Cystometric og ekstern urethrae Sphincter målinger i vågen rotter med indopereret kateter og elektroder giver mulighed for gentagne målinger

Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Denne protokol først beskrives den kirurgiske procedure af permanent implantation af en urinblæren kateter kombineret med eksterne urethrae sphincter elektroder, og andet, måling af urinblæren og eksterne urethral funktion lukkemuskel i implanterede vågen dyr.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Foditsch, E. E., Roider, K., Sartori, A. M., Kessler, T. M., Kayastha, S. R., Aigner, L., Schneider, M. P. Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements. J. Vis. Exp. (131), e56506, doi:10.3791/56506 (2018).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Lavere urinvejsinfektion funktion vurderes primært ved cystometric blære funktion analyse i gnavere. Konventionelle cystometries er normalt udføres som terminal analyse under urethan anæstesi. Det er velkendt, at bedøvende medicin kan påvirke blærefunktion. Derfor, formålet med denne teknik er at udføre cystometric målinger af urinblæren og eksterne urethrae sphincter i let behersket vågen rotter. Til dette formål, er en blære kateter implanteret i blæren dome. Efterfølgende to elektroder er implanteret bilaterale til eksterne urethrae sphincter og en jorden elektrode er syet til en ikke-responderende skeletmuskulatur. Blæren kateter og tre elektroderne er endelig tunnelforbindelsen subkutant til halsregionen og fastgjort til en sele. Med denne teknik, kan de nedre urinveje måles på flere tidspunkter i den samme dyr at vurdere nedre urinveje funktion. Den vigtigste anvendelse af denne teknik er opfølgningen af samtidige urinblæren og eksterne urethrae sphincter funktion i vågen sund rotter og efter induktion af en sygdom eller skade. Desuden kan efterfølgende nedre urinveje overvågning udføres under evaluering af sygdom/skade og til at overvåge behandlingen effektivitet.

Introduction

For at analysere urin opbevaring og tømme funktion og dysfunktion, har de fleste undersøgelser brugt gnavere modeller. Gennem fortløbende aktivering af reflekser, er vandladning produceret. Koordinering af disse reflekser er afgørende for effektiv tømme1. Cystometric optagelse teknikker give værdifulde redskaber til at analysere funktionen urinblæren under sin neurale kontrol1.

De fleste konventionelle cystometries hos rotter er udført som en enkelt afsluttende analyse i anæstesi, hovedsagelig urethan2, og fokusere på urinblæren udelukkende. Men i nogle patologier ligesom neurogen nedre urinveje dysfunktion (NLUTD), urinblæren, men også blære outlet, ydre urethrae sphincter, er dysfunktionel3,4. Dette gør NLUTD vanskelig at opfølgning, hvis det kun blæren er undersøgt i et enkelt cystometric måling. For at få pålidelige resultater, der er sammenlignelige med mennesker, er det nødvendigt at præcist at måle både urinblæren og eksterne urethrae sphincter funktion og dets samspil2. Derudover er det afgørende at udføre funktionelle analyser i vågen rotter som anæstesi er meget sandsynligt, at ændre blære funktion2,5,6. En god cystometric optagelse i vågen dyr er grundlaget for identifikation af blære funktion og fejl7.

De små dyr cystometry station bruges (fxCatamount cystometry station (CCS)) er en enhed til at udføre cystometric analyser i vågen smådyr8. Ved hjælp af en permanent blære kateter og implanteret eksterne urethrae sphincter elektroder, kan gentagne målinger foretages over en længere tid perioder2. Således CCS giver et værdifuldt redskab for ikke-neurogen og NLUTD evalueringer i de gnaver model, hvor patomekanismer kan ændre i løbet af kort eller mellemlang sigt opfølgning. Denne metode indeholder desuden en artefakt-reduceret cystometric analyse ved hjælp af en Tilbageholderen for at gennemføre blære målinger i vågen rotter.

I dette papir beskriver vi de kirurgiske tilgang til permanent implantat en blære kateter og eksterne urethrae sphincter elektroder, sammen med cystometric målinger i vågen rotter.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle procedurer, der beskrives her blev godkendt af den østrigske statslige etiske komité for dyreforsøg (yder støtten Bundesministerium für Wissenschaft, Forschung und Wirtschaft, WF / V /3b) og var i overensstemmelse med Foreningen for vurdering af laboratorium Dyrs pleje retningslinjer for brug af dyr. Rotter anvendes for denne fremgangsmåde var kvindelige, 12-uge-forhenværende Lewis rotter. Brug sterile instrumenter overalt i protokollen.

1. materielle forberedelse

  1. Fremstilling af kateteret
    1. Skære kateter (polyethylen slanger PE-50) i passende længde (20-25 cm) passer til størrelsen på dyret.
      Bemærk: Lad nogle ekstra længde for tunnelføring og nemmere håndtering.
    2. Flare ene ende med en lettere at få en rundet spids. Check for endelige passende åbning og stumpe ende af kateteret.
    3. Placer en 2 mm lange silikone slange over kateteret, indtil det ligger lige under blussede udgangen.
  2. Fremstilling af elektroderne
    1. Forberede en Teflon-belagt stål wire på 20-25 cm (passende længde afhængig af størrelsen af dyret).
    2. Forberede en sølv wire 2 cm i længde og sno enderne indtil en lille loop forbliver. Strip off 2 mm af Teflon isolering i den ene ende. Lodde den snoede sølvtråd afslutning på den blottede ståltråd.
    3. Anvende konventionelle neglelak på zonen belægning. Forbered 4-mm lang polyethylen slanger over regionen belagt, og forsegle slutningen ved at anvende varme til at komprimere pincet.

2. animalske forberedelse

  1. Anæstesi
    1. Brug en passende anæstesi cocktail godkendt af institutionen for en generel anæstesi.
    2. Forberede bedøvelse cocktail med medetomidine (0,15 mg/kg), midazolam (0,08 mg/kg) og fentanyl (0,01 mg/kg) og injiceres intramuskulært ved en 1 mL sprøjte med en 27 Gauge kanyle.
  2. Kirurgisk forberedelse
    1. Barbere i maven med en elektrisk barbermaskine, herunder genital regionen og ryg region på niveau med scapulae.
    2. Desinficere abdominal og hals områder med 70% ethanol første og derefter 3 skiftevis scrubs med povidon-jodopløsning.

3. blære kateter Implantation

  1. Udføre en lav midterlinje laparotomi på niveau af den tredje og fjerde sut (ca. 2 til 2,5 cm i længden) ved hjælp af en skalpel for huden og en kirurgisk saks til den mavemuskel.
  2. Udsætte blæren ved at vejlede den abdominale væg i Kranio-caudale retning og ordne det i denne position ved at placere på bagsiden af en pincet bag blæren til undgå re positionering.
  3. Placer en pung-streng sutur omkring blære kuplen ved hjælp af en 6-0 ikke-resorberbare monofilamenter sutur med en kegleformet spids nål.
  4. Incise blære dome indeni pung-streng, enten af skalpel tip eller 18G nåle, indsætte blære kateter (se protokollen trin 1).
  5. Indsæt kateteret udfyldes på forhånd med steril fysiologisk 0,9% natriumchlorid løsningen og forsigtigt trække blære kateter indtil blussede åbning af kateteret er placeret lige under blæren dome.
  6. Sikre pung-streng suturen omkring kateteret og gøre et stop-sutur omkring kateteret organ for yderligere fiksering.
  7. Kontrollere for lækage via blære kuplen af langsomt fylde i blæren via kateteret med steril fysiologisk 0,9% natriumchlorid løsning.

4. urethrae Sphincter elektrode Implantation

  1. Forberede implantation tre elektroder (se protokollen trin 1).
  2. Markere én elektrode med en farvet permanent filtpen til yderligere identifikation af den fremtidige null elektrode. Desinficere elektroder med 70% ethanol.
    Bemærk: Katetre er ikke egnet for varme og kemiske sterilisation procedurer. I stedet kold sterilisere elektroder i 24 timer.
  3. Udvide den abdominale snit ved kirurgisk saks op til skambenet, men ikke skære pubica.
  4. Identificere urinrøret og oprette en stump lomme ved hjælp af fine pincet på begge sider af urinrøret, men undgå traumer af fartøjer eller nerver.
  5. Identificere passende fedt poser tæt på urinrøret i dette vindue.
  6. Lave elektroder bilateralt til passende fedt posen ved hjælp af 6-0 ikke-resorberbare monofilamenter sutur.
    Bemærk: Den endelige holdning til elektroderne skal være bilaterale ved midten region af urinrøret.
  7. Binde de to elektroder sammen med 6-0 ikke-resorberbare monofilamenter sutur.
  8. Sutur den markerede null elektrode til bugvæggen muskler inden for afstand af urinrøret. Binde alle tre elektroder sammen med en enkelt sutur.

5. tunneling

  1. Lave en lille hud snit mellem scapulae til tunnelføring.
  2. Tunnel elektrode ledninger til halsen og gøre et afsluttende check for korrekt placering, og kontrollere positionen for elektroder efter tunneling.
  3. Tunnel blære kateter til scapulae niveau - opmærksomme på blæren mens tunneling kateter for at undgå blære vride. Til dette formål, skal du holde kateteret lige før ind i blæren kuppel for at undgå vrid i blæren.
  4. Lukke mavemuskler ved kontinuert eller afbrudt sting med en 4-0 polyfilament resorberbare sutur. Lukke hud indsnit ved afbrudt madras suturer.
  5. Strække dyret sin fulde længde skal have maksimal udspilning af elektrode ledninger og kateter.
  6. Fix kateter og elektrode ledninger af et sunket i sutur til skulder muskler.
  7. Lukke huden af en enkelt søm med 4-0 sutur.

6. sele montering

  1. Passer en sele til dyret ved at trække selen over hovedet på dyret og trække forbens til en slutstilling mellem to silikone strimler. Kontrollere sele størrelsen af vægten af dyr forud for kirurgi med forhandleren.
  2. Tunnel blære kateteret til det centrale hul i sele og elektroder gennem de skræddersyede hul af en boremaskine justeres til størrelsen af elektroden ledninger.
  3. Justere selen ved at trække silikone strimler. Justere selen, så det ikke er for løs, men sikre nogle rum forbliver for at bevare den bevægelige evne af rotten.
  4. Brug et kabel rem til at fastsætte silicium strimler.
  5. Skæres længden af blæren kateter til 3 cm over seletøjet, tilsluttes 23-G proppen, og til sidst lave den til seletøjet.

7. fremstilling af elektrode-stik

  1. Forberede tre små heat shrink rør (en anden farve til den null elektrode). Forbered to yderligere heat shrink rør i en passende større størrelse.
  2. Forkorte længden af elektrode ledningerne til et optimal længde til at være i stand til at sætte senere til den kvindelige stik uden at være alt for løs eller for kort. Strip off Teflon isolering af de tre ledninger (ca. 2 mm), og drej stålwirer til en streng.
  3. Placer store heat shrink rør over alle ledninger, placere de lille rør individuelt for alle tre ledninger, og bruge farvede røret til den null elektrode.
  4. Lodde elektroder til den mandlige 3-forbindelse-stik. Placer den null elektrode i midten, og skrumpe området tre små individuelle rør ovenstående loddet.
  5. Krybe først af de større rør for enden af de enkelte tube endelser og den endelige store tube til grænsen hanstik.
  6. Tilslut den hanstik til kvindelige stikket fast til seletøjet, og fix med et stykke tape yderligere sikkerhed.

8. efter operationen pleje

  1. Ren kirurgiske områder og desinficere med povidon-jod.
  2. Placere dyret på en varmepude indtil vågen og give 0,9% natriumchlorid løsning for vand substitution, baseret på retningslinjerne for lokale dyrs pleje under og efter operationen.
  3. Administrere analgetika (meloxicam 1 mg/kg) og antibiotika (sulfadoxinum 200 mg, trimethoprimum 40 mg, 15 mg/kg) en løsning ved kombineret injektion subkutant. To gange dagligt, give analgetika (morgen og aften), og en gang om dagen give antibiotika, for fem efterfølgende dage.
  4. Fortsætte med antibiotika på samme dosis over hele opfølgningsperioden på to til tre injektioner pr. uge.
  5. Kontroller dagligt for passende montering af selen og udføre en kirurgisk markinspektion, især af halsregionen. Justere selen, hvis det bliver for stram ved forsigtigt at trække på silikone strimler.
  6. Skylle kateteret regelmæssigt en gang om ugen til at undgå en blokade.

9. forberedelse til Cystometric måling

  1. Udføre de første cystometric målinger efter seks postoperative dage.
    Bemærk: Tidligere målinger kan påvirkes af smertestillende medicin og/eller urothelial irritation på grund af kateter implantationen.
  2. Drej på hovedafbryderen, computer og EMG-forstærker.
  3. Fyld sprøjten pumpe med stuetemperatur varmede 0,9% natriumchlorid. Åbn trevejs-stik én efter den anden i en faldende måde, startende fra pumpen, og skylle rørene.
    Bemærk: Tjek omhyggeligt for resterende luftbobler, som boblerne vil ændre cystometric målinger.

10. kalibrering

  1. Start program uroflowmeter software og gå til kalibrering.
  2. Luk trevejs-stik til at pumpe og dyr.
  3. Åbne ventilen til den tilsluttede manometer og tryk på nul i programmet.
  4. Justere trykket på trykmåleren til 100 mmHg, og tryk på 100 mmHg knappen i programmet. Tryk på Bekræft for at gemme justeringen kalibrering. Vinduet lukkes automatisk.
  5. Lukke ventilen til trykmåleren og åbne tre-vejs stik fra pumpen til dyret til at være klar til måling.

11. dyr Database (dyr DB)

  1. For at registrere dyr, Giv dyret en kortfattet ID.
  2. Angiv yderligere oplysninger, såsom dato LAF, start af behandling, kateter implantation, eksperimentelle gruppe og fødselsdato af dyret.
  3. Endelig log data, skal du trykke på "Gem post" og gemme til fil.

12. måling indstillinger før optagelse

  1. Start programmet ved at trykke på start-knappen.
  2. Vælg dyret og tryk på Tara skala og nul pres.
    Bemærk: Vær opmærksom mens placere dyret i Tilbageholderen, således at ingen kablet sidder fast, da dette kan føre til en fjernelse af en ledning af EMG-kablet.

13. animalske forberedelse

  1. Fjerne kateter plug og fjern EMG stikket fra seletøjet.
  2. Sætte rotten i Tilbageholderen. Luk Tilbageholderen og låse selen med en klemme.
  3. Få kateter og EMG stik ud af Tilbageholderen.
  4. Sted Tilbageholderen i catamount enhed. Sætte halen gennem røret og fastgør røret med tape for at undgå bevægelser.
  5. Tilslut EMG hanstik til optagelse kvindelige EMG stikket.
  6. Tryk på nul Tryk endnu en gang og derefter slutte kateteret til påfyldning/optagelse tube. Kontroller trykket i softwaren.
    Bemærk: Pres skal være positiv, omkring 5-10 cm H2O ved baseline. Hvis trykket er negative, afbryde kateter fra kanylen, tryk på nul pres, og derefter igen tilslutter kateteret.

14. optagelse

  1. Hvis kateteret og EMG kabel er tilsluttet, skal du trykke på køre pumpen og optagelse.
  2. Tilpasse påfyldning hastighed til de eksperimentelle behov i μL/min.
  3. Bemærk tidspunktet optagelse starter og stuetemperatur i logbogen.
  4. For at stoppe cystometric optagelse, stop pumpen ved at trykke på køre pumpen og trykke på optage igen.
    Bemærk: Pumpen vil være slukket og grønt lys på pumpen er slukket.
  5. Afbryde kateteret og brug 23G prop plug til at lukke kateter slutningen. Afmonter EMG-kablet.
  6. Åbner forsiden af Tilbageholderen og guide rotten ud af Tilbageholderen.
    Bemærk: Håndtere rotte omhyggeligt, og overvåge ledninger for at undgå enhver fastlåsning af kabler.
  7. Sæt kateteret tilbage i selen. Re-stik i EMG stikket til seletøjet, og sætte et stykke tape rundt i stikket.
    Bemærk: Hvis dyret har en patologisk tilstand, nedre urinveje, express blære enden manuelt for at undgå overdistention af blæren.
  8. Læg dyret tilbage til sit hjem bur.
  9. Luk programmet ved at trykke på exit.
  10. Ren Tilbageholderen og bægerglas.
  11. Lukke de tre-vejs stik til pumpen og den animalsk outlet.
  12. Luk computeren, EMG enhed og system via hovedafbryderen.
    NOTE: Data gemmes i en separat mappe "Logførte data" med filen undermappe af målte rotte-ID. Enkelt optagelser er sorteret i enkelt rotte ID mapper efter dato.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

En skematisk viser processen med vågen cystometric målinger er præsenteret i figur 1 og den indre anatomi til blæren kateter implantation er vist i figur 2. Operationen tager ca 2 h. Postoperative analgesi og antibiotika, som beskrevet i protokollen, omfatter smerte og infektioner over fem dage efter operationen. Ingen tegn på nogen smerte blev bemærket, derefter. To gange daglig omhyggelig inspektion af maven, abdominal sutur og hals sutur er nødvendige for at opretholde den dyresundhed. Sele kontrol (position og trykken) bør gennemføres én gang dagligt i de første fem dage og senere på en regelmæssig basis. Abdominal suturer kan fjernes på de 10th postoperative dag.

Vi bruger bløde, ikke-træagtige sengetøj til de første 10 dage efter operationen for at undgå betændelse. Sengetøj er ændret mindst to gange om ugen for at fremme lavere risiko for betændelse. Dyrene holdes i enkelt boliger, som gruppe boliger øger risikoen for seletøj, kateter eller elektrode kabel bidende af bur kammerater.

Kateteret skal tømmes mindst én gang om ugen, enten i løbet af en cystometric måling eller ved gennemskylning kateter manuelt med 1-3 mL steril 0,9% natriumchlorid med en lav infusion hastighed (figur 3). Almindelig antibiotika dækning af dyr yderligere reducerer risikoen for infektioner og urin sten formation. Overvågning væske optagelsen er et yderligere vigtigt punkt at forhindre urin sten formation. Citronsyre i lave koncentrationer (2-3%) administreres enten intravesically via kateteret eller til drikkevand til at forhindre calculi dannelse.

Succesraten for den kirurgiske procedure, samt vedligeholdelse af blæren kateter og elektroder intakt, er omkring 80%. I de resterende 20% af tilfældene var det største problem udstationering af elektrode ledningerne fra stikket. En omhyggelig fastgørelse af elektrode ledninger til seletøjet er således afgørende at undgå elektrode tab.

Cystometric målinger er normalt gøres indtil tre på hinanden følgende tømme cyklusser registreres pr. maaling, som tager mellem 20-40 min, afhængig af angsten og håndtering status af rotten. Den første cystometric Måling sker normalt en uge efter kateter implantering.

Læs ud hovedparametre for cystometric optagelse er baseline pres, tærskel pres, maksimale detrusor pres, nedlagte volumen, gennemsnitlige flow, tømme tid, gennemsnitlige pres, overholdelse af urinblæren, og samtidig læse ud af det eksterne urethrae sphincter EMG-aktivitet (figur 4).

Træk cystometric målinger i opfølgningsperioden kan udføres i mindst fire uger efter operationen. Hvis kateteret linje er jævnligt skylles, er kateter blokering ikke noget problem. Regelmæssig håndtering og optisk kontrol af rotter skal foretages under hele opfølgningsperioden.

Hvis kateteret er snoet eller blokeret, vil intravesikal pres stige lineært op til meget høje tryk (over 100 cm H2O). I dette tilfælde påfyldning bør stoppes og synlige kateter slutningen skal kontrolleres for kinke. Hvis ikke kinke ses, skal kateteret kontrolleres for en blokeret outlet. Til dette formål, kateteret kan være skyllet manuelt via kateteret. Hvis væsken ikke let flyder ind i blæren, kan trække tilbage og fremad let blive retsforfulgt. For et sidste forsøg, kan en sure rødmen løsning (citronsyre 2-3%) bruges til at forsøge at klare regionen blokeret i kateteret. Denne løsning kan have en højere chance for at opløse blokaden, endnu, blæren vil være irriteret efter vellykket rødmen og på hinanden følgende målinger foretages kun to dage efter skylning med sure løsning. Hvis ingen væske kan tømmes ind i blæren, kateteret er permanent blokeret og ingen yderligere målinger er muligt, og dyret er tabt for opfølgning.

Figure 1
Figur 1: skematisk tegning af cystometric målinger i vågen rotter. Dette tal er blevet tilpasset fra2. (en) Illustration af Urodynamiske setup. (b) Lab station for Urodynamiske undersøgelser. (c) Implantation af eksterne urethrae sphincter Elektromyografi elektroder lateral til urinrøret, intraoperativ visning. (d) udsigt over blæren kuplen på tidspunktet for blære kateter implantation, intraoperativ visning. (e) efter implantation af elektroder og kateter, rotte vil være udstyret med en sele til sikkert gemme stik og stik. (f) menneskers urodynamics. Numre i b-e vedrører forklaringen i en. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 2
Figur 2: indre anatomi af rotte til blæren kateter implantation. Dette tal er blevet ændret fra8.

Figure 3
Figur 3: Flushing af kateteret linje af en rotte. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 4
Figur 4: Urodynamiske tracings i dyrets 12 dagen efter kateter implantation. (en) repræsentant Urodynamiske sporing fra en naiv rotte. Øverst er vist blære pres sporing, i midten udskilles urin vægt sporing og bunden eksterne urethrae sphincter EMG-sporing. (b) Zoom vindue fra en naiv dyr 60 s, taget fra (en). En vigtig bemærkning er, at der er mindre eksterne urethrae sphincter EMG aktivitet under annullering end før og efter annullering. Øverst er vist blære pres sporing, i midten udskilles urin vægt sporing og bunden eksterne urethrae sphincter EMG-sporing. Nederst, er en varme plot vist med tid matchede frekvens spektrogram (svarende til frekvens for den nuværende tidspunkt). Rød repræsenterer en høj effekt og blå repræsenterer lavt strømforbrug. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Denne protokol beskriver den kirurgiske procedure af en permanent kateter og urethrae sphincter elektroder implantation og cystometric optagelse teknik i vågen, let behersket rotter, herunder både den samtidige analyse af urinblæren og eksterne urethrae sphincter.

Kritiske trin under kirurgi er omhyggelig implantation af blæren kateter, undgå lækage og omfattende manipulation. Desuden er en præcis implantation af elektroder bilaterale til urethral eksterne sphincter afgørende for en sondemåling af eksterne urethrae sphincter. Et tæt inspektion af felterne kirurgisk efter implantation er også afgørende for at opretholde den dyresundhed. Antibiotika dækning under opfølgning hjælper med at forebygge infektioner langs linjen kateter, såvel som forekomsten af urinvejsinfektioner.

Under cystometric måling bliver håndteret rotte roligere og mere afslappet end en rotte, som ikke blev behandlet tidligere. Således kan cystometric optagelse afvige i resultatet heraf. Desuden, Tilbageholderen tilbyder rotten en begrænse rummet med en mørk forenden til at føle sig bedre tilpas og nedsætter stressniveauet. Andre offentliggjorte vågen cystometric målinger, kan rotter frit flytte i måling buret. Men dette bærer en højere artefakt risiko under målingen og kan øge tid for optagelse, og også stressniveauet i dyret. I sund rotter, kan optimal cystometric måling replikeres på flere målepunkter tid under opfølgning. Under målingen cystometric er problemer med almindeligt forekommende bøjet katetre eller en fejl i trinvis overledning af protokollen. Hvis der opstår tekniske eller software fejl, er en ny initialisering af cystometric måling og trinvis gentagelse af protokollen stærkt anbefales til fejlfinding.

Begrænsninger af denne teknik er indbyrdes animalske variation af cystometric optagelser, strukturelle ændringer i urinblæren væv på grund af den implanterede kateter, som kunne hæmme histologiske eller molekylære biologiske undersøgelser af dette væv, og enkelt opstaldning af dyrene under follow-up-perioden. Desuden, denne teknik er kun blevet testet i hunrotter, anvendelighed og udfald for mandlige rotter har endnu ikke blevet undersøgt.

Den største fordel ved denne teknik er samtidig måling af urinblæren og de eksterne urethrae sphincter samt indstillingen vågen måling. Således, en mere translationel undersøgelse af de nedre urinveje hos vågen dyr er tilgængelige, i forhold til den indre, terminal cystometric analyse i anæstesi5,6,9,10. Desuden, med denne tilgang, progression af en nedre urinveje dysfunktion eller patologi kan følges i samme dyr over tid, samt behandling succeser. Især, kan NLUTD undersøges i et tidsforløb, som ikke var mulig i fuldt omfang med de fælles cystometric teknik2.

Sammenfattende anvendes præsenteres kirurgi og cystometric måling til flere, artefakt-reduceret analyser af de nedre urinveje, herunder samspillet af urinblæren og de eksterne urethrae sphincter i vågen rotter.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne har ikke noget at oplyse.

Acknowledgements

Forfatterne har ikke nogen anerkendelser.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Polyethylene tubing PE 50 Becton Dickinson 427411 Catheter
Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c) Ethicon EH7403H Suture
Teflon coated steel wire Cooner wire AS631 Electrode material
Silver wire 0.250 mm World Precision Instruments AGW1030 Electrode material
Rotilabo - PVC tube Carl Roth 97241 Harness
Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c) Ethicon V4940H Suture
Quick Connect Single Harness SAI Infusion Technologies QCH-23CW Harness
Shrinking tubes ChiliTec 17894 Electrode soldering
Soldering wire Pb60 Sn40 Stannol LD0029 Electrode soldering
Fluxing agent 157 Castolin Eutectin 157 0150 Electrode soldering
Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box Preci-dip 801-87-050-10-001101 Electrode soldering
Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box Preci-dip 890-18-003-10-001101 Electrode soldering
Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis) Catamount Research and Development Inc. CAT-CYT-R
Differential amplifier with active headstage AD instruments DP-311 EMG amplifier
Restrainer Medium size for rats 200-300 g emka Technologies HLD-RM
Uro Dyn Software Zürich of University MTA-based
Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age Charles River, Sulzfeld, Germany animals

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. Rodent models for urodynamic investigation. Neurourol Urodyn. 30, 636-646 (2011).
  2. Schneider, M. P., et al. A novel urodynamic model for lower urinary tract assessment in awake rats. BJU Int. 115, Suppl 6. 8-15 (2015).
  3. Cruz, C. D., Cruz, F. Spinal cord injury and bladder dysfunction: new ideas about an old problem. Scientific World Journal. 11, 214-234 (2011).
  4. de Groat, W. C., Yoshimura, N. Plasticity in reflex pathways to the lower urinary tract following spinal cord injury. Exp Neurol. 235, 123-132 (2012).
  5. Matsuura, S., Downie, J. W. Effect of anesthetics on reflex micturition in the chronic cannula-implanted rat. Neurourol Urodyn. 19, 87-99 (2000).
  6. Cannon, T. W., Damaser, M. S. Effects of anesthesia on cystometry and leak point pressure of the female rat. Life Sci. 69, 1193-1202 (2001).
  7. Patra, P. B., Thorneloe, K. S. Enhanced sensitivity to afferent stimulation and impact of overactive bladder therapies in the conscious, spontaneously hypertensive rat. J Pharmacol Exp Ther. 338, 392-399 (2011).
  8. Herrera, G. M., Meredith, A. L. Diurnal variation in urodynamics of rat. PloS One. 5, e12298 (2010).
  9. Chang, H. Y., Havton, L. A. Differential effects of urethane and isoflurane on external urethral sphincter electromyography and cystometry in rats. Am J Physiol Renal Physiol. 295, F1248-F1253 (2008).
  10. Yaksh, T. L., Durant, P. A., Brent, C. R. Micturition in rats: a chronic model for study of bladder function and effect of anesthetics. Am J Physiol. 251, R1177-R1185 (1986).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics