Visualisera effekten av bekämpningsmedel mot sjukdom vektor mygg i fältet

Environment
 

Summary

Effekten av folkhälsan bekämpningsmedel inriktning olägenhet och sjukdom-vektor insekter är inte enhetlig över olika ekologiska zoner. Här presenterar vi ett system av tekniker med fångenskap smittbärande insekter som vaktposter för bekämpningsmedel effekt för att härleda elektroniska kartor stödja standarden utvärderingen av bekämpningsmedel i flera miljöer.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Britch, S. C., Linthicum, K. J., Aldridge, R. L., Golden, F. V., Walker, T. W. Visualizing Efficacy of Pesticides Against Disease Vector Mosquitoes in the Field. J. Vis. Exp. (145), e58440, doi:10.3791/58440 (2019).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Effekten av folkhälsan bekämpningsmedel inriktning olägenhet och sjukdom-vektor insekter som myggor och sandflugor filth-avel flugor är inte enhetlig över ekologiska zoner. För att bäst skydda folkhälsan och veterinärmedicinska från dessa insekter, måste de miljömässiga begränsningarna av bekämpningsmedel undersökas för att informera effektiv användning av de lämpligaste bekämpningsmedel och tekniker. Vi har utvecklat ett forskningsprogram att utvärdera kombinationer av bekämpningsmedel, bekämpningsmedel spridningsutrustning och appliceringsteknik i hot-torra öknen, hot-fuktiga tropiska, varma och svala tempererade och urbana platser att härleda bekämpningsmedel använder riktlinjer specifika mål insekt och miljö. Till dessa toppar utformat vi ett system av protokollen att stödja effektiva, kostnadseffektiva, bärbara och standardiserad utvärdering av ett varierat utbud av bekämpningsmedel och utrustning över flera miljöer. Kärnan i dessa protokoll är användningen av en rad små burar med koloni-uppfödda sentinel myggor (vuxna och Juvenilen) och sandmyggor (vuxna), strategiskt placerade i naturliga livsmiljöer och utsätts för bekämpningsmedel spray. Rumsliga och tidsmässiga mönster av bekämpningsmedel effekt är härrör från procent dödlighet i sentinel burar, sedan mappas och visualiseras i ett geografiskt informationssystem. Kartor över sentinel dödsstatistik kan jämföras statistiskt att utvärdera relativa effekten av ett bekämpningsmedel över flera miljöer, eller att studera flera bekämpningsmedel i en enda miljö. Protokoll kan ändras för att rymma en mängd olika scenarier, inklusive, till exempel, den vertikala orienteringen av vaktposter i trädkronorna livsmiljöer eller samtidig provning av marken och antenn appliceringsmetoder.

Introduction

Effekten av folkhälsan bekämpningsmedel inriktning olägenhet och sjukdom-vektor insekter som myggor och sandflugor filth-avel flugor är inte enhetlig över öknen, tropiska, tempererade, eller urban ekologiska zoner1. Vissa viktiga arter i dessa tre grupper av insekter är viktiga vektorer av parasiter, virus, timori maskar och bakterier som orsakar betydande sjukdomar hos människor, husdjur och djur världen över. För att bäst skydda folkhälsan och veterinärmedicinska, måste de miljömässiga begränsningarna av bekämpningsmedel undersökas för att informera effektiv användning av de lämpligaste bekämpningsmedel och tekniker. Folkhälsa bekämpningsmedel tillverkare krävs inte av US Environmental Protection Agency att ange förväntade effekten av en formulering i en rad miljöer eller målinsektspopulationen, men dessa bekämpningsmedel används för mygga och vector kontroll över flera ekologiska zoner i USA och runt om i världen.

Vi har utvecklat ett forskningsprogram att utvärdera många kombinationer av bekämpningsmedel och bekämpningsmedelsrester utrustning och tekniker i hot-torra öknen, hot-fuktiga tropiska, varma och svala tempererade och urbana platser, för att härleda användning av bekämpningsmedel riktlinjer som är specifika för målet insekt och miljö1. I detta program utvärderar vi bekämpningsmedel att målet vuxna stadier av myggor och sandflugor (adulticides) och omogna stadier av myggor (larvicides) använda bekämpningsmedel spridningsutrustning som är hand bärs, lastbil eller flygplan-monterade, och installerade i fasta platser. Sedan, fyra stora utomhus bekämpningsmedel ansökan tekniker utvärderas: (1) ultra-låg volym (ULV) eller termisk dimma aerosolsprayer utrymme av adulticides avsedd för snabb Nedslagning av målinsektspopulationen, (2) en variant av den första tekniken i vilken flytande larvicides appliceras med ULV eller termisk dimma för kort - eller långfristiga undertryckande av omogna stadier av målinsektspopulationen, (3) tidsinställda imma sprayer från fasta platser för att avvärja eller döda och (4) låg volym (LV) kall dimma sprayer av kvarvarande bekämpningsmedel avsedda att tillämpa lång-varande giftiga eller motbjudande beläggningar på en mängd olika naturliga eller artificiella substrat. Presenteras här är de detaljerade metoderna för att utföra tekniker (1) och (2) ovan. Metoder för (3) kommer att presenteras i separata studier och tekniker i (4) beskrivs i korthet i tidigare publikationer2,3,4.

För att åstadkomma detta komplexa forskningsprogram, utformade vi ett system av protokollen att stödja effektiva, kostnadseffektiva, bärbara och repeterbara/standardiserade utvärdering av aerosol adulticid och larvicide tekniker med olika bekämpningsmedel/utrustning kombinationer i flera miljöer. Kärnan i dessa protokoll är användningen av kolonin uppfödda sentinel myggor (vuxna och Juvenilen) och sandmyggor (vuxna) att indikera rumsliga och tidsmässiga mönster av bekämpningsmedel effekt. Adulticid ansökningar, som sentinel vuxna myggor eller sand flugor finns i små engångsbruk disponibla burar distribueras i strukturerade matriser genom målområdet och en kontrollgrupp område. För larvicide tillämpningar distribueras små engångsbruk disponibla koppar på samma sätt för att samla in sprutade larvicide droppar för senare införande av vatten och sentinel koloni-uppfödda omogna myggor. Nästa, vi spela in procent dödlighet i sentinel burar eller utveckling i procent vuxna i sentinel koppar, vid angivna intervaller efter spray och använda dessa data för att producera elektroniska kartor av rumsliga och tidsmässiga effekten i ett geografiskt informationssystem (GIS) som kan vara kvantitativt förhållande mellan och bland miljöer.

Med hjälp av sentinel burar av kolonin uppfödda insekter att utvärdera bekämpningsmedel effekten i fältet är en väletablerad praxis5,6, och använder tomma plast sentinel cups för insamling sprutade larvicide växer fram i litteraturen7 . Våra elektroniska kartläggning av effekten att visualisera rumsliga och tidsmässiga mönster av dödlighet är dock en innovation som avsevärt förbättrar utredning av dödlighet annars presenteras i platt tabellformat. Även hög genomströmning buren laddar systemet och modulära bur distribution systemet anpassas till olika scenarier som beskrivs här är unik för vårt program. Andra forskningsprogram närma utvärdering av bekämpningsmedel ansökningar i fältet annorlunda. Dagens populära metoder inkluderar att fånga och analysera dye-märkt bekämpningsmedel droppar från sprayer i fältet på spinning glas bilder8 eller akryl stavar9, som är en sedan länge etablerad producerar processdata kan mappas elektroniskt och visualiseras.

En nackdel är att droppstorlek och densitet mätningar från samling media beräknas endast från en liten andel av den totala yta, med programvara-assisted mikroskopi av synfält som tyvärr är mycket subjektiva. Dessutom kartor droplet distribution och densitet inte fullt illustrera bekämpningsmedel effekt, eftersom antagandet är att förekomsten av ett tröskelvärde för antal droppar av en viss storlek automatiskt anger målet insekt dödlighet. Detta antagande tar inte hänsyn till dödligheten från avdunstning produkter från droppar genom målområdet som kan också inducera dödligheten10, eller att ett lägre antal droppar eller andra droplet storlekar kan döda vissa andelen mål individer. Den ursprungliga logik10,11,12 är att en aerosol bekämpningsmedel är utformad att inkräkta små vattendroppar på aktivt flygande mål insekter. Våra observationer i fältet, inklusive minskningar i naturliga populationer efter sprutning när målinsektspopulationen inte aktivt flyger, tyder emellertid på att droppar eller evaporativ produkter från droppar når mål som inte är flygande men ganska dolda i vila refugier (opublicerade data 2011). Dessutom har vi observerat i analys av ett fält applicering (via samtidiga droplet capture, bekämpningsmedel aktiva ingrediensen capture och sentinel burar) att kartor över droplet distribution, aktiva ingrediensen distribution och dödlighet inte är samstämmiga) opublicerade data 2010).

En annan populär metod att utvärdera bekämpningsmedel effekt är att distribuera sentinel burar i ett rutnät som avgränsas i en platt mejade homogent område med några hinder till bekämpningsmedel plymen och under nära perfekt meteorologiska förhållanden (t.ex. konsekvent vindar < 10 mph och vind riktning som är vinkelrät till spray line). Fortfarande, andra närma sig detta genom att mäta effekt med sentinels placeras i vindtunnlar14. Dessa metoder ger ett perspektiv på bekämpningsmedel effekt, men är mindre benägna att inse operativa effekt under icke-ideala fältförhållanden (heterogena livsmiljöer som inkluderar hinder till bekämpningsmedel flöde och variabel om inte under optimala meteorologiska förhållanden). Söker bevis till stöd för absoluta effekt är inte realistiskt. Driftförhållanden är sällan idealiska, och att välja formuleringar baserade på tester i vindtunnlar eller direkt tillämpning i bakåtkompilerade parker kan vara vilseledande.

I vår forskning använder vi naturliga fältet platser och viss meteorologiska förhållanden (men inte i regn eller extrema vindar som är utanför gränserna för alla operativa program). Detta är sannolikt mer informativ för operativa vector kontroll när observerar rimlig effekt i en bekämpningsmedel formulering trots dåliga miljöförhållanden, heterogena livsmiljö och hinder till bekämpningsmedel flöde. Om möjligt rekommenderas att komplettera sentinel insekt dödsstatistik med före - och efter - surveillance av naturlig insekt målgrupper inom behandling och kontroll, som en bro mellan kontrollerade exponeringar och insåg exponering för den Focal bekämpningsmedel. Dock räcker det inte med övervakning av naturliga populationer för att avgöra huruvida bekämpningsmedel producerar dödlighet i en målgrupp eller huruvida målinsektspopulationen faktiskt flytta från målområdet efter upptäcka mötande bekämpningsmedel aerosoler.

Oavsett förbehåll att någon utvärdering av bekämpningsmedel sprayer i fältet behåller elektronisk kartläggning av Dödlighetsdata i ett GIS (i motsats till platt presentation av Dödlighetsdata i tabeller) de kvantitativa attribut kan noggrann jämförelse över prövningar och ger också ett medel för snabb, visuell bedömning. Med data i GIS, forskare kan fastställa gränsvärden för bekämpningsmedel effekt och visualisera en fokal bekämpningsmedel relativa förmåga över flera miljöer, eller de kan jämföra funktionerna i flera bekämpningsmedel inom en enda miljö över en mängd utrustning och tekniker.

Protocol

Obs: Detta protokoll är skriven speciellt för fältförsök inriktning vuxna myggor. Information om ändringar som är nödvändiga för omogna myggor, andra vuxna sentinel insektsarter och unika scenarier ingår i diskussionen.

1. sentinel insekt uppfödning och Sentinel bur preparat

  1. Att konstruera vuxen sentinel burar
    1. Fastställa det totala antalet sentinel burar behövs för fältstudien av inklusive behandling och kontroll områden och antalet replikat som planerat och sedan lägga till 5% för att kompensera förluster på grund av skada eller ovanliga dödlighet (se steg 2.1). Förbereda 5 x 5 i tyll mesh torg (2 per sentinel bur) använder en rullande disk skärare, rak kant och skärbräda med bulk tyll yardage. Store tyll mesh rutor i partier på 50 i 1 qt återförslutningsbara plastpåsar.
    2. Förbereda sentinel burar genom att försiktigt trycka de platta kartong diskarna ur bottnar i nya ½ pt papp glass koppar att skapa öppen 2 x 3 i cylindrar. För varje kopp, ta bort kartong diskarna ur 2 lock att skapa öppna ramar (1 för varje ände på cylindern). Säkert en tyll mesh square till ena änden av cylindern genom att fånga det under bezel som bezel blir tätt monterade på cylindern.
    3. För varje sentinel bur, skruva fast bandklamma krok-och-loop till ett gummiband och säkra gummibandet runt ringen som är på plats. Väska sentinel burar i partier på 50, med en separat väska innehållande 50 ramar och en påse med 50 tyll mesh rutor.
      Obs: Tyll maskstorlek bör minsta gapet storleken att innehålla särskilt sentinel arten placeras i buren. Till exempel kommer att Aedes aegypti myggor kräva en mindre maskstorlek än Culex quinquefasciatus myggor.

Figure 1
Figur 1: Sentinel bur förberedelse. (A) visas här två personal lastning sentinel burar med bedövat myggor sprids på ett stort vitt ark av papper. Bunten med tyll mesh rutor i förgrunden redo för placering på den väntar öppen sentinel burar bör noteras. (B) visas flera laddade sentinel burar, väntar på placering av 10% sackaros bomullstussar och uträtning av gummibandet. (C) visas är sentinel burar i ett svalare, redo för distribution i fältet. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

  1. Schemaläggning och uppfödning kolonin insekter
    1. För sentinel insekter, väljer du en art som är mest lämplig för miljö, säsong och medicinska hot på plats där rättegången äger rum. Tänk på kolonin kapacitet och utvecklingstid till vuxen för att arter; exempelvis anser om kolonin kommer att kunna ge antalet exemplar som behövs för antalet sentinel burar krävs i tidsramen.
    2. För alla uppfödning, säkerställa befolkningen uppfödning burar hålls i en kontrollerad miljö och är tillräckligt stor för antalet vuxna planerat, och att en utfodring och städning regim är etablerad och följts noggrant för att minska senare stressrelaterade dödlighet som kommer att blanda ihop fältet effektstudier. För omfattande fältstudier, planera att bakre sekventiell batchar i separat väl märkt population burar.
    3. Använd endast kvinnliga myggor i sentinel burar, helst 3-5 d efter eclosion. Mygga puppor kan vara könsbestämmas under en dissekera omfattning eller åtskilda fysiskt med glas Pupp avgränsare för att minska sortering ansträngning med vuxna på sentinel cage lastning steg.
      Obs: En koloni måste kunna leverera dubbelt så många myggor som planerats för användning i sentinel burar, eftersom endast Honor används för vaktposter. Använd 10 vuxna Honor för varje sentinel bur, eftersom detta nummer är snabbladdad, snabb att räkna för dödlighet och lätt att avgöra om någon har rymt. Det är viktigt att back-plan från föreslagna SprayDate så att 3-5 dag-gamla vuxna myggor är tillgängliga. 3-5 d spridning ger dock viss marginal ifall vädret tag förhindrar sprutning.
  2. Lastning sentinel burar
    1. Förbereda en CO2 kammare genom foder botten av en ny ½ gal plast mat förrådscontainer med bomullstussar. Direkta ena änden av en 6-ft längd på polyuretan slang (¼ tum i diameter) i bomull bollar genom en åtsittande hål stansade låg i ena sidan av behållaren. Bifoga en 20 lb CO2 flaska med en regulator i andra änden av röret och placera locket löst i behållaren för att gas fly efter sprida genom bomull bollar och cirkulerar genom behållaren. Tejpa röret till bordsskivan att förhindra den lätta Avdelningen drog eller knackade på golvet. Ange en flödeshastighet beroende på djurart som används (start vid ~ 7 L/min och göra justeringar som behövs).
    2. Förbereda 10% sackaroslösning i en ny ½ gal plast matbehållare och dränka 100 bomull bollar så de blir fullt mättade. Lägg ut sentinel burar från steg 1.1 batchvis i 25 eller 50 som utrymmet tillåter, med tyll mesh kvadraterna och lösa beslag å i närheten.
    3. Ta bort myggor från befolkningen buren med en mekanisk hygienfilter kan kanalisera myggor direkt i flyttbara ventilerade samling rör. Mer än ~ 10 myggor bör vara aspirerade i varje rör och inga fler rör än kan behandlas inom 10 min ska fyllas för att lindra stress. Placera 2-4 rör i taget in CO2 kammare och ställa in en timer för en 4-minuters exponering för att bedöva myggen för efterföljande könsbestämning och överföring till sentinel burar.
    4. När timern chimes, ta bort alla rör från CO2 kammare och försiktigt skaka ur bedövat myggor från rören för att skingra dem jämnt över en ren vit 11,5 x 17 - i pappersark. Ställ in timern för 4 min, vilket är den ungefärliga tid innan myggen blir aktiv igen. Använda en pistol hygienfilter15,16 eller mjuk insekt pincett att plocka ut partier av 20 vuxna honor och placera dem omedelbart i väntan öppna sentinel burar. När alla honor har plockats ur bedövat batchen, använda en separat mekanisk hygienfilter för att samla alla återstående manliga myggor som kommer att förstöras genom frysning.
    5. Som alla väntar på öppna sentinel får bur ett parti av 20 vuxna kvinnliga myggor, fälla en tyll mesh torg med en bezel över öppna övre ände bur cylindern och tryck ner för att slutföra sentinel bur montering. När tyll är på plats, pivotera gummibandet så att det lägger över båda mesh ändarna av sentinel buren, med krok-och-loop buntbandet placeras mot sidan av cylindern. Pressa flesta 10% sackaroslösning ur en bomullstuss så att det är fortfarande fuktig, precis innan punkten av fritt droppande och försiktigt tuck bomullstuss under gummibandet mot tyll mesh på ena sidan av sentinel buren , lättillgänglig för myggen.
    6. Upprepa steg 1.3.3-1.3.5 tills alla sentinel burarna är laddade.
      Obs: Buren lastning förfarande bör innehålla minst två personal: en att genomföra alla mygga hantering steg och en annan att genomföra alla åtgärder för hantering av buren.
  3. Lastning sentinel bur kylare
    1. Förbereda en 48-qt isolerade picknick kallare för varje 45-50 sentinel burar (beroende på fabrikat/storleken på kylaren) genom att placera en våt 18 x 24 - i bomull handduk längst omfattas av en 13-gal tall kök soppåse. Våta handduken bör vara vred till peka av mättnad men inte droppar. Vik och ordna 13-gal påsen för att helt täcka botten av kylaren och minst 3 i från botten på alla sidor.
    2. Ladda kylaren genom noggrant placera sentinel burar i staplade lager med bomull bollar vänd uppåt. Beroende på fabrikat av kylaren, det bör finnas om 10-12 burar per lager och 4-5 lager. Om möjligt, något kompensera varje lager så att en bur inte täcker helt buren nedan att främja luftflöde. Täcker det översta lagret med en andra 13-gal soppåse (vikta som den nedre soppåse) och sprida en andra blöt handduk ovanpå denna väska.
    3. Använd tejp för att fästa en hopvikt bit kartong i en främre hörnet av överläppen av kylaren, så att locket är stödd öppna ca 3/8 i för att främja luftväxling och förhindra överhettning. I varje kylare inkludera en 1-qt återförslutningsbar plastpåse med 10 extra bomullstussar dränkta i 10% sackaroslösning, och en separat väska med 5 extra gummiband och 5 krok-och-loop Buntband (dessa komponenter är ibland förlorade från sentinel burar under distributionen i fältet). Hela tiden i kylarna i labbet och fältet, toppa sackaroslösning i alla bomull bollar på burar som behövs, med hjälp av en pipett och 10% sackaroslösning lagras i en robust behållare.
      Obs: Med den här metoden typiska kolonin myggor kan laddas in sentinel burar och lagras i kylare 24-28 h före användning i fältförsök.
  4. Transportera sentinel bur kylare till fältet
    1. Under transport till fältet plats hålla sentinel bur kylare i ett fordon med luftkonditionering men skyddat från direkt solljus. På fältet platser i milda till varma tempererade miljöer, kan kylare vara staplade utomhus för att acklimatisera sig eller hållit i fordon med luftkonditionering som kör; men i båda fallen hålla kylare direkt solljus. Klocka för alla omgivande förhållanden utomhus som kan påverka vaktposter i kylarna (t.ex., avgaser, papperskorgen bränder, etc.)
    2. I extrema varma miljöer, hålla kylare i fordon med luftkonditionering körs direkt solljus, men acklimatisera sig sentinels gradvis till utomhus författningarna före distributionen till behandlingsområdet för att undvika döden från shock. I alla miljöer, försöka testa en eller två kylare av sentinel burar att avgöra hur länge de kan lämnas eller hur snabbt de kan vara acklimatiserad till lokala utomhusförhållanden.

2. beredning av webbplatsen fältet

  1. Att upprätta området sentinel rutnät och kontroll
    1. Välj ett studieområde som ger tillräckligt utrymme för spridning av planerade funktionsläget av bekämpningsmedel (antenn, lastbil, eller portable) med en tydlig väg för förflyttning av sprayenheten, och klara av mänsklig bosättning eller aktivitet. Om möjligt innehålla en mängd vegetation densitet och allmänna heterogenitet livsmiljö och att utmana spray penetration.
    2. Designa ett rutnät av platser för sentinel burar som fångar variationer i avstånd från spruta, avstånd längs spray, vegetation/hinder till spray penetration och höjden över marken. Använda en 300 ft mäta tape reel för att markera bekvämt intervall från sprutan och längs raden spray; exempelvis använda multipler av 25 ft intervall.
    3. Producera en karta över rutnätet genom att märka upp en utskrift av en satellitbild med en tydlig numrering koden för sentinel bur platser och distribuera den till fältteam. Om möjligt, få GPS-koordinaterna för varje bur plats eller på minst koordinaterna för framstående funktioner som kan användas senare för registrering poäng för att bygga en rumsligt sammanhängande karta i GIS.
    4. Markera sentinel bur rutnät platser på marken med flaggning tejp, glow sticks eller fästa flaggor. Bekämpningsmedel sprayer bedrivs ofta vid skymning eller natt: försök att rensa distinkta promenadvägar till alla sentinel platser, inklusive extra flaggning tejp och/eller glöd pinnar för att markera resa risker eller andra betydande hinder.
    5. Installera sentinel bur montering av stolpar i marken med rutnät utformning och tydligt märka varje påle med en kod för sin unika position med en permanent spritpenna. Minst 48 inches i stolpen ska vara ovan jord. Om livsmiljön inte ger naturligt vegetation/hinder utmaningar till bekämpningsmedel spray spridning, överväga att placera en 1 ft3 kartong på sin sida med topp öppen bredvid varje sentinel bur pole, ge en ytterligare sentinel position inom simulerade refugier. Luftflödet genom rutan kan justeras genom att borra ½-i hål i en eller flera sidor, och lådor bör märkas med en unik position-kod med en permanent spritpenna.
    6. Om det finns en risk för myror attackerar sentinel myggor, installera sentinel bur montering polacker genom ett åtsittande hål borras i mitten av en 18 x 18 - i självhäftande golv kakel, med den klibbiga sidan uppåt om du vill svälla myror innan de kan nå vaktposter. 1 ft3 rutorna från steg 2.1.5 kan också placeras på den klibbiga sidan av sådana plattor att hindra myror, och även att hålla lådor på plats i blåsiga förhållanden.
    7. Upprätta en vindsidan kontrollområde (bestående av liknande livsmiljö och meteorologi som behandlingsområdet) för distribution av kontrollgrupp sentinel burar utsätts för miljön på stolpar eller i 1 ft3 lådor för samma tid som vaktposter i behandlingsområdet. Ett specifikt team av personal med separat kylare av sentinel burar bör ägnas åt hantering av alla kontroll vaktposter.
    8. Resurser tillåter, utforma en fördelning av lämpliga fällor i hela behandlingsområdet, områden som gränsar till behandlingsområdet och kontrollområden att bedriva övervakning av lokala naturliga populationer av myggor som är närmast av de arter som valts i 1.2.1. Påbörja dagtid eller över natten övervakning, beroende på art, under en eller flera av 12-24 h perioder innan spray prövningar kommer att äga rum. Fortsätta övervakningen i hela spray prövningar, följt av övervakning för en eller flera perioder efter spray prövningar.

Figure 2
Figur 2: förbereda fältet webbplats med sentinel bur polacker. Två scenarier av sentinel bur polacker distribueras i (A) bevattnade tropiska mikrohabitat i en hot-ointressant region och (B) hot-torra öknen. (A), tre sorters sentinel apparater visas: ”stegen” till vänster är en serie av bomull band upphängd mellan PVC-röret att fånga bekämpningsmedel på olika höjder ovanför marken. staven i mitten är för sentinel mygga burar; och Polen till höger stöder en bild spinner för att fånga bekämpningsmedel droppar. (B) det finns en liknande bomull band att fånga bekämpningsmedel, men det bör noteras att högra stöd av apparater i förgrunden i öppen dubbel som sentinel bur polack (sentinel buren bifogas ungefär en tredjedel av vägen ner); apparaturen i bakgrunden är däremot placerad så att menyfliksområdet och sentinel buren (indikeras med gul pil) är skyddade inom vegetation. Flygplanet i bakgrunden genomför en ULV bekämpningsmedel spray. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

  1. Öva säkerhet
    1. Upprätta ett kommunikationssystem bland spray team, behandling område sentinel hantering team, kontroll området sentinel hantering team, etc.via mobiltelefoner (röst/text) eller handburna radioapparater.
    2. Tillhandahålla personlig skyddsutrustning (PPE) till all personal som är lämpliga för deras roller och lämpliga för bekämpningsmedel formulering- och ansökan.
    3. Fastställa ett bekämpningsmedel lagring och blandning/lastning område skyddas med sekundär inneslutning och fylld med nödutrustning, såsom spadar eller brandsläckare för termisk dimma applikationer, handdukar innehåller spill eller droppar, avfallsbehållare, ren vatten, första hjälpen leveranser och bärbara ögonspolningsmöjligheter. Ännu viktigare, upprätta protokoll i fall av spill eller exponering av personal för kemikalier.
  2. Märkning raden spray och registrering meteorologi
    1. För körning eller hand-bära applikationer, kontrollera linjen spray är tydlig och att hinder identifieras och tydligt märkta med flaggning tejp, fästa flaggor eller glow sticks. För antenn applikationer, göra alla lämpliga arrangemang med air traffic control.
    2. Grundläggande längden på raden spray ska matcha måtten på nätet; dock ange start och stop punkter väl-före och väl-efter rutnätet. Lägga till cirka 10% av den grundläggande längden av raden spray i början och slutet att öka möjligheten för hela nätet att exponeras, gett oundvikliga förändringar och ojämnheter i vind mönster (se representativa resultat).
    3. Om möjligt förutse stora vind förskjutningar, ställa in alternativa spray rad(er) och designa sentinel rutnätet ska vara informativa från båda spray riktningar. Operatorn spray bör vara beredda att sluta sprutning kort om vinden börjar att vindstöt dåligt eller SKIFT plötsligt, vilket kan skapa en säkerhetsrisk. Operatören kan återuppta sprutning när så är lämpligt, och rättegången kan fortfarande producera användbara effektdata så länge kontroller hålls i miljön under en liknande längre.
    4. Placera minst en väderstation med en färdregistrator som kan mäta temperatur, relativ fuktighet, vindhastighet och vindriktning i området spray och en annan i området. Dessutom sätta upp en enkel vind indikator menyfliksområdet (ca 2-3 ft ljusa färgade flaggning tejp) på polack reservdelar sentinel buren med tanke på spray operatör och fältteam att öka övergripande medvetenhet av villkor. För antenn applikationer, bör flygplanet helst kunna rapportering meteorologi på release höjd.
      Obs: Samarbeta med universitet, folkhälsa organisation, mygga och vector kontroll distrikt eller andra byrå med kunskap om området föreslås att genomföra fältförsök, så att befintliga partnerskap och överenskommelser med markägare eller mark ordningsvakter kan byggas och bidra till att utveckla forskningsprogrammet. Befintliga partnerskap översätta webbplatsen säkerhet, långvarig användning, och i vissa fall, kritiska köpa-i och accepterad av allmänheten. Med strukturerade nät är det enkelt för lokala medarbetare att utveckla sin egen numrering/märkning system för snabb och repeterbara distribution, insamling och dödlighet kontroller av sentinel burar. När rutnät, spray line och meteorologi ställs in, kan material lämnas på plats (till exempel över natten tills ett bekväm spray eller om det finns en väder-håll).
      FÖRSIKTIGHET: Kartonger kan deformera när blöt om det regnar, och starka vindar kan flytta tunga självhäftande golvplattor.

3. distribuera Sentinel burar

  1. Bestämma i förväg placeringen av sentinel burar på varje sentinel punkt i rutnätet som höjden på buren på montering pole (inklusive flera höjd, där en kan placeras längst ned på masten och en annan överst), eller huruvida burar kommer att placeras i n 1 ft3 lådor.
  2. Tilldela 2 personer sentinel bur distributionsgrupperna: en att hålla kylaren och en annan att dra ut sentinel burar som behövs. Alternativt kan du tilldela individer att bära och placera flera burar beroende på miljö och storleken på rutnätet. Inkludera alltid extra sentinel burar i fall en tappas eller klev på, tyll är trasigt, eller en förlorad medan du flyttar genom nätet.
  3. Per positionering regimen som beskrivs i steg 3.1, Använd krok-och-loop buntbandet att anbringa sentinel burar till stolpar och kontrollera bomullstussar med 10% sackaroslösning är fortfarande på plats under gummibandet. Placera buren på deras sidor i rutorna 1 ft3 så att båda tyll mesh ändar är vinkelrätt mot marken. Läggning av burar på stolpar kan anges i förväg. exempelvis vindriktning sådan att mesh tyll sidor är i linje med den planera spray riktningen och förväntade. I varma öknen miljöer, vinkel burar på polerna så att insekterna inte i direkt solljus och kan flytta in i skugga av sidan av buren cylindern.
  4. I både behandling och kontroll, tydligt märka varje sentinel bur med en permanent spritpenna som det sätts på plats med två bitar av information: (1) pol och/eller box unika placera koden för senare mappning i GIS och (2) pre-spray dödlighet för senare korrigering för spray-inducerad dödlighet eller dödlighet från exponering för miljön oavsett spray. Till exempel om pre-spray dödlighet är noll, skriva ”pre-0”; om 2 exemplar är döda, skriva ”pre-2”, osv

Figure 3
Figur 3: placering av sentinel burar inomhus och utomhus. Exempel på pole placeringar och 1 ft3 lådor (A) inomhus i en simulerad landsbygdens residence, (B) utomhus i en simulerad stadsdelen och (C) i ett datum palm grove i en hot-ointressant zon. Också visat de klibbiga plattorna under rutan och sentinel buren placeras i öppna i (A), och sentinel bur pole pin drivit igenom panelen klibbiga bredvid rutan i (B) att minska invasion av myror i sentinel burar. Plywood fyrkantig med upprätt PVC berget till vänster om rutan i (A) är ett stöd för en bild spinner. En liknande apparat kan användas för att stödja polack sentinel bur för att möjliggöra placering av vaktposter på varierande höjder. Också visat är den bild spinner med diabilder på en montering till vänster om sentinel bur pole och box (B). I (C) visas en high-low placering av två sentinel burar att undersöka rörligheten för bekämpningsmedlet på olika nivåer. Toppen av öppnade sentinel buren svalare är bara synlig i förgrunden. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Obs: Beroende på storleken på rutnätet, säkerställa det finns tillräckligt med personal att distribuera alla burar i en lämplig tidsram att minimera miljöeffekterna på sentinel dödlighet. Det kan vara nödvändigt att genomföra praktiken körningar med tomma burar att avgöra huruvida tillräckligt personal är närvarande. Det är underförstått att det oundvikligen kommer att viss spridning i exponeringstiden av sentinel burar på miljön, på grund av ställtid med visst antal burar per person. I mycket stora sentinel grids (t.ex. för vissa antenn program), planerar att samordna flera team i flera fordon att placera sentinel burarna inom en rimlig tidsram. Det är oundvikligt att vissa dödligheten inträffar över befolkningens sentinel bur mygga, så det måste redovisas med försiktig bur märkning före miljöexponering utanför kylare och före bekämpningsmedel.

4. genomföra bekämpningsmedel

  1. Tilldela en tidtagare att spåra ansökan spray varaktighet (starta/stoppa gånger) och hålla tider med hjälp av ett stoppur, klocka eller digital video med tid/datum stämplar. Tidtagaren kan även tilldelas en skriftlärd att fånga flera viktiga variabler, inklusive den tid vid vilken sentinel bur distributionen är klar, flyger, körning, walking hastighet, ansökan enhet flöde, bekämpningsmedel koncentration och spädningsvätska, spraya tid, håll tid, på vilket cage samling är klar, och allmänna livsmiljö observationer.
  2. Förbereda bekämpningsmedel appliceringsutrustningen per tillverkare riktlinjer och ladda bekämpningsmedel (och spädningsvätska vid behov), med lägsta belopp för att täcka målområdet plus ett förutbestämt belopp att redovisa spray line volymer och bekämpningsmedel reservoar sumpen att förhindra kavitation under spray. Överskrid inte söktryck som anges på etiketten som bekämpningsmedel och inte använder bekämpningsmedel som inte godkänts av US Environmental Protection Agency, såvida inte ett experimentell användning-tillstånd som är specifika för platsen för fältstudien har säkrats.
  3. Upprätta tillräckligt efter spray hålltid som gör att bekämpningsmedel spray plume att skingra hela rutnätet sentinel bur innan sentinel burarna samlas. Håll tiden är baserad på ett balanserat hänsynstagande av habitat/vegetation densitet, meteorologiska förhållanden (särskilt extrem hetta eller vind), applikatorn, programläge (antenn, markfordon, bärbar), target insekt och bekämpningsmedel formulering, och kan kräva preliminära försök att utveckla effektivt.
  4. När sentinel burar är märkt och distribueras i både behandling och kontroll och alla nyckelpersoner har kommunicerat beredskap, har spray operatören genomföra en slutkontroll av vindhastighet och vindriktning och initiera antenn, marken eller bärbar spruta bekämpningsmedel från utsedda spray line eller alternativa spray line som behövs. Ange den flygande, kör, eller promenerar hastigheter beroende på tillämpning enhet flöde och bekämpningsmedelsrester etikett skattesats.
  5. När applicering är klar, har tidtagaren markerar början av hålla tiden och meddelar all personal 1-2 min innan håll tiden ska gå, så att all personal kan flytta in i position och förbereda för att samla in sentinel burar.
    Varning: Följ alla säkerhetsföreskrifter som anges på skivbolaget bekämpningsmedel utöver standard bekämpningsmedel applikator bästa praxis. Bekämpningsmedel ansökningar bör utföras av en certifierad bekämpningsmedel applikator med, om möjligt, ytterligare certifiering i kategorin folkhälsa bekämpningsmedel. Innan applicering se till att all personal är vindsidan av användningsområde, eller i fordon med luftkonditionering på återcirkulera om de måste vara i målområdet, och/eller bär lämplig personlig skyddsutrustning. Säkerställa alla sentinel bur kylare är stängda och att inuti stängda fordon parkerade vindsidan av applicering har luftkonditionering på återcirkulera.

Figure 4
Figur 4: fordonet monterade termisk dimma sprutning ett rutnät i varm-ointressant ekvatoriella läge. En lastbil monterad ULV spruta körning längs en spray linje styra bekämpningsmedel spray genom ett rutnät av sentinel burar på ett öppet fält (A). Liknar figur 2, varje sentinel position är utrustad med en andra stolpe att stödja ett bomull band för att samla in bekämpningsmedel droppar för senare analys med gaskromatograf/masspektrometri. Närbilder av sentinel burar (B) i en varm tempererade miljö innan spray och (C) i en miljö med hot-ointressant efter spray. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

5. samla Sentinel burar och inspelning Dödlighetsdata

  1. Använda samma sentinel bur lagen för att samla burar över hela rutnätet när håll tiden har förflutit. All personal som hanterar efter spray burar bör engångs nitrilhandskar för att minimera mänsklig kontakt med bekämpningsmedel. Tillbaka efter spray burar till skyddande miljön av sentinel bur kylarna så snart som möjligt, lagras i ett cool fordon direkt solljus, och återvände till laboratoriet för behandling så snart som möjligt.
  2. I både behandling och kontroll är det viktigt att spela in efter spray dödlighet på varje sentinel bur med en permanent spritpenna som det samlas in. Efter spray dödlighet räkningen bör omfatta alla döda myggor i buren, och detta nummer ska vara skriven i direkt anslutning till ”före” räkningen, men cirklade tydligt nog för att skilja den från före exponeringen dödlighet räkningen. Senare, dras före räkningen från efter greven att få faktiska dödlighet från exponering för bekämpningsmedel (spray område) eller miljö (kontrollområde). Försök inte att föra denna matematik i fältet samtidigt skynda sig för att samla in sentinel burar.
  3. Försök att återgå sentinel burar till arbetsytan lab inom 6 h efter spray så att antalet 6 h dödlighet kan registreras. I labbet, över alla burar till Plastbrickor, kasta alla gummiband, krok-och-loop kablar band och bomullstussar. Varje fack bör hålla ca 20 sentinel burar lagras med mesh tyll parallellt med marken. Placera en ny bomullstuss för 10% sackaros lösning på alla burar och täck varje bricka med en ny fuktig handduk, liknande dem som används i sentinel bur kylarna. Stapla magasinen på en lab-bänk eller i en inkubator med ½-i PVC pipe distanser. Förvara magasinen med burar från behandlingsområden väl separerade eller i olika inkubatorer som styr bur brickor.
  4. At this Point, överföra före och efter spray Dödlighetsdata från varje bur till dataformulär 6 h dödlighet räkningen sker: en person som bär engångs nitrilhandskar ska ta sentinel burar av brickor en-av-en för varje bur, ringer ut 1) unika lagerställekod, sedan 2) före antalet och omedelbart efter antalet läsa från buren själv, följt av 3) aktuellt 6 h antal observerade direkt. En andra person bör anteckna dessa data om färdiga former med en rad för varje unik positionskod från rättegången (tabell 1). Upprepa denna process på 12 h och 24 h efter spray, lagra magasinen under stabila förhållanden mellan dödlighet räknas.
  5. När antalet 24 h dödlighet är klar, frysa alla fack sentinel burar att döda alla exemplar, och sedan genomföra slutliga räknas för varje bur att erhålla en korrekt nämnare för beräkning av procent dödlighet. Om ett provexemplar saknas från en bur, titta direkt nedanför det i facket, där det kan ha torkat ut och fallit. Kassera alla sentinel burar, bomullshanddukar och plast skräp väska liners i förseglade soppåsar i normal skräp, och noggrant rengöra alla kylare och brickor med tvål och vatten och lufttorka dem i direkt solljus.
    Obs: Larval fack distanser görs enkelt från lager PVC-rör, med ett snäpp skära i varje ände så de inte rullar av magasinen. Distanser låta stapling av larval brickor att spara utrymme i fordon, inkubatorer eller lab bänkar. För vissa fält områden, kan det inte vara möjligt att återvända till lab inom 6 h. i vilket fall överföra burar från kylare till brickor i fältet med hjälp av ovanstående protokoll och material och stapla dem försiktigt i det luftkonditionerade fordonet. Inspelning dödlighet i varje bur omedelbart efter efter sprayen hålltid, och vid ungefär 6 h, 12 h och 24 h efter spray ger information om knockdown (kortsiktiga) vs. långtidseffekterna av bekämpningsmedlet.

Figure 5
Figur 5: bearbetning sentinel burar efter spray. Två scenarier överföra efter spray burar in staplade magasin under 6 h dödlighet kontrollen: (A) i ett hotellrum nära en avlägsen plats och (B) i en bekväm parkeringsplats som återvände till labbet från en avlägsen plats. Observera PVC distanserna i den infällda bilden i (A), fuktiga handdukar som täcker burar som anges i fack i huvudbilden av (A) och ett exempel på en unik lagerställekod och pre och inringade efter spray dödlighet kommenterade direkt på en sentinel bur i den infällda bilden i (B). Klicka här för att se en större version av denna siffra.

6. bearbetning, analys och kartläggning Data om dödligheten

  1. Överföra alla hand-inspelade Dödlighetsdata från formulären i ett elektroniskt kalkylblad och beräkna 4 nya kolumner för efter spray, 6 h, 12 h och 24 h dödlighet (alla korrigerade för pre-spray dödlighet).
  2. Korrigera alla behandling område dödlighet data för kontrollgruppens mortalitet i 4 ytterligare nya kolumner med hjälp av Abbott korrigering17: beräkna en genomsnittlig kontrollgruppens mortalitet över alla kontroll vaktposter för varje tidsperiod som dödligheten var inspelade (dvs. efter spray, 6 h, 12 h och 24 h; alla korrigerade för pre-spray dödlighet), och använda detta betyder att Abbott-korrigera dödligheten i varje behandling område sentinel bur för varje motsvarande tidsperiod. Tröskeln för acceptabel kontrollgruppens mortalitet kan bestämmas godtyckligt baserat på arter av sentinel mygga används men bör inte överstiga 25%18.
  3. I en geografisk information system karta alla unika sentinel bur platser med GPS-data samlats in i steg 2.1.3 och skapa 4 kolumner för Abbott-korrigerade dödlighet för 4 dödlighet tidsperioder i attributtabellen för dessa platser. Skapa en interpolerade täckning för dödlighet för varje 4 dödlighet tidsperioder över alla unika sentinel platser i behandlingsområdet. Lägga till dessa interpolerade omfattningar på kartan och använda en sträckt färgrampen på en blå till röd spektrum orienterade lågt (blå) till hög (röd).
  4. Förbättra karta över behandlingsområdet med en underliggande satellitbild och lägga till sentinel bur positioner (särskiljande behandling och kontroll sentinels), spraya line, körning skalstapeln, norr pilen, riktning, interpolerade dödlighet färg ramp nyckel, nyckeln till symboler och en detaljerad titel med datum, naturtyp, bekämpningsmedel och spädningsmedel används, utrustning används, och rikta arter. Exportera en kartbild för varje yta med dödlighet i tid.
  5. Lägga till meteorologisk information som en infälld graf och inkludera en separat vindros (polär plot) att Visa rådande vind, vindhastighet och variabilitet under hela spray. Även ge separata meteorologiska data för release höjd vid antenn uttag.
  6. Diagramdata naturliga lokalbefolkningen övervakning som ett index av antalet Honor av varje art som samlas in per fälla per natt. Generera en serie diagram partitionerade av läge (anslutning till behandlingsområdet, inom behandlingsområdet, och släpper kontrollområde) och period (provtas före, under eller efter spray prövningar) och placera dem separat som inläggningar i huvudsakliga GIS karta Visa effekter på naturliga populationer över tid inom, intill, och bort från bekämpningsmedel.

Representative Results

Här är representativa resultat presenterades från två opublicerade studier som inkluderade kärnan i de metoder som beskrivs ovan. I dessa studier sentinel två aspekter av adulticid effekt mot sjukdom vektor insekter undersöktes.

Den första studien (opublicerade data 2010-2012) undersökte huruvida spädningsvätska kan påverka effekten av bekämpningsmedel mot mygg i en hot-torra öken miljö tillämpas med en termisk dimma enhet. Vi har genomfört tre separata applikationer med en synergized permetrin adulticid kan späds ut i antingen olja eller vatten. Varje program utfördes med en Lastbilsmonterade termisk dimma generator med en annan spädningsvätska: antingen vatten, BVA13 mineralolja eller diesel. Sedan ett rutnät av minst 20 sentinel mygga burar placeras på stolpar i ett öppet torra-land område (figur 6) användes och meteorologi spelades in med hjälp av en bärbar väder recorder.

Den andra studien (opublicerade data 2011) undersökt den relativa effekten av en enda bekämpningsmedel formulering tillämpas samtidigt med två typer av sprutor (ULV och termisk dimma) i en varm ekvatoriella miljö mot sandmyggor. Vi använde två intilliggande galler av 25 sentinel sand fluga burar placeras på stolpar i lågt gräs-forb livsmiljöen av varierande densitet på ett stort fält i en het ekvatoriella dal bassäng (figur 7). Meteorologi spelades in med hjälp av en bärbar väder brännare placerad mellan de två nät. En lastbil som ULV enheten och en annan bärs den termiska dimma generatorn och båda initierade sprayer i spray linje samtidigt, varje rörelse från öst till väst med en hastighet lämpligt till etikett-angivna doseringen och med tanke på flödet av den spruta.

I båda fältstudier, efter en 10-minuters håll tid efter spray, samlat vi alla sentinel burar från områden behandling och kontroll, samtidigt inleda processen att efter spray dödlighet. Procent Dödlighetsdata var då kodade, korrigerat för observerade bakgrund kontroll sentinel dödlighet och placeras i en GIS täckning bestående av georefererade punkter motsvarar platserna för sentinel burar i rutnätet behandling område (figur 6 och figur 7). Trots den ideala situationen där ett bekämpningsmedel spray ger en 100% döda hela målområdet, är realistiska tröskelvärdet för godtagbar effekt av ett bekämpningsmedel godtycklig. Förväntningar på effekten kan variera med distans från sprutan (t.ex. ange ett tröskelvärde på 95% dödlighet 50 ft från spray-linjen, med 80% dödlighet på 250 ft).

Resultaten från båda representativt studierna visar naturligt spektrum av positiva till negativa resultat, eftersom färgrampen representerar områden av 0 till 100% dödlighet (se färgramper i figur 6 och figur 7). Alla data om dödligheten i behandlingsområdet är normaliserade av bakgrunden dödligheten i området kontrollgrupp att ett tröskelvärde på 25% kontroll dödlighet18, ovan som skulle har ignorerats på grund av överdriven miljö eller kolonin effekter på dödlighet. Nyttan av metoden elektronisk kartläggning för att visualisera data om dödligheten är uppenbart här: forskaren och (senare) läsaren omedelbart kan förstå den relativa effekten av fokal bekämpningsmedel och spädningsvätskor (figur 6) eller fokala bekämpningsmedlet sprutor (figur 7) mot myggor eller sand flyger, respektive. Det är värdefullt att jämföra figur 6 i underliggande dödlighet data som traditionellt skulle presenteras i tabellform (tabell 2) och kräver mycket mer inre konceptualisering, med proportion ökad potential för felet av forskare och läsare både. Den elektroniska kartan, underlättar om kompletteras med meteorologiska data och en satellit foto bas täckning, också snabb bedömning av potentiella effekter av livsmiljöen på bekämpningsmedel ansökningar. Det bör noteras att inset vindros diagrammet i figur 7 har en vindvinkel som perfekt matchar vinkeln på rumsliga dödlighet i rutnätet west, vilket anger att spray lastbilen bör ha startat vidare österut så att bekämpningsmedel skulle ha en möjlighet att nå alla sentinel burar. Om data om dödligheten anses varit endast i tabellform, kan det vara lätt att missa denna svaghet i experimentell design och tilldela en lägre total effekt till att bekämpningsmedel spridningsutrustning, påverkade av nollvärden dödlighet från områden som inte kontaktats av den bekämpningsmedel.

I vår erfarenhet producerar flesta bekämpningsmedel program i fältet en gradient av dödlighet genom mål området sentinel burar, som automatiskt visar att programmet var giltigt. Dock om noll dödlighet observeras hela behandlingsområdet och händelsen spray är giltig (dvs spray molnet rör sig genom sentinel målområdet observeras), kan det utläsas att bekämpningsmedlet inte är effektivt med den arten i takt tillämpas, i den miljön och med att ansökan utrustning. Detta är naturligtvis, med tanke på att bekämpningsmedel batchen inte har upphört att gälla eller har lagrats olämpligt. Däremot, vissa antenn bekämpningsmedel program särskilt kan producera inga synliga eller påvisbara spray moln påverkar målområdet och noll dödlighet i hela vaktposter kan innebära att sprayen missade målområdet. Det är klokt att förutse detta scenario genom att inrätta en rad extra sentinel burar som hakparenteser inverkan målområdet till vissa avstånd motvind och medvind (t.ex. 50 ft intervall för minst en strängbredd i vardera riktningen) så som en fingervisning om sättning av bekämpningsmedlet kan utläsa om målområdet missas.

Figure 6
Figur 6: representant interpolerade sentinel bur Dödlighetsdata från ett fält-rättegång i hot-torra öknen villkor inriktning myggor. I denna serie av sprayer hölls den termiska dimma bekämpningsmedel spruta, bekämpningsmedel och miljö konstant, varierande bland bekämpningsmedel spädningsvätska till (A) vatten, (B) diesel och (C) BVA 13 mineralolja över tre prövningar. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figure 7
Figur 7: representant interpolerade sentinel bur Dödlighetsdata från ett fält-rättegång i hot-Ekvatorialguinea villkor inriktning sandmyggor. I detta set av två samtidiga spray-program med bekämpningsmedel och miljön hålls konstant, men bekämpningsmedel sprutan var annorlunda mellan de två nät: termisk dimma (west grid) och ultra-låg volym (ULV, east rutnät). Observera att vindriktningen anges i diagrammet vindros perfekt matchar vinkeln på rumsliga dödlighet i rutnätet west, vilket anger att spray lastbilen bör ha startat vidare österut så att bekämpningsmedel skulle ha en möjlighet att nå alla sentinel burar. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

PROJEKT:
EKOLOGISK ZON:
PLATS:
PLATS:
DATUM FÖR ANSÖKAN:
SPRUTUTRUSTNING:
BEKÄMPNINGSMEDEL FORMULERING:
SPÄDNINGSVÄTSKA:
SENTINEL INSEKTSARTER:
LEVNADSSTADIER AV SENTINELS:
DÖDLIGHETEN KONTROLLER
[kopierade direkt från sentinel burar; data observeras i fält] [observeras från sentinel burar lagras i magasin]
Sentinel bur kod Nej. FÖRE DÖDA Nej. DÖD EFTER-SPRAY/HÅLL TIDEN Nej. DÖD 6 tim efter SPRAY Nej. DÖD 12 tim efter SPRAY Nej. DÖD 24 hr efter SPRAY
Behandlingsområdet A1
A2
A3
A4
A5
B1
B2
B3
B4
B5
C1
C2
C3
C4
C5
D1
D2
D3
D4
D5
E1
E2
E3
E4
E5
Kontrollområde Kontroll 1
Kontroll 2
Kontroll 3
Kontroll 4
Kontroll 5
Kontroll 6
Kontroll 7
Kontroll 8
Kontroll 9
Kontroll 10

Tabell 1: prov dödlighet dataformulär. Formuläret har utrymmen för allmän information om fältstudien i övre vänstra, vilket är avgörande för att hantera data från flera fältprojekt. Huvudavsnittet i formuläret har utrymmen för pre- och post spray dödlighet (båda kopieras direkt från sentinel burarna), genom de senare 6 h, 12 h och 24 h kontrollerna. Handskrivna uppgifter på blanketten förs in i ett liknande elektroniska kalkylblad, med extra kolumner att korrigera data om dödligheten för pre-spray döda och korrigera spray område dödlighet för någon miljömässigt-inducerad dödlighet i området.

PROCENT DÖDLIGHET (ABBOTT-KORRIGERAT)
Sentinel bur kod (A) Aqualuer + vatten (B) Aqualuer + Diesel (C) Aqualuer + BVA13
A1 1 0,78 0,54
A2 1 1 0,05
A3 1 0,29 0
A4 1 0,04 0,03
A5 1 0,04 0
B1 1 0,79 0
B2 1 0,82 0
B3 1 0,15 0
B4 1 0,21 0,15
B5 1 0 0
C1 1 0,93 0
C2 1 0,71 0,01
C3 1 0,32 0
C4 1 0,26 0
C5 1 0,46 0
D1 1 0,67 0
D2 0,78 0,24 0,01
D3 0,97 0,5 0
D4 1 0,27 0,03
D5 1 0,33 0
E1 1 0,82 -
E2 1 0,88 -
E3 1 1 -
E4 1 0,79 -
E5 1 0,78 -

Tabell 2: underliggande Dödlighetsdata används för att skapa interpolerade effekt kartan i Figur 6 . Det bör noteras att vissa rumslig information kan fångas i denna tabell. Detta kan exempelvis göras genom att separera rader och kolumner av avstånd från spruta och avstånd längs spray line, respektive. Men skulle tidsmässiga förändringar i dödlighet motsvarar omedelbart efter spray, 4 h efter spray och 12 h efter spray, exempelvis kräva en mer komplicerad tabell eller ytterligare tabeller. Separata tabeller för varje spädningsvätska som använts i prövningarna är likaså nödvändigt för tydlighet om tabellerna är partitionerad vid utrymme och tid.

Discussion

Att kombinera den klassiska sentinel bur strategin med elektronisk kartläggning av interpolerade dödlighet data är en unik och kraftfull metod för att utvärdera bekämpningsmedel i fältet, och det stöder jämförande bekämpningsmedel effektstudier över flera miljöer och olika konfigurationer av bekämpningsmedel och appliceringsteknik. Även om metoden grundläggande sentinel bur inte är ny, är visualisering av sentinel bur dödlighet mönster i ett GIS en befordran som bidrar till djupare analys av mönster av flöde av bekämpningsmedel aerosolsprayer. Interpolering av punkt mätningar av bekämpningsmedel effekt i en färgkodad karta täckning liknar lägga rök utgjutningar till en vindtunnel att visualisera luftflödet runt en bil, och det är en stor förbättring för rapportering rumsliga och tidsmässiga dödlighet data i en serie tabeller.

Vissa delar av bekämpningsmedel sprayer kan ses med blotta ögat, och bekämpningsmedel som droppar från osynliga delar av sprayer kan fångas på glasskivor eller andra medier som gillar sentinel burar, är sedan länge etablerad protokoll. Evaporativ produkter från droppar och droppar själva kan fångas med bomull band och analyseras med en Gaskromatograf/masspektrometer, vilket ger ännu mer information om ödet av ett bekämpningsmedel spray. Dock kan insåg effekten av spray och rumsliga mönster av faktiska bekämpningsmedel-inducerad dödlighet i målområdet (som kan omfatta både droplet och evaporativ produktens komponenter) bara slutgiltigt mätas av sentinel insekter.

Dessutom kan komponenten temporal effekt endast mätas slutgiltigt genom en rad dödlighet iakttagelser i sentinel insekter som fångar kvantifierade index snabba knockdown kontra långsiktiga sjuklighet och dödlighet på målet arter. Igen, en serie interpolerade färgkodade kartor kan användas för att tydligt visualisera utvecklingen av efter spray dödlighet över tid, med en explicit rumsliga komponent, på ett sätt som en serie tabeller inte är möjlighet att kommunicera till en läsare. Serien av kartor kan animeras i en slinga för att återge förloppet för spray och dess effekter på sentinel insekter, ytterligare stärka förståelsen av effekten inte bara för en enda studie, men i jämförelser mellan olika bekämpningsmedel, tekniker, ansökan utrustning, målinsektspopulationen och ekologiska zoner.

För högsta kvalitet Dödlighetsdata i denna metod, bör vara mycket försiktig i hela start-till-avslut hantering och observationer av sentinel insekter. Exponeringstid och villkoren för sentinel insekter i miljön över både behandling och kontroll områden innan bekämpningsmedel sprayen bör vara så lika som praktiska. Denna exponering bör omfatta en period av acklimatisering till omgivande förhållanden och en enhetlig håll tid efter spray för både behandling och kontroll insekter. Observationer av dödlighet innan sprayen, efter håll tiden (dvs. under hämtning av burar), och för angivna perioder efter sprayen bör noga spåras på dataformulär. Försiktighet bör också iakttas att hämta alla vaktposterna från fältet innan avresa till labbet. Kontroll och behandling sentinel burar bör separeras fysiskt i hela protokollet. Tillförlitliga observationer av bakgrunden baslinjen dödlighet från kontroll burar alls designerat tidsperioder är kritiska till lämplig korrigering av observerade dödlighet i zonen behandling. Exakt, exakt, jämförbara och meningsfull effekt kartor kan endast vinnas från hög dödlighet data input till geografiska informationssystem.

Sentinel insekt metoden är naturligt flexibel för att vara relevant i olika scenarier - någonstans en liten bur kan placeras, dödlighet kan samlas. Exempelvis har vi genomfört bekämpningsmedel prövningar med sentinel burar placeras i och runt simulerade stads- och landsbygdsområden byggnader10 och amerikanska militära tält (opublicerade data 2017-2018), förutom flera scenarier av öknen, tempererade och tropiska vegetationen19,20,21,22 [inklusive hissa burar upp till 60 ft upp tall kapellet för att mäta vertikala mortaliteten efter en stor antenn ansökan (opublicerade data 2011-2017)]. Om marken är alltför svårt att placera sentinel bur stolpar eller är det att föredra att placera dem på betong eller asfalt områden, enkel står eller betongblock kan konstrueras för att stödja polackerna. För scenarier att undersöka sprejade flytande larvicides, kan protokollet ändras för att placera tomma plast disponibel 1 qt koppar för att fånga larvicide över sentinel platser. Dessa koppar kan senare fyllas med vatten och mygga larver att mäta effekten av programmet7,23,24,25. Använd golvplattor med den klibbiga sidan upp till hålla koppar på plats i vinden och hålla lock i närheten att snabbt cap och samla följande efter sprayen hålltid. Alternativt kan koppar kvar till väder naturligt eller lämnas öppen i en kontrollerad miljö att utreda livslängden av en kvarstående larvicide behandling.

För att undersöka droplet densitet och droplet spektra i hela området, slide spinnare kan placeras nära sentinel insekt positioner - men iaktta försiktighet som virveln från spinning glasen inte påverkar flödet av bekämpningsmedel spray till den Sentinel insekter. Liknande till mappning dödlighet, ytterligare kolumner i attributtabellen för det sentinel platser kan läggas för droplet och färga parametrar att härleda interpolerade omfattningar. Observera att lägga droplet samling aspekter kommer att kräva en ökning av antalet anställda i fältet med dedikerade team till exempel att noggrant samla bilder och bistå operatorn spray med dye tillsatser. Med ytterligare material och team av personal, dessa metoder kan slås samman för att genomföra samtidiga prövningar med larver och vuxna vaktposter, flera program lägen (antenn, marken, bärbar), eller bekämpningsmedel side-by-side (se representativa resultat).

Även om det huvudsakliga protokollet skrevs för myggor, har vi framgångsrikt genomfört fältförsök med sand flugor och snusk-avel flugor som vaktposter med endast mindre ändringar av sentinel burar och övergripande protokoll. Exempelvis är det inte praktiskt att sex vuxna sandmyggor eller filth avel flyger så att blandade kön batchar används i sentinel burar, eftersom detta kommer att minska belastningen på kolonin eftersom färre prover behövs än när du arbetar med myggor. För sandflugor, måste en mycket finmaskig användas för sentinel burar; Dessutom är sandmyggor inte bedövat men istället läggas med aspirators direkt i färdigmonterad burar genom gummi slits limmas över ett hål som är skuren i sidan av cylindern.

Figure 8
Figur 8: ytterligare scenarier visar flexibiliteten i systemet sentinel. Sentinel protokollet för utredning av bekämpningsmedel effekt i fältet är mycket flexibel, som visas i sentinel burar hissade intervaller upp till 60 ft genom pine trädkronorna (A) och en närliggande öppet område (B) att undersöka antenn ULV bekämpningsmedel spray förmåga att penetrera trädkronorna. Sentinel systemet kan enkelt justeras för att undersöka larvicide sprayer inriktning omogna mygga stadier använder engångs plastmuggar för att fånga droppar (C) inomhus och (D) utomhus i en simulerad stadsområde. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Metoden för mappning av effekt är naturligt flexibel eftersom den är baserad på interpolation vilket är en standard i de flesta GIS program26. I allmänhet använder interpolation kända data på börvärden för att uppskatta data på närliggande försammanställda punkter. I området i närheten finns det flera typer av interpolation tekniker27 som kan väljas utifrån geografisk spridning och täthet av punkt Dödlighetsdata. Vi har använt inverse avstånd viktning (IDW), som tilldelar kända data högre statistisk vikt från punkter närmare till de okända punkter som uppskattas. Felsökning för fältet del av metoden är centrerad på kontroll sentinel dödlighet (dvs. om dödligheten är > 25% i kontroller, och det är vissheten om att programmet inte påverkar området, något i miljön än bekämpningsmedlet orsakar dödlighet, som kommer att blanda ihop analys; sedan måste rättegången vara upprepad eller flyttade till en annan plats). De vanligaste sårbarheterna i vydelen kartläggning av metoden är produktionen av kvalitet datatabeller i GIS, så är det viktigt att noggrant klistra in data så att rätt data justeras med rätt punkter (läsa frame) och korrekt etikett kolumner för varje dödligheten tid period, bekämpningsmedel, utrustning m.m

Metoden sentinel insekt är inte avsedd att vara ett absolut mått på effekt. Snarare ger metoden förmågan att jämföra relativa effekten av ett bekämpningsmedel (under en given miljö, spridningsutrustning, spädningsvätska, target insekt och teknik) till det samma bekämpningsmedlet under olika förhållanden, eller att jämföra olika bekämpningsmedel på samma villkor. Metoden inkluderar inte bekämpningsmedel droplet eller aktiva ingrediensen fånga, men apparaturar för att utreda dessa aspekter kan enkelt placeras i rutnätet i anslutning till sentinel burar. Sentinel bur metoden mäter inte effekten av bekämpningsmedel sprayer mot smittbärande insekter i flykten, vilket är möjligt men inte praktiskt28. En livlig tvist om typ av mesh på sentinel burar effekter mätningar av bekämpningsmedel spraya effekt14,29,30,31. Detta är dock inte enormt relevant till vårt mål att undersöka relativa effekten av en formulering över miljöer eller flera formuleringar inom en miljö (som kan genomföras med en standard bur med en standard mesh-typ).

Exempelvis en senaste studie jämfördes sentinel bur dödlighet resulterar över tre liknande antenn bekämpningsmedel ansökan experiment åtskilda av årtionden, var och en med olika sentinel bur metoder, alla med jämförbara resultat10. Likaså finns kontrovers över om du vill överföra sentinel insekter till ”ren” burar (dvs burar som inte har besprutats). Igen, data från sentinel insekt dödlighet övervägas relativa och inte absoluta och berörs inte med ytterligare dödlighet som följd av sentinel insekter att kontakta bekämpningsmedel som ansluter sig till buren eller mesh. I själva verket i naturliga miljöer, kommer bekämpningsmedel sprayer också följa naturliga ytor som målinsektspopulationen kan kontakta. Vi har tidigare funnit att dödligheten inducerad från hantering av myggor, att inkludera CO2- eller kall-baserade anaesthetization, får överstiga dödlighet från att kontakta ett bekämpningsmedel som kunde ha varit närvarande på burar (opublicerade data 2008). En annan begränsning är att relevans och tillämplighet sentinel bur dödlighet resultat i de lokala naturliga populationerna av målet insekten fortfarande inte är helt känd; dock är närmare genealogiskt den koloni uppfödda sentinel insekterna till de lokala arter, desto starkare effekt kartorna tillämplighet är att lokala populationer.

I framtida varianter av denna metod, det vore fördelaktigt att inkludera ändringar för att rymma bekämpningsmedel program med obemannade aerial system (UAS). Strömutvecklingar med UAS användning i operativa vector kontroll innehåller bekämpningsmedel program (i synnerhet larvicide formuleringar riktade på omogna mygga habitat) över och genom mycket otillgängliga platser. För att få relevant information från sentinel prövningar, skulle sentinel insekt stationer behöva placeras i hela otillgängliga platser i största utsträckning möjligt. Ett exempel av relevant information testar förmågan att UAS effektivt når ett visst område med larvicide, med den endast line-of-sight lotsning av en leverantör som inte kan direkt Observera målområdet. Detta scenario kan kräva utveckling av andra UAS att distribuera och hämta sentinel burar eller larvicide samling koppar och andra att registrera meteorologi i dessa otillgängliga målområden. Dödlighetsdata från ett sådant scenario kan analyseras i GIS som med etablerade scenarier, med extra karta funktioner såsom effekterna av naturliga hinder, mikrohabitat och mikrometeorologi som kan skilja sig från sådana effekter under mer standard applikationer med lastbil, flygplan eller bärbar sprutor. Avancerade funktioner GIS såsom visualisering av 3-dimensionell interpolationer dödlighet från förbättrad sentinel placering i vertikala och horisontella rutnät finns också möjligheter för både standard och nya ansökan teknik.

Disclosures

Författarna har inga intressekonflikter avslöja.

Acknowledgments

Vi vill tacka de vetenskapsmän och tekniker i Coachella Valley mygga och Vector kontroll District och den amerikanska armén medicinsk forskning Direktorat-Kenya för expert produktion av kolonin insekt exemplar och samarbete på Fältstudierna producerar de opublicerade data som presenteras i de representativa resultat. Denna forskning stöds av programmet U.S. avdelning av jordbruk (USDA) - Agricultural Research Service och US Department of Defense (DoD) distribuerad kriget - Fighter skydd (DWFP). Omnämnande av varunamn eller kommersiella produkter i denna publikation är endast i syfte att tillhandahålla specifik information och innebär inte rekommendation eller bekräftelse av USDA, DoD eller DWFP. USDA är en lika möjligheter leverantör och arbetsgivare.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Bioassay racks:
plastic tube lid Visipak 192224
1.25-in PVC coupler SCH-40 Lowes PVC 00100 0800
1/4-in OD brass rod K&S Engineering 1165
Name Company Catalog Number Comments
Bioassays:
FDA silicone o-rings S-500-70 Alltek seal and packing PA-2127-12
fine screening Walmart 40310-0000-063 white T-310
cotton balls Fisher Brand Large cotton balls (non-sterile)
plastic tubes Visipak 775674
regulator Norgren R83-200-RNEA
reguilator gauge Wika Instrument Corp 4315031
CO2 canister 20 lb capacity
CO2 chamber Mainstays Modified tupperware container (16 cup)
1/4-in tygon tubing
maglite aspirator and tubes Bioquip 2809D D-cell maglite aspirator
modified PVC pipe for o-rings Lowes PVC 07112 0600 SCH-40 pipe modified by cutting tool on inner surface to accommodate bioassay tube
Pupal separator John W. Hock Co. 5412
Name Company Catalog Number Comments
Field sentinel cages:
1/2 pt cardboard can body Neptune 295
1/2 pt cardboard cup lid Neptune 295A
coarse screening Walmart 41721-0540-063 white T-1721
Velcro cable ties 8-in x 1/2-in Velcro Brand VEL91140
rubber band National Institutes for the Blind 7510-01-058-9974
cotton balls Fisher Brand Large cotton balls (non-sterile)
PVC spacers Lowes PVC 04010 0600 Modified by cutting into 18-in length pieces and cutting half off of the end (lengthwise)
Tray totes Blue Ridge Thermalforming 400-3N-WHT-ABS
Name Company Catalog Number Comments
Field bioassay set-up equipment:
60-in tread-in post Jeffers.com T8T4
1 ft3 cardboard boxes USP S-18344
Deli cups WNA Inc. APCOMBO16
18-in x 18-in linolium tiles Lowes LSS4307BPS
Name Company Catalog Number Comments
Sentinel cage transport:
48 qt Island Breeze cooler Igloo
16-in x 19-in. terry towels Ability One 7920-01-454-1150
garbage bags 13 gal (kitchen size)

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Britch, S. C., et al. A mobile App for military operational entomology pesticide applications. Journal of the American Mosquito Control Association. 30, (3), 234-238 (2014).
  2. Britch, S. C., et al. Evaluation of barrier treatments on native vegetation in a southern California desert habitat. Journal of the American Mosquito Control Association. 25, (2), 184-193 (2009).
  3. Britch, S. C., et al. Residual mosquito barrier treatments on U.S. military camouflage netting in a southern California desert environment. Military Medicine. 175, (8), 599-606 (2010).
  4. Britch, S. C., et al. Longevity and efficacy of bifenthrin treatment on desert-pattern US military camouflage netting against mosquitoes in a hot-arid environment. Journal of the American Mosquito Control Association. 27, (3), 272-279 (2011).
  5. Rogers, A. J., Beidler, E. J., Rathburn, C. J. A cage test for evaluating mosquito adulticides under field conditions. Mosquito News. 17, (3), 194-198 (1957).
  6. Rathburn, C. B. Jr, Rogers, A. J., Boike, A. H. Jr, Lee, R. M. Evaluation of the ultra-low volume aerial spray technique by use of caged adult mosquitoes. Mosquito News. 29, 376-381 (1969).
  7. Aldridge, R. L., Golden, F. V., Britch, S. C., Blersch, J., Linthicum, K. J. Truck mounted Natular 2EC (spinosad) ULV residual treatment in a simulated urban environment to control Aedes aegypti and Aedes albopictus in North Florida. Journal of the American Mosquito Control Association. 34, (1), 53-57 (2018).
  8. Chaskopoulou, A., Latham, M. D., Pereira, R. M., Koehler, P. G. Droplet sampling of an oil-based and two water-based antievaporant ultra-low volume insecticide formulations using Teflon- and magnesium oxide-coated slides. Journal of the American Mosquito Control Association. 29, (2), 173-176 (2013).
  9. Bonds, J. A. S., Greer, M. J., Fritz, B. K., Hoffmann, W. C. Aerosol sampling: comparison of two rotating impactors for field droplet sizing and volumetric measurements. Journal of the American Mosquito Control Association. 25, (4), 474-479 (2009).
  10. Britch, S. C., et al. Aerial ULV control of Aedes aegypti with naled (Dibrom) inside simulated rural village and urban cryptic habitats. PLoS One. 13, (1), e0191555 (2018).
  11. Knapp, F. W., Roberts, W. W. Low volume aerial application of technical malathion for adult mosquito control. Mosquito News. 25, 46-47 (1965).
  12. Lofgren, C. S., Anthony, D. W., Mount, G. A. Size of aerosol droplets impinging on mosquitoes as determined with a scanning electron microscope. Journal of Economic Entomology. 66, (5), 1085-1088 (1973).
  13. Haile, D. G., Mount, G. A., Pierce, N. W. Effect of droplet size of malathion aerosols on kill of caged adult mosquitos. Mosquito News. 42, 576-583 (1982).
  14. Hoffmann, W. C., Fritz, B. K., Farooq, M., Cooperband, M. F. Effects of wind speed on aerosol spray penetration in adult mosquito bioassay cages. Journal of the American Mosquito Control Association. 24, (3), 419-426 (2008).
  15. Aldridge, R. L., Wynn, W. W., Britch, S. C., Linthicum, K. J. Aspirator gun for high-throughput mosquito bioassays. Journal of the American Mosquito Control Association. 28, (1), 65-68 (2012).
  16. Aldridge, R. L., et al. High-throughput mosquito and fly bioassay system for natural and artificial substrates treated with residual insecticides. Journal of the American Mosquito Control Association. 29, (1), 84-87 (2013).
  17. Abbott, W. S. A method of computing the effectiveness of an insecticide. Journal of Economic Entomology. 18, 265-267 (1925).
  18. Healy, M. J. R. A table of Abbott's correction for natural mortality. The Annals of Applied Biology. 39, (2), 211-212 (1952).
  19. Britch, S. C., et al. Evaluation of ULV and thermal fog mosquito control applications in temperate and desert environments. Journal of the American Mosquito Control Association. 26, (2), 183-197 (2010).
  20. Britch, S. C., et al. Evaluation of ULV applications against Old World sand fly (Diptera: Psychodidae) species in equatorial Kenya. Journal of Medical Entomology. 48, (6), 1145-1159 (2011).
  21. Dunford, J. C., et al. SR450 and Superhawk XP applications of Bacillus thuringiensis israelensis against Culex quinquefasciatus. Journal of the American Mosquito Control Association. 30, (3), 191-198 (2014).
  22. Haagsma, K. A., Breidenbaugh, M. S., Linthicum, K. J., Aldridge, R. L., Britch, S. C. Development of Air Force aerial spray night operations: high altitude swath characterizations. U.S. Army Medical Department Journal. 47-59 (2015).
  23. Henke, J. A. Fighting Aedes aegypti in the desert. Proceedings and Papers of the Eighty-Fifth Annual Conference of the Mosquito and Vector Control Association of California. 85, 24-25 (2017).
  24. Britch, S. C., et al. Ultra-low volume application of Natular 2EC (spinosad) larvicide as a residual in a tropical environment against Aedes and Anopheles species. Journal of the American Mosquito Control Association. 34, (1), 58-62 (2018).
  25. Golden, F. V., et al. Ultra-low volume application of Natular 2EC (spinosad) as a residual in a hot-arid environment against Aedes aegypti. Journal of the American Mosquito Control Association. 34, (1), 63-66 (2018).
  26. Hay, S. I., Lennon, J. J. Deriving meteorological variables across Africa for the study and control of vector-borne disease: a comparison of remote sensing and spatial interpolation of climate. Tropical Medicine & International Health. 4, 58-71 (1999).
  27. Tunalioğlu, N. Quality test of interpolation methods on steepness regions for the use in surface modelling. Technical Gazette (Tehnički vjesnik). 19, (3), 501-507 (2012).
  28. Rathburn, C. B., Rogers, A. J. Field tests of mists and dusts against caged adults of Aedes taeniorhynchus (Wied.). Report of the Thirtieth Annual Meeting, Florida Anti-Mosquito Association. 38-43 (1959).
  29. Breeland, S. G. Effect of test cage materials on ULV malathion evaluations. Mosquito News. 30, 338-342 (1970).
  30. Boobar, L. R., Dobson, S. E., Perich, M. J., Darby, W. M., Nelson, J. H. Effects of screen materials on droplet size frequency-distribution of aerosols entering sentinel mosquito exposure tubes. Medical and Veterinary Entomology. 2, 379-384 (1988).
  31. Bunner, B. L., Posa, F. G., Dobson, S. E., Broski, F. H., Boobar, L. R. Aerosol penetration relative to sentinel cage configuration and orientation. Journal of the American Mosquito Control Association. 5, (4), 547-551 (1989).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics