Yumurtalık Kanseri Erken Teşhisi İçin Umut Verici Bir Araç Olarak Fallop Tüpünün Tubal Sitolojisi

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Summary

Yumurtalık kanseri erken teşhisinin bir aracı olarak fallop tüpünü direkt olarak cerrahi sonrası eksizyonu örnekleyerek bir tubal sitolojik yöntem araştırdık. Burada, yeni alınan cerrahi örneklerden fallop tüp hücreleri toplamak için bir protokol sunuyoruz.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Chen, H., Klein, R., Arnold, S., Wang, Y., Chambers, S., Zheng, W. Tubal Cytology of the Fallopian Tube as a Promising Tool for Ovarian Cancer Early Detection. J. Vis. Exp. (125), e55887, doi:10.3791/55887 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Günümüzde, over yüksek dereceli seröz karsinomanın (HGSC) büyük çoğunluğunun fallop tüpünden kaynaklandığı yaygın olarak kabul edilmektedir. Bununla birlikte, yumurtalık kanseri tanımlaması için belirteçlerin veya araçların olmamasından dolayı, HGSC'nin erken teşhisi zorlayıcı olmaya devam etmektedir. Fallop tüpünün doğrudan örneklenmesi, tümör gözle görünmüyorsa neoplastik hücrelerin saptanması için duyarlılığı artırabilir. Yeni alınan cerrahi örneklerden fallop tüp hücrelerini doğrudan toplamak için bir prosedür geliştirdik ve bu histolojik bulgularla mükemmel korelasyon gösterdi. Bu yaklaşım, gelecekte yüksek riskli hasta popülasyonlarında minimal invaziv laparoskopik taramanın kullanılmasına zemin hazırlamaktadır.

Introduction

Yumurtalık yüksek dereceli seröz karsinom (HGSC), en yaygın ve öldürücü yumurtalık kanseri türüdür ve halk sağlığı için büyük bir tehdit olmaya devam etmektedir. Son on yılda, araştırmacılar HGSC vakalarının büyük çoğunluğunun yumurtalık yerine 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 fallop tüplerinden kaynaklandığını öne sürmüşlerdir. Serum tubal intraepitelyal karsinom (STIC), HGSC 1 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11'in prekürsörü olarak yaygın olarak kabul edilmektedir. Şimdiye kadar, yumurtalık kanseri erken teşhisi zor olmaya devam etmektedir. Kombine kanser antijen 125 (CA-125) ve transvajinal ultrason ile mevcut tarama protokolüHasta mortalitesi üzerine çok az etki 12 , 13 . Over kanseri saptamasında endometriyal örnekleme son derece düşük hassasiyet gösterdi 14 . 15 , 16 nolu iki öncü çalışma, iyi huylu fallop tüplerinin laparoskopik doğrudan örneklenmesinin kullanımını araştırmış ve benign tübal epitelin sitolojik özelliklerini karakterize etmiştir. Fallop tüpünden direkt örneklemenin, tümörün görüntüleme ile görülemediği erken bir aşamada STIC veya HGSC'nin saptanması için pratik ve doğrudan bir yol olabileceğine inanıyoruz.

Nihai amaç, yüksek risk faktörlü hastalarda minimal invaziv laparoskopik taramanın faydası olmasına rağmen, şu andaki çalışmanın asıl amacı şudur: 1) Benign tübal epitelin bazal sitolojik özelliklerini oluşturmak; Ve 2) yumurtalık kanseri tespitinde tüp sitolojisinin hassasiyetini ve özgüllüğünü test etmekErs ve kanser öncülleri. Bu nedenle, bu protokolün HGSC ve onun prekürsörü STIC 17'nin saptanmasında etkinliğini test etmek için aşağıdaki temel tüp sitolojisi yöntemini geliştirdik. Bu çalışmada, düzenli olarak alınan cerrahi örneklerin büyük bir bölümünü kullandık ve düzenli grossing prosedürlerine ek olarak cerrahi olarak kesilen fallop tüpünün doğrudan örneklenmesini yaptık.

Bizim son çalışmada 17 malign veya malignite şüphesi sitolojik tanı son derece HGSC (% 100) histolojik tanı ile ilişkili olduğunu göstermiştir. Buna ek olarak, tubal sitolojik değerlendirme, bu çalışmaya katılan iki histolojik olarak doğrulanmış STIC olgusunda intratubal neoplaziyi saptamıştır. Tüp sitolojisinin erken tespitte büyük potansiyele sahip olduğuna ve hasta yönetimi için değerli bilgiler sağlayacağına inanıyoruz.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Bu çalışmanın yürütülmesinden dolayı University of Arizona tarafından Kurumsal Değerlendirme Kurulu onayı alındı. Bilgilendirilmiş hasta onay formları elde edildi.

1. Hasta Seçimi

NOT: Bir Kurumsal Gözden Geçirme Kurulu onayı Arizona Üniversitesi'nden alınmıştır. Toplam 38 hasta çalışmaya alındı. Hastaların yaşları 32-86 arasında değişmekte olup, ortalama yaş 55, bunlardan 26'sı menopoz sonrası, 12'si menopoz öncesi idi.

  1. Her bir hastanın bilgilendirilmiş onayı alın.

2. Fallop Tüp Hücreleri Toplama Prosedürü

NOT: Mevcut çalışmaya dahil olan hastaların profilaktik risk azalması veya malignite için total histerektomi ve bilateral salpingo-oofrektomi yapılması planlandı. Ameliyatın ayrıntıları, sitoloji çalışmasını yapan patolog için bilinmemektedir.

  1. Surgi bittikten hemen sonraRahim, iki taraflı yumurtalıklar ve bilateral fallop tüplerini içeren taze doku örneğini inceleyerek ikili fallop tüpünü tanımlayın.
  2. Kan kaynağını kelepçelendirerek 30 dakika içinde fallop tüp hücrelerini koruyucunun içine yerleştirin (bakınız Malzeme Tablosu). Önerilen koruyucu, metanol bazlı, tamponlanmış bir koruyucu çözeltidir.
    NOT: Tüp hücresi toplanması için hafif bir dokunmatik fırça kullanın (gelecek adımlar). Fallop tüpünün uterusdan ayrıldığı ender durumlarda hariç olmak üzere, tubal fimbriadan hücreleri toplamak için bir fırça kafası takmak, genellikle fallop tüpü uterusa bağlandığında gerçekleşir.
    1. Küçük bir forseps yardımı ile fırçayı fimbrianın ucundan fallop tüpünün lümenine sokun (bkz . Malzeme Tablosu ). Yavaşça saat yönünde döndürün ve fırçayı sonbaharın infundibular kısmı boyunca öne doğru hareket ettirinOpian tüpünü, ardından ampülden isthusa ulaşana kadar.
    2. Fırçayı dışarı çekmek için yavaşça döndürün ve fırçayı saat yönünün tersine tersine çevirin. Fırçanın lümen içindeki maksimum hızının 1 cm / s'den daha yavaş olduğundan emin olun.
    3. Fırça, solüsyonda 10 kez döndürüp döndürerek koruyucu bir solüsyonda (bir flakondaki) durulayın.
    4. Şişe kapağını sıkıştırın.
    5. Hastanın bilgilerini ve numunenin yanallığını kaydedin.
    6. Şişeyi 4 ° C'lik bir buzdolabında (6 ay kadar) saklayın.

3. Tubal Sitoloji Slayt Hazırlama

  1. Slayt hazırlığı için örnek şişeyi otomatik işlemciye yükleyin.
    NOT: Otomatik işlemciyi slayt hazırlığı için kullanırız. Aşağıdaki adımlar, numune şişesinin işlemciye yerleştirilmesinden sonra otomatik olarak gerçekleştirilir: (i) Hücreler ve enkaz, numunedeki test filtresinin dönüşü ile ayrılır ve dağılır.şişe. (Ii) Tüp hücreleri, hafif bir vakumla filtrenin dış yüzeyinden toplanır. (Iii) Filtrenin ters çevrilmesi ve hücrelerin slayt içindeki dairesel bölgeye yapışmasına izin vermek için slaydın üzerine basılması. (Iv) Slayt, bir hücre fiksatif banyosunda sabitlenir ve boyama ve sitoloji analizi için hazırdır. Ne yazık ki, benzer kalitede sonuçlar verebilecek alternatif bir manuel yöntem yok.

4. Değiştirilmiş Papanicolaou Boyama Protokolü

  1. Tablo 1'de gösterildiği gibi, otomatize non-gyn boyama prosedürünü çalıştırarak adım 3.1'de hazırlanan slaytları boyayın.
    NOT: Boyama yöntemi, jinekolojik olmayan örnekler için rutin olarak kullandığımız Papanicolaou boyama tekniğinin bir değişikliğini temsil eder. Bazı slaytları leke yapmak için otomatik bir doku işlemcisi kullanıyoruz. Bu çalışmada Gyn boyama prosedürü üzerinden Non-Gyn boyama prosedürünü seçtik. Kullanılan Eosin, EA-65 yerine EA-50 olarak kullanılır.Jinekolojik numuneler (Pap smear örneği). Ek olarak, esasen skuamöz hücre boyaması için olan Gyn boyama prosedüründe OG-6, boyama prosedürüne dahil değildir, çünkü bu çalışmada skuamoz hücrelerin görülmesi beklenmemektedir. EA65 (Eosin Azure), Eozin Y, Hızlı yeşil FCF ve Bismarck kahverengi Y olmak üzere 3 boya içeren bir sayaç boyama çözeltisidir. Prosedür, Tablo 1'de gösterilmektedir.
  2. Aşağıdaki gibi manuel hızlı bir Pap boyama prosedürü uygulayın.
    1. Adım 3.1'de hazırlanan slaydı, her bir daldırma yaklaşık 1 s süren 10 kat% 95 etanol içine daldırın.
    2. Yaklaşık 1 saniye alan her daldırma ile, H2O, 10 kat içine slayt batırın.
    3. Slayt 10 - 60 s boyunca hematoksilen içinde görünür hale getirilir.
    4. Yaklaşık 1 saniye alan her daldırma ile, H2O, 10 kat içine slayt batırın.
    5. Her daldırma yaklaşık 1 s süren slayt% 95 etanol içine 10 kez batırın.
    6. EA65'deki slaydı 1 - 3 dakika süreyle ortaya çıkarın.
    7. Dip slayt intH 2 O, 10 defa, her bir daldırma yaklaşık 1 s sürer.
    8. Her daldırma yaklaşık 1 s süren slayt% 95 etanol içine 10 kez batırın.
    9. Slayt kaybolana kadar slaydonu ksilen içine daldırın.
      NOT: Bu, değiştirilmiş bir Papanicolaou boyama prosedürüdür. Bu yöntem yerinde ince iğne aspirasyonu ve STAT numuneleri gibi sınırlı zaman veya mekan olan vakalar için daha hızlı bir leke yöntemi olarak kullanılır. Bu prosedür, otomatize Non-Gyn boyama prosedürü olarak karşılaştırılabilir kaliteli lekeler sağlar. İşlem Tablo 2'de gösterilmektedir.

5. Hücreleri Slaytlara Döndürün

NOT: Her numune için üç sitospin slayt yapılır. Bir slayt, sitoloji slaydı ile morfolojik karşılaştırma için boyanmış H & E'dir. Gelecekteki IHC boyama çalışması için iki lekelenmemiş slayt yapılmıştır. Bu bölümün ayrıntılı adımları bu makalenin odak noktası değildir; Bu nedenle, onları genişletilmiş d'de tartışmayacağızetails.

  1. İncelenecek her numune için etiketli bir slayt, numune hunisi ve filtre ile bir sitosentrifüj hazırlayın.
  2. 200 x g'de 5 dakika santrifüj ederek hücreleri konsantre hale getirin.
  3. Süpernatanın yaklaşık yarısını çıkarın ve yavaşça pipetle hücreleri tekrar askıya alın.
  4. Her bir hücre süspansiyonunun 200 μL'ini örnek hunisine ekleyin.
  5. 5 dakika 250 x g'de döndürün. Slaytları sitozentrifüjden dikkatlice çıkarın ve tespit için% 95 etanol'e aktarın.
  6. Boyamadan önce ve uzun süre saklama için hava kurur.
    NOT: Son slaytlardaki hücre yoğunluğuna bağlı olarak, adım 5.2 ve adım 5.3 atlanabilir veya ayarlanabilir. Bu çalışmada, yeterli hücre yoğunluğu için yüksek güç görünümü başına en az 2 hücre kümesi mevcut olmasını gerektirir.

6. Fimbriasyon Sonu (SEE-FIM) Protokolünü Bölümlendirme ve Kapsamlı Olarak İnceleme

  1. Tüm örneği düzeltin (rahim, bilateral fallop tüpleri ve yumurtalıklar dahil)Eksfoliyasyonu en aza indirgemek için grossing öncesi% 10 formalin içinde.
  2. Küçük forseps ve makas kullanarak fallop tüplerini izostan dokudaki uterusdan hafifçe ve dikkatle ayırın. Yapışma varsa, küçük forseps ve bir makas kullanarak yumurtalık yüzeyden tırtıklı kenarı dikkatlice parçalayın; Bu adımlar, yumurtalık ve fallop tüpleri arasındaki yakınmalarından ötürü tümör çapraz kontaminasyonunu en aza indirgemek için çok önemlidir.
  3. Numunenin geri kalanından gelen infundibulum ve fimbriale segmenti (distal 1.0 - 2.0 cm fallop tüpü) parçalayın.
  4. Infundibulum ve fimbriaları boyuna olarak 2 mm aralıklarla kes. Histolojik muayene için tüm bölümleri toto'ya gönderin.
  5. Ayırma ve ampül 2 - 3 mm aralıklarla kesilip tamamen gönderin.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Önceki çalışmamız, hafif bir dokunuş fırçası kullanılarak kesilmiş fallop tüpünden doğrudan numuneleşmenin daha fazla sitolojik değerlendirme için niceliksel ve niteliksel olarak yeterli numuneye neden olabileceğini gösterdi. Buna ek olarak, otomatik slayt hazırlama ve modifiye Papanicolaou boyama kombinasyonu, patologun doğru tanı koymak için sitolojik ayrıntılarını daha iyi görselleştirmesini sağlar. İyi huylu fallop tüplerinden alınan bir numunenin elle hızlı bir pap lekesi örneği Şekil 1'de gösterilmiştir. Şekil 1'de gösterildiği gibi, fırça manevrası, numunenin yeterli bir şekilde örneklenmesiyle sonuçlanır. Dahası, manuel hızlı Pap lekesi, boru hücrelerinin doğru bir şekilde değerlendirilmesi için gerekli olan nükleer detayların ve sitoplazmik şeffaflığın iyi bir şekilde çözümlenmesini sağlar.

Elle hızlı Pap st arasındaki karşılaştırmaA sitoloji slayt ve H & E sitospin slayt boyama Şekil 2'de gösterilmiştir. Yukarda bahsedilen slayt preparatının konvansiyonel bulaşma ile karşılaştırıldığında sağladığı avantajlardan biri, çok daha temiz bir arka plana sahip olması ve nükleer detayların ve sitoplazmik şeffaflığın daha iyi çözünmesidir. Fallop Tüp Protokolünün SEE-FIM'inin bir örneği Şekil 3'te gösterilmiştir. Şekil 1'de gösterildiği gibi, iki hücre popülasyonunun (silli hücreler ve sekresyon hücreleri) varlığı, benign tübal epitelin bir özelliğidir. Fimbria ve ampulla temsil eden bölümlerin histolojisi Şekil 4'te gösterilmektedir. Fırça manevrası, örneklemin yaklaşık üçte birinde villöz yapının hafif rahatsızlığını gösterir.

Önceki çalışmamızda 17 , tubal sitolojik tanı histolojik çene ile korelasyon gösterdiHGSC gnozu çok iyi (% 100). Malignitenin sitolojik görünümü belirgin nucleoli ve anisonükleozlu hücrelerden oluşan üç boyutlu kümeleri gösterir ( Şekil 5a ). Aksine, atipik reaktif sitoloji, açısal tabakalar şeklinde, küçük nukleolili atipik hücreler ve üç boyutlu kümeleme olmaksızın ılımlı anisonükleozdan oluşmaktadır ( Şekil 5b ). HGSC benzeri hücre grupları, normal epitel hücrelerinin açı oluşturan tabakaları bağlamında kaydedildi ( Şekil 6 ).

Şekil 1
Şekil 1: Benign Tubal Epitelin Manuel Hızlı Pap Boyası Örneği. ( A ) Arka plan hücreleri. Arka plan hücreleri, büyük salgı hücrelerinden ve küçük silik hücrelerden oluşan küçük hücre kümelerini, tek büyük (muhtemelen saniyeRetori hücreleri) ve küçük (muhtemelen siliated hücreler) hücreler, dağınık büyük ve küçük çıplak çekirdekler. ( B ) Küçük silik hücreler ve geniş salgı hücrelerinden oluşan küçük hücre kümesi (ok). ( C ) Silili epitel şeridi (ok). ( D ) mezotel benzeri tabakalarla birlikte tubal epitel. Çevredeki yapışkan hücreleri saptadı (ok). Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.

şekil 2
Şekil 2: Sitoplazma slaydının ( B ) bir Sitoloji Slayt ( A ) Manuel Hızlı Pap Boyası ve H & E boyaması arasındaki karşılaştırma. Hem Pap lekesi hem de H & E leke slaytlarının merkezinde benign açılı bir hücre kümesi bulunur. Her iki yöntem de iyiNumunenin sitolojik değerlendirilmesi için çözünürlük. Bununla birlikte, sitoloji slaydının Pap lekesi daha temiz bir geçmiş oluşturdu. Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.

Şekil 3
Şekil 3: Fallop Tüpünün SEE-FIM'inin İllüstrasyonu. Infundibulum ve fimbriale segmentinin uzunlamasına kesitleri ve ismus ve ampulla'nın transvers kesitine dikkat edin. Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.

Şekil 4
Şekil 4: Benign Tubal Epitel Histolojisi.( A ) Fimbria segmenti. Tüp epiteli iki farklı hücre popülasyonundan oluşur: küçük silik hücreler (oklar) ve sivilasyona uğratılmamış büyük salgı hücreleri (daireler). Hafif villa rahatsızlığı belirtiliyor. ( B ) Ampulla bölümü. Parmak benzeri fimbria dikkat edin. ( C ) Hafif villus yapı bozukluğu (ok). Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.

Şekil 5
Şekil 5: Atipik Küme ( a ) ile Üç Boyutlu Malign Küme Arasındaki Karşılaştırma ( b ) . Malign sitoloji belirgin nucleoli ve anisonükleoz ( b ) bulunan hücrelerden oluşan üç boyutlu kümeleri gösterir. Atipik sitoloji, eğik tabaka gösterirKüçük nucleoli ve orta dereceli anisonükleozlu atipik hücrelerden oluşmaktadır. Not: Üç boyutlu kümeleme yoktur ( a ). Bu rakam, referans 17'den uyarlanmıştır.

Şekil 6
Şekil 6: İntraepitelyal Neoplazide Sitolojik ve Histolojik Görünüm Arasındaki Korelasyon. ( A ) Sitolojik intratubal neoplazi. Normal epitel hücrelerinin açısal sayfaları bağlamında üç boyutlu kontur ve anlamlı anisonükleoz ve geniş kiraz kırmızı nucleoli (daire) edinimi gösteren sitolojik intratubal neoplazi (ok). ( B ) Tübal intraepitelyal karsinom ile karşılık gelen cerrahi patoloji bölümü. Nispeten normal görünümdeki epitel hücrelerine (ok) bitişik olan aşırı displastik hücrelere (daire) dikkat edin. Bu rakamReferans 17'den alınmıştır . Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.

</ Table>

Tablo 1: Non-Gyn Stain Adımları.

% 95 etanol 5 dakika
H2O 10 saniye
Hematoksilen 15 saniye - 3 dakika
Damıtılmış H20 5 dakika
% 95 etanol 30 saniye
EA65 2 - 5 dak
% 95 etanol 30 saniye
% 95 etanol 30 saniye
% 100 etanol 30 saniye
% 100 etanol 30 saniye
Ksilen 30 saniye
Ksilen 5 dakika
% 95 etanol 10 dips
H2O 10 dips
Hematoksilen 10 saniye-1 dakika
Damıtılmış H20 10 dips
% 95 etanol 10 dips
EA65 1-3 dakika
% 95 etanol 10 dips
% 100 etanol 10 dips
Ksilen Berraklaşana kadar daldırma

Tablo 2: Manuel Hızlı Pap Boyama Adımları.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Profilaktik bilateral salpenjektomi veya salpingo-ooforektominin, BRCA gen mutasyonları ve güçlü ailesel kanser öyküsü olan kadınlar gibi yüksek riskli popülasyonlarda HGSC gelişme riskini azalttığı gösterilmiştir. Bununla birlikte ameliyatın neden olduğu kısırlık ve cerrahi menopoz ciddi sonuçlar doğurur ve özellikle doğurganlık çağındaki kadınlar için zor bir karar verir. Bir önceki çalışmada tüp sitoloji ve histoloji 17 arasında mükemmel bir korelasyon göstermiştir. Laparoskopik olarak toplanan fallop tüp hücrelerindeki tubal sitolojinin erken kanser tespiti için pratik, minimal invaziv bir araç olma potansiyeline sahip olduğuna inanıyoruz.

Fallop tüp hücrelerinin başarılı bir şekilde toplanması için en kritik adımlar şunlardır: 1) Kan temini ve hücre toplanması arasındaki zaman; Ve 2) Nazik dokunuşlu fırçanın yumuşak ve doğru manevrası.

Zaman (30 dakika içindeEs), toplanan hücrelerin morfolojisini ve nükleer detaylarını iyi bir şekilde muhafaza etmek için çok önemlidir. Patologlar ve cerrahlar arasındaki etkin iletişim, numunenin bu süre zarfında toplama bölgesine teslim edilmesini sağlar. Çalışmaya dahil edilen vakaların büyük çoğunluğu dondurulmuş kesit odasında gerçekleştirildi. Tüp hücrelerini başarıyla toplamak için, koleksiyonu gerçekleştiren kişi, durum maligneyse safhanın yumurtalık serozal yüzeyine dokunmasına izin vermemek için olabildiğince iyi denemelidir. Bazen bu, ilgili iki organın yakınlığı ve örnek anatomisinin karmaşıklığı nedeniyle zor olabilir. Koleksiyondan önce fallop tüplerinin tüm numuneden ayrılması garanti edilebilir.

Bu çalışmada kullanılan nazik dokunuşlu fırça, daha sonra kolayca slaytlara veya bir koruyucu çözelti şişesine aktarılabilen çok sayıda hücre toplayabilir,Ve kanala travmayı en aza indirgemek için tasarlanmış nazikçe dokunmatik bir uca sahiptir. Üstelik tüberküloz mukozasının villöz yapılarını ciddi derecede rahatsız etmemek için tüm manevraların yavaş ve nazik olması gerekir. Bazı durumlarda tıkanıklık nedeniyle fırçanın tüm fallop tüpünü geçmesini sağlamak zor olabilir. Bununla birlikte, HGSC'nin çoğunluğunun fallop tüpünün distal ucundan geldiğine inanıldığından, fimbriadan ve infundibular kısımlardan hücreleri toplamak için mümkün olduğunca çabalıyorum önemlidir. Bununla birlikte, numunenin bütünlüğü tehlikeye atılabilirse koleksiyonun ilerlememesi gerekir.

Deneyimlerimize dayanarak, numune toplanan hücrelerin morfolojisinden ödün vermeden birkaç ay boyunca koruyucu solüsyonda muhafaza edilebilir. Papanicolaou boyası sitopatolojide sıkça kullanılan bir sitolojik boyama tekniğidir. Bu boyama prosedürünün başlıca avantajları şunlardır: 1) nükleer detayın iyi tanımlanması;Ve 2) Sitoplazmik şeffaflık. Bu çalışmada, otomatize Non-Gyn boyama prosedürü ve Quick Pap leke prosedürü de dahil olmak üzere, sitoloji slaytlarının boyanması için iki modifiye Papanicolaou leke prosedürü kullanılmıştır. Her iki prosedür de, nükleer ve sitoplazmik ayrıntıların iyi korunmasını ve temiz zemini gösteren mükemmel ve güvenilir slayt boyama sağlar. Sitospin slaytlar genellikle sitoloji slaytlarıyla karşılaştırıldığında daha büyük bir geçmişe sahiptir, ancak H & E lekesi de benzer hücre boyanma kalitesini göstermiştir. Otomatik işlemci yoksa, bu slaytların H & E boyanması tubal sitoloji analizi için uygun bir alternatif yöntem olabilir.

SEE-FIM protokolü, hem benign hem de malign vakalar da dahil olmak üzere, bu çalışmada yer alan tüm fallop tüplerini toparlamak için kullanılır. SEE-FIM protokolü başlangıçta standart risk azaltma seçeneği olan BRCA pozitif profilaktik bilateral salpingo-ooferektomi numuneleri için geliştirilmiştir.Veya BRCA mutasyon taşıyıcıları. Bu protokol, STIC'nin kaynaklandığı düşünülen tubal plicae'nin azami maruz kalmasına izin verir. Bu şu anda HGSC tubal ekstansiyon ve STIC bulgulamasında altın standart olarak alınmaktadır. Bu çalışmada mevcut protokolün etkinliğini doğrulamak için tubal sitolojik bulgu ile SEE-FIM histolojik bulgusu arasındaki korelasyon önemlidir.

Nazik bir dokunmatik fırça kullanılarak tüp hücrelerinin toplanmasına ilişkin endişeler, manevranın tüp epitelinin bütünlüğünü bozabileceği ve habislik tespit edildiğinde cerrahi numunelerin, özellikle tümörün evrelendirmesinin daha doğru histolojik yorumlanmasını engelleyebileceğidir. Bununla birlikte, tecrübelerimize dayanarak, vakaların yaklaşık üçte biri, genellikle tüp histolojisinin nihai yorumuna müdahale etmeyen histolojik analizde villilerin hafif rahatsızlığı göstermektedir.

Önceki çalışmamızda tubal sitolojinin hassas ve spesifik olduğunu göstermiştirHGSC ve STIC saptamada. Tüp sitolojisinin P53 ve IMP3 gibi biyobelirteç lekelenmesiyle kombinasyonunun tubal kökenli seröz kanser tespitinde duyarlılığı ve özgüllüğü artırabileceğini daha ileri test etmek büyük ilgi olacaktır. Gelecekteki çalışma, in vivo fallop epitel örneklemesi için laparoskopik prosedür geliştirmeye odaklanacaktır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar, rekabet eden mali çıkarlarının olmadığını beyan ettiler.

Acknowledgments

Yazarlar, maddi destek için Arizona Üniversitesi Patoloji Bölümü'nü kabul etmek istiyorlar. Proje kısmen WZ'ye Mark ve Jane Gibson bağış fonu tarafından desteklenmektedir.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Cytobrush plus GT gentle touch of Medscand sample collection kit CooperSurgical C0112
ThinPrep preservCyt solution HOLOGIC 234005
ThinPrep 2000 Processor HOLOGIC 70031-001
Papanicolaou Stain, EA 65 sigma aldrich HT40432
95% Ethanol sigma aldrich 652261
100% Ethanol sigma aldrich 493538
Xylene sigma aldrich 214736
Hematoxylin sigma aldrich H9627
Sakura Tissue Tek 2000 tissue processor SAKURA TISSUE-TEK VIP 2000
Mayo Dissecting Scissors,5.5 straight Pilgrim medical equiment FA710-45
Chemware Forceps United state plastic corp 76122
Tissue-Tek Accu-Edge Trimming blades,short SAKURA 4785
Tissue-Tek Accu-Edge Trimming blades handle,short SAKURA 4786

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Carlson, J. W., et al. Serous tubal intraepithelial carcinoma: its potential role in primary peritoneal serous carcinoma and serous cancer prevention. J Clin Oncol. 26, (25), 4160-4165 (2008).
  2. Kurman, R. J., Shih Ie, M. The origin and pathogenesis of epithelial ovarian cancer: a proposed unifying theory. Am J Surg Pathol. 34, (3), 433-443 (2010).
  3. Lee, Y., et al. A candidate precursor to serous carcinoma that originates in the distal fallopian tube. J Pathol. 211, (1), 26-35 (2007).
  4. Li, J., Fadare, O., Xiang, L., Kong, B., Zheng, W. Ovarian serous carcinoma: recent concepts on its origin and carcinogenesis. J Hematol Oncol. 5, 8 (2012).
  5. Przybycin, C. G., Kurman, R. J., Ronnett, B. M., Shih Ie, M., Vang, R. Are all pelvic (nonuterine) serous carcinomas of tubal origin? Am J Surg Pathol. 34, (10), 1407-1416 (2010).
  6. Zheng, W., Fadare, O. Fallopian tube as main source for ovarian and pelvic (non-endometrial) serous carcinomas. Int J Clin Exp Pathol. 5, (3), 182-186 (2012).
  7. Carcangiu, M. L., et al. Atypical epithelial proliferation in fallopian tubes in prophylactic salpingo-oophorectomy specimens from BRCA1 and BRCA2 germline mutation carriers. Int J Gynecol Pathol. 23, (1), 35-40 (2004).
  8. Leunen, K., et al. Prophylactic salpingo-oophorectomy in 51 women with familial breast-ovarian cancer: importance of fallopian tube dysplasia. Int J Gynecol Cancer. 16, (1), 183-188 (2006).
  9. Piek, J. M., et al. Dysplastic changes in prophylactically removed Fallopian tubes of women predisposed to developing ovarian cancer. J Pathol. 195, (4), 451-456 (2001).
  10. Crum, C. P., et al. The distal fallopian tube: a new model for pelvic serous carcinogenesis. Curr Opin Obstet Gynecol. 19, (1), 3-9 (2007).
  11. Jarboe, E. A., et al. Tubal and ovarian pathways to pelvic epithelial cancer: a pathological perspective. Histopathology. 53, (2), 127-138 (2008).
  12. Menon, U. Ovarian cancer screening has no effect on disease-specific mortality. Evid Based Med. 17, (2), 47-48 (2012).
  13. Buys, S. S., et al. Effect of screening on ovarian cancer mortality: the Prostate, Lung, Colorectal and Ovarian (PLCO) Cancer Screening Randomized Controlled Trial. JAMA. 305, (22), 2295-2303 (2011).
  14. Otsuka, I., Kameda, S., Hoshi, K. Early detection of ovarian and fallopian tube cancer by examination of cytological samples from the endometrial cavity. Br J Cancer. 109, (3), 603-609 (2013).
  15. Dhanani, M., Nassar, A., Dinh, T. Classification of Fallopian Tube Cytology Sampling to Develop a Model for Future Peritoneal and Ovarian Cancer Screening. J Am Soc Cytopathol. 3, (5), S35-S36 (2014).
  16. Rodriguez, E. F., Lum, D., Guido, R., Austin, R. M. Cytologic findings in experimental in vivo fallopian tube brush specimens. Acta Cytol. 57, (6), 611-618 (2013).
  17. Chen, H., Klein, R., Arnold, S., Chambers, S., Zheng, W. Cytologic studies of the fallopian tube in patients undergoing salpingo-oophorectomy. Cancer Cell Int. 16, 78 (2016).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics