الشعيرات الدموية المغذية الفحص يقيس كمية الطعام في

Neuroscience

Your institution must subscribe to JoVE's Neuroscience section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Diegelmann, S., Jansen, A., Jois, S., Kastenholz, K., Velo Escarcena, L., Strudthoff, N., Scholz, H. The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (121), e55024, doi:10.3791/55024 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Introduction

الأكل ضروري. ومع ذلك، رفع القيود عن تناول الطعام مما يؤدي إلى اضطرابات الأكل مثل الشره المرضي، وفقدان الشهية أو الاتجاه العام إلى وجبة دسمة يفرض تكاليف على الأفراد والمجتمع 3. الهدف من هذا البحث هو الكشف عن الآليات التنظيمية لتناول الطعام، وتوفير استراتيجية للتحايل على تشكيل اضطراب. وقد وفرت العديد من الدراسات باستخدام الكائنات نموذج الثدييات رؤى جديدة من الدوائر ودور نظم الإنذار في اضطرابات الأكل 6. ومع ذلك، لدينا معرفة الأسس العصبية والجزيئية الكامنة وراء هذه الاضطرابات لا تزال بعيدة عن الاكتمال. في السنوات الأخيرة، وذبابة الفاكهة ذبابة الفاكهة أصبح نظام نموذجا قيما للكشف رؤى الآلية الأساسية في تنظيم metabolisم 9. تأسست الشعرية المغذية (CAFE) فحص لذبابة الفاكهة في مختبر سيمور بنزر في عام 2007 مستوحاة من العمل في وقت سابق من قبل DETHIER في الذبابة 10 و 11. جعل فحص CAFE من الممكن قياس مباشرة تناول الطعام في ذبابة الفاكهة. في هذا النظام الاختبار السلوكي، الذباب تتغذى على المواد الغذائية السائلة الواردة في الشعيرات الدموية الزجاج متدرجة وضعها داخل القارورة. تراجع الغضروف المفصلي الشعرية يشير فقدان حل الغذائية عن طريق التبخر والاستهلاك الغذائي. تحديد سعر التبخر التي كتبها قارورة دون الذباب يسمح للتقدير دقيق لتناول الطعام.

فحص CAFE هو واحد من عدة نماذج سلوكية تستخدم لقياس التغذية في ذبابة الفاكهة ويجب على الباحثين اختيار الأنسب لالمحددة لهاسؤال. قرار استخدام فحص معين يجب النظر في النقاط التالية: طبيعة الطعام المقدم؛ في حالة التغذية. قياس كمية أو امتصاص العناصر الغذائية والتحقيق استهلاك الغذاء أو الاستجابة للطعام.

فحص CAFE كما هو موضح في هذا التقرير هو المثالي لتناول الطعام التالية من مصدر المواد الغذائية السائلة في ظل حالة التغذية في وضع مستقيم. بدلا من تناول الطعام يمكن قياسها لمجموعة ذبابة على مصدر الغذاء الملون في قارورة أو على طبق من ذهب. والذباب قتل عادة أو تخدير بعد الرضاعة ويتم تحديد كمية من الصبغة تناولها من قبل الطيف أو الفحص البصري من البطن الملون. الذباب تبدأ في إفراز المواد الغذائية تناولها سوى 30 دقيقة بعد تناول وبالتالي هذا النهج من الصعب استخدام لتحليل التغذية أطول مستمرة السلوكيات 12، 13.

في المقابل يتم الاحتفاظ الذباب على حالها عند صبغ امتصاصيتم استخدام الصورة مع استشفاف المشعة وسجل استهلاكها من النظائر المشعة في عداد التلألؤ 14 و 15. امتصاص radiolabel من قبل الجهاز الهضمي ذبابة يجعل طويلة الأجل قياس امتصاص الغذاء ممكن، ولكن قد يؤدي إلى التقليل من استهلاك بسبب جزيئات غير استيعابها وتفرز التتبع. وثمة نهج آخر لقياس استجابة في الغذاء في ذبابة الفاكهة هو الرد خرطوم تمديد (PER)، والذي يحدث عادة لتناول الطعام (16). يقيس هذا الأسلوب الأنيق الاستجابة الأولية لحافز الطعام ولكن لا يسجل كمية السعرات. يتم ضبط الاستهلاك الغذائي حيوي أثناء الرضاعة باستخدام عدة إشارات ردود الفعل بعد الهضمية التي تعتبر بالغة الأهمية لتنظيم التغذية 17 و 18. وقد بذلت عدة محاولات في السنوات الأخيرة لجمع البيانات شبه أتمتة في مقايسة PER 19، 20. يتم الكشف عن PER عن طريق لوحة كهربائية أو مجموعة من الأقطاب الكهربائية وتحسب عن طريق الكمبيوتر. الجمع بين فحص PER مع امتصاص النظائر المشعة كشف أن هذا الاختبار محدودة بسبب انخفاض الحساسية للكشف عن الاختلافات التغذية كمية 18. الفحص اليدوي التغذية (MAFE) 21، والتي يتم تغذيتها ذبابة يدويا مع الزجاج الشعرية، وقد وضعت مؤخرا لقياس امتصاص المواد الغذائية في ذبابة يجمد واحد. فحص MAFE يلغي التدخلات من البحث عن الطعام والتغذية بدء ولديه قرار وقت ثانية، وبدء PER ويمكن رصد استهلاك المواد الغذائية بشكل مستقل في الفحص. ومع ذلك، فإن الطريقة التي تجميد الطاير يؤثر على جوانب معينة من السلوك التغذية (مثل الحركة، والتحفيز) لا تزال بحاجة إلى التحقيق. للاستعراضات المقارنة ممتازة من فحوصات مختلفة لقياس استهلاك الغذاء في ذبابة الفاكهة ليlanogaster ولمساعدة الباحثين في العثور على واحدة الأنسب، انظر التقارير التي ديشباندي وماركس 13، 22.

فحص CAFE يتجنب بعض من مساوئ فحوصات أخرى المذكورة أعلاه، ويجمع بين سهولة الاستخدام مع قياس موثوق من تناول الطعام. هنا، يتم تقديم وصفا مفصلا لفحص CAFE ونظهر تعديل الإعداد بسيطة للحد من تبخر. وأظهرت نتائج ممثلة بما في ذلك اختيار لفحص اثنين من المواد الغذائية (على المدى القصير والطويل) وامتصاص السكروز من الذباب. في مناقشة قارنا طريقة موضح لدينا مع طرق بديلة لأداء الفحص CAFE، وتسليط الضوء على أوجه القصور المحتملة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. الفحص CAFE

ملاحظة: يتكون الاختبار من ثلاثة عناصر هي: قارورة التجريبية، غطاء معين والشعيرات الدموية الدقيقة. ويستخدم مربع من البلاستيك مع غطاء لنقل قنينات مستعدة وللسيطرة على الرطوبة بشكل أكثر كفاءة.

  1. استخدام ذبابة الفاكهة البلاستيكية ثقافة البطن قارورة (اختياري 8 سم ارتفاع، 3.3 سم القطر) كما أنبوب للفحص.
  2. ختم قارورة مع غطاء زجاجي المصنعة التي تحتوي على الدائري O (أرقام 1A، 1B). الحمل عن طريق الذباب التنصت أو مع أنبوب النفخ من خلال فتح غطاء المركزي (0.9 سم القطر)، والذي يسمح أيضا لتدوير الهواء وإمدادات المياه، وإغلاق الفتحة مع كدر الاسفنج. ست فتحات المخروطية أصغر (0.4 سم قطرها العلوي، 0.3 سم القطر الداخلي) تحيط حفرة المركزي وتناسب نصائح ماصة من 2-20 حجم ميكرولتر لعقد الشعيرات الدموية في المكان. (انظر الشكلين التكميلية للاطلاع على التفاصيل الفنية للغطاء.)
    ملاحظة: استخداممن سدادة الإسفنج مع فتحات للالشعيرات الدموية بدلا من الغطاء مصنوعة خصيصا المستخدمة في مخطوطة لدينا هو ممكن. لدينا غطاء مخصصة يسمح التداول الآمن للقارورة مستعدة التقليل من خطر الشعيرات الدموية التي تقع أسفل.
  3. لتقديم المواد الغذائية السائلة، استخدم 5 microcapillaries ميكرولتر مع 1 علامات ميكرولتر. ضع الشعيرات الدموية في فتحات المخروطية في غطاء عن طريق قطع الجزء العلوي من 2-20 ميكرولتر ماصة وإدراج معلومات سرية إلى الحفرة (الشكل 1B، مع وضع علامة الحافة الحمراء). لمنع الذباب من الهرب، إدراج تقطيعه 2-20 ميكرولتر ماصة في نفس الافتتاح.
  4. للتعامل مع بأمان متعددة قارورة مستعدة، ووضعها في علبة بلاستيكية مع ترصيع الشبكية (الشكل 2A).

2. إعداد الذباب

  1. إبعاد الذباب على الغذاء القياسية عند 25 درجة مئوية والرطوبة النسبية 60٪ و/ 12 ساعة دورة ضوء الظلام 12 ساعة.
  2. للسيطرة على ظروف التكاثر، وإدخال 35 الإناث البكر لد 15 من الذكور لكل مجموعة التجريبية في قارورة الثقافة البلاستيكية (9.8 سم ارتفاع، 4.8 سم القطر) تحتوي على 50 مل تطير الغذاء. السماح الذباب لتضع بيضها لأول 3 أيام، ثم نقل الكبار الذباب إلى قارورة المواد الغذائية الطازجة والسماح لهم وضع البيض لمدة يومين آخرين. بعد هذا تكرار نقل مرة أخرى. الذباب الكبار نبذ بعد 2 ايام اخرى.
  3. كما تناول الطعام يعتمد على حجم ذبابة، وتحديد الوزن من مجموعة من 100 الذباب من قبل التخدير 2- إلى الكبار من العمر 3 يوما الذباب باستخدام وسادة ذبابة CO 2 وجمع بينهما في أنبوب من البلاستيك 1.5 مل وقياس مع معيار نطاق المختبر. تحديد الوزن الرطب للأربع مجموعات على الأقل ذبابة مستقلة مرتبة حسب الجنس (الجدول 1). استخدام الوزن لحساب ميكرولتر الاستهلاك الغذائي في ذبابة ملغ. استخدام القيمة لتحديد كمية الطعام الذي يغذي ذبابة واحدة في التجربة وضبط عدد من الشعيرات الدموية مليئة المواد الغذائية وفقا لذلك لتجنب تفريغ الشعيرات الدموية عن طريق تغذية.
    1. ل3 ساعات فحص، واستخدام20 الذباب واثنين من الشعيرات الدموية شغلها. لتجربة طويلة الأجل (> 3 ساعات ويصل إلى 9 أيام)، استخدم مجموعة من ثمانية الذباب مع العرض من أربعة الشعيرات الدموية شغل (لا يمكن الحصول على نتائج موثوقة مع أقل من ثمانية الذباب في ظل ظروف وصفها).
  4. الذباب منفصلة إلى مجموعات (8 أو 20 الذباب) بعد قياس الوزن تحت التعرض CO 2. نقل المجموعة إلى قارورة الغذائية الجديدة (التي تحتوي على 15 مل الغذاء القياسية) للسماح للانتعاش من CO 2 التخدير لمدة 48 ساعة قبل التجربة. استخدام الذباب البالغ من العمر 6-اليوم-4- لللمقايسة CAFE.
  5. كما تتغذى الذباب غير المتعطشة النوع البري بشكل هامشي فقط 19 و 21، قبل تجويع الذباب للتجارب التغذية 3 ساعات. لا يلزم الصوم عندما يتم رصد استهلاك الغذاء على مدى عدة أيام. للصيام، ونقل الذباب من 16 إلى 20 ساعة قبل الاختبار عن طريق النقر عليها بلطف إلى قارورة تحتوي فقط على قطر ورقة مطوية مرشح 45 ملم مبلل مع ~ 0.5 مل ده2 O (انقر نقرا مزدوجا الماء المقطر)، وعلى مقربة مع توصيل غطاء CAFE الفحص.

3. إعداد الأغذية السائلة

  1. إعداد 3 M (10٪، ث / ت) حل سهم السكروز عن طريق ملء 102.6 غرام السكروز (C 12 H 22 O 11) إلى 100 مل ده 2 O. ماصة 3 ميكرولتر، 33 ميكرولتر، 333 ميكرولتر و 3.3 مل و 6.6 مل من محلول المخزون إلى أنبوب بلاستيكي 15 مل. إضافة 2 مل من لون الطعام (للأحمر: قرمزي [E124]؛ فعلى الأزرق: نيلي اللون القرمزي [E132]) وملء إلى 10 مل مع DDH 2 O. تركيزات الناتجة 0.001، 0.01، 0.1، 1، و 2 M السكروز .
    ملاحظة: إن صبغة الطعام يسمح تصور الغضروف المفصلي أكثر سهولة. لكن الصبغة قد يكون لها تأثير على تناول الطعام. لتجنب التحيز بسبب الصبغة الاستغناء عن صبغة الطعام أو عشوائية استخدام الأصباغ على عينات من المواد الغذائية خلال التجربة والجماعات.
  2. لاختبار ماصة تفضيل الكحول 333 ميكرولتر من محلول المخزون 3 M السكروز في أنبوب بلاستيكي 15 مل.إضافة 1.5 مل (2.3 مل) من 100٪ ETOH (الإيثانول) وإضافة ده 2 O ما يصل إلى 10 مل أن تسفر عن 15٪ (0.25 ملم) وبنسبة 23٪ (0.39 ملم) حلول العمل.
  3. الحفاظ حلول السهم عند -20 درجة مئوية، وحلول العمل في 4 درجات مئوية. استخدام في غضون أسبوع 1.
  4. تعبئة ما يصل إلى 10 الشعيرات الدموية في نفس الوقت مع حل الغذائية الملونة، بالقوة الشعرية. إدراج نهايات الشعيرات الدموية في محلول السكروز (عقد الشعيرات الدموية في زاوية 45 درجة إلى الحل). تتوقف إذا السائل يصل أعلى (5 ميكرولتر) علامة الشعرية، وإزالة حل الزائد في الخارج والداخل مع المناديل الورقية.

4. الجمعية والمسرحية والشعرية الفحص الطاعم

  1. إذا لم يكن هناك حاجة إلى الصيام، ونقل الذباب التجريبية للفحص عن طريق النقر أو عن طريق ضربة الأنابيب. تأكد من تضمين ثلاث قوارير السيطرة من دون الذباب لقياس التبخر.
  2. إزالة بعناية طرف ماصة (2-20 حجم ميكرولتر) التي تم إغلاق واحد من فتح والخارجيع، وإدراج ملء كوب الشعرية، من أسفل إلى نهاية البداية. تأمين الشعرية عن طريق وضع طرف ماصة الظهر بجانب الشعرية. إذا كان يتم اختبار العديد من الحلول الغذائية، كرر هذا الإجراء وفقا لذلك.
  3. ضع الشعرية ينتهي داخل كل قارورة على نفس المستوى لتجنب التحيز التي يمكن أن تحدث إذا كانت موجودة في مصادر الغذاء على ارتفاعات مختلفة (3-4 سم من غطاء)؛ الحفاظ على مسافة لورقة الترشيح لمنع الشعرية من تسرب عن طريق لمس عن طريق الخطأ ورقة الترشيح أو اللزوجة مختلفة من مصادر الغذاء.
  4. تسمية الطرف العلوي من السائل الملون باستخدام علامة من ركلة جزاء (علامة البداية). لضمان ويمكن تحديد الشعيرات الدموية المختلفة، تسمية منهم على حدة باستخدام لون أو شريط التعليمات البرمجية.
  5. وضع عدة فحوصات CAFE أعدت داخل مربع من البلاستيك مع البطانة الشبكية ونقل مربع (الشكل 2A) إلى وضع آمن تحت ظروف المختبر أو في temperature-، CLIM الخفيف والرطوبة التي تسيطر عليهاأكل غرفة (معلمات: 25 ° C، 60٪ الرطوبة النسبية، 12 ساعة / 12 ساعة دورة ضوء الظلام) للفترة التجريبية (على سبيل المثال 3 ساعات أو أيام).
  6. كما يجف ورق الترشيح أسفل ما إذا كان يتم إجراء فحص على مدى عدة أيام، وتطبيق المياه العذبة كل 24 ساعة عبر كدر الإسفنج (100 ميكرولتر) للحفاظ على ثابت الرطوبة داخل الفحص. استخدام أربع عبوات منفصلة (8 سم ارتفاع، 3.3 سم القطر) مليئة 30 مل ده 2 O كأجهزة الرطوبة ووضعها بجانب فحوصات CAFE في مربع من البلاستيك. استخدام غطاء للصندوق من البلاستيك لخلق الرطوبة بيئة تسيطر عليها أثناء التجربة (الشكل 2A).
    ملاحظة: التباين الكبير يحدث تحت ظروف المختبر. ومع ذلك، فمن الممكن لإجراء فحص CAFE في درجة حرارة الغرفة (على سبيل المثال، في أحد الفصول). استخدام جهاز الترطيب (ورق الترشيح، مع أو من دون كدر اسفنجة رطبة، وشغل قوارير المياه وغطاء للصندوق من البلاستيك) وشجعت غاية لتقليل التبخر (
  7. استبدال الشعيرات الدموية بأخرى مملوءة حديثا للتجارب طويلة المدى كل 24 ساعة. جعل علما من الذباب الميت قبل كل فاصل زمني ح 24 واستخدام عدد من الذباب حية لحساب معدل الاستهلاك الطيران للفترة التالية. تجاهل الشعرية القديمة بعد قياس تدهور الغضروف المفصلي (انظر 5.1).
    ملاحظة: أثناء تجربة 3 ساعات نحن بالكاد نرى أي الذباب الميت. خلال دراسة 4 أيام نجد عادة 1-3 الذباب الميت.
  8. في نهاية الفحص أو قبل استبدال الشعرية، بمناسبة الغضروف المفصلي أقل من الشعرية (علامة النهاية) مع القلم علامة في حين أن الفحص CAFE لا يزال في وضع مستقيم. تجاهل البيانات إذا علامة نهاية ليست تحت علامة الأولية (علامة البداية). لا تقم بإزالة الغطاء، لأن هذا قد يغير الغضروف المفصلي.
  9. بعناية إزالة الشعيرات الدموية من الفحص وتخزينها لجمع البيانات. تحقق مما إذا وصل السائل داخل الشعيرات الدموية في الطرف الأدنى إن لم يكن discarد البيانات، كما كان الطعام ليس في متناول الذباب. جمع كل الشعيرات الدموية في قارورة كمجموعة. إدراج نصائح ماصة تقطيعه إلى جميع الفتحات لمنع الذباب من الهرب. تفكيك الإعداد وغسل قارورة، أغطية وسدادات الإسفنج في حمام الصابون وبين عشية وضحاها جاف في درجة حرارة الغرفة لاستخدامها مرة أخرى.
    ملاحظة: الذباب يمكن تحليلها بعد الفحص. تأكيد امتصاص المواد الغذائية عن طريق العين أو تحت المجهر تشريح.
  10. كرر التجارب مع نفس المورثات على الأقل في ثلاث أيام مختلفة.

5. جمع وتحليل البيانات

  1. قياس المسافة بين علامة بداية ونهاية علامة على شعري باستخدام الفرجار أو مسطرة. لنقل البيانات مباشرة إلى جدول بيانات، واستخدام USB (الناقل التسلسلي العالمي) متصلة الفرجار الرقمية (الشكل 1E). تجاهل الشعيرات الدموية بعد القياس.
  2. حساب حجم الشعرية لحساب امتصاص الغذاء أو التبخر. على سبيل المثال، والنظر في سقفillary التي هي 73 مم طويل ويحتوي على 5 ميكرولتر من محلول الغذاء. انخفاض 14.6 ملم في الغضروف المفصلي يعكس الإقبال على 1 حل ميكرولتر. حساب امتصاص المواد الغذائية التي تستخدم الصيغة التالية:
    امتصاص المواد الغذائية (ميكرولتر) = المسافة قياس (مم) / 14.6 ملم
  3. استبعاد تأثير التبخر في تناول الطعام، وحساب يعني تبخر في قارورة الثلاث لمراقبة (على الأقل) دون الذباب. طرح هذه القيمة المتوسطة من القيمة التي تم الحصول عليها للاستهلاك الغذائي عن طريق الذباب.
  4. استخدام الصيغة التالية لتحديد الاستهلاك الكلي في الطيران:
    استهلاك المواد الغذائية (ميكرولتر) = (الغذاء امتصاص [ميكرولتر] - الخسارة بالبخر [ميكرولتر]) / إجمالي عدد الذباب في القارورة. على المدى الطويل تجارب استخدام عدد من الذباب على قيد الحياة قبل بداية فترة 24 ساعة.
  5. لمراعاة الفروق في حجم الجسم، مثل بين الذكور والإناث الذباب، وتطبيع استهلاك المواد الغذائية إلى وزن الجسم (ميكرولتر الغذاء / ذبابة ملغ).
  6. استخدام البرامج الإحصائية لتحليل البيانات. للقاعدةالبيانات الموزعة حليف، -tests T استخدام الطالب لتحديد الاختلافات بين الجماعات ذبابة اثنين، واستخدام ANOVA (تحليل التباين) مع اللاحق توكي كريمر اختبارات لأكثر من مجموعتين. في حالة الاختيار، تحليل الاختلافات من اختيار عشوائي باستخدام اللامعلمية عينة واحدة علامة الاختبار.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

وتستخدم الذباب من النمط الجيني ث 1118 لشرح كيفية يتم تنفيذ الفحص. وتستخدم المسوخ ث 1118 عادة لتوليد خطوط المعدلة وراثيا وللسيطرة على الخلفية الوراثية الجينات المحورة ملحوظ مع الجين الأبيض. عادة، لإجراء التجارب السلوكية، وbackcrossed جميع خطوط المعدلة وراثيا لمدة خمسة أجيال نفس الرصيد ث 1118، والذي يستخدم كعنصر تحكم التجريبية. وتبين لنا تجارب مختلفة: مقارنة بين الخسارة التبخر من أجل الإعداد لدينا تعديل، على المدى القصير تجربة اختيار الأغذية، على المدى الطويل تجربة تناول الطعام، وتجربة على التخفيفات السكروز مختلفة.

تبخر يلعب دورا حاسما في أداء الفحص CAFE. أدرجنا النهج إضافية لفحص جهدنا لتقليل التبخر: ط) وتعبئتها كدر الإسفنج المركزي مع الماء كل 24 ساعة. ب) عديtional المياه شغل في قارورة داخل مربع النقل وج) استخدام غطاء لمربع لإنشاء سياج الرطوبة (انظر 4.6). مقارنة تبخر بين الإعداد دون ومع الأجهزة المذكورة أعلاه، شهدت انخفاضا كبيرا في التبخر. حتى على تأثير تقلبات أعلى من حل الايثانول التي تحتوي ولم يتم اكتشاف باستخدام الإعداد الجديد.

في تجربة الطعام للاختيار اثنين من مجموعة من 20 الذباب يمكن أن تغذي لمدة 3 ساعات. في البيئات الطبيعية، ذبابة الفاكهة تتغذى بشكل تفضيلي على تخمر الفواكه مع الكحول 22، ولقد ثبت ذلك، باستخدام الإعداد مماثل، أن الذباب يفضل الحلول الخميرة السكروز مع الإيثانول على الحلول الخميرة السكروز دون الايثانول 23. هنا، وتقدم اثنين من الخيارات الغذائية، وإيجاد حل 0.1 M السكروز المسمى مع لون الطعام الاحمر وحل 0.1 M السكروز مع 15٪ ETOH المسمى مع اللون الأزرق الغذائية (الشكل 1A، C). البصري السابقأمينة من البطن يدل على أن الذباب تتغذى على كل من حلول (1D الشكل). استهلاك الطعام في الطيران هو أكبر بكثير (حوالي 2 أضعاف) لمحلول السكروز التي تحتوي على ETOH (الشكل 3A).

في التجربة التالية، دراسة طويلة الأجل، وهي مجموعة من ثمانية الذباب لديه حق الوصول إلى مصادر الغذاء مماثلة لمدة 4 أيام، والذباب تستهلك أكثر من المواد الغذائية التي تحتوي على الإيثانول في كل يوم (الشكل 3B). يبقى ثابتا خلال هذه الفترة (متوسط = 0.29، الجدول 4) - مؤشر الأفضلية للإيثانول ([يمث] / الاستهلاك الكلي [يمث + ETOH]). تفضيل الإيثانول يتسق مع العديد من المنشورات والبرامج الأخرى التي الذباب يمكن التمييز بين المصادر الغذائية المختلفة 24 و 25 و 26. قد يكون جذب الإيثانول لاحظنا نتيجة لمحتويات السعرات الحرارية المختلفةالحلول المقدمة وخصائص مجزية من الايثانول 24. يمكن أيضا فحص استخدامها لقياس الآثار السلبية من المكملات الغذائية. أظهر جا وزملاؤه في أول نشر لهذه الطريقة أن تطبيق الباراكوات (دواء المؤكسدة) ينخفض استهلاك الأغذية 10.

في التجربة المقبلة، ويظهر الفرق في تناول الطعام بين الجنسين. متطلبات الأيض تختلف بين الذكور والإناث د البطن. على سبيل المثال، في حين تفضل الذباب الذكور المواد الغذائية الغنية بالكربوهيدرات، خلال إنتاج البيض، وهي المرحلة التي تتطلب زيادة مكونات البروتين، والإناث يفضلن الوجبات الغذائية الغنية بالبروتين على الوجبات الغنية بالكربوهيدرات 27. استخدمت ذكر تزاوج والذباب الإناث في هذه التجربة. تحليل الاختلافات في تناول الطعام بين 20 من الذكور و 20 إناث الذباب ضمن فترة زمنية التغذية 3 ساعات، يتم إجراء فحص CAFE باستخدام تناسق السكروزسلسلة التموينية. وقدمت خمسة الشعيرات الدموية، مع حلول تتراوح 10-3 إلى 2 متر السكروز، وقياس استهلاك كل حل (الشكل 4A). وأظهرت النتائج أن كلا الجنسين يفضل الحلول السكروز تركيز عالية كمصدر للغذاء (الشكل 4A). ومع ذلك، استهلكت الإناث أكثر بكثير من اثنين من حلول السكروز أدنى على التركيز مقارنة بالذكور (P <0.05)؛ من ناحية أخرى، استهلكت الذكور أكثر بكثير من الحلول على التركيز العالي (P <0.001). لاحظ أن هذه البيانات لم يفسر الاختلافات في حجم الجسم. أنثى D. البطن وعادة ما تكون أكبر وأثقل من الذكور (الجدول 1). عندما يتم تطبيع الاستهلاك الغذائي للطيران كتلة، الفروق بين الذكور والإناث في استهلاك حلول منخفضة السكروز لم تعد كبيرة. وباختصار، الذكور تستهلك المزيد من محلول السكروز من الإناث تزاوج، بما يتفق مع البيانات السابقة، reflecting الممكنة مطالب الأيض المختلفة، والأفضليات الغذائية أو اختلافات بسيطة في القدرة على تتغذى على الشعيرات الدموية بين الجنسين.

شكل 1
الشكل 1: ذبابة الفاكهة الشعرية المغذية الفحص. أ) فحص التغذية مع الذباب. تقدم مرشح ورقة مبللة بالماء في الجزء السفلي من القارورة. وتقدم أربعة الشعيرات الدموية خلال التجربة (الغذاء الأحمر- والأزرق اللون في الشعيرات الدموية المعاكس). لاحظ أنه يتم تأمين الشعيرات الدموية في الموقف من طرف ماصة الثاني، ويتم إغلاق مواقف غير المستخدمة تستخدم نصائح ماصة. المكونات رغوة في وسط غطاء يسمح تبادل الهواء. ب) عرض مفصل للغطاء. تندس - (20 ميكرولتر والحدود الحمراء 2) في فتحات المخروطية من المواقف غير المستخدمة، وبي الثانية نصائح قطع ماصةيتم إدخال pette معلومات سرية إلى قطع طرف لإغلاق الثقب. تستخدم النصائح قطع ماصة للسيطرة على تنسيب من microcapillaries، وتستخدم نصائح تقطيعه إلى عقد الشعيرات الدموية ضيقة. ج) وD. البطن ذبابة يتغذى على الشعرية. D) بعد التغذية، لون الطعام واضحة للعيان في البطن ذبابة. E) والفرجار الرقمية يستخدم لقياس المسافة بين علامة بداية وعلامة نهاية الغضروف المفصلي. يتم نقل البيانات مباشرة إلى جداول البيانات إكسل عن طريق USB. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2
الشكل 2: تأثير التبخر في شعري الطاعم الفحص. أ) وضع متعددة فحص CAFE داخلمربع من البلاستيك مع البطانة الشبكية. للسيطرة على الرطوبة خلال التجربة أربع عبوات المياه تملأ (الحافات الحمراء) يتم وضعها داخل الشبكة. يتم وضع الضوابط تبخر في القرب المباشر لهذه قارورة. ويرد غطاء لإعداد كله في الخلفية. ب) المقارنة بين فقدان الصوت من خلال التبخر. يظهر القيمة المتوسطة للتبخر أكثر من 4 أيام. يتم التحكم الرطوبة التي كتبها (ط) تطبيق المياه إلى كدر الإسفنج المركزي (24 ساعة الفاصل)؛ (ب) مضيفا أربع عبوات المياه تملأ في الشبكة. و (ج) باستخدام غطاء من البلاستيك لإعداد كله. تبخر أقل بكثير إذا تم التحكم في الرطوبة لكل من حلول اختبار (*** P ≤ 0.001؛ ن = 48). لا توجد فروق في مستوى التقلب بين ETOH احتواء وغير التي تحتوي على محلول السكروز هو اكتشافها مع الأجهزة الرطوبة المستخدمة. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر منهذا الرقم.

الشكل (3)
الشكل (3): الأفضلية للإيثانول (ETOH) يحتوي على السكروز على السكروز الحل. ويرد) استهلاك الغذاء للذكور ث 1118 الذباب. الذكور تستهلك أكثر بكثير من ETOH 15٪ تحتوي على محلول السكروز من محلول السكروز من عادي. *** P ≤ 0.001. N = 27. B) الذباب يفضل بشكل كبير حل السكروز التي تحتوي على 23٪ ETOH خلال محاكمة لمدة 4 أيام. *** P ≤ 0.001. ** P ≤ 0.01. N = 16. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل (4)
الشكل 4: Consumption (ميكرولتر / يطير وميكرولتر / ملغ ذبابة) من تركيزات السكروز مختلفة من ذكر وأنثى ث 1118 الذباب. أ) يختلف استهلاك تركيزات مختلفة من حلول السكروز بشكل ملحوظ بين الذكور والإناث. الذباب الإناث تستهلك أكثر بتركيزات السكروز أقل، والذباب الذكور تستهلك أكثر بتركيزات أعلى. * P <0.05. *** P <0.001. N = 27 المحاكمات مع 20 ذكور لكل منهما، N = 30 المحاكمات مع 20 من الإناث لكل منهما). ب) امتصاص الغذاء على أساس الكتلة. زيادة كبيرة في استهلاك تحدث بين الذكور والإناث الذباب لحلول السكروز 0،1-2 م عندما تطبيع للطيران كتلة. *** P ≤ 0.001. N = 27 من الذكور، N = 30 من الإناث. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الجدول 1
الجدول 1: وزن الجسم من ذكر وأنثى ث 1118 الذباب. تم قياس أربع إلى خمس مجموعات من 100 الذباب، وكان يحسب وزن الجسم (ملغ / ذبابة). وتظهر القيم المتوسطة (مع STDEV (الانحراف المعياري) وSTERROR (الخطأ المعياري)). وتستخدم القيم المتوسطة لتطبيع الاستهلاك الغذائي للطيران كتلة (ميكرولتر / ملغ ذبابة). الرجاء الضغط هنا لتحميل هذه البيانات.

الجدول 2
الجدول 2: التبخر فقدان (ميكرولتر) في CAFE الفحص. يظهر كمية من السوائل المفقودة من خلال التبخر لمدة 4 أيام. يتم التحكم في الرطوبة (+) أو لار (-) كما هو موضح في الشكل (2). وأظهرت بيانات التبخر لمدة حلول مختلفة (السكروز وسكر القصب بالإضافة إلى ETOH). وتعرض القيم المتوسطة لكل يوم، وخلال الفترة (مع STDEV وSTERROR). يظهر فقدان تبخر التجربة التخفيفات السكروز تحت منفصل (يعني القيم). الرجاء الضغط هنا لتحميل هذه البيانات.

الجدول 3
الجدول 3: استهلاك 0.1 M السكروز مع / بدون 15٪ ETOH التي ذكر ث 1118 الذباب بنك الاحتياطي الفيدرالي لمدة 3 ساعات. وقد تم قياس استهلاك كل الحلول من خلال مجموعة من 20 الذباب لمدة 3 ساعات في 3 أيام. وتنقسم القيم استهلاك لمجموعة الطيران من قبل عدد من الذباب اختبار لتقدير امتصاص ميكروليتر في الطيران بعد طرح خسائر التبخر. وتظهر القيم المتوسطة (مع STDEV وSTERROR). الرجاء الضغط هنا لتحميل هذه البيانات.

الجدول 4
الجدول 4: استهلاك 0.1 M السكروز مع وبدون 23٪ ETOH لمدة أربعة أيام من ذكر ث 1118 الذباب. وقد تم قياس استهلاك كل الحلول من قبل مجموعات من 8 الذباب لمدة 24 ساعة لمدة 4 أيام. تم احتساب مؤشر تفضيل الإيثانول باستخدام الصيغة التالية ([يمث + ETOH] - [يمث] / إجمالي الاستهلاك). وتنقسم القيم استهلاك لمجموعة الطيران من قبل عدد من الذباب اختبار لتقدير ميكرولتر امتصاص في الطيران بعد خصم خسائر التبخر. وتظهر القيم المتوسطة (مع STDEV وSTERROR) عن كل يوم..jove.com / ملفات / ftp_upload / 55024 / JoVE55024R1-Diegelmann-الجدول 4.xlsx "الهدف =" _ فارغة "> الرجاء انقر هنا لتحميل جدول البيانات.

الجدول 5
الجدول 5: استهلاك خمسة تركيزات السكروز من ذكر وأنثى ث 1118 الذباب. تناول كل حل، والقيمة مقابل مبلغ من مآخذ السكروز، ويرد. يتم إعطاء القيم المتوسطة لكل تركيز أسفل كل عمود (مع STDEV وSTERROR). لحساب كمية على أساس الكتلة ذبابة (امتصاص ميكروليتر لكل مليغرام من ذبابة)، وينقسم الاستهلاك الغذائي على متوسط وزن الذباب الذكور أو الإناث (من الجدول 1، كما هو موضح على اليمين). الرجاء الضغط هنا لتحميل هذه البيانات.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

ويصف التقرير فحص CAFE بطريقة خطوة بخطوة، مع التركيز على الإعداد التقني والأداء الناجح في المختبر. نظرا لبساطته، ويمكن أيضا أن هذا الاختبار أن تستخدم تربويا كتجربة المدرسة. وتبين الأمثلة التي مقايسة يسمح التحقيق في الاستشعار عن الطعام، وتفضيل والاستهلاك في ذبابة الفاكهة على مدى فترات زمنية قصيرة وطويلة (ساعات إلى أيام). وقد استخدم الفحص CAFE على نطاق واسع في مجال التحقيق في المواضيع بما في ذلك المواد الغذائية واستهلاك المخدرات، والإدمان، توازن الطاقة والسيطرة العصبية التغذية 16، 18، 24، 25.

في مقايسة CAFE، يجب أن الذباب التجريبية بنجاح أداء العديد من المهام للحصول على الغذاء، مثل البحث عن الطعام، الاستشعار عن بعد والحركة. عدم القدرة على أداء هذه المهام قد يؤدي إلى خفض الاستهلاك. إلى عن علىالشيخوخة السلوك يعتمد أساسا على حالة الجوع من الذباب ويمكن زيادتها عن طريق الصيام 19 و 21. الاستشعار عن بعد، وبالتالي توطين، من مصدر الغذاء يمكن أن تتأثر قدرة الذبابة على رائحة أو طعم وقد يؤدي بشكل غير مباشر في خفض معدل استهلاك 28. عرض الطعام في نهاية الشعرية قوات الطاير إلى النزول والعمل بنشاط على عقد نفسها في موقف رأسا على عقب لتغذية. ليشغل هذا المنصب الشرب على شعري، يجب الطاير تنسيق تقلص العضلات لها. ضعف أو فرط النشاط الحركي بشكل واضح من شأنه أن يؤثر امتصاص الطعام، كما يفعل القصور الحركة بسبب الشيخوخة. وبالإضافة إلى ذلك، تدخل عن طريق الذباب الأخرى خلال هذه المناورة يؤدي إلى إنهاء السابق لأوانه تناول الطعام. ولذلك، ينبغي تحديد عدد من الذباب لاستخدامها قبل التجربة. وينبغي أن يضمن هذا العدد أن جميع الذباب يمكن أن تغذي بشكل صحيح، وينبغي أن تحكم لوكثافة لاي في القارورة (من 8 إلى 20 عضوا كحد أقصى الذباب في منطقتنا D. البطن CAFE فحص قارورة). ويتأثر التغذية من القيمة الغذائية للوجبة، والذباب ضبط حيوي الابتلاع وفقا لذلك 24، 29. فقد تبين أن طفرات في عداد المفقودين أوكتوبامين العصبي لها عشرات استجابة PER العادية ولكن في نفس الوقت تظهر انخفاضا كبيرا في كمية الغذاء 14. وعلاوة على ذلك، خلال التغذية، والتحفيز للاستمرار في انخفاض الأكل ويؤدي إلى إنهاء السلوك.

تطبيق الاعتبارات المذكورة أعلاه، ليس فقط لفحص CAFE، فإنها تؤثر على سلوك التغذية تقاس في الاختبار الأخرى كذلك. ولذلك، يجب أن تؤخذ في قدرة الذباب لإجراء الفحص في الاعتبار عند قياس كمية الغذاء. على الرغم من أنها ليست صعبة من الناحية الفنية، وفحص CAFE لديه بعض العيوب العملية المحتملة. تراجع هلالةداخل شعري يعتمد على خسارة التبخر وتناول الطعام عن طريق الذباب. عالية التبخر إشكالية فيما يتعلق إشارة إلى نسبة الضوضاء، وبالتالي يجب أن يكون الحد الأدنى. طبقنا عدة طرق وأجهزة إضافية للسيطرة على الرطوبة خلال الفترة التجريبية (انظر 4.6). وساعدت هذه الملحقات لنا للحد من تبخر الآثار القضاء بشكل كبير وحتى من تقلبات مختلفة من مصادر الغذاء استخدمنا. ومع ذلك، إذا لم غرفة المناخ متاح الفحص لا يمكن أن يؤديها في درجة حرارة الغرفة (على سبيل المثال في الفصل الدراسي) مع قيم التبخر العالي باعتباره العائق.

كما ورد في البروتوكول، يجب أن توضع في نفس مستوى داخل القارورة لتجنب التحيز في اختيار الذبابة نظرا لمسافات مختلفة إلى مصدر الغذاء نهايات الشعيرات الدموية. ولتحقيق ذلك، يتم إصلاح موقف الشعرية مع طرف ماصة الثاني. طول شعري لا يبدو أن تكون معيارا للتغذية في wild-نوع الذباب (10). أي تسرب للسائل يمكن أن تقوض قراءات دقيقة من استهلاك الطعام (انظر 4.3 و 4.9)؛ بيئة خالية من الاهتزاز يمنع تسرب. الجسيمات في الشعرية كتلة الحل تدفق ومنع استهلاك المواد الغذائية. الحل الغذائي، وخصوصا إذا كان يحتوي على الخميرة، ويحتاج إلى أن يذوب تماما لتجنب مثل هذا الانسداد. استخدام استخراج المياه القابلة للذوبان الخميرة يمكن التغلب على هذه المشكلة ولكن كمصدر ناقصة التغذية قد يسبب تكاليف إضافية لياقة بدنية. يحتاج الوصول الغذائية التي سيتم تقييمها قبل وبعد التجربة. البيانات الطيران الوحيدة التي ينبغي أن تدرج في التحليل هو أن الحصول عليها حيث كان الحصول على الغذاء حاضرا خلال التجربة بأكملها (انظر 4.9). موقف التغذية رأسا على عقب هو سمة أساسية من التجربة. في ظل ظروف طبيعية، وهذا الموقف التغذية ليست غريبة الطاير، وشنق الفواكه انخفاضا من الأشجار وأنها قد يتنازل ثمرة فاسدة. ويؤيد ذلك التجارب comparجي أحجام وجبة من الذباب التغذية في الموقف رأسا على عقب في مقايسة CAFE إلى (ط) وضع الأكل الأفقي من الذباب يجمد في مقايسة MAFE و (ب) من اليمين الجانب المتابعة تغذية موقف يستخدم الغذاء رديولبلد 13 و 21 . على الرغم من أن عرض المواد الغذائية رأسا على عقب لا يبدو أن يكون مشكلة بالنسبة لالذباب، ويمكن أن تؤثر على تكوين الغذاء داخل الشعيرات الدموية. المكملات الغذائية العالقة مثل خلايا الخميرة يمكن أن تغرق عبر الجاذبية إلى أسفل الشعرية، وبالتالي قد يكون أكثر تركيزا في أسفل أو قد المكونات الشعرية. وهذا من شأنه التأثير على سلوك الذبابة، وبالتالي النتائج. التأكد من أن مكونات الحل التغذية ويذوب تماما، وكثيرا ما طرح الشعيرات الدموية الجديدة خلال التجارب على المدى الطويل، يقلل هذا التأثير على تناول الطعام.

استخدام فحص CAFE الموصوفة هنا يسمح قياس الاستهلاك الغذائي في مجموعة جوي فوق وقت يمتد منساعات أو أيام. إذا كان المطلوب تحليل أكثر تفصيلا (على سبيل المثال، سلوك ذبابة واحدة أو السلوك في حدود دقيقة)، المقايسات التغذية الأخرى، مثل فحص MAFE، هي أكثر ملاءمة. قد يكون من الممكن لعدد من الذباب إلى أن تخفيض إضافي باستخدام أنبوب 1.5 مل microcentrifuge وشعري واحد 30.

عدد من التجارب استخدامها للحصول على نتائج ممثلة يختلف 15-27، بما يتفق مع وصف التجارب في الأدب 17 و 24. الفحص لا يمكن أن يؤديها بطريقة عمياء الكلاسيكية التي يستبعد التحيز المحتمل من مجرب، وأنها عادة متكررة على الأقل 4-5 مرات على كل عدة أيام. البيانات التي تم الحصول عليها مع مقايسة CAFE يمكن تطبيع على وزن الجسم لحساب الاختلافات في سلوك التغذية المتعلقة حجم الجسم. النتائج التي تم الحصول عليها مع هذا الاختبار هي قوية وقابلة للتكرار، بحيثوقد أدخلت بنجاح في الدورات العملية لطلاب الدراسات العليا.

يستخدم على نطاق واسع فحص CAFE في مجال التمثيل الغذائي والبحوث الذوق في ذبابة الفاكهة. لها تطبيقات متعددة في اختبار دور المكملات الغذائية و / أو المخدرات على سلوك التغذية، ويمكن استخدامه للتحقيق في الاستجابة للجرعة الى مصدر الغذاء محدد 24. جنبا إلى جنب مع مجموعة متنوعة رائعة من التقنيات المستخدمة لمعالجة الدوائر العصبية في D. البطن، كما يسمح هذا الاختبار الباحثين للتحقيق في دور نظم التعزيز على سلوك التغذية 12، 17، 18.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Vials (breeding) Greiner Bio-One 960177 www.greinerbioone.com
Vials (CAFE assay) Greiner Bio-One 217101 www.greinerbioone.com
Lid-CAFE assay Workshop
Plastic box, low wall Plastime 353 www.plastime.it
Cover for the plastic box Workshop
Capillaries BLAUBRAND  REF 7087 07 www.brand.de
Pipette tips Greiner Bio-One 771290 www.greinerbioone.com
Filter paper circles Whatman 10 311 804 www.sigmaaldrich.com
D(+)-Sucrose AppliChem 57-50-1 www.applichem.com
Ethanol absolute VWR Chemicals 20,821,330 www.vwr.com
Food color (red, E124) Backfun 10027 www.backfun.de
Food color (blue, E133) Backfun 10030 www.backfun.de
Soap solution (CVK 8) CVH 103220 www.cvh.de
Digital caliper GARANT 412,616 www.hoffmann-group.com
Vials (breeding) Height 9.8 cm, diameter 4.8 cm 
Vials (CAFE assay) Height 8 cm, diameter 3.3 cm
Lid-CAFE assay Produced in university workshop, technical drawing supplied
Please click here to download this file.
Plastic box, low wall A plastic grid inlay was custom-made for 8 x 10 vial positions 
Cover for the plastic box Dimensions (37 x 29 x 18 cm)
Capillaries DIN ISO 7550 norm,  IVD-guideline 98/79 EG, ends polished
Pipette tips Pipettes for the outer circle are cut according to the lid
Filter paper circles 45 mm diameter works nicely if folded for the vials used
D(+)-Sucrose Not harmful
Ethanol absolute Highly flammable liquid and vapor
Food color (red, E124) Not stated
Food color (blue, E133) Not stated
Soap solution (CVK 8) Odor neutral soap
Digital caliper
Standard fly food (for 20 L)
Agar 160 g
Brewer's Yeast 299.33 g
Cornmeal 1,200 g
Molasses 1.6 L
Propionic acid 57.3 mL
Nipagin 30% 160 mL

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Krauth, C., Buser, J., Vogel, K. How high are the costs of eating disorders - anorexia nervosa and bulimia nervosa - for German society. Eur. J. Health Econ. 3, (4), 244-250 (2002).
  2. Cawley, J., Meyerhoefer, C. The medical costs of obesity and instrumental variables approach. J. Health Econ. 31, 219-230 (2012).
  3. PriceWaterhouse Coopers LLP. The costs of eating disorders: Social, health and economic impacts. Assessing the impact of eating disorders across the UK on behalf of BEAT. PwC. Available from: https://www.beat.co.uk/assets/000/000/302/The_costs_of_eating_disorders_Final_original.pdf (2015).
  4. Lenard, N. R., Berthoud, H. R. Central and peripheral regulation of food intake and physical activity: pathways and genes. Obesity. 16, S11-S22 (2008).
  5. Magni, P., et al. Feeding behavior in mammals including humans. Trends in Comp. Endocrinology and Neurobiology. 1163, 221-232 (2009).
  6. Morton, G. J., Meek, T. H., Schwartz, M. W. Neurobiology of food intake in health and disease. Nature Reviews Neuroscience. 15, 367-378 (2014).
  7. Bharuchka, K. N. The epicurean fly: using Drosophila melanogaster to study metabolism. Pediatr. Res. 65, (2), 132-137 (2009).
  8. Smith, W. W., Thomas, J., Liu, J., Li, T., Moran, T. H. From fat fruit fly to human obesity. Physiol. Behav. 136, 15-21 (2014).
  9. Rajan, A., Perrimon, N. Of flies and men: insights on organismal metabolism from fruit flies. BMC Biology. 11, (2013).
  10. Ja, W. W., et al. Prandiology of Drosophila and the CAFE assay. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 104, (20), 8253-8256 (2007).
  11. Dethier, V. G. The Hungry Fly: A Physiological Study of the Behavior Associated with Feeding. Harvard Univ Press. Cambridge, MA. (1976).
  12. Albin, S. D., Kaun, K. R., Knapp, J., Chung, P., Heberlein, U., Simpson, J. H. A subset of serotonergic neurons evokes hunger in adult Drosophila. Curr. Biol. 25, 2435-2440 (2015).
  13. Deshpande, S. A., et al. Quantifying Drosophila food intake: comparative analysis of current methodology. Nat. Methods. 11, (5), 535-540 (2014).
  14. Geer, B. W., Olander, R. M., Sharp, P. L. Quantification of dietary choline utilization in adult Drosophila melanogaster by radioisotope methods. J. Insect Physiol. 16, 33-43 (1970).
  15. Thompson, E. D., Reeder, B. A., Bruce, R. D. Characterization of a method for quantitating food consumption for mutation assays in Drosophila. Environ. Mol. Mutagen. 18, 14-21 (1991).
  16. Wong, R., Piper, M. D., Wertheim, B., Partridge, L. Quantification of food intake in Drosophila. PLoS One. 4, (6), e6063 (2009).
  17. Scheiner, R., Steinbach, A., Classen, G., Strudthoff, N., Scholz, H. Octopamine indirectly affects proboscis extension response habituation in Drosophila melanogaster by controlling sucrose responsiveness. J. Insect Physiol. 69, 107-117 (2014).
  18. Liu, Y., Luo, J., Carlsson, M. K., Nässel, D. R. Serotonin and insulin-like peptides modulate leucokinin-producing neurons that affect feeding and water homeostasis in Drosophila. J. Comp. Neurol. 523, 1840-1863 (2015).
  19. Ro, J., Harvanek, Z. M., Pletcher, S. D. FLIC: high-throughput, continuous analysis of feeding behaviors in Drosophila. PLoS One. 9, (6), e101107 (2014).
  20. Itskov, P. M. Automated monitoring and quantitative analysis of feeding behavior in Drosophila. Nat. Commun. 5, 4560 (2014).
  21. Qi, W., Yang, Z., Lin, Z., Park, J. Y., Suh, G. S. B., Wang, L. A quantitative feeding assay in adult Drosophila reveals rapid modulation of food ingestion by its nutritional value. Mol. Brain. 8, 87 (2015).
  22. Marx, V. Metabolism: feeding fruit flies. Nat. Methods. 12, (7), 609-612 (2015).
  23. Spieth, H. T. Courtship behavior in Drosophila. Annu. Rev. Entomol. 19, 385-405 (1974).
  24. Devineni, A. V., Heberlein, U. Preferential ethanol consumption in Drosophila models features of addiction. Curr. Biol. 19, (24), 2126-2132 (2009).
  25. Lee, K. P., et al. Lifespan and reproduction in Drosophila: New insights from nutritional geometry. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 105, (7), 2498-2503 (2008).
  26. Pohl, J. B., et al. Ethanol preference in Drosophila melanogaster is driven by its caloric value. Alcohol Clin. Exp. Res. 36, (11), 1903-1912 (2012).
  27. Vargas, M. A., Luo, N., Yamaguchi, A., Kapahi, P. A role for S6 kinase and serotonin in postmating dietary switch and balance of nutrients in D. melanogaster. Curr. Biol. 20, (11), 1006-1011 (2010).
  28. Masek, P., Scott, K. Limited taste discrimination in Drosophila. Proc. Natl. Acad. Sci. 107, (33), 14833-14838 (2010).
  29. Pool, A. H., Scott, K. Feeding regulation in Drosophila. Curr. Opin. Neurobiol. 29, 57-63 (2014).
  30. Luo, J. N., Lushchak, O. V., Goergen, P., Williams, M. J., Nässel, D. R. Drosophila insulin-producing cells are differentially modulated by serotonin and octopamine receptors and affect social behavior. Plos One. 9, (6), e99732 (2014).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics