Veno-एक माउस में शिरापरक Extracorporeal झिल्ली ऑक्सीजन

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Summary

यहां हम एक गैर intubated, अनायास श्वास माउस में veno-शिरापरक extracorporeal झिल्ली ऑक्सीजन (ECMO) की तकनीक का वर्णन एक प्रोटोकॉल मौजूद । ECMO के इस murine मॉडल तीव्र और अंत चरण फेफड़ों के रोगों के प्रायोगिक अध्ययन में प्रभावी ढंग से लागू किया जा सकता है ।

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Madrahimov, N., Khalikov, A., Boyle, E. C., Natanov, R., Knoefel, A. K., Siemeni, T., Hoeffler, K., Haverich, A., Maus, U., Kuehn, C. Veno-Venous Extracorporeal Membrane Oxygenation in a Mouse. J. Vis. Exp. (140), e58146, doi:10.3791/58146 (2018).

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Abstract

extracorporeal झिल्ली ऑक्सीजन (ECMO) का उपयोग हाल के वर्षों में काफी बढ़ गया है । ECMO तीव्र के लिए एक विश्वसनीय और प्रभावी चिकित्सा के रूप में अच्छी तरह से अंत चरण फेफड़ों के रोगों बन गया है । नैदानिक मांग और ECMO के लंबे समय तक उपयोग में वृद्धि के साथ, प्रक्रियात्मक अनुकूलन और बहु की रोकथाम-अंग क्षति महत्वपूर्ण महत्व के हैं । इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य एक गैर intubated में veno-शिरापरक ECMO की एक विस्तृत तकनीक वर्तमान है, सहज श्वास माउस । इस प्रोटोकॉल ECMO और शल्य चिकित्सा कदम के तकनीकी डिजाइन को दर्शाता है । यह murine ECMO मॉडल ECMO (जैसे, सूजन, रक्तस्राव और thromboembolic घटनाओं) से संबंधित pathophysiology के अध्ययन की सुविधा देगा । आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों की बहुतायत के कारण ECMO संबंधी जटिलताओं में शामिल आणविक तंत्र को भी विच्छेदित किया जा सकता है.

Introduction

Extracorporeal झिल्ली ऑक्सीजन (ECMO) एक अस्थाई जीवन समर्थन प्रणाली है कि फेफड़ों और दिल के कार्यों के लिए पर्याप्त गैस विनिमय और छिड़काव की अनुमति लेता है । हिल एट अल1 १९७२ में रोगियों में ECMO का पहला प्रयोग बताया; हालांकि, यह केवल व्यापक रूप से २००९2में H1N1 इंफ्लूएंजा महामारी के दौरान अपनी सफल आवेदन के बाद किया गया । आज, ECMO नियमित रूप से अंत में एक lifesaving प्रक्रिया के रूप में प्रयोग किया जाता है चरण दिल और फेफड़ों के रोगों3। Veno-शिरापरक ECMO तेजी से जाग, गैर intubated में आक्रामक यांत्रिक वेंटिलेशन के लिए एक विकल्प के रूप में कार्यरत है, अनायास दुर्दम्य श्वसन विफलता के साथ रोगियों श्वास4

इसके व्यापक अपनाने के बावजूद, विविध जटिलताओं ECMO5,6,7के लिए सूचित किया गया है । जटिलताओं कि ECMO पर रोगियों द्वारा अनुभव किया जा सकता है रक्तस्राव, घनास्त्रता, पूति, थ्रोम्बोसाइटोपेनिया, डिवाइस से संबंधित खराबियों, और हवा आवेश शामिल हैं । इसके अलावा, एक प्रणालीगत भड़काऊ प्रतिक्रिया सिंड्रोम (सीिी) बहु में जिसके परिणामस्वरूप-अंग क्षति अच्छी तरह से दोनों नैदानिक और प्रायोगिक अध्ययन8,9में वर्णित है । इस तरह के मस्तिष्क रोधगलन के रूप में स्नायविक जटिलताओं भी अक्सर लंबी अवधि के ECMO चिकित्सा के दौर से गुजर रोगियों में सूचित कर रहे हैं । मामलों को भ्रमित करने के लिए अक्सर यह अंतर करना मुश्किल है कि क्या जटिलताओं ECMO के कारण होता है या अंतर्निहित तीव्र और अंत चरण रोगों के साथ विकारों से पैदा होता है ।

विशेष रूप से एक स्वस्थ जीव पर ECMO के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए, एक विश्वसनीय प्रयोगात्मक पशु मॉडल स्थापित किया जाना चाहिए । छोटे जानवरों पर ECMO के प्रदर्शन पर बहुत कुछ रिपोर्ट कर रहे हैं और सभी चूहों तक ही सीमित हैं. तारीख करने के लिए, ECMO के कोई माउस मॉडल साहित्य में वर्णित किया गया है । आनुवंशिक रूप से संशोधित माउस उपभेदों की एक बड़ी संख्या की उपलब्धता के कारण, एक माउस ECMO मॉडल की स्थापना ECMO में शामिल आणविक तंत्र की आगे की जांच की अनुमति होगी-जटिलताओं से संबंधित10,11

कार्डियोपल्मोनरी बाईपास (CPB)12के हमारे पहले वर्णित murine मॉडल के आधार पर, हम गैर ECMO, अनायास श्वास चूहों में veno-शिरापरक intubated की एक स्थिर विधि विकसित की है । ECMO सर्किट (चित्रा 1), बहिर्वाह और बहिर्वाह cannulas, एक सिकुड़नेवाला पंप, oxygenator, और हवा में फँसाने जलाशय युक्त, हमारे पहले वर्णित मॉडल के समान है murine CPB12 एक छोटे भड़काने के अपवाद के साथ वॉल्यूम (०.५ mL) । इस प्रोटोकॉल विस्तृत तकनीक, शारीरिक निगरानी, और रक्त गैस एक सफल ECMO प्रक्रिया में शामिल विश्लेषण दर्शाता है ।

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Protocol

प्रयोगों पुरुष C57BL/6 चूहों, 12 सप्ताह की आयु पर प्रदर्शन किया गया । यह अध्ययन प्रोटोकॉल TSA 16/2250 के तहत जर्मन पशु कानून के दिशा निर्देशों के अनुपालन में आयोजित किया गया ।

1. सामग्री की तैयारी

नोट: सभी कदम साफ, गैर बाँझ शर्तों के तहत प्रदर्शन कर रहे हैं. यदि पशु को पश्चात जीवित किया जाना है तो बाँझ स्थितियों की आवश्यकता होगी ।

  1. एक 2-Fr 16X आवर्धन के साथ एक खुर्दबीन के नीचे एक शल्य ब्लेड का उपयोग कर ट्यूब में 3 fenestrations परिचय ।
    नोट: सभी fenestrations इष्टतम रक्त जल निकासी सुनिश्चित करने के लिए प्रवेशनी के बाहर तीसरे में स्थित होना चाहिए ।
  2. भड़काने समाधान (सामग्री तालिका) तैयार करें । NaHCO3के एक ८.४% समाधान के 30 IU/एमएल हेपरिन और २.५% v/v शामिल हैं । यह प्रयोग करने के लिए तैयार है जब तक 4 डिग्री सेल्सियस पर इस समाधान प्रशीतित । प्राइमिंग समाधान के ५०० उल के साथ सर्किट ।
  3. भड़काना समाधान में प्रवेशनी प्लेस और सिकुड़नेवाला पंप पर स्विचन द्वारा ECMO मशीन भरें । 1 मिलीलीटर की एक प्रवाह दर पर अगले 30 मिनट के लिए मशीन के माध्यम से भड़काना समाधान प्रसारित करने के लिए जारी रखें/
  4. oxygenator को १००% ऑक्सीजन के ०.५ एल/

2. संज्ञाहरण

  1. एक प्रेरण एक २.५% v/v isoflurane/ऑक्सीजन मिश्रण से भरा कक्ष में पशु प्लेस । vaporizer के लिए १००% ऑक्सीजन की ०.५ एल/ सर्जरी से पहले, जांच करें कि पूर्ण संज्ञाहरण पैडल वापसी और दर्द सजगता परीक्षण द्वारा हासिल की है । आंख जेल लागू करने के लिए सुखाने नुकसान को रोकने ।
  2. ३७ डिग्री सेल्सियस पर शरीर का तापमान बनाए रखने के लिए एक वार्मिंग पैड का प्रयोग करें ।
  3. साँस लेना मुखौटा संज्ञाहरण एक isoflurane vaporizer का उपयोग कर प्रदर्शन और 5 मिलीग्राम/किलोग्राम carprofen चमड़े के नीचे ।
  4. नियमित रूप से सहज श्वास का निरीक्षण और isoflurane की एकाग्रता को समायोजित करें ताकि यह १.३ और २.५% के बीच है ।

3. सर्जरी

  1. गर्दन के बाईं ओर ठीक कैंची की मदद से 4 मिमी की एक पार्श्व त्वचा चीरा का उपयोग करके छोड़ दिया jugular नस बेनकाब । एक साथ तेज और कुंद तैयारी माइक्रो संदंश और कपास झाड़ू का उपयोग कर के साथ, छोटे जहाजों के द्विध्रुवी जमावट का उपयोग करें ।
  2. एक बार बाईं jugular नस उजागर है, ligate माइक्रो संदंश की मदद से एक 8-0 रेशम सीवन का उपयोग कर बाहर का हिस्सा ।
  3. नस के समीपस्थ छोर पर एक पर्ची गाँठ लगाएं । Incise नस के पूर्वकाल दीवार माइक्रो कैंची का उपयोग कर ।
  4. पूर्ण heparinization प्राप्त करने के लिए, एक 26 ग्राम braunula के माध्यम से jugular नस में २.५ IU/जी हेपरिन इंजेक्षन ।
  5. प्रवेशनी की प्रविष्टि के दौरान नस से अत्यधिक खून की कमी से बचने के लिए 30 डिग्री से पशु पैड के सिर की ओर उठाएं ।
  6. एक 2-Fr टुकड़े (पु) प्रवेशनी jugular नस के समीपस्थ भाग में डालें, यह थोड़ा घूर्णन जबकि यह 4 सेमी की गहराई के लिए धक्का; ऐसा करते हुए श्रोणि विभाजन अवर वेना कावा (IVC) के पास पहुंच जाएंगे ।
  7. 8-0 सिल्क microforceps का उपयोग समुद्री मील के साथ प्रवेशनी सुरक्षित ।
  8. ३.१, ३.२, और ३.३ में वर्णित चरणों का उपयोग कर सही jugular नस बेनकाब ।
  9. एक 1-Fr पु प्रवेशनी के साथ सही jugular नस Cannulate और धीरे यह सही atrium की दिशा की ओर 5 मिमी ले जाएँ ।
  10. चरण ३.७ दोहराएँ ।
  11. Catheterize एक और 1-Fr पु प्रवेशनी के साथ छोड़ दिया ऊरु धमनी और यह इनवेसिव दबाव निगरानी के लिए उपयोग के रूप में के रूप में अच्छी तरह से रक्त गैस विश्लेषण (BGA) के लिए रक्त का नमूना ।
  12. दोनों forelimbs में और बाएं वक्ष की दीवार में एक डेटा अधिग्रहण डिवाइस से जुड़े इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम (ईसीजी) सुई डालें ।
  13. एक गुदा थर्मामीटर एक डेटा अधिग्रहण डिवाइस से जुड़ा डालें ।

4. Veno-शिरापरक Extracorporeal झिल्ली ऑक्सीजन और रक्त गैस विश्लेषण

नोट: पूरा ECMO सर्किट के एक योजनाबद्ध के लिए, चित्र 1देखें ।

  1. ०.१ मिलीलीटर की एक प्रारंभिक प्रवाह दर के साथ पंप पर मोड़ द्वारा पशु पर ECMO आरंभ/अगले 2 मिनट के भीतर पंप की प्रवाह दर को समायोजित करने के लिए 3-5 मिलीलीटर/
  2. cannulation साइट के माध्यम से बहिर्वाह प्रवेशनी में हवा चूषण के मामले में, प्रवाह को कम करने और एक हवा फँसाने जलाशय के माध्यम से सर्किट को भड़काना समाधान के ०.१ मिलीलीटर जोड़ें ।
  3. स्थिर प्रवाह के तहत, वास्तविक समय मोड में डेटा अधिग्रहण डिवाइस के माध्यम से सभी महत्वपूर्ण मापदंडों पर नजर रखने के लिए जारी है ।
  4. लगातार शिरापरक जल निकासी से backflow निरीक्षण और हवा में रक्त के स्तर को बिछाकर जलाशय की निगरानी ।
  5. एक 24 ग्राम branula की नोक के साथ एक 1 सीसी सिरिंज में घावों से किसी भी रक्त लीक ले लीजिए यह हवा के माध्यम से ECMO सर्किट के लिए andreturn जलाशय फँसाने.
  6. BGA के लिए, निम्न समय बिंदुओं पर और निम्न स्थानों से लगभग ७५ µ एल धमनी रक्त एकत्र करने के लिए एक रक्त नमूना कारतूस का उपयोग करें:
    1. ECMO की दीक्षा के बाद 10 मिनट, एक अतिरिक्त oxygenator से पहले में निर्मित ट्यूब के माध्यम से IVC से रक्त इकट्ठा, oxygenator (नियंत्रण) के बाद समान अतिरिक्त ट्यूब के माध्यम से, और सीधे ऊरु धमनी से ।
    2. 30 मिनट ECMO की दीक्षा के बाद, ऊरु धमनी से रक्त इकट्ठा ।
  7. एक अतिरिक्त ०.१ मिलीलीटर भड़काने समाधान के लिए हवा के माध्यम से हर ४५ मिनट intravasal तरल नुकसान के लिए मुआवजा बिछाकर या ऊरु धमनी कैथेटर या रक्त draining प्रवेशनी के माध्यम से हवा के बुलबुले चूसने से दे ।
  8. BGA के लिए, एक रक्त नमूना कारतूस का उपयोग करने के लिए लगभग ७५ µ एल धमनी रक्त इकट्ठा:
    1. ऊरु धमनी से ECMO की दीक्षा के बाद 1 ज.
    2. ECMO की दीक्षा के बाद 2 ज, एक अतिरिक्त oxygenator से पहले में निर्मित ट्यूब के माध्यम से IVC से रक्त इकट्ठा, oxygenator (नियंत्रण) के बाद समान अतिरिक्त ट्यूब के माध्यम से, और सीधे ऊरु धमनी से ।
  9. 2 घंटे के बाद, पंप पर प्रवाह की दर को कम-धीरे (5 मिनट के पाठ्यक्रम पर), जिससे ECMO रोक ।
  10. एक और 10 मिनट के लिए महत्वपूर्ण मापदंडों रिकॉर्ड जारी रखें ।
  11. पशु exsanguinating और रक्त और अंगों की कटाई द्वारा प्रयोग खत्म करो ।

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Representative Results

यह प्रोटोकॉल एक माउस में veno-शिरापरक ECMO की विधि का वर्णन करता है । इस मॉडल को विश्वसनीय और reproducible है, और श्वसन और संचार12,13के साथ CPB के हमारे पहले वर्णित मॉडल की तुलना में, यह कम तकनीकी रूप से स्थापित करने की मांग है ।

शिरापरक प्रणाली में ECMO प्रवाह १.५ और 5 मिलीलीटर के बीच रखा गया था/ मतलब धमनी दबाव ७० और ८५ mmHg के बीच ECMO सर्किट में अतिरिक्त भड़काना समाधान जोड़कर रखा गया था । आमतौर पर, ECMO के दौरान सर्किट को भड़काने समाधान के ०.१ मिलीलीटर के जोड़ने रक्त की मात्रा के प्रतिस्थापन की अनुमति देता है । सभी मात्रा प्रतिस्थापन या बफर समाधान ऊरु धमनी या हवा फँसाने जलाशय के माध्यम से दिए गए थे ।

शारीरिक मापदंडों हर 10 मिनट और एक प्रतिनिधि ECMO प्रयोग से डेटा दर्ज किया गया चित्र 2में प्रस्तुत कर रहे हैं । एक सफल ECMO से BGA डेटा तालिका 1में दिखाए जाते हैं ।

रक्त मापदंडों ECMO के दौरान प्रासंगिक hemodilution दिखाया; हालांकि, कोई रक्त आधान उदारवादी एनीमिया (तालिका 1) के लिए क्षतिपूर्ति करने के लिए आवश्यक था । BGA से ऑक्सीजन पैरामीटर फियो2 १.० (तालिका 1) में एक ऑक्सीजन/एयर मिश्रण पर oxygenator के समुचित प्रदर्शन का प्रदर्शन किया ।

ECMO के दौरान चयापचय परिवर्तन शुरू में श्वसन क्षारमयता दिखाया और प्रयोग के अंत में उदारवादी दाखवते (तालिका 1). रक्त की कोई अतिरिक्त बफ़रिंग किया गया था ।

Figure 1
चित्र 1: माउस में ECMO लेआउट । रक्त बाएं jugular नस के माध्यम से अवर वेना कावा (IVC) से सूखा है और oxygenated रक्त सही वेना नस के माध्यम से बेहतर कावा SVC (jugular) में पंप है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्रा 2: शारीरिक पैरामीटर ECMO के 2 एच के दौरान मापा । एक = दिल की दर, बी = धमनी का दबाव मतलब (बनाम मात्रा प्रतिस्थापन =), और सी = मलाशय के तापमान । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

10 min 30 min 1 ज 2 ज
पैरामीटर एफए IVC एफए एफए एफए IVC
फोन ७.६७ ७.५१ ७.३१ ७.५७ ७.५ ७.६ ७.५७ ७.३४
pCO2 (mmHg) २४.५ 24 ५२ 26 25 22 26 ५१.१
pO2 (mmHg) ७०७ ६५६ १३५ ६४३ ६२१ ६३८ ५७३ १०१
HCO3 (mmol/ २८.३ २५.३ 26 24 23 27 23 25
sO2 (%) १०० १०० ९९ १०० १०० १०० १०० ९८
HCT (%) 24 23 23 20 18 17 17 16
एचबी (g/dl) ८.८ ८.६ ८.५ 8 ७.८ ७.६ ७.२ 7
एलएसी (mmol/ १.९ १.७ १.८ २.१ २.४ ३.२ ३.१ ३.३

तालिका 1: प्रयोग के पाठ्यक्रम पर परिणाम BGA । O = oxygenator, एफए = ऊरु धमनी, व IVC = हीन वेना कावा.

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Discussion

इससे पहले, हम एक माउस12,13में CPB के एक सफल मॉडल का वर्णन किया । तीव्र या अंत चरण फेफड़ों विकारों के लिए इस तरह के एक मॉडल को लागू करने के लिए हम चूहों के लिए एक आसान उपयोग veno-शिरापरक ECMO सर्किट विकसित की है । CPB मॉडल के लिए अलग, veno-शिरापरक ECMO इस तरह के sternotomy और महाधमनी के clamping के रूप में जटिल शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं की आवश्यकता नहीं है, इस प्रकार एक पूरी तरह से heparinized पशु में घाव रक्तस्राव के जोखिम को कम करने । रक्त के थक्के के साथ oxygenator के embolization से बचने के लिए, हेपरिन/किग्रा के २.५ IU प्रत्येक जानवर को दिया जाता है । इस खुराक सक्रिय थक्के समय (अधिनियम) है कि रक्त की पूरी एंटिकोगुलेशन दिखाया (अधिनियम > ८०० सेकंड) के पिछले मापन पर आधारित था । सूक्ष्म oxygenator में हेपरिन कोटिंग के अभाव के कारण, हमारे एंटिकोगुलेशन प्रोटोकॉल हमारे CPB प्रक्रिया के समान रखा गया था ।

CPB सर्किट की तुलना में, हम हवा की मात्रा को कम करके ०.५ मिलीलीटर के लिए समग्र भड़काना मात्रा को कम कर सकता है-बिछाकर और माइक्रो oxygenator । इसके अलावा, एक धीमी प्रवाह के लिए पशुओं की पर्याप्त ऑक्सीजन रखने के लिए आवश्यक था । रक्त की मात्रा के Intravasal हानि मतलब धमनी दबाव की एक क्रमिक ड्रॉप में हुई । पशु को भड़काने मात्रा के एक अतिरिक्त ०.१ मिलीलीटर जोड़ने 20 mmHg से अधिक रक्तचाप में वृद्धि करने के लिए नेतृत्व किया है, लेकिन अगले 30 मिनट में धमनी दबाव में एक छोटे रैखिक कमी हमेशा मौजूद था । मात्रा प्रतिस्थापन के लिए बुलाया गया था अगर हवा जल निकासी प्रवेशनी के माध्यम से चूसा गया था या वहां ७५ mmHg नीचे रक्तचाप में एक बूंद थी ।

माउस ECMO मॉडल के लिए शल्य प्रक्रिया में सबसे कठिन चुनौती IVC में बाईं jugular नस के माध्यम से प्रवेशनी के स्थान है । इस विधि स्थापित करने के लिए, cannulas के विभिंन प्रकार का परीक्षण किया गया, और एक laparotomy माउस cadavers में किया गया था सही IVC श्रोणि से पहले विभाजन में प्रवेशनी टिप की स्थिति । कई बार, बड़े जानवरों में, प्रवेशनी की जमावट सही गुर्दे की नस में प्रवेशनी के विस्थापन के लिए नेतृत्व कर सकते हैं । फिर भी, IVC के सभी खंडों से पूरे रक्त प्रवेशनी के साइड fenestrations के कारण अच्छी तरह से सूखा हो सकता है ।

प्रारंभिक परीक्षणों में, हम ऊरु नस के माध्यम से cannulation प्रदर्शन किया । दुर्भाग्य से, केवल एक 1-Fr प्रवेशनी ऊरु नस, जो अपर्याप्त रक्त प्रवाह में परिणाम में रखा जा सकता है (≤ 1 मिलीलीटर/ 1-Fr IVC में धकेल दिया कैथेटर सभी अपर्याप्त backflow प्रदर्शित । पर्याप्त backflow को प्राप्त करने के लिए, दोनों ऊरु नसों cannulated करने की आवश्यकता होगी; इसलिए, हम इस प्रक्रिया को छोड़ दिया और एक 2-Fr jugular नस के माध्यम IVC में रखा प्रवेशनी के माध्यम से पर्याप्त draining हासिल की । jugular नस में प्रवेशनी की नियुक्ति के दौरान रक्त की कमी बहुत विशिष्ट है । इसलिए, प्लेसमेंट से पहले, पशु पैड के सिर अंत 30-40 ° उठाया है, तो नस से backflow काफी कम है ।

हीमोग्लोबिन और हेमाटोक्रिट में क्रमिक कमी hemolysis द्वारा समझाया गया है और डिवाइस के प्रदर्शन को प्रदर्शित करने के लिए दोहराए गए रक्त नमूने. अस्तित्व के प्रयोगों के लिए, रक्त आधान से बचने के लिए, रक्त का नमूना अत्यंत सीमित या भी बचा जाना चाहिए. इसके अलावा, प्रयोग के अंत में, ECMO सर्किट से रक्त जानवर में लौट जाना चाहिए । हालांकि, मॉडल के जीवित रहने के लिए एक अलग परियोजना में एक कम इनवेसिव प्रोटोकॉल का उपयोग कर अध्ययन किया जाना है ।

हमारे ECMO रन के दौरान रक्त का प्रवाह 3 और 5 मिलीलीटर के बीच था/सामान्य माउस कार्डियक आउटपुट 6 और 9 एमएल/मिनट के बीच होने की सूचना है; इसलिए, औसत पर, हम माउस के कार्डियक आउटपुट के ५४% के एक ECMO प्रवाह को प्राप्त करने में सक्षम थे । आमतौर पर, veno-शिरापरक ECMO veno-धमनी ECMO की तुलना में कम रक्त के प्रवाह की आवश्यकता है, सही overperfusion के atrium के रूप में सही वेंट्रिकुलर अधिभार और फलस्वरूप, दिल की विफलता के लिए नेतृत्व कर सकते हैं । चिकित्सकीय, पर्याप्त ऑक्सीजन प्राप्त करने के लिए, कार्डियक आउटपुट के 50-75% के एक veno-शिरापरक ECMO प्रवाह हवादार या सहज श्वास रोगियों में पर्याप्त ऑक्सीजन के लिए पर्याप्त है । अनावश्यक रूप से ECMO प्रवाह में वृद्धि सीिी और hemolysis और IVC और SVC के बीच शिरापरक रक्त के प्रमुख भाग के बेकार पुनर्संचरण की वजह से अधिक नुकसान के लिए नेतृत्व कर सकते हैं । इसके अलावा, हमने देखा है कि veno-शिरापरक ECMO में प्रवाह में वृद्धि के द्वारा, अत्यधिक नकारात्मक दबाव cannulation की साइट पर हवा सक्शन की ओर जाता है । हमारे पशुओं isoflurane संज्ञाहरण के तहत १००% ऑक्सीजन प्राप्त किया, और veno-शिरापरक ECMO की मदद से, हाइपर oxygenated थे । हमारे मॉडल में हम "जाग ECMO"4 फेफड़ों को कम नुकसान होने की स्थिति को पुन: पेश करने की कोशिश की है ।

आणविक ECMO में शामिल तंत्र-संबंधित जटिलताओं अब आनुवंशिक रूप से संशोधित माउस उपलब्ध उपभेदों की बहुतायत के कारण की जांच की जा सकती है । फेफड़ों विकारों कि इन अंतर्निहित रोगों के संदर्भ में ECMO अनुकरण कर सकते हैं के साथ चूहों के ८० से अधिक उपभेदों भी कर रहे हैं । इसलिए, हमें विश्वास है कि हमारे veno-शिरापरक ECMO माउस मॉडल कई synergistic परियोजनाओं में लागू किया जा सकता है ।

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Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

यह परियोजना ड्यूश Forschungsgemeinschaft से KFO ३११ अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Sterofundin B.Braun Petzold GmbH PZN:8609189 in 1:1 with Tetraspan
Tetraspan 6% Solution B. Braun Melsungen AG PZN: 05565416 in 1:1 with Sterofundin
Heparin Natrium 25.000 Ratiopharm GmbH PZN: 3029843 2,5 IU per ml of priming
NaHCO3 8,4% Solution B. Braun Melsungen AG PZN: 1579775 3% in priming solution
Carprofen Zoetis Inc., USA PZN:00289615 5mg/kg/BW
1 Fr PU Catheter Instechlabs INC., USA C10PU-MCA1301 carotide artery
2 Fr PU Catheter Instechlabs INC., USA C20PU-MJV1302 jugular vein
8-0 Silk suture braided Ashaway Line & Twine Co., USA 75290 ligature
Isoflurane Piramal Critical Care GmbH PZN:9714675 narcosis
Spring Scissors - 6mm Blades Fine Science Tools GmbH 15020-15 instruments
Spring Scissors - 2mm Blades Fine Science Tools GmbH 15000-03 instruments
Halsted-Mosquito Hemostat Fine Science Tools GmbH 13009-12 instruments
Dumont #55 Forceps Fine Science Tools GmbH 11295-51 instruments
Castroviejo Micro Needle Holder - 9cm Fine Science Tools GmbH 12060-02 instruments
Micro Serrefines Fine Science Tools GmbH 18555-01 instruments
Bulldog Serrefine Fine Science Tools GmbH 18050-28 instruments
Isoflurane Vaporizer Drager 19.1 Drägerwerk AG & Co. KGaA anesthesia 1,3 -2,5%
Multichannel Data Aquisition Device with ISOHEART Software Hugo Sachs Elektronik GmbH, Germany invasive pressure, ECG, t °C
i-STAT portable device Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, USA blood gas analysis
i-STAT CG4+ and CG8+ cartridges Abbott Laboratories, Lake Bluff, Illinois, USA blood gas analysis
C57Bl/6 mice, male, 30 g, 14 weeks old Charles River Laboratories housed 1 week before

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References

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