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Orthotopic जिगर प्रत्यारोपण का एक चूहा मॉडल Suprahepatic वेना कावा पुनर्निर्माण के लिए एक उपंयास चुंबकीय सम्मिलन तकनीक का उपयोग

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Summary

suprahepatic वेना कावा (SHVC) के पुनर्निर्माण चूहे orthotopic जिगर प्रत्यारोपण में एक मुश्किल कदम रहता है । इस लेख में, हम एक उपंयास चुंबकीय सम्मिलन तकनीक का उपयोग चूहों में SHVC पुनर्निर्माण के लिए एक कदम दर कदम प्रोटोकॉल दिखाते हैं ।

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Yang, L., Lu, J., Wang, Y., Zhang, M., Shi, Y., Wei, S., Liu, P., Wu, Z., Lv, Y., Wu, R. A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction. J. Vis. Exp. (133), e56933, doi:10.3791/56933 (2018).

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Abstract

orthotopic लीवर ट्रांसप्लांटेशन (OLT) के चूहे मॉडल प्रत्यारोपण अनुसंधान के लिए आवश्यक है । यह एक बहुत ही परिष्कृत पशु मॉडल है और एक खड़ी सीखने की अवस्था की आवश्यकता है । पोर्टल नस (पीवी) और infrahepatic वेना कावा (IHVC) के सम्मिलन के लिए कफ तकनीक की शुरूआत ने चूहों में प्रत्यारोपण प्रक्रिया को काफी सरल कर दिया है । हालांकि, प्राप्तकर्ताओं ' suprahepatic वेना कावा (SHVC) के छोटे पूर्वकाल दीवार के कारण, कफ तकनीक SHVC के पुनर्निर्माण के लिए उपयोग करने के लिए बहुत मुश्किल है । इस क्षेत्र में अधिकांश शोधकर्ताओं अभी भी हाथ SHVC पुनर्निर्माण के लिए टांका तकनीक है, जो यह चूहा orthotopic यकृत प्रत्यारोपण में अड़चन कदम बनाता है का उपयोग करें । चुंबकीय सम्मिलन तकनीक (यानी, magnamosis) दो मैग्नेट के बीच आकर्षक बल का उपयोग कर दो जहाजों को जोड़ने की एक विधि है । हमारे हाल के अध्ययन से पता चला है कि चुंबकीय सम्मिलन तकनीक हाथ से बेहतर है, चूहों में SHVC पुनर्निर्माण के लिए टांका तकनीक । इस लेख में, हम उपंयास चुंबकीय सम्मिलन तकनीक का उपयोग चूहों में SHVC पुनर्निर्माण के लिए एक कदम दर कदम प्रोटोकॉल दिखाते हैं । इस मॉडल में, PV और IHVC के पुनर्निर्माण के मानक कफ तकनीक द्वारा प्रदर्शन किया गया था, जबकि पित्त नलिका (BD) के पुनर्निर्माण एक स्टेंट तकनीक द्वारा किया गया था । यकृत पुनः arterialization नहीं किया गया था । चुंबकीय सम्मिलन तकनीक SHVC पुनर्निर्माण बहुत आसान बना दिया है और काफी anphepatic चरण छोटा । एक उचित सीखने की अवस्था के बाद भी उन्नत microsurgical कौशल के बिना शोधकर्ताओं ने OLT के इस चूहे मॉडल का उपयोग कर विश्वसनीय और reproducible परिणाम का उत्पादन कर सकते हैं ।

Introduction

orthotopic लीवर ट्रांसप्लांटेशन (OLT) के चूहे मॉडल प्रत्यारोपण अनुसंधान के लिए आवश्यक है1,2। पहला चूहा OLT ने ली एट अल. 1973 में3बताया था. उस मॉडल में, सभी जहाजों हाथ टांका तकनीक द्वारा खंगाला गया । हाथ टांका तकनीक उंनत microsurgical कौशल है, जो काफी इसके उपयोग की सीमा की आवश्यकता है । तब से, चूहे OLT के मूल प्रोटोकॉल के लिए विभिंन संशोधनों की सूचना दी गई है । उनमें से, सम्मिलन के लिए कफ तकनीक पोर्टल नस (पीवी) और infrahepatic वेना कावा (IHVC) द्वारा रिपोर्ट कामदा एट अल । 1979 में इस मॉडल के लिए एक प्रमुख सुधार माना जाता है, क्योंकि यह काफी पुनर्निर्माण प्रक्रियाओं को सरलीकृत4 . हालांकि, प्राप्तकर्ताओं ' suprahepatic वेना कावा (SHVC) के छोटे पूर्वकाल दीवार के कारण, कफ तकनीक SHVC के पुनर्निर्माण के लिए उपयोग करने के लिए बहुत मुश्किल है । इस क्षेत्र में अधिकांश शोधकर्ताओं अभी भी SHVC पुनर्निर्माण के लिए हाथ सीवन तकनीक का उपयोग करें, जो इसे चूहे OLT5,6,7में अड़चन कदम बनाता है ।

चुंबकीय सम्मिलन तकनीक (यानी, magnamosis) दो मैग्नेट8,9,10,11के बीच आकर्षक बल का उपयोग कर दो जहाजों या अन्य ट्यूबलर संरचनाओं को जोड़ने की एक विधि है । चुंबकीय बल धीरे से compresses और एक मजबूत, टांका सम्मिलन12,13में ऊतक remodels । इस संपीड़न सम्मिलन मानव14,15में प्रभावी साबित किया गया है । हम विशेष रूप से चूहों में SHVC के सम्मिलन के लिए चुंबकीय के छल्ले की एक जोड़ी तैयार की है । हमारे हाल के अध्ययन से पता चला है कि चुंबकीय सम्मिलन तकनीक हाथ टांका तकनीक के लिए बेहतर है चूहा OLT में SHVC पुनर्निर्माण के लिए16। इस लेख का उद्देश्य उपंयास चुंबकीय सम्मिलन तकनीक का उपयोग कर चूहों में SHVC पुनर्निर्माण के लिए एक विस्तृत, कदम दर कदम प्रोटोकॉल प्रदान करना है ।

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Protocol

प्रोटोकॉल की देखभाल और प्रयोगशाला पशुओं के उपयोग के लिए दिशा निर्देशों के अनुसार किया गया था और समिति द्वारा शीआन Jiaotong विश्वविद्यालय, शीआन, शानक्सी प्रांत, चीन के पशु प्रयोगों की नैतिकता पर अनुमोदित किया गया था ।

नोट: इस प्रोटोकॉल में प्रक्रियाओं में से कोई भी एक शल्य माइक्रोस्कोप के तहत किया गया था ।

1. ऑपरेटिव तैयारी

  1. डिजाइन और चुंबकीय के छल्ले के आकार (चित्रा 1)
    1. neodymium-आयरन-बोरान चुंबकीय छल्ले की एक जोड़ी मिलान करके चुंबकीय सम्मिलन डिवाइस को इकट्ठा ।
    2. एक प्रमुख अक्ष व्यास, छोटे अक्ष व्यास, मोटाई और 8 मिमी, 5.5 मिमी, 1 मिमी, 0.5 जी, क्रमशः के वजन के साथ चूहे SHVC के मापदंडों के अनुसार छल्ले डिजाइन ।
    3. वक्र एक तार इलेक्ट्रोड काटने तकनीक द्वारा वांछित आकार के छल्ले, और फिर कोट एक टाइटेनियम ऑक्साइड एयरब्रश के साथ प्राप्त छल्ले और 55-60 डिग्री सेल्सियस पर 500 मिलीग्राम/एल ईथीलीन ऑक्साइड के साथ बंध्याकरण 6 एच के लिए ।
  2. कफ (चित्रा 2)
    1. पॉलीथीन ट्यूब को काटने से IHVC और पीवी के सम्मिलन के लिए कफ तैयार करें । सुनिश्चित करें कि कफ शरीर एक 2 मिमी कफ विस्तार के साथ 5 मिमी लंबी है ।
      नोट: पीवी कफ के भीतरी और बाहरी व्यास 1.8 और 2.1 मिमी हैं, जबकि IHVC कफ के वे क्रमशः 2.6 और 2.8 मिमी के होते हैं ।
  3. स्टेंट (चित्र 2)
    1. दोनों सिरों पर तिरछा उत्पादन करने के लिए 5 मिमी की लंबाई के साथ 24-जी नसों में प्रवेशनी काटने के द्वारा बी के सम्मिलन के लिए स्टेंट तैयार करें ।
  4. प्रायोगिक पशु
    1. का प्रयोग करें पुरुष Sprague Dawley दाताओं और प्राप्तकर्ताओं के रूप में 250 और 280 जी के बीच वजन चूहों । सुनिश्चित करें कि प्राप्तकर्ता एक ही वजन या थोड़ा भारी है (< 10 g) दाता की तुलना में ।
    2. जलवायु में चूहों नियंत्रित कमरे में सर्जरी से पहले भोजन और पानी के लिए मुफ्त का उपयोग के साथ रखें ।

2. दाता ऑपरेशन

  1. ऑपरेशन से पहले एक एनाल्जेसिक 1 घंटे के रूप में चमड़े के नीचे buprenorphine (0.05 मिलीग्राम/
  2. Anesthetize ने दाता चूहे को isoflurane साँस लेना. संज्ञाहरण के रखरखाव के लिए एक शंकु मुखौटा पर एक प्रवाह की दर 0.6-0.8 l/मिनट पर एक Plexiglas बॉक्स में 1.5 एल/मिनट की एक प्रवाह दर पर 5 vol% isoflurane का प्रयोग करें । एक पैर की अंगुली चुटकी और एक त्वचा चुटकी प्रदर्शन करके संज्ञाहरण की गहराई की पुष्टि करें ।
  3. एक इलेक्ट्रिक शेविंग का उपयोग कर चूहे की पूरी उदर त्वचा दाढ़ी क्लीनर जोखिम के लिए अनुमति देते हैं । एक povidone-आयोडीन समाधान के साथ संगत त्वचा को संक्रमित ।
  4. एक cruciform चीरा के माध्यम से उदर गुहा खोलने के लिए लिंग की जड़ से शल्य कैंची का उपयोग कर xiphisternum के ऊपर 1 सेमी करने के लिए विस्तार लीनिया अल्बा, अनुदैर्ध्य लाइन के लिए midaxillary चीरा के मध्यबिंदु से विस्तार. बाईं ओर जठरांत्र संबंधी मार्ग Exteriorize और गीला धुंध के साथ कवर ।
  5. दबाना और एक hemostatic संदंश का उपयोग कर सिर की ओर xiphisternum खींचो । falciform बंधन और जिगर के आसपास संयोजी ऊतकों काटना । पृथक और ligate छोड़ दिया अवर phrenic नस एक 6-0 रेशम टांका के साथ ।
  6. पित्त नलिका में स्टेंट डालें ।
    1. बस बिंदु जहां gastroduodenal नस पोर्टल नस में मिलती है और यह एक छोटे से एक microforceps का उपयोग कर तनाव बनाए रखने के लिए पुल से ऊपर बी क्लैंप । फिर एक माइक्रो कैंची द्वारा पित्त संगम के बारे में 5 मिमी समीपस्थ पूर्वकाल दीवार पर 1 मिमी लंबाई का एक "वी" चीरा प्रदर्शन ।
    2. एक घुमावदार microforceps का उपयोग कर पित्त नलिका के लुमेन में स्टेंट डालें. सुनिश्चित करें कि स्टेंट का एक आधा पित्त नलिका के बाहर निहित है ।
    3. स्टेंट को 6-0 रेशमी सीवन के साथ सुरक्षित कर लीजिये । सीवन के एक छोर को काट लें । बाद में सम्मिलन के दौरान एक दूसरे को पकड़ रखें । पित्त नलिका को स्टेंट के नीचे Transect और यह सुनिश्चित कर लें कि पित्त स्टेंट से बाहर आ सकता है ।
  7. बाईं गुर्दे की नस स्तर के लिए नीचे IHVC को अलग । IHVC कंकाल है जब तक कपास कली विच्छेदन द्वारा पूर्वकाल और पार्श्व आसपास के ऊतकों से IHVC मुक्त. अलग और ligate सही suprarenal नस और सही गुर्दे की नस एक 6-0 रेशम सीवन के साथ ।
  8. लिंग की पृष्ठीय नस के माध्यम से सामांय खारा समाधान के 2 मिलीलीटर में पतला हेपरिन के 50 यू इंजेक्शन द्वारा चूहे Heparinize ।
  9. जिगर Perfuse ।
    1. छोड़ दिया गुर्दे की नस नीचे उदर महाधमनी को अलग । महाधमनी में एक 22-G कैथेटर डालें ।
    2. एक thoracotomy प्रदर्शन, वक्ष महाधमनी एक microforceps का उपयोग कर दबाना ।
    3. महाधमनी में कैथेटर के माध्यम से दाता जिगर Perfuse 25 हेपरिन (4 डिग्री सेल्सियस) की दर से युक्त सामान्य खारा समाधान के साथ 3 मिलीलीटर/मिनट के साथ एक अर्क पंप । इस बीच में, सही गुर्दे नस नीचे वेना कावा कटौती करने के लिए छिड़काव समाधान जिगर से बाहर प्रवाह करने के लिए अनुमति देते हैं ।
    4. Transect डायाफ्राम और बाईं गुर्दे की नस के स्तर पर IHVC के भाग के साथ SHVC जब दाता जिगर pallid बन गया ।
  10. दो माइक्रो संदंश द्वारा पीवी आसपास के संयोजी ऊतक काटना । Ligate और एक 8-0 prolene टांका के साथ जठरनिर्गम नसों विभाजित । Transect के स्तर पर पीवी प्लीहा नस । दाता जिगर उत्पाद और ठंड सामांय खारा समाधान के साथ कुल्ला । यह एक ठंडा खारा स्नान 4 ° c में रखें ।

3. भ्रष्टाचार की तैयारी

नोट: जिगर भ्रष्टाचार तैयारी के लिए सभी प्रक्रियाओं 4 डिग्री सेल्सियस पर एक ठंडा खारा स्नान में प्रदर्शन कर रहे हैं ।

  1. दाता के IHVC (चित्रा 3) को एक कफ संलग्न करें ।
    1. इसके कफ में IHVC को कफ विस्तार के साथ डालें जिगर की ओर इशारा करते हुए । IHVC के पीछे दीवार पर कफ विस्तार की स्थिति । कफ विस्तार और IHVC एक घुमावदार microforceps ही स्नान कंटेनर के लिए एक फ़ाइल क्लिप का उपयोग कर संलग्न के साथ ठीक करें ।
    2. दो माइक्रो संदंश का उपयोग कर कफ शरीर पर IHVC के बाहर का छोर एवर्ट ।
    3. एक 6-0 रेशम सीवन के साथ बढ़त को सुरक्षित । सुनिश्चित करें कि प्रक्रिया के दौरान IHVC मुड़ नहीं है ।
  2. दाता पीवी के लिए एक कफ संलग्न करने के लिए pv पर कदम 3.1 दोहराएँ ।
  3. दाता के SHVC (चित्रा 4) के लिए एक चुंबकीय अंगूठी देते हैं ।
    1. चार संदंश के माध्यम से डायाफ्राम खींचो और SHVC ट्रिम कर दीजिए ।
    2. चुंबकीय अंगूठी के माध्यम से SHVC पास टाइटेनियम-मिश्र धातु माइक्रो संदंश का उपयोग कर ।
    3. रिंग के ऊपर SHVC के बाहर का छोर एवर्ट ।
    4. एक 6-0 रेशम टांका के साथ अंगूठी सुरक्षित । सुनिश्चित करें कि प्रक्रिया के दौरान SHVC मुड़ नहीं है ।
    5. जिगर के आसपास अतिरिक्त डायाफ्राम निकालें ।
  4. एक ठंडा सामांय खारा स्नान में दाता जिगर विसर्जित कर दिया और 4 डिग्री सेल्सियस पर दुकान ।

4. प्राप्तकर्ता ऑपरेशन

नोट: प्राप्तकर्ता चूहा में भ्रष्टाचार आरोपण की स्कीमा चित्रा 5में दिखाया गया है ।

  1. ऑपरेशन से पहले एक एनाल्जेसिक 1 घंटे के रूप में चमड़े के नीचे buprenorphine (0.05 मिलीग्राम/ Anesthetize ने दाता चूहे को isoflurane साँस लेना. संज्ञाहरण के रखरखाव के लिए एक शंकु मुखौटा पर एक प्रवाह की दर 0.6-0.8 l/मिनट पर एक Plexiglas बॉक्स में 1.5 एल/मिनट की एक प्रवाह दर पर 5 vol% isoflurane का प्रयोग करें ।
  2. चूहे की पूरी पेट की त्वचा दाढ़ी । एक povidone-आयोडीन समाधान के साथ संगत त्वचा को संक्रमित ।
  3. एक 4 सेमी midline चीरा के माध्यम से उदर गुहा खोलें । पेट के रिट्रेक्टरों को लगाएं । midline से संभव के रूप में दूर अलग पसलियों खींचो ।
  4. दबाना और एक hemostatic संदंश का उपयोग कर सिर की ओर xiphisternum खींचो । संयोजी ऊतक और जिगर के आसपास के बंधन काटना । Ligate और हेपतो-घेघा बंधन विभाजित । Ligate और एक 8-0 prolene टांका के साथ यकृत धमनी फूट डालो ।
  5. पहले यकृत पोर्टल से आम पित्त नलिका को अलग । बस अपने विभाजन से नीचे आम पित्त नलिका के चारों ओर एक 6-0 रेशमी टांका लगाएं और आम पित्त नलिका को ligate ।
  6. काटना सही गुर्दे नस के लिए नीचे IHVC । Ligate और सही अधिवृक्क नस विभाजित । जिगर के SHVC में एक पट्टा रखें ।
  7. सिर्फ microvessel क्लिप्स के साथ सही गुर्दे की नस के ऊपर IHVC दबाना । microvessel क्लिप्स के साथ जठरनिर्गम नस के स्तर पर PV दबाना ।
    1. रक्त को लीवर से बाहर निकलवाने के लिए, धीरे से पीवी के माध्यम से सामान्य खारा के 2 मिलीलीटर इंजेक्ट करें । पहले से रखा पट्टा खींचकर जिगर नीचे खींचें । SHVC और एक Satinsky दबाना के साथ डायाफ्राम के भाग दबाना ।
    2. Transect के पास IHVC को पैरेन्काइमा और पीवी को porta hepatis । एक्साइज लिवर को सिर्फ SHVC के ऊपर transecting कर लीवर को ठीक कर रहा है । प्राप्तकर्ता जिगर जल्दी निकालें ।
  8. प्राप्तकर्ता के SHVC के लिए एक चुंबकीय रिंग अनुलग्न करें ।
    1. प्राप्तकर्ता के शेष SHVC को एक चुंबकीय रिंग में संमिलित करें ।
    2. चुंबकीय आकर्षण द्वारा एक Satinsky दबाना पर चुंबकीय अंगूठी को ठीक करें ।
    3. एवर्ट चुंबकीय अंगूठी पर SHVC जब तक पोत अंगूठी के किनारे शामिल हैं ।
  9. दाता जिगर भ्रष्टाचार orthotopically प्लेस और यह एक ठंडा गीला धुंध के साथ कवर ।
  10. दाता और सामांय खारा समाधान के साथ प्राप्तकर्ता के SHVCs के लुमेन भरें । एयर आवेश को रोकने के लिए अच्छी तरह से एयर बुलबुले निकालें । चुंबकीय बल के माध्यम से एक साथ दाता और प्राप्तकर्ता के SHVC में एंबेडेड चुम्बक के छल्ले युग्मन द्वारा SHVC पुनर्निर्माण समाप्त ।
  11. पीवी का पुनर्निर्माण ।
    1. एक 8-0 prolene सीवन खींच द्वारा pv के तनाव को बनाए रखने के लिए है प्राप्तकर्ता पीवी की दाईं और बाईं शाखा पथ ।
    2. जठरनिर्गम नस से प्लीहा नस को पूरी तरह से नस को बेनकाब करने के लिए प्राप्तकर्ता की पीवी के दबाना नीचे ले जाएं ।
    3. प्राप्तकर्ता के पूर्वकाल दीवार Incise । सामान्य खारा समाधान के साथ PV के लुमेन भरें ।
    4. एक घुमावदार संदंश के साथ दाता की पीवी के कफ विस्तार पकड़ो ।
    5. दाता की पीवी के कफ शरीर को प्राप्तकर्ता के पीवी में डालें जबकि पीवी लुमेन को सामान्य खारा के साथ फ्लश करते रहें ।
    6. यह एक circumferential 6-0 रेशम संयुक्ताक्षर के साथ सुरक्षित । फिर से पीवी और SHVC पर clamps जारी करके भ्रष्टाचार जिगर के लिए रक्त का प्रवाह स्थापित करें ।
  12. IHVC को फिर से संगठित करने के लिए IHVC पर चरण 4.11 दोहराएँ ।
  13. एक स्टेंट तकनीक द्वारा पित्त नलिका का पुनर्निर्माण ।
    1. Incise एक "वी" प्राप्तकर्ता आम पित्त नलिका के पूर्वकाल दीवार पर ।
    2. प्राप्तकर्ता BD के लुमेन में दाता स्टेंट डालें और एक 6-0 रेशम circumferential टांका के साथ इसे ठीक करें । दो पित्त नलिकाओं पर टांके एक साथ खींचो और एक दूसरे के लिए BD बंद लाने के लिए टांके टाई ।
    3. पित्त रिसाव को रोकने के लिए anastomotic साइट के आसपास ओमेंटम ऊतक लपेटें ।
  14. उदर गुहा गर्म सामांय खारा समाधान के साथ सिंचाई । एक सतत 3-0 गैर अवशोषित शल्य टांका के साथ दो परतों में पेट चीरा बंद करें ।
  15. प्रशासन 16 मिलीग्राम/kg cefuroxime (एक एंटीबायोटिक) और 0.05 मिलीग्राम/kg buprenorphine (एक एनाल्जेसिक) द्वारा आपरेशन के बाद तुरंत ।
  16. चूहे को साफ पिंजरे में रखें और भोजन और पानी का विज्ञापन libitumकी अनुमति दें ।
  17. cefuroxime सुई (16 मिलीग्राम/किग्रा) और buprenorphine (0.05 मिलीग्राम/उदर गुहा में) 3 दिनों के लिए हर 12 घंटे ।

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Representative Results

लगभग 10 प्रयासों के बाद, SHVC पुनर्निर्माण के लिए चुंबकीय सम्मिलन तकनीक सफलतापूर्वक एक शोधकर्ता जो कोई पूर्व microsurgical प्रशिक्षण था द्वारा महारत हासिल था । SHVC के पुनर्निर्माण से कम 2 मिनट लग गए । प्राप्तकर्ता चूहों के लिए anhepatic चरण लगभग 10 मिनट था । reperfusion के बाद 1, 5 और 30 दिनों में SHVC anastomotic साइट पर कोई घनास्त्रता, रक्तस्राव या angiostegnosis नहीं मनाया गया । अवर वेना cavography ने रोपाई के 2 सप्ताह बाद ही प्रदर्शन किया था । जैसा कि चित्रा 6में दिखाया गया है, चुंबकीय छल्ले बरकरार थे, और रक्त प्रवाह SHVC सम्मिलन के माध्यम से पेटेंट था । बाद प्रत्यारोपण जीवित रहने की दर दिन में 95% था 1, 90% दिन में 3, और 85% दिनों में 7 से 30 (चित्रा 7) ।

Figure 1
चित्र 1 : डिजाइन (एक) और फोटो (बी) SHVC के सम्मिलन के लिए चुंबकीय अंगूठी की ।
SHVC: suprahepatic वेना कावा.  कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्र 2 : कफ और IHVC (A), PV (B) और BD (C) के सम्मिलन के लिए स्टेंट ।
IHVC: infrahepatic वेना कावा; पीवी: पोर्टल नस; BD: पित्त नलिका. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 3
चित्र 3 : IHVC और पीवी के कफ सम्मिलन की स्कीमा । IHVC या PV को कफ (a) में डालें; दो microforceps (B) का उपयोग करते हुए कफ शरीर पर IHVC या पीवी के बाहर के छोर को एवर्ट; एक 6-0 रेशम टांका () के साथ बढ़त को सुरक्षित; दाता के IHVC या पीवी के कफ शरीर को प्राप्तकर्ता के IHVC या पीवी (D) में डालें ।
IHVC: infrahepatic वेना कावा; पीवी: पोर्टल नस । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 4
चित्र 4 : SHVC के चुंबकीय सम्मिलन की स्कीमा । टाइटेनियम-मिश्र धातु microforceps का उपयोग कर एक चुंबकीय अंगूठी के माध्यम से SHVC दर्रा (a); रिंग (B) से अधिक SHVC के बाहर के छोर को एवर्ट; एक 6-0 रेशम टांका () के साथ अंगूठी को सुरक्षित । जोड़े चुंबकीय के छल्ले में एंबेडेड दाता और प्राप्तकर्ता के SHVC चुंबकीय बल के माध्यम से एक साथ (डी) ।
SHVC: suprahepatic वेना कावा. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 5
चित्र 5 : प्राप्तकर्ता चूहा में भ्रष्टाचार आरोपण की स्कीमा । SHVC का पुनर्निर्माण: चुंबकीय सम्मिलन; IHVC और पीवी: कफ सम्मिलन का पुनर्निर्माण; BD: स्टेंट सम्मिलन का पुनर्निर्माण । हा का पुनर्निर्माण: नहीं किया ।
SHVC: suprahepatic वेना कावा; IHVC: infrahepatic वेना कावा; पीवी: पोर्टल नस; BD: पित्त नलिका; हा: यकृत धमनी । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 6
चित्र 6 : अवर वेना cavography 2 सप्ताह के प्रत्यारोपण के बाद चूहे की । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 7
चित्र 7 : प्रतिनिधि अस्तित्व प्रत्यारोपण के बाद इलाज । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

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Discussion

जिगर प्रत्यारोपण में कई नैदानिक प्रगति पशु अध्ययन के लिए जिंमेदार ठहराया जा सकता है । चूहा OLT अंग संरक्षण, प्रत्यारोपण इम्यूनोलॉजी, फिजियोलॉजी और विकृति विज्ञान के अनुसंधान में एक व्यापक रूप से इस्तेमाल किया और अच्छी तरह से स्वीकार मॉडल है । हालांकि, यह भी एक बहुत जटिल प्रक्रिया है और उंनत microsurgical कौशल की आवश्यकता है । चूहे OLT की प्रक्रिया में कई सुधार के बावजूद, SHVC सम्मिलन एक चुनौतीपूर्ण कदम रहे । इस लेख में, हम चूहे OLT में SHVC पुनर्निर्माण के लिए एक उपंयास चुंबकीय सम्मिलन तकनीक का वर्णन । इस तकनीक के आवेदन से कम 2 मिनट और चूहे OLT के anhepatic चरण लगभग 10 मिनट के लिए SHVC पुनर्निर्माण के लिए समय कम कर दिया । हमारा मानना है कि इस तकनीक प्रत्यारोपण अनुसंधान में बहुत निहितार्थ है ।

SHVC के पुनर्निर्माण के लिए इस चुंबकीय सम्मिलन तकनीक का उपयोग करने में महत्वपूर्ण कदम है दाता और प्राप्तकर्ता के SHVC के लिए चुंबकीय के छल्ले संलग्न है । हर सावधानी SHVC घुमाने से बचने के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए । इसके अलावा, जब दो चुंबकीय छल्ले को जोड़ने, SHVC में हवा के बुलबुले अच्छी तरह से हटा दिया जाना चाहिए ।

इस तकनीक का उपयोग करने में कुछ सीमाएं हैं । चूहों जैसे फिशर के कुछ उपभेदों-344 चूहों और भैंस चूहों एक बहुत ही कम SHVC है । यह उनके SHVC के लिए चुंबकीय अंगूठी संलग्न करने के लिए असंभव है । इस प्रकार, वे इस तकनीक के लिए उपयुक्त नहीं हैं । हालांकि, इस तकनीक को आसानी से Sprague Dawley चूहों, लुईस चूहों और भूरे रंग के नॉर्वे चूहों सहित चूहों के सबसे उपभेदों में OLT के लिए लागू किया जा सकता है । चुंबकीय के छल्ले चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई) स्कैन के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं । इसलिए प्रयोग के लिए एमआरआई परीक्षा की आवश्यकता होने पर इस चुंबकीय सम्मिलन तकनीक का इस्तेमाल नहीं किया जा सकता ।

संक्षेप में, चुंबकीय सम्मिलन तकनीक संभव चूहों में आसान और तेजी से SHVC पुनर्निर्माण करता है । एक उचित सीखने की अवस्था के बाद भी उन्नत microsurgical कौशल के बिना शोधकर्ताओं ने OLT के इस चूहे मॉडल का उपयोग कर विश्वसनीय और reproducible परिणाम का उत्पादन कर सकते हैं ।

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Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgements

इस काम के लिए चीन के शिक्षा मंत्रालय के नवाचार टीम विकास कार्यक्रम से अनुदान का समर्थन किया था (सं. IRT16R57), राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन ऑफ चाइना (No. ८१४७०८९६), और शीआन Jiaotong विश्वविद्यालय (आरडब्ल्यू) की युवा प्रतिभा की भर्ती की योजना के लिए एक अनुसंधान कोष ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Anesthesia Machine Harvard  tabletop Animal anaesthesia
PLX7000B HF Mobile Digital C-arm System Perlong Medical PLX7000B It is mainly used for the angiography and photography of various operations
Syringe Pump Mindray BeneFusion SP5 intravenous infusion
Isoflurane RWD life Science Co. anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia
iohexol Shanghai General Pharmaceutical Co  intravascular contrast media  
heparin sodium injection SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD   prevent the formation of thrombosis 
cefuroxime  Glaxo Operations UK Limited  an antibiotic
buprenorphine  TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd an analgesic
curved microforceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. W40350 surgical tool
hemostatic forceps(straight) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31010 surgical tool
hemostatic forceps(curved) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J31020 surgical tool
Satinsky clamp Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC050 surgical tool
needle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J32010 surgical tool
microneedle holder Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WBA040 surgical tool
notched forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J42010 surgical tool
tissue forceps(with hook) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. J41010 surgical tool
tissue scissor Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00040 surgical tool
surgical scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Y00030 surgical tool
micro scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. MR-S121T surgical tool
microvessel clips Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. XEC240 surgical tool
straight microforceps(titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC010 surgical tool
curved microforceps  (titanium alloy) Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. WCC020 surgical tool

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References

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