Sirozlu fareleri Portal hipertansif sendromunda invaziv hemodinamik karakterizasyonu

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Burada portal hipertansif sendromu sıçanlarda karakterize için portal basınç, splanchnic kan akımı ve sistemik hemodinami gibi hemodinamik parametrelerin invaziv ölçümleri için detaylı bir protokol açıklayın.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Königshofer, P., Brusilovskaya, K., Schwabl, P., Podesser, B. K., Trauner, M., Reiberger, T. Invasive Hemodynamic Characterization of the Portal-hypertensive Syndrome in Cirrhotic Rats. J. Vis. Exp. (138), e57261, doi:10.3791/57261 (2018).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Bu portal hipertansif sendromu karakterizasyonu için sirozlu fareleri invaziv hemodinamik ölçümlerde açıklayan ayrıntılı bir protokoldür. Portal hipertansiyon (PHT) siroz nedeniyle karaciğer hastalığı olan hastalarda en ciddi komplikasyonlar sorumludur. Portal hipertansif sendromu tam resim artan intrahepatic vasküler direnç (IHVR), hyperdynamic dolaşımı ve artmış splanchnic kan akımı nedeniyle artan portal basıncı (PP) ile karakterizedir. İlerici splanchnic arteriyel vazodilatasyon ve artmış kardiyak çıktı yüksek kalp hızı (HR) ama düşük arteriyel basınç ile karakterize portal hipertansif sendromu.

Roman terapiler PP azaltmak için bu amaçla tarafından hedefleme ya IHVR Şu anda geliştirilmekte olan veya splanchnic kan akımı artmış — ama yan etkileri üzerinde sistemik hemodinami oluşabilir. Böylece, portal venöz, splanchnic ve sistemik Hemodinamik parametreler detaylı karakterizasyonu, ölçüm PP, portal venöz kan akımı (PVBF), mezenterik arteryel kan akımı, ortalama arter basıncı (Harita) ve insan kaynakları da dahil olmak üzere için gereklidir preklinik PHT için yeni tedavi etkinliğinin değerlendirilmesi. Video makalemizi sirozlu fareleri invaziv hemodinamik ölçümleri gerçekleştirmek için yapılandırılmış bir protokol ile okuyucu sağlar. Özellikle, biz femoral arter ve portal ven yoluyla bir ileocolic ven kateterizasyonu ve portal venöz ölçümü tarif ve splanchnic kan akımı perivasküler Doppler ultrason akışı probları ile. Farklı fare modelleri PHT temsilcisi sonuçları gösterilir.

Introduction

PHT patolojik olarak artan kan basıncı hastalarda siroz atardamarında kanama ve asit1gibi ciddi komplikasyonlara neden olabilir portal venöz sistem tanımlı. Süre öncesi hepatik (Örneğin, portal ven trombozu) ve sonrası hepatik (Örneğin, Budd-Chiari sendromu) PHT nadirdir, karaciğer sirozu nedeniyle intrahepatic PHT PHT2en sık nedeni temsil eder.

Karaciğer sirozu PP öncelikle yükseltilmiş IHVR3sonucu olarak artırılır. İleri aşamalarında PHT artmış kardiyak çıkış nedeniyle artan PVBF tarafından ağırlaştırılmış ve sistemik ve splanchnic vasküler direnci azalmıştır — portal hipertansif sendromu4tanımlama. Ohm Kanunu (ΔP = Q * R) IHVR ve kan akışı s5' e ile orantılı olduğunu gösterir. Hastalarda, doğrudan PP riskli ve düzenli olarak gerçekleştirilen ölçümdür; Bunun yerine, hepatik venöz basınç gradyan (HVPG) s6,7dolaylı bir ölçüt olarak kullanılır. HVPG ücretsiz hepatik venöz basıncı (FHVP) hepatik ven8' yerleştirilen bir balon kateter kullanarak ölçülen kamalı hepatik venöz basınç (WHVP), çıkarılarak hesaplanır. Fizyolojik HVPG bir HVPG ≥10 mmHg klinik olarak anlamlı portal hipertansiyon (CSPH) tanımlar ve atardamarında kanama, asit ve hepatik ensefalopati9 gibi PHT ile ilgili komplikasyon riski gösterir iken 1 – 5 mmHg arasında değişmektedir . (Örneğin, HVPG) PP PHT önem, PHT, diğer bileşenler hakkında bilgiler için en uygun parametre olmasına rağmen hyperdynamic dolaşım (HR, harita), önem splanchnic/mezenterik arteryel kan akımı ve IHVR, için önemlidir PHT farklı temel mekanizması kapsamlı bir anlayış elde edilir.

Böylece, insanlarda dolaylı ölçümleri PP aksine fareler için tanıtılan metodoloji PP doğrudan bir ölçü avantajı sunuyor ve portal hipertansif sendromu karakterize ek Hemodinamik parametreler kayıt sağlayan. Ayrıca, PP doğrudan ölçülmesi karaciğer fibrozis (IHVR önemli bir belirleyici) miktarı mükemmel bir bütünleştirici okuma ve fibrozis miktar için karaciğer dokusu örnekleme hataları ile ilgili bazı sınırlamalar üstesinden gelir.

Cerrahi safra kanalı ligasyonu (BDL), toksin kaynaklı karaciğer hasarı (yani, karbon tetraklorür, thioacetamide veya nitrozamin yönetim tarafından) ve diyet kaynaklı metabolik karaciğer sirozlu PHT en sık kullanılan kemirgen modelleri içerir hastalık modelleri. Prehepatik (sirozlu olmayan) PHT kısmi portal ven ligasyonu (PPVL)10tarafından indüklenen.

Küçük kemirgen fareler, hamster, fare veya tavşan, gibi sunulan yöntem için uygundur ve nispeten düşük bakım maliyeti ile ilişkilidir. Buna rağmen tüm hemodinamik değerlendirmelerinin fareler, daha iyi doğruluk ve tekrarlanabilirlik sonuçlarının gerçekleştirmek için uygun fareler veya daha büyük kemirgen hayvan boyutu bariz avantajı nedeniyle görülür. Buna ek olarak, belirli mikro- ve aygıtlar benzer Hemodinamik parametreler farelerde elde etmek için ihtiyaç vardır. Son olarak, fareler alt ilişkili morbidite ve mortalite ile daha sağlam ve böylece, bırakma oranları farelerde sıçanlarda düşük olasılığı daha yüksektir.

Sunulan metodoloji (yani, anti-fibrotik veya anti-inflamatuar ilaçlar) karaciğer hastalığının spesifik tedaviler değerlendirmek için çok uygundur veya bu etki vasküler sesi ve/veya endotel biyoloji roman farmakolojik yaklaşımlar; ve böylece, PHT olası etkisi Hemodinamik parametreler.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Tüm yöntem tanımlamak burada Viyana Tıp Üniversitesi ve Avusturya Bakanlığı Bilim, araştırma ve Ekonomi (BMWFW) Etik Komitesi tarafından onaylanmış olması. Yordamlar bir operasyon odasında aseptik şartlarda gerçekleştirilen veya benzer olmalıdır cerrahi müdahaleler hemodinamik ölçümleri temsil bu yana çalışma alanı temiz. Genellikle, steril koşullarda çalışma önerilir. Bir inhalasyon anestezi, ameliyat odası iş güvenliği için yeterli havalandırma düşünün. Bir saat süre 40-50 min/hayvan vardır durumda bu protokol için sunulan tüm hemodinamik veriler dikkate alınacak.

1. cerrahi öncesi hazırlıklar

  1. Açmak ve basınç güç çeviriciler üreticinin yönerge göre de dahil olmak üzere elektronik çok kanallı kayıt cihazı kalibre.
  2. Ultrasonik akış sondaları (1 mm ve 2 mm) köprü amplifikatör bağlamak.
  3. Steril fizyolojik serum çözüm, vücut ısısı, dokular veya gazlı bez sıkıştırır nemlendirme için 37 ° C ısıtılmış bir rezervuar hazırlayın.
  4. Ağırlık-düzeltilir anestezi ve vücut ağırlığına bağlı hemodinamik parametreler normalleştirme sağlamak için hayvan vücut ağırlığı kaydetmek.
  5. Tüm ekipman bir inhalasyon anestezi için hazırlayın.
    Not: inhalasyon anestezi ve/veya gerekli ekipman sitesinde veya uygun değil ise, daha sonra ketamin ve xylazine kullanarak enjeksiyon anestezi kullanılabilir (80-100 mg/kg ketamin ile 5-10 mg/kg xylazine fizyolojik serum çözümünde, mayi (IP)). Bir ketamin (azaltılmış doz 20-30 mg/kg, kas içi (sohbet)) 30-45 dakika sonra yeniden dozaj sürekli uçak cerrahi anestezi ikna etmek gereklidir.
  6. Hayvanın inhalasyon anestezi için bir indüksiyon kutusunu kullanarak kısa vadeli isoflurane anestezi altında (5 dk, % 5 v/v isoflurane, 3-4 L O2-akış). Dikkatle kutuyu eğilme ve hayvan hareketsizlik durumuna göre anestezi derinliği kontrol edin.
  7. Uygun bir kendi kendine yapılan Endotrakeal tüp fareyle tüp takacağım.
    Not: entübasyon tekniği için yeni olan personel için analjezi/anestezi (adım 1,10) hemen sonra kısa vadeli inhalasyon anestezi entübasyon için ekstra zaman sağlamak için verilebilir. Bir hayvan özgü sağlamlılık inhalasyon anestezi için başka bir seçenektir.
    1. Kendi kendine yapılan Endotrakeal tüp sizden bir değiştirilmiş periferik venöz kateter (14 G) kullanın. İşleme kanatlarını kesti ve bir yapışkan bant döngü sıçan yanak çıkığı Endotrakeal Tüpün (Şekil 1A) önlemek için posterior fiksasyon için yapıştırmayın.
    2. Değiştirilmiş bir arteryel kanül self-made kılavuz tel aygıttan bir kılavuz tel tutucu ve uygun künt uçlu kablo (Şekil 1B) kullanın.
    3. Uygun entübasyon masa uygun hayvan almak için kullanın. Hayvan açılı pozisyonu sırtüstü pozisyonda kafa ile yerleştirin.
      Not: hiçbir entübasyon Resepsiyon varsa, dikkatle tablonun kenar üzerinde gerilmiş boyun ile sırtüstü pozisyonda hayvan için mümkün. Ancak, bu yordamı yaralanma riski nedeniyle önerilmez.
    4. Fareyi bir tarafında bir sütür kesici dişler arkasında düzeltmek ve yavaşça, dikişi (Şekil 1 c) diğer tarafta bağlayarak hayvanın boyun germek.
    5. Önceden trakeal ventral yaka alan odaklanmış ışık demeti tarafından aydınlatmak. Albino hayvanlarda özellikle, ses telleri geliştirilmiş görselleştirme ve hızlı entübasyon için izin vermek için deri yoluyla ışıklı olun.
      Not: bir hayvan özgü Laringoskop pigmentli hayvanların entübasyon için kullanın.
    6. Dilini tut ve yavaşça iki parmak kullanarak çekin.
    7. Lidokain (pompa sprey) tarafından tedavi bir pamuk bud dikkatle gırtlak alan anestezi için kullanın.
    8. Hayvan Endotrakeal tüp vokal kıvrımları arasında ve kılavuz tel aygıt (Şekil 1 d) desteği kullanarak nefes borusu içine ekleyerek tüp takacağım.
    9. Kılavuz tel aygıtı kaldırın.
    10. Tüp vantilatöre bağlamak.
    11. Havalandırma için hayvan uygun ayarlarla başlatmak (1 L/min O2-akış, otomatik akış 90/dak; = inspiratory basınç: 18 mmHg; DİKİZLEMEK: 3 mmHg, ben / E = 1:2) ve onay için uygun entübasyon.
      Not: Eğer enflasyon mide kaydetti, tüp kaldırın ve yeniden deneyin. Ayrıca, solunum ritmi solunum faaliyete karşılaştırmak veya iki parmağınızı karın duvara doğru mide potansiyel enflasyon değerlendirmek için mide koyun.
  8. İsoflurane anestezi 0.5-1.0'de başlamak % v/v ve 1 L/dk O2-akış sonra hemen başarılı entübasyon (Şekil 2A).
  9. Endotrakeal tüp transbuccal dikiş yanak ve tüp yapıştırılmış yapışkan bant döngü ile sabitleyin.
  10. Ek anestezi ve analjezi iki 1 mL şırınga, Örneğin, ketamin (100 mg/kg) IP (23 G kanül) [veya kaudal uyluk kas (30 G kanül) ikili iğne enjekte birimi (doz) dağıtma tarafından sohbet] yönetmek ve piritramide (2 mg/kg) cilt altı (SC) enjeksiyonla (23 G kanül). Sohbet enjeksiyon enjeksiyon yeri (Şekil 2B) başına maksimum hacmi unutmayın.
  11. Göz merhem uygulamak. Karın bölgesi ve her iki iç uyluk vücut saç kırpın. Cilt dezenfekte.
    Not: Her iki iç uyluk femoral arter kateterizasyonu bir tarafta başarısız HR ve harita ölçmeler için kontralateral femoral arter kullanılmasına izin veren traş. Tıraş daha sonraki bir zamanda noktada cerrahi alan kirletmek saç neden olabilir.
  12. Hayvan bir ısıtma yastığı (38 ° C) üzerine sırtüstü pozisyonda yapışkan bant (Şekil 2C) ile düzeltmek.
  13. Hayvan sürekli olarak, Örneğin, vücut sıcaklığını bir rektal sıcaklık probu (Şekil 2B) kullanarak izleyin.
  14. Anestezi derinliği Kapak kapatma refleks ve ayak çimdik testi herhangi bir müdahale veya ameliyat öncesinde tarafından değerlendirmek.

2. insan kaynakları ve harita ölçüm

  1. Femoral arter varsayılan konumunu yukarıda iç uyluk (select bir tarafı) cilt cilt doku forsepsi tarafından kaldırarak deşmek ve yaklaşık 2 cm cilt alanını kaldırmak uzunluğa göre Mayo makas (3A rakam).
  2. Ortaya çıkarmak ve açık açık bir hemostat karmaşık boyunca tekrar tekrar açarak bağ dokusu (adventitia) femoral arterin içerir arter-damar-sinir kompleksi incelemek.
  3. Arter-damar-sinir kompleksi ~1–1.5 cm (Şekil 3B) boyunca çevredeki dokusundan incelemek.
  4. Gerekirse, bir daha iyi görüş ve diseksiyon için subkutan/perivasküler yağ çıkarmak.
    Not: yaralı kan damarları kanamalar neden olabilir beri subkutan/perivasküler yağ kütikül makas tarafından kaldırırken dikkatli olun. Kanama kaydetti, basınç kanama alanda küçük bir gazlı bez kullanarak uygulamak veya bir hemostat tarafından kanamayı durdurmak.
  5. Femoral arter femoral ven ve sinir ayrı iki yüksek hassasiyetli 45 ° açılı geniş nokta forseps ile (femoral ven en medial yapısı ve femoral arter bulunur düşünün daha yanal) (Şekil 3 c-F).
  6. Bir bağ femoral arter mümkün olduğunca distal ve kavisli bir kelepçe üzerinde dikiş nazik boyuna çekiş femoral arter ile uygulamak için kullanın.
  7. İkinci (ama değil kapalı düğüm) önceden düğümlü dikiş femoral arter olarak proksimal yerleştirmek mümkün (Şekil 3 g).
  8. Heparinized steril fizyolojik serum çözüm (5 mL şırınga ve 23 G künt kanül) ile boşaltılan eğimli (~ 45 °) kesme ipucu ile uygun kateter (sıçan femoral arter için PE-50) hazırlayın. Atardamar basıncı ve İK okuma (Şekil 3 H) engel olarak hiçbir hava kabarcıkları kateter içinde olduğundan emin olun.
  9. Femoral arter arteryel kan akımı (Şekil 3I) geçici olarak durdurmak için bir mikro kelepçe kullanma maruz kalan bölümüne proksimal ucunda sıkıştırın.
  10. Arteryel duvar disseke bölümünün distal bir yerde bükülmüş kanül (23 G) kullanarak femoral arter (Şekil 3J) altında destekleyici bir mikro metal spatula yerleştirerek süre sorgulamaktı.
  11. Dikkatle femoral arter eğimli ucu perforasyon yukarı bakacak şekilde kateterin içinden catheterize. Peşin Mikro kelepçe olana kateter yaklaşık olarak (Şekil 3 K).
    Not: bir daha proksimal ikinci girişimi durumunda başarısız kateterizasyon ilk denemede, femoral arter gerçekleştirilebilir (2.8 adımda başlar). Damarı yırtığı veya şiddetli kanama ortaya çıkarsa, ligate ya da daha fazla kan kaybı önlemek mümkün olduğu kadar proksimal arter kelepçe. Kan kaybı çok az ise, kontralateral femoral arter catheterizing girişimi (2.1 adımda başlar).
  12. Mikro kelepçe ve pulsatil arteryel kan akışı içine kateter (Şekil 3 L) için onay açın.
  13. Daha fazla kan akını kateter kateter çıkış bloke ederek önlemek.
  14. Kateter intraluminal konumunda hazırlanan proksimal bağ femoral arter ve tanıtılan kateter (Şekil 3 M) etrafında kapatarak düzeltin.
  15. Tekrar tekrar durulayın ve uygun damar içi yerleşim değerlendirmek için femoral arter kateter Aspire edin. Emişli kan sütunundaki arteriyel nabız-meli var olmak kolayca fark edilebilir.
  16. Kateter pozisyonu çıkığı önlemek ve kateter (Şekil 3N) boyuna konumunu sağlamak için distal ip uçlarını kullanarak gemi düzeltmek.
  17. Ayrıca, yakın hayvan güvenli ve kaza yerinden çıkması önlemek için cerrahi masada kateter teyp.
  18. Hava kabarcıklarının oluşumunu kaçınırken fizyolojik serum eriyik-e doğru basınç detektörler dolu kateter takın.
  19. İK ve dijital arabirimi (Şekil 3O) kullanarak harita kaydetmeye başlamak.
  20. Bir küçük ıslatılmış gazlı bez kompres (Şekil 3 P) ile iç uyluk üzerinde maruz kalan alanı kapsamaktadır.
  21. Hyperdynamic (HD) Endeksi hesaplanır: HD harita/HR =.
    Not: Gelişmiş PHT içinde sigara-portal hipertansif hayvanlar ile karşılaştırıldığında HD Dizin yükselmiş. Ancak, HD Dizin ameliyat sırasında bir artış da kanama, Hipovclemi ya da ağrı gösterebilir. Kaydedilmiş harita değerleri çok düşük ama sinyal iyidir ve pulsatil akışı içinde kateter tespit edildiğinde, anestezi düzeyini kontrol edin ve potansiyel olarak anestezi düzeyini azaltır. Tamamen bu yetersiz anestezi derinliği hayvan refahı ve iyi bilimsel uygulama göre neden olabilir beri isoflurane anestezi, durma.

3. superior mezenterik arter kan akımı (SMABF)

  1. Medyan laparotomi (Şekil 4A-C) gerçekleştirmek
    1. Doku forseps ile cilt katmanı kaldırın 5-6 cm xiphoid ve Kaldır bir Mayo kullanarak cilt ince bir şerit makas linea alba xiphoid kadar ulaşıldığında.
    2. Orta cilt kesi, doku forsepsi linea boyunca tarafından kas katmanı kaldırın alba splanchnic organlar ve karın duvarı arasındaki mesafe oluşturmak için.
    3. Periton boşluğuna linea, bir neşter ile karın duvarı incising tarafından açık alba. Doku forsepsi linea boyunca Metzenbaum makas ile tarafından karın duvarı kaldırma sırasında açılış genişletmek alba cilt katmanı olarak aynı mesafe.
  2. Dikkatle coecum ile başlatarak ıslak pamuk tomurcukları kullanarak bağırsak kazı ve steril fizyolojik serum çözüm kesi (Şekil 4 d-F) yanındaki batırılmış bir büyük gazlı bez kompres yerleştirin.
  3. Bağırsak gazlı bez sıkıştır sarın ve steril fizyolojik serum çözüm (Şekil 4 g) ile nemlendirilmiş emin olun.
  4. Bulun ve superior mezenterik arter bulaşmasına neden.
  5. Superior mezenterik arter iki self-made künt 'Schwabl' ile teşrih-kanca: arter ilk kanca ile Asansör ve ikincisi aynı doku tünelinden yerleştirmeyi deneyin. Superior mezenterik arter akışı sonda (1 mm)-ebilmek var olmak konulmak çevrede o (Şekil 4 H-K) emin olmak için 5 mm mesafe boyunca maruz.
    Not: tercih edilen, bir hassas 45° açılı geniş nokta forseps arter de kaldırmak için kullanılabilir. 'Schwabl'-kancalar kanca şekle bükülmüş açık açık kırık ipuçları ile 30 G kanüller hazır. Kollateral damar kapsamlıysa, 'Schwabl'-superior mezenterik arter dissekan önlenebilir iken kanca de¤erler kanamalar daha güvenli olabilir. Superior mezenterik arter hazırlarken kanama meydana gelirse, 1-2 dk hafif basınç ile kanama sitesine bir küçük gazlı bez kompres yerleştirin. Küçük kanama genellikle hızlı bir şekilde durur; her zaman doku düzenli olarak (adım 1.12) nemlendirme için unutmayın. Superior mezenterik arter kendisi zarar gelirse, hemodinamik değerlendirme tamamlanmalıdır.
  6. Ultrasonik akış sondanın sensör için ultrason jeli uygulayın ve bunu splanchnic mezenterik arter ile ekleyin. Superior mezenterik arter (Şekil 4L-M) doğal yol hizalayın.
  7. Akış sonda (1 mm) kapatır ve yavaşça gerekirse ek Ultrason jeli sinyal kalitesini artırmak için Doppler sensörüne uygular. Bunu Ultrason jeli ve bir künt uçlu kanül (18 G) (Şekil 4N-O) ile dolu bir şırınga (20 mL) kullanarak.
    Not: akış sonda de gemi doğal seyri değil hizalanmışsa, gerginlik vasküler daralma ve böylece, türbülanslı akış, akış ölçüm doğruluğunu azaltır neden olabilir. Geminin doğal yol boyunca akışı sonda yönünü yeniden hizalayın ve sonra yeterince akışı sonda uygun bir konumda düzeltmek deneyin.
  8. SMABF ölçmek ve pulsatil akışı sinyal femoral arter kayıt sistolik doruklarına için uygun olarak değerlendirin.
    Not: kaydedilmiş harita değerleri çok düşük ama sinyal iyidir ve pulsatil akışı içinde tespit edildiğinde kateter, anestezi düzeyini kontrol edin ve potansiyel olarak anestezi düzeyini azaltır. Tamamen bu hayvan refahı ve iyi bilimsel uygulama göre anestezi yetersiz derinliği neden olabilir beri isoflurane anestezi, durma.
  9. İstikrarlı bir akış sonda (1 mm) konumunu bulmak ve akış inceleyebilirsek tamir. SMABF daha fazla akış sonda (1 mm) (Şekil 4 P) manipülasyon olmadan kaydetmeye başlamak.

4. PVBF

  1. Bulun ve portal ven karaciğer Hilus (Şekil 5A) yakın olduğunu bıçaklanmasından dorsal yüzüne bulaşmasına neden.
  2. Yavaşça bir yüksek hassasiyetli 45 ° açılı geniş nokta forseps kullanarak çevredeki dokusundan portal ven teşrih: portal ven yavaşça ve sürekli olarak bir doku (5B rakam) oluşturmaları için portal ven altında forseps iterek yalıtmak.
    Not: bir kanama periportal dokudan portal ven hazırlarken ortaya çıkarsa, 1-2 dk pamuk bud kullanarak kanama sitesine hafif basınç uygulayın; Bu kez kanamayı durdurur.
  3. Tünel yüksek hassasiyetli 45 ° açılı geniş nokta forseps yavaş yavaş açarak büyütün ve portal ven perivasküler akışı sonda (2 mm) (Şekil 5C, D) yerleşimini izin vermek için 5-6 mm bir mesafe boyunca ortaya çıkarmak.
  4. Ultrasonik akış sondanın sensör için ultrason jeli uygulayın ve bunu doğal güzergâhı (Şekil 5E) ile uyumlu portal ven ekleyin.
  5. Akış sonda (2 mm) kapatır ve gerekirse, yukarıda açıklanan (adım olarak 3,7) ek Ultrason jeli uygular (Şekil 5F).
  6. Akış sonda portal ven (Şekil 5G) etrafında sıkıcı olmayan bir şekilde yerleştirildiğinden emin olun.
    Not: akış sonda de gemi doğal seyri değil hizalanmışsa, gerginlik vasküler daralma ve böylece, türbülanslı akış, akış ölçüm doğruluğunu azaltır neden olabilir. Geminin doğal yol boyunca akışı sonda yönünü yeniden hizalayın ve sonra yeterince akışı sonda uygun bir konumda düzeltmek deneyin.
  7. İstikrarlı bir akış sonda (2 mm) konumunu bulmak ve akış inceleyebilirsek tamir. Sonra PVBF (Şekil 5 H) kaydetmeye başlamak.
    Not: kaydedilmiş harita değerleri çok düşük ama sinyal iyidir ve pulsatil akışı içinde tespit edildiğinde kateter, anestezi düzeyini kontrol edin ve potansiyel olarak anestezi düzeyini azaltır. Tamamen bu hayvan refahı ve iyi bilimsel uygulama göre anestezi yetersiz derinliği neden olabilir beri isoflurane anestezi, durma.

5. S

  1. Bir sonda (sıçan mezenterik damarların için PE-50) ile bir eğimli (yaklaşık 45 °) hazırlamak steril fizyolojik serum çözüm (5 mL şırınga ve künt 23 G kanül) aktarılmadan kesme ipucu. Onlar s okuma (Şekil 6A) engel olarak kateter içinde hiçbir hava kabarcıkları olan dikkat edin.
  2. Bağırsak ıslak eldiven ve parmak (Şekil 6B) dağılmış yer ile başa.
  3. İnce bağırsak (Şekil 6C) yakın mezenterik vasküler yatağın görünümünü en iyi duruma getirme.
  4. Portal ven (vena ileocolica - vena mesenterica superior - vena portae) önde gelen ana venöz mezenterik damarları tanımlayın.
  5. Kateterizasyon için erişilemez ileocolonic damarın uygun bir bağlantı bulmak.
  6. İlk kateter mezenterik dokusuna bıçaklanmasından visseral periton yakın kateterizasyon için seçilen vasküler kavşak perfore tarafından sopa.
  7. Gemi kavşak hafif bir izlenim görülür kadar dikkatle kateter daha yakın eğimli ucu ileocolic ven bir birleşme için ilerlemek (Şekil 6D).
  8. Son olarak, birleşme geminin rota uygun venöz sistemi gemilerin geçiş açıyla vasküler duvar perfore tarafından catheterize. (Şekil 6E).
    Not: ileocolic ven kateterizasyonu kanama meydana gelirse, kanama alanda bir küçük gazlı bez kompres ile bir başparmak basın kullanarak. Bu basınç kanamayı durdurmak 1-2 min için sağlanmalıdır. Daha sonra bir daha proksimal ileocolic ven şubesine kateter eklemeye çalışır.
  9. Kateter ilerlemek dikkatle daha ven (Şekil 6F) perfore olmadan portal ven için ana venöz damar yolu birlikte.
    Not: kateter portal ven akışı sinyal aktarımında önlemek için ve portal ven perforasyon önlemek için ana dalı yerleştirilen akışı sonda için yeterli bir mesafe tutun.
  10. Hava kabarcıklarının oluşumunu kaçınırken fizyolojik serum eriyik-e doğru basınç detektörler dolu kateter takın.
  11. PP kaydetmeye başlamak.
  12. Aynı anda birkaç dakika (Şekil 6G, H) istikrarlı koşullar altında tüm Hemodinamik parametreler kayıt. İsteğe bağlı olarak, portal venöz kateter doku yapıştırıcı kullanarak yerde sabit ve bağırsak karın boşluğuna yeniden konumlandırılabilir.
    Not: kaydedilmiş harita değerleri çok düşük ama sinyal iyidir ve pulsatil akışı içinde tespit edildiğinde kateter, anestezi düzeyini kontrol edin ve potansiyel olarak anestezi düzeyini azaltır. Tamamen bu hayvan refahı ve iyi bilimsel uygulama göre anestezi yetersiz derinliği neden olabilir beri isoflurane anestezi, durma.

6. IHVR

  1. Hayvan ödün sonra karaciğer ağırlığı ölçmek. IHVR hesaplamak: IHVR PVBF/s. Normalize = karaciğer ağırlığı bu PVBF değerini.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Hayvan modeli ve karaciğer hastalığı şiddetine bağlı olarak, PHT derecesini ve portal hipertansif sendromu şiddeti farklı (Şekil 7) olduğunu.

BDL modeli biliyer siroz nedeniyle Histiositoz neden olur. Buna göre zaman ve bir hyperdynamic üzerinde s artırır dolaşım geliştirir, İK artış ve harita azalma görüldüğü gibi. Sirozlu hayvanlarda, SMABF, PVBF ve IHVR da önemlisi hepatik ve hemodinamik değişiklikler (Şekil 7A-F) için artırın.

Buna ek olarak, PP hemen bir artış ve sistemik hemodinami karşılık gelen değişiklikleri ile karakterize Prehepatik, Sigara sirozlu PHT PPVL neden olur (Şekil 7 g-ben). Ancak, zaman-ders portosystemic de¤erler sırasında hangi PP düşürebilir geliştirmek.

Sham işletilen hayvan hemodinamik değerleri fizyolojik düzeylerde kalır ve zaman içinde önemli ölçüde değişmez. Portal sağlıklı SO hayvanlarda en fazla 5-6 mmHg (şekil 7J-L) basıncıdır.

Figure 1
Şekil 1: self-made entübasyon cihazlar: (A)Endotrakeal tüp. (B) kılavuz tel aygıt (C) entübasyon resepsiyon. (D) tüp kılavuz tel aygıta bağlı. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 2
Şekil 2: cerrahi öncesi hazırlıklar: (A)entübasyon hayvan. (B) Intramuscular ve anestezi için subkutan enjeksiyon. Mat Isıtma üzerinde (C) fiksasyonu hayvan. (D) yerleştirme ve rektal sıcaklık probu sabitleme. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 3
Şekil 3: kalp hızı (İK) ve ortalama arter basıncı (Harita): (A)cilt kesi. (B) hazırlanması femur damar ve sinir yapıları. (C-F) Femoral arter diseksiyonu. (G) Distal sütür fiksasyonu - proksimal proksimal dikiş önceden o düğüm. (H) femoral kateter hazırlanması. (ben) vasküler mikro kelepçe yerleşimini. (J) perforasyon femoral arter bend iğneyle. (K) femoral arter kateterizasyonu. Darbe değerlendirilmesi için Mikro kelepçe (L) açılması. (M) kateter proksimal fiksasyonu. (N) kateter Distal fiksasyonu. (O) harita ölçüm ve sırılsıklam küçük gazlı bezle cerrahi alan kapsayan saatlik (P) sıkıştırmak. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 4
Şekil 4: Superior mezenterik arteryel kan akımı (SMABF): (A-C) Medyan laparotomi. Coecum (D) kazı. (E-F) Kazı bağırsak. (G) kaydırma batırılmış gazlı bez sıkıştır bağırsaklar. (H-K) Künt kanül ile splanchnic mezenterik arter hazırlanması için kanca oluşturur. (L, M) Akış sonda Eki. Ultrason uygulanması (N) akış sondayı sensör üzerinde jel. (O) doğru 'sıkıcı olmayan' yerleşimini akışı inceleyebilirsek. SMABF (P) ölçüm birimi. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 5
Şekil 5: Portal venöz kan akımı (PVBF): (A)için optimize edilmiş dorsal portal ven mezenterik Yağ dokusundan (B) diseksiyon portal ven üzerinde göster. (C) portal ven akışı sonda için bir doku tünel oluşturma. (D, E) Portal ven için ek akışı inceleyebilirsek. Ultrason uygulanması (F) akış sondayı sensör üzerinde jel. (G) doğru 'sıkıcı olmayan' yerleşimini akışı sonda. PVBF (H) ölçüm birimi. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 6
Şekil 6: Portal basınç (s): (A)kateter hazırlanması. (B) bağırsak hazırlanması. (C) için optimize edilmiş üzerinde ana mezenterik venöz damarlara görüntüleyin. (D) perforasyon visseral Karın zarını ve kateter yakın uygun vasküler şube ilerlemesi. (E) kateterizasyonu ileocolic damarın ana dal ve yan dal arasında kavşak açıyla. Kateter ucu (F) ilerlemesi için karaciğer Hilus daha yakın portal ven içine. (G, H) S. ölçümü Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 7
Şekil 7: temsilcisi sonuçlar: (A) s, (B) harita ve (C) İK BDL sıçanlarda zaman tabii. Buna göre (D) SMABF, (E) PVBF ve (F) IHVR değişiklikler gözlenir. PPVL, (G) s, (H) harita ve (ben) İK Hemodinamik değişiklikler ameliyat sonrası ilk günlerinde en belirgin. İçinde sağlıklı sham (yani hayvanlar, (J) s, (K) harita ve (L) İK fizyolojik değerleri içinde kalır ve zaman içinde değişmez) ile çalışan. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

S ana sonuç parametresi için portal hipertansif sendromu değerlendirilmesi ve temel siroz şiddetini yansıtır. Matris ifade (Örneğin, fibrozis) ve (nedeniyle hepatik ifade vasoconstrictors artmış ve kavramaları vazodilatör düşmüştür) sinüsoidal vazokonstriksiyona artan IHVR neden olur. Birden çok preklinik11,12,13,14 ve klinik çalışmalar15,16, PP ve kronik karaciğer hastalığı üzerindeki etkilerini önemini gösterilmiştir 17 , 18. bu nedenle, sirozlu hastalarda, PP zor sonuç parametresi, onun azaltma tedavi yönergeleri19,20 ve geçerli Hepatoloji ana araştırma amacı tarafından önerilir. Kapsamlı hayvan modelleri karakterize ve16,21 roman tedavi seçenekleri PHT22çevirmek için ihtiyaç vardır. Bu iletişim kuralı değerlendirme portal basınç, hyperdynamic kan dolaşımı, splanchnic vazodilatasyon ve intrahepatic direnç de dahil olmak üzere bir detaylı hemodinamik karakterizasyonu için gereken yöntemi sunuyor. Bir temsilcisi ve kemirgen modellerden tam hemodinamik veri kümesi elde etmek için deneyim ve eğitim performans gösteren operatörü olduğunu son derece önemli.

Önleme ve şiddetli kanamalar kontrolünü özellikle anahtar becerileri vardır. Kesin ve açık sözlü hazırlıkları'faiz damar bölümlerinden cannulation hataları ve şiddetli kanamalar önlemek için önemlidir. Önemli kan kaybı hemodinami üzerinde bir etkisi vardır ve doğru ölçümler PP engellemektedir veya laboratuvar hayvanı ölümde bile sonuç olabilir. Bu protokolleri ölçümler sırasında meydana gelmiş ve önem derecesi ve kanama konum karakterize belge kanamalar.

Notun, kan akımı değerlendirmek için perivasküler ultrason akışı problar kullanarak yalnızca yaklaşık üretir ve hataları nedeniyle farklı gemi boyutları ve yanlış sonda hizalama okumaya tabi. Kan akışı ve özellikle (manevra portosystemic hesaplanması da dahil olmak üzere) kan akımı dağıtım ölçmek için başka bir teknik renkli microsphere tekniği23' tür. Ancak, tüm organları, çözünmüş, analiz ve hasat gerekir ve bu olasılık histolojik gerçekleştirmek için veya ifade analizi atlar. Bu nedenle, Ultrason tekniği 'Üç Rs' prensipleri hayvan araştırmaları destekler (azaltmak, rafine ve eski yerine koymak) tarafından Russell ve Burch24. Buna ek olarak, akış sondaları organ (mezenterik kan) akış zaman içinde entegre renkli microsphere tekniği gerektirir iken gerçek zamanlı ve diğer Hemodinamik parametreler için paralel splanchnic kan akımını izlemek uygundur. Ayrıca, genellikle 15 µm bir çapa sahip, bir normal dağılım mikro-damarlarının kapana kısılmış ve hareketsiz kalmamak için ilgili organlarında çapı < 15 µm ile gerektirir, mikroküreler, renkli hangi sirozlu karaciğer durumda olmayabilir.

Bu yöntemin ana sınırlama PHT sendromu hayvanlarda hemodinamik karakterizasyonu sırasında bilinçsizlik ve anestezi bir devlet için ihtiyaç vardır. En yaygın ve yaygın olarak kullanılan enjeksiyon anestezi ketamin/xylazine genellikle 30-45 dakika sonra anestezi25,26gerekli bir derinlik elde etmek için redosing gerektirir; özellikle sorun giderme gerekiyorsa, bu zaman baskısı ekler. İnhalasyon anestezi kullanarak pek çok avantajı içerir ama özel donatım gereklidir ve emanet düzenlemeler ile ilgili uçucu anestezi izlenmesi gerekir. Anestezi derinliği ile cerrahi prosedürler anestezi konsantrasyon ayarlayarak engel olmadan hızla adapte edilebilir. Özellikle etkinleştirmesi ketamin ve havalandırma tarafından kurtuluş yeterli oksijenlenme ve havalandırma hayvanın anestezi kaynaklı ölüm27riskini düşürmek için garanti altına alır sonra Endotrakeal tüp airways güvenlik altına alır. Ketamin/xylazine olmakla birlikte hala yaygın olarak kullanılan, düşük doz isoflurane anestezi fareler28,29hemodinamik veya kardiyovasküler parametreler hiçbir önemli değişiklik neden olur.

Yerel deneyim ve düzenlemeler techizatları öneriler ve anestezi en iyi yöntemler ve araştırmacılar sürekli bu hemodinamik değerlendirme30gerçekleştirmek için kullanılan anestezi türünü tekrar düşünmek gerekir sağlar. Gelecekteki deneyler telemetri geçerli sınırlamaları ile ilgili genel anestezi üstesinden gelmek ve hemodinamik bilinçli hayvanlar karakterizasyonu izin implante kablosuz basınç güç çeviriciler ile kullanabilirsiniz.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar ifşa gerek yok.

Acknowledgments

Bizim araştırma projeleri sırasında veteriner hekimler, hemşireler ve hayvan sahipleri, Merkezi Biyomedikal araştırma sürekli destek için teşekkür ederiz. Yazarlar bu protokolün tüm gözden geçirenlerin önemli giriş kabul eder. Bazı araştırma finanse Avusturyalı Gastroenteroloji Derneği ve Hepatoloji (ÖGGH) PS "Genç Bilim Ödülü" ve "Skoda Ödülü", Avusturya toplum iç hastalıkları için TR tarafından.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Instruments
LabChart 7 Pro software ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA  - Software
ML870 PowerLab 8/30 ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA  - Electronic multichannel recorder
MLT0380/D ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA  - Pressure transducer (x2: for Portal Pressure and Arterial Pressure)
ML112 Quad Bridge Amplifier ADInstruments, Colorado Springs, CO, USA  - Bridge amplifier
TS420 Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA  - Flowmeter module
Biological Research Apparatus 7025 UGO BASILE S.R.L., Comerio, Italy  - Ventilator
Vapor 2000 Dräger Medical AG & Co. KG, Lübeck, Germany  - Isofluran Vaporizer
Perivascular probes (rat) for Transonic systems (Superior Mesenteric Artery) Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA #MA1PRB Ultrasonic flow probe (1mm)
Perivascular probes (rat) for Transonic systems (Portal Vein) Transonic Systems Inc., Ithaca, NY, USA #MA2PSB Ultrasonic flow probe (2mm)
1st for intubation & 2nd for clean skin incisions  -  - Mayo scissor [x2]
Metzenbaum scissor  -  -  -
Cuticle scissor  -  -  -
e.g. Adson Brown tissue forceps  -  - Tissue Forceps
High precision 45° angle broad point forceps [x2]  -  -  -
Hemostat [x4]  -  -  -
e.g. Mikulicz peritoneal clamp  -  - Curved clamp
e.g. Dieffenbach clamp  -  - Micro clamp
e.g. micro spatula with flat ends, width 4 mm,  -  - Micro metal spatula
for transbuccal suture at intubation  -  - Needle holder
Scalpel grip  -  -  -
selfmade  -  - Intubation desk
blut, flexible and with a suitable diameter for arterial cannula and venflow  -  - Blunt steel wire
modified arterial line 20G with Flowstich Becton Dickinson, Farady Road, Swindon, UK #682245 Arterial line
Heating pad  -  -  -
Rectal temerature probe  -  -  -
Saline heater  -  -  -
Laryngoscope (specific for animal size, e.g. rat)  -  -  -
Inductionbox for inhalation anesthesia  -  -  -
Scale (able to measure mg)  -  -  -
Hair clipper  -  -  -
Name Company Catalog Number Comments
Consumables
e.g. modified BD Venflon Pro Safety 14GA Becton Dickinson Infusion Therapy, AB, SE251 06 Helsingborg, Sweden #393230 Peripheral venous catheter (14G)
Fine-Bore Polyethylene Tubing, ID 0.58mm, OD 0.96mm, Portex, Smiths Medical International Ltd., Kent, UK #800/100/200 Catheter tube (PE-50)
e.g. Omnifix-F Solo B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany #9161406V Syringe 1mL
e.g. Injekt Solo B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany #4606051V Syringe 5mL
e.g. Injekt Solo B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany #4606205V Syringe 20mL
e.g. BD Microlance 3, 18G - 1 1/2" Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain #304622 Cannula (18G)
e.g. BD Microlance 3, 23G - 1" Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain #300800 Cannula (23G)
e.g. BD Microlance 3, 30G - 1/2" Becton Dickinson S.A., Fraga, Spain #304000 Cannula (30G)
e.g. Leukoplast S BSN medical GmbH, Hamburg,  Germany #47619-00 Adhesive tape
e.g. Gazin RK Mullkompressen (18x8cm) Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria #10972 Gauze compress (small)
e.g. Gazin RK Mullkompressen (5x5cm) Lohmann & Rauscher, Vienna, Austria #10961 Gauze compress (big)
Silk Braided black, USP 4/0, EP 1.5 SMI AG, St. Vith, Belgium #2021-04 Suture (Silk 4/0, EP 1.5)
e.g. Mersilk, 2-0 (3 Ph. Eur.), PS-1 Prime Johnson & Johnson Medical GmbH - Ethicon Deutschland, Germany #EH7552 Transbuccal suture
e.g. Cottonbuds (2.2mm, 15cm) Paul Hartmann AG, Heidenheim, Germany #967936 Cotton buds
e.g. Vue Ultrasoundgel Optimum Medical Limited, UK #1157 Ultrasound gel
e.g. Glubran 2 Gem srl, Viareggio, Italy #G-NB2-50 Tissue glue
e.g. Surgical scalpell knife Nr. 10 - carbon steel Swann-Morton, England, B.S. #202 Scalpel Knife
Heparin, 5000 i.E./mL (Natriumheparin) Medicamentum Pharma GmbH, Allerheiligen im Mürztal, Austria  - Heparin
Florane Aesica Queenborough Ltd., Queenborough, UK  - Isoflurane
OeloVital (5g) Fresenius Kabi Austira Gmbh, Graz, Austria  - Eye gel
Ketasol aniMedica GmbH, Senden-Bösensell, Germany  - Ketamine
Rompun Bayer Austria Ges.m.b.H., Vienna, Austria  - Xylazine
Xylocain 10% Pumpspray AstraZeneca Österreich GmbH, Vienna, Austria  - Lidocaine pump spray
Dipidolor Jansen-Cilag Pharma GmbH, Vienna, Austria  - Piritramide
NaCl 0.9% Fresenius, 1L Fresenius Kabi Austira GmbH, Graz, Austria #13LIP132 Physiological saline solution

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ripoll, C., et al. Hepatic venous pressure gradient predicts clinical decompensation in patients with compensated cirrhosis. Gastroenterology. 133, (2), 481-488 (2007).
  2. Bosch, J., Groszmann, R. J., Shah, V. H. Evolution in the understanding of the pathophysiological basis of portal hypertension: How changes in paradigm are leading to successful new treatments. J Hepatol. 62, S121-S130 (2015).
  3. Blachier, M., Leleu, H., Peck-Radosavljevic, M., Valla, D. C., Roudot-Thoraval, F. The burden of liver disease in Europe: a review of available epidemiological data. J Hepatol. 58, (3), 593-608 (2013).
  4. Colle, I., Geerts, A. M., Van Steenkiste, C., Van Vlierberghe, H. Hemodynamic Changes in Splanchnic Blood Vessels in Portal Hypertension. Advances in Integrative Anatomy and Evolutionary Biology. 291, (6), 699-713 (2008).
  5. Laleman, W., Van Landeghem, L., Wilmer, A., Fevery, J., Nevens, F. Portal hypertension: from pathophysiology to clinical practice. Liver International. 25, (6), 1079-1090 (2005).
  6. Franchis, R. d Updating Consensus in Portal Hypertension: Report of the Baveno III Consensus Workshop on definitions, methodology and therapeutic strategies in portal hypertension. Journal of Hepatology. 33, (5), 846-852 (2000).
  7. Zardi, E. M., Di Matteo, F. M., Pacella, C. M., Sanyal, A. J. Invasive and non-invasive techniques for detecting portal hypertension and predicting variceral bleeding in cirrhosis: a review. Annals of medicine. 46, (1), 8-17 (2014).
  8. Kumar, A., Sharma, P., Sarin, S. K. Hepatic venous pressure gradient measurement: time to learn. Indian J Gastroenterol. 27, (2), 74-80 (2008).
  9. Tsochatzis, E. A., Bosch, J., Burroughs, A. K. Liver cirrhosis. Lancet. 383, (9930), 1749-1761 (2014).
  10. Abraldes, J. G., Pasarín, M., García-Pagán, J. C. Animal models of portal hypertension. World Journal of Gastroenterology : WJG. 12, (41), 6577-6584 (2006).
  11. Reiberger, T., et al. Sorafenib attenuates the portal hypertensive syndrome in partial portal vein ligated rats. Journal of Hepatology. 51, (5), 865-873 (2009).
  12. Schwabl, P., et al. Pioglitazone decreases portosystemic shunting by modulating inflammation and angiogenesis in cirrhotic and non-cirrhotic portal hypertensive rats. Journal of Hepatology. 60, (6), 1135-1142 (2014).
  13. Reiberger, T., et al. Nebivolol treatment increases splanchnic blood flow and portal pressure in cirrhotic rats via modulation of nitric oxide signalling. Liver International. 33, (4), 561-568 (2013).
  14. Schwabl, P., et al. The FXR agonist PX20606 ameliorates portal hypertension by targeting vascular remodelling and sinusoidal dysfunction. Journal of Hepatology. 66, (4), 724-733 (2017).
  15. Mandorfer, M., et al. Sustained virologic response to interferon-free therapies ameliorates HCV-induced portal hypertension. J Hepatol. 65, (4), 692-699 (2016).
  16. Schwabl, P., et al. Interferon-free regimens improve portal hypertension and histological necroinflammation in HIV/HCV patients with advanced liver disease. Aliment Pharmacol Ther. 45, (1), 139-149 (2017).
  17. Reiberger, T., Mandorfer, M. Beta adrenergic blockade and decompensated cirrhosis. Journal of Hepatology. 66, (4), 849-859 (2017).
  18. Reiberger, T., et al. Carvedilol for primary prophylaxis of variceal bleeding in cirrhotic patients with haemodynamic non-response to propranolol. Gut. 62, (11), 1634-1641 (2013).
  19. Reiberger, T., et al. Austrian consensus guidelines on the management and treatment of portal hypertension (Billroth III). Wiener klinische Wochenschrift. 129, (3), 135-158 (2017).
  20. de Franchis, R. Expanding consensus in portal hypertension. Journal of Hepatology. 63, (3), 743-752 (2015).
  21. Pinter, M., et al. The effects of sorafenib on the portal hypertensive syndrome in patients with liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma - a pilot study. Alimentary Pharmacology & Therapeutics. 35, (1), 83-91 (2012).
  22. Schwabl, P., Laleman, W. Novel treatment options for portal hypertension. Gastroenterol Rep (Oxf). 5, (2), 90-103 (2017).
  23. Klein, S., Schierwagen, R., Uschner, F., Trebicka, J. Mouse and Rat Models of Induction of Hepatic Fibrosis and Assessment of Portal Hypertension. (2017).
  24. Russell, W. M. S., Burch, R. L. The Principles of Humane Experimental Technique. (1959).
  25. Langhans, W., Myrtha, A., Riediger, T., Lutz, T. A. Routine animal use procedures. Institute of Veterinary Physiology, University of Zurich, Physiology and Behavior Laboratory, Institute of Food, Nutrition and Health, ETH Zurich. (2016).
  26. Animal Care and Use Program. Rat and Mouse anesthesia and analgesia: Formulary and General Drug Information. The University of British Columbia. (2016).
  27. Davis, J. A. Current Protocols in Neuroscience. John Wiley & Sons, Inc. (2001).
  28. Albrecht, M., Henke, J., Tacke, S., Markert, M., Guth, B. Effects of isoflurane, ketamine-xylazine and a combination of medetomidine, midazolam and fentanyl on physiological variables continuously measured by telemetry in Wistar rats. BMC Veterinary Research. 10, (1), 198 (2014).
  29. Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat. Laboratory Animals. 48, (1), 6-14 (2014).
  30. Becker, K., et al. Statement on anesthesia methodologies: Recommondations on anaesthesia methodologies for animal experimentation in rodents and rabbits. GV-SOLAS - German veterinary association for animal welfare. (2016).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics