Utarbeidelse og evaluering av * These authors contributed equally

Chemistry

Your institution must subscribe to JoVE's Chemistry section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Bilton, H. A., Ahmad, Z., Janzen, N., Czorny, S., Valliant, J. F. Preparation and Evaluation of 99mTc-labeled Tridentate Chelates for Pre-targeting Using Bioorthogonal Chemistry. J. Vis. Exp. (120), e55188, doi:10.3791/55188 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Introduction

99mTc forblir den dominerende radioisotopen benyttes i diagnostisk kjernefysisk medisin, med over 50 millioner avbildningsprosedyrer som utføres hvert år på verdensbasis 1, 2, 3. Flertallet av 99mTc midler som anvendes klinisk er perfusjon typen radiofarmasøytika. Det er et begrenset antall av aktivt målrettede forbindelser hvor 99mTc er rettet til å binde en spesifikk biomarkør gjennom ligering til en målretting konstruksjon. Opprettelsen av målrettet 99mTc radiofarmasøytika er ofte hindret ved påvirkning av 99mTc-ligand-kompleksene på evnen av den målsøkende molekyl for å binde det biomarkør av interesse, eller de isotoper halveringstid er ikke lang nok for bruk med høyere molekylvekt biomolekyler slik som antistoffer. Sistnevnte krever vanligvis flere dager før bildene er ervervet for at biomolekyl å fjerne fra ikke-target tiss verdier. Pre-målretting tilbyr en alternativ tilnærming til å overvinne disse utfordringene.

Pre-målretting kombinert med bioorthogonal kjemi har vist seg å være en effektiv måte for å utvikle nye molekylære avbildnings prober for både fluorescens og radio-avbilding 4, 5, 6, 7, 8. Den inverse elektron krav Diels-Alder (IEDDA) Reaksjonen mellom 1,2,4,5-tetrazine (Tz) og trans -cyclooctene (TCO) derivater, slik som vist i figur 1, har vist seg å være spesielt effektiv 6. Den IEDDA reaksjon med disse komponentene kan fremvise raske kinetikk i PBS (k 2 ≈ 6000 M -1 s -1) og høy selektivitet, noe som gjør den ideell for in vivo pre-målretting applikasjoner 9, 10.

e_content "> Den vanligste tilnærmingen som brukes innebærer å administrere en TCO-avledet målretting vektor og etter en tilstrekkelig forsinkelsesperioden, er en radiomerket tetrazine administreres. Radiomerkede tetraziner basert på 11 C, 18 F, 64 Cu, 89 Zr, og 111 In har vært rapporterte 11, 12, 13, 14, 15. i motsetning til dette, er det bare en rapport av en 99m Tc-merket Tz, som ble fremstilt ved anvendelse av en HYNIC typen ligand som krever bruk av ko-ligander for å forhindre proteinbinding og degradering in vivo 16. som et alternativ, rapporterer vi her syntesen av 99mTc (i) merket tetraziner ved hjelp av en familie av ligander som danner stabile komplekser med tridentate en [99mTc (CO) 3] + kjerne.


Figur 1: bioorthogonal IEDDA reaksjon mellom tetrazine og trans -cyclooctene. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Familien av ligander fremstilt inneholde tridentate chelater som varierer i polaritet og arten av bindingsgruppe mellom metall-bindende regionen og den Tz (figur 2). Målet var å identifisere en 99m Tc-Tetrazine konstruksjon som effektivt kunne lokalisere og reagere med TCO-merkede områder in vivo og raskt klart da ikke er bundet, for å gi høy target-til-ikke-target-forhold. For å teste ligander, ble en TCO-derivat av et bisfosfonat (TCO-BP) brukes 17. Vi har tidligere vist at TCO-BP lokaliserer til områder med aktiv benmetabolisme og kan reagere medradiomerket tetraziner in vivo 18. Det er et passende reagens for å teste nye tetraziner, fordi det kan fremstilles i et enkelt trinn og eksperimenter kan utføres i normale mus, hvor lokaliseringen skjer hovedsakelig i leddene (knær og skuldrene).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Dyrestudier ble godkjent av forsøksdyretiske styret ved McMaster University i samsvar med Canadian Council on Animal Care (CCAC) retningslinjer.

1. Radiomerking av Tz-tridentate ligander med 99m Tc

FORSIKTIG: Følgende prosedyrer krever bruk av radioaktive forbindelser. Arbeidet bør bare gjøres i en lisensiert laboratorium med overholdelse av sikkerhets- og avfallsforskriftene. Mikrobølgeovn reaksjoner bør utføres i en mikrobølgeovn spesielt utviklet for kjemisk syntese.

  1. Syntese av [99mTc (CO) 3 (H2O) 3] + 19, 20
    1. I en mikrobølge medisinglass, kombinere 8 mg K 2 [BH 3 CO 2], 15 mg Na 2 CO 3, 20 mg Na 2 B 4 O 7 · 10 H 2 O, og 25 mg KOCO [CH (OH)]2 COONa · 4H 2 O. Purge hetteglasset i 10 min med argongass.
    2. Tilsett 4 ml 99m-TcO 4 - (~ 1100 MBq, ~ 30 mCi) i 0,9% saltoppløsning til beholderen.
    3. Oppvarm reaksjonsblandingen i en mikrobølgeovn i 3,5 minutter ved 110 ° C etter 10 sek med omrøring for å sikre grundig blanding av reagensene.
    4. Juster pH til oppløsningen til 3,5-4 ved hjelp av ~ 400 ul av 1 M HCI. Kontroller ved hjelp av pH-papir.
  2. Radiomerking av Tetrazine ligander 1-5
    1. Løs opp 2 mg av hver ligand (forbindelser 1-5) i 250 mL MeOH 21.
    2. Tilsett 250 ul av [99mTc (CO) 3 (H2O) 3] + (~ 74 MBq, ~ 2 mCi) til hver løsning.
    3. Varm opp reaksjonsblandingen ved hjelp av en mikrobølgeovn i 20 minutter ved 60 ° C.
      MERK: Dette trinnet var identisk for alle 5 tetraziner.
    4. For forbindelser 2- 5, fordamp løsningsmidlet og re-oppløstehar de resulterende produkter i 1 ml av 1: 1 volum / volum DCM: TFA.
    5. Varm de oppløste reaksjonsprodukter (2-5) ved 60 ° C i en mikrobølgeovn i 6 min (2-4) eller 10 min (5).
    6. Etter avkjøling til romtemperatur, fordamper løsningsmidlet ved hjelp av en fordamper (36 ° C, 8 mbar, 3 min, 6000 rpm) og oppløse det tørkede forbindelsen i 1: 1 ACN: H 2 O eller 1: 1 MeOH: H2O, før HPLC-rensing.
    7. Rens det 99mTc-merkede forbindelser (1-5), inkludert separering av den merkede produkt fra umerket tetrazine ligand, ved hjelp av HPLC (C 18 revers-fase). Vanligvis bruker en elueringsgradient fra 30:70 ACN: H 2 O (begge med 0,1% TFA) til 40:60 ACN: H 2 O i løpet av 20 min (18 min), og en C-18 analytisk 4,6 x 100 mm kolonne. Bruk både UV (254 nm) og gamma gjenkjenning.
      1. Ta en liten prøve av hver merket produkt og sammenligne sin HPLC retensjonstid som i en co-injected, ikke-radioaktive, Re-merket standard (0,125 mg i 20% metanol-H 2 O). Re-merkede standard er identifisert i UV-HPLC-kurven, og vil elueres samtidig som det 99mTc-merkede forbindelse i γ-HPLC spor. Dette ko-injeksjon viser topper ved sammenlignbare tilbakeholdelsestider, noe som bekrefter identiteten av det 99mTc-merket forbindelse.
    8. Fordamp løsningsmidlet fra HPLC-fraksjoner med en fordamper (36 ° C, 8 mbar, 3 min, 6000 rpm).
    9. Formulere den rensede forbindelsen i en konsentrasjon på 7,4 kBq / ul i PBS, inneholdende 0,5% BSA og 0,01% Tween-80.
    10. For å sikre at de merkede forbindelser er stabile, utføre en in vitro stabilitetsstudie. Inkuber den formulerte forbindelsen ved 37 ° C i 1, 4 og 6 timer å injisere en liten mengde (3,7 MBq) av blandingen på HPLC på hvert tidspunkt for å vurdere stabiliteten.

2. Pre-målrettede Bio-distribusjonsstudier

    Fremstilling av dyr
    1. Ved hjelp av 7-9 uker gamle, Balb / c-mus (n = 3), administrere TCO-BP formuleres i saltvann (20 mg / kg) (5 ug / ul), via halevene-injeksjon.
    2. Plasser musen i fysisk beherskelse enhet, og identifisere venene plassert på sideflatene av halen og tørk med en spritserviett. På omtrent 2 cm fra enden av halen, sette inn en 30-gauge nål i en spiss vinkel, parallelt med venen. Sakte trykke ned stempelet for å injisere, fjerne nål og bruke rent gasbind svamp på injeksjonsstedet med et lett trykk inntil blødningen stopper.
    3. Ved 1 time etter injeksjon av TCO-BP, administrere ~ 0,74 MBq (20 pCi) av 99mTc-tetrazine formulert i 100 mL av 0,5% BSA, 0,01% Tween-80 i PBS, via halevene-injeksjon.
  1. Bio-distribusjonsstudier
    1. Ved ønsket tidspunkt (t = 6 t), bedøver musene ved bruk av 3% isofluran og 2% oksygen gassblandingen. Demonstrere en tile klype uttak på bedøvet mus å sikre at de er under kirurgisk plan av anestesi.
    2. Samle (1 ml) blod ved hjertepunktur ved hjelp av en sprøyte forbehandlet med heparin. Plasser musen på ryggen med nesen i nesen membran for videre anestesi og finn xiphoid prosessen på dyret.
      1. Sette inn en 25 G nål, litt til venstre for midtlinjen dyrets under xiphoid prosessen, ved en 20 ° vinkel. Fullt stikk nålen, og sakte trekke tilbake på stempelet for å se blod i nålen hub hvis hjerte var punktert. Litt omstille nålen mens du holder stempelet om nødvendig, å punktere hjertet. Sakte trekke blod inn i sprøyten.
    3. Avlive dyret ved cervikal dislokasjon, mens under anestesi.
    4. Plassere hvert dyr i en plastpose og bruke en dose kalibrator (99mTc innstilling) for å måle hele kroppen aktivitetsnivå.
    5. Samle følgende vev og væsker i pre-veiered telle rør: blod, bein (kne og skulder), galleblære, nyrer, lever, mage (med innhold), tynntarmen (med innhold), tykktarm og blindtarm (med innhold), skjoldbruskkjertel og luftrør, urinblæren med urin og hale.
    6. Skyll aktuelle vev (unntatt blod, galleblæren, og urinblæren) i PBS for å fjerne blod og klatt tørr før du legger vev i passende telle rør.
    7. Plasser dyr skrotten i en plastpose og måle rest hele kroppen aktivitet ved hjelp av en dose kalibrator.
    8. Veie hvert rør inneholdende en vevsprøve. Trekk opprinnelige vekt av røret for å oppnå masse av vev.
    9. Bruke en dose kalibrator (99mTc innstilling) for å måle mengden av aktivitet i en prøve (100 ul) ved injeksjonstidspunktet for hver mus.
      MERK: Denne prøven er lik injeksjonsvolum, og dermed gi aktivitet telleverdien ved tidspunktet for injeksjonen.
    10. På tidspunktet for vev måling, enliquot 5 ul av testprøven brukt tidligere. Bruke en multi-detektor gammateller (99mTc innstilling) og teller for å oppnå telle per minutt (CPM) for 5 ul testprøven.
    11. Bruk de to verdiene oppnådd i 2.2.9 og 2.2.10 for å beregne aktiviteten og CPM-forbindelse ved hjelp av ligning 1 for å oppnå en konverteringsfaktor (CPM pCi -1).
      (1) ligning 1
    12. Bruke en gammateller for å måle mengden av radioaktivitet i hvert vev eller fluidprøve.
    13. Bruke ligning 1 for å beregne mengden av aktivitet i hvert vev eller væske ved måletidspunktet i forhold til den totale injiserte dose. Denne verdien blir så normalisert ved organvekt og rapportert som prosent injisert dose pr gram (dvs.% ID / g) av vev.
    14. Følg trinn 2.1.2 til 2.2.13 for å gjennomføre en negativ kontroll eksperiment ved hjelp av 99m Tc-merket tetrazine ligander i absence av TCO-BP. Offer mus (n = 3) på 0,5, 1, 4 og 6 timer etter injeksjonen, og oppnå vev eller væske som beskrevet ovenfor.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Ligandene ble syntetisert ved hjelp av forskjellige linkere og chelatorer via en enkel reduktiv aminering strategi (figur 2), etterfulgt av kobling av produktet til en kommersielt tilgjengelig tetrazine 22, 23. Radiomerking ble utført ved anvendelse av den samme metode for alle forbindelser og var meget reproduserbar. Prosessen ble optimalisert ved å variere pH, mengden av ligand, reaksjonstid og temperatur, hvoretter den 99m Tc-radiomerkede forbindelser 1-5 ble oppnådd ved moderat til høy radiokjemisk utbytte: 83% (1), 45% (2), 31% (3), 42% (4), og 54% (5). Etter HPLC-rensing fra uomsatt ligand og fordampning ved hjelp av en fordamper, ble forbindelsene formulert i PBS inneholdende 0,5% BSA og 0,01% Tween80 før injeksjon. Den spesifikke aktivitet av p urified 99m Tc-merket tetrazine var ~ 1,48 MBq / mikrogram. Studier ble utført for å vurdere stabiliteten til 99m Tc-merkede ligander tetrazine før in vivo studier. Stabiliteten ble overvåket ved hjelp av HPLC på 1, 4 og 6 timer uten noen synlig nedbrytning i løpet av 6 timer, (R t = 14 min), som vist i figur 3 for forbindelse 4 som et eksempel.

Figur 2
Figur 2: Forbindelser 1-5 ble fremstilt ved hjelp av forskjellige linkere (Y) og chelatorer (X) som vist (nederst). Alle forbindelser ble radioaktivt merket med [99mTc (CO) 3 (H2O) 3] + anvendelse av de samme reaksjonsbetingelser (øverst), med unntak av en, som ikke krever at trinn (ii).

</ Html"Figur 3" src = "/ files / ftp_upload / 55188 / 55188fig3.jpg" />
Figur 3: Stabilitet testresultater ved bruk av forbindelse 4. γ-HPLC spor av 4-inkubert i PBS ved 37 ° C i 1, 4 og 6 timer.

For in vivo-testing, ble friske Balb / c-mus anvendt. Kort beskrevet for hver forbindelse, grupper av mus (n = 3) ble injisert med TCO-BP (100 ul, 20 mg / kg), som ble etterfulgt av administrering av det 99mTc-merkede forbindelser 1 time senere. Ved 6 timer etter injeksjon av 99mTc-komplekser, ble dyrene avlivet, og aktivitetskonsentrasjoner i forskjellige vev og væsker bestemt. De resulterende data er rapportert som prosent injisert dose pr gram vev (% ID / g) og er vist i figur 4. Representative forhold av ben (kne eller skulder) til blod for hver av de fem 99mTc-merkede TZ-forbindelser er vist i tabell 1. Disse dataene indikerer cltidlig som forbindelse 3 gitt optimal målretting kombinert med klaring fra blodet, og at det var betydelig variasjon mellom 99m Tc-merkede forbindelser i forhold til off-target vev lokalisering. En negativ kontroll undersøkelse ved hjelp CD1 mus (n = 3) ble utført, hvor mus ble injisert med 99mTc-tetrazine ligander i fravær av TCO-BP. Musene ble avlivet ved 0,5, 1, 4 og 6 timer, og% ID / g ble bestemt for alle vev og væsker. For alle testede forbindelser, hvor data for forbindelse 2 er presentert i figur 5, var det ingen signifikant opptak sett i ben eller andre vev (hjerte, lunger, milt, skjelettmuskel) som ikke er vist i figur 4.

Figur 4
Figur 4. Bio-distribusjons resultater for 99m Tc-merket tetrazine derivater 1-5 (barer indicated). Dataene som vises ble oppnådd fra utvalgte vev og væsker tatt 6 timer etter injeksjon av de radiomerkede derivater, og aktiviteten ble normalisert til vev eller væske i vekt, som gjennomsnittlige prosentvise injiserte dose per gram vev eller væske (% ID / g) ± SEM. Bone mål er indikert med •. MERK: Alle gjenværende vev som ikke er vist hadde gjennomsnittlig% ID / g som var mindre enn 1%. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 5
Figur 5. Bio-distribusjons resultater for kontroll studie med 99m Tc-merket tetrazine (2) uten forutgående injeksjon av TCO-BP. Dataene som vises ble oppnådd fra utvalgte vev og fluider tatt fra 3 mus ved 0,5, 1, 4 og 6 timer etter injeksjon av 2. Aktivitet ble normalisert til vev ellerfluidvekt, som gjennomsnittlige prosentvise injiserte dose per gram vev eller væske (% ID / g) ± SEM. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

forbindelse
Forhold 1 2 3 4 5
Skulder: Blood 3,5: 1 3,5: 1 21: 1 7,8: 1 0,8: 1
Knee: Blood 6,9: 1 5,6: 1 26: 1 12: 1 1,3: 1

Tabell 1. benvev: blodforhold bestemt fra bio-distribusjonsstudier.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

En samling av tetrazine bundet tridentate chelater av ulik polaritet var forberedt, og nytten av sine 99m Tc komplekser i IEDDA reaksjon med en TCO derivat in vivo ble vurdert. En effektiv og reproduserbar 99mTc merking metode ble utviklet for fem tetrazine-chelatene, hvor ligandkonsentrasjonen var 10 -3 M. markeringstrinn ble etterfulgt av avbeskyttelse av t- butyl-grupper (for forbindelsene 2-5). Den høye konsentrasjonen av ligand ble anvendt for å forbedre den radiokjemiske utbyttet og redusere reaksjonstider som minimaliserte nedbrytning av tetrazine 21. Produktet ble isolert og separert fra umerket ligand og eventuelle radiokjemiske urenheter ved HPLC, noe som resulterer i radiokjemiske utbytter som varierer 31-83%, med alle har> 99% radiokjemisk renhet og en høy spesifikk aktivitet på ~ 1,48 MBq / ug. Alle forbindelser ble vist å være stabil i PBS inneholdende 0.5% BSA og 0,01% Tween80 i opp til 6 timer, (bilde 3).

Bisfosfonater forbindelser, som TCO-BP, lokalisere til regioner med aktiv beinmetabolisme eller skade, som inkluderer kne og skulder ledd i mus. TCO-BP gir derfor en enkel måte å vurdere effektiviteten av nye radiomerkede tetraziner å levere isotoper in vivo. Evaluering av bio-distribusjon av alle fem 99m Tc-tetraziner viste opptak i kne og skulder ledd seks timer etter injeksjon, demonstrerer vellykket pre-målretting for å bone in vivo (figur 4). Tidligere studier bekreftet at radiomerket TCO-BP akkumuleres på benet 18, mens det 99mTc-tetrazine konstruksjon (2) gis alene ikke (figur 5). Dette gjør det mulig å konkludere med at beinopptaket var på grunn av IEDDA reaksjonen.

De mer lipofile konstruksjonene 1 og 2 (1); 7,6 ± 2,7 (2)) og skulderen (4,6 ± 1,4 (1); 4,8 ± 1,9 (2)). Høye radioaktivitetskonsentrasjon ble også observert i galleblæren, lever og tarmer, som er i overensstemmelse med fordelingen av det lipofile 99m Tc-tetrazine forbindelse 2 i fravær av TCO-BP (figur 5). Andre ikke-mål vev og organer som skjelettmuskulatur og milt viste ingen signifikant opptak (<1%) ved bio-fordelingsstudier ble utført på de 99mTc-tetraziner i fravær av den TCO-BP (figur 5) , slik at disse organene ble ikke tatt for pre-targeting eksperimenter. I tillegg bio-distribusjons eksperimenter med 99m Tc-tetraziner alene avslørte god klaring fra ikke-målet vev på seks timer etter injeksjon. Følgelig, this tidspunkt, noe som er innenfor en halveringstiden til isotopen, ble valgt som tidspunkt for å sammenligne de forskjellige radiomerkede tetrazine ligander.

Den mer polare 99m Tc-tetrazine forbindelse 3 som bærer en PEG-linker 5 viste meget høy kne og skulder opptak (henholdsvis 16,2 ± 4,8 og 20,7 ± 4,9). Det var også lavere aktivitet observert i leveren og tarmene. Den tilsvarende PEG-derivat 10 viste også binding til benet og redusert opptak i leveren sammenlignet med forbindelsene 1 og 2. Den mest polare avledede 5 viste nedre ben binding enn alle andre konstruksjoner som er sannsynlig på grunn av dets hurtige clearance.

Den høye beinopptaket og ben: blodforhold (tabell 1) spesielt for forbindelser 3 og 4 viser at pre-målretting og den IEDDA reaksjonen, kan anvendes for å locMurphy 99mTc-merkede forbindelser in vivo. Metodene som er rapportert her kan brukes til å evaluere en hvilken som helst radiomerket tetrazine inkludert neste generasjon av Tc (I) -tetrazine ligander. Det bør bemerkes at for klassen av ligander som ble brukt i denne studien, er strukturer kan lett varieres ved å endre naturen til donorgrupper og forbindelsesledd mellom metallkompleks og den tetrazine, uten i betydelig grad å endre den ligand syntesemetode 21. Når en leder molekyl er identifisert, en instant kit metode, som trolig vil omfatte faste fase rensemetoder, kan utvikles for å støtte klinisk oversettelse.

De Tc (I) komplekser rapportert her skape mulighet for å forberede nye 99m Tc radiofarmaka ved hjelp av et bredt spekter av forskjellige TCO-avledet rettet mot molekyler, inkludert antistoffer. Antistoffer, til tross for sine gode målretting egenskaper før etableringen av technetium-merket tetraziner, ville ikke typically brukes sammen med 99mTc på grunn av deres langsomme clearance (dager), som er mye lengre enn halveringstiden til isotopen (~ 6 timer). En ytterligere anvendelse av kjemien rapporteres her, er at den samme klassen av ligander kan fremstilles med beta-emitterende radionuklider 186 Re og 188 Re. De isostrukturelle Re (I) analoger av de Tc (I) agenter når de kombineres med den tumor som søker egenskaper av TCO-BP kan anvendes til behandling av benmetastaser.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Argon gas Alphagaz --- ---
Na2CO3 EMD Millipore 106395 ---
Na2B4O7·10H2O Anachemia S9640 ---
KNaC4H4O6·4H2O Anachemia 217255 ---
Technelite 99mTc generator Lantheus medical imaging --- Source of 99mTcO4-
0.9% Saline Lantheus medical imaging --- To elute generator
1 M HCl Lab Chem --- ---
MeOH Caledon --- ---
ACN Caledon --- HPLC grade
Millipore H2O Thermo Fisher Scientific Barnstead Nanopure ---
DCM Caledon --- ---
TFA Caledon --- ---
PBS Thermo Fisher Scientific 10010023 pH 7.4 1x
BSA Sigma Aldrich A7906 ---
Tween80 Sigma Aldrich P8047 ---
Isoflurane CDMV 108737 Supplier: Fresenius Kabi Animal Health
HPLC Waters 1525 Binary Pump, 2998 Photodiodde Array Detector, E-SAT/IN, Bioscan Flowcount PMT detector (item # 15590) ---
HPLC column for analysis and purification of compounds 2-4 Phenomenex 00G-4435-E0 Gemini® 5 µm C18 110 Å, LC Column 250 x 4.6 mm
HPLC column for analysis and purification of compounds 1 and 5 Waters  186003115 XBridge BEH C18 Column, 130 Å, 5 µm, 4.6 mm x 100 mm
Microwave Reactor  Biotage  Initiator 8 ---
Biotage V10 Evaporator Biotage  Serial # V1041 ---
Dose calibrator Capintec, Inc.  CRC-25R ---
Gamma counter Perkin Elmer Wizard 1470 Automatic Gamma Counter ---
Animal room scale  Mettler Toledo XP105 Delta Range ---
Microwave vials  Biotage  355629 0.5-2 mL 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Jurisson, S. S., Lydon, J. D. Potential Technetium Small Molecule Radiopharmaceuticals. Chem. Rev. 99, (9), 2205-2218 (1999).
  2. Kluba, C. A., Mindt, T. L. Click-to-chelate: Development of Technetium and Rhenium-Tricarbonyl Labeled Radiopharmaceuticals. Molecules. 18, 3206-3226 (2013).
  3. Amato, I. Nuclear Medicines Conundrum. Chem. Eng. News. 87, (36), 58-70 (2009).
  4. Hnatowich, D. J., Virzi, F., Rusckowski, M. Investigations of Avidin and Biotin for Imaging Applications. J. Nucl. Med. 28, (8), 1294-1302 (1987).
  5. Blackman, M. L., Royzen, M., Fox, J. M. Tetrazine Ligation: Fast Bioconjugation Based on Inverse-Electron-Demand Diels-Alder Reactivity. J. Am. Chem. Soc. 130, (41), 13518-13519 (2008).
  6. Devaraj, N. K., Weissleder, R., Hilderbrand, S. A. Tetrazine-Based Cycloadditions: Application to Pretargeted Live Cell Imaging. Bioconjugate Chem. 19, (12), 2297-2299 (2008).
  7. Rossin, R., et al. In Vivo Chemistry for Pretargeted Tumor Imaging in Live Mice. Angew. Chem., Int. Ed. 49, (19), 3375-3378 (2010).
  8. Zeglis, B. M., et al. Optimization of a Pretargeted Strategy for the PET Imaging of Colorectal Carcinoma via the Modulation of Radioligand Pharmacokinetics. Mol. Pharmaceutics. 12, (10), 3575-3587 (2015).
  9. Rossin, R., et al. Highly Reactive trans-Cyclooctene Tags with Improved Stability for Diels-Alder Chemistry in Living Systems. Bioconjugate Chem. 24, (7), 1210-1217 (2013).
  10. Rossin, R., Robillard, M. S. Pretargeted Imaging Using Bioorthogonal Chemistry in Mice. Curr. Opin. Chem. Biol. 21, 161-169 (2014).
  11. Denk, C., et al. Development of a 18F-Labeled Tetrazine with Favorable Pharmacokinetics for Bioorthogonal PET Imaging. Angew. Chem., Int. Ed. 53, (36), 9655-9659 (2014).
  12. Herth, M. M., Andersen, V. L., Lehel, S., Madsen, J., Knudsen, G. M., Kristensen, J. L. Development of a 11C-labeled Tetrazine for Rapid Tetrazine-Trans-Cyclooctene Ligation. Chem. Commun. 49, (36), 3805-3807 (2013).
  13. Li, Z., et al. Tetrazine-Trans-Cyclooctene Ligation for the Rapid Construction of 18F Labeled Probes. Chem. Commun. 46, (42), 8043 (2010).
  14. Nichols, B., Qin, Z., Yang, J., Vera, D. R., Devaraj, N. K. 68Ga Chelating Bioorthogonal Tetrazine Polymers for the Multistep Labeling of Cancer Biomarkers. Chem. Commun. 50, (40), 5215-5217 (2014).
  15. Zeglis, B. M., et al. A Pretargeted PET Imaging Strategy Based on Bioorthogonal Diels-Alder Click Chemistry. J. Nucl. Med. 54, (8), 1389-1396 (2013).
  16. García, M. F., et al. 99mTc-Bioorthogonal Click Chemistry Reagent for In Vivo Pretargeted Imaging. Bioorg. Med. Chem. 24, (6), 1209-1215 (2016).
  17. Russell, R. G. G. Bisphosphonates: The First 40 Years. Bone. 49, (1), 2-19 (2011).
  18. Yazdani, A., et al. A Bone-Seeking Trans-Cyclooctene for Pretargeting and Bioorthogonal Chemistry: A Proof of Concept Study Using 99mTc and 177Lu-Labeled Tetrazines. J. Med. Chem. (2016).
  19. Alberto, R., et al. A Novel Organometallic Aqua Complex of Technetium for the Labeling of Biomolecules: Synthesis of [99mTc(OH2)3(CO)3]+ from [99mTcO4]- in Aqueous Solution and its Reaction with a Bifunctional Ligand. J. Am. Chem. Soc. 120, (31), 7987-7988 (1998).
  20. Alberto, R., Ortner, K., Wheatley, N., Schibli, R., Schubiger, A. P. Synthesis and properties of boranocarbonate: A convenient in situ CO source for the aqueous preparation of [99mTc(OH2)3(CO)3. J. Am. Chem. Soc. 123, (13), 3135-3136 (2001).
  21. Lu, G., et al. Synthesis and SAR of 99mTc/Re-labeled Small Molecule Prostate Specific Membrane Antigen Inhibitors with Novel Polar Chelates. Bioorg. Med. Chem. Lett. 23, (5), 1557-1563 (2013).
  22. Maresca, K. P., et al. Small Molecule Inhibitors of PSMA Incorporating Technetium-99m for Imaging Prostate Cancer: Effects of Chelate Design on Pharmacokinetics. Inorg. Chim. Acta. 389, 168-175 (2012).
  23. Bartholomä, M. D., et al. Insight into the Mode of Action of Re(CO)3 Thymidine Complexes. ChemMedChem. 5, (9), 1513-1529 (2010).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics