Teknikken med minimal invasiv tverrgående aorta Constriction i mus for induksjon av venstre ventrikkel hypertrofi

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Målet med denne protokollen er å beskrive trinnvise teknikken for minimal invasiv tverrgående aorta innsnevring (TAC) i mus. Eliminering av intubasjon og ventilasjon som er obligatorisk for brukte standard prosedyre, minimal invasiv TAC forenkler den operative prosedyren og reduserer belastningen satt på dyret.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy. J. Vis. Exp. (127), e56231, doi:10.3791/56231 (2017).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Tverrgående aorta innsnevring (TAC) i mus er en av de vanligste kirurgiske teknikkene for eksperimentell undersøkelse press overbelastning-indusert venstre ventrikkel hypertrophy (LVH) og dens progresjon til hjertesvikt. I fleste rapporterte undersøkelser utføres denne prosedyren med intubasjon og ventilasjon av dyret som gjør det krevende og tidkrevende og legger til kirurgisk byrden til dyret. Målet med denne protokollen er minimal invasiv TAC uten intubasjon forenklet teknikk og ventilasjon av mus. Avgjørende skritt av teknikken er understreket for å oppnå lav dødelighet og høy effektivitet i forårsaker LVH.

Mannlige C57BL/6 mus (10-uke-gamle, 25-30 g, n = 60) var anesthetized med en enkelt intraperitoneal injeksjon av en blanding av ketamin og xylazine. Et spontant puste dyr etter en 3-4 mm øvre delvis sternotomy, et segment av 6/0 silke Sutur tredd gjennom en ligatur hjelp var gått under aortabuen og knyttet over en avstumpet 27-gauge nål. Humbug-opererte dyr gjennomgikk samme kirurgisk utarbeidelse men uten aorta innsnevring. Effekten av prosedyren i inducing LVH bekreftes av en betydelig økning i hjerte/kropp vekt forhold. Dette forholdet er oppnådd ved dager 3, 7, 14 og 28 etter operasjonen (n = 6-10 i hver gruppe og hvert punkt). Bruke våre teknikk, er LVH observert i TAC sammenlignet humbug dyr fra dag 7 gjennom dag 28. Operative og slutten (over 28 dager) dødelighet er begge svært lav på 1,7%.

Avslutningsvis våre kostnadseffektiv teknikken med minimal invasiv TAC i mus bærer svært lav operative og postoperativ dødelighet og er svært effektiv i forårsaker LVH. Det forenkler den operative prosedyren og reduserer belastningen satt på dyret. Det kan utføres enkelt med kritiske fremgangsmåten beskrevet i denne protokollen.

Introduction

De siste årene, studier av hjertesvikt har vært gjennomført i levedyktig dyr modeller1. Sammenlignet med store dyr modeller av hjertesvikt, har små dyr modeller mange potensielle fordeler. Ved lavere kostnader bolig-og vedlikehold er små dyr modeller tilgjengelig for flere forskere på grunn av mindre komplekse fasiliteter som trengs for2.

Musen hjertesvikt modeller tilbyr mange av de samme fordelene som rotte modeller. I tillegg til redusert boliger koster3, musen modeller dra nytte av tilgjengeligheten av relevante transgene og knockout (KO) stammer. Muligheten for celle type-spesifikk, induserbart KO eller transgene strategier gjøre musen et uvurderlig verktøy å studere patogenesen av hjertesvikt og prøve å identifisere romanen terapeutiske regimer3.

Blant musen modeller av hjertesvikt brukt4, tverrstilt aorta innsnevring (TAC) som ble først beskrevet av Rockman5 er den foretrukne modellen å generere press overbelastning-indusert venstre ventrikkel hypertrophy (LVH)1 , 3. den største fordelen ved denne modellen er muligheten til lagdeling av LVH2, selv om venstre ventrikkel remodeling svar på TAC variabel blant annen mus stammer. Spesielt utvikle C57BL/6 mus rask LV dilatasjon etter TAC som forekomme med andre stammer4,6,7.

Den plutselige utbruddet av hypertensjon med TAC forårsaker en ca 50% økning i LV masse innen 2 uker, slik at raskt undersøke aktiviteten av farmakologiske eller molekylær intervensjoner rettet modulerende utviklingen av LVH4. Akutt induksjon av alvorlig hypertensjon av TAC gjengir ikke akkurat den progressive venstre ventrikkel hypertrofi og remodeling observert i klinisk setting aortic stenosis eller arteriell hypertensjon. Likevel, denne modellen brukes av mange etterforskere til å identifisere og endre romanen terapeutiske mål i hjertesvikt4.

Utføre TAC i mus krever større kirurgisk ekspertise enn det som kreves for andre teknikker brukes til å indusere LVH og påfølgende hjertesvikt2. De fleste forfattere utføre denne prosedyren ved intubere og ventilasjon dyr2,8, som gjør denne prosedyren mer krevende og tidkrevende og legger til kirurgisk byrden for dyret. Bare få etterforskere har brukt minimal invasiv TAC i studiet med kort referanse til kirurgisk prosedyre9,10,11.

Målet med denne protokollen er å beskrive trinnvise forenklet og brukervennlig teknikk minimal invasiv tverrgående aorta innsnevring i mus, fremhever de kritiske stadiene av prosedyren. Ved å følge fremgangsmåten nøkkel, kan en enkelt utføre denne teknikken.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

mann C57BL/6J mus (10 uker, 25-30g, n = 60) brukes i denne protokollen. Dyr får human ha lyst fulgt retningslinjene formulert av franske departementet av landbruket og høyere utdanning og forskning, og alle prosedyrer er utført i samsvar med det europeiske fellesskapet rådsdirektiv av 24 November 1986 () 86/609/EEC) og fransk lover. Protokollen ble godkjent av den " Regional komité for dyr eksperimentering CREMEAS " (#2016092816207606).

1. forberedelse til operasjon

  1. opprettholde mus for en uke etter ankomst i dyr anlegget på en 12h / 12h lys/mørke syklus, i standard bur, med mat (for detaljer se tabellen for materiale) og vann tilgjengelig annonse libitum.
  2. På dagen for operasjonen, setter musene i individuelle bur noen minutter før induksjon av anestesi, for å unngå noen ekstra stress til dyret. Sterilisere alle kirurgiske dagen før kirurgi.
  3. Injisere intra-peritoneally en enkelt dose av en blanding av ketamin (51,4 mg/kg) og xylazine (3,3 mg/kg) fortynnet i saltvann (0,9% NaCl).
  4. Kontroller på dybden av anestesi ved fravær av det toe-retrett refleks.
  5. Barbere halsen og brystet av dyret med en kommersielt tilgjengelig barberhøvel og desinfiser barberte området med 70% alkohol.
  6. Plasser dyret supine på en ren cork arbeider pad og fikse paws med teip.

2. Operasjon

  1. Sterile kirurgisk teknikk er brukt gjennom prosedyrene. I et spontant pustende dyr, utføre en langsgående midtlinjen cervical snitt over 10 mm med en 11-blad kniv fra supra sternal hakk i midten av brystet slik at sternum ( figur 1).
  2. Trekke skjoldbrusk ved å sende en 4/0 monofilament polypropylen oppholdet Sutur en Crile tre nål holder og tape den til arbeider pad.
  3. Skille rett ut pre tracheal muskler med mikro-kirurgisk tang å avdekke luftrøret.
  4. Lysbilde forsiktig i glatt-tipped buede mikro-kirurgisk tang med lukket kjever over luftrøret og bak sternum.
  5. Nøye åpner og lukker kjevene av glatt-tipped buet Mikrokirurgiske tang utføre en stump disseksjon under pre tracheal musklene og bak sternum til scenowe pleura.
  6. Forstå akkurat supra kravebenet muskler med glatt-tipped rett mikro-kirurgisk tang og løft forsiktig brystet av dyret.
  7. Skyv den underlegne kjeven bone nipper under sternum og utføre en 3-4 mm øvre delvis sternotomy ( figur 2). Direkte nederst i mini-sternotomy litt mot venstre.
  8. Passerer en 7/0 monofilament polypropylen oppholdet Sutur fra innsiden til utenfor gjennom den andre interkostalrom plassen på hver side av mini-sternotomy bruker en mikro-kirurgisk nål holder. Nær costo-sternal vinkel for å unngå skader på interkostalrom og interne thorax fartøy eller pleura.
  9. Spre sternal kant benytter 7/0 monofilament polypropylen oppholdet suturer på hver side og fikse dem til arbeider pad med teip.
  10. Forsiktig flytte til side pre tracheal musklene, mediastinal fett og thymus bruker glatt-tipped buede Mikrokirurgiske tang for å visualisere aortabuen under strømsparende forstørrelse (2-3 X) ( Figur 3). Ta spesielt vare ikke å berøre eller skade parietal pleura for å hindre pneumotoraks utvikling.
  11. Avsløre bløtvev under aortabuen ved å binde tang ( Figur 4 A) og spre forsiktig kjevene. Forberede en tunnel i bløtvev under aortabuen med andre knytte tang ved forsiktig åpning og lukking jaws i bløtvev.
  12. Pass et segment av 6/0 silke ligatur tredd gjennom en ligatur hjelp ( Figur 4 B) holdt i venstre hånd under aortabuen og hente dem ved å knytte tang i høyre hånd mellom opprinnelse innominate og venstre felles carotis arteriene ( figur 5).
  13. Skjær en 27-gauge nål til en lengde på 5 mm og sløv begge ender ved å trykke dem med en Crile nål holder. Avstumpet 27-gauge nålen ved siden av aortabuen ( figur 6) med glatt-tipped rett mikro-kirurgisk tang og knytte suture tett rundt nålen og aorta mellom høyre innominate og venstre carotis communis arteriene bruker to knytte tang ( figur 7). For å knytte perfekt suture, utføre en første dobbel knute etterfulgt av fire ekstra knop. Kontroller at alle knop er flatt.
  14. Etter hemorroider, fjerne raskt, men forsiktig nålen å oppnå en 0.4 mm diameter innsnevring og en reproduserbare tvers 65-70% aorta innsnevring.
  15. Kontrollere hemostasen av vevet rundt aortabuen, sternal kanter og pre tracheal muskler. Sette resorbable hemostatic gasbind hvor oser av blod er observert. Fjern 7/0 monofilament polypropylen bo suturer brukes for å spre sternal kantene.
  16. Passerer en enkel 6/0 monofilament polypropylen Sutur med en mikro-kirurgisk nål holder fra utenfor til i den venstre andre interkostalrom plassen og deretter fra innsiden utenfor høyre andre interkostalrom plass. Nær costo-sternal vinkel for å unngå skader på interkostalrom og interne thorax fartøy eller pleura.
  17. Bringe sammen sternal kantene ved å binde 6/0 monofilament polypropylen Sutur med en Crile-tre nål holder.
  18. Nær huden med en 5/0 monofilament polypropylen kjører Sutur i ett lag med en Crile-tre nål holder.
  19. Utføre humbug prosedyren identisk til innsnevring operasjonen, men uten å binde en Sutur rundt aorta.

3. Postoperativ recovery

  1. nøye overvåke dyrene. overføre musen til en individuell buret og plassere det i en utsatt posisjon.
  2. Tillat musen for å komme seg under en oppvarming lys til fullt våken (mindre enn 1 time etter inducing anestesi).
  3. For postoperativ analgesi, injisere 0,1 mg/kg av buprenorfin intraperitoneally. Gjenta subcutaneous injeksjoner 0,1 mg/kg av buprenorfin hver 8 h for de tre første dagene som indikert.
  4. Plasserer styres musene i standard bur (maksimalt 3 mus per bur) og minimum 2 mus per bur.

4. Hjertet høste

  1. ved analyse, euthanize musen med en løsning av ketamin 300 mg/kg og xylazine 20 mg/kg i saltvann ved intraperitoneal injeksjon.
  2. Første høste blodet fra de mindreverdige vena cava og deretter gjennom samme linje injisere 5 mL løsning av 2.6 mM EDTA i saltvann.
  3. Høste hjertet, fjerne atria og vekt hjertet (venstre og høyre ventriklene uten atria).
  4. Skille venstre fra den høyre ventricle med septum igjen til venstre ventrikkel del. Veie både vevsprøver og fryse dem i flytende nitrogen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Operative og sent overlevelse
Operativ overlevelse var svært høy, 98,3% (59 av 60) for hele serien (TAC og humbug-opererte dyr). Kun operativ død var en blødning komplikasjon i musen planlagt humbug drift. Postoperativ overlevelse i observasjon løpet av 28 dager var også utmerket, med 98,3% (58 av 59). Bare sent postoperativ død skjedde i TAC mus dag (D) 16, muligens av cardiac opprinnelse.

Validering av teknikken
Presentert teknikken er svært pålitelig og reproduserbar. Den riktige plasseringen av suture mellom høyre innominate og venstre felles carotis arteriene ble bekreftet under vev harvest i alle dyr gjennomgår TAC.

Effekten av teknikken å indusere venstre ventrikkel hypertrofi ble godkjent ved bestemmelse av hjertet vekt/kropp vekt ratio (HW/BW, mg/g) på 3, 7, 14 og 28 dager etter operasjonen. GØ er vekten av venstre og høyre ventriklene uten atria. HW/BW forholdet betydelig økt i bundede sammenlignet humbug gruppene postoperativ D7 (4.9±0.2 mot 4.1±0.05 mg/g, P < 0,01) på, og forble betydelig høyere opp til D28 (5.8±0.3 mot 4.1±0.1 mg/g, P < 0,0001) etter operasjonen (Figur 8). Den observerte økningen i HW/BW forholdet var utelukkende på grunn av en økning i venstre ventrikkel/kropp vekt-forhold (figur 9A) siden høyre ventrikkel/kropp vektforholdet var sammenlignbar mellom TAC og humbug-opererte dyr under hele observasjon periode (figur 9B).

Videre målt vi i venstre ventrikkel vevet mRNA uttrykket av biomarkers av hjerte-hypertrofi som beskrevet tidligere12. På D14, mRNA uttrykk for hjernen natriuretisk protein (BNP), atrial natriuretisk protein (ANP), angiotensin-konvertering enzym (ACE), kollagen 1a1 (Col1a1) og transformasjon av vekstfaktor ß (TGFß) var betydelig høyere i aorta-banded sammenlignet humbug-opererte dyr (Figur 10). Derfor, den observerte venstre ventrikkel hypertrofi validerer effektiviteten av våre TAC teknikk.

Middelverdi og standardfeil mener verdier ble forhold mellom TAC og humbug grupper med enveis ANOVA etterfulgt av Bonferronis innlegg-hoc test for sammenligning av sammenkoblede data.

Figure 1
Figur 1 : Snitt.
Huden er avbildning over 10 mm fra supra sternal hakk til midten av sternum og skjoldbruskkjertelen er trukket med et opphold Sutur. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 2
Figur 2 : Bein nipper.
Dette tillater en kort og presis kutt i beinet for en 3-4 mm øvre delvis overlegen mini-sternotomy. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 3
Figur 3 : Eksponering.
Etter tilbakekalling av sternal kantene med 7/0 bo bildet, av aortabuen, rett innominate og venstre felles carotis arteriene sammen med luftrøret er utsatt. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 4
Figur 4 : A. Tying tang. Disse tang er nødvendig å utføre en mild og sløv disseksjon bak sternum og rundt aortabuen. B. Ligation hjelp. Dette er det viktigste instrumentet for å realisere en delikat og atraumatiske passasje under aortabuen både i TAC og humbug-opererte mus. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 5
Figur 5 : Passage under den aorta arch.
Et segment av 6/0 silke ligatur er gått under aortabuen bruker ligation hjelp og plassert mellom høyre innominate og venstre felles carotis arteriene. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 6
Figur 6 : Forberedelse til hemorroider.
Et lite segment 2-3 mm av en avstumpet 27-gauge nål er plassert over aortabuen. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 7
Figur 7 : Tverrgående aorta innsnevring.
Den silke Sutur er knyttet nålen og aortabuen mellom høyre innominate og venstre felles carotis arteriene bruker knytte tang. Silke i stedet for polypropylen Sutur foretrekkes for den aorta ligation fordi knuten avholder bedre. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 8
Figur 8 : Validering av tverrgående aorta innsnevring.
Induksjon av hjerte-hypertrofi av våre minimal invasiv tverrgående aorta innsnevring er demonstrert av betydelig økning i hjertet kamerahus/vekt-forhold i bundede (striper) sammenlignet med humbug drives (hvit barer) mus. Hjerte-hypertrofi er allerede tilstede på D7 etter operasjonen og øker gradvis frem D28 (n = 6-10 per gruppe. ** P < 0.01, *** P < 0,001, *** P < 0,0001). Dataene presenteres som betyr ± SEM (feilfelt). Bønnse-Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 9
Figur 9 : Venstre (A) og høyre (B) ventrikkel / kropp vekt forhold.
Under observasjon perioden øker venstre ventrikkel/kropp vektforholdet mens høyre ventrikkel/kropp vektforholdet er lik i TAC (striper) sammenlignet med humbug-opererte (hvit barer) dyr. Dette bekrefter venstre ventrikkel hypertrofi uten endring i høyre ventrikkel og styrker validering av våre teknikk (n = 6-10 per gruppe. ** P < 0.01, *** P < 0,001, *** P < 0,0001). Dataene presenteres som betyr ± SEM (feilfelt). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 10
Figur 10 : BNP-mRNA uttrykk.
mRNA uttrykk for hjernen natriuretisk protein (BNP), atrial natriuretisk protein (ANP), angiotensin-konvertering enzym (ACE), kollagen 1a1 (Col1a1) og omforming vekst faktor ß (TGFß), positivt kontroller for hjerte-hypertrofi i aorta-banded (svart bar) VS humbug dyr (hvite linjen) (n = 6 per gruppe) på D14. Uttrykket beregnes som 2(-ΔCt) der kalibrator er mRNA nivået av Gapdh referanse genet. Dataene presenteres som betyr ± SEM (feilfelt). * P < 0,05, ** P < 0.01, *P < 0,001 sammenlignet med humbug gruppe (t-test). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Målet med denne protokollen er å presentere en trinnvis illustrasjon av kirurgiske teknikken for minimal invasiv tverrgående aorta innsnevring i mus. Detaljert teknisk beskrivelse av tverrgående aorta innsnevring i mus har rapportert andre forfattere2,8. Men disse etterforskere utføre kirurgi etter intubasjon og ventilasjon av dyr. Bruk av et ekstra trinn intubasjon-ventilasjon øker kompleksiteten og varigheten av hele prosedyren og global stress dyret er utsatt for. For disse grunner, har begrepet minimal invasiv tverrgående aorta innsnevring fått noen oppmerksomhet. Den minimal invasiv tverrgående aorta innsnevring i mus til å indusere venstre ventrikkel hypertrofi og dens progresjon til hjertesvikt9,10,11. Disse studiene fokuserer på veiene i genesis av venstre ventrikkel hypertrofi og hjertesvikt, men ikke på beskrivelsen av kirurgisk teknikk9,10,11.

I denne protokollen rapportere vi i detaljer forenklet og reproduserbar teknikk minimal invasiv TAC i mus. En dyktig kirurg kan gjøre innsnevring operasjonen på 20 minutter og humbug operasjonen (uten Sutur knytte) på 15 minutter. Under våre innledende teknisk bevis fant vi at innføring av et sentralt virkemiddel, hemorroider hjelp, tillatt en svært lav operative dødelighet av 1,7%. Dette sammenligner gunstig til operativ dødelighet på 4% rapportert av Rockman et. al. 5, på 3,7% av Liao et al. 13 og 2,7% av Stansfield et al14. Videre, observasjon perioden opp til 28 dager, viser en svært lav slutten postoperativ dødelighet av 1,7%. Igjen, dette sammenligner godt til sent dødeligheten rapportert av Rockman et al (10%)5, Liao et al (19%)13 eller Stansfield et al (2,6%)14.

Passasjen under aortabuen er det mest avgjørende skrittet i hele prosedyren. Reproduserbarhet av dette trinnet ikke er beskrevet ved Hu og co-arbeidere som brukte en hjemmelaget wire med en snare affæren skjedde under aorta mellom opprinnelsen av innominate og venstre felles carotis arteriene9, eller ved Tarnavski som plassert i buet Tang fra medial side under stigende aorta å fange 7/0 silke Sutur på motsatt side og flytte den under den aorta2. Hemorroider hjelp brukes i våre teknikken kan en standardisert og reproduserbar manøver med lav risiko aorta tåre.

En annen avgjørende trinn i prosedyren er spenningen på slipset over 27-gauge nålen å redusere effektivt og homogenously lumen av aortabuen. Først bruker vi knytte tang, som å bruke en uniform og reproduserbar spenning på suture rundt aortabuen. Den aktuelle plasseringen av suture kontrolleres under innhøstingen av hjertet og aortabuen. Andersen og kolleger bekreftet den aktuelle plasseringen av bandet ved evaluering av Doppler signalene carotis arteriene både før og etter plassering av aorta bandet11. I sin rapport, ble tilstrekkelig striper godtatt når Doppler hastighet forholdet doblet fra høyre til venstre carotis arteriene11. I vår teknikken, valgte vi å måle effektiviteten av TAC av graden av indusert venstre ventrikkel hypertrofi i striper sammenlignet humbug dyr for å validere prosedyren, siden det ikke nødvendiggjøre en økt varighet av prosedyren eller supplerende anestesi av dyrene. I vår teknikken kontrolleres graden av venstre ventrikkel hypertrofi og aktuelle plasseringen av striper på slutten av eksperimentet. Graden av venstre ventrikkel hypertrofi av våre teknikk sammenligner gunstig med resultatene rapporteres av andre etterforskere på 3 uker etter TAC i mus15. I tillegg lav variasjonen av forholdet mellom hjerte til kroppsvekt i bundede dyr vitner om lav svingninger i spenning på slipset.

Avslutningsvis gjennom unngå intubasjon-ventilasjon gir som presenteres i denne protokollen, våre teknikken med minimal invasiv TAC i mus en pålitelig og reproduserbar modell. Denne modellen reduserer globale belastning satt på dyrene og er tid - og kostnadsbesparende sammenlignet TAC bruker intubasjon-ventilasjon av dyr. Operative og sent dødeligheten i denne fremgangsmåten er svært lav, og gjøre denne teknikken én av metodene valgfrihet for induksjon av venstre ventrikkel hypertrofi i mus.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne har noen interessekonflikt avsløre.

Acknowledgements

Dette arbeidet ble støttet av stipend (N ° 32016) av sveitsiske hjerte Foundation til RT.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Surgical microscope Olympus SZX2-TR30
Razor Rowenta Nomad TN3650FO
Sutures:
Polypropylene 7/0 Ethicon BV-1X
Polypropylene 6/0 BBraun C0862061
Silk 6/0 ligature  FST 18020-60
Polypropylene 4/0 Ethicon 8683
Polypropylene 5/0 Ethicon Z303
Drugs:
Ketamin Merial Imalgène 1000, LBM154AD
Xylazine Bayer Rompun 2%, KP09PPC
Buprenorphine Ceva Vetergesic, 072013
Instruments: 
Bone nippers Fine Surgical Tools 16101-10
Ligation aid Fine Surgical Tools 18062-12
Tying forceps Fine Surgical Tools 18026-10
Needle holder Crile-Wood Fine Surgical Tools 12003-15
Microsurgery forceps  Fine Surgical Tools 11003-12
Microsurgery forceps  Fine Surgical Tools 11002-12
Tissue forceps Fine Surgical Tools 11021-12
Microsurgery needle holder Fine Surgical Tools 12076-12
Microsurgery scissors Fine Surgical Tools 91501-09
Mayo scissors Fine Surgical Tools 14511-15
11-blade knife Fine Surgical Tools 10011-00
RNA extraction and qPCR:
TriReagent Euromedex TR-118-200
Rneasy Mini kit Qiagen 74704
Qubit Fluorimetric RNA assay Fisher Scientific 10034622
RNA 6000 Nano kit Agilent 5067-1511
High Capacity cDNA kit Fisher Scientific 10400745
Taqman Master Mix Fisher Scientific 10157154
Taqman BNP primers Fisher Scientific Mm01255770_g1
Taqman ANP primers Fisher Scientific Mm01255747_g1 
Taqman ACE primers Fisher Scientific Mm00802048_m1
Taqman Col1a1 primers  Fisher Scientific Mm00801666_g1
Taqman TGFb primers Fisher Scientific Mm01178820_m1
Taqman Gapdh primers Fisher Scientific Mm99999915_g1
ABIPrism  Thermocycler Applied Biosystems 7000
Software:
GraphPad Prism GraphPad Prism 7
Animal food
Complete diet for adult rats/mice Safe UB220610R

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Molinari, F., Malara, N., Mollace, V., Rosano, G., Ferraro, E. Animal models of cardiac cachexia. Int. J. Cardiol. 219, (15), 105-110 (2016).
  2. Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods. Mol. Biol. 573, 115-137 (2009).
  3. Verma, S. K., Krishnamurthy, P., Kishore, R., et al. Transverse aortic constriction: a model to study heart failure in small animals. Manual of Research Techniques in Cardiovascular Medicine. Ardehali, H. Wiley, J., & Sons. 164-169 (2014).
  4. Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure. Development of novel therapies, past and present. Circ. Heart Fail. 2, (2), 138-144 (2009).
  5. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88, (18), Erratum in: Proc. Natl. Acad. Sci. USA Page 9907 8277-8281 (1991).
  6. Barrick, C. J., Rojas, M., Schoonhoven, R., Smyth, S. S., Threadgill, D. W. Cardiac response to pressure overload in 129S1/SvImJ and C57BL/6J mice: temporal- and background-dependent development of concentric left ventricular hypertrophy. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 292, (5), 2119-2130 (2007).
  7. Deschepper, C. F., Olson, J. L., Otis, M., Gallo-Payet, N. Characterization of blood pressure and morphological traits in cardiovascular-related organs in 13 different inbred mouse strains. J. Appl. Physiol. 97, (1), 369-376 (2004).
  8. Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. T. Transverse aortic constriction in mice. J. Vis. Exp. (38), April 21 (2010).
  9. Hu, P., Zhang, D., Swenson, L., Chakrabarti, G., Abel, E. D., Litwin, S. E. Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 285, (3), 1261-1269 (2003).
  10. Faerber, G., et al. Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: Reduced peroxisome proliferator-activated receptor ϒ coactivator levels and mitochondrial dysfunction. J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 141, (2), 492-500 (2011).
  11. Andersen, N. M., Tang, R., Li, L., Javan, H., Zhang, X. Q., Selzman, C. H. IKK-β inhibition prevents adaptive left ventricular hypertrophy. J. Surg. Res. 178, (1), 105-109 (2012).
  12. Nemska, S., Monassier, L., Gassmann, M., Frossard, N., Tavakoli, R. Kinetic mRNA profiling in a rat model of left ventricular hypertrophy reveals early expression of chemokines and their receptors. PLoS ONE. 11, (8), 0161273 (2016).
  13. Liao, Y., et al. Echocardiographic assessment of LV hypertrophy and function in aortic-banded mice: necropsy validation. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 282, (5), 1703-1708 (2002).
  14. Stansfield, W. E., et al. Characterization of a model to independently study regression of ventricular hypertrophy. J. Surg. Res. 142, (2), 387-393 (2007).
  15. Beetz, N., et al. Ablation of biglycan attenuates cardiac hypertrophy and fibrosis after left ventricular pressure overload. J. Mol. Cell. Cardiol. 101, December 145-155 (2016).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics