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Présenté ici est une méthode simple pour créer une bibliothèque d’insertion haute densité transposon dans Escherichia coli ou Shigella flexneri utilisant la conjugaison bactérienne. Ce protocole permet la création d’une collection de centaines de milliers de mutants uniques chez les bactéries par l’insertion de génomique au hasard d’un transposon.