La cytologie tubaire de la trompe de Fallope est un outil prometteur pour la détection précoce du cancer de l'ovaire

Medicine

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Summary

Nous avons exploré une méthode cytologique des trompes en échantillonnant l'échappée post-chirurgicale directement à l'échappée de Fallope en tant qu'outil de détection précoce du cancer de l'ovaire. Ici, nous présentons un protocole pour recueillir des cellules tubulaires de Fallope à partir de spécimens chirurgicaux fraîchement reçus.

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Chen, H., Klein, R., Arnold, S., Wang, Y., Chambers, S., Zheng, W. Tubal Cytology of the Fallopian Tube as a Promising Tool for Ovarian Cancer Early Detection. J. Vis. Exp. (125), e55887, doi:10.3791/55887 (2017).

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Abstract

Actuellement, il est largement admis que la grande majorité du carcinome séreux de haute qualité ovarien (HGSC) provient de la trompe de Fallope. Cependant, en raison du manque de marqueurs ou d'outils pour l'identification du cancer de l'ovaire, la détection précoce de HGSC reste difficile. L'échantillonnage direct de la trompe de Fallope peut améliorer la sensibilité pour la détection des cellules néoplasiques lorsque la tumeur n'est pas visible. Nous avons développé une procédure pour recueillir des cellules de trompe de Fallope directement à partir de spécimens chirurgicaux fraîchement reçus, ce qui a montré une excellente corrélation avec les résultats histologiques. Cette approche jette les bases de l'utilité future du dépistage laparoscopique minimalement invasif dans les populations de patients à haut risque.

Introduction

Le carcinome séreux de haute qualité ovarien (HGSC) est le cancer le plus fréquent et létal du cancer de l'ovaire et demeure une menace majeure pour la santé publique. Au cours de la dernière décennie, les chercheurs ont suggéré que la grande majorité des cas de HGSC proviennent de la trompe de Fallope plutôt que de l'ovaire lui-même 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 . Le carcinome intra-épithélial tubaire serieux (STIC) est largement accepté comme précurseur de HGSC 1 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 . Jusqu'à présent, la détection précoce du cancer de l'ovaire reste difficile. Le protocole de dépistage actuel avec l'antigène combiné contre le cancer 125 (CA-125) et l'échographie transvaginale a montréPeu d'effet sur la mortalité des patients 12 , 13 . L'échantillonnage de l'endomètre pour la détection du cancer de l'ovaire a montré une sensibilité extrêmement faible 14 . Deux études pionnières 15 , 16 ont exploré l'utilisation de l'échantillonnage direct laparoscopique des trompes de Fallope et ont caractérisé les caractéristiques cytologiques de l'épithélium tubaire bénin. Nous croyons que l'échantillonnage direct de la trompe de Fallope peut également être un moyen pratique et direct de détecter STIC ou HGSC à un stade précoce lorsque la tumeur n'est pas visualisée par imagerie.

Bien que l'objectif ultime soit l'utilité du dépistage laparoscopique minimalement invasif chez les patients présentant des facteurs à haut risque, les objectifs immédiats de l'étude actuelle sont les suivants: 1) établir les caractéristiques cytologiques de référence de l'épithélium tubaire bénin; Et 2) Pour tester la sensibilité et la spécificité de la cytologie tubaire dans la détection de cancer de l'ovaireEt les précurseurs du cancer. Nous avons donc développé la méthode de cytologie tubaire de base suivante pour tester l'efficacité de ce protocole dans la détection de HGSC et son précurseur STIC 17 . Dans cette étude, nous avons profité du grand volume de spécimens chirurgicaux régulièrement reçus et avons effectué un échantillonnage direct de la trompe de Fallope excisée chirurgicalement en plus des procédures de prélèvement de routine.

Notre étude récente 17 a montré que le diagnostic cytologique de malignité ou de suspicion de malignité est fortement corrélé au diagnostic histologique de HGSC (100%). De plus, l'évaluation cytologique des trompes a identifié la néoplasie intratubal dans les deux cas cliniquement confirmés de STIC impliqués dans cette étude. Nous pensons que la cytologie des trompes a un grand potentiel dans le dépistage précoce et fournira des informations précieuses pour la gestion des patients.

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Protocol

Une approbation de l'Office d'examen institutionnel a été reçue de l'Université de l'Arizona pour mener cette étude. Des formulaires de consentement éclairés ont été obtenus.

1. Sélection du patient

NOTE: Une approbation du Conseil d'examen institutionnel a été obtenue auprès de l'Université de l'Arizona. Au total, 38 patients ont été recrutés. L'âge des patients variait de 32 à 86 ans avec une moyenne de 55 ans, dont 26 patients étaient post-ménopausés et 12 patients étaient pré-ménopausés.

  1. Obtenez le consentement éclairé de chaque patient.

2. Procédure de collecte des cellules de trompe de Fallope

NOTE: Les patients inclus dans l'étude actuelle ont tous été programmés pour l'hystérectomie totale et la salpingo-ooforectomie bilatérale pour la réduction du risque prophylactique ou la malignité. Les détails de la chirurgie étaient inconnus pour les pathologistes qui ont effectué l'étude de cytologie.

  1. Immédiatement après la surgiExcision calcique, examiner attentivement l'échantillon de tissus frais comprenant l'utérus, les ovaires bilatéraux et les trompes de Falopie bilatérales afin d'identifier la trompe de Falopie bilatérale.
  2. Recueillir et placer les cellules des trompes de Fallope dans le flacon de la solution de conservation (voir le Tableau des matériaux) dans les 30 minutes suivant le serrage de l'approvisionnement en sang; Le conservateur recommandé est une solution conservatrice tamponnée à base de méthanol.
    REMARQUE: Utilisez une brosse douce pour la collecte des cellules tubulaires (étapes à venir). À l'exception des cas rares où la trompe de Fallope est détachée de l'utérus, l'insertion d'une tête de brosse pour collecter des cellules à partir de la fimbrie tubaire se produit généralement lorsque la trompe de Fallope est attachée à l'utérus.
    1. À l'aide d'une petite pince, insérez la brosse (voir le tableau des matériaux ) dans la lumière de la trompe de Fallope à travers la fin des fimbrias. Tournez lentement dans le sens des aiguilles d'une montre et déplacez la brosse vers l'avant à travers la partie infondante de l'automneTube opian, puis l'ampoule jusqu'à ce qu'elle atteigne l'isthme.
    2. Tournez lentement et inversez la brosse dans le sens inverse des aiguilles d'une montre pour retirer la brosse. Veillez à ce que la vitesse maximale de la brosse dans la lumière soit plus lente que 1 cm / s.
    3. Rincer la brosse dans la solution de conservation (dans un flacon) en tournant et en faisant tourbillonner la brosse 10 fois dans la solution.
    4. Serrer le bouchon du flacon.
    5. Notez l'information du patient et la latéralité du spécimen.
    6. Conservez le flacon dans un réfrigérateur à 4 ° C (jusqu'à 6 mois).

3. Cytologie Tubal Préparation de la diapositive

  1. Chargez le flacon d'échantillon dans le processeur automatisé pour la préparation de la diapositive.
    REMARQUE: Nous utilisons le processeur automatisé pour la préparation des diapositives. Les étapes suivantes sont effectuées automatiquement après que le flacon d'échantillon est placé dans le processeur: (i) Les cellules et les débris sont séparés et dispersés par la rotation du filtre de test dans l'échantillonampoule. (Ii) Les cellules tubulaires sont collectées à partir de la surface extérieure du filtre par un vide doux. (Iii) Le filtre est inversé et appuyé contre la glissière pour permettre aux cellules d'adhérer à la zone circulaire à l'intérieur de la glissière. (Iv) La glissière est encore fixée dans un bain de fixation cellulaire et prête pour l'analyse de coloration et de cytologie. Malheureusement, il n'y a pas de méthode manuelle alternative, qui peut donner des résultats avec une qualité similaire.

4. Protocole de coloration Papanicolaou modifié

  1. Tenez les diapositives à partir de l'étape 3.1 en exécutant la procédure de coloration non gynisée automatisée, comme illustré dans le tableau 1 .
    NOTE: La méthode de coloration représente une modification de la technique de coloration Papanicolaou que nous utilisons habituellement pour les spécimens non gynécologiques. Nous utilisons un processeur de tissus automatisé pour tacher des diapositives. Nous avons choisi la procédure de coloration non-Gyn sur la procédure de coloration Gyn dans cette étude. L'Eosine utilisée est EA-65, au lieu de l'EA-50 utilisé pourSpécimens gynécologiques (échantillon de Papanicolaou). En outre, OG-6 dans la procédure de coloration Gyn, qui est principalement pour la coloration des cellules squameuses, n'est pas inclus dans la procédure de coloration car aucune cellule squameuse ne devrait être observée dans cette étude. EA65 (Eosin Azure) est une solution de contre-coloration composée de 3 colorants: Eosin Y, Fast FC vert et Bismarck Brown Y. La procédure est illustrée dans le Tableau 1 .
  2. Effectuez une procédure manuelle manuelle de dépistage du papier comme suit.
    1. Trempez la glissière faite à l'étape 3.1 dans l'éthanol à 95%, 10 fois, chaque rampe prenant environ 1 s.
    2. Trempez la glissière dans H 2 O, 10 fois, chaque rampe prenant environ 1 s.
    3. Émerger la glissière dans l'hématoxyline pendant 10 à 60 s.
    4. Trempez la glissière dans H 2 O, 10 fois, chaque rampe prenant environ 1 s.
    5. Trempez la glissière dans l'éthanol à 95%, 10 fois, chaque rampe prenant environ 1 s.
    6. Émerger la diapositive dans EA65 pendant 1 à 3 min.
    7. Dip the slide intO H 2 O, 10 fois, chaque rampe prenant environ 1 s.
    8. Trempez la glissière dans l'éthanol à 95%, 10 fois, chaque rampe prenant environ 1 s.
    9. Trempez la glissière en xylène jusqu'à ce que la glissière devienne claire.
      NOTE: Il s'agit d'une procédure de coloration Papanicolaou modifiée. Cette méthode est utilisée comme une méthode de tache plus rapide pour les cas avec un temps ou un espace limité comme l'aspiration à l'aspiration fine sur place et les spécimens STAT. Cette procédure fournit une coloration de qualité comparable à la procédure de coloration non-Gynisée automatisée. La procédure est illustrée dans le tableau 2 .

5. Spin Cells sur les diapositives

REMARQUE: Trois diapositives cytospin sont réalisées pour chaque spécimen. Une diapositive est réalisée par H & E pour la comparaison morphologique avec la glissière de cytologie. Deux diapositives non colorées ont été réalisées pour la future étude de coloration par IHC. Les étapes détaillées de cette section ne font pas l'objet de cet article; Par conséquent, nous ne les discuterons pas dans dEtails.

  1. Préparez une cytocentrifugeuse avec un coulisseau marqué, un entonnoir à échantillon et un filtre pour chaque échantillon à examiner.
  2. Concentrer les cellules en centrifugant pendant 5 min à 200 x g.
  3. Retirer environ la moitié du surnageant, puis réinstaller les cellules par pipetage doux.
  4. Ajouter 200 μl de chaque suspension cellulaire à un entonnoir à échantillon.
  5. Tourner à 250 xg pendant 5 min. Retirez délicatement la (les) glissière (s) de la cytocentrifugeuse et transférez-les à 95% d'éthanol pour la fixation.
  6. Sécher à l'air avant la coloration et pour le stockage à long terme.
    REMARQUE: en fonction de la densité de la cellule sur les diapositives finales, l'étape 5.2 et l'étape 5.3 peuvent être ignorées ou ajustées. Dans cette étude, nous avons besoin d'au moins 2 grappes de cellules présentes par vue de haute puissance pour une densité cellulaire adéquate.

6. Sectionnement et examen approfondi du Protocole de fin Fimbriated (SEE-FIM)

  1. Réparez l'ensemble de l'échantillon (y compris l'utérus, les trompes de Falopie bilatérales et les ovaires)Dans 10% de formol avant l'extraction pour minimiser l'exfoliation.
  2. Détachez doucement et soigneusement les trompes de Fallope de l'utérus à l'isthme à l'aide de petites pinces et des ciseaux. Si l'adhérence est présente, dissécher soigneusement l'extrémité fimbrée de la surface de l'ovaire à l'aide de petites pinces et des ciseaux; Ces étapes sont essentielles pour minimiser la contamination croisée des tumeurs entre l'ovaire et la trompe de Fallope en raison de leur proximité intime.
  3. Amputez le segment infundibulum et fimbriae (le 1,0 - 2,0 cm distal de trompe de Fallope) du reste de l'échantillon.
  4. Sectionz l'infundibulum et les fimbriae longitudinalement à des intervalles de 2 mm. Soumettre toutes les sections en toto pour l'examen histologique.
  5. Sectionz l'isthme et l'ampoule aux intervalles de 2 à 3 mm et soumettez-les entièrement.

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Representative Results

Notre étude précédente a montré que l'échantillonnage directement à partir de la trompe de Fyopie excisée à l'aide d'une brosse douce pourrait produire un échantillon quantitatif et qualitativement adéquat pour une évaluation cytologique supplémentaire. En outre, la combinaison de la préparation automatisée de la diapositive et de la coloration Papanicolaou modifiée permet au pathologiste de mieux visualiser les détails cytologiques pour faire un diagnostic précis. Un exemple d'une tache rapide et manuelle d'un échantillon provenant d'une trompe de Fallope bénigne est illustré à la figure 1 . Comme le montre la figure 1 , la manœuvre de la brosse entraîne un échantillonnage adéquat de l'échantillon. En outre, la tache rapide et manuelle rapide fournit une bonne résolution des détails nucléaires et de la transparence cytoplasmique, ce qui est essentiel pour une évaluation précise des cellules tubaires.

La comparaison entre le manuel Quick Pap StUne diapositive de cytologie et la coloration H & E d'une glissière cytospin est illustrée à la figure 2 . L'un des avantages de la préparation de la diapositive mentionnée ci-dessus par rapport au frottis conventionnel est qu'il a un fond beaucoup plus propre et une meilleure résolution des détails nucléaires et de la transparence cytoplasmique. Un exemple de SEE-FIM du protocole de trompe de Fallopian est démontré à la figure 3 . Comme le montre la figure 1 , la présence de deux populations cellulaires (cellules ciliées et cellules sécrétoires) est une caractéristique de l'épithélium tubaire bénin. L'histologie des sections représentatives de la fimbria et de l'ampoule est illustrée à la figure 4 . La manœuvre de la brosse montre une légère perturbation de la structure des villosités dans environ un tiers de l'échantillon.

Dans notre étude précédente 17 , le diagnostic cytologique des trompes était en corrélation avec le diapo histologiqueGnosis de HGSC très bien (100%). L'aspect cytologique de la malignité montre des grappes tridimensionnelles composées de cellules avec des nucléoles proéminents et une anisonucléose ( figure 5a ). En revanche, la cytologie réactive atypique présentée sous forme de feuilles angulaires composées de cellules atypiques à faible nucléole et d'anisonucléose modérée sans groupement tridimensionnel ( figure 5b ). Des groupes cellulaires de type HGSC ont été notés dans le contexte de feuilles angulées de cellules épithéliales normales ( figure 6 ).

Figure 1
Figure 1: Exemple d'une tache rapide manuelle manuelle de l'épithélium tubaire bénin. ( A ) Cellules de fond. Les cellules de fond comprennent des grappes de petites cellules constituées de grandes cellules sécrétoires et de petites cellules ciliées, une seule grande (vraisemblablementCellule récurrente) et de petites cellules (vraisemblablement ciliaires), des grands et petits noyaux épars dispersés. ( B ) Groupe de petites cellules composé de petites cellules ciliées et de grandes cellules sécrétoires (flèche). ( C ) Bande d'épithélium cilié (flèche). ( D ) L'épithélium tubaire à feuilles mésothéliales. Noté les cellules ciliées accrochées à la périphérie (flèche). Cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.

Figure 2
Figure 2: Comparaison entre la tache rapide manuelle manuelle d'une glissière de cytologie ( A ) et une coloration H & E d'une glissière cytospin ( B ). Un groupe de cellules angulées bénignes est présent au centre de la tache Pap et des lames de coloration H & E. Les deux méthodes fournissent un bonRésolution pour l'évaluation cytologique du spécimen. Cependant, la tache de Pap de la glissière de cytologie a donné un fond plus propre. Cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.

figure 3
Figure 3: Illustration de SEE-FIM de la trompe de Fallope. Veuillez noter la section longitudinale du segment infundibulum et des fimbriae et la section transversale de l'isthme et de l'ampoule. Cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.

Figure 4
Figure 4: Histologie de l'épithélium tubaire bénin.( A ) segment de Fimbriae. L'épithélium tubaire se compose de deux populations cellulaires distinctes: petites cellules ciliées (flèches) et de grandes cellules sécrétrices non ciliées (cercles). Une légère perturbation de la villa est notée. ( B ) Section Ampulla. Notez le fimbria en forme de doigt. ( C ) Mauvaise perturbation de la structure des villosités (flèche). Cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.

Figure 5
Figure 5: Comparaison entre le groupe atypique ( a ) et le groupe malin tridimensionnel ( b ) . La cytologie maligne montre des grappes tridimensionnelles composées de cellules avec des nucléoles proéminents et anisonucléose ( b ). La cytologie atypique montre une feuille anguléeS composé de cellules atypiques avec de petits nucléoles et une anisonucléose modérée. Remarque: Aucun cluster en trois dimensions n'est présent ( a ). Ce chiffre a été adopté à partir de la référence 17 .

Figure 6
Figure 6: Corrélation entre l'apparition cytologique et histologique de la néoplasie intra-épithéliale. (A) cytologique néoplasie intratubaire. Néoplasie cytopositive intratubal montrant l'acquisition d'un contour tridimensionnel et d'une anisonucléose significative et de grands nucléoles rouge cerise (cercle) dans le contexte de feuilles angulaires de cellules épithéliales normales (flèche). ( B ) Section de la pathologie chirurgicale correspondante avec un carcinome intra-épithélial tubaire. Notez les cellules hautement dysplasiques (cercle) adjacentes à l'apparence relativement normale des cellules épithéliales (flèche). Ce chiffre a étéAdopté à partir de la référence 17 . Cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.

</ Table>

Tableau 1: Étapes des taches non-Gyn.

95% d'éthanol 5 min
H2O 10 secondes
Hematoxyline 15 sec - 3 min
H2O distillé 5 min
95% d'éthanol 30 sec
EA65 2 à 5 min
95% d'éthanol 30 sec
95% d'éthanol 30 sec
100% d'éthanol 30 sec
100% d'éthanol 30 sec
Xylène 30 sec
Xylène 5 min
95% d'éthanol 10 trempettes
H2O 10 trempettes
Hematoxyline 10 sec-1 min
H2O distillé 10 trempettes
95% d'éthanol 10 trempettes
EA65 1 - 3 min
95% d'éthanol 10 trempettes
100% d'éthanol 10 trempettes
Xylène Tremper jusqu'à ce qu'il soit clair

Tableau 2: Étapes manuelles manuelles de taches de Pap.

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Discussion

La salpingectomie bilatérale prophylactique ou la salpingo-ooforectomie a montré qu'il diminue le risque de développer un HGSC dans des populations à haut risque, comme les femmes présentant des mutations génétiques BRCA et une forte histoire de cancer familial. Cependant, la stérilité et la ménopause chirurgicale causées par l'intervention chirurgicale sont des conséquences graves et font une décision difficile, en particulier pour les femmes en âge de procréer. L'étude précédente a montré une excellente corrélation entre la cytologie tubaire et l'histologie 17 . Nous croyons que la cytologie des trompes sur les cellules tubéreuses de trompe de Laparoscopie a grand potentiel pour devenir un outil pratique et peu invasif pour la détection précoce du cancer.

Les étapes les plus critiques pour la collecte réussie des cellules tubulaires de Fallope sont: 1) Le temps entre le serrage de l'approvisionnement en sang et la collecte des cellules; Et 2) Manœuvre douce et correcte de la douce brosse à contact.

L'heure (dans les 30 minutesEs) entre le serrage et la collecte des cellules est cruciale pour une bonne conservation de la morphologie et des détails nucléaires des cellules collectées. Une communication efficace entre les pathologistes et les chirurgiens assure que le spécimen soit livré au site de collecte au cours de cette période. La grande majorité des cas inclus dans l'étude ont été réalisés dans la salle de section congelée. Pour recueillir avec succès les cellules tubulaires, la personne qui effectue la collecte devrait essayer le mieux possible pour éviter que le pinceau ne touche la surface seroselle de l'ovaire en raison de l'implication de la mise en scène si le cas est malin. Parfois, cela peut être difficile en raison de la proximité des deux organes impliqués et de la complexité de l'anatomie de l'échantillon. La séparation des trompes de Fallope de l'ensemble de l'échantillon avant la collecte peut être justifiée.

La brosse douce utilisée dans cette étude peut collecter un grand nombre de cellules qui peuvent être transférées facilement sur des lames ou un flacon de solution conservatrice,Et a un bout doux conçu pour minimiser les traumatismes du canal. En outre, toute la manœuvre doit être lente et douce pour éviter de perturber sévèrement les structures villoustiques de la muqueuse tubaire. Dans certains cas, il peut être difficile de faire passer la brosse dans toute la trompe de Fallope en raison d'une obstruction. Néanmoins, il est important d'essayer le mieux possible de collecter des cellules à partir des fimbriae et infundibulaires, car on pense que la majorité du HGSC provient de l'extrémité distale de la trompe de Fallope. Toutefois, la collecte ne doit pas se dérouler si l'intégrité de l'échantillon peut être potentiellement compromise.

Sur la base de notre expérience, le spécimen peut être stocké dans une solution de conservation pendant plusieurs mois sans compromettre la morphologie des cellules collectées. La coloration Papanicolaou est une technique de coloration cytologique couramment utilisée en cytopathologie. Les principaux avantages de cette procédure de coloration sont les suivants: 1) bonne définition des détails nucléaires;Et 2) transparence cytoplasmique. Dans cette étude, deux procédures de coloration Papanicolaou modifiées sont utilisées pour la coloration des diapositives de cytologie, y compris la procédure de coloration non-Gynne automatisée et la procédure de coloration rapide. Les deux procédures donnent une coloration glissante excellente et fiable, ce qui montre une bonne conservation des détails nucléaires et cytoplasmiques et un fond propre. Bien que les diapositives de cytospin aient généralement plus de fond par rapport aux diapositives de cytologie, leur coloration H & E a démontré une qualité similaire de coloration cellulaire. La coloration H & E de ces diapositives peut être une méthode alternative appropriée pour l'analyse de la cytologie tubaire si un processeur automatique n'est pas disponible.

Le protocole SEE-FIM est utilisé pour extraire toutes les trompes de Fallope incluses dans cette étude, y compris des cas bénins et malins. Le protocole SEE-FIM a d'abord été développé pour les échantillons de salpingo-oophorectomie bilatéraux prophylactiques positifs à BRCA, qui est une option standard de réduction des risques fOu les transporteurs de mutations BRCA. Ce protocole permet l'exposition maximale de la tubercule plicae, à partir de laquelle le STIC est censé être originaire. Ceci est actuellement considéré comme l'étalon-or pour la détection de l'extension des trompes HGSC et du STIC. La corrélation entre la découverte cytologique des trompes avec la découverte histologique du SEE-FIM est cruciale pour que cette étude puisse valider l'efficacité du protocole actuel.

Une préoccupation de la collecte des cellules tubulaires à l'aide d'une brosse douce est que la manœuvre peut perturber l'intégrité de l'épithélium tubaire et entraver l'interprétation histologique plus tardive des spécimens chirurgicaux, en particulier la mise en scène de la tumeur, si l'on identifie une tumeur maligne. Cependant, en fonction de notre expérience, environ un tiers des cas présentent une légère perturbation des villosités sur l'analyse histologique, ce qui n'interfère généralement pas avec l'interprétation finale de l'histologie des trompes.

Notre étude précédente a montré que la cytologie tubaire est sensible et spécifiqueDans la détection de HGSC et de STIC. Il sera très intéressant de tester encore si la combinaison de la cytologie tubaire avec la coloration des biomarqueurs tels que P53 et IMP3 peut augmenter la sensibilité et la spécificité de la détection du cancer séreux d'origine tubaire. Une étude future mettra l'accent sur le développement d'une procédure laparoscopique pour l'échantillonnage de l'épithélium des Fallope in vivo .

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Disclosures

Les auteurs déclarent qu'ils n'ont pas d'intérêts financiers concurrents.

Acknowledgments

Les auteurs souhaitent remercier le Département de pathologie de l'Université de l'Arizona pour le soutien financier. Le projet est partiellement soutenu par le fonds de dotation Mark et Jane Gibson à WZ.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Cytobrush plus GT gentle touch of Medscand sample collection kit CooperSurgical C0112
ThinPrep preservCyt solution HOLOGIC 234005
ThinPrep 2000 Processor HOLOGIC 70031-001
Papanicolaou Stain, EA 65 sigma aldrich HT40432
95% Ethanol sigma aldrich 652261
100% Ethanol sigma aldrich 493538
Xylene sigma aldrich 214736
Hematoxylin sigma aldrich H9627
Sakura Tissue Tek 2000 tissue processor SAKURA TISSUE-TEK VIP 2000
Mayo Dissecting Scissors,5.5 straight Pilgrim medical equiment FA710-45
Chemware Forceps United state plastic corp 76122
Tissue-Tek Accu-Edge Trimming blades,short SAKURA 4785
Tissue-Tek Accu-Edge Trimming blades handle,short SAKURA 4786

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References

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