Смешанных биолюминесцентных и позитронный выбросов томография/вычислительная томография томография множественной миеломы ксенотрасплантатов костного мозга мышей Нагель

Cancer Research

Your institution must subscribe to JoVE's Cancer Research section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Здесь мы используем биолюминесцентных, рентген и позитрон выбросов/компьютерная томография томография изображений изучить как ингибирующих активность mTOR воздействия опухолей костного мозга-прижившимися миеломы в ксенотрансплантата модели. Это позволяет для анализа физиологически соответствующих, неинвазивная и смешанных эффекта анти миеломе терапии миеломы костный мозг прижившимися опухоли в естественных условиях.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Gastelum, G., Chang, E. Y., Shackleford, D., Bernthal, N., Kraut, J., Francis, K., Smutko, V., Frost, P. Multimodal Bioluminescent and Positronic-emission Tomography/Computational Tomography Imaging of Multiple Myeloma Bone Marrow Xenografts in NOG Mice. J. Vis. Exp. (143), e58056, doi:10.3791/58056 (2019).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Множественная миелома (мм) опухоли привито в костном мозге (БМ) и их выживание и прогрессирования зависят от сложных молекулярных и клеточных взаимодействий, которые существуют в рамках этой микроокружения. Тем не менее BM микроокружения не может быть легко реплицируемых в пробирке, что потенциально ограничивает физиологическая значимость многих экспериментальных моделях in vitro и ex vivo . Эти проблемы могут быть преодолены путем использования ксенотрансплантата модель, в которой Люцифераза (Люк)-transfected клеток 8226 мм будет специально привито в мыши скелета. Когда эти мыши даны соответствующие субстрата, D-люциферин, эффекты терапии опухолевого роста и выживания могут быть проанализированы путем измерения изменений в биолюминесцентных изображения (BLI) производимые опухоли в естественных условиях. Этот BLI данных в сочетании с позитронный выбросов томография/вычислительной томографии (ПЭТ/КТ) анализ с использованием метаболических маркер 2-deoxy - 2 - (18F) фтор D-глюкоза (18F-ФДГ) используется для мониторинга изменений в метаболизме опухоль со временем. Эти изображения платформы позволяют несколько неинвазивного измерения в пределах микроокружения опухоли/BM.

Introduction

ММ является неизлечимой болезни состоит из плазмы злокачественное B-клетки, которые проникают BM и вызвать разрушение кости, анемии, почечной недостаточностью и инфекции. ММ составляет 10% - 15% всех гемобластозами1 и является наиболее часто рак привлечь скелет2. Разработка мм проистекает из онкогенных трансформации долгоживущих плазматические клетки, которые устанавливаются в зародышевых центров лимфоидных тканей прежде чем в конечном итоге самонаведения для БМ3. BM характеризуется весьма разнородных ниши; включая разнообразных и критических клеточных компонентов, регионы низкой Ро2 (гипоксии), обширные васкуляризации, сложных внеклеточной матрицы и цитокинов и фактор роста сети, все из которых способствуют мм tumorgenesis4. Таким образом развитие рассеянного мм гранулы ксенотрансплантата модель характеризуется опухолей, которые являются строго прижившимися, в BM бы очень мощный и клинически значимых инструмент для изучения мм патологии в vivo5,6. Однако многочисленные технические препятствия может ограничить эффективность большинства ксенотрансплантата моделей, что делает их дорогостоящим и трудным применять. Это включает в себя проблемы, связанные с последовательной и воспроизводимые опухоли приживления в нише, БМ, длительное время для развития опухоли и ограничения в возможность непосредственно наблюдать и измерять изменения роста/выживания опухоли без необходимости Пожертвуйте мышей в ходе эксперимента7,8.

Этот протокол использует изменение ксенотрансплантата модель, которая была первоначально разработана Миякава et al. 9, в котором внутривенно (IV) проблема с миеломой клетки приводит к «распространение» опухоли, которые последовательно и герметизации привито в БМ NOD/SCID/IL-2γ(null) (Нагель) мышах10. Визуализация на месте этих опухолей достигается стабильная трансфекции 8226 человека мм клеточной линии с люк аллелей и серийно измерения изменений в BLI производства эти прижившимися опухолевых клеток6. Важно отметить, что эта модель может быть расширена для использования различных других Люк выражая человеческие мм клеточных линий (например, U266 и OPM2) с аналогичные склонности специально привить в скелет NOG мышей. Выявление опухолей у биолюминесцентных Вообразимый мышей следуют измерения поглощения радиофармацевтические зонды (например 18F-ФДГ), ПЭТ/КТ вместе, это позволяет дополнительные характеристики важнейших биохимических пути (то есть, изменения в метаболизме, изменения в гипоксии и индукции апоптоза) в пределах микроокружения опухоли/BM. Основные преимущества этой модели можно выделить наличие широкого круга radiolabeled, биолюминесцентных и флуоресцентных зондов и маркеры, которые могут быть использованы для изучения мм прогрессии и патологии в естественных условиях.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Все животные процедуры, описанные ниже были утверждены институциональный уход животных и использование Комитет (IACUC) системы более здравоохранения ва Лос-Анджелес и были исполнены в стерильных и свободной от возбудителя условиях.

1. Подготовка Люцифераза выражая 8226 клеток (8226-люк)

  1. Поддерживать линии клеток человека мм 8226, в среде RPMI 1640, дополненная плода бычьим сывороточным (ФБС) 10% и 1% пенициллин стрептомицина при 37 ° C в атмосфере увлажненные, содержащих 95% воздуха и 5% двуокиси углерода (CO2).
  2. Генерировать стабильные Люк выражая репортер 8226 клетки transfecting 1 x 106 8226 клетки с вектором репортер Люцифераза, следуют выбор с hygromycin (100-350 мг/мл), как ранее описанные6.
  3. Сохранить клетки стандартных стерильных условиях культивирования для 2-3 недели, изменения среды каждый день, пока не сгенерированы создание стабильно transfected клеток 8226 линии.
  4. Подтвердите действие Люцифераза в пробирке в 1 x 10-6 transfected клеток/100 мкл-фосфатный буфер (PBS), добавив Люцифераза субстрата, D-Люциферин (150 мкг/мл рабочего раствора в подогретую питательной среды) и измерения биолюминесценции в пробирке или 96-луночных пластины с помощью люминометра6клеток.

2. ортотопическая гранулы ксенотрансплантата модель

  1. Сохранить мыши Нагель (4-6 недель, старый, мужчина или женщина) стерильные/возбудитель свободно в условиях объекта соответствующего ухода за животными.
  2. Подготовьте 8226 Люк transfected клеток для IV инъекции в NOG мышей (~ 5 x 106 клеток/мыши) в день эксперимента. Вымыть клетки 3 x в ледяной PBS, считать их и Ресуспензируйте их в ледяной PBS (минус антибиотики и FBS) в конечной концентрации 5 х 106 клеток/200 мкл PBS) в стерильную пробирку. Держите клетки на льду и вызов мыши как можно скорее (в течение 30-120 мин).
  3. Анестезировать мыши (с изофлюрановая, 1% - 3% в воздухе на 0,5 - 1 Л/мин) и поместите животное в лежачем положении на грелку с головой, стоящих перед прочь. Проверьте уровень анестезии, защемления ног. Применить глазной мази в глаза.
  4. Придать 8226-Люк клетки в мышей через Вену хвост (200 мкл/инъекции), с помощью инсулина 1 мл шприц и игла 26-G.
    Примечание: Тепла лампы может использоваться для подогрева хвост, тем самым расширяя Вены и повышая эффективность инъекции.
  5. Вернуть их домой клетка животного и контролировать животных до тех пор, пока они полностью выздоровел.
  6. Подтвердите приживления 8226-Люк клеток мыши скелета, измеряя BLI наркотизированных мышей (описано ниже и показано на рисунке 1A).
    Примечание: BM экссудат также могут быть окрашены для человека CD45 выражения с помощью проточной цитометрии (рис. 1B) или по иммуногистохимия собранные кости (рис. 1 c).

3. Измерение BLI в естественных условиях

Примечание: Как правило, измеримые BLI от прижившимися опухолей у мышей может наблюдаться первый между postchallenge 10-20 дней, но это, возможно, потребуется быть экспериментально определены.

  1. Проверить уровень анестезии, защемления ног и анестезировать мыши (с изофлюрановая, 1% - 3% в воздухе на 0,5 - 1 Л/мин). Применить глазная мазь на его глазах.
  2. Дать животным IP инъекций (200 мкл /) из «в vivo-класс «D-люциферин субстрата (30 мг/мл разбавленной в стерильного физиологического раствора).
  3. Измерить BLI в течение 5-10 мин, после инъекции люциферин субстрата (хотя BLI активность может быть наблюдаемой в мышей до 45-60 мин), размещая наркотизированных животного в лежачем положении в съемочной системы малых животных (Рисунок 2 ). Выберите светящиеся и рентгеноструктурного анализа и получить изображения (рис. 3).
    1. Измерьте средний сияние (/steradian фотоны/s/см2) в отдельных регионах, представляющих интерес (ROI) с помощью изображений программное обеспечение (рис. 4).
    2. Вернуть его домой клетка животного и контролировать его, до тех пор, пока он полностью выздоровел (приблизительно 15-20 мин).

4. Лечение мышей с целенаправленной терапии

  1. Измерить базовые BLI и рандомизировать животных в группах (4-8 мышей/группа).
  2. Лечить мышей с IP инъекции temsirolimus (0,2 - мыши 40 мг/кг) с использованием режима пяти ежедневных инъекций IP, затем 2 дня отдыха и еще пять ежедневных инъекций11(200 мкл/инъекции).
  3. Измерения активности Люцифераза (/steradian фотоны/s/см2) 2 раза в неделю, как описано в разделе 3 и сюжет изменение BLI с течением времени. Изменения в опухоли BLI могут быть представлены как последовательные изображения мышей (Рисунок 5B).
    Примечание: Рекомендуется, что ежедневный мониторинг животных выполняться до тех пор, пока они представляют следующие симптомы (обычно в течение 45-60 дней первоначального вызова): вес потеря (потеря более 10% по сравнению с весом до имплантации) и/или Хинд паралич конечностей, в это время они должны быть euthanized, используя камеру2 CO, следуют шейки матки дислокации.

5. PET/CT анализ с использованием 18F-ФДГ для измерения изменения в метаболизме опухоли

  1. Быстро животных в их дома клетки путем удаления их питание за 24 часа до эксперимента, чтобы избежать избыточного поглощения неспецифической 18F-ФДГ.
  2. Подготовка 18F-radiolabeled ФДГ-ПЭТ зонды (50-100 Μки/инъекции в стерильного физиологического раствора) в день эксперимента. Запись времени и деятельности 18F-ФДГ зонда с дозы калибратора.
    Примечание: Поскольку 18F имеет относительно короткий период полураспада (~ 2 h), тщательной подготовки и планирования для использования этих датчиков должны создаваться.
  3. Анестезировать животное (с изофлюрановая, 1% - 3% в воздухе на 0,5 - 1 Л/мин) и поместите его в лежачем положении на грелку с головой, стоящих перед прочь. Проверьте уровень анестезии, защемления ног. Применить глазная мазь на его глазах.
  4. Вводить зонд через Вену хвост (100 мкл/инъекции), с помощью экранированных 1 мл инсулин шприц и игла 26-G.
    Примечание: Тепла лампы может использоваться для подогрева хвост, тем самым расширяя Вены и повышая эффективность инъекции.
  5. Измерить остаточная радиоактивность в иглы/шприца в дозе калибратор и обратите внимание на активность и время.
    Примечание: Стандартизация мыши инкубации, дозировки и сроки необходимо обеспечить воспроизводимость данных и сопоставимости.
  6. Сохранить мыши под наркозом и при 37 ° C, с помощью грелку на весь период поглощения зонд (~ 45-90 мин).
    Примечание: Важно, что мышей остаются покоя и при 37 ° C, чтобы избежать неспецифических поглощение зонда.
  7. Разнесите инъекции 18F-ФДГ зонд промежутки около 20 - 30 мин для обеспечения аналогичного маркировки раз в мышей.
    Примечание: Надлежащего процесса и сроков проведения инъекции зонд приведет к оптимальным и воспроизводимых изображений условий.
  8. Измерения активности 18F-ФДГ в PET/CT малых животных тепловизионные системы в отдельных регионах интереса, которые соответствуют прижившимися опухоли (рис. 6).
    Примечание: Первоначально, рекомендуется 10-мин статические PET воздействия и воздействия CT 2-мин, но точное воздействие раз может потребоваться экспериментально определены.
  9. Вернуть их домой клетки животных и следить за ними до тех пор, пока полностью выздоровел. Дом мышей в комнате выделенный возврата для 24 часа во время зонд разлагается на фоновых уровнях.
    Примечание: Из-за короткий период полураспада 18F, несколько измерений, используя свежие зонд можно сделать так часто, как 2 раза в неделю.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

В первоначальных экспериментальных исследований IV инъекции клеток 8226-люк в кивок/SCID мышей не развиваться опухоли БМ прижившимися мм, хотя плоскоклеточный мм опухоли были легко сформирована (100% успеха). В противоположность этому IV проблемы с 8226 клеток в NOG мышей сгенерирована (в течение 15-25 дней) опухоли скелета (и только редко сформированных опухоли в не скелетные ткани, например, печени или селезенки). Так как опухоли в скелета могут не быть подтверждены визуально физически изучения животных, другие методы должны рассматриваться для подтверждения успешного опухоли приживления и расположения опухоли в пределах BM (рис. 1). Аналогичные доклады Миякава и др. 9, IgG человека, производимые 8226 клеток, могут быть обнаружены в сыворотке оспаривается NOG мышей с помощью ИФА (данные не показаны), хотя эти данные только подтвердили приживления и не местоположение или степени опухолей. Последовательных изображений несколько животных показывает распределение опухоли БМ прижившимися мм (рис. 4). BLI, производимых этими прижившимися опухолевых клеток может затем быть серийно и неинвазивным измеряется оценивать изменения в опухолевого роста и выживания у мышей, получавших mTOR ингибитор temsirolimus (рис. 5). Наконец анализ PET/CT для поглощения 18F-ФДГ в опухоли был использован для демонстрации temsirolimus опосредованной изменения метаболизма глюкозы и что это коррелирует с изменениями в опухолевого роста (рис. 6). Однако в стабильно transfecting 8226 клетки с Люцифераза аллеля, в сочетании с оптических изображений/X-рентген анализ, точное местоположение и распределение мм опухолей в скелет мыши можно быстро и неинвазивным определяться.

Figure 1
Рисунок 1: подтверждение приживления 8226-Люк клеток в мыши скелет. (A) NOG мышей были оспорены с 5 х 106 клеток 8226-LUC2 IV (мышь слева) или физиологического раствора (мыши справа). После 15 дней мышей были укол IP D-люциферин субстрата и образы с помощью системы обработки изображений малых животных. (B) мышей были принесены в жертву, бедра были собраны, и было собрано BM сотовой экссудата. Выражение человека CD45 определяется проточной цитометрии с помощью PE-конъюгированных антител CD45 антинародным. (C) Эта группа показывает иммуногистохимия последовательных секций мыши бедра, витражи для гипоксии с помощью pimonidazole (верхней панели) или человека CD45 (внизу панели) у мышей с 8226 (правой панели) или физиологическим (контроль; левой панели). Звездочка указывает местоположение большой кровеносный сосуд в последовательных секциях. Шкалы бар = 100 µm. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 2
Рисунок 2: наркотизированных NOG мышей показаны позиционирования в системе визуализации до измерения BLI сигнал от опухолей костного мозга-прижившимися мм. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 3
Рисунок 3: установка оптических изображений и рентгеноструктурного анализа биолюминесцентных сигнала собранные от мышей NOG. После того, как животные были успешно оспорены и было подтверждено приживления опухоли в БМ, мышей может рандомизированных в группы лечения. В разное время в ходе эксперимента животные могут отслеживаться изменения в BLI. Поскольку процедура неинвазивной, частота мониторинга могут быть изменены с учетом ожидаемого роста опухоли, а также как быстро раковые клетки будет реагировать на терапию. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 4
Рисунок 4: Serial изображения несколько животных, показывающий распределение опухолей костного мозга-прижившимися мм. Регионы интереса (ROI) для каждой мыши определены. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 5
Рисунок 5: изменения в BLI прижившимися опухолей у мышей NOG во время анти мм терапевтический режим. (A) Эта группа показывает изменения в среднем сияние (p/s/см2/ser) в temsirolimus (20 мг/кг мышь)-обработанных мышей NOG оспорено IV с 5 х 106 клеток. Как только мышей наблюдались быть положительным для прижившимися опухоли, они были рандомизированы в различные группы лечения. Мышей были приведены пять инъекции IP ежедневно, затем 2 дня отдыха и, затем, еще пять инъекции IP temsirolimus (баров на оси x указывают дни лечения) или управления транспортного средства. В различные дни, мышей были даны IP инъекции » в естественных условиях-класс «D-люциферин и BLI была измерена с помощью оптических изображений платформы. Значения представляют средний сияние (/ser p/s/см2) ± 95% доверительного интервала. (B) это Каплана-Мейера сюжет показывает изменение в процентах от живых мышей со временем. Мышей, которые достигли критерии конечной точки (например, потеря массы тела > 10% или задних конечностей паралич) были гуманно euthanized. (C) Эта группа показывает представитель изображения мышей на дни 28, 35 и 40, показаны изменения в деятельности люк. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Figure 6
Рисунок 6: Последовательных изображений и относительные изменения в 18F-ФДГ поглощение ПЭТ/КТ (A) Эта группа показывает серийный изображений же мыши для изображений биолюминесценции (оптических изображений/X-рентген) и 18F-ФДГ поглощение BLI ПЭТ/КТ была измерена в наркотизированных мышей, и ПЭТ/КТ и та же мышь была проведена 24 часа позже. Мышь на ночь и постился, в день исследования, получил укол IV 50 Μки 18F-ФДГ. Мышей были сохранены под наркозом во время инкубации поглощение зонд (60 мин) и, затем, были проанализированы для поглощения 18F-ФДГ PET/CT анализа. Указываются туморы (T1 и T2). H = сердце, K = почек и B = мочевого пузыря. (B) Эта группа показывает относительные изменения (в процентах от необработанных управления опухоли) в 18F-ФДГ поглощения в управления мышей (без лечения) или temsirolimus (20 мг/кг мышь)-лечение мышей (измеряется в дни 22, 35 и 40). Данные представлены как среднее (n = 5 мышей) ± 1 с.д. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Несмотря на разнообразие моделей доклинических ксенотрансплантата мм6,9,11,12,13возможность изучить взаимодействия опухоли/BM в BM микроокружения остается сложной 14. описанные здесь методы позволяют для быстрого и воспроизводимые приживления 8226-Люк клеток опухоли в скелет NOG мышей.

Важнейшие шаги в этом протоколе участвует создание Люцифераза выражая мм клеточных линий и проверке стабильной выражение Люцифераза в vitro15. После были созданы клеточных линий, NOG мышей оспариваются IV инъекции и приживления опухоли к скелету подтверждается путем измерения BLI деятельность в vivo (обычно в течение 10-20 дней postchallenge) (рис. 1A). Использование мыши NOG имеет важное значение, потому что другие иммунодефицитных штаммы (например NOD/ТКИД) обычно не образуют БМ прижившимися опухоли. Относительно высокий уровень успеха имплантации (> 90%) и короткий интервал для наблюдения за позитивный сигнал BLI делает эту модель идеально подходит для высокой пропускной способности и продольного анализа терапевтических методов анти мм (рис. 4). Еще одним очень важным аспектом этой модели является, что БМ прижившимися мм клеточных линий поддерживать их морфологических и иммунологических особенностей родительского клеточных линий (например, 8226, U266); они имеют последовательную и воспроизводимые роста и экспонат характеристик пациента заболеваний, таких как увеличение парапротеина человека IgG в сыворотке и формирование костей поражений.

Преимущество этой стратегии является использование эти мощные методы визуализации неоднократно изучение биохимических и молекулярных компонентов микроокружения опухоли/BM течение прогрессирования заболевания и в ответ на противоопухолевой терапии. В этом эксперименте мы обнаружили, что ориентация mTOR активность мышей с БМ прижившимися миеломы опухоли привело к сокращению в биолюминесцентных измерений, которые могут наблюдаться с течением времени. Кроме того мы обнаружили, что изменения в поглощении 18F-ФДГ зонд (Рисунок 6B) в этих же опухоли были коррелирует с изменениями биолюминесцентных сигнала (Рисунок 5B). Другим важным компонентом этой процедуры является, что несколько биохимических переменных могут быть измерены в опухоль со временем. Это особенно важно, потому что опухолевой прогрессии представляет собой динамичный процесс, характерны изменения в характеристики физиологии и микроокружения опухоли. Таким образом эта процедура, из-за его неинвазивный характер и относительно короткий период полураспада зондов, позволяет несколько продольного анализа изменений в опухоли ответа на терапию.

После освоения техники, будущего применения техники представляют большую гибкость. Например использование других биолюминесцентных или флуоресцентные метки (например, дневно тегами антитела) может также использоваться, равно как и различные другие 18F-меченых зондов и радиофармацевтические соединений для изучения конкретных биохимических пути или процессов в микроокружения опухоли/BM. Из-за небольшой half-life многих из этих ингаляционного несколько последовательных измерений удалось в течение конкретного эксперимента для изучения поглощения наркотиков, распределение, кинетика и распада. С помощью этой модели ксенотрансплантата, мм способность использовать анаэробного гликолиза и других метаболических (то есть, синтез жирных кислот) с помощью других датчиков (например,18F-фтор 2deoxyglucose [18F-ФДГ] и 18 F-FLUORO-4-Thia-Palmitate [FTP])16,17, а также возможность измерения анти пролиферативные эффекты лечения с помощью другой широко используется зонд (т.е., 3'-deoxy-3'-[18F] fluorothymidine [ 18F-FLT]) могут быть включены в экспериментальных проектах. Кроме того она может быть непосредственно измерить смерть клетки с помощью 18F-Annexin B1 для измерения апоптоз в vivo18. Многие из этих соединений являются коммерчески доступных.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Автор Кевин Фрэнсис является сотрудником Perkin-Elmer.

Acknowledgments

Эта работа была поддержана ва ЗАСЛУГИ grant1I01BX001532 из Соединенных Штатов Америки Отдел ветеранов дел биомедицинских лабораторных исследований и развития службы (BLRDS) п.ф., и ЕС признает поддержки от ва клинические науки R & D службы ( Заслуживают награды I01CX001388) и реабилитации ва R & D службы (заслуга премии I01RX002604). Дальнейшая поддержка пришли из Грант Seed факультет UCLA в ж.к. Это содержание не обязательно отражают взгляды нас Департамент по делам ветеранов или правительства США.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
8226 human myeloma cell line ATCC CCL-155
NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ Mice (NOG) Jackson Labs 5557
VivoGlo Luciferin substrate Promega P1041
Hypoxyprobe-1Kit HPL HP1-100
PE-CD45 (clone H130) BD Biosciences 555483 Used for flow cytometry to identify human CD45+ tumor cells in BM exudate
rabbit anti-human CD45 (clone D3F8Q) Cell Signaling Technology 70527 Primary antibody used for Immunohistochemistry of excised bone
Goat Anti-rabbit IgG (HRP conjugated) ABCAM ab205718 Seconday antibody used for Immunohistochemistry of excised bone
Dual-Luciferase Reporter Assay System Promega E1910
pGL4.5 Luciferase Reporter Vector Promega E1310
IVIS Lumina XRMS In Vivo Imaging System Perkin Elmer
Sofie G8 PET/CT Imaging System Perkin Elmer

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Raab, M. S., Podar, K., Breitkreutz, I., Richardson, P. G., Anderson, K. C. Multiple Myeloma. The Lancet. 374, (9686), 324-339 (2009).
  2. Galson, D. L., Silbermann, R., Roodman, G. D. Mechanisms of Multiple Myeloma Bone Disease. BoneKEy Reports. 1, 135 (2012).
  3. Anderson, K. C., Carrasco, R. D. Pathogenesis of Myeloma. Annual Review of Pathology. 6, 249-274 (2011).
  4. Reagan, M. R., Rosen, C. J. Navigating the Bone Marrow Niche: Translational Insights and Cancer-Driven Dysfunction. Nature Reviews Rheumatology. 12, (3), 154-168 (2016).
  5. Frost, P., et al. Mammalian Target of Rapamycin Inhibitors Induce Tumor Cell Apoptosis in Vivo Primarily by Inhibiting Vegf Expression and Angiogenesis. Journal of Oncology. 2013, 897025 (2013).
  6. Mysore, V. S., Szablowski, J., Dervan, P. B., Frost, P. J. A DNA-Binding Molecule Targeting the Adaptive Hypoxic Response in Multiple Myeloma Has Potent Antitumor Activity. Molecular Cancer Research. 14, (3), 253-266 (2016).
  7. Podar, K., Chauhan, D., Anderson, K. C. Bone Marrow Microenvironment and the Identification of New Targets for Myeloma Therapy. Leukemia. 23, (1), 10-24 (2009).
  8. Campbell, R. A., et al. Laglambda-1: A Clinically Relevant Drug Resistant Human Multiple Myeloma Tumor Murine Model That Enables Rapid Evaluation of Treatments for Multiple Myeloma. International Journal of Oncology. 28, (6), 1409-1417 (2006).
  9. Miyakawa, Y., et al. Establishment of a New Model of Human Multiple Myeloma Using Nod/Scid/Gammac(Null) (Nog) Mice. Biochemical and Biophysical Research Communications. 313, (2), 258-262 (2004).
  10. Ito, M., et al. Nod/Scid/Gamma(C)(Null) Mouse: An Excellent Recipient Mouse Model for Engraftment of Human Cells. Blood. 100, (9), 3175-3182 (2002).
  11. Frost, P., et al. In Vivo Antitumor Effects of the Mtor Inhibitor Cci-779 against Human Multiple Myeloma Cells in a Xenograft Model. Blood. 104, (13), 4181-4187 (2004).
  12. Asosingh, K., et al. Role of the Hypoxic Bone Marrow Microenvironment in 5t2mm Murine Myeloma Tumor Progression. Haematologica. 90, (6), 810-817 (2005).
  13. Storti, P., et al. Hypoxia-Inducible Factor (Hif)-1alpha Suppression in Myeloma Cells Blocks Tumoral Growth in Vivo Inhibiting Angiogenesis and Bone Destruction. Leukemia. 27, (8), 1697-1706 (2013).
  14. Fryer, R. A., et al. Characterization of a Novel Mouse Model of Multiple Myeloma and Its Use in Preclinical Therapeutic Assessment. PLoS One. 8, (2), e57641 (2013).
  15. Gould, S. J., Subramani, S. Firefly Luciferase as a Tool in Molecular and Cell Biology. Analytical Biochemistry. 175, (1), 5-13 (1988).
  16. Czernin, J., Phelps, M. E. Positron Emission Tomography Scanning: Current and Future Applications. Annual Review Medicine. 53, 89-112 (2002).
  17. Pandey, M. K., Bhattacharyya, F., Belanger, A. P., Wang, S. Y., DeGrado, T. R. Pet Imaging of Fatty Acid Oxidation and Glucose Uptake in Heart and Skeletal Muscle of Rats: Effects of Cpt-1 Inhibition. Circulation. 122, (21), (2010).
  18. Wang, M. W., et al. An in Vivo Molecular Imaging Probe (18)F-Annexin B1 for Apoptosis Detection by Pet/Ct: Preparation and Preliminary Evaluation. Apoptosis. 18, (2), 238-247 (2013).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics