Clostridium Perfringens 독성 연구를 마 취 특정 병원 체 무료 닭에 합자 장 루프 모델

Medicine

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Summary

여기 치킨 소장에서 '장 합자 루프'를 수술로 만들려고 프로토콜 선물이. 이 절차는 여러 Clostridium perfringens 긴장의 독성에서 제자리에 단일 호스트에서의 비교에 대 한 수 있습니다. 이 메서드는 현저 하 게 일반적으로 비슷한 vivo에서 실험에 필요한 닭의 수 감소.

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Parent, E., Burns, P., Desrochers, A., Boulianne, M. A Ligated Intestinal Loop Model in Anesthetized Specific Pathogen Free Chickens to Study Clostridium Perfringens Virulence. J. Vis. Exp. (140), e57523, doi:10.3791/57523 (2018).

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Abstract

괴 사 성 장 염은 다양 한 비보에 감염 모델을 사용 하 여 닭에 공부 했다. 대부분의 gavage 또는 Clostridium perfringens를 사용 하 여 피드를 통해 관리 predisposing 요소, coccidiosis, 다이어트, 등의 조합을 사용 합니다. 이러한 모델에서 독성 연구에 대 한 여러 C. perfringens 긴장의 비교는 많은 중요 한 결과 얻기 위해 호스트 필요 합니다. 연구의 과정에서 사망률 따라서 연구에서 동물 복지에 관한 윤리적 우려를 제기 하는 실험 모델에 따라 높은 수 있습니다. 적은 동물 공부 병 인, 아직 제공 하 고 통계적으로 중요 하 고 유효한 결과 요구 하는 새로운 감염 모델의 개발 연구에서 동물 사용 감소에 중요 하다. 쥐, 토끼, 송아지 등 다양 한 종에서 clostridial 감염 공부 하 장 합자 루프 모델 사용 되었습니다. 합자 루프 세그먼트를 만드는 수술 절차에 따라 C. perfringens 긴장 박테리아와 장 점 막 사이의 긴밀 한 접촉을 설정 하는 루프에 직접 주입 됩니다. 소장 및 luminal 내용을 샘플 몇 시간 후 절차의 종료에 찍힌다. 여러 세균성 긴장 따라서 실험에서 필수 과목의 수를 줄이고 각 동물에 주사 될 수 있습니다. 또한, 절차는 동물 통증을 줄이기 위해 전신 마 취 아래 수행 됩니다. 닭,이 모델을, 때문에 적은 동물 필요 없음 predisposing 요소, 질병을 유발 하는 데 필요한 통증 진통제에 의해 제어 됩니다 C. perfringens 스트레인 pathogenicity 비교할 구강 관리 보다 더 적절 한 것 . 장 합자 루프 모델은 닭에 제대로 설명 하 고 표준화의 최적의 사용을 위해 필수적 이다. 이 원고는 닭에 수많은 장 합자 루프를 만드는 데 필요한 모든 단계를 제공 하 고 유효한 결과 얻기 위해 중요 한 포인트에 대 한 정보를 제공.

Introduction

인간과 동물에 영향을 미치는 전염병 연구 동물 모델의 사용 규제 정교를 방지 하거나 질병1치료 전략으로 특정 조건 또한의 병 독성 요인 평가에서 중앙 도구입니다. 동물 모델을 사용 하 여 다양 한 질병 연구의 수많은 장점에도 불구 하 고이 연습에 대하여 윤리적인 관심사는 발생 하는. 연구팀은 중요 하 고 유효한 결과 가져오는 동안 동물 사용을 최소화 해야 합니다. 3 Rs 원칙 (대체, 감소 및 수정)의 개념은 복지 문제 같은 재판에서 해결 했다 보장 하기 위해 정교 했다. 닭 괴 사 성 장 염 연구, 치킨 모델 vivo에서 병 인, 예방, 및이 조건2,3,,45의 치료를 조사 하는 데 사용 됩니다. C. perfringens 들고 NetB 독 소6, 등 특정 독성 요인의 병원 성 긴장 닭7에서 괴 사 성 장 염을 일으킬 관리 됩니다. 교체 원리가 이다, 따라서, 이러한 독성 요인으로 중요 한 다른 동물 종에 되지 않을 수도 있습니다 이러한 경우에 달성 하기 어렵습니다. 대부분 닭에서 괴 사 성 장 염에 대 한 위험 요소, coccidiosis 등의 조합을 사용 하 여 모델과의 C. perfringens2. 의 많은 수를 포함 하는 국물 문화 gavage 뒤 괴 사 성 장 염을 유발 하는 다이어트를 변경 이러한 모델에 많은 닭, 질병을 유발 한다 고 사망률 같은 재판8, 따라서 동물 연구에서 감소와 상세 원칙에 대 한 우려를 제기에 중요할 수 있습니다.

장 합자 루프 모델 원리 감소 및 구체화 장내 병원 균에 의해 유도 된 질병의 연구에 대 한 바람직한 대안입니다. 이 모델에서 '루프' 라는 장 세그먼트 병원 체는 혼자9 주입 될 수 있는 독립적이 고 밀폐 구획을 형성 하는 창 자를 따라 또는 백신 후보자 등 다른 분자와 연자를 배치 하 여 만들어집니다. 10 , 11. 관심의 병원 체 장 세포와 가까운 접촉에 배치 되 고 몇 시간 후 감염 시간, 장 샘플 추가 분석을 위해 재기 될 수 있다. 이 같은 동물에서 여러 치료 및 제어 그룹의 사용을 수 있습니다. 그룹 간의 차별의 힘을 증가 하 고 구강 재판에 비해 필요한 닭의 수를 감소, 반복된 측정 모델 통계 분석을 수행할 수 있습니다. 또한, 수술 절차와 후속 감염 시간 연속 전신 마 취 및 진통, 따라서 동물 고통 최소화에서 수행 됩니다. 폐쇄 루프 ligations 호스트 숫자를 줄이고 동물 연구에서 더 인간적 시스템을 만들기 위한 이상적인 서식 파일입니다.

장 합자 루프 모델 송아지, 토끼 및 쥐2,9, 등 다양 한 종에 잘 설명 되어 있지만 제대로 닭7에 설명 된. 이 수술 모델의 최적의 사용에 대 한 적절 한 기술과 실행 장 무결성에 손상을 피하기 위해 합자 장 루프의 창조를 위해 필수적입니다. 이 원고의 목표 치킨 모델에 여러 장 루프의 생성에서 단계 메서드를 설명 하는 것입니다. 이 기술은 정확한 절차는 프로젝트의 성공을 위해 필수적으로 외과 의사의 기술과 경험에 의해 제한 됩니다.

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Protocol

라이브 동물 사용과 모든 절차의 학부의 수의학, 대학교 드 몬트리올 윤리 위원회에 의해 승인 되었다 (CÉUA, '위원회 회의 d' éthique 드 데 동물 ').

1입니다. 수술 전 고려 사항

  1. 10 주 오래 된 수술에 대 한 특정 병원 체 자유롭게 (SPF) 레그 닭을 선택 합니다.
    참고: 자신의 체중 1.0과 1.2 k g 사이 여야 합니다.
  2. 피드를 빈 창 자 절차 이전 12 h를 철회 한다.
  3. 수술 전에 전신 마 취에 의해 확인 하는 프로토콜을 다음에서 닭을 놓습니다. Premedicate 각 치킨 midazolam의 근육 주사 (IM)으로 수술 하기 전에 15 분 1 mg/kg 및 butorphanol 4 mg/kg. 반복, 모든 4 h butorphanol 주사 4 mg/kg IM 또는 호흡 패턴 변화와 주파수 마 취 동안 증가 하는 경우. 전신 마 취에 대 한 모든 절차 동안, 1.5와 intratracheal 튜브 2.5% 농도에서 isoflurane를 관리 합니다.
    참고: 진정 및 진통에 대 한 premedication의 사용으로 그들은 것입니다 크게 마 취의 깊이 향상, 필요한 모든 절차 동안, 마 취약의 수량을 줄일 뿐 아니라 통증 수준을 제어 하는 연구원을 가능 하 게 좋습니다.
  4. 체온, 심장 박동 및 심전도 (ECG), 호흡 속도 리듬, 산소 포화, 만료 된 이산화탄소 (CO2)과 신경학 적 반사를 기록 하 여 마 취를 모니터링 합니다.
    참고: 모든 절차를 통해 이러한 매개 변수를 모니터링 하는 사람이 할당 되어야 합니다.
  5. 수술 절차를 통해 무 균 원칙을 따릅니다. 외과 의사와 보조 외과 의사 드레스 멸 균 가운, 장갑, 마스크와 보호 고글 기관 수술 프로토콜에 따라 확인 합니다. 외과 의사 손톱과 각 손가락 표면에 중점을 두고 팔꿈치까지 액체 gluconate 임신 살 균 브러시와 손을 스크럽 확인 합니다.
  6. 살 균 제와 수술 기구를 소독.

2. 외과 사이트 준비

  1. 첫째, 수동으로 부드러운 견인 복 부에서 깃털 제거 합니다.
  2. 브러시로 액체 gluconate 세제 임신 불 임 수술 사이트 스크럽. 부드럽게 센터에 다시 오는 없이 5 분의 총 접촉 시간에 대 한 밖으로 센터에서 피부를 문질러.
  3. 액체 gluconate 솔루션와 이소프로필 알코올 살 균 gauzes를 사용 하 여 외과 사이트에 3 다른 구절을 수행 합니다.
    참고: 통과 수술 사이트에 소독 되지 않은 지역에서 오염을 피하기 위하여 국경에 외과 사이트의 중간에서 시작 해야 합니다.
  4. 닭고기에 메 마른 외과 용 드 레이프를 놓습니다.

3. 복 부 구멍에서 작은 창 자를 추출

  1. 외과 용 드 레이프가 위로 외과 사이트의 피부 노출에 incise.
  2. 메스 칼 날 #3 ' L' 모양의 낮은 중간 절 개를 수행 하 여 피부를 incise.
    1. 첫 번째 절 개 흉 골에 꼬리 1 cm를 시작 하 고 마지막 1 cm는 cloaca 두개골에서.
    2. 첫 번째 절 개에 수직인 두 번째 절 개를 수행 합니다. 첫 번째 절 개의 꼬리 끝에서 시작 하 고 골반 라인을 따라 복 부의 왼쪽에 5 cm를 계속.
      참고:이 오프닝 플랩 내장의 쉽게 추출 수 있도록 만들어집니다.
  3. 수술이 위, 복 막 및 복 부 구멍을 열고 같은 'L' 모양 패턴으로 복 부 근육을 잘라.
    참고:이 공기 낭을 노출 합니다. 창 자는 이러한 구조 아래 있습니다. 공기 주 머 니 나 gauzes 건조와 절차를 통해 가능한 파열을 피하기 위해 멸 균 식 염 수 0.85% 포화와 습도 해야 합니다.
  4. 삽입 시 시 해 spay 왼쪽된 복 부 벽을 따라 복 부 구멍에 연결 하 고 복 부 공기 낭 주위에 방법을 작동.
  5. 부드럽게 내장 exteriorize와 수술 필드에 이것을 밖으로 확산.
    참고: 내장 자주 절차를 통해 메 마른 염 분 0.9%를 분사 하 여 습도 유지 합니다. 또한, 멸 균 식 염 수와 습도 gauzes 건조를 피하기 위해 창에 배치할 수 있습니다.
  6. 건조 멸 균 거 즈를 사용 하 여 내장을 공장 노출 수동 견인에 의해 작은 창 자 밖으로 조심 스럽게 잡아 당겨.
    참고: Mesenteric 선박 허약한이 고 과도 한 긴장 그들 장 허 혈 성 병 변으로 이어질 수 있습니다 그리고 절차의 결과 크게 손상 파열 될 수 있습니다.

4입니다. 장 루프의 제작

  1. 루프 제 1의 창조입니다.
    1. 장소는 polyglactin multifilament 합성 흡수 소재 주요 mesenteric 혈관의 합자를 피 함으로써 인접 공장에서 간단한 합자.
    2. 장소는 원심 합자 인접 합자에서 2 cm.
      참고: 간단한 합자 multifilament 봉합 사 물자로 만든 연금술 세그먼트를 만드는 창 자를 따라 배치 됩니다. 스키마 (그림 1) 모든 합자의 위치를 설명합니다. 인접 하 고 원심 합자 구분 2 cm 루프에 의하여 이루어져 있다.
  2. Interloop 제 1의 창조입니다.
    1. 장소는 간단한 합자 aborally 루프 no.1의 원심 합자를 0.5 c m.
      참고: 연속 루프, 사이 있다 interloops 1 cm, 세그먼트는 루프 간의 물리적 분리를 만들기. 아마 다른 하나의 루프에서 교차 오염에의 가능한 위험 감소, 간단한 합자 interloop (0.5 cm 2 인접 루프의 원심 및 인접 합자)를 가운데 배치 됩니다. 이 인접 한 루프의 합자를 도달 하는 루프에서 가능한 유출 된 오염 물질의 위험을 줄일 수 있습니다. 이 세그먼트는 필수 되지 않습니다 하지만 교차 오염의 위험을 줄일 것 이다.
  3. 후속 루프와 interloops의 창조입니다.
    1. 4.1 및 4.2 원하는 루프의 수를 단계를 반복 합니다.
      참고:이 실험에서 9 루프와 8 interloops 창조 되었다. 총 길이 26 cm를 도달 했다. 연구에 따라 루프의 수를 조정할 수 있습니다.

5. 루프에 Clostridium perfringens 긴장의 주입

  1. 루프 1 호에 병원 체는 무 균 주사기와 바늘 26 G 주사. 부드럽게 45 ° 각도로 내장의 antimesenteric 쪽에 바늘을 삽입 합니다.
    참고:이 실험에서 0.2 mL의 두뇌 심 혼 주입 (BHI) 1 x 106 CFU (콜로 니 형성 단위) C. perfringens 의 중간 로그 성장 단계에 포함 된 각 루프에 주입 했다. 5 다른 긴장 5 다른 루프에 주입 했다 고 아무 박테리아 (살 균 BHI), 교대로 반복 되는 병원 균 살 균 BHI 루프를 포함 하는 부정적인 제어 루프를 남은 4 주입 했다.
  2. 5.1 모든 루프 삽입 단계를 반복 합니다.
  3. 부드럽게 공기 낭 아래 복 부 구멍의 지 면에서 장로 교체 합니다.

6입니다. 복 부 구멍의 폐쇄

  1. 복 막과 복 부 근육의 봉합입니다.
    1. Polyglactin multifilament 합성 흡수 소재를 사용 하 여 간단한 연속 봉합 패턴으로 복 막 및 복 부 근육 (단계 3.3에서에서 만든) 골반을 따라 봉합.
    2. 복 막과 흉 골에서 복 부 근육은 cloaca 봉합 (단계 3.3에서. polyglactin multifilament 합성 흡수 소재를 사용 하 여 간단한 연속 봉합 패턴으로.
  2. 피부 봉합입니다.
    1. polyglactin을 사용 하 여 multifilament 합성 재료와 간단한 연속 봉합 패턴 단계 3.2에서 골반을 따라 피부 절 개를 닫습니다.
    2. Using 동일한 multifilament 합자 재료와 간단한 연속 봉합 패턴, 3.2 단계에서 만든 cloaca 흉 골에서 피부 절 개를 닫습니다.

7입니다. 결론

  1. 수술 절차 후 감염 시간 동안 동물 통증을 최소화 하기 위해 진통제의 적절 한 사용과 일반 마 취에서 닭을 유지. 적절 한 마 취 수준 보장 하기 위해 마 취 모니터링을 계속 합니다.
  2. 원하는 감염 시간 후 전신 마 취하에 자 궁 경부 전위에 의해 닭 고통 없이 안락사.
    참고:이 절차에 대 한 C. perfringens 병원 성 긴장으로 미세한 병 변의 유도 하기 위해 필요한 시간 7 h 했다.
  3. 메스 블레이드 #3, 0.5 cm 1 cm 긴 루프 섹션을 잘라내어 10% 포 르 말린 고정 숙박 및 추가 histopathological 분석에.
  4. 같은 메스 칼 날 나머지 루프 섹션을 잘라내어 그들의 유전 특성에 대 한 각 루프 추가 bacteriologic 분석에서 C. perfringens 종자의 격리에 대 한 살 균 microcentrifuge 튜브에.
  5. 모든 루프 사이 메스 블레이드를 변경 하 여 모든 루프에 대 한 단계 7.2와 7.3 단계를 반복 합니다.

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Representative Results

9 장 루프와 8 interloops의 회로도 그림 1에 표시 됩니다. 이 모델에서는 총 9 루프와 8 interloops 간단한 합자 함께 만들어집니다. 2cm 근 합자에서 측정에 의해 인접 하 고 원심 합자 루프에 의하여 이루어져 있다. 두 개의 인접 한 루프는 1 cm의 interloop으로 구분 됩니다. 루프는 합자에서 누설에 의해 사이 상호 오염을의 가능한 위험을 감소, interloop 합자 원심 합자를 2 인접 루프의 인접 합자 중간 방식으로 배치 됩니다. 연구의 요구 사항에 따라 루프의 수를 조정할 수 있습니다.

Figure 1
그림 1: 합자 장 루프의 도식 대표. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

그림 2A (HPS 얼룩) 장 루프 주입 제어 메 마른 매체와의 미세한 모습을 보여줍니다. 점 막 브러시 테두리는 그대로 이며 아무 괴 섹션에 존재. 온화한 혼잡 세그먼트의 장 레이어 (점 막, submucosa, muscularis, 및 serosa)에 존재할 수 있습니다. 그림 2B (HPS 얼룩) 점 막 괴 사 7 시간 Clostridium perfringens 닭 농장에 괴 사 성 장 염의 임상 사례에서 회복의 병원 성 긴장의 주입을 보여줍니다. Villi 팁 villi 팁을 둘러싼 괴 사 성 enterocytes와 침식 된다. 괴 사 성 자료는 villi 주변에 큰 막대 모양의 박테리아의 클러스터 (화살표) 관찰 된다. 이 박테리아는 Twort의 얼룩 (표시 되지 않음)과 그람 양성 박테리아로 추가 확인 되었다. Clostridium perfringens, 다 수의 세균 학에 의해 고립 결합이 찾는 병 변이이 박테리아에 의해 발생 했다 나타냅니다. 그림 2C (HPS 얼룩) 표시는 허 혈 성 루프의 조직학 병 변 괴 병원 성 C. perfringens 의 주입에 관련이 없는 긴장 하지만 가난의 결과 실행 절차. 이 확대는 Clostridium perfringens에 의해 발생 하는 병 변으로는 잘못 해석 될 수 있는 심한 응고 괴 사를 보여줍니다. 그러나, 아무 박테리아는이 섹션에서 관찰 된다. 또한, 혈관 근육 층에 심각 하 게 악화 적혈구 (화살표)의 큰 숫자의 축적으로 크기는. 이 혈관 혼잡 지표 이며이 경우에, 혼잡 합자 mesenteric 혈관에 의해 발생 했다. 허 혈 성 루프 확인 될 수 있다 쉽게 거시적 동안 수술 절차; 심한 혈관 혼잡, 다음은 serosa는 정상적인 분홍색 붉은 채색 대신 진한 파란색 될 것입니다.

Figure 2
그림 2: 감염 된 후 조직 결과 7 h. (A) 있다 아무 괴 사 성 병 변은 점 막에 histopathology 주입의 두뇌 심 혼 주입 (BHI), 무 균 배양을 다음에. (B) 루프 Clostridium perfringens의 병원 성 긴장으로 주입에 거기 표시 되어 점 막의 괴 사 수많은 큰 그람 양성 막대 모양의 세균 점 막을 덮고 있습니다. (C) 허 혈 성 병 변 C. perfringens에 의해 발생 하는 괴 사 성 병 변 닮은 수 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

이 연구에서는 루프 살 균 제어 문화 매체 (BHI) 또는 중 Clostridium perfringens 영향을 다양 한 항생제 무료 닭 무리에서 또는 괴 사 성 장 염12와 함께 회복의 5 가지 변종이 주입 했다 . 10 닭이이 연구에 사용 되었다. 변종 pathogenicity 반복적으로 발생할 병 변은 점 막에 괴 사 성 장 염와 호환 하는 능력에 따라 결정 될 수 있습니다. 7 h 후 감염, 긴장 점 막 괴 사를 일으킬 수 있는 능력을 보여준 괴 사 성 장 염의 임상 사례에서 발견 하는 긴장에서 회복 하는 동안 임상적으로 건강 한 닭 농장 점 막 괴 사를 유도 하지 않았다 고 점 막을 정상 유사 했다 BHI12주입 제어 루프에서의 결과 같은 동물에 수많은 루프를 사용 하 여 5 C. perfringens 긴장 및 4 개의 제어 루프 동일한 새에 사용 될 수 있습니다.

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Discussion

Clostridium perfringens Clostridium 남과 어울리지 않 는, 등 다양 한 장 병원 체로 인 한 질병의 병 인 호스트 병원 체 상호 작용을 공부 하 고 수많은 종에 창 자 루프 모델 설명 되었습니다. 살 모 넬 라 enterica7,,913,,1415. 그것은 또한 점 막 면역 응답16, 장 병원 체11 배설 세균성 독 소를 중화 하 고10 장 질병을 방지 하기 위해 백신 후보자를 평가 하는 항 체의 효능을 분석 하 사용 되었다 . 그러나, 단일 개별 동물에 수많은 합자 루프를 사용 하 여이 모델 닭에 제대로 설명 이며이 기술의 표준화로 부적당 한 조작 false 결과 및 오해도 이어질 수 있습니다 유효한 결과 얻기 위해 필수 . 이 원고 9 연속 합자 루프 있는 공장에는 치킨 위장의 회장의 창조를 보여 줍니다. 이 연구는 특정 병원 체 자유롭게 (SPF) 레그 남성 닭 1.0과 1.2 k g 사이 무게를 사용 합니다. 이 품종이이 무게에 의해 허용 되는 루프의 최대 수 26 cm의 작은 창 자는 쉽게 coelomic 구멍에서 exteriorized 수 때문에 9, 이었다. 그것은 다른 품종 및 무거운 레그 남성 닭을 사용 하 여 만든 루프의 총 수는 다른, 9 보다 더 높은 수 있습니다 배제 하지 않습니다. 창 자 루프 길이 수정할 수도, 그러나 2 cm 길이 최적의 사용 가능한 장 길이의 최대 용량을 사용 하는 동안 histopathology 및 세균 학에 대 한 샘플 컬렉션을 허용 하도록 고려 되었다.

이 문서에서 설명 하는 장 합자 루프 기술 가치 있는 대안 공부 Clostridium perfringens에 의해 발생 하는 닭에 괴 사 성 장 염을 사용할 수 있는 현재 모델을 수 있습니다. 12이전 문서 설명 된 결과, 10 닭 5 C. perfringens 긴장의 평가 C. perfringens의 높게 악성 및 공생 긴장을 차별화 하는 데 충분 했다. 비교에서는, C. perfringens 와 괴 사 성 장 염 재현 접종 당 운영 체제를 사용 하 여 다른 감염 모델 많은 개인이 동일한 결과 얻기 위해 필요 합니다. 문학에서 새 수 C. perfringens 긴장 범위 10에서 그룹17,,1819 는 백 호스트 그룹20당 당 30 닭의 독성을 평가 하기 위해 필요 합니다. 연구에서 동물 사용에 대 한 상세 원칙에 관한 호스트의 가장 낮은 번호를 요구 하는 기술을 사용 하 여 중요 한 결과 얻을 하도록 조언 될 것 이다. 이 문서에서 설명 하는 장 합자 루프 모델은 대부분 C. perfringens 긴장의 독성을 비교 하는 닭의 가장 낮은 번호를 요구 하는 모델입니다.

이후는 합자에서 누설에 의해 교차 오염을 C. perfringens 문화와 특성에 의해 펄스 분야 젤 전기 이동 법 (PFGE) 절차 후 며칠 후에 평가 될 수, 그것은 이것을 최소화 하기 위해 매우 중요 1 cm를 포함 하 여 위험 interloops interloop 합자 중간쯤 2 인접 한 루프 사이 포함 하. 이러한 예방 조치를 취하여 가능한 상호 오염을 피하기 위하여 가능 했다. 사실, 병원 성 긴장 발생 미세 괴 사 성 병 변 괴 사 성 장 염, 거기와 조화 된 아무 중요 한 미세한 병 변 비 병원 성 주사 인접 한 루프에서 했다 하는 동안 C. perfringens 긴장 또는 BHI는 문화 매체 부정적인 통제입니다. 이것은 다른 종자 안전 하 게 같은 닭의 인접 한 창 자 루프에 주입 될 수 표시.

이 모델과 가장 어려운 문제 중 하나는 환기와 장 vascularization를 타협 하지 않고 작은 창 자의 exteriorization 이었다. 조류는 포유류 보다 다른 호흡 시스템이 있다. 횡 경 막 결 석, 그리고 환기 airsacs, 복 부 구멍에 얇은 벽 구조에 의해 제어 됩니다. 닭에 이러한 7 이며 그들은 자 궁 경부 (1), 앞쪽 흉부 (2), 후부 (2) 흉부 및 복 부 (2) 공기 주 머 니 나에 분할 된다. 이 풍선 모양의 구조 폐에 직접 연결 하 고 호흡기에 공기의 운동을 허용 합니다. 흉 골과 cloaca 사이 복 부 구멍, 열자마자 복 airsacs 유명 하 고 특히 경우 건조 쉽게 파열 될 경향이. 이러한 이유로, gauzes 멸 균 식 염 수와 감쇠와 지속적인 습기 절차 중 적절 한 환기와 마 취를 쉽게 하기 위해 중요 하다. 또한, 그것은 복 부 구멍에서 내장을 exteriorizing 하는 동안 복 부 airsacs에 작은 구멍을 방지 하기 어려울 수 있습니다. 그것은 호흡 속도 패턴, 종을 반사, 심장 박동, 닭 마 취의 적절 한 평면에서 유지 되도록 닭의 움직임 등 마 취 매개 변수를 모니터링 해야 합니다. 작은 공기 누설 덜 마 취의 품질에 영향을 미칠 것입니다 하지만이 누설을 최소화 해야 합니다. 그것은 밀폐 절차 후 복을 폐쇄 하는 것이 중요입니다. 내부 공기 압력을 다시 것이 고 환기가이 단계 후에 정상으로 반환 합니다. 이 구조체의 폐쇄 후 복 부에서 공기 누설 해야 합니다. 이 봉합에 소량의 살 균 식 염 수를 분사 하 여 확인할 수 있습니다 그리고 복 부 구멍에서 나오는 거품 형성 나타내는 공기 찾습니다. 이 경우, 추가 간단한 피부 봉합 공기 누설 사이트에 배치할 수 있습니다.

또 다른 기술적으로 도전적인 측면은 허 혈 성 병 변 소장 가난 하 게 실행 된 수술 절차 때문에 개발의 위험에 관련 되어 있습니다. 허 혈 조직, 다른 분자 세포질 물질 대사에 필요한 산소의 부족을 일으키는 혈액 공급의 제한 있을 때 발생 합니다. 이 경우에, 소장 거시적 진한 파란색 분홍색 붉은 대신 빠르게 될 고 장 점 막 세포를 신속 하 게 타락 한 것 이다. 이것은 주입 된 병원 체와 관련이 없는 허 혈 성 병 변 발생 하 고 그것은 histopathological 해석에 방해가 됩니다. 두 가지 문제가 있는 경우 국 소 빈 혈 발생할 수 있습니다. 첫째, 부주의 의해 mesenteric 혈관의 합자가이 상태를 일으킬 것입니다. 이런 이유로, mesenteric 선박 등을 피하기 위해 창 자 따라 합자의 배치를 신중 하 게 봐이 결정적 이다. 둘째, 허 혈 mesenteric 혈관의 출혈 절차 동안 발생 하는 경우 발생할 수 있습니다. 이러한 구조는 얇은 벽으로 둘러싸인 고 연약한. 과도 한 긴장 그들의 파열을 수동으로 exteriorizing 내장 하는 동안 발생할 수 있습니다, 그리고 주의에 주어져야 한다 긴장 mesenteric 선박에이 단계 동안 그들의 무결성을 보장 하기 위해. 또한, mesenteric 혈관 출혈이 수술 봉합 바늘으로 찔 리는 경우 발생할 수 있습니다. 외과 의사는 바늘으로는 mesentery를 통해 피어 싱 위치 신중 하 게 봐야 한다. 출혈 두 상황에서 중지 할 수 있습니다 하지만 응고 과정 중지 이러한 장 세그먼트, 따라서 돌이킬 수 없는 장애를 일으키는 원인이 되 고 결과의 유효성을 손상 시 키 지 혈액의 흐름을 크게 줄일 것 이다.

이 모델은 호스트 병원 체 상호 작용의 연구 및 전염 성 요원으로 인 한 장 질환의 병 인에 대 한 유용 합니다. 만든 루프의 수를 변경 하 여 또는 각 루프의 길이 수정 하 여 제안 된 모델 연구에 따라 적용할 수 있습니다. 이러한 변경 내용을 구현 하기 전에 메서드를 의미 있는 결과 표준화 하는 것이 좋습니다. 이 기술의 한계는 기술 지향적 고만 제대로 훈련된 인원 살아있는 동물에이 수술을 수행 해야 합니다.

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Disclosures

저자는 공개 없다.

Acknowledgments

이 작품 대학교 드 몬트리올의 수의학의 학부에서 가금류 연구 (M. Boulianne)에 자에 의해 지원 되었다. 박사 Boulianne 및 부모 모델 개발. 박사 Boulianne 및 부모는 수술을 수행. 박사 화상 마 취 프로토콜을 개발에 도움. 박사 부모 비디오를 편집 하 고 원고를 썼다. Drs 번즈, 원고를 편집 하는 Desrochers 및 Boulianne.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
EZ-Scrub 747 Becton Dickinson and Company 4% chlorhexidine gluconate detergent impregnated sterile brush. No catalog number available. Web address: https://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/infection-prevention/surgical-hand-scrubs/ez-scrub-preoperative-surgical-scrub-brushes 
Isopropyl alcohol 70% USP 4 L Commercial isopropyl alcohol P016IP70 Web address: http://www.comalc.com/products/
Chlorexidine Sigma-Aldrich 282227-1G Chlorhexidine gluconate solution, must be diluted to 4%. Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/aldrich/282227?lang=fr&region=CA&gclid=EAIaIQ
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Formalin solution, buffered neutral, 10% Sigma-Aldrich HT501128-4L Ratio tissue : formalin of 1: 10 for adequate fixation. Web address: http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/ht501128?lang=fr&region=CA
Clostridium perfringens strains Université de Montréal, Chaire en recherche avicole N/A Specific to each laboratory, available upon request to correspondant author

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