Cystometric og eksterne urinrøret Sphincter målinger i våken rotter implantert kateter og elektroder slik at gjentatte målinger

Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Summary

Denne protokollen først beskriver kirurgiske prosedyren for permanent implantering av et urinblæren kateter kombinert med eksterne urinrøret sphincter elektroder, og andre, måling av funksjonen i urinblæren og urinrøret ekstern lukkemuskelen i implantert våken dyr.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Foditsch, E. E., Roider, K., Sartori, A. M., Kessler, T. M., Kayastha, S. R., Aigner, L., et al. Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements. J. Vis. Exp. (131), e56506, doi:10.3791/56506 (2018).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Lavere urin skrift funksjonen vurderes hovedsakelig med cystometric blæren funksjon analyse i gnagere. Konvensjonelle cystometries utføres vanligvis som terminal analyse under uretan anestesi. Det er velkjent at bedøvende narkotika kan påvirke blærefunksjon. Derfor er målet med denne teknikken til å utføre cystometric målinger av urinblæren og eksterne urinrøret sphincter i lett behersket våken rotter. For dette formålet, er en blære kateter implantert i blæren kuppelen. Deretter to elektrodene er implantert bilaterale til den eksterne urinrøret sphincter og en bakken elektrode Burrows til en utilgjengelig skjelettmuskulatur. Blæren kateter og tre elektrodene er endelig tunnelerte subcutaneously til nakken regionen og festet til en sele. Med denne teknikken, kan lavere urinveiene måles på flere tidspunkt i samme dyr å vurdere lavere urin skrift-funksjonen. Den viktigste anvendelsen av denne teknikken er oppfølgingen av samtidige urinblæren og eksterne urinrøret sphincter funksjon i våken sunn rotter og etter innledningen av en sykdom eller skade. Videre kan påfølgende lavere urin skrift overvåking utføres under evaluering av sykdom/skaden og overvåke behandling effekt.

Introduction

Analysere urin oppbevaring og renons funksjon og dysfunksjon, har de fleste studier brukt gnager modeller. Gjennom sekvensiell aktivering av reflekser, er micturition produsert. Samordning av disse reflekser er avgjørende for effektiv renons1. Cystometric-brenning gir verdifulle verktøy for å analysere funksjonen urinblæren under dens nevrale kontroll1.

De fleste konvensjonelle cystometries i rotter er gjort som en enkelt, endelig analyse i anestesi, hovedsakelig uretan2, og fokus på urinblæren utelukkende. Men i noen pathologies som neurogenic lavere urin skrift dysfunksjon (NLUTD) er ikke bare urinblæren, men også blæren utløpet, den eksterne urinrøret sphincter, dysfunksjonelle3,4. Dette gjør NLUTD vanskelig oppfølging, hvis bare blæren undersøkes i en enkelt cystometric måling. For å få pålitelige resultater det er sammenlignbare til mennesker, er det viktig å måle både urinblæren og funksjonen ekstern urinrøret sphincter og dens interaksjoner2. Videre er det avgjørende å utføre funksjonelle analyser i våken rotter som anestesi er svært sannsynlig å endre blæren funksjon2,5,6. En god cystometric i våken dyr er grunnlaget for identifikasjon av blæren funksjon og feil7.

Små dyr cystometry stasjonen brukes (f.eksCatamount cystometry stasjon (CCS)) er en enhet for å utføre cystometric analyser i våken smådyr8. En permanent blæren kateter og implantert eksterne urinrøret sphincter elektroder, kan repeterende målinger utføres over en lengre tid perioder2. Dermed CCS gir et verdifullt verktøy for ikke-neurogenic og NLUTD evalueringer i gnager modellen, der pathomechanisms kan endres under kort eller mellomlang sikt oppfølging. I tillegg inneholder denne metoden en gjenstand-reduserte cystometric analyse ved hjelp av en restrainer for å gjennomføre blæren målinger i våken rotter.

I dette papir beskriver vi kirurgisk tilnærming for å permanent implantat en blære kateter og eksterne urinrøret sphincter elektroder, sammen med cystometric mål i våken rotter.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle prosedyrene som er beskrevet her ble godkjent av den østerrikske statlige etikk for Forsøksdyrutvalget (Bundesministerium für Wissenschaft, Forschung und Wirtschaft, WF / V /3b) og var i samsvar med foreningen for vurdering av laboratorium Dyr omsorg retningslinjer for dyr bruk. Rotter brukes for denne tilnærmingen var kvinnelige, 12-uke-gamle Lewis rotter. Bruke sterilt instrumenter i protokollen.

1. materialet forberedelse

  1. Produksjonen av kateter
    1. Kuttet kateter (polyetylen rør PE-50) i passende lengde (20-25 cm) passer til størrelsen på dyret.
      Merk: La noen ekstra lengde for tunnelering og enklere håndtering.
    2. Blusse en ende opp med en lettere å få en avrundet tupp. Sjekk for siste passende åpning og butte enden av kateter.
    3. Plasser et 2 mm lang silikon rør over kateter til ligger like nedenfor fakles slutten.
  2. Produksjon av elektrodene
    1. Klargjør en polytetrafluoroethylene-belagt stålwire 20-25 cm (passende lengde avhengig av dyr).
    2. Forberede en sølv wire 2 cm i lengde og vri ender til en liten hempe gjenstår. Kle av 2 mm av Teflon isolering i den ene enden. Lodding vridd sølv wire avslutning på den strippet ståltråd.
    3. Gjelde konvensjonelle neglelakk til sonen belegg. Forberede 4 mm lang polyetylen rør over regionen belagt, og forsegle slutten ved å bruke varme til datokomprimere tang.

2. dyr forberedelse

  1. Anestesi
    1. Bruk et passende anestesi cocktail godkjent av institusjonen for en generell anestesi.
    2. Forberede anestesi cocktail med medetomidine (0,15 mg/kg), midazolam (0,08 mg/kg) og fentanyl (0,01 mg/kg), og injisere intramuskulært av en 1 mL sprøyte med en 27 Gauge nål.
  2. Kirurgisk forberedelse
    1. Barbere magen med en elektrisk barberhøvel, inkludert kjønnsorganene regionen og tilbake regionen på nivå med scapulae.
    2. Desinfiser mage og nakke regioner med 70% etanol først og deretter 3 vekslende scrubs povidon-jod løsning.

3. blæren kateter implantasjon

  1. Utføre en lav midtlinje laparotomy på nivå av tredje og fjerde smokken (ca 2 til 2,5 cm i lengde) ved hjelp av en skalpell for huden og en kirurgisk saks for abdominal muskler.
  2. Utsette blæren ved å lede bukveggen i Kranio-caudal retning og fikse det i denne posisjonen ved å plassere baksiden av en tang bak blæren å unngå re posisjonering.
  3. Plass en veske-streng Sutur rundt blæren kuppelen med en 6-0 ikke-absorberbare monofilament Sutur med en taper-tip nål.
  4. Incise blæren kuppelen i vesken-strengen, skalpell tips eller 18G nål, sette inn blæren kateter (se protokollen trinn 1).
  5. Sett inn kateter forhåndsutfylt med den sterile fysiologiske 0,9% natriumklorid løsningen og nøye trekke blæren kateter til fakles åpningen av kateter plasseres rett under blæren kuppel.
  6. Sikre det veske-streng suture rundt kateter og gjøre en stopp-Sutur rundt kateter kroppen for ytterligere fiksering.
  7. Se etter lekkasje via blæren kuppelen ved sakte fylle blæren gjennom kateter med sterile fysiologiske 0,9% natriumklorid løsning.

4. urinrøret Sphincter elektrode implantasjon

  1. Forberede tre elektroder implantasjon (se protokollen trinn 1).
  2. Merke en elektrode med farget permanent filt penn for ytterligere identifikasjon av fremtidige null elektroden. Desinfiser elektroder med 70% etanol.
    Merk: Katetre er ikke egnet for varme og kjemiske dampsterilisering. I stedet kalde sterilisere elektrodene for 24 timer.
  3. Utvide abdominal innsnitt ved kirurgisk saks til skambenet, men ikke klippe den kjønnshår symphysis.
  4. Identifisere urinrøret og opprette en stump lomme med fine tang på begge sider av urinrøret, men unngå traumer av fartøy eller nerver.
  5. Identifisere riktig fett poser nær urinrøret i dette vinduet.
  6. Løs elektroder bilateralt til riktig fett posen ved hjelp av 6-0 ikke-absorberbare monofilament Sutur.
    Merk: Den endelige plasseringen av elektrodene bør være bilaterale på midten av området av urinrøret.
  7. Knytte de to elektrodene med 6-0 ikke-absorberbare monofilament Sutur.
  8. Sutur merket null elektroden til bukveggen muskel gangavstand av urinrøret. Knytte alle tre elektroder sammen med en enkelt Sutur.

5.-tunnelering

  1. Gjør en liten huden snitt mellom scapulae for tunnelering.
  2. Tunnelen elektrode ledninger til hals og en endelig kontroller for riktig plassering og plasseringen av elektroder etter tunnelering.
  3. Tunnelen blæren kateter til scapulae nivå - ta hensyn til blæren mens tunnelering kateter for å unngå blæren vri. For dette formålet, hold kateter bare før blæren kuppelen for å unngå vridning av blæren.
  4. Lukk magemusklene av kontinuerlig eller avbrutt masker med en 4-0 polyfilament absorberbare Sutur. Lukke den hud snittet ved avbrutt mattress suturer.
  5. Strekke dyret i sin fulle lengde har maksimal oppblåsthet elektrode ledninger og kateter.
  6. Fastsette kateter og elektroden ledninger av en senket i Sutur til skulder muskler.
  7. Lukk huden av en pigg med 4-0 Sutur.

6. sele montering

  1. Passer en sele til dyret ved å trekke selen i hodet av dyret og trekke forelimbs til slutt posisjon mellom to silikon strimler. Sjekk sele størrelsen av vekten av dyret før operasjonen med distributøren.
  2. Tunnelen blæren kateter til sentrale hullet sele og elektroder gjennom skreddersydde hullet en drill tilpasset størrelsen på elektroden ledningene.
  3. Justere selen ved å trekke silikon strimler. Justere selen så det ikke er for løs, men sikre plass gjenstår for å opprettholde bevegelige evne til rotta.
  4. Bruk en kabel stropp for å fikse silisium strimler.
  5. Kutte lengden på blæren kateter til 3 cm over selen, koble til 23-G stopperen og til slutt fastsette det til selen.

7. produksjon av elektroden kontakten

  1. Forberede tre små varme krympe rør (en annen farge for null elektroden). Forberede to ytterligere varme krympe rør i en passende større størrelse.
  2. Reduser elektrode ledningene til en optimal lengde skal kunne koble seg senere til kvinnelige pluggen uten å være for løst eller for kort. Kle av Teflon isolering av tre ledninger (ca 2 mm), og vri stål ledninger til en streng.
  3. Plasser store varme krympe rør over alle kabler, plassere små rør for alle tre kabler, og bruke farget røret for null elektroden.
  4. Lodding elektrodene for mannlige 3-tilkobling-pluggen. Plasser null elektroden i midten, og krympe tre små personlige rør over loddet området.
  5. Krympe først større rør på slutten av personlige tube avslutninger og siste store røret hann plugg grensen.
  6. Koble mannlige pluggen til kvinnelige kontakten fast til sele og fastsette med et stykke tape for ytterligere sikkerhet.

8. etter operasjonen omsorg

  1. Rengjør kirurgiske områder og disinfect med povidon-jod.
  2. Plassere dyret på en varmeputen til våken og gi 0,9% sodium chloride løsning for vann substitusjon, basert på lokale dyr omsorg retningslinjene under og etter operasjonen.
  3. Administrere analgetika (har meloksikam 1 mg/kg) og antibiotika (sulfadoxinum 200 mg trimethoprimum 40 mg, 15 mg/kg) som kombinerte injeksjon løsning subcutaneously. To ganger daglig, gi analgetika (morgen og kveld), og en gang per dag gir antibiotika, fem påfølgende dager.
  4. Fortsett med antibiotika på samme dosering over hele oppfølging periode på to til tre injeksjoner per uke.
  5. Sjekke daglig for riktig montering av selen og utføre en kirurgiske feltet inspeksjon, spesielt av nakken regionen. Juster selen hvis det blir for stram ved nøye trekke på silikon strimler.
  6. Tømme kateter regelmessig en gang per uke for å unngå en blokade.

9. forberedelse til Cystometric måling

  1. Utføre første cystometric målene etter seks postoperativ dager.
    Merk: Tidligere målinger kan være påvirket av smertestillende medisiner og/eller urothelial irritasjon på grunn av kateter implantation.
  2. Slå på hovedbryteren, datamaskinen og EMG forsterkeren.
  3. Fyll sprøytepumpen med romtemperatur varmet 0,9% natriumklorid. Åpne treveis kontaktene en etter en i en synkende måte, fra pumpen, og skyll rørene.
    Merk: Se nøye etter gjenværende luftbobler, som bobler vil endre målene som cystometric.

10. kalibrering

  1. Start programmet uroflowmeter programvare og gå til kalibrering.
  2. Lukk treveis kontakten til pumpen og dyr.
  3. Åpne ventilen til den tilkoblede manometer og trykk null i programmet.
  4. Justere trykket på manometer for 100 mmHg, og trykk 100 mmHg i programmet. Trykk Bekreft for å lagre kalibreringen justeringen. Vinduet lukkes automatisk.
  5. Lukke ventilen til manometer og åpne treveis kontaktene fra pumpen til dyret å være klar for målingen.

11. animal Database (dyr DB)

  1. For å registrere dyr, gi dyret en konsis ID.
  2. Angi ytterligere data, for eksempel datoen for SCI, start behandling, kateter implantasjon, forsøksgruppen og fødselsdagen til dyret.
  3. For å endelig logge data, trykk "Lagre post" og lagre filen.

12. måleinnstillinger før opptak

  1. Starte programmet ved å trykke start-knappen.
  2. Velg dyret og trykk tare skala og null press.
    Merk: Vær oppmerksom mens plassere dyret i restrainer, slik at ingen kabel er fast, da dette kan føre til en fjerning av en ledning av EMG kabelen.

13. dyr forberedelse

  1. Fjern kateter pluggen og koble EMG pluggen fra selen.
  2. Putte rotta inne restrainer. Lukk restrainer og lås selen med en klemme.
  3. Få kateter og EMG plugg av restrainer.
  4. Plasser restrainer i catamount enheten. Sett halen gjennom røret og reparere røret med tape for å unngå bevegelser.
  5. Koble mannlige EMG pluggen til opptak kvinnelige EMG kontakten.
  6. Trykk null trykk igjen og koble kateter til fylling/opptak røret. Når trykket i programvaren.
    Merk: Trykket bør være positive, rundt 5-10 cm H2O ved baseline. Dersom trykket er negativ, koble kateter fra kanyle, trykk null press og deretter koble kateter.

14. opptak

  1. Hvis kateter og EMG kabelen er tilkoblet, trykker du kjøre pumpen og opptak.
  2. Tilpasse fylling hastigheten til eksperimentelle behovene i μL/min.
  3. Merk tiden innspillingen starter og romtemperatur i loggen boken.
  4. For å stoppe cystometric innspillingen, stopper pumpen ved å trykke kjøre pumpen og trykk opptak igjen.
    Merk: Pumpen vil være av og det grønn lyset på pumpen lyser.
  5. Koble kateter og bruker 23G disables kobler lukke kateter slutten. Koble EMG kabelen.
  6. Åpne forsiden av restrainer og lede rotta ut av restrainer.
    Merk: Håndtere rotte nøye og overvåke ledninger for å unngå eventuelle låsing av kabler.
  7. Koble kateter til selen. Nytt koble EMG pluggen til selen, og satt et stykke tape rundt pluggen.
    Merk: Hvis dyr har en patologisk lavere urin skrift tilstand, uttrykke blæren på slutten manuelt for å unngå overdistention av blæren.
  8. Sett dyret tilbake i buret sitt hjem.
  9. Lukk programmet ved å trykke på Avslutt.
  10. Rengjør restrainer og kanne.
  11. Lukk treveis kontaktene til pumpen og dyr uttaket.
  12. Avslutt datamaskinen, EMG enheten og systemet via hovedbryteren.
    Merk: Data er lagret i mappen separat "Loggførte data" med filen i undermappen målt rotte-ID. Enkelt opptak sorteres i enkelt rotte-ID-mapper etter dato.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

En skjematisk viser prosessen med våken cystometric målinger vises i figur 1 og den interne anatomien for blæren kateter implantasjon er vist i figur 2. Operasjonen tar ca 2 h. Postoperative analgesi og antibiotika, som beskrevet i protokollen, dekker smerte og infeksjoner over fem dager etter operasjonen. Ingen tegn til noen smerte var merket etterpå. To ganger daglig forsiktig inspeksjon av magen og abdominal Sutur halsen Sutur er nødvendig for å opprettholde dyrets helse. Sele kontroll (posisjon og tetthet) bør utføres én gang daglig i de første fem dagene og senere på jevnlig basis. Abdominal suturer kan fjernes på 10th postoperativ dagen.

Vi bruke myke, ikke-woody sengetøy for de første 10 dagene etter operasjonen for å unngå betennelse. Sengetøy endres minst to ganger i uken for å fremme lavere risiko for betennelse. Dyr holdes i én bolig, som gruppe bolig øker risikoen for sele og kateter elektrode kabel biter av bur make.

Kateter som skal tømmes minst en gang per uke, enten i en cystometric måling eller rødme kateter manuelt med 1-3 mL steril 0,9% natriumklorid i en lav infusjon hastighet (Figur 3). Vanlig antibiotika dekning av dyrene ytterligere reduserer risiko for infeksjoner og urin stein formasjonen. Overvåking væske opptak er et ytterligere store poeng å hindre urin stein formasjonen. Sitronsyre i lave konsentrasjoner (2-3%) administreres enten intravesically via kateter eller inn i drikker vann å hindre calculi formasjon.

Suksessrate på den kirurgiske prosedyren, i tillegg til å opprettholde blæren kateter og elektroder intakt, er rundt 80%. De resterende 20% av tilfellene var hovedproblemet avdeling av elektroden ledningene fra pluggen. Dermed er en forsiktig tilknytning av elektroden ledningene til selen avgjørende for å unngå tap av elektroden.

Cystometric mål er vanligvis gjort før tre påfølgende renons sykluser er registrert per måling, som tar mellom 20 til 40 minutter, avhengig av angst og håndtering status av rotte. Den første cystometric målingen utføres vanligvis en uke etter kateter implantasjon kirurgi.

Viktigste Les ut parametrene til cystometric innspillingen er planlagt press, terskel press, maksimal detrusor press, annullerte volumet, gjennomsnittlig flyt, renons tid, gjennomsnittlig press, overholdelse av urinblæren og samtidige lese ut av det eksterne urinrøret sphincter EMG-aktivitet (Figur 4).

Påfølgende cystometric mål i oppfølging periode kan utføres i minst fire uker etter operasjonen. Hvis kateter linjen tømmes regelmessig, er kateter blokkering ikke noe problem. Vanlig håndtering og optisk kontroll av rotter gjennomføres under hele oppfølging periode.

Hvis kateter er kinked eller blokkert, øker intravesical trykket lineært til svært høyt trykk (over 100 cm H2O). I dette tilfellet fylling bør stoppes og synlig kateter slutten bør sjekkes for brette. Hvis ingen elastiske er sett, bør kateter kontrolleres for en blokkert stikkontakt. For dette formålet, kateter kan tømmes manuelt via kateter. Hvis væsken ikke er lett flyter i blæren, kan trekke tilbake og fremover lett prøves. For en siste forsøk, kan en syrlig rødme løsning (sitronsyre 2-3%) brukes til å fjerne hindret regionen innenfor kateter. Denne løsningen kan ha en høyere sjanse å oppløse blokaden, ennå, blæren vil bli irritert etter vellykket rødme og påfølgende mål skal bare utføres to dager etter spyling sur løsning. Hvis ingen væske kan tømmes i blæren, kateter er blokkert permanent og ingen ytterligere målingene er mulig, og dyret er tapt for oppfølging.

Figure 1
Figur 1: skjematisk tegning av cystometric målinger i våken rotter. Dette tallet er tilpasset fra2. (en) illustrasjon av urodynamic. (b) Lab stasjon for urodynamic undersøkelse. (c) implantering av eksterne urinrøret sphincter Elektromyografi elektroder lateral til urinrøret, intraoperativ visning. (d) visning av blæren kuppelen i øyeblikket av blæren kateter implantasjon, intraoperativ visning. (e) etter implantasjon av elektroder og kateter, rotta være utstyrt med en sele trygt lagre støpsler og kontakter. (f) Human urodynamics. Tall i b-e gjelder forklaringen i en. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 2
Figur 2: innvendig anatomi av rotte for blæren kateter implantasjon. Dette tallet er endret fra8.

Figure 3
Figur 3: Flushing av kateter linje rotte. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 4
Figur 4: Urodynamic tracings i et dyr 12 dag etter kateter implantasjon. (en) representant urodynamic sporing fra rotte naiv. På toppen er vist blæren press sporing, i midten utskilles urin vekt sporing, og på bunnen eksterne urinrøret sphincter EMG sporing. (b) Zoom-vinduet fra en naiv dyr 60 s, tatt fra (en). En viktig merknad er at det er mindre eksterne urinrøret sphincter EMG aktivitet under renons enn før og etter renons. På toppen er vist blæren press sporing, i midten utskilles urin vekt sporing, og på bunnen eksterne urinrøret sphincter EMG sporing. Nederst vises en varme tomt med tiden matchet frekvens spectrogram (tilsvarende frekvens på det nåværende tidspunktet). Rød representerer en høy makt og blå representerer strømsparingsmodus. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Denne protokollen beskriver den kirurgiske prosedyren av en permanent kateter og urinrøret sphincter elektroder implantasjon og cystometric opptak teknikk i våken, lett behersket rotter inkludert begge samtidig analyse av urinblæren og eksterne urinrøret sphincter.

Kritisk er under operasjonen forsiktig implantering av blæren kateter, unngå lekkasje og omfattende manipulasjon. Videre er en presis implantering av elektrodene bilaterale til den eksterne urinrøret sphincter avgjørende for en lyd måling av eksterne urinrøret sphincter. En nært inspeksjon av feltene kirurgisk etter implantasjon er også avgjørende for å opprettholde dyrets helse. Antibiotika dekning under oppfølging hjelper i å forebygge infeksjoner langs kateter linjen, i tillegg til forekomsten av urin skrift infeksjoner.

Under cystometric måling blir rotte håndteres roligere og mer avslappet enn rotte som ikke ble behandlet tidligere. Dermed avvike cystometric innspillingen i resultatet. Videre, restrainer tilbyr rotta en confining plass med en mørk forsiden å føle seg mer komfortabel og dermed reduserer stress nivåer. I andre publiserte våken cystometric målinger, kan rotter fritt bevege i måling buret. Men dette bærer høyere gjenstanden risiko under målingen og kan øke opptak, og også stressnivået på dyret. I sunn rotter, kan optimale cystometric målingen replikeres på flere måling tidspunkt under oppfølging. Under cystometric måling er problemer som vanligvis oppstår kinked katetre eller en feil i step-wise gjennomføring av protokollen. Hvis det oppstår en teknisk eller programvare feil, anbefales sterkt Reinitialiseringen av cystometric måling og gradvis gjentakelse av protokollen for feilsøking.

Begrensninger av denne teknikken er inter dyr variasjon av cystometric opptakene, strukturelle endringer i urinblæren vev på grunn av den implanterte kateter, som kan hemme histologiske eller molekylær biologiske undersøkelser av dette vevet, og én bolig av dyr under oppfølging periode. Videre, denne teknikken har bare blitt testet i hunnrotter, anvendbarhet og resultater for hannrotter har ikke ennå blitt undersøkt.

Den største fordelen med denne teknikken er samtidig måling av urinblæren og den eksterne urinrøret sphincter, samt innstillingen våken måling. Dermed er en mer translasjonsforskning undersøkelse av lavere urinveiene i våken dyr tilgjengelig, i forhold til enkelt, terminal cystometric analyse i anestesi5,6,9,10. Videre med denne tilnærmingen, kan utviklingen av en lavere urin skrift dysfunksjon eller patologi følges i samme dyr over tid, samt behandling suksesser. Spesielt kan NLUTD undersøkes Kursenes tid, som ikke var mulig i en grad med felles cystometric teknikk2.

Avslutningsvis brukes presentert kirurgi og cystometric måling for flere gjenstanden-redusert analyser av lavere urin-område, inkludert samspillet av urinblæren og den eksterne urinrøret sphincter våken rotter.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne ikke avsløre.

Acknowledgements

Forfatterne har ikke noen anerkjennelse.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Polyethylene tubing PE 50 Becton Dickinson 427411 Catheter
Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c) Ethicon EH7403H Suture
Teflon coated steel wire Cooner wire AS631 Electrode material
Silver wire 0.250 mm World Precision Instruments AGW1030 Electrode material
Rotilabo - PVC tube Carl Roth 97241 Harness
Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c) Ethicon V4940H Suture
Quick Connect Single Harness SAI Infusion Technologies QCH-23CW Harness
Shrinking tubes ChiliTec 17894 Electrode soldering
Soldering wire Pb60 Sn40 Stannol LD0029 Electrode soldering
Fluxing agent 157 Castolin Eutectin 157 0150 Electrode soldering
Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box Preci-dip 801-87-050-10-001101 Electrode soldering
Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box Preci-dip 890-18-003-10-001101 Electrode soldering
Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis) Catamount Research and Development Inc. CAT-CYT-R
Differential amplifier with active headstage AD instruments DP-311 EMG amplifier
Restrainer Medium size for rats 200-300 g emka Technologies HLD-RM
Uro Dyn Software Zürich of University MTA-based
Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age Charles River, Sulzfeld, Germany animals

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. Rodent models for urodynamic investigation. Neurourol Urodyn. 30, 636-646 (2011).
  2. Schneider, M. P., et al. A novel urodynamic model for lower urinary tract assessment in awake rats. BJU Int. 115, Suppl 6. 8-15 (2015).
  3. Cruz, C. D., Cruz, F. Spinal cord injury and bladder dysfunction: new ideas about an old problem. Scientific World Journal. 11, 214-234 (2011).
  4. de Groat, W. C., Yoshimura, N. Plasticity in reflex pathways to the lower urinary tract following spinal cord injury. Exp Neurol. 235, 123-132 (2012).
  5. Matsuura, S., Downie, J. W. Effect of anesthetics on reflex micturition in the chronic cannula-implanted rat. Neurourol Urodyn. 19, 87-99 (2000).
  6. Cannon, T. W., Damaser, M. S. Effects of anesthesia on cystometry and leak point pressure of the female rat. Life Sci. 69, 1193-1202 (2001).
  7. Patra, P. B., Thorneloe, K. S. Enhanced sensitivity to afferent stimulation and impact of overactive bladder therapies in the conscious, spontaneously hypertensive rat. J Pharmacol Exp Ther. 338, 392-399 (2011).
  8. Herrera, G. M., Meredith, A. L. Diurnal variation in urodynamics of rat. PloS One. 5, e12298 (2010).
  9. Chang, H. Y., Havton, L. A. Differential effects of urethane and isoflurane on external urethral sphincter electromyography and cystometry in rats. Am J Physiol Renal Physiol. 295, F1248-F1253 (2008).
  10. Yaksh, T. L., Durant, P. A., Brent, C. R. Micturition in rats: a chronic model for study of bladder function and effect of anesthetics. Am J Physiol. 251, R1177-R1185 (1986).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics