In Vivo Отслеживание развития отек и микрососудистая патология в модели экспериментальной церебральной малярии с использованием магнитно-резонансной томографии

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Hoffmann, A., Helluy, X., Fischer, M., Mueller, A. K., Heiland, S., Pham, M., Bendszus, M., Pfeil, J. In Vivo Tracking of Edema Development and Microvascular Pathology in a Model of Experimental Cerebral Malaria Using Magnetic Resonance Imaging. J. Vis. Exp. (124), e55334, doi:10.3791/55334 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Introduction

Малярия является серьезной проблемой глобального здравоохранения. 1 Тяжелая малярия характеризуется, в частности, вовлечением головного мозга и часто является плохим прогностическим фактором. Участие в мозге распространено у детей в возрасте до пяти лет в районах с высокой передачей малярии и является основной причиной смерти от малярии в этой возрастной группе. 1 Хотя агрессивное лечение может быть жизненно важным, выявление церебральной малярии, особенно на ранних стадиях, может быть затруднено. Патологические процессы, связанные с церебральной малярией, включают микрососудистые нарушения и отек мозга, что может привести к серьезному отеку мозга. В этой статье мы представляем протокол магнитно-резонансной томографии (МРТ), который позволяет полностью мозговой визуализации in vivo экспериментальной церебральной малярии (ECM). В этом заболевании широко использовались методы визуализации с высоким разрешением с высоким разрешением, хотя мало что известно о том, как ECM инициирует в центральнойНервной системы или какие конкретные механизмы приводят к заболеванию. МРТ in vivo , охватывающая весь мозг, представляет собой важный исследовательский инструмент для лучшего понимания патологии ECM. МРТ способна оценить глобальную головную мозговую опухоль, которая в последнее время признана важным предсказателем смерти не только в ECM, но также и при церебральной малярии. 2 , 3 Тяжелая опухоль головного мозга возникает при смертельных заболеваниях и представляет собой одну из нескольких патологических особенностей между моделями ECM и болезнями человека, заболеванием, которое характеризуется как воспалительными, так и микрососудистыми изменениями. 4

ECM может индуцироваться у мышей CBA или C57BL путем заражения летальным плазмодием berghei ANKA. 5 Начало ECM обычно происходит между 6 и 10 днями после инфицирования и приводит к фитингу, атаксии, респираторному дистрессу и коме, что приводит к рэпуId смерть. 4 Быстрая шкала комы и поведения (RMCBS) - это полезный показатель для оценки клинических симптомов ECM. Он состоит из 10 параметров, каждый из которых оценивается от 0 до 2, с максимально возможной оценкой 20. 6 Недавно мы показали хорошее согласие между степенью оценки RMCBS у мышей ECM и патологическими изменениями, продемонстрированными с помощью МРТ. 7 В этом протоколе мы описываем индукцию ECM у мышей и визуализацию in vivo магнитно-резонансной томографии мышей с ECM.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Все эксперименты на животных, описанные в этой статье, проводились в соответствии с стандартными рекомендациями Федерации лабораторных ассоциаций животных (FELASA) категории B и стандартами общеорганизационного лабораторного животноводства (GV-SOLAS) и были одобрены местными властями Германии в Карлсруэ (Regierungspräsidium Karlsruhe , Германия). Обратите внимание, что уровень биозависимости 2 относится к работе москита и Plasmodium berghei ANKA sporozoite.

1. Инфекция

  1. Инфекция мошек Anopheles stephensi с помощью Plasmodium berghei ANKA путем кормления их в течение 15 мин на гаметоцитемической мыши. Держите инфицированных комаров при влажности 80% и 21 ° C.
  2. Соберите самцов комаров из их клетки через 17-22 дня после еды. Поместите их на лед, чтобы обезболивать их.
  3. Используя щипцы, разместите от трех до четырех москитов на стеклянном слайде, покрытом каплей холодной среды RPMI. Поместите слайд под микроскоп.
  4. <Li> Используя щипцы, аккуратно растяните комара между головой и телом. Выделите слюнную железу с помощью шприца и иглы. Повторите эту процедуру с оставшимися комарами.
  5. Соберите слюнные железы со стекла, сосав их стеклянной пипеткой и соберите их в 1,5 мл центрифужной пробирке.
    ПРИМЕЧАНИЕ. В зависимости от уровня инфицирования, обычно от 8 000 до 15 000 инфекционных спорозоитов могут быть получены в слюнной железе.
  6. В течение приблизительно 3 минут разбейте изолированные слюнные железы в пробирке центрифуги маленькой пластиковой палкой для выделения спорозоитов из ткани слюнной железы.
  7. Центрифуга в течение 3 мин при 1000 мкг и 4 ° С для очистки спорозоитов от оставшейся ткани.
  8. Внесите супернатант, который содержит спорозоиты (SPZ), в новую пробирку для центрифуги и подсчитайте очищенные спорозоиты в гемоцитометре Нойбауэра.
  9. Отрегулируйте концентрацию очищенных спорозоитов до 10 000 / мл, добавив phЗамасленный залив.
  10. Вводят в общей сложности 1000 спорозоитов (0,1 мл) в хвостовые вены инбредных мышей C57BL / 6 для инициирования инфекции. Чтобы облегчить инъекции, поместите мышей C57BL / 6 в ограничитель и поместите хвосты в теплую (приблизительно 37 ° C) воду, чтобы помочь визуализации хвостовых вен;
    ПРИМЕЧАНИЕ. Сама инъекция - это короткая процедура, которая может быть выполнена в течение нескольких секунд.
  11. Один раз в день проверяйте паразитемию крови на мазках крови с 3-го дня после заражения SPZ.
    ПРИМЕЧАНИЕ. Мониторинг паразитемии был ранее визуализирован в статье JoVE Mueller et al. 8
  12. Оцените мышей один раз в день с помощью шкалы быстрого кома и шкалы поведения (RMCBS), начиная с 5-го дня после инъекции спорозоита.
    ПРИМЕЧАНИЕ. Подробное описание этой процедуры, включая демонстрацию видео, было опубликовано Caroll et al. 6
  13. оценитьМышей с визуализацией МРТ в соответствии с оценкой RMCBS и вопросом исследования, подлежащим рассмотрению. 6

2. Настройка магнитно-резонансной томографии

  1. Выполните МРТ на маленьком сканирующем сканере 9,4 т с использованием объемного резонатора для радиочастотной передачи и катушки приемника поверхности с 4-канальной фазированной решеткой. Включите водяную баню с контролируемой температурой до 42 ° C, чтобы поддерживать температуру тела мыши.
  2. Вызывают анестезию в камере с использованием 2% изофлурана и сжатого воздуха, пока мышь больше не реагирует на пинч пальца. Поддерживайте анестезию на уровне 1-1,5%.
  3. Поместите катетер хвостовой вены в хвостовую вену мыши. Расположите мышь для МРТ, поставив ее склонным и с хрустом спиной на животной кровати, оборудованной головной дверью и зубчатым стержнем, чтобы свести к минимуму движение головы. Старайтесь не выпрямлять шейный позвоночник мыши.
  4. Подключите систему инъекции контрастного вещества к катетеру хвостовой вены, Используйте специальную инъекционную систему, заполненную шприцем Gd-DTPA (0,3 ммоль / кг), или используйте полиэтиленовые трубки, подключенные к шприцу Gd-DTPA (0,3 ммоль / кг).
  5. Нанести глазную мазь декспантенолом на оба глаза. Поместите обмотку головки приемника с 4-канальной фазированной решеткой на головку мыши. Поместите дыхательную подушку на тыльную сторону мыши и подключите ее к устройству мониторинга дыхания.

3. Протокол обработки изображений

ПРИМЕЧАНИЕ. Выберите последовательности изображений из приведенного ниже протокола в соответствии с вопросами исследования, которые необходимо решить. Все перечисленные параметры действительны для программного обеспечения MRI, но могут потребоваться корректировка при использовании других программ.

  1. Начните с выполнения локализующего сканирования, чтобы убедиться, что мозг мыши находится в изоцентре магнита.
  2. Чтобы качественно оценить вазогенный отек, используйте 3D-взвешенное изображение с Т2, выбирая многосекундную RARE-последовательность.
    1. Введите следующий paПомехами в программное обеспечение MRI: время повторения = 2000 мс, время эха = 22 мс, изотропное разрешение = 0,1 мм, поле зрения = 20 x 10 x 12 мм 3 ; Матрица = 200 x 100 x 120, угол поворота = 90-180 °; (Спин-эхо) и редкий фактор = 8. Запустите последовательность и подождите 10 мин 48 с, чтобы получить необработанные изображения.
  3. Чтобы количественно оценить вазогенный отек, произведите релаксометрию Т2, выбирая многослойную множественную спин-эхо-последовательность.
    1. Используйте следующие параметры: время повторения = 3,100 мс, время эха = 8-136 мс с шагом 8 мс, количество срезов = 17, толщина среза = 0,7 мм, разрешение по плоскости = 0,116 мм x 0,116 мм, поле зрения 20 X 20 мм 2 , матрица = 172 x 172, угол поворота = 90-180 градусов; (Спин-эхо). Запустите последовательность и подождите 8 мин 53 с, чтобы получить необработанные изображения.
  4. Чтобы количественно оценить как вазогенный отек, так и цитотоксический отек, выполните диффузионно-взвешенную визуализацию / коэффициент кажущейся диффузии(АЦП) путем выбора диффузионной последовательности ЭПИ спин-эха.
    1. Используйте следующие параметры: время повторения = 3.400 мс, эхо-время = 20 мс, толщина среза = 0,7 мм, количество срезов = 17, количество сенсибилизированных направлений диффузии = 30, значение b = 1,500 с / мм 2 , δ = 3 мс , Δ = 9 мс, частичный коэффициент ускорения Фурье = 1,51, поле зрения = 12 x 15 мм 2 , матрица = 96 x 128, разрешение в плоскости = 0,125 мм x 0,117 мм, угол поворота = 90-180 градусов и Количество насыщенных срезов (сагиттал) = 1. Запустите последовательность и подождите 7 минут 56 с, пока не будут получены необработанные изображения.
  5. Чтобы оценить микрогеморрагии, используйте 3D T2 * -среднюю визуализацию. Выберите FLASH-последовательность с компенсацией потока.
    1. Введите следующие параметры в программное обеспечение MRI: время повторения = 2000 мс, время эха = 22 мс, изотропное разрешение 0,08 мм, поле зрения = 32 x 15 x 8 мм 3 , размер матрицы = 400 x 188 x 100 и fУгол губ = 12 градусов. Запустите последовательность и подождите 15 мин 40 с, чтобы получить необработанные изображения.
  6. Чтобы оценить артериальную проходимость, используйте время ангиографии полета, выбрав трехмерную последовательность FLASH.
    1. Используйте следующие параметры в программном обеспечении MRI: время повторения = 16 мс, время эха = 3,5 мс, толщина среза = 0,07 мм, разрешение в плоскости = 0,104 x 0,104 мм, поле зрения = 20 x 20 x 10 мм 3 , матрица = 192 x 192 x 142, угол поворота = 15 градусов. Запустите последовательность и подождите 7 минут 16 с, пока изображения не будут получены.
  7. Чтобы оценить нарушение гематоэнцефалического барьера, используйте 3D T1-взвешенную визуализацию до и после инъекции контрастного агента 0,3 ммоль / кг. Выберите радиочастотную вспышку FLASH с глобальным радиочастотным возбуждением.
    1. Используйте следующие параметры последовательности в программном обеспечении MRI: время повторения = 5 мс, время эха = 1,9 мс, изотропное разрешение = 0,156 мм, поле зрения 20 х 18,7X 18,7 мм 3 , матрица 128 x 120 x 120 и угол поворота = 8.5 ° ;. Начните последовательность и подождите 1 мин 14 секунд, пока изображения не будут получены.

4. Обработка и анализ изображений

  1. Чтобы проанализировать нарушение гематоэнцефалического барьера, вычитайте трехмерные не расширенные изображения, взвешенные по T1, из расширенных изображений с T1-взвешиванием с помощью арифметического инструмента или инструмента калькулятора изображения в ImageJ. Оцените вычитание изображений для увеличения сигнала, что соответствует разрушению гематоэнцефалического барьера. 9
  2. Чтобы проанализировать объем мозга, используйте собственные 3D-массивы T1 или 3D T2. Выделите мозг из обонятельной луковицы в мозжечок, используя редактор сегментации. 10
  3. Вазогенный отек
    1. Обработайте данные релаксометрии T2 с помощью программного обеспечения MRI или используйте нелинейную процедуру подбора наименьших квадратов. 11 Данные с диффузионно-взвешенной технологией для получения карт АЦП с использованием МРТTware или FDT (см. Таблицу материалов ).
    2. Поместите области интереса вручную в разные анатомические области.
      ПРИМЕЧАНИЕ. Автоматическое размещение областей, представляющих интерес, может регистрироваться неправильно из-за значительного отека мозга. Таким образом получают значения Т2 и АЦП выбранных анатомических областей.
  4. Чтобы проанализировать объем микрогеморрагии, выделите микрогеморрагии, которые выглядят как яйцевидные, темные фокусы на T2 * -уровневых наборах данных, используя редактор сегментации.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

У мышей C57BL / 6 первые клинические симптомы ECM наблюдаются между 6 и 10 днями после заражения спорозоитами P. berghei ANKA . ECM развивается у 60 - 80% инфицированных мышей и быстро прогрессирует до комы и смерти в течение 24-48 часов. Напротив, мыши, которые не развивают ECM, умирают после второй недели после инфицирования от тяжелой анемии из-за гиперпаразитемии. 12

В МРТ-визуализации самые ранние признаки ECM видны в обонятельной луковице, которая принадлежит обонятельной системе мыши и расположена в ростральной части мозга. 7 , 13 Увеличение разрыва гематоэнцефалического барьера (наблюдаемое на изображениях с увеличенным T1-коэффициентом контраста) и увеличение жидкости (увеличение сигнала T2 на T2-взвешенных изображениях, релаксометрия T2 и диффузионно-взвешенное изображение) указывают на ранний вазогенный отекВ обонятельной луковице, которая уже присутствует в легкой болезни (показатель RMCBS 20-16), и начинает распространяться по мере увеличения тяжести заболевания. Относительные изображения сигналов T1 помогают обнаружить тонкое нарушение гематоэнцефалического барьера ( рисунок 1 ). Нарушение гематоэнцефалического барьера и вазогенный отек развиваются определенным образом. Эти патологические изменения распространяются вдоль рострального миграционного потока, мигрирующего маршрута для нейробластов, к стволу головного мозга, который достигается при очень тяжелом заболевании (RMCBS болит 9-0). На картах Т2 тяжесть вазогенного отека можно количественно оценить, привлекая интересные области в конкретные анатомические области, как показано на рисунке 2 . Для каждой области может быть получено время релаксации T2, которое увеличивается с увеличением отека. Наряду с вазогенным отеком и нарушением гематоэнцефалического барьера опухоль головного мозга начинается с серьезности ECM. Объем мозга, указывающий на отек, начинает значительно увеличиваться у умеренно больных мышей как комПо сравнению с исходным уровнем и дальнейшим увеличением количества сильно больных мышей ( рис. 3 ).

Микрососудистая патология, о чем свидетельствуют микрогеморрагии и увеличение контрастности восприимчивости сосудов (что соответствует медленному течению), возникает после первых признаков нарушения гематоэнцефалического барьера и вазоодного отека и может быть визуализировано с помощью T2 * -звезного изображения. Микроосаждения преимущественно встречаются в обонятельной луковице ( рис. 4 ). Количество микрогеморрагов увеличивается с прогрессирующим заболеванием. При прогрессирующей болезни микрогеморраги также проявляются в коре, базальных ганглиях, мозжечке, белом веществе и стволе мозга.

Снижение артериальной проходимости наблюдается при ангиографии во время полета, что является признаком макроваскулярного нарушения параллельно с микрососудистыми изменениями. Церебральный инфаркт не является ключевым нахождением в ECM. Однако при очень тяжелом заболевании основные областиУменьшение АЦП можно выявить, указав церебральные инфаркты.

Рисунок 1
Рисунок 1: Нарушение барьера мозгового мозга. ( A ) Репрезентативное изображение коронального 3D T1-взвешенного изображения. Увеличение сигнала T1 наблюдается в центральной области обонятельной луковицы. ( B ) На соответствующем изображении сигнала T1 (предварительное контрастное изображение T1, вычитаемое из постконтрастного изображения T1), экстравазация контрастного вещества легче очерчивать. Экстравазатор контрастного вещества виден в лобных областях коры (белые стрелки). Нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

фигура 2
Рисунок 2: Релакс T2ometry. Образцы карт T2 на разных высотах от одной сильно больной мыши с оценкой RMCBS 5 ( A ) и базовым сканированием ( B ) отображаются в цветовой гамме, в шкале серого и в сером цвете с ROI в виде цветных накладок. Синий = RMS, зеленый = кора, бирюза = внешняя капсула, желтый = базальные ганглии, светло-синий = DMS, оранжевый = таламус и красный = мозговой штурм. Нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 3
Рисунок 3: Измерения объема мозга. Объем мозга значительно увеличивается у умеренно больных мышей (RMCBS 15-10). Показаны репрезентативные значения 10 мышей. Данные представлены как среднее стандартное отклонение. Для анализа различий в бюстгальтере был использован t-критерий для парного студентаПри набухании между группами. У умеренно / сильно больных мышей объем мозга был значительно увеличен по сравнению с исходным уровнем (p = 0,021 / 0,001). Нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

Рисунок 4
Рисунок 4: Микрогеморраги. Показаны T2-взвешенные изображения мыши перед наступлением инфекции на стадии крови ( A ) и на 8-й день после заражения с помощью показателя RMCBS 14 ( B и C ). На первом изображении никакие микрогеморремы не видны ( А ), а во втором и третьем изображениях видны несколько микрогеморрагов с преобладанием обонятельной луковицы (B: плоское корональное изображение, C: 3D-проекция с сегментированными микрогеморрагиями).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

В этой статье мы описываем МРТ-протокол всего мозга для определения изменений в экспериментальной церебральной малярии. Мы считаем, что МРТ до сих пор недостаточно используется в исследованиях малярии и надеемся, что наши протоколы помогут другим исследователям. Мы хотели бы описать некоторые дополнительные моменты, которые могут быть полезны.

Если выводятся тяжелые больные мыши, то позиционирование имеет решающее значение. Из-за повышенного внутричерепного давления мыши подвержены смерти, и поэтому шейный отдел позвоночника не должен растягиваться. Анестезию следует также свести к минимуму. Если визуализировать мышей с легкой болезнью, лучший момент времени для МРТ составляет 12-24 ч до ожидаемого начала первых клинических симптомов. Мягкий вазогенный отек в обонятельной луковице наблюдается у мышей, у которых нет клинических признаков ECM (оценка RMCBS 20).

Длина самого протокола MRI может быть адаптирована в соответствии с конкретным вопросом исследования. Минимальный протоCol должен включать взвешенную по T2 последовательность или релаксометрию T2 и последовательность T2 * с взвешенным весом, чтобы судить о наличии вазоодного отека и микрохромной нагрузки / микрососудистой недостаточности. Чтобы получить изображения хорошего качества, артефакты движения должны быть сведены к минимуму. Движение будет уменьшено благодаря правильному расположению мыши и поддержанию скорости дыхания примерно на 60-80 вдохов в минуту.

Другие методы визуализации in vivo , такие как интравитальная микроскопия, демонстрируют перспективность визуализации патологических изменений в ECM на клеточном уровне. 14 , 15 , 16 , 17 По сравнению с МРТ, микроскопическая микроскопия может обеспечить высокое пространственное разрешение за счет покрытия только ограниченной области коры. Напротив, МРТ способна охватить весь мозг с разрешением до 80 мкм. Поэтому МРТ может проводить дальнейшие клеточные исследования, идентифицируяСайты пристрастия - начало заболевания, а также стадию заболевания, которые затем могут быть оценены с использованием дополнительных методологий. Результаты МРТ в ECM можно сравнить с патологическими изменениями, выявленными с помощью МРТ при церебральной малярии. Как человеческая, так и экспериментальная церебральная малярия демонстрируют вазогенный отек в областях нейрогенеза, а также микрососудистую патологию, такую ​​как вторичные церебральные инфаркты в водораздельных зонах. 7 , 18 Аналогичным образом затрагиваются белое и серое вещество, а опухоль головного мозга как у человека, так и у экспериментальной церебральной малярии связана с мозговой стеной при тяжелой болезни, объясняя состояние коматозности. 2 , 7

Мы надеемся, что визуализация in vivo поможет разгадать лежащий в основе патологический механизм церебральной малярии, который в настоящее время остается неуловимым. Поскольку отек и опухоль головного мозга едва заметны ex vivo, мнеМетоды визуализации этой патологии in vivo являются ключевыми и помогут улучшить оценку новых методов лечения и вакцинации.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgements

С благодарностью признается экспертная техническая помощь Мириам Рейниг. AH получил финансирование от постдокторской стипендии медицинского факультета Гейдельбергского университета. MP поддерживается мемориальной стипендией фонда Else-Kröner-Fresenius. АКМ является получателем стипендии по беременности и родам Академии DZIF Немецкого центра инфекционных исследований (DZIF). JP является получателем научного центра Heidelberg Research Molecular Medicine (HRCMM) по развитию карьеры. Кроме того, мы с благодарностью признаем Джулию М. Саттлер и Фридриха Фришкнехта за предоставление образцового фильма о спорозоите.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Isoflurane Baxter 1001747 for anesthesia
Dotarem Guebert 1086923 Gd-DTPA contrast agent; 0.5 mmol/mL
Amira (Image Processing Program) FEI Group Version Amira 5.3.2
MATLAB  The MathWorks, Inc., Release 2012b
FDT toolbox  FMRIB's Software Library http://www.fmrib.ox.ac.uk/fsl/fdt/index.html

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. World Health Organization. World Malaria Report. (2014).
  2. Seydel, K. B., et al. Brain swelling and death in children with cerebral malaria. N Engl J Med. 372, (12), 1126-1137 (2015).
  3. Penet, M. F., et al. Imaging experimental cerebral malaria in vivo: significant role of ischemic brain edema. J Neurosci. 25, (32), 7352-7358 (2005).
  4. de Souza, J. B., Riley, E. M. Cerebral malaria: the contribution of studies in animal models to our understanding of immunopathogenesis. Microbes Infect. 4, (3), 291-300 (2002).
  5. Curfs, J. H., van der Meide, P. H., Billiau, A., Meuwissen, J. H., Eling, W. M. Plasmodium berghei: recombinant interferon-gamma and the development of parasitemia and cerebral lesions in malaria-infected mice. Exp Parasitol. 77, (2), 212-223 (1993).
  6. Carroll, R. W., et al. A rapid murine coma and behavior scale for quantitative assessment of murine cerebral malaria. PLoS One. 5, (10), (2010).
  7. Hoffmann, A., et al. Experimental Cerebral Malaria Spreads along the Rostral Migratory Stream. PLoS Pathog. 12, (3), e1005470 (2016).
  8. Mueller, A. K., Behrends, J., Blank, J., Schaible, U. E., Schneider, B. E. An experimental model to study tuberculosis-malaria coinfection upon natural transmission of Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium berghei. J Vis Exp. (84), e50829 (2014).
  9. Hynynen, K., McDannold, N., Sheikov, N. A., Jolesz, F. A., Vykhodtseva, N. Local and reversible blood-brain barrier disruption by noninvasive focused ultrasound at frequencies suitable for trans-skull sonications. Neuroimage. 24, (1), 12-20 (2005).
  10. Nag, N., Mellott, T. J., Berger-Sweeney, J. E. Effects of postnatal dietary choline supplementation on motor regional brain volume and growth factor expression in a mouse model of Rett syndrome. Brain Res. 1237, 101-109 (2008).
  11. Giri, S., et al. T2 quantification for improved detection of myocardial edema. J Cardiovasc Magn Reson. 11, 56 (2009).
  12. Engwerda, C., Belnoue, E., Gruner, A. C., Renia, L. Experimental models of cerebral malaria. Curr Top Microbiol Immunol. 297, 103-143 (2005).
  13. Zhao, H., et al. Olfactory plays a key role in spatiotemporal pathogenesis of cerebral malaria. Cell Host Microbe. 15, (5), 551-563 (2014).
  14. Nacer, A., et al. Experimental cerebral malaria pathogenesis--hemodynamics at the blood brain barrier. PLoS Pathog. 10, (12), e1004528 (2014).
  15. Nacer, A., et al. Neuroimmunological blood brain barrier opening in experimental cerebral malaria. PLoS Pathog. 8, (10), e1002982 (2012).
  16. Pai, S., et al. Real-time imaging reveals the dynamics of leukocyte behaviour during experimental cerebral malaria pathogenesis. PLoS Pathog. 10, (7), e1004236 (2014).
  17. Shaw, T. N., et al. Perivascular Arrest of CD8+ T Cells Is a Signature of Experimental Cerebral Malaria. PLoS Pathog. 11, (11), e1005210 (2015).
  18. Potchen, M. J., et al. Acute brain MRI findings in 120 Malawian children with cerebral malaria: new insights into an ancient disease. AJNR Am J Neuroradiol. 33, (9), 1740-1746 (2012).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics