Neurobehavioral vurderinger i en musemodell av Neonatal Hypoxic-iskemisk hjerneskade

Neuroscience

Your institution must subscribe to JoVE's Neuroscience section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Summary

Vi utførte ensidige arteria carotis okklusjon postnatal dag 7-10 CD-1 mus pups å opprette en neonatal hypoxic-iskemiske (HI) modell og undersøkt virkningene av HI hjerneskade. Vi studerte neurobehavioral funksjoner i disse musene sammenlignet med ikke-opererte normal mus.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Kim, M., Yu, J. H., Seo, J. H., Shin, Y. K., Wi, S., Baek, A., Song, S. Y., Cho, S. R. Neurobehavioral Assessments in a Mouse Model of Neonatal Hypoxic-ischemic Brain Injury. J. Vis. Exp. (129), e55838, doi:10.3791/55838 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Vi utførte ensidige arteria carotis okklusjon på CD-1 mus å opprette en neonatal hypoxic-iskemiske (HI) modell og undersøkt virkningene av neonatal HI hjerneskade ved å studere neurobehavioral funksjoner i disse musene sammenlignet med ikke-opererte (dvs. normal) mus. Studien, ble ris-Vannucci metoden brukt til å indusere neonatal HI hjerneskade i postnatal dag 7-10 (P7-10) mus. HI operasjonen ble utført på valpene ensidige arteria carotis ligatur og eksponering for hypoksi (8% O2 og 92% N2 for 90 min). En uke etter operasjonen, skadet hjernen ble evaluert med det blotte øye gjennom semi-transparent skallen og ble kategorisert undergrupper basert på fravær ("ingen kortikale skader" gruppe) eller tilstedeværelse ("kortikale skader" gruppe) av kortikale skader, som en leksjonen i høyre halvkule. Uke 6, følgende neurobehavioral tester ble utført for å evaluere det kognitive og motoriske funksjoner: passive unngåelse oppgave (PAT), stigen gå test, og grep styrke test. Testene opptreden er nyttig for å bestemme effekten av neonatal HI hjerneskade og brukes i andre musen modeller av nevrodegenerative sykdommer. I denne studien viste neonatal HI hjernen skade mus motor underskudd som tilsvarte høyre hjernehalvdelen skade. Atferdsmessige testresultatene være relevante til underskuddene observert i menneskelige Nyfødte HI pasienter, for eksempel cerebral parese eller neonatal slagpasienter. I denne studien var en musemodell av neonatal HI hjerneskade etablert og viste ulike grader av motor underskudd og kognitiv svekkelse i forhold til ikke-opererte mus. Dette arbeidet gir grunnleggende informasjon om HI musemodell. Mr bilder viser i Norge, med avhengig av graden av hjerneskade motoriske og kognitive tester.

Introduction

Neonatal HI hjerneskade oppstår under tidlig barndom (ca to pasienter per 1.000 barn)1,2,3,4,5. Studier om neonatal HI hjerneskade er viktig, og bruker en etablert neonatal HI hjernen skade musemodell kan lette i vivo prekliniske undersøkelser på HI hjerneskade.

Tradisjonelle HI modeller brukes på voksen rotter6. For den neonate modellen brukes ris-Vannucci metoden vanligvis på P7 rotter7,8. Men siden rotter og mus er litt annerledes9,10, selv om de begge gnagere, vi utført en endret ris-Vannucci metode på CD-1 pups på P7-10, basert på tidligere studier som viste at P7-10 er perioden med umoden oligodendrocytes, tilsvarer human frist P011,12. Neonatal HI musemodell er etablert gjennom både av ligation av den ensidige arteria carotis og eksponering for mus hypoksi med 8% oksygen i P7-10 pups.

Mus utsatt for prosedyren viste ulike grader av hjernen lesjoner i posterolateral-området i den høyre hjernehalvdelen. For å identifisere den kognitive og motor underskudd, neurobehavioral vurderingene er basert på PAT, ble stigen gå test, og grep styrke test utført. Forskjellene mellom ikke-opererte (dvs. vanlig) og HI mus ble analysert. Dette arbeidet gir grunnleggende informasjon om HI musemodell. Mr bildene viser i Norge, atskilt avhengig av graden av hjerne skader bruker motoriske og kognitive tester.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle dyrene ble plassert i en standard bur (27 × 22,5 × 14 cm3) i anlegg akkreditert av foreningen for vurdering og akkreditering av laboratoriet Animal Care (AAALAC) og gitt mat og vann annonse libitum under vekslende 12-h lys/mørke sykluser. Forfatterne fulgt dyrebeskyttelsesbestemmelsene og eksperimentelle prosedyrene ble godkjent av institusjonelle Animal Care og bruk komiteen av Yonsei University College of Medicine (IACUC nei 2010-0252; 2013-0220).

1. mus modell Neonatal HI hjerneskade

  1. Bedøve valpene med isoflurane.
    1. Plasser pups (mindre enn 5) i en anesthetizing boks og lukke lokket.
    2. Slå på anesthetizing system for ca 15 min; justere gass og isoflurane bruker en tabell topp anestesi maskin. Justere oksygen flowmeter til 1,5 L/min. Juster isoflurane vaporizer til 3-5% for induksjon av anestesi.
    3. Etter 15 min, kan du justere isoflurane vaporizer til 1-2% for vedlikehold av anestesi.
  2. Legge en helt bedøvet pup under disseksjon mikroskop (magen overfor forskeren) og fest den med tape.
  3. Lage et ~0.7-mm snitt i halsen på sterilisert saks.
  4. Nøye fjerne fettvev bruke steriliserte tang og avdekke den ensidige høyre arteria carotis.
  5. Ligate den ensidige høyre arteria carotis med en 5-0 absorberbare Sutur.
  6. Sutur av såret i nakken med 5-0 Sutur.
  7. Plass hver valp i en 37 ° C varmt hypoxic kammer 1t for utvinning. Ikke Lukk kammer lokket.
  8. 1 time etter kirurgi, når valpene er fullt våken stenger hypoksi kammer lokket og redusere gass å etablere hypoxic forhold (8% O2 og 92% N2).
  9. Etter 90 min av oksygenmangel, returnere pups til deres burene.
  10. En uke etter hjerneskade HI Gjenta trinn 1.
    1. Etter anestesi, gjøre et snitt i hodebunnen med sterilisert saks og tang til å identifisere hjernen lesjonen i posterolateral-området i den høyre hjernehalvdelen.
      Merk: Denne behandlingen induserer oksygenmangel i pups. Tilstedeværelse og omfanget av hjerneskade i alle mus vurderes visuelt med det blotte øye gjennom skallen halvgjennomsiktig. Som bestemmes av størelse eller volum av misfarging (dvs. de hjernen lesjonen), klassifiseres pups i grupper. Hvis det ikke er noen synlige kortikale skader, er musen klassifisert i gruppen "ingen kortikale skader". Hvis det er en synlig kortikale skader (dvs. en lesjon i høyre halvkule), er musen klassifisert i gruppen "kortikale skader". Siden klassifisering av mus i grupper er gjort en uke etter operasjonen, kan grupperingene endres når morphologies av hjernen prøvene er klart definert ved offer1,2,3, 4.

Figure 1
Figur 1: Modellering neonatal HI hjerneskade i mus.
(A) en syv dag gamle musen pup gjennomgikk kirurgi og den ensidige høyre arteria carotis ble samskrevet. (B) pups ble plassert i en hypoxic kammer i 90 min med 8% O2 og 92% N2. (C, D og E) Hjernen med neonatal HI skade viste ulike alvorlighetsgraden av skaden og var kategoriseres basert på graden av skade. Uke 14, hjernen ble innhentet og lesjonene var visualisert. (C) Image av en hjerne klassifisert som en "ingen kortikale skader". Begge (D) og (E) ble klassifisert i gruppen "kortikale skader". (F, G og H) Representant MRI (c), (D), og (E) mus, henholdsvis. (F) skaden hippocampus angis med en gul pil, og lesjoner i høyre halvkule er også markert med gule piler (G og H). Skalere barer = 1 mm Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

2. neonatal atferdsmessige tester

Merk: Her, atferdsmessige testene ble utført på 6 ukens av alderen.

  1. Passiv unngåelse oppgave.
    Merk: For å evaluere minnefunksjon basert på læring og unngå en aversive stimulans, en to-compartment trinnvis klapp skal være gjennomført13,14,15,16.
    1. Plass musen i lyse rommet av plexiglass shuttle boksen (41,5 × 21 × 35 cm3) av en klapp apparater.
    2. Etter 30 s, åpne giljotinen og registrere ventetiden for musen å bevege i det mørke rommet (opptil 300 s).
    3. Lukk giljotinen døren når alle fire lemmer av musen er fullt inne det mørke rommet.
    4. Administrere elektrisk foten sjokk (0,5 mA) for 2 s og tilbake musen til buret sitt.
    5. Erstatte musen i lyse rommet 24 h sjokket elektrisk foten.
    6. Åpne giljotinen døren 10 s etter musen er fullstendig plassert i lyse rommet og registrere ventetiden for musen å bevege i det mørke rommet (opptil 300 s).
  2. Stigen gå test.
    Merk: Stige rung gangavstand oppgaven tillater diskriminering mellom subtile forstyrrelser av motorikk ved å kombinere kvalitative og kvantitative analyser av dyktige gangavstand17,18.
    1. Slå på et videokamera.
    2. Plasser musen på start panel av stigen og umiddelbart begynne innspillingen.
    3. Spille inn video, med fokus på musen lemmer.
    4. Stoppe innspillingen når musen berører den siste panelet av stigen. Gjenta turen frem og tilbake fire ganger.
    5. Analysere videoinnspillingen og manuelt telle antall papirlapper hver forlemen, som følger:
      1. Spille innspilling av video på en datamaskin med en treg hastighet (0,1 x) og telle trinnene manuelt.
  3. Grep styrke test.
    Merk: Grep styrke testen utføres med et grep Passordstyrke meter, som inkluderer en push-pull påkjenning gauge.
    1. Fastsette grep styrke apparatet på en akryl panel.
    2. Plasser musen på akryl panel og hold halen.
      1. Flytte hånden holder halen slik at musen kan nå og grep metalltråd av apparatet.
    3. Tillate flere forsøk før musen grep et trekantet stykke metalltråd (2 mm i diameter); fjellpigg makt registreres automatisk i gram av apparatet.
      Merk: Bruk kraft betyr topp tre forsøk for analyse19,20,21.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Alle data er uttrykt som gjennomsnittlig ± standard feil av gjsnitt (SEM). Sammenligning av variabler mellom de to gruppene ble gjennomført ved hjelp av en uavhengig eller parvise t-test på SPSS statistikk programvare. En p-verdien < 0,05 ble ansett som statistisk signifikant.

Hjernen med neonatal HI skade viste ulike alvorlighetsgraden av skaden og ble kategorisert tilsvarende (figur 1 c- E). Hjernen ble oppnådd på uke 14 og lesjonene var visualisert. Figur 1 c viser en hjerne klassifisert som en "ingen kortikale skader" hjerne, figur 1 d viser en hjerne klassifisert som en mild skade, og figur 1E alvorlig skadet hjerne. Både (D) mild og (E) alvorlige skader ble klassifisert i gruppen "kortikale skader". Etter HI driften, 13-uke-gamle mus ble fotografert med MRI, og resultatene (figur 1F-H) er representativt bilder av (C), (D), og (E) skader, henholdsvis. Selv om det var ingen betydelig leksjonen på morfologi av hjernen, MRI bildet viste hippocampus skade (figur 1F). Skade hippocampus (figur 1F, merket med en gul pil) er litt tydelig i mildt skadet hjernen. I en alvorlig skadet hjernen mistet musen det meste av den høyre hjernehalvdelen (figur 1G og H, med en gul pil).

Siden hjernen med HI skade viste hippocampus skade (figur 1F-H), utstilt mus med HI skade minnet underskudd i forhold til normal mus. PAT er nært knyttet til hippocampus skade13,15,16,19. Figur 2 viser at mus med HI skade hadde mer kognitiv underskudd enn normal mus13, som vurdert i PAT (normal n = 10; HI n = 9). En statistisk signifikant forskjell ble observert mellom grunnlinjen og 24-timers lagring testen i normal mus, som vist i figur 2A (*p = 0.003 basert på en parvis t-test). Finne 2B viser endringene i kognitiv funksjon i HI skade mus sammenlignet med normal mus (delta (Δ) er forskjellen mellom planlagte og 24t testen)13.

Fordi bare den høyre hjernehalvdelen ble ødelagt, neonatal HI hjernen skade musene viste hemiplegisk motoriske funksjoner. Forskjellen i prosent for følgesedler på tverrgående trinnene av stigen i forhold til totalt antall skritt hver forlemen ble brukt til å sammenligne normal mus med neonatal HI hjernen skade mus17,19. Figur 3 viser at slip frekvensen av kontralateral forlemen i HI hjernen skade mus var betydelig høyere enn i vanlig mus (normal n = 19; Hei n = 18; *p = 0.010 basert på en uavhengig t-test)22, men ingen forskjell ble observert i ipsilateral forlemen(p = 0.798 basert på en uavhengig t-test).

Videre siden grep styrke innebærer motorisk cortex i hjernen, normal og kortikale skader gruppene viste forskjeller i gripe makten. Selv om resultatene fra grep styrke test viste ingen forskjell mellom normal og ingen kortikale skader mus (figur 4A, normal n = 4; ingen kortikale skader n = 12), grafen viser at grep makt kontralateral forlemen var betydelig svakere i kortikale skader mus enn i vanlig mus (figur 4B, normal n = 4; kortikale skader n = 36; *p = 0.036 basert på en uavhengig t-test)21,22,23.

Figure 2
Figur 2: PAT neonatal HI hjerneskade og normal mus.
(A) ventetiden i lyse rommet ble målt og sammenlignet mellom neonatal HI hjerneskade og normal mus (n = 9 og n = 10, henholdsvis). (B) måling i øyeblikket av elektroniske sjokket ble ansett som den opprinnelige planen, og langsiktig hukommelse ble evaluert 24 timer etter elektrisk sjokk. Delta (Δ) 24-h ventetid var forskjellen mellom funksjonen evalueres i 24 timer og ved baseline. p< 0,05; alle data blir uttrykt som den gjennomsnittlig ± SEM. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 3
Figur 3: Forlemen slip rate i stigen gå test.
Satsene for kontralateral og ipsilateral forlemen slip ble vurdert mellom normal og HI hjernen skade mus (n = 19 og n = 18, henholdsvis). p< 0,05; alle data blir uttrykt som den gjennomsnittlig ± SEM. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 4
Figur 4: Grip styrke test i neonatal HI hjerneskade og normal mus.
Gripe makten av kontralateral forlemen var vurdert og forhold mellom (A) normal, ikke kortikale skader og (B) kortikale skader mus (n = 4, n = 12, n = 36). * p< 0,05; alle data blir uttrykt som den gjennomsnittlig ± SEM. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

I denne studien vi indusert HI hjerneskade i neonatal P7-10 CD-1 mus og identifisert hjernen lesjonen med relevante kognitive og motor underskudd. Under denne prosedyren var okklusjon av de ensidige høyre arteria carotis avgjørende. I dette trinnet kunne arterien bli skadet og revet. De fleste pups som opplevd en arterie rive døde. Omvendt, hvis forskere samskrevet en annen blod blodåre i stedet for den ensidige høyre arteria carotis, hjerne pup bare mildt ble skadet og ingen betydelig fenotypen kunne observeres24.

I denne studien, på grunn av variasjoner i mus og lesjon volum, hjernen ble kategorisert i flere grupper (Figur 1 C-H). Flere mus med mildt skadet hjerner hadde skade bare i hippocampus og ikke i kortikale området (figur 1F)13. Derimot flere mus med alvorlig skadet hjernen tapt mesteparten av den høyre hjernehalvdelen, og halvdelene ble alvorlig skadet (figur 1G og H). Derfor bør Forskerne identifiserer størrelsen på lesjonen en uke etter prosedyren19,25. Siden hjernen ble evaluert med Mr skanner, var bestemmelse av volumet og størrelsen på en leksjonen mer pålitelig. Vi anbefaler derfor at forskere vurdere hjernen bruke MRI, selv om visuell inspeksjon med det blotte øye er også mulig.

Cerebral parese oppstår ofte i barndommen, med en forekomsten av ca to pasienter per 1.000 barn5. Siden neonatal HI musemodell kan være en representativ modell av cerebral parese eller neonatal strek4,11,26, den opprinnelige informasjonen fra denne studien kan brukes i preklinisk forskning på cerebral parese eller neonatal slag.

Neurobehavioral vurderinger er nyttig for å identifisere av fenotyper kognitive og motor underskudd13. Neurobehavioral vurderingene i denne studien kan også tilpasses og brukes vanligvis for andre nevrodegenerative sykdommer, slik som Huntingtons, Parkinson's, og så videre. Forskere bør være klar over at, under PAT, fag får elektrisk støt. PAT bør derfor utføres til på sist, så elektrisk støt ikke påvirker andre opptreden vurderinger.

For videre studier trenger forskere å studere en humbug-opererte gruppe med gruppen HI. For en bestemt kontrollgruppe, kan forskere gjøre et snitt på halsen og stenger incision uten noen arterien hemorroider. For å etterligne HI operasjonen, bør disse hvalpene settes inn i hypoxic kammeret, men uten hypoksi, for den samme tid som en HI-gruppe de returneres til deres burene.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne har ingen konkurrerende interesser.

Acknowledgements

Denne studien ble støttet av tilskudd fra National Research Foundation (NRF-2014R1A2A1A11052042, 2015M3A9B4067068), departementet for vitenskap og teknologi, Sør-Korea, koreansk helse teknologi R & D Project (HI16C1012), helse & Velferd, Sør-Korea og programmet "Dongwha" fakultet forskning assistanse ved Yonsei University College of Medicine (6-2016-0126).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Hypoxic chamber Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder
PAT apparatus Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder
The ladder rung walking Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder
SDI Grip Strength System San Diego Instruments Inc.
Grip-Strength Meter Ugo Basile 47200
Harvard Apparatus Fluovac anesthetizing system  Harvard Apparatus
Anesthetizing box acryl box
I-Fran Liquid (Isofluorane) Hana Pharm. Co., Ltd. General Anesthetics ( isoflurane 100ml)
CD-1 mice Orient Co., Ltd.
Blue Nylon Mono Non-Absorbbable suture 5-0 50cm Ailee Co., Ltd. NB 521
IBM SPSS Statistics IBM Ver. 23

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Yager, J. Y. Animal models of hypoxic-ischemic brain damage in the newborn. Semin Pediatr Neurol. 11, (1), 31-46 (2004).
  2. Vannucci, R. C., et al. Rat model of perinatal hypoxic-ischemic brain damage. J Neurosci Res. 55, (2), 158-163 (1999).
  3. Im, S. H., et al. Induction of striatal neurogenesis enhances functional recovery in an adult animal model of neonatal hypoxic-ischemic brain injury. Neuroscience. 169, (1), 259-268 (2010).
  4. Clowry, G. J., Basuodan, R., Chan, F. What are the Best Animal Models for Testing Early Intervention in Cerebral Palsy? Front Neurol. 5, (258), 1-17 (2014).
  5. Colver, A., Fairhurst, C., Pharoah, P. O. Cerebral palsy. Lancet. 383, (9924), 1240-1249 (2014).
  6. Levine, S. Anoxic-ischemic encephalopathy in rats. Am J Pathol. 36, 1-17 (1960).
  7. Rice 3rd, J. E., Vannucci, R. C., Brierley, J. B. The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat. Ann Neurol. 9, (2), 131-141 (1981).
  8. Lafemina, M. J., Sheldon, R. A., Ferriero, D. M. Acute hypoxia-ischemia results in hydrogen peroxide accumulation in neonatal but not adult mouse brain. Pediatr Res. 59, (5), 680-683 (2006).
  9. Brazel, C. Y., Rosti 3rd, R. T., Boyce, S., Rothstein, R. P., Levison, S. W. Perinatal hypoxia/ischemia damages and depletes progenitors from the mouse subventricular zone. Dev Neurosci. 26, (2-4), 266-274 (2004).
  10. Buono, K. D., et al. Mechanisms of mouse neural precursor expansion after neonatal hypoxia-ischemia. J Neurosci. 35, (23), 8855-8865 (2015).
  11. Rumajogee, P., Bregman, T., Miller, S. P., Yager, J. Y., Fehlings, M. G. Rodent Hypoxia-Ischemia Models for Cerebral Palsy Research: A Systematic Review. Front Neurol. 7, (57), 1-20 (2016).
  12. Hagberg, H., Peebles, D., Mallard, C. Models of white matter injury: comparison of infectious, hypoxic-ischemic, and excitotoxic insults. Ment Retard Dev Disabil Res Rev. 8, (1), 30-38 (2002).
  13. Wi, S., Yu, J. H., Kim, M., Cho, S. R. In Vivo Expression of Reprogramming Factors Increases Hippocampal Neurogenesis and Synaptic Plasticity in Chronic Hypoxic-Ischemic Brain Injury. Neural Plast. 2016, (2580837), 1-11 (2016).
  14. Lu, Y., Christian, K., Lu, B. BDNF: a key regulator for protein synthesis-dependent LTP and long-term memory? Neurobiol Learn Mem. 89, (3), 312-323 (2008).
  15. Manabe, T., et al. Facilitation of long-term potentiation and memory in mice lacking nociceptin receptors. Nature. 394, (6693), 577-581 (1998).
  16. Alonso, M., et al. BDNF-triggered events in the rat hippocampus are required for both short- and long-term memory formation. Hippocampus. 12, (4), 551-560 (2002).
  17. Seo, J. H., et al. In Situ Pluripotency Factor Expression Promotes Functional Recovery From Cerebral Ischemia. Mol Ther. 24, (9), 1538-1549 (2016).
  18. Kim, M. S., et al. Environmental enrichment enhances synaptic plasticity by internalization of striatal dopamine transporters. J Cereb Blood Flow Metab. 36, (12), 2122-2133 (2015).
  19. Lee, M. Y., et al. Alteration of synaptic activity-regulating genes underlying functional improvement by long-term exposure to an enriched environment in the adult brain. Neurorehabil Neural Repair. 27, (6), 561-574 (2013).
  20. Rha, D. W., et al. Effects of constraint-induced movement therapy on neurogenesis and functional recovery after early hypoxic-ischemic injury in mice. Dev Med Child Neurol. 53, (4), 327-333 (2011).
  21. Chong, H. J., Cho, S. R., Jeong, E., Kim, S. J. Finger exercise with keyboard playing in adults with cerebral palsy: A preliminary study. J Exerc Rehabil. 9, (4), 420-425 (2013).
  22. Chong, H. J., Cho, S. R., Kim, S. J. Hand rehabilitation using MIDI keyboard playing in adolescents with brain damage: a preliminary study. NeuroRehabilitation. 34, (1), 147-155 (2014).
  23. Seo, J. H., Yu, J. H., Suh, H., Kim, M. S., Cho, S. R. Fibroblast growth factor-2 induced by enriched environment enhances angiogenesis and motor function in chronic hypoxic-ischemic brain injury. PLoS One. 8, (9), e74405 (2013).
  24. Washington, P. M., et al. The effect of injury severity on behavior: a phenotypic study of cognitive and emotional deficits after mild, moderate, and severe controlled cortical impact injury in mice. J Neurotrauma. 29, (13), 2283-2296 (2012).
  25. Cho, S. R., et al. Astroglial Activation by an Enriched Environment after Transplantation of Mesenchymal Stem Cells Enhances Angiogenesis after Hypoxic-Ischemic Brain Injury. Int J Mol Sci. 17, (9), 1-15 (2016).
  26. Tsuji, M., et al. A novel reproducible model of neonatal stroke in mice: comparison with a hypoxia-ischemia model. Exp Neurol. 247, 218-225 (2013).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics