Author Produced

تخطيط الصدى في تحقيقات الإنجابية تجريبية على الفئران

* These authors contributed equally
Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

ويصف هذه المخطوطة الأداة المساعدة من الموجات فوق الصوتية التي أجريت على إناث الفئران لتصميم نماذج تجريبية لتحقيق الصحة الإنجابية وأمراض النساء. ويرد شرح خطوة بخطوة عن كيفية تنفيذ التقييم أولتراسونوجرافيك.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Wang, T., Oltra-Rodríguez, L., García-Carrillo, N., Nieto, A., Cao, Y., Sánchez-Ferrer, M. L. Ultrasonography in Experimental Reproductive Investigations on Rats. J. Vis. Exp. (130), e56038, doi:10.3791/56038 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

مع تطور التكنولوجيا الإنجابية المساعدة والقيود الأخلاقية للبحوث على البشر، استخدمت نماذج حيوانية الفئران على نطاق واسع في الطب الإنجابي. في الماضي، دراسة لتطوير الجهاز التناسلي في القوارض استناداً إلى الفحص النسيجي مرة واحدة من الأنسجة قصت. في الآونة الأخيرة، مع تطوير الاستبانة المهبل بالموجات فوق الصوتية، الموجات فوق الصوتية عالية الجودة يمكن الآن إجراء تقييم الأجهزة التناسلية للفئران، مما يتيح طريقة جديدة لدراسة الجهاز التناسلي. تم الحصول على الصور باستخدام نظام أولتراسونوجرافيك عالية الدقة. تم إجراء تخطيط الصدى أمراض النساء على 28 عمرها 8 الأسبوع غير الحوامل الجرذان والفئران سبراغ داولي الحوامل 5. ونحن تصف كيفية التعرف على الأجهزة التابعة للجهاز التناسلي والهياكل المرتبطة بها في وجهات النظر النمطية أثناء المراحل المختلفة من السفاد دورة. لون تدفق دوبلر استخدمت لقياس تدفق الدم في الشريان الرحمي وتقييم التغييرات نمط تدفق الدم الرحم أثناء المراحل المختلفة للحمل. لقد أظهرنا أن الاستكشاف بالموجات فوق الصوتية طريقة مفيدة لتقييم التغييرات في الأجهزة التناسلية الداخلية. استخدامها يثير إمكانية إجراء تجارب إضافية، بما في ذلك الإجراءات الطبية أو الجراحية، ويوفر القدرة على رصد التغيرات سونوجرافيك للأجهزة الداخلية دون التضحية بالحيوانات.

Introduction

نماذج حيوانية الفئران قد استخدمت على نطاق واسع في الطب التناسلي، بما في ذلك في الجنين وزرع المبيض1،2. بيد في الماضي، دراسة تطوير الجهاز التناسلي في القوارض واستند الفحص النسيجي مرة واحدة من الأنسجة قصت، ولم يكن من الممكن في الفئران3دراسة طولية التغيرات اليومية الجهاز التناسلي. الموجات فوق الصوتية وقد استخدمت على نطاق واسع في ساعدت التكنولوجيا الإنجابية في البشر لأكثر من 30 عاماً، ولكن فقط تم تطبيق هذه التكنولوجيا قيمة إلى الفئران مؤخرا.

كان هدفنا وضع نهج أولتراسونوجرافيك لتقييم الأجهزة التناسلية للفئران سبراغ داولي لتصميم نماذج تجريبية لتحقيق الإنجاب وأمراض النساء وإثبات هذا الإجراء نظراً لمعرفتنا، وهناك لا منشورات تصور الحالية فيما يتعلق بهذا الإجراء. يصف لنا إجراء الفحص أولتراسونوجرافيك من الجهاز التناسلي للأنثى في الفئران والنتائج أولتراسونوجرافيك هذا التشريح وتدفق الدم الشريان الرحمي باستخدام الموجات فوق الصوتية عالية الوضوح. يمكننا رصد الخصائص بطانة الرحم والمبايض وتدفق الدم الشريان الرحمي في الحيوانات غير الحوامل في مراحل مختلفة من دورة السفاد لتقييم الاختلافات الكبيرة في سمك بطانة الرحم والمبيض مورفولوجيا وتدفق الدم الرحم في مراحل مختلفة من دورة السفاد، مماثلة للمرأة. ونحن تستخدم معدات الموجات فوق الصوتية عالية الجودة مع تردد 70 ميغاهيرتز ومستوى قرار من 30 ميكرون. وكان هدفنا الأخرى لتقييم التغيرات في المقاومة لتدفق الدم الرحم في الجرذان الحوامل. يسمح هذا الأسلوب لدراسة التغيرات اليومية في الأجهزة الإنجابية دون التضحية بالحيوانات.

وهناك عدة صعوبات تقنية في استخدام الموجات فوق الصوتية على الفئران. وتشمل هذه الصعوبات: بطانة الرحم الفئران أرق كثير من الإناث بشرية4. صعوبة في تصوير المبيضين الفئران قد نسبت إلى الجلد أكثر سمكا وعضلات جدار البطن في الفئران، مما أدى إلى تخفيف شبه الكامل ل الموجات فوق الصوتية5، والشريان الرحمي أكثر بكثير من الصعب العثور في غير الحوامل الفئران. أننا قد تحل العديد من المشاكل التقنية مع الإجراء، ونظهر لتلك المشاكل التي ما زالت، كيفية التقليل إلى أدنى حد لها.

رصد نجاح التغييرات سونوجرافيك في الأجهزة التناسلية للفئران دون الحاجة إلى التضحية بالحيوانات سيتم فتح إمكانية بناء المستقبل نماذج حيوانية للطب الإنجابي وغيرها من العمليات الجراحية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

أجريت هذه الدراسة صارمة وفقا للتوصيات الواردة في الدليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية "المعاهد الوطنية للصحة" ووفقا سيصلون (بحوث الحيوان: الإبلاغ في تجارب فيفو) المبادئ التوجيهية. البروتوكول تلقي ترخيص للتجارب الحيوانية الامتثال للتوجيه 2010/63/الاتحاد الأوروبي مع رقم الترخيص A13170404 (أنيكسو 1). جميع التجارب التي أجريت في مختبر معتمد من قبل الاتحاد الأوروبي بعد مبادئ توجيهية وطنية للرعاية الأخلاقية للحيوانات (RD 53/2013، وتوجيه الاتحاد الأوروبي رقم 63/2010). تمت الموافقة البروتوكول اللجنة المعنية "أخلاقيات التجارب الحيوانية" من جامعة مورثيا.

1-إعداد الحيوان

ملاحظة: جميع التجارب التي حظيت بقسم الحيوان التجريب بجامعة مورسيا والتوليد وجامعة "إدارة مورسيا التوليد".

  1. استخدم الأسبوع عمره 8 سبراغ داولي الفئران (28 إناث الفئران) وزنها 200-250 غم في جميع التجارب.
    ملاحظة: هنا، ونحن أيضا استخدام الفئران الحوامل 5.
  2. للحصول على الفئران الحوامل، قفص عمرها 8 الأسبوع الفئران الذكور الإناث والخصبة ورفيقه من 17:00-23:00 h. تحديد المكونات المهبلي في الصباح اليوم التالي تم تفسيره في التزاوج نجاح. النظر في اليوم الأول من الحمل، وفي اليوم التالي بعد أن كانوا قد تزاوج.
  3. القيام التجارب في أيام 9 و 15 و 18 من الحمل.
  4. الفئران البيت في مجموعات من اثنين مع حرية الحصول على الغذاء والمياه والاحتفاظ بها في دورات منتظمة ح 12 الضوء/الظلام.
  5. بعد التأقلم لشروط مرفق كحد أدنى لمدة أسبوعين، استخدام الخلايا المهبلية اليومية صباح اليوم لتقييم تواتر السفاد والانتظام.
    ملاحظة: تم اختيار الفئران الثمانية والعشرين مع مرحلة السفاد عادية 4 إلى 5 أيام لإدراجها في الدراسة.

2-إعداد الفئران للتصوير

ملاحظة: تم الحصول على صور باستخدام الموجات فوق الصوتية المهبل عالية الدقة. تم تحديد مراحل دورة الشبقية بعنق اللطاخة المهبلية.

  1. قبل دراسة التصوير، تخدير السد في قاعة توجيهي مع الغاز إيسوفلوراني 2-3%.
  2. إزالة الحيوان وفورا مكان الآنف داخل مخروط الآنف متصل بنظام التخدير والحفاظ على الحيوان على 1.5-2% isoflurane خلال النظر في أولتراسونوجرافيك.
  3. إزالة الفراء من الهامش الساحلي في البطن والذيلية مع لوس أنجليس كليبرز وكريم مزيل الشعر.
  4. وضع الفئران أنيسثيتيزيد في موقف ضعيف على طاولة ساخنة لتأمين الفئران وضمان الراحة المثلى والصيانة من المعلمات الفسيولوجية لمدة دورة التصوير. ينبغي أن تدمج جميع المعلمات الفسيولوجية مع الصور والتقاط البيانات في الوقت الحقيقي عن طريق تطبيق الموجات فوق الصوتية.
  5. بلطف بإدراج تحقيق المستقيم (بعد التشحيم) لرصد درجة حرارة الجسم (37.5 درجة مئوية ± 0.5 درجة مئوية).
  6. ضع محول (30 هرتز) في حامل ثابتة وتحريكه على طول محور عمودي ومحور أفقي (إلى الأمام إلى الوراء وجنبا إلى جنب) باستخدام جويستيك تشغيلها يدوياً أو باليد.
  7. تطبيق بلسم العيون النفطي لعيون الفئران لتجنب التجفيف أثناء الإجراء.

3-النظر في الإجراءات

ملاحظة: تشريح الأعضاء التناسلية rats´: المهبل يكمن الظهرية للمثانة البولية، ويقسم قرنان الرحم التي تمتد نحو الكلي. وترتبط المبايض لقرون الرحم عن طريق أوفيدوكتس (الشكل 1). الرحم يقع في المنطقة الخلفية للكلى.

  1. تعريف الرحم
    1. باستخدام المثانة كعلامة بارزة للعثور على عنق الرحم، اتبع عنق الرحم للعثور على فرع ابواق اليسار واليمين من الرحم.
    2. قم بالتبديل إلى عرض ثنائي الأبعاد والفيديو عن طريق تحديد "ب-الوضع". قياس القطر أنتيرو الخلفي من كل القرن الرحم في المنطقة منتصف البرزخية في صورة خط الوسط السهمي. الكشف عن القياسات باستخدام برامج النظام أولتراسونوجرافيك.
    3. قياس سمك بطانة الرحم من الحدود اتشوجينيك للحدود اتشوجينيك عبر تجويف الرحم في صورة خط الوسط السهمي في "ب-الوضع".
    4. تغيير إلى وضع دوبلر لون عن طريق تحديد "لون دوبلر". استخدام لون دوبلر لتحديد إمدادات الدم من بطانة الرحم وقياس تدفق الدم من بطانة الرحم. تحديد المعلمات التالية في وضع اللون دوبلر: تعيين مرشح الترددات العالية في 4 هرتز، مجموعة تردد التكرار النبضي بين 4 و 48 كيلوهرتز، وبوابة "نابض دوبلر" تعيين بين 0.2 و 0.5 مم.
  2. تحديد تدفق الدم الشريان الرحمي
    1. الحصول على دوبلر الطول الموجي في الشريان الرحمي قرب الهامش الجانبي-أدنى من مفرق عنق الرحم قريبة من شريان حرقفي على كل جانب.
    2. استخدم المعلمات التالية في طريقة دوبلر: تعيين مرشح الترددات العالية في 6 هرتز، مجموعة تردد التكرار النبضي بين 4 و 48 كيلوهرتز، وبوابة "نابض دوبلر" تعيين بين 0.2 و 0.5 مم.
    3. الحرص على تنظيم تدفق الدم وشعاع دوبلر للتقليل من زاوية دوبلر. سجل الزاوية بين شعاع دوبلر والسفينة. القيم التي اتخذت بعد بزاوية 60 درجة غير دقيقة وينبغي تجنبها6.
    4. قياس السرعة القصوى الانقباضية (آيندهوفن) والسرعة نهاية الانبساطي (ادف) من ثلاث دورات متتالية. ثم حساب الانقباضي الانبساطي (S/D) نسبة (آيندهوفن/ادف) والمقاومة index (RI) ([آيندهوفن-ادف]/بي إس في آيندهوفن) القيم لكل القرن الرحم.
    5. قياس تدفق الدم الشريان الرحمي للفئران الحوامل 5 خلال 9th، 15th، اليومال 18 من الحمل.
  3. تحديد المبيض وتدفق الدم الشريان المبيض
    ملاحظة: توجد المبايض الفئران الإناث الوحشي للكلى على كلا الجانبين من الحيوان، ويقيمون في منصات الدهون الموجودة في نهاية القرن الرحم (الشكل 1).
    1. صورة المبيض وتبدأ التحقيق في طائرة عرضية ووضعه على الجانب الأفقي للحيوان أقل قليلاً من أضلاعه. الكلي ولوحة الدهون لها مظهر هايبريتشويك مقارنة بالمبيض.
    2. قياس الحدود الخارجية المبيض والمسام. أرقام بمقياس لكل صورة في ملليمتر، مع زيادات 0.1 ملم.
      ملاحظة: يساعد على تصوير دوبلر اللونية، وطريقة دوبلر السلطة مع تحديد كثافة المبيض وتدفق توجيهي.

4-تصميم الدراسة

  1. فحص دورة السفاد بعنق اللطاخة المهبلية.
  2. تقسيم جميع الفئران في مجموعتين. المجموعة 1 أو خصبة مسبقاً (أو بيريوفولاتوري)، وتشمل على الفئران التي كانت في بروستروس والسفاد مراحل دورة. المجموعة 2 أو بعدها خصبة، تشمل على الفئران التي كانت في وقت مبكر ديستروس وديستروس أواخر مراحل دورة.
  3. رصد ومقارنة القطر أنتيرو الخلفي من كل القرن الرحم في المنطقة منتصف البرزخية في الفئات 1 و 2.
  4. رصد ومقارنة سمك بطانة الرحم والخصائص لبطانة الرحم في المجموعتين 1 و 2.
  5. رصد ومقارنة حجم (أقطار كحد أقصى) وخصائص المبيض، وترجمة أي بصيلات بيريوفولاتوري في كلا المبيضين في الفئات 1 و 2.
  6. رصد ومقارنة تدفق الدم الشريان الرحمي في المجموعتين 1 و 2.
  7. رصد ومقارنة تدفق الدم الشريان الرحمي الفئران الحوامل في مراحل مختلفة من الحمل (أيام 9 و 15 و 18 من الحمل).
  8. أداء التحليلات الإحصائية باستخدام SPSS. تقديم البيانات يعني ± الانحراف المعياري (SD) أو الوسيط مع النطاقات المجال. تحليل النتائج باستخدام اختبار t للطالب بين المجموعات المختلفة. واعتبر فقيمه أقل من 0.05 فرقا يعتد به إحصائيا.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

لا توجد أي اختلافات كبيرة في أقطار القرن الخلفي أنتيرو الرحم أو في سمك بطانة الرحم بين الجانبين في القرن الأفريقي الرحم (الجدول 1). بالمقارنة مع المجموعة 2، كان متوسط سمك بطانة الرحم في المجموعة 1 الاختلافات أكثر سمكا، ولكن ليس كبيرا (P > 0.05) عثر بين المجموعتين (الشكل 3). ومع ذلك، وجدنا السوائل داخل الرحم (في 8 من أصل 28 الفئران) قرب دورة السفاد المرتبطة بالتغيرات في بطانة الرحم مورفولوجيا (الشكل 2).

دراسات دوبلر كما أظهر أي تغييرات كبيرة في تدفق أنماط الموجي السرعة في كل جانب من القرن الأفريقي الرحم أو في مراحل مختلفة من دورة السفاد في الفئران غير الحوامل (الجدولان 1 و 2، الشكل 4A). ومع ذلك، في الفئران الحوامل، كالحمل المتقدمة، ذروة سرعات الانقباضي والانبساطي نهاية زيادة كبيرة، وفي فهرس المقاومة المحسوبة التي انخفضت بشكل ملحوظ (الجدول 3و الشكل 4B).

يعني قطر المبيض لم يكن يختلف كثيرا (الجدول 1). عند مقارنة مورفولوجية المبيض بين المجموعتين، شوهدت المسام بيريوفولاتوريس والسائل حول المبيض بعد الإباضة (الجدول 2، الشكل 2).

Figure 1
الشكل 1 : علم التشريح الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 2
الشكل 2 : قياس سمك بطانة الرحم (الوضع-ب)- سمك بطانة الرحم (الخط الأزرق) (A). أقطار القرن الخلفي أنتيرو الرحم (الخط الأزرق الكبير) وسمك بطانة الرحم (الخط الأزرق القصير) أثناء السفاد دورة (ب). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Figure 3
الشكل 3 : (أ) قياس قطر المبيض الأيسر؛ (ب) المبيض والمسام أثناء مرحلة السفاد.

Figure 4
الشكل 4 : قياس تدفق الدم في الشريان الرحمي. (أ) تدفق الدم الشريان الرحمي في الفئران غير الحوامل. (ب) تدفق الدم الشريان الرحمي في اليوم ال 15 للفئران الحوامل.

(P > 0.05، لا يوجد فرق كبير في كل مجموعة). التنمية المستدامة: ديسفياتيونبسف القياسية: ذروتها الانقباضية فيلوسيتييدف: نهاية الانبساطي فيلوسيتيس/d: Systolic الانبساطي راتيوري: مؤشر المقاومة. ((RI)=[PSV–EDV]/PSV)

متغير
(mm±SD)
الجانب الأيسر الجانب الأيمن قيمة ص
القرن القطر (ملم) 1.78±0.24 1.73±0.28 0.626
سمك بطانة الرحم (مم) 0.75±0.06 0.76±0.05 0.752
قطر المبيض (ملم) 3.69±0.52 3.62±0.32 0.107
حجم المسام (مم) 1.68±0.31 1.74±0.29 0.859
بي إس في آيندهوفن (mm/s) 91.52±17.91 93.07±22.87 0.055
ادف (mm/s) 34.18±9.36 36.67±11.14 0.178
S/D 2.78±0.59 2.62±0.50 0.294
ري 0.62±0.08 0.60±0.08 0.876
(P > 0.05، لا يوجد فرق كبير في كل مجموعة).
التنمية المستدامة: ديسفييشن القياسية
آيندهوفن: ذروة السرعة الانقباضية
ادف: سرعة نهاية االنبساطي
S/d: "الانقباضي" الانبساطي نسبة إلى
ري: المقاومة الفهرس. ((RI)=[PSV–EDV]/PSV)

الجدول 1: الفروق في القرن الأيسر وحق الرحم والمبيض.

متغير
(mm±SD)
المرحلة السفاد
(المجموعة 1)
مرحلة عدم السفاد
(المجموعة 2)
P.value
القرن القطر (ملم) 1.71±0.18 1.83±0.23 0.433
سمك بطانة الرحم (مم) 0.78±0.04 0.72±0.05 0.168
قطر المبيض (ملم) 3.71±0.56 3.66±0.47 0.515
بي إس في آيندهوفن (mm/s) 92.05±17.93 94.15±20.62 0.886
ادف (mm/s) 37.81±9.64 34.72±5.38 0.096
S/D 2.61±0.58 2.77±0.44 0.249
ري 0.60±0.08 0.63±0.06 0.232
(P > 0.05، لا يوجد فرق كبير في كل مجموعة).
التنمية المستدامة: ديسفييشن القياسية
آيندهوفن: ذروة السرعة الانقباضية
ادف: سرعة نهاية االنبساطي
S/d: "الانقباضي" الانبساطي نسبة إلى
ري: المقاومة الفهرس. ((RI)=[PSV–EDV]/PSV)

الجدول 2: الاختلافات بين مراحل مختلفة من دورة الشبقية في الفئران غير الحوامل.

متغير D9 D15 D18 قيمة P
PSV(mm/s) 111.08±5.93أ، ب 122.64±7.49ج 131.91±3.50 < 0.05
EDV(mm/s) 38.80±3.37د، ه 56.43±3.10و 79.29±5.47 < 0.05
S/D 2.87±0.12ز، ح 2.17±0.16أنا 1.67±0.14 < 0.05
ري 0.65±0.02 ي، ك 0.54±0.04ل 0.39±0.05 < 0.05
آيندهوفن = السرعة القصوى الانقباضية
ادف = سرعة نهاية الانبساطي.
S/D = Systolic لنسبة الانبساطي (آيندهوفن/ادف).
RI = مؤشر المقاومة ((RI) = ([آيندهوفن – ادف]/بي إس في آيندهوفن).
D9 = 9 يوم من الحمل
D15 = 15 يوما من الحمل
D18 = 18 يوما من الحمل
التنمية المستدامة: الأخطاء تشير إلى الانحراف المعياري (±).
(ف < 0.05، لا يوجد فرق كبير في كل مجموعة)
قيمة P: D9 مقابل D15 = 0.03؛ د = 0.001؛ g = 0.01؛ ي = 0.01.
D9 مقابل D18 ب = 0.003؛ e = 0.001؛ ح = 0.01؛ k = 0.001.
ج مقابل D18 D15 = 0.03؛ f = 0.001؛ أنا = 0.03؛ L = 0.04.

الجدول 3: الفروق في تدفق الدم الشريان الرحمي في الفئران الحوامل.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

بسبب التعديلات الإجرائية واستكشاف الأخطاء وإصلاحها التي كانت مطلوبة في هذه الدراسة، على الرغم من أن هدفنا من تحديد جميع مراحل السفاد دورة في الفئران باستخدام الموجات فوق الصوتية، كنا غير قادر على العثور على أي اختلافات كبيرة. نحن افترض أن هذه الصعوبات قد يكون بسبب دورة السفاد يدوم سوى بضعة أيام في الفئران، خلافا للدورة في المرأة. نحن على ثقة من أن جميع قياسات أجريت في الوقت المناسب بالضبط لتحديد أي اختلافات. ولذلك، نحن تجميع السفاد في مراحل دورة في إلا مرحلتين لتقييم لأي خلافات، ولكن لم يلاحظ أي. كما هو متوقع، وجدنا لا يوجد فرق كبير بين قياسات كل القرن الرحم، مما سيتيح لنا أن تختار أما القرن لإجراء قياسات في المستقبل. دراسات عن آثار استخدام isoflurane على القوارض متناقضة. قد يكون من أحداثه، ولكن فقط إذا كانت تدار بتركيزات مخدر لعدة ساعات أو عدة أيام. في تجربتنا، كان وقت الفحص في الفئران الحوامل أقل من 30 دقيقة، حيث أننا لم نجد أي آثار سلبية في أي الفئران الحوامل أو ذريتهم.

ونود أن وجدت أوجه التشابه أكثر للتقييم بالموجات فوق الصوتية للمسالك التناسلية في المرأة، التي توجد فيها اختلافات اتشوجينيك واضحة بين المرحلة الجرابية، بيريوفولاتوري ومراحل الافرازية، ولكن مثل هذه التغييرات لا ينظر إليها في الفئران نموذج. ويمكن تفسير هذه الحقيقة لأن دورة السفاد الفئران المراحل الأخيرة سوى أربعة أو خمسة أيام. جعل السفاد قصيرة فترات الحمل ومراحل دورة الفئران حيوان مثالي للبحوث في الاستنساخ5. ومع ذلك، هذه الحقيقة قد يكون السبب لماذا ليست هناك فروق كبيرة في قطر للقرن الرحم وسمك بطانة الرحم والمبيض القطر في مراحل السفاد وغير السفاد. من الصعب أن تأخذ القياسات في الوقت المناسب بالضبط للتأكد من الفروق، وعلى الرغم من أخذ القياسات كل يوم، فإننا لم نجد تغييرات كبيرة.

وعلى الرغم من القيود المذكورة أعلاه، فإننا نقترح استخدام الموجات فوق الصوتية لرصد التغيرات في الجهاز التناسلي، بما في ذلك سمك ومورفولوجية للأعضاء التناسلية. ونحن نؤكد هذا استخدام الموجات فوق الصوتية نظراً لسمك بطانة الرحم في الأسبوع 8 عاماً سبراغ-داولي الجرذان مقاسا هيستوباثولوجيكالي (± طبقة واحدة 359.13 مم 49.70) طريق جينغ et al. 7 مشابه للنتائج هنا. وعلى الرغم من تقنيات مختلفة لقياس سماكة بطانة الرحم هيستوباثولوجيكالي وسونوجرافيكالي، حصلنا على نتائج مماثلة. ولو استخدمت السلطة دوبلر ولون دوبلر على الفئران الحوامل لعدة سنوات8،9، كانت هناك بعض التحقيقات قياس تدفق الدم في الشريان الرحمي في الفئران غير الحوامل. الآن مع تطور الموجات فوق الصوتية، ونحن يمكن الاستفادة من هذه التقنية لرصد التغيرات في المسالك التناسلية أثناء كل مرحلة من مراحل مختلفة، حتى في بداية الحمل.

التطبيقات المستقبلية للموجات فوق الصوتية قد تشمل استكشاف إليه زرع الجنين وعلاج بطانة الرحم رقيقة في نماذج حيوانية الفئران. أيضا، من خلال رصد خصائص النامية المسام، يمكننا الحصول على المعرفة أكثر شمولاً حول وظيفتها في نموذج زرع المبيض. حاليا، هناك بعض التحقيقات باستخدام التصوير ثلاثي الأبعاد والتصوير الجزيئي بالموجات فوق الصوتية للجهاز التناسلي في الفئران10، وسوف نطبق هذا الأسلوب في نموذج بطانة الرحم رقيقة في المستقبل.

يمكن أن نخلص إلى استنتاج أن الفأر هو نموذج مناسب لدراسة ديناميات الجهاز التناسلي باستخدام الموجات فوق الصوتية ترانسكوتانيوس بيو-مجهرية، التي لا تتطلب التضحية بالحيوان.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgements

هذا البحث أيده قسم التجريب الحيوان بجامعة مورسيا والتوليد وجامعة "قسم التوليد في مورسيا". ونحن نشكر جميع الفنيين العاملين في سيب (en Biomédicas البحوث التجريبية Centro)، قسم التجريب الحيوان من جامعة مورسيا، الذين تعاونت في هذا المشروع.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Vevo3100 high-resolution in vivo micro-imaging system* Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo integrated rail system including physiological monitoring unit. Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
MX400 Transducter Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
Vevo Lab Software Visual Sonics, inc. www.visualsonics.com/products
HSD: Sprague Dawley SD Envigo, inc. Rat strain
Lubricating Gel General Supply
CIBERTEC CA-EAC20 Anesthesia Trolley System Cibertec S.A  Anesthesia Machine
Ecogel 100 ultrasound gel Eco-Med Pharmaceuticals Inc.
Hair removal lotion (Nair)  General Supply
Isoflurane Esteve Veterinaria Inhalatory anesthesia
* Required software is Vevo software including B-Mode application, pulse wave Doppler application, and vascular strain analysis tools package.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Hunter, R. K. II, et al. Adipose-Derived Stromal Vascular Fraction Cell Effects on a Rodent Model of Thin Endometrium. PLoS ONE. 10, (12), e0144823 (2015).
  2. Wang, H., Dey, S. K. Roadmap to embryo implantation: clues from mouse models. Nat Rev Genet. 7, (3), 185-199 (2006).
  3. Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging. J Vis Exp. (42), (2010).
  4. Lohmiller, J. J., Swing, S. P. Reproduction and Breeding. The Laboratory Rat. 2nd, Elsevier Academic Press. 147-164 (2006).
  5. Jaiswal, R. S., Singh, J., Adams, G. P. High-resolution ultrasound biomicroscopy for monitoring ovarian structures in mice. Reprod Biol Endocrinol. 7, (69), (2009).
  6. Kim, G. H. Murine Fetal Echocardiography. J Vis Exp. (72), (2013).
  7. Jing, Z., Qiong, Z., Yonggang, W., Yanping, L. Rat bone marrow mesenchymal stem cells improve regeneration of thin endometrium in rat. Fertil Steril. 101, (2), 587-594 (2014).
  8. Mu, J., Adamson, S. L. Developmental changes in hemodynamics of uterine artery, utero- and umbilicoplacental, and vitelline circulations in mouse throughout gestation. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, (3), H1421-H1428 (2006).
  9. Anderson, C. M., Lopez, F., Zhang, H. Y., Pavlish, K., Benoit, J. N. Reduced uteroplacental perfusion alters uterine arcuate artery function in the pregnant Sprague-Dawley rat. Biol Reprod. 72, (3), 762-766 (2005).
  10. Hongmei, L., et al. Ultrasound Molecular Imaging of Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 Expression for Endometrial Receptivity Evaluation. Theranostics. 5, (2), 206-217 (2015).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics