken van de muis.

  1. Twee verschillende maten flexibele buis: steek de binnenbuis (0,94 mm uitwendige diameter, om het geneesmiddel bevatten worden toegediend) in de buitenste buis (3,18 mm buitendiameter, ter bescherming van de binnenste buis).
  2. Pkant de muis in de buikligging toepassing 10% povidon-jood scrub oplossing voor desinfectie en maak een 1 cm incisie op de rug van de hals met een maat 10 chirurgische scalpel. Draai de muis in rugligging, opnieuw steriliseren de voorzijde van de hals met 10% povidonjood scrub oplossing en open de chirurgische wond aan de voorzijde van de hals. Tunnel de slang onder de huid vanaf de incisie gemaakt aan de achterzijde naar de voorzijde van de hals en exterioriseren uit de open wond 1 cm.
  3. Verwijderen onderhuidse vetweefsel van de linkerzijde van de voorzijde van de hals ongeveer 1 cm lateraal van middellijn. Zoek de linker halsader, plaatst u twee banden langs de ader 5 mm van elkaar, en iets rekken de ader. Maak een klein gaatje aan de halsader tussen de twee banden met microvasculaire scharen; Steek het uiteinde van de binnenste buis 5 mm diep caudaal (naar het hart).
  4. Zet de buis met beide banden met de halsader. Sluit de huid aan de voorzijde van de halseen 3-0 zijden hechtdraad. Middels de tekening, figuur 1C.
  5. Bevestig de slang aan de huid op de rug van de hals met een hechtdraad en sluit de slang aan een microinfusion IV pomp via een wartel. De swivel maakt vrij verkeer van muizen in de kooi met volledige toegang tot het eten en water.
  6. Infiltreren huid insnijdingen aan de voorkant en de achterkant van de nek met 0,2 ml 0,5% bupivacaïne voorkomen postoperatieve pijn.
    Opmerking: Afhankelijk van de institutionele specifiek dier protocollen, kunnen de dieren worden behandeld met opioïden, NSAID's, of antibiotica pre- en post-operatief. Echter, genoemd behandelingen resultaten van ischemische beroerte uitkomst veranderen (zie Overleg sectie). 11-14
  7. Laat het dier te ontwaken in het herstel kamer, en vervolgens het huis van het dier in een aparte kooi tot aan het eindpunt van het experiment. Heeft het dier niet onbeheerd achter, totdat het voldoende bewustzijn heeft herwonnen borstbeen te onderhoudenrecumbence.
  8. Stel de infusiesnelheid voor continue 48 uur intraveneuze behandeling van conivaptan (0,14 mg / ml in 5% dextrose) of drager bij 1,5 ml / kg / uur, 4 en begin de infusie.
    Opmerking: Het totale bedrag van IV infuus conivaptan moet ongeveer 0,2 mg / muis / dag in een totaal volume van 1,44 ml.
    Opmerking: Voer intraperitoneale (IP) injectie van conivaptan tweemaal daags met een totale hoeveelheid van 0,2 mg in 1,44 ml 5% dextrose. Uitvoering IP injectie zoals eerder beschreven. 15 Beperken muizen door het vastgrijpen van de huid van de dorsale zijde van het lichaam en de staart. Injecteer conivaptan of voertuigen die in de linker onderste kwadrant van de buik met een 26 G / 1/2 inch naald. 15
  9. Observeer de dieren tweemaal per dag gedurende de gehele duur van het experiment (48 uur). Laat de dieren om volledige toegang tot voedsel en water. Als het dier tekenen van angst of kortademigheid vertoont een dierenarts raadplegen. Wanneer euthanasie is nodig voor dit dier ernstige distruk verwijzen naar de stap 3.1 hieronder, en uitsluiting van het dier uit de studie.

3. Evaluatie van-Stroke opgeroepen hersenoedeem op het eindpunt

  1. Offer de muis door over-verlamming met 5% isofluraan.
  2. Gebruik een scalpel een incisie in de huid over de schedel bot over de middellijn te maken en trek de huid om de hele schedel over de hersenen bloot te leggen. Beginnend bij het foramen magnum, snijd de schedel bot zijdelings langs de omtrek van de hersenen aan elke kant, en til het zonder het aanraken van de hersenen eronder. Scheiden de hersenen van de rug en bevestigd aan de basis van de schedel zenuwen.
  3. Verwijder de hersenen, scheiden van de bulbus olfactorius en het cerebellum en cerebrum ontleden de interhemisferische langs de spleet in de ischemische en niet-ischemische cerebrale hemisferen, zoals eerder beschreven. 9
  4. Beoordelen hersenoedeem door vergelijking nat-op-droog-verhoudingen (WDR) zoals eerder beschreven 4,9. Weeg weefselsvóór en na drogen gedurende 3 dagen bij 100 ° C in een oven. Bereken hersenen watergehalte (BWC) als% H 2 O = (1-droog gew. / Nat gew.) X 100%.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

De lichaamstemperatuur van de dieren was in het fysiologische bereik en stabiel tijdens de chirurgische procedure beroerte inductie. Twee muizen die NDS lager vertoonden dan 2 direct na MCAO uit de studie werden uitgesloten.

MCAO in muizen produceert infarct volume in de ipsilaterale hemisfeer na 48 uur. Evaluatie van de TTC gekleurde plakjes blijkt dat ongeveer 50% van de halve bol wordt beïnvloed door infarct na MCAO (figuur 1D), zoals gepubliceerd door Zeynalov, E. en Dore, S., 2009. 10 Het begin van hersenen ischemische beroerte veroorzaakt ernstige beroving van hersenweefsel in zuurstof en voedingsstoffen. Als gevolg van deze lokale hersenweefsel hypoxie, neuronen en gliale cellen sterven, waarbij de geïnfarceerde deel van de hersenen te vormen. Figuur 1D toont representatieve muizenhersenen slices beïnvloed door MCAO geïnduceerde infarct, alsmede een aanwijzing van de omvang van schade.

Evaluatie van hersenen watergehalte (BWC) en 48 uur na 60 minuten MCAO inductie gebleken dat conivaptan IV toegediend (0,2 mg / dag) vermindert hersenoedeem zowel ipsilaterale en contralaterale hemisferen, (figuur 2A). In tegenstelling IP-behandeling van conivaptan met 0,2 mg per dag bolus niet dezelfde positieve effecten op slag opgewekte hersenoedeem (Figuur 2B) te produceren.

Bevestiging van conivaptan effect op plasma en urine osmolaliteit werd bereikt in alle proefdieren op het eindpunt van het experiment. Conivaptan behandeld IV of IP verhoogde plasma en urine osmolaliteit verlaagd in alle muizen 4 Plasma osmolaliteit waarden bij muizen waren als volgt:. 313 ± 4,4 mOsm / kg (voertuig IV) vs. 355 ± 7,5 * mOsm / kg (conivaptan, IV) zoals eerder gepubliceerd, 4 en 340 ± 7,7 mOsm / kg (voertuig IP) vs.383 ± 8.8 * mOsm / kg (conivaptan, IP). Urine osmolaliteit waarden bij muizen waren als volgt: 1210,6 ± 13,4 mOsm / kg (voertuig IV) vs. 595,0 ± 57,4 * mOsm / kg (conivaptan, IV), zoals eerder gepubliceerd, 4 en 1535,0 ± 80,9 mOsm / kg (voertuig IP) vs. 242,0 ± 23,2 * mOsm / kg (conivaptan, IP). Alle gegevens gepresenteerd als gemiddelde ± SEM, * p ≤0.05 vs. overeenkomstige controle.

Figuur 1
Figuur 1:. Schema van de experimentele slagmodel, IV katheter installatie en representatieve infarct volume 48 uur na een beroerte positie van de gloeidraad (blauw) vooraf bekleed met kunststof (groen) in de linker interne halsslagader (ICA) tijdens de occlusie (A) en de reperfusietijd (B). De juiste positie van de flexibele buis tip in de linker halsader (C). Experimental beroerte bij muizen produceert infarct volume in de ipsilaterale hemisfeer na 48 uur. Muizen werden opgeofferd op 48 uur na MCAO en hersenen werden verwijderd, zoals beschreven in het protocol (stappen 3.1-3.3). Hersenen werden gesneden in 2 mm dikke secties en gekleurd met TTC (D). Figuur 1D is gewijzigd ten opzichte van het oorspronkelijke artikel van Zeynalov, E. en Dore, S., 2009. 10 Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Figuur 2
Figuur 2: Effecten van continue intraveneuze (IV) en intraperitoneale (IP) conivaptan (0,2 mg / dag) behandelingen slag opgewekte hersenoedeem conivaptan IV behandeling werd toegediend gedurende 48 h.. Conivaptan behandeling toegediend IV verminderd post-ischemische hersenoedeem in de ipsilaterale en contralaterale hEmisphere (A). Figuur 2A is aangepast het oorspronkelijke artikel van Zeynalov et al., 2015. 4 conivaptan IP behandeling van 48 uur niet hersenoedeem veroorzaakt door experimentele beroerte, n = 10 in elke groep. Muizen onderging MCAO met reperfusie zoals beschreven in het protocol hierboven (stappen 1.1.1-1.15.3). Vervolgens IP injecties van conivaptan (0,2 mg) werden onmiddellijk toegediend op 22 uur en 46 uur reperfusie. Muizen werden opgeofferd; de hersenen werden verwijderd en gedroogd in de oven, zoals beschreven in het protocol (stappen 3.1-3.4). (B) Alle gegevens worden gepresenteerd als gemiddelde ± SEM, * p <0,05 versus overeenkomstige controle. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Deze studie heeft belangrijke waarde voor preklinisch beroerte onderzoek. Deze studie toont aan dat continue IV infusie van conivaptan (0,2 mg / dag) na experimentele beroerte bij muizen vermindert efficiënt hersenoedeem na 48 uur behandeling. Het effect van IP injectie van dezelfde dosis conivaptan op hersenoedeem werd eveneens onderzocht. Conivaptan behandeling van zowel IV en IP routes produceert aquaresis bij muizen aangegeven: 1) verhoging van plasma osmolaliteit iets boven fysiologische niveaus; en 2) afname van urine osmolaliteit door geblokkeerde water reabsorptie in de nier. Daarom, op basis van de resultaten van de behandeling, vermelden wij dat het IV levering methode heeft extra belangrijke gunstige effecten op slag opgewekte oedeemvorming.

Onze belangrijkste bevinding is dat IV behandeling beter effect op hersenoedeem verlichting dan het IP-route voor conivaptan geproduceerd. Conivaptan is een gecombineerde V1a en V2-receptor antagonist, beschikbaar voor klinisch gebruik aan Correct hyponatremie, bloedvolume en osmolaliteit. 16 conivaptan is aangetoond dat hyponatremie bij patiënten corrigeert verschillende omstandigheden. 17 Klinische beschikbaarheid van conivaptan suggereert dat de exploratie in het kader van hersenoedeem kan resulteren in snelle bench-to-bed translatie. Gebruik van experimentele selectieve V1a receptorblokkers intracerebroventriculair geleverde bewezen postischemische hersenoedeem vorming beschreven door andere onderzoekers verminderen. 3,18 Noch de in deze studies geneesmiddel of de behandeling route voor de geneesmiddelen suggereert mogelijke klinische toepassing in de nabije toekomst.

Mechanismen waarmee hersenischemie en AVP veroorzaken hersenoedeem complex. Sommige belangrijke moleculaire spelers zijn natrium- en chloride co-transporteurs 19,20 en V1a receptoren die zijn gelokaliseerd in bloedvatwanden de BBB interface. V2 blokkerende effect van conivaptan is verantwoordelijk voor de uitscheiding van excesen water door de nieren en verhoging van bloed osmolaliteit, die ook kan bijdragen tot de ontwikkeling van hersenoedeem te voorkomen. 21 Deze mechanismen kunnen nog in het spel wanneer conivaptan direct in de circulatie wordt afgegeven aan weefselbarrières dat conivaptan beschikbaarheid kan verminderen voorkomen. Echter, rechtvaardiging van de dosering en de duur van de behandeling was gebaseerd op eerder gepubliceerde waarnemingen. 4 Het moet nog worden vastgesteld of conivaptan na verwonding veroorzaakte daling van de regionale bloedstroom het ischemische site van de hersenen bereikt. Het moet ook worden onderzocht of de hersenen voldoende hoeveelheid van conivaptan om de gewenste locale effecten, zoals de preventie van vasoconstrictie veroorzaken door het blokkeren V1a receptoren in cerebrale arteriën ontvangt.

Het experimentele protocol werd ontworpen om de kwestie van de keuze aan te pakken voor de behandeling route van conivaptan. Op basis van de resultaten, de studie geeft krachtige steun voor de IV route van conivaptan adbediening. Echter, de meeste kritische stappen van het protocol moest worden vastgesteld en verfijnd om significante verschillen in de resultaten van de behandeling na een beroerte in muizen te detecteren. Onder deze stappen zijn: 1) de duur van de MCAO (60 min); 2) de dagelijkse dosis (0,2 mg), en de infusiesnelheid (1,5 ml / kg / uur); en 3) de duur van de behandeling (48 uur). Duur van MCAO bepaalt de mate van ischemie die zeer belangrijk voor het protocol omdat onomkeerbaar beschadigt het hersenweefsel. Te streng van een blessure zou het moeilijk voor het dier om te overleven voor 48 uur, of de dieren konden minder te reageren op conivaptan behandeling tegen hersenoedeem geworden te maken. Anderzijds, de duur van MCAO minder dan 60 minuten kan onvoldoende zijn om een ​​ischemie induceren in de muis, en daarom zou niet tot hersenoedeem. De dosis en de duur van de behandeling werden gekozen op basis van de aanbevelingen FDA voor gebruik conivaptan. 16 Er is echter gerapporteerd datde humane dosis voor conivaptan was niet efficiënt bij muizen tot hersenoedeem te verminderen na een beroerte. Daarom moest de dosis 10 maal worden verhoogd in muizen, significante bescherming tegen post-ischemische hersenoedeem geïnduceerd. 4 Het belang van het kiezen van de juiste infusiesnelheid is dat het totale bloedvolume, de bloeddruk en interstitiële vochtophoping of kan beïnvloeden het tarief is aanzienlijk groter dan de voorgestelde tarief. Toch zou metingen van bloedvolume en de bloeddruk erg informatief.

Chirurgische inductie van de MCAO is een invasieve procedure en vereist nauwkeurige aandacht voor alle stappen van het protocol, en het is belangrijk om te weten de instructies die de techniek. Een aantal onverwachte chirurgische complicaties, zoals overmatige slagaderlijke bloeden als gevolg van een ongeluk gescheurde slagader verminderen van de kans op succes voor het experiment en verhoging van het sterftecijfer. Echter, kunnen veneuze bloeden gestopt worden door het toepassen van lichte druk wet een steriele spons.

Dit protocol beschrijft een eenzijdige inductie van hersenischemie, hetgeen impliceert dat de MCA occlusie wordt geproduceerd aan de rechter- of linker MCA. Echter kan het protocol worden aangepast afhankelijk van voorkeurszijde van MCA occlusie en de IV katheter installatie van de chirurg. Figuur 1 diagram toont een tekening van de meest kritieke onderdelen van de MCAO procedure Figuur 1A en B, de IV katheter installatie protocol figuur 1C, en de hersenen representatieve plakjes MCAO geïnduceerde herseninfarct bij het ​​eindpunt van het experiment (48 uur), zoals eerder gepubliceerd, 10 figuur 1D. Hoewel het schema en de representatieve hersenplakken impliceren dat de MCAO geïnduceerd aan de linkerkant van de hersenen, is er geen dramatische verschillen in resultaten verwachten als MCAO geïnduceerd aan de rechterkant van de hersenen zolang coherentie in enband onderzoek wordt gehandhaafd.

Tijdens de herstelperiode na de operatie en de anesthesie, kunnen de dieren leed ondervinden als gevolg van post-operatieve pijn en ernstige neurologische tekorten. In veel gevallen kan de postoperatieve pijnbehandeling worden beperkt tot het gebruik alleen lokale anesthetica zoals 0,5% bupivacaïne. Beroerte als gevolg CVA bij mensen en experimentele beroerte bij muizen zijn pathofysiologische factoren zoals ontsteking, herseninfarct en hersenoedeem. 9 Deze pathofysiologische gebeurtenissen worden aangegrepen door belangrijke moleculaire spelers zoals cyclooxygenase (COX) 13 en G-eiwit verwante receptoren. 22 Interferentie met de moleculaire wegen die COX betrokken kan worden veroorzaakt door het NSAID drugs, 13 als ze werden gebruikt in deze instellingen. Opioïden werken op hun receptoren die gekoppeld zijn aan G-proteïne en tweede messengers 12 en kan pathofysiologische gevolgen van een beroerte, 11 en het resultaat te veranderens van deze studie. Deze factoren beperken het gebruik van pijnstillers bij muizen postoperatief.

Kortom, onze studie onderzoekt de mogelijkheid van een herbestemming conivaptan als verreikende doel. Diermodel experimentele beroerte inductie gevolgd door continue IV infusie van conivaptan is altijd constante resultaten die het potentiële gebruik bij beroerte patiënten suggereren produceren. Meer in het bijzonder hebben we aangetoond dat het model van continue intraveneuze behandeling van conivaptan na een beroerte naar secundair hersenletsel voorkomen kan worden gebruikt voor preklinische studie in muizen. Deze studie was bedoeld om een ​​alternatieve toepassing van conivaptan behandeling bieden als een extra instrument om hersenoedeem bij muizen te bestuderen na een beroerte, omdat snelle vertaling in klinische instellingen kunnen worden levensreddende voor IC-patiënten.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

De auteurs hebben niets te onthullen.

Acknowledgments

Wij danken Swedish Medical Center voor het verstrekken van de financiering en de faciliteiten. We danken ook Craig Hospital voor de royale gebruik van de laboratoriumruimte.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Heated Pad K&H Manufacturing Inc 1060
Temperature Monitor with Rectal Probe Physitemp 7029
Silk Suture Spool, 6-0 Surgical Specialties Corporation SP114
Silk Suture on a Needle, 3-0 Ethicon 1684G
Nylon Suture, 7-0 Ethicon 1696G
Dental Resin Polysiloxane with Hardener Heraeus Kulzer 65817930
Microinfusion IV Pump Kent Scietific GT0897
Swivel 22GA Instech 375/22PS
Laboratory Tubing, 0.94 mm x 0.51 mm Dow Corning 508-002
Laboratory Tubing, 3.18 mm x 1.98 mm Dow Corning 508-009

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gueniau, C., Oberlander, C. The kappa opioid agonist niravoline decreases brain edema in the mouse middle cerebral artery occlusion model of stroke. J Pharmacol Exp Ther. 282, 1-6 (1997).
  2. Krafft, P. R., et al. Etiology of stroke and choice of models. Int J Stroke. 7, 398-406 (2012).
  3. Vakili, A., Kataoka, H., Plesnila, N. Role of arginine vasopressin V1 and V2 receptors for brain damage after transient focal cerebral ischemia. J Cereb Blood Flow Metab. 25, 1012-1019 (2005).
  4. Zeynalov, E., Jones, S. M., Seo, J. W., Snell, L. D., Elliott, J. P. Arginine-Vasopressin Receptor Blocker Conivaptan Reduces Brain Edema and Blood-Brain Barrier Disruption after Experimental Stroke in Mice. PloS one. 10, e0136121 (2015).
  5. Med Lett Drugs Ther.. Conivaptan (Vaprisol) for hyponatremia. The Medical letter on drugs and therapeutics. 48, 51-52 (2006).
  6. Zhao, X. Y., et al. Effect of arginine vasopressin on the cortex edema in the ischemic stroke of Mongolian gerbils. Neuropeptides. 51, 55-62 (2015).
  7. Manaenko, A., Chen, H., Kammer, J., Zhang, J. H., Tang, J. Comparison Evans Blue injection routes: Intravenous versus intraperitoneal, for measurement of blood-brain barrier in a mice hemorrhage model. J Neurosci Methods. 195, 206-210 (2011).
  8. Adams, S., Pacharinsak, C. Mouse anesthesia and analgesia. Curr Protoc Mouse Biol. 5, 51-63 (2015).
  9. Zeynalov, E., et al. The perivascular pool of aquaporin-4 mediates the effect of osmotherapy in postischemic cerebral edema. Crit Care Med. 36, 2634-2640 (2008).
  10. Zeynalov, E., Dore, S. Low doses of carbon monoxide protect against experimental focal brain ischemia. Neurotox Res. 15, 133-137 (2009).
  11. Zeynalov, E., Nemoto, M., Hurn, P. D., Koehler, R. C., Bhardwaj, A. Neuroprotective effect of selective kappa opioid receptor agonist is gender specific and linked to reduced neuronal nitric oxide. J Cereb Blood Flow Metab. 26, 414-420 (2006).
  12. Ma, M. C., Qian, H., Ghassemi, F., Zhao, P., Xia, Y. Oxygen-sensitive {delta}-opioid receptor-regulated survival and death signals: novel insights into neuronal preconditioning and protection. J Biol Chem. 280, 16208-16218 (2005).
  13. Ahmad, M., Zhang, Y., Liu, H., Rose, M. E., Graham, S. H. Prolonged opportunity for neuroprotection in experimental stroke with selective blockade of cyclooxygenase-2 activity. Brain Res. 1279, 168-173 (2009).
  14. Meisel, C., et al. Preventive antibacterial treatment improves the general medical and neurological outcome in a mouse model of stroke. Stroke. 35, 2-6 (2004).
  15. Miner, N. A., Koehler, J., Greenaway, L. Intraperitoneal injection of mice. Appl Microbiol. 17, 250-251 (1969).
  16. Adis International Limited. Conivaptan: YM 087. Drugs in R&D. 5, 94-97 (2004).
  17. Murphy, T., Dhar, R., Diringer, M. Conivaptan bolus dosing for the correction of hyponatremia in the neurointensive care unit. Neurocrit Care. 11, 14-19 (2009).
  18. Liu, X., Nakayama, S., Amiry-Moghaddam, M., Ottersen, O. P., Bhardwaj, A. Arginine-vasopressin V1 but not V2 receptor antagonism modulates infarct volume, brain water content, and aquaporin-4 expression following experimental stroke. Neurocrit Care. 12, 124-131 (2010).
  19. Wallace, B. K., Jelks, K. A., O'Donnell, M. E. Ischemia-induced stimulation of cerebral microvascular endothelial cell Na-K-Cl cotransport involves p38 and JNK MAP kinases. Am J Physiol Cell Physiol. 302, C505-C517 (2012).
  20. O'Donnell, M. E., et al. Intravenous HOE-642 reduces brain edema and Na uptake in the rat permanent middle cerebral artery occlusion model of stroke: evidence for participation of the blood-brain barrier Na/H exchanger. J Cereb Blood Flow Metab. 33, 225-234 (2013).
  21. Walcott, B. P., Kahle, K. T., Simard, J. M. Novel treatment targets for cerebral edema. Neurotherapeutics. 9, 65-72 (2012).
  22. Shen, Z., et al. Inhibition of G protein-coupled receptor 81 (GPR81) protects against ischemic brain injury. CNS Neurosci Ther. 21, 271-279 (2015).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics