Wirksamkeit von Pestiziden gegen Krankheit Vektor Mücken im Bereich Visualisierung

Environment
 

Summary

Die Wirksamkeit der Volksgesundheit Pestizide targeting Ärgernis und Krankheit-Vektor Insekten ist nicht einheitlich in verschiedenen ökologischen Zonen. Hier präsentieren wir ein System von Techniken, die mit Gefangenen Insekten als Wächter für Pestizid Wirksamkeit abzuleiten elektronische Karten der Standardauswertung von Pestiziden über mehrere Umgebungen hinweg zu unterstützen.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Britch, S. C., Linthicum, K. J., Aldridge, R. L., Golden, F. V., Walker, T. W. Visualizing Efficacy of Pesticides Against Disease Vector Mosquitoes in the Field. J. Vis. Exp. (145), e58440, doi:10.3791/58440 (2019).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Wirksamkeit von Volksgesundheit Pestiziden targeting Ärgernis und Krankheit-Vektor Insekten wie Mücken, Sandfliegen und Dreck-Zucht fliegen ist über ökologischen Zonen nicht einheitlich. Um die Gesundheit von Mensch und Veterinär am besten vor diesen Insekten zu schützen, müssen die ökologischen Grenzen der Pestizide untersucht werden, um die effektive Nutzung der am besten geeigneten Pestizid-Formulierungen und Techniken zu informieren. Haben wir ein Forschungsprogramm, Kombinationen von Pestiziden, Pestizidausbringungsgeräte und Anwendungstechniken in heiß-trockenen Wüste, feucht-heißen tropischen, Warm und kühl gemäßigt zu bewerten, und urbane Orten abzuleiten Pestizid verwenden Richtlinien bestimmten Ziel Insekt und Umgebung. Zu diesem Zweck entwickelten wir ein System Protokolle, effiziente, kostengünstige, tragbare und standardisierte Bewertung der unterschiedlichsten Pestizide und Ausrüstung über mehrere Umgebungen hinweg zu unterstützen. Das Herzstück dieser Protokolle ist die Verwendung eines Arrays von kleinen Käfigen mit Kolonie aufgezogen Sentinel (Erwachsene und Jungvögel) Moskitos und Sandfliegen (Erwachsene), strategisch angeordnet in natürlichen Lebensräumen und Sprühen von Pestiziden ausgesetzt. Räumliche und zeitliche Muster des Pestizid-Wirksamkeit sind aus Prozent Sterblichkeit in Sentinel Käfigen dann zugeordnet und visualisiert in einem geographischen Informationssystem. Karten von Sentinel Mortalitätsdaten können statistisch, relative Wirksamkeit eines Pestizids über mehrere Umgebungen hinweg zu bewerten, oder um mehrere Pestizide in einer einzigen Umgebung zu studieren verglichen werden. Protokolle können eine Vielzahl von Szenarien, darunter z. B. die vertikale Ausrichtung des Wächter im Baldachin Lebensräume oder simultane Prüfung von Boden und Luft Anwendungsmethoden angepasst werden.

Introduction

Wirksamkeit von Volksgesundheit Pestiziden targeting Ärgernis und Krankheit-Vektor Insekten wie Mücken, Sandfliegen und Dreck-Zucht fliegen ist über Wüste, tropisch, gemäßigt, oder urban Ökozonen1nicht einheitlich. Bestimmte wichtigen Arten in diesen drei Gruppen von Insekten sind wichtige Vektoren Parasiten, filarial Würmer, Viren und Bakterien, die bedeutende Krankheiten bei Menschen, Haustiere und Tiere weltweit. Um die Gesundheit von Mensch und Veterinär am besten zu schützen, müssen die ökologischen Grenzen der Pestizide untersucht werden, um effektive Nutzung der am besten geeigneten Pestizid-Formulierungen und Techniken zu informieren. Volksgesundheit Pestizid-Hersteller sind nicht verpflichtet, von der US Environmental Protection Agency, die erwartete Wirksamkeit einer Formulierung in den unterschiedlichsten Umgebungen oder Zielinsekten angeben, aber diese Pestizide dienen der Mücke und Vektor-Steuerung über mehrere ökologische Zonen in den USA und der ganzen Welt.

Wir haben ein Forschungsprogramm, zahlreiche Kombinationen von Pestiziden und Pestizidausbringungsgeräte und Techniken in heiß-trockenen Wüste, feucht-heißen tropischen, Warm und kühl gemäßigt und städtischen Lagen, zu bewerten, um Einsatz von Pestiziden ableiten entwickelt. Leitlinien auf dem Ziel Insekt und Umwelt1. In diesem Programm bewerten wir Pestizide, dass Ziel adulten Stadien von Moskitos und Sandfliegen (Adulticides) und unreifen Stadien der Mücken (Larviziden) mit Pestizidausbringungsgeräte, die Hand ist, LKW oder Flugzeug montiert durchgeführt, in installiert festen Standorten. Vier große Outdoor-Pestizid Anwendungstechniken sind ausgewertet: (1) Ultra-low-Volume (ULV) oder thermische Nebel Aerosolsprays Raum der Adulticides für schnelle Knockdown von Zielinsekten, (2) eine Variante der ersten Technik in die flüssige Larviziden konzipiert gelten mit ULV oder thermische Nebel für kurz- oder langfristige Unterdrückung der unreifen Stadien der Zielinsekten, (3) zeitlich beschlagen Sprays von festen Standorten entwickelt, um abzuwehren oder zu töten, und (4) geringes Volumen (LV) Kaltnebel Sprays residual Pestizide gelten soll lang anhaltende giftig oder abweisend Beschichtungen auf einer Vielzahl von natürlichen oder künstlichen Substraten. Hier sind die ausführliche Methoden für die Durchführung von Techniken (1) und (2) genannten. Methoden für (3) in separaten Studien vorgestellt werden, und Techniken (4) werden in Kürze in früheren Publikationen2,3,4beschrieben.

Um dieses komplexe Forschungsprogramm zu erreichen, entwarfen wir ein System von Protokollen, effiziente, kostengünstige, tragbare und wiederholbare/standardisierte Bewertung von Aerosol Adultizid und Larvicide Techniken mit verschiedenen Pestiziden/Ausrüstung zu unterstützen Kombinationen über mehrere Umgebungen hinweg. Das Herzstück dieser Protokolle ist die Verwendung der Kolonie aufgezogen Sentinel (Erwachsene und Jungvögel) Moskitos und Sandfliegen (Erwachsene), räumliche und zeitliche Muster des Pestizids Wirksamkeit zeigen. Bei Adultizid Anwendungen Sentinel erwachsene Mücken oder Sandfliegen in kleinen Einweg-Einweg-Käfigen in strukturierten Arrays durch das Zielgebiet und einer unbehandelten Fläche verteilt befinden. Larvicide Anwendungen sind kleine Einweg-Einwegbecher ähnlich verteilt um gespritzte Larvicide Tröpfchen für spätere Einführung von Wasser und Sentinel Kolonie aufgezogen unreifen Mücken zu sammeln. Als nächstes wir aufzeichnen Prozent Sterblichkeit in Sentinel Käfigen oder Prozent Erwachsene Entwicklung von Sentinel Tassen, in festgelegten Intervallen nach dem Sprühen und verwenden diese Daten, um elektronische Karten der räumlichen und zeitlichen Wirksamkeit in ein geografisches Informationssystem (GIS) zu produzieren, die möglicherweise quantitativ im Vergleich zwischen und unter den Umgebungen.

Mit Sentinel Käfige der Kolonie aufgezogen Insekten auszuwertende Pestizid Wirksamkeit auf dem Gebiet ist eine seit langem etablierte Praxis5,6, und mit leeren Kunststoff Sentinel Cups für das Sammeln von gespritzten Larvicide zeichnet sich in der Literatur7 . Unsere elektronische Abbildung der Wirksamkeit, räumlichen und zeitlichen Muster der Sterblichkeit zu visualisieren ist eine Innovation, die Untersuchung der Sterblichkeit anders dargestellt in flachen Tabellenformaten verbessert. Auch der Hochdurchsatz-Käfig laden und dem modularen Käfig Bereitstellungssystem anpassbar an verschiedene Szenarien, die hier beschrieben sind einzigartig in unserem Programm. Bewertung von Pestizid-Anwendungen im Bereich anders andere Forschungsprogramme. Aktuelle populäre Methoden gehören erfassen und analysieren Farbstoff-markierten Pestizid-Tröpfchen von Sprays im Feld auf spinning Glas Folien8 oder Acryl Stangen9, die eine traditionsreiche Herstellung von Prozessdaten, die elektronisch abgebildet werden kann und visualisiert.

Ein Nachteil ist die Tropfengröße und Dichtemessungen von Sammlung Medien sind nur geschätzt, von einen kleinen Anteil an der Gesamtkollektion Oberfläche mit softwaregestützte Mikroskopie der Gesichtsfelder, die leider sehr subjektiv sind. Auch Karten von Tröpfchenverteilung und Dichte nicht voll Pestizid Wirksamkeit, illustrieren, weil die Annahme ist, dass die Anwesenheit von ein Schwellenwert Anzahl der Tröpfchen einer bestimmten Größe automatisch Ziel Insekt Sterblichkeit zeigt. Diese Annahme berücksichtigt nicht für die Mortalität von evaporative Produkte von Tröpfchen durch das Zielgebiet, die kann auch induzieren Mortalität10, oder eine geringere Anzahl von Tröpfchen oder andere Tröpfchen, die Größen töten können einige Einzelpersonen Anteil. Die ursprüngliche Begründung10,11,12 ist, dass ein Aerosol-Pestizid kleine Tröpfchen auf aktiv fliegenden Zielinsekten eingreifen soll. Unsere Beobachtungen im Feld, einschließlich Kürzungen in natürlichen Populationen nach dem Sprühen wenn Zielinsekten nicht aktiv fliegen, deuten jedoch darauf hin, dass Tröpfchen oder evaporative Produkte aus Tröpfchen Ziele erreichen, die nicht fliegen, sondern eher versteckt sind im ruhenden Refugien (unveröffentlichte Daten 2011). Auch haben wir in der Analyse einer Feld-Spray-Anwendung (über gleichzeitige Tröpfchen Capture, Pestizid-Wirkstoff-Aufnahme und Sentinel Käfige) beobachtet, sind Karten von Tröpfchenverteilung, Wirkstoff-Verteilung und Mortalität nicht übereinstimmende ( unveröffentlichte Daten 2010).

Ein weiterer beliebter Ansatz zur Bewertung der Wirksamkeit von Pestiziden ist Sentinel Käfige in einem Raster in ein flaches gemähten homogene Feld mit keine Hindernisse der Pestizid-Plume und unter in der Nähe von idealen meteorologischen Bedingungen (z. B. konsequente abgegrenzt bereitstellen. Winde < 10 km/h und Wind Richtung senkrecht zu der Spritzleitung). Noch, auf andere zugehen dies durch die Messung der Wirksamkeit mit Sentinels in Windkanälen14gelegt. Diese Ansätze bieten eine Perspektive auf Pestizid-Wirksamkeit, aber sind weniger wahrscheinlich zu realisieren operative Wirksamkeit unter nicht idealen Bedingungen (heterogenen Lebensräume, die Hindernisse Pestizid und Variable, wenn nicht unter suboptimalen enthalten meteorologischen Bedingungen). Suche nach Beweise für absolute Wirksamkeit ist nicht realistisch. Betriebsbedingungen eignen sich nur selten, und Wahl Formulierungen basierend auf Tests im Windkanal oder direkte Anwendung in veränderter Parks kann irreführend sein.

In unserer Forschung verwenden wir natürliche Wiese und der gegebenen meteorologischen Bedingungen (aber nicht im Regen oder extremen Winden, die außerhalb der Grenzen eines operationellen Programms sind). Dies dürfte mehr informativ für operative Vektor-Kontrolle beim angemessenen Wirksamkeit in einer Pestizid-Formulierung trotz schlechten Umweltbedingungen, heterogene Lebensraum und Hindernisse mit Pestizid-Fluss zu beobachten. Wann immer möglich, es empfiehlt sich, Sentinel Insekt Mortalitätsdaten mit vor - und after - Überwachung der natürlichen Insekten Zielgruppen im Bereich Behandlung und Kontrolle zu ergänzen, wie eine Brücke zwischen Exposition gesteuert und Exposition gegenüber realisiert den fokale Pestizid. Überwachung der natürlichen Populationen ist jedoch nicht ausreichend, um festzustellen, ob Pestizideinsatz Sterblichkeit in einer Zielbevölkerung oder ob Zielinsekten tatsächlich bewegen erzeugt nach Erkennung von entgegenkommenden Pestizid Aerosole vom Zielgebiet.

Unabhängig von den vorbehalten, eine Auswertung der Pestizid-Sprays im Bereich behält elektronische Abbildung der Sterblichkeitsdaten in ein GIS (im Gegensatz zu flachen Darstellung der Sterblichkeitsdaten in Tabellen) die quantitativen Attributen, die in der Lage, strenge Vergleich über Studien und bietet auch eine Möglichkeit für schnelle, visuelle Bewertung. Mit Daten im GIS erfasst Forscher legen Sie Grenzwerte für Pestizide Wirksamkeit und die relative Fähigkeit der fokalen Pestizid über mehrere Umgebungen hinweg visualisieren können, oder sie können Funktionen von mehreren Pestiziden innerhalb einer einzigen Umgebung vergleichen über eine Vielzahl von Anwendung-Ausrüstung und Techniken.

Protocol

Hinweis: Dieses Protokoll ist speziell für Feldversuche für Erwachsene Mücken geschrieben. Informationen über Änderungen für unreife Mücken, andere Erwachsene Sentinel Insektenarten und einzigartige Szenarien ist in die Diskussion einbezogen.

(1) sentinel Insekt Aufzucht und Sentinel Käfig Vorbereitungen

  1. Bau von Erwachsenen Sentinel-Käfige
    1. Bestimmen Sie die Gesamtzahl der Sentinel Käfige benötigt für den Feldversuch durch die Aufnahme, Behandlung und Kontrolle sowie die Anzahl der Wiederholungen geplant, dann fügen Sie 5 % zum Ausgleich der Verluste aufgrund von Beschädigungen oder ungewöhnliche Sterblichkeit (siehe Punkt 2.1). Vorbereiten von 5 x 5 in Tüll Netz Quadrate (2 pro Sentinel Käfig) mit einem rollenden Festplatte Cutter, geradlinig und Frühstücksbrettchen mit loser Schüttung Tüll Birdie. Shop der Tüll mesh Quadrate in Losgrößen von 50 in 1 qt wiederverschließbaren Plastiktüten.
    2. Vorbereiten der Sentinel Käfige indem man sorgfältig die flachen Karton Festplatten aus den Böden der neuen ½ pt Pappe Eisbecher unbefristete 2 x 3 Zylinder zu erstellen. Entfernen Sie für jede Tasse die Pappe Datenträger aus 2 Deckel offene Einfassungen (1 für die beiden Enden des Zylinders) zu erstellen. Sicher ein Tüll Netz Quadrat an einem Ende des Zylinders durch unter der Lünette abfangen, wie die Lünette fest am Zylinder angebracht wird.
    3. Befestigen Sie für jede Sentinel-Käfig einen Haken und Ösen Kabelbinder an einem Gummiband und sichern Sie das Gummiband um die Lünette, die vorhanden ist. Die Sentinel-Käfige in Losgrößen von 50, mit einer separaten Tasche mit 50 Einfassungen und einen Beutel mit 50 Tüll Netz Quadrate Tasche.
      Hinweis: Tüll Maschenweite der Mindestabstand Größe enthalten bestimmte Sentinel-Arten in den Käfig platziert werden sollte. Beispielsweise erfordert die Aedes Aegypti Moskitos Netz kleiner als Culex Quinquefasciatus Mücken.

Figure 1
Abbildung 1: Sentinel Käfig Vorbereitung. (A) hier gezeigt werden, dass zwei Personen laden sentinel Käfige mit narkotisierter Moskitos auf einem großen weißen Blatt Papier zu verbreiten. Die Stapel von Tüll mesh Quadrate im Vordergrund bereit für die Platzierung auf die wartenden offen Sentinel ist Käfige hinzuweisen. (B) gezeigt werden mehrere geladene Sentinel Käfige, warten auf Vermittlung von 10 % Saccharose Wattebällchen und Neuausrichtung des Gummibandes. (C) gezeigt werden Sentinel Käfige in einem Kühler, bereit für den Einsatz im Feld. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

  1. Terminplanung und Aufzucht Kolonie Insekten
    1. Wählen Sie für Sentinel Insekten eine Spezies, die eignet sich besonders für die Umwelt, Saison und medizinische Bedrohung an der Stelle, wo der Prozess stattfinden wird. Betrachten Sie die Kolonie Fähigkeiten und Entwicklungszeit bis zum Erwachsenen, dass Arten; zum Beispiel prüfen Sie, ob die Kolonie in der Lage, die Anzahl der Exemplare benötigt für die Anzahl der Sentinel Käfige im Zeitrahmen erforderlich sein wird.
    2. Für alle Aufzucht zu gewährleisten, Bevölkerung Aufzucht Käfige befinden sich in einer kontrollierten Umgebung und sind groß genug für die Anzahl der Erwachsenen geplant, und, der Fütterung und Reinigung Regime etabliert und sorgfältig befolgt, um spätere stressbedingte Sterblichkeit zu verringern, wird Feld Wirksamkeitsstudien verwechseln. Planen Sie für umfangreiche Feldversuche, sequentielle Chargen in separaten gut beschrifteten Bevölkerung Käfigen hinten.
    3. Verwenden Sie nur weibliche Mücken in Sentinel Käfige, vorzugsweise nach dem Bewegungsapparate 3-5 d. Moskito-Puppen können einen sezierenden Rahmen sexed oder physisch getrennt mittels eines Glas pupal Probenteilers Sortierung Aufwand mit Erwachsenen bei der Sentinel-Käfig laden Schritt zu reduzieren.
      Hinweis: Eine Kolonie muss doppelt so viele Mücken, geplant für den Einsatz in Sentinel Käfige zu liefern, da nur die Weibchen für Wächter verwendet werden können. Verwenden Sie 10 adulte Weibchen für jeden Käfig Sentinel, wie diese Zahl schnell zu laden, für die Mortalität zählen schnell und einfach zu bestimmen, ob irgendwelche entgangen zu sein. Unbedingt zurück-Plan ab dem vorgeschlagenen Spray, dass 3 bis 5 Tage alte Erwachsene Mücken zur Verfügung stehen. Die Verbreitung von 3-5 d bietet jedoch einige Marge für den Fall, dass ein Wetter halten Spritzen verhindert.
  2. Laden Sentinel Käfige
    1. Bereiten Sie eine CO2 Kammer, indem entlang der Unterseite von einem neuen ½ gal Kunststoff-Lebensmittel Vorratsbehälter mit Wattebällchen. Direkte einseitig mit einer 6-ft Länge von Polyurethan Schläuche (¼ Zoll Durchmesser) in die Wattebällchen durch eine eng anliegende Loch gestanzt tief in einer Seite des Behälters. Befestigen Sie eine 20 lb CO2 Flasche mit einem Regler an das andere Ende des Schlauches und setzen Sie den Deckel locker auf den Behälter um Gas zu entkommen, nachdem durch die Wattebällchen diffundierenden und zirkuliert durch den Container zu ermöglichen. Kleben Sie das Rohr an der Tischplatte, die leichte Kammer gezogen oder klopfte auf den Boden zu verhindern. Legen Sie einen Durchfluss artgerecht verwendet wird (ab ~ 7 L/min und Anpassungen vornehmen, je nach Bedarf).
    2. Bereiten Sie 10 % Saccharose-Lösung in einem neuen ½ gal Kunststoff Essen-Container vor und Tauchen Sie 100 Wattebällchen, so dass sie vollständig gesättigt werden. Die Sentinel-Käfige aus Schritt 1.1 in Chargen von 25 oder 50 Raum erlaubt, mit Tüll-Netz-Plätzen auslegen und lose Einfassungen auf Seite in der Nähe.
    3. Entfernen Sie Mücken aus der Bevölkerung-Käfig mit einer mechanischen Absauganlage in der Lage, Kanalisierung Mücken direkt in abnehmbare belüfteten Primärgefäßen. Nicht mehr als ~ 10 Mücken sollte in jedem Röhrchen abgesaugt werden, und keine mehr Rohre als innerhalb von 10 min verarbeitet werden können sollte um Stress zu mildern gefüllt werden. Platz 2-4 Rohre gleichzeitig in die CO-2 -Kammer und stellen Sie einen Timer für eine 4-min Belichtung, die Moskitos für spätere Geschlechtsbestimmung und Transfer zum Käfigen sentinel zu betäuben.
    4. Sobald der Timer Glockenspiel, CO2 Kammer entfernen Sie alle Röhren und schütteln Sie vorsichtig narkotisierter Mücken aus den Rohren zu ihnen in einem sauberen weißen 11,5 x 17 - Zoll-Blatt Papier gleichmäßig streuen aus. Stellen Sie den Timer für 4 min, das ist die ungefähre Zeit vor Mücken wieder aktiv werden. Verwenden einer Pistole Absauganlage15,16 oder Softtouch-Insekten Pinzette Chargen von 20 adulte Weibchen herausgreifen und sofort in die wartenden offen Sentinel Käfige statt. Sobald alle Weibchen aus dem narkotisierter Teig entnommen wurden, verwenden Sie eine separate mechanische Absauganlage alle übrigen männlichen Mücken zu sammeln, die durch das Einfrieren zerstört werden.
    5. Wie jede offene warten sentinel erhält Käfig einen Stapel von 20 Erwachsenen weiblichen Mücken, Falle eine Tüll mesh-Platz mit einer Lünette über offenen oberen Ende des Zylinders Käfig, und drücken Sie, um die Sentinel-Käfig-Baugruppe fertig. Sobald die Tüll vorhanden ist, Schwenken des Gummibandes so, dass es mit den Haken und Ösen Kabelbinder gegen die Seite des Zylinders positioniert über beidseitig Gitter des Käfigs Sentinel legt. Die Mehrheit der 10 % Saccharoselösung aus einem Wattebausch zu quetschen, so dass es immer noch feucht, kurz vor dem Punkt der frei tropft, und sanft tuck die Watterolle unter das Gummiband gegen das Tüll-Netz auf einer Seite des Käfigs sentinel , leicht zugänglich für die Mücken.
    6. Wiederholen Sie Schritte 1.3.3-1.3.5, bis die Sentinel-Käfige geladen werden.
      Hinweis: Der Käfig Ladevorgang sollte ein Minimum von zwei Personen: eine Durchführung aller Moskito Umgang mit Schritten und eine andere, alle Käfig Handhabung Schritte durchführen.
  3. Laden-Sentinel-Käfig-Kühler
    1. Bereiten Sie einen 48-qt isolierte Picknick Kühler für jede 45-50-Sentinel-Käfige (je nach Marke/Kühler) indem man ein Baumwolltuch nass 18 x 24 - in an der Unterseite durch einen Müllsack groß Küche 13-gal abgedeckt. Das nasse Handtuch sollte bis zu dem Punkt der Sättigung aber nicht tropft ausgewrungen werden. Falten Sie und ordnen Sie die 13-gal-Tasche um den Boden des Kühlers und mindestens 3 in von unten auf allen Seiten vollständig zu bedecken.
    2. Laden Sie den Kühler, indem man sorgfältig Sentinel Käfige in gestapelten Schichten mit der Watte nach oben. Je nach Marke des Kühlers, sollte über 10-12 Käfige pro Schicht und ca. 4-5 Schichten. Wenn möglich, leicht versetzt jede Schicht, so dass ein Käfig den Käfig unten, um den Luftstrom zu fördern nicht vollständig deckt. Decken Sie die oberste Schicht mit einem zweiten 13-gal Müllsack (wie den Müllsack unten gefaltet) und verbreiten Sie ein zweite nasses Handtuch auf diese Tasche zu.
    3. Verwenden Sie Klebeband ein gefaltetes Stück Pappe in einer vorderen Ecke der Oberlippe von befestigen je kühler, öffnen, so dass der Deckel gelehnt ist etwa 3/8 Zoll um Luftaustausch zu fördern und eine Überhitzung zu vermeiden. Gehören Sie in jedem Kühler einen 1-qt wieder verschließbaren Plastikbeutel mit 10 freie Wattebällchen getränkt in 10 % Saccharoselösung und 5 freie Gummibänder mit 5 Haken und Ösen Kabelbinder (diese Komponenten sind gelegentlich von Sentinel Käfige verloren während der Bereitstellung in einer separaten Tasche das Feld). Im Laufe der Zeit in den Kühlern im Labor und Feld Runden Sie die Saccharoselösung in allen Wattebällchen auf Käfige bei Bedarf mit einer Pipette und 10 % Saccharose-Lösung in einem robusten Behälter gelagert.
      Hinweis: Bei dieser Methode typische Kolonie Mücken können in Sentinel Käfige geladen und gespeichert werden in Kühlboxen 24-28 h vor Gebrauch in Feldversuchen.
  4. Transport von Sentinel-Käfig-Kühler zum Feld
    1. Während des Transports zum Feld Website halten sentinel Käfig Kühler in einem Fahrzeug mit Klimaanlage aber vor direkter Sonneneinstrahlung geschützt. Auf Wiese in milden bis warmen gemäßigten Umgebungen können der Kühler gestapelt im Freien um zu akklimatisieren oder in Fahrzeugen mit Klimaanlage laufen gehalten; aber in beiden Fällen Kühler vor direkter Sonneneinstrahlung geschützt. Achten Sie auf alle Umgebungsbedingungen im Freien, die Wächter in den Kühlern beeinflussen könnten (zB., Abgasen, Müll-Brände, etc.)
    2. Halten Sie in extrem heißen Umgebungen Kühler in Fahrzeugen mit Klimaanlage laufen vor direkter Sonneneinstrahlung geschützt, aber akklimatisieren Sie die Wächter, Outdoor-Bedingungen vor der Bereitstellung in den zu behandelnden Bereich schrittweise um Tod von Schock zu vermeiden. Prüfen Sie in allen Umgebungen, Testen von ein oder zwei Kühler der Sentinel Käfige zu bestimmen, wie lange sie ausgelassen werden können oder wie schnell sie an die örtlichen Gegebenheiten im freien akklimatisiert werden.

2. Vorbereitung des Standortes Feld

  1. Schaffung des Sentinel Raster und Kontrolle
    1. Wählen Sie einen Arbeitsbereich, der ausreichend Platz für die Verbreitung des geplanten Modus der Pestizideinsatz bietet (Antenne, LKW oder Portable) mit einem klaren Pfad für die Bewegung der Sprühvorrichtung und frei von menschlicher Besiedlung oder Aktivität. Wenn möglich, enthalten Sie eine Vielzahl von Dichte Vegetation und allgemeine Heterogenität des Lebensraums, Spray eindringen herauszufordern.
    2. Entwerfen Sie ein Netz von Standorten für Sentinel Käfige, die Variationen im Abstand der Sprüher, Abstand entlang der Spritzleitung, Vegetation/Hindernisse Spray eindringen und Höhe über dem Boden erfasst. Verwenden Sie eine 300 ft Messung Bandspule bequemere Abständen aus der Spritze und entlang der Spritzleitung markieren; z. B. ein Vielfaches von 25 ft Abständen.
    3. Produzieren Sie eine Karte des Rasters durch Markup für einen Ausdruck, der ein Satellitenbild mit einem klaren Nummerierung Code für Sentinel Käfig Standorten und verteilen sie in das Feld Team. Wann immer möglich, erhalten GPS-Koordinaten für jeden Käfig-Standort oder am wenigsten Koordinaten des herausragenden Merkmale, die später für Registrierungspunkte verwendet werden können, um eine räumlich zusammenhängende Karte im GIS zu bauen.
    4. Markieren Sie Sentinel Käfig Gitter Positionen auf dem Boden mit Klebeband markieren, glow Sticks und/oder Fahnen heften. Pestizid-Sprays werden häufig durchgeführt, bei Dämmerung oder Nacht: versuchen, verschiedene Wanderwege für alle Standorte der Sentinel, einschließlich zusätzliche Kennzeichnung Band löschen und/oder glow Sticks markieren Sie Stolperfallen oder andere Hindernisse.
    5. Installieren Sie Sentinel Käfig Montage Pfosten in den Boden nach dem Raster Design und klar beschriften Sie jedem Pol mit einem Code für seine einzigartige Position mit einem wasserfesten Filzstift. Mindestens 48 Zoll des Mastes sollte über dem Boden sein. Wenn der Lebensraum Vegetation/Hindernis Herausforderungen zu Pestizid Spray Streuung natürlich nicht bereitstellt, betrachten Sie die Seite mit dem oberen offenen neben jedem Sentinel Käfig Pol, ermöglichen eine zusätzliche Sentinel-Lage in einem 1 ft3 Karton Inverkehrbringen simulierte Refugien. Luftstrom durch die Box lässt sich durch Bohren ½-in einer oder mehreren Seiten, und Boxen sollte mit einem Alleinstellungsmerkmal Code mit einem wasserfesten Filzstift beschriftet werden.
    6. Besteht ein Risiko von Ameisen Angriff auf Sentinel Mücken, Install Sentinel Käfig Montage Polen durch eine eng anliegende Bohrung in der Mitte einer 18 x 18 - in selbstklebende Bodenfliese, mit der Klebeseite nach oben um Ameisen zu fangen, bevor sie Wächter erreichen können. 1 ft3 Boxen aus Schritt 2.1.5 können auch auf die Klebeseite des solche Fliesen, Ameisen zu behindern, und auch Boxen in den windigen Bedingungen beibehalten platziert werden.
    7. Etablieren einer Luv Regelzone (bestehend aus einem ähnlichen Lebensraum und Meteorologie als den zu behandelnden Bereich) für die Bereitstellung der unbehandelten Kontrolle Sentinel Käfige für die Umwelt auf Masten und/oder in 1 ft3 Boxen für die gleiche Menge an Zeit als Wächter ausgesetzt in den zu behandelnden Bereich. Ein bestimmtes Team des Personals mit separaten Kühlern Sentinel Käfige sollten gewidmet, Umgang mit allen Kontrolle Wächter.
    8. Ressourcen bei schönem design eine Verteilung der entsprechenden fallen im gesamten Behandlungsbereich, Behandlungsbereich angrenzenden Gebieten und Kontrollbereiche, Überwachung der lokalen natürlichen Populationen von Mücken durchzuführen, die am nächsten zu den Arten, die in 1.2.1 ausgewählt. Beginnen am Tag oder über Nacht Überwachung, abhängig von der Sorte, während eine oder mehrere der 12-24 h Perioden vor der Spray-Prüfungen stattfinden. Fortzusetzen Sie Überwachung während der Spray-Studien, gefolgt von Überwachung für eine oder mehrere Perioden nach der Spray-Studien.

Figure 2
Abbildung 2: Wiese mit Sentinel Käfig Polen vorbereiten. Zwei Szenarien der Sentinel Käfig Pole verteilt in (A) bewässert tropischen Mikrohabitat in einem heißen trockenen Region und (B) heiß-trockenen Wüste. In (A), werden drei Arten von Sentinel-Geräten gezeigt: die "Leiter" auf der linken Seite ist eine Reihe von Baumwolle Bänder zwischen PVC-Rohr zu erfassen Pestizid in verschiedenen Höhen über dem Boden; die Pole Position in der Mitte ist für Sentinel Moskito Käfige; und die Pole auf der rechten Seite unterstützt einen Dia Spinner um Pestizid Tröpfchen zu erfassen. (B) gibt es eine ähnliche Baumwolle Borte von Pestiziden zu erfassen, aber es sei darauf hingewiesen, dass die rechten Unterstützung des Gerätes im Vordergrund im Freien als Sentinel Käfig Pole verdoppelt (Sentinel-Käfig angebracht rund ein Drittel des Weges nach unten); im Gegensatz dazu ist der Apparat im Hintergrund platziert, so dass das Band und den Sentinel-Käfig (mit gelben Pfeil gekennzeichnet) innerhalb der Vegetation geschützt sind. Das Flugzeug im Hintergrund führt eine ULV-Pestizid-Spray. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

  1. Üben Sicherheit
    1. Ein Kommunikationssystem zwischen Spray Team, Bereich Sentinel Handhabung Behandlungsteam, Kontrolle Bereich Sentinel Umgang mit Team, etc., über Mobiltelefone (Stimme/Text) oder Handfunkgeräte zu etablieren.
    2. Liefern Sie persönliche Schutzausrüstung (PSA) für alle Mitarbeiter, die für ihre Rollen geeignet und angemessen für die Pestizid-Formulierung und Anwendung-Ausrüstung.
    3. Ein Pestizid Lager- und mischen/Ladefläche geschützt mit Auffangeinrichtungen und bestückt mit Notfallausrüstung wie Schaufeln und/oder Feuerlöscher für thermische Nebel Anwendungen zu etablieren, Handtücher enthalten verschüttet oder tropft, Abfallbehälter, sauber Wasser, erste-Hilfe-Versorgung und tragbare Augenwischerei Stationen. Etablieren Sie wichtig ist, Protokolle in den Fällen von Leckagen oder Exposition des Personals gegenüber Chemikalien.
  2. Kennzeichnung der Spritzleitung und Aufnahme Meteorologie
    1. Fahren oder Hand-Carry Anwendungen stellen Sie sicher die Spritzleitung klar ist und dass die Hindernisse werden erkannt und gekennzeichnet mit Klebeband kennzeichnen pin Fahnen und/oder Stöcke glühen. Machen Sie für Luftaufnahmen Anwendungen alle entsprechende Vereinbarungen mit der Flugsicherung.
    2. Die Grundlänge der Spritzleitung sollten die Maße des Rasters übereinstimmen; jedoch die Start- und stop-Punkte gut-vor und auch nach dem Raster. Fügen Sie etwa 10 % der die Grundlänge der Spritzleitung am Anfang und Ende, erhöhen die Chance für das gesamte Netz ausgesetzt zu sein, unvermeidlichen Verschiebungen und Unvollkommenheiten in Windmuster (siehe repräsentative Ergebnisse) gegeben.
    3. Wann immer möglich, antizipieren Sie größeren Winddrehungen zu, Alternative Spray Zeile(n) richten Sie ein und entwerfen Sie die Sentinel-Raster informativ aus beiden Richtungen sprühen. Der Spray-Betreiber sollten bereit sein, kurz Spritzen, wenn der Wind beginnt zu schlecht gust aufhören oder plötzlich verschiebt, die ein Sicherheitsrisiko erstellen. Der Betreiber kann wieder aufzunehmen, sprühen bei Bedarf, und der Prozess kann noch nutzbare Wirksamkeitsdaten produzieren, solange Kontrollen in der Umgebung für eine ähnliche längere Zeit gehalten werden.
    4. Legen Sie mindestens eine Wetterstation mit einem Datenrekorder zur Messung von Temperatur, Luftfeuchtigkeit, Windgeschwindigkeit und Windrichtung im Bereich Spray und ein weiteres in der Regelzone. Auch ein einfaches Wind Indikator Band (ca. 2-3 ft der hell farbigen Kennzeichnung Band) auf eine freie Sentinel Käfig Pol angesichts der Spray-Operator und Außendienst allgemeine Sensibilisierung für Bedingungen einrichten. Für Luftaufnahmen Anwendungen sollte das Flugzeug im Idealfall Berichterstattung Meteorologie auf Freigabe Höhe standhalten.
      Hinweis: Arbeiten Sie mit einer Universität, öffentliche Gesundheitsorganisation, Mücke und Vektor Bezirk oder andere Agentur mit Wissen über die Gegend vorgeschlagen, Feldversuche, sodass bestehende Partnerschaften und Vereinbarungen mit Grundbesitzern oder Land Verwalter können aufgebaut werden und dazu beitragen, um das Forschungsprogramm zu entwickeln. Bestehende Partnerschaften übersetzen Website-Sicherheit, langfristige Nutzung und in einigen Fällen, kritische Buy-ins und Akzeptanz in der Öffentlichkeit. Mit strukturierte Gitter ist es einfach für Kollaborateure, eigene Nummerierung/Kennzeichnung Systeme für schnelle und wiederholbare Bereitstellung, Sammlung und Sterblichkeit Kontrollen der Sentinel Käfige zu entwickeln. Sobald das Gitter, Spritzleitung und Meteorologie eingerichtet sind, können die Materialien in Ort (z. B. Übernachtung bis eine bequeme Sprühzeit oder besteht ein Wetter halten) belassen werden.
      Achtung: Kartons können verformen, wenn nass wenn es regnet, und starke Winde die schwere selbstklebende Bodenfliesen bewegen können.

(3) Bereitstellung von Sentinel-Käfige

  1. Bestimmen Sie im Voraus die Anordnung der Sentinel Käfige an jedem Sentinel-Punkt im Raster, wie die Höhe des Käfigs auf der Montage Pole (einschließlich Multi-Höhe, wo man am unteren Rand der Pole und anderen an der Spitze platziert werden könnte), oder ob die Käfige werden legte ich n 1 ft3 Boxen.
  2. 2-Personen-Sentinel Käfig Bereitstellungsteams zuweisen:, halten Sie den Kühler und ein weiteres herausziehen Sentinel Käfige nach Bedarf. Alternativ weisen Sie Personen zu transportieren und platzieren Sie mehrere Käfige je nach Umgebung und Größe des Rasters. Immer auch zusätzliche Sentinel Käfige für den Fall, dass einer fallen gelassen oder trat auf, Tüll ist hin-und hergerissen, oder man verloren, geht während der Bewegung durch das Gitter.
  3. Pro Positionierung Regime wie unter Punkt 3.1 beschrieben, verwenden Sie die Haken und Ösen Kabelbinder befestigen Sentinel Käfige zu Polen und stellen Sie sicher, dass Wattebällchen mit 10 % Saccharoselösung noch unter das Gummiband werden. Legen Sie Käfige auf ihren Seiten in 1 ft3 Boxen, so dass beide Tüll Netz enden senkrecht zum Boden sind. Ausrichtung der Käfige auf Pfählen kann im Voraus angegeben werden; zum Beispiel, Windrichtung so dass Netz Tüll Seiten stehen im Einklang mit der geplanten Spray Richtung und erwartete. In heißen Wüsten Winkel die Käfige an den Polen so, dass die Insekten nicht in direktem Sonnenlicht sind und können in den Schatten von der Seite des Zylinders Käfig bewegen.
  4. In Behandlung und Kontrolle deutlich beschriften jeden Sentinel-Käfig mit einem permanent-Marker wie es mit zwei Stück von Informationen eingeführt wird: (1) die Pole und/oder Feld eindeutig positionieren Sie Code für die Zuordnung später im GIS und (2) vorsprühen Sterblichkeit für nachträgliche Korrektur für Spray-induzierte Mortalität oder Mortalität vor der Exposition gegenüber der Umgebung unabhängig von Spray. Zum Beispiel wenn vorsprühen Sterblichkeit Null ist, schreiben Sie "Pre-0"; Wenn 2 Exemplare tot sind, schreiben Sie "Pre-2" usw.

Figure 3
Abbildung 3: Platzierung des Sentinel Käfige im Innen- und Außenbereich. Beispiele für Pol Platzierungen und 1 ft3 Boxen (A) drinnen in einem simulierten ländliche Residenz, (B) im Freien in einer simulierten Umgebung und (C) in einem Datum Palmenhain in einer heißen trockenen Zone. Auch sind die klebrigen Fliesen unter der Box und den Sentinel-Käfig platziert im Freien in (A), und die Sentinel Käfig Pol Pin geschoben durch die klebrige Fliese neben dem Feld in (B), der Einfall von Ameisen in Sentinel Käfige zu reduzieren. Das Sperrholz quadratisch mit aufrecht PVC-Halterung an der linken Seite der Box in (A) ist eine Unterstützung für eine Folie Spinner. Eine ähnliche Vorrichtung kann verwendet werden, um ein Sentinel Käfig Pole um Platzierung der Wächter in unterschiedlichen Höhen ermöglichen zu unterstützen. Auch ist der Folie Spinner mit Folien auf einem Hügel auf der linken Seite der Schildwache Käfig Pole und das Feld (B). (C) zeigt eine Min/Max-Platzierung von zwei Wächter-Käfigen, Bewegung des Pestizids auf verschiedenen Ebenen zu untersuchen. Die Oberseite des geöffneten Sentinel Käfigs Kühler ist nur sichtbar im Vordergrund. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Hinweis: Je nach Größe des Rasters, sicherzustellen Sie, dass ausreichend Personal, um alle Käfige in einem angemessenen Zeitrahmen zur Minimierung der Umweltauswirkungen auf Sentinel Sterblichkeit bereitstellen. Es möglicherweise notwendig, Praxis läuft mit leeren Käfige um festzustellen, ob genügend Personal vorhanden sind. Es versteht sich, daß es unvermeidlich einige Verbreitung der Belichtungszeit von Sentinel Käfige für die Umwelt aufgrund Rüstzeit mit der angegebenen Nummer der Käfige pro Person. In sehr großen Sentinel Rastern (z. B. für einige Luftaufnahmen Anwendungen), planen, koordinieren mehrere Teams in mehreren Fahrzeugen um den Sentinel-Käfigen innerhalb eines angemessenen Zeitrahmens zu platzieren. Es ist unvermeidlich, dass einige Sterblichkeit in der Sentinel-Käfig-Moskito-Bevölkerung stattfindet, so dass es mit sorgfältiger Käfig Kennzeichnung vor Umweltbelastungen außerhalb der Kühler und vor der Anwendung von Pestiziden berücksichtigt werden muss.

4. Durchführung der Pestizideinsatz

  1. Weisen Sie ein Zeitnehmer zu verfolgen Spray Anwendungsdauer (Start/Stopp-Zeiten) und halten Sie jederzeit über eine Stoppuhr, Uhr oder digitales Video mit Zeit/Datum-Stempel. Die Zeitnehmer kann auch einen Schreiber erfassen mehrere entscheidende Variablen einschließlich der Zeit, an welche Sentinel Käfig Bereitstellung abgeschlossen ist, fliegen, fahren, zu Fuß Geschwindigkeit, Anwendung Gerät Durchfluss, Pestizid-Konzentration und Verdünnungsmittel, sprühen Sie Zeit zugewiesen werden, halten Sie Zeit, mal an dem Käfig Sammlung abgeschlossen ist und allgemeine Lebensraum Beobachtungen.
  2. Bereiten Sie die Pestizidausbringungsgeräte pro Herstellerrichtlinien vor und laden Sie das Pestizid (und Verdünnungsmittel falls erforderlich), mit dem geringsten zur Deckung der Zielbereich plus eine vorbestimmte Menge Spray Linie Volumen und Pestizid-Reservoir zu berücksichtigen Ölwanne, Kavitation bei Spray zu verhindern. Überschreiten Sie auf dem Pestizid-Etikett angegebene Aufwandmengen nicht, und verwenden Sie keine Pestizide nicht von der US Environmental Protection Agency, genehmigt, es sei denn, eine experimentelle Nutzungserlaubnis für den Standort des Feldversuchs gesichert worden ist.
  3. Etablieren Sie eine ausreichende Post-Spray-Haltezeit, mit denen Schädlingsbekämpfungsmittel Spray Plume in der Sentinel-Käfig-Raster zu zerstreuen, bevor die Sentinel-Käfige gesammelt werden. Haltezeit basiert auf einer ausgewogenen Berücksichtigung der Lebensraum/Vegetation Dichte, meteorologischen Bedingungen (insbesondere extreme Hitze oder Wind), Auftragsvorrichtung, Anwendungsmodus (Luft, Boden-Fahrzeug, tragbare), Ziel Insekt und Pestizid Formulierung, und eventuell Vorversuche effektiv zu entwickeln.
  4. Nachdem Sentinel Käfige sind beschriftet und in Behandlung und Kontrolle Bereichen eingesetzt und alle Schlüsselpersonen Bereitschaft mitgeteilt haben, haben Sie die Spray-Betreiber eine Endkontrolle auf Windgeschwindigkeit und Windrichtung zu führen und die Luft, Boden oder tragbaren Spritze zu initiieren Pestizideinsatz aus dem dafür vorgesehenen Spritzleitung oder Alternative Spritzleitung nach Bedarf. Fliegen, fahren oder zu Fuß Geschwindigkeiten je nach Anwendung Gerät Durchfluss und Pestizid-Label Rate festgelegt.
  5. Sobald die Spray-Anwendung abgeschlossen ist, haben die Zeitnehmer markieren den Beginn der Haltezeit und informieren alle Mitarbeiter 1 – 2 min. bevor die Hold-Zeit vergehen wird, damit alle Mitarbeiter in Position bringen und bereiten auf die Sentinel-Käfige sammeln können.
    Achtung: Beachten Sie alle Sicherheitsvorkehrungen auf dem Pestizid-Etikett zusätzlich zu standard Pestizid-Applikator bewährten Methoden angegeben. Pestizid-Anwendungen durchgeführt werden von einem zertifizierten Pestizid-Applikator mit, wenn möglich, zusätzliche Zertifizierung im Bereich öffentliche Gesundheit Pestizid. Bevor die Spray-Anwendung sicherzustellen, dass alle Mitarbeiter gegen den Wind der Anwendungsbereich oder in Fahrzeugen mit Klimaanlage auf umwälzen Sie wenn muss im Zielgebiet und/oder geeignete PSA tragen. Sicherstellen Sie, dass alle Sentinel Käfig Kühler geschlossen sind und dass in geschlossenen Fahrzeugen gegen den Wind von der Sprühanwendung geparkt haben die Klimaanlage auf umwälzen.

Figure 4
Abbildung 4: thermische Nebel versprühen ein Raster in Warm-trockenen äquatorialen Lage montiert. Ein LKW montierte ULV Sprüher Fahrt entlang einer Spritzleitung Regie Pestizid-Spray durch ein Gitter von Sentinel Käfige auf freiem Feld (A). Ähnlich wie in Abbildung 2, ist jede Sentinel-Position mit einem zweiten Pfosten ausgestattet, ein Baumwoll-Band Pestizid Tröpfchen für die spätere Analyse mit Gaschromatographen/Massenspektrometrie sammeln zu unterstützen. Nahaufnahmen von Sentinel Käfige (B) in einem warmen gemäßigten vor Spritzwasser und (C) in einer heißen trockenen Umgebung nach Spray. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

5. sammeln die Sentinel-Käfige und Mortalitätsdaten aufzeichnen

  1. Verwenden Sie die gleichen Sentinel-Käfig-Teams Käfige in das Raster zu sammeln, nachdem die Haltezeit abgelaufen ist. Alle Personen, die Umgang mit Post-Spray Käfige sollten Einweg Nitrilhandschuhe zur Minimierung von menschlichen Kontakt mit Pestiziden tragen. Post-Spray Käfige der Schutzraum der Sentinel Käfig Kühler so bald wie möglich in einen coolen Fahrzeug vor direkter Sonneneinstrahlung geschützt gelagert, und kehrte in das Labor für die Verarbeitung so bald wie möglich zurück.
  2. In Behandlung und Kontrolle ist es wichtig, Rekord Post-Spray-Sterblichkeit auf jeder Sentinel-Käfig mit einem permanent-Marker, wie sie erfasst werden. Post-Spray Sterblichkeit mitgezählt sollten alle toten Mücken in den Käfig, und diese Zahl sollten direkt angrenzend an die Anzahl der "Pre" geschrieben, aber deutlich genug zur Unterscheidung von der Vorbelichtung Sterblichkeit Graf eingekreist. Später wird die vor-Anzahl die von der Post-Zählung, die tatsächliche Sterblichkeit von Exposition gegenüber Pestiziden (Sprühbereich) oder Umgebung (Kontrollzone) zu erhalten abgezogen. Versuchen Sie nicht, diese Mathematik im Bereich durchzuführen und eilte zu Sentinel Käfige sammeln.
  3. Versuch, Sentinel Käfige in den Lab-Arbeitsbereich innerhalb von 6 h nach dem Spray zurückzukehren, so dass die Anzahl der 6 h-Sterblichkeit erfasst werden kann. Übertragen Sie im Labor alle Käfige in Kunststoffschalen, verwirft alle Gummibänder, Haken und Ösen Kabelbinder und Watte. Jedes Fach sollte ca. 20 Sentinel Käfige gespeichert mit dem Netz Tüll parallel zum Boden halten. Legen Sie einen neuen 10 % Saccharose Lösung Wattebausch auf alle Käfige und jedes Fach mit einem neuen feuchter Baumwollhandtuch, ähnlich denen in der Sentinel-Käfig-Kühler. Stapeln Sie die Tabletts auf einem Labortisch oder in einem Inkubator mit ½-in PVC Rohr Abstandhalter. Speichern Sie die Tabletts mit Käfigen aus Behandlungsbereiche gut getrennt oder in verschiedenen Inkubatoren, die Käfig-Tabletts zu steuern.
  4. Beratungssitzung, übertragen Pre- und Post-Spray Mortalitätsdaten aus jeder Käfig auf Datenformulare, wie die Anzahl der 6 h-Mortalität durchgeführt wird: eine Person Einweg-Nitril-Handschuhe sollten Sentinel Käfige aus Schalen eins nach dem anderen für jeden Käfig nehmen, rief die 1) einzigartige Ortsbezeichnung, dann die 2) Pre-zählen und die Post-Anzahl der unmittelbaren lesen aus dem Käfig selbst, gefolgt von den 3) aktuelle 6 h Anzahl direkt beobachtet. Eine zweite Person sollte dieser Datensatz auf vorgefertigte Formen, eine Zeile für jeden Alleinstellung-Code aus der Studie (Tabelle 1). Wiederholen Sie diesen Vorgang bei 12 h und 24 h Post-Spray, die Tabletts in stabile Verhältnisse zwischen Sterblichkeit zählt zu speichern.
  5. Sobald die Anzahl der 24 h-Sterblichkeit abgeschlossen ist, friert alle Fächer der Sentinel Käfige, alle Proben zu töten, und führen Sie dann final zählt für jeden Käfig, eine genaue Nenner für die Berechnung der Prozent Sterblichkeit zu erhalten. Fehlt eine Probe aus einem Käfig, nachstehend finden Sie direkt in das Fach, wo es ausgetrocknet und durch gefallen haben kann. Alle Sentinel Käfige, Handtücher aus Baumwolle und Plastikmüll Tasche Liner in versiegelten Müllsäcke in normalen Müll entsorgen Sie und gründlich reinigen Sie alle Kühler und Schalen mit Wasser und Seife und trocknen sie in direktem Sonnenlicht.
    Hinweis: Larven Fach Abstandhalter leicht bestehen aus PVC-Lager Rohr, mit einer Kerbe in jedem Ende geschnitten, so dass sie die Tabletts abperlen können nicht. Abstandshalter ermöglichen der Larven Tabletts in Fahrzeugen, Inkubatoren oder Laborbänke platzsparend stapeln. Für einige Standorte Feld kann nicht zurück zum Labor innerhalb von 6 h möglich; in diesem Fall, übertragen Sie Käfige von Kühlern auf Tabletts im Feld mit den oben genannten Protokoll und Materialien und Stapeln sie sorgfältig im klimatisierten Fahrzeug. Aufzeichnung von Sterblichkeit in jedem Käfig unmittelbar nach das Post-Spray Haltezeit und bei ca. 6 h, 12 h und 24 h nach dem Spray informieren auf Zuschlag (kurzfristig) vs. Langzeitwirkungen des Pestizids.

Figure 5
Abbildung 5: Verarbeitung Sentinel Käfige nach dem Sprühen. Zwei Szenarien zur Übertragung von Post-Spray Käfige in gestapelt Schalen während des 6 h-Mortalität-Check: (A) in einem Hotelzimmer in der Nähe eines abgelegenen Wiese und (B) in einen praktischen Parkplatz Rückkehr ins Labor aus einer weit entfernten Wiese. Beachten Sie die PVC-Abstandhalter auf dem Einschub-Foto in (A), feuchte Handtücher für Käfige in Schalen in das Hauptfoto von (A) und ein Beispiel für eine einzigartige Ortsbezeichnung und Pre angelegt und eingekreisten Post-Spray Sterblichkeit kommentierte direkt auf eine Sentinel-Käfig auf dem Einschub-Foto in (B). Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

6. Verarbeitung, Analyse und Zuordnung von Mortalitätsdaten

  1. Alle Hand aufgezeichnet Mortalitätsdaten aus den Formen in eine elektronische Tabelle übertragen und 4 neue Spalten für die Post-Spray, 6 h, 12 h und 24 h Mortalität (alle korrigiert vorsprühen Mortalität) zu berechnen.
  2. Korrigieren Sie alle Behandlung Bereich Mortalitätsdaten für Kontrolle Sterblichkeit in 4 zusätzliche neue Spalten mithilfe der Abbott-Korrektur-17: eine mittlere Kontrolle Sterblichkeit über alle Kontrolle Wächter zu berechnen, für jeden Zeitraum, die Sterblichkeit war (d. h. aufgenommen Post-Spray, 6 h, 12 h und 24 h; alle korrigierten vorsprühen Mortalität), und dieses Mittel, Abbott zu korrigieren die Sterblichkeit in jeder Behandlung Bereich Sentinel Käfig für jeden entsprechenden Zeitraum. Die Schwelle für akzeptable Kontrolle Sterblichkeit kann basierend auf die Arten der Sentinel Moskito verwendet willkürlich bestimmt werden, sondern sollte nicht mehr als 25 %18.
  3. In einer geographischen Informationen System Karte alle einzigartige Sentinel Käfig Urlaubsziele anhand der GPS-Daten in Schritt 2.1.3 gesammelt und 4 Spalten für die Abbott-korrigierte Mortalität für die 4 Sterblichkeit Zeiträume in der Attributtabelle für diese Standorte zu erstellen. Erstellen Sie eine interpolierte Abdeckung für die Mortalität für jeden der 4 Sterblichkeit Zeiträume über alle einzigartig Sentinel Standorte im Behandlungsbereich. Fügen Sie diese interpolierten Deckungen zur Karte hinzu und verwenden Sie einen gestreckten Farbverlauf auf ein blau bis rot Spektrum orientierte niedrig (blau) bis hoch (rot).
  4. Verbessern Sie die Karte von den zu behandelnden Bereich mit einem zugrunde liegenden Satellitenbild und fügen Sie Sentinel-Käfig-Positionen (Unterscheidung von Behandlung und Kontrolle Wächter hinzu), sprühen Linie, fahren Richtung, Maßstabsleiste, Nordpfeil, Rampe Farbschlüssel interpolierten Sterblichkeit Schlüssel zum Symbole und eine ausführliche Titel mit Datum, Lebensraumtyp, Pestiziden und Verdünnungsmittel Gebrauchtmaschinen, Anwendung verwendet, und Zielarten. Exportieren Sie ein Kartenbild für jede Sterblichkeit Zeitraum Oberfläche.
  5. Fügen Sie meteorologischen Informationen als ein Einschub-Diagramm hinzu und beinhalten Sie eine separate Windrose (polar Plot), vorherrschende Windrichtung, Windgeschwindigkeit und Variabilität während der gesamten Spray zu zeigen. Darüber hinaus bieten Sie separate meteorologische Daten für Freigabe Höhe bei Antenne Anwendungen.
  6. Diagrammdaten natürliche Bevölkerung Überwachung als Index für die Anzahl der Weibchen der einzelnen Arten gesammelt pro Falle pro Nacht. Ausgabe einer Reihe von Grafiken nach Lage (neben Behandlungsbereich, innen Behandlungsbereich und innerhalb der Kontrollzone) partitioniert und Zeitraum (Stichprobe vor, während oder nach der Spray-Studien) und legen Sie sie separat, wie Einsätze im wichtigsten GIS Karte Wirkung zu zeigen in natürlichen Populationen Laufe der Zeit in, neben und abseits der Pestizid-Applikation.

Representative Results

Hier sind repräsentative Ergebnisse, die aus zwei unveröffentlichte Feldstudien, die den Kern der oben beschriebenen Methoden enthalten. In diesen Studien sentinel zwei Aspekte der Adultizid Wirksamkeit gegen Krankheit Vektor-Insekten untersucht wurden.

Die erste Studie (unveröffentlichte Daten 2010-2012) untersucht, ob Verdünnungsmittel Wirksamkeit von Pestizid gegen Mücken in einer heißen trockenen Wüstenumgebung mit einem thermischen Nebel Gerät angewendet beeinflussen könnten. Wir haben drei separate Anwendungen mit einer Weltordnungspolitik Permethrin Adultizid fähig, in Öl oder Wasser verdünnt. Jede der Anwendungen wurde durchgeführt mit einer LKW-montierte thermische Nebelgenerator mit verschiedenen Verdünnungsmittel: Wasser, BVA13 Mineralöl oder Diesel. Dann, ein Raster von mindestens 20 Sentinel Moskito Käfige gesetzt auf Pole in einer trockenen Land Freifläche (Abbildung 6) diente und Meteorologie wurde mit einem tragbaren Wetter Recorder aufgezeichnet.

Die zweite Studie (unveröffentlichte Daten 2011) untersucht die relative Wirksamkeit einer einzigen Pestizid Formulierung in einer heißen äquatorialen Umgebung gegen Sandfliegen gleichzeitig mit zwei Arten von Spritzen (ULV und thermische Nebel) angewendet. Wir haben zwei angrenzende Raster 25 Sentinel Sandmücken Käfige gesetzt auf Pfählen im niedrigen Rasen-Nahrungsbasis Lebensraum unterschiedlicher Dichte in einem großen Feld in einen heißen äquatorialen Talkessel (Abbildung 7). Meteorologie wurde aufgenommen mit einem tragbaren Wetter Recorder positioniert zwischen den beiden Netzen. Ein LKW befördert die ULV-Gerät und anderen thermischen Nebelgenerator durchgeführt, und beide initiierten Sprays entlang der Spray-Linien zur gleichen Zeit, jeder Umzug von Ost nach West mit einer Geschwindigkeit entsprechende auf dem Etikett angegebenen Aufwandmenge und Durchflussmenge von der Sprayer.

In beiden Feldstudien nach eine 10-min halten Zeit Post-Spray, sammelten wir alle Sentinel Käfige aus Bereichen der Behandlung und Kontrolle, gleichzeitig den Prozess der Aufnahme nach dem Spray Sterblichkeit zu initiieren. Prozent Mortalitätsdaten war dann codiert, korrigiert für die beobachteten Hintergrund Kontrolle Sentinel Mortalität und gelegt in eine GIS-Abdeckung, bestehend aus georeferenzierte Punkte entsprechend zu den Standorten der Sentinel Käfige in der Behandlung Bereich Raster (Abbildung 6 und Abbildung 7). Trotz die ideale Situation, in der eine Pestizid-Spray einen 100 % töten in den Zielbereich produziert, ist die realistische Schwelle für akzeptable Wirksamkeit eines Pestizids willkürlich. Erwartungen der Wirksamkeit konnte mit der Entfernung der Sprayer (z. B. das Festlegen eines Schwellenwerts von 95 % Mortalität 50 ft aus der Spritzleitung mit 80 % Mortalität bei 250 ft) variieren.

Die Ergebnisse aus beiden repräsentativen Studien natürlich zeigen die Bandbreite von positiven zu negativen Ergebnissen, weil der Farbverlauf Bereiche von 0 bis 100 % Mortalität darstellt (siehe Farbe Rampen in Abbildung 6 und Abbildung 7). Alle Mortalitätsdaten im Behandlungsbereich werden normalisiert, durch die Hintergrund-Sterblichkeit in den unbehandelten Kontrollbereich eine Schwelle von 25 % Kontrolle Sterblichkeit18, über die aufgrund von übermäßiger Umwelt verworfen haben würde oder Kolonie Auswirkungen auf die Mortalität. Das Dienstprogramm für die elektronische Abbildung Ansatz zur Visualisierung von Mortalitätsdaten wird hier deutlich: der Forscher und (später) kann der Leser sofort verstehen, die relative Wirksamkeit der fokalen Pestizide und Verdünnungsmittel (Abbildung 6) oder die fokale Pestizid Sprühgeräte (Abbildung 7) gegen Mücken oder Sand fliegt, beziehungsweise. Es ist wertvoll, Abbildung 6 auf die zugrunde liegende Sterblichkeitsdaten vergleichen, die würde traditionell in tabellarischer Form (Tabelle 2) vorgelegt werden und erfordern viel mehr interne Konzeption mit angemessen erhöhtes Potenzial für Fehler, durch Forscher und Leser gleichermaßen. Die elektronische Karte erleichtert wenn mit meteorologischen Daten und ein Foto Basis Satellitenabdeckung, ergänzt auch schnelle Bewertung potenzieller Auswirkungen des Lebensraums auf Pestizid-Anwendungen. Es ist anzumerken, dass der Einschub-Windrose-Diagramm in Abbildung 7 ein Windwinkel, die passt perfekt zu den Winkel des räumlichen Sterblichkeit im Westen Raster verfügt, darauf hinweist, dass der Spray-Truck weiter nach Osten begonnen haben sollte, so dass Pestizid müsste eine Möglichkeit, alle Sentinel Käfige zu erreichen. Wenn Mortalitätsdaten nur in tabellarischer Form in Betracht gezogen worden ist, kann es leicht zu verpassen diese Schwäche in den Versuchsplan und weisen eine geringere allgemeine Wirksamkeit dieser Pestizidausbringungsgeräte voreingenommen von Nullwerten Mortalität aus Bereichen, die nicht von kontaktiert sein die Pestizid.

Nach unserer Erfahrung produzieren die meisten Pestizid-Anwendungen auf dem Gebiet einen Verlauf der Sterblichkeit durch die Ziel-Bereich Sentinel Käfige, die automatisch zeigt, dass die Anwendung gültig war. Allerdings können wenn Null Mortalität in den zu behandelnden Bereich beobachtet wird und die Spray-Veranstaltung ist gültig (d. h. , die Bewegung durch das Zielgebiet Sentinel Spray-Wolke beobachtet wird), abzuleiten, dass das Pestizid nicht effektiv mit dieser Tierart in Höhe ist in dieser Umgebung, und mit diesem Ausbringungsgeräte angewendet. Natürlich ist dies angesichts der Tatsache, dass die Pestizid-Charge nicht abgelaufen ist oder unsachgemäß gelagert wurde. Auf der anderen Seite einige Luftaufnahmen Pestizid-Anwendungen können insbesondere keine Auswirkungen auf den Zielbereich sichtbar oder nachweisbar Spray-Wolke zu produzieren, und Null Sterblichkeit im gesamten Wächter kann bedeuten, dass das Spray das Zielgebiet verpasst. Es wird empfohlen, dieses Szenario zu antizipieren, durch die Einrichtung eine Reihe von zusätzlichen Sentinel Käfige, die den Zielbereich Auswirkungen auf einige Entfernung Luv und Lee (z. B. 50 ft Intervalle für mindestens eine Schwadbreite in jede Richtung) so zu Klammern, die bestimmte Anzeichen von Touchdown von Schädlingsbekämpfungsmitteln kann entnommen werden, wenn das Zielgebiet verpasst wird.

Figure 6
Abbildung 6: Vertreter interpoliert Sentinel Käfig Mortalitätsdaten aus einem Feldversuch in heiß-trockenen Wüste Bedingungen gezielt Mücken. In dieser Serie von Sprays waren die thermische Nebel Pestizid Sprüher, Pestiziden und Umwelt konstant gehalten, variierend zwischen Pestizid Verdünnungsmittel, (A) Wasser, Diesel (B) und (C) BVA 13 Mineralöl über die drei Versuche. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Figure 7
Abbildung 7: Vertreter interpoliert Sentinel Käfig Mortalitätsdaten aus einem Feldversuch in warme äquatoriale Bedingungen gezielt Sandfliegen. In diesem Satz von zwei gleichzeitigen Spritzanwendungen Pestizid und Umgebung waren konstant gehalten, aber die Pestizid-Spritze war anders zwischen den beiden Netzen: thermische Nebel (West-Raster) und ultra low Volume (ULV, Ost-Raster). Beachten Sie, dass die Windrichtung, die perfekt in die Windrose Diagramm angegebenen den Winkel der räumlichen Sterblichkeit im Westen Raster entspricht, darauf hinweist, dass der Spray-Truck weiter nach Osten begonnen haben sollte, so dass Pestizid Gelegenheit, alle Wächter zu erreichen müsste Käfigen. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

PROJEKT:
ÖKOLOGISCHE ZONE:
ORT:
WIESE:
DATUM DER ANTRAGSTELLUNG:
DIE AUSRÜSTUNG:
PESTIZID-FORMULIERUNG:
VERDÜNNUNGSMITTEL:
SENTINEL INSEKTENARTEN:
LEBENSPHASE DER WÄCHTER:
MORTALITÄT-KONTROLLEN
[kopiert direkt von Sentinel Käfige; verzeichneten Daten Feld] [beobachtet von Sentinel Käfige in Schalen gespeichert]
Sentinel-Cage-Code Nein. PRE-TOTEN Nein. TOTE POST-SPRAY/HALTEZEIT Nein. Toten 6 h Post-SPRAY Nein. TOT 12 hr Post-SPRAY Nein. Toten 24 Stunden Post-SPRAY
Behandlungsbereich A1
A2
A3
A4
A5
B1
B2
B3
B4
B5
C1
C2
C3
C4
C5
D1
D2
D3
D4
D5
E1
E2
E3
E4
E5
Regelzone Kontrolle 1
Kontrolle 2
Kontrolle 3
Regler 4
Regler 5
Regler 6
Regler 7
Kontrolle 8
Steuerung 9
Kontrolle 10

Tabelle 1: Probieren Sie Sterblichkeit Datenformular. Das Formular hat Räume für allgemeine Informationen zu den Feldversuch in der oberen linken Seite, die ist entscheidend für die Verwaltung von Daten aus mehreren Feldprojekte. Der Hauptteil des Formulars verfügt über Räume für die Pre- und Post-Spray Mortalität (beide direkt aus der Sentinel-Käfige kopiert), durch den späteren 6 h, 12 h und 24 h Kontrollen. Eine ähnliche elektronische Tabelle mit hinzugefügten Spalten Mortalitätsdaten für vorsprühen Toten zu korrigieren und Spray Bereich Sterblichkeit für jede umweltbedingte Sterblichkeit in der Regelzone zu korrigieren sind handschriftliche Daten in diesem Formular eingegangen.

PROZENT STERBLICHKEIT (ABBOTT-KORRIGIERT)
Sentinel-Cage-Code (A) Aqualuer + Wasser (B) Aqualuer + Diesel (C) Aqualuer + BVA13
A1 1 0.78 0,54
A2 1 1 0.05
A3 1 0.29 0
A4 1 0,04 0,03
A5 1 0,04 0
B1 1 0.79 0
B2 1 0,82 0
B3 1 0,15 0
B4 1 0.21 0,15
B5 1 0 0
C1 1 0.93 0
C2 1 0,71 0,01
C3 1 0,32 0
C4 1 0.26 0
C5 1 0,46 0
D1 1 0,67 0
D2 0.78 0,24 0,01
D3 0,97 0,5 0
D4 1 0,27 0,03
D5 1 0,33 0
E1 1 0,82 -
E2 1 0,88 -
E3 1 1 -
E4 1 0.79 -
E5 1 0.78 -

Tabelle 2: zugrunde liegende Sterblichkeitsdaten zur Erstellung die interpolierten Wirksamkeit Karte in Abbildung 6 . Es sei darauf hingewiesen, dass einige räumliche Informationen in dieser Tabelle erfasst werden können; Beispielsweise kann dies durch die Trennung von Zeilen und Spalten durch Entfernung von Sprayer und Abstand entlang Spritzleitung, beziehungsweise. Zeitliche Änderungen im irdischen Leben entsprechend sofort nach dem Sprühen, Post-Spray 4 h und 12 h nach dem Spray, würde jedoch beispielsweise eine komplexere Tabelle oder zusätzliche Tabellen erfordern. Ebenso sind separate Tabellen für jedes Verdünnungsmittel in den Studien verwendet aus Gründen der Übersichtlichkeit nötig, wenn die Tabellen durch Raum und Zeit partitioniert sind.

Discussion

Kombination des klassischen Sentinel-Käfig-Ansatzes mit elektronische Abbildung der interpolierten Sterblichkeit Daten ist eine einzigartige und leistungsstarke Methode zur Bewertung von Pestiziden im Feld und vergleichende Pestizid Wirksamkeitsstudien über mehrere Umgebungen hinweg unterstützt und unterschiedliche Konfigurationen von Pestiziden und Anwendungstechniken. Obwohl die grundlegenden Sentinel-Käfig-Methode nicht neu ist, ist die Visualisierung von Sentinel Käfig Mortalitätsmustern in einem GIS eine Weiterentwicklung förderlich für tiefer gehende Analyse der Muster der Fluss von Pestiziden Aerosolsprays. Die Interpolation von Punktmessungen Pestizid Wirksamkeit in einer farbcodierten Kartenabdeckung ist ähnlich wie ein Windkanal Umströmung eines Automobils zu visualisieren Rauch Ergüsse hinzufügen, und es ist eine wesentliche Verbesserung für die Berichterstattung von räumlichen und zeitlichen Sterblichkeit Daten in einer Reihe von Tabellen.

Einige Teile des Pestizids Sprays können gesehen werden, mit dem bloßen Auge und Schädlingsbekämpfungsmittel, die Tröpfchen aus unsichtbaren Teilen des Sprays auf Objektträgern erfasst werden können oder anderen Medien, die wie Käfige, sentinel sind seit langem etablierte Protokolle. Evaporative Produkte von Tröpfchen und Tröpfchen selbst können mit Baumwoll-Bändern erfasst und mit einem Gaschromatograph/Massenspektrometer, bietet noch mehr Informationen über das Schicksal eines Pestizid-Spray analysiert werden. Jedoch können die realisierten Wirksamkeit des Sprays und räumliche Muster des tatsächlichen Pestizid-induzierte Mortalität im Zielgebiet (die Tröpfchen und Verdunstungskühlung Produktkomponenten enthalten kann) nur endgültig durch Sentinel Insekten gemessen werden.

Darüber hinaus kann die zeitliche Komponente der Wirksamkeit nur endgültig durch eine Reihe von Beobachtungen der Sterblichkeit in Sentinel Insekten gemessen werden, die quantifizierten Indizes der schnelle Knockdown versus langfristige Morbidität und Mortalität auf dem Ziel erfassen Spezies. Wiederum kann eine Reihe von interpolierten farbcodierte Karten verwendet werden, deutlich die Entwicklung der Post-Spray Sterblichkeit im Laufe der Zeit mit einer expliziten räumliche Komponente in einer Weise zu visualisieren, die eine Reihe von Tabellen nicht an ein Lesegerät kommunizieren kann. Die Reihe von Karten können animiert werden, in einer Schleife um den Fortschritt des Sprays und deren Auswirkungen auf Sentinel Insekten, weitere Verbesserung des Verständnisses der Wirksamkeit nicht nur für eine einzige Studie zu reproduzieren, aber im Vergleich zu Pestiziden, Techniken, Anwendung Ausrüstung, Zielinsekten und ökologischen Zonen.

Für die höchste Mortalität Datenqualität bei dieser Methode sollte während der Start-Ziel-Handhabung und Beobachtungen der Sentinel Insekten großer Sorgfalt sein. Belichtungszeit und Bedingungen der Sentinel Insekten für die Umwelt über die Behandlung und Kontrolle Bereiche vor dem Pestizid-Spray sollte möglichst gleich praktisch sein. Diese Ausstellung sollte eine Zeit der Akklimatisierung an die Umgebungsbedingungen und eine einheitliche Zeit Post-Spray zur Behandlung und Kontrolle Insekten halten. Beobachtungen der Sterblichkeit vor dem Spray nach der Hold-Zeit (z.B. beim Abrufen der Käfige) und für die angegebenen Zeiträume Post-Spray sollte sorgfältig auf Datenformulare verfolgt werden. Auch sollte darauf geachtet werden, alle Wächter aus dem Bereich abrufen, vor der Abreise für das Labor. Behandlung und Eindämmung der Sentinel-Käfige sollten physisch im gesamten Protokoll getrennt werden. Zuverlässige Beobachtungen der Hintergrund Grundlinie Sterblichkeit von den Steuerelement-Käfigen überhaupt bezeichneten Zeiträume sind entscheidend für die entsprechende Korrektur der beobachteten Mortalität in der Behandlungszone. Genaue, präzise, vergleichbare und aussagekräftige Wirksamkeit Karten können nur aus qualitativ hochwertigen Sterblichkeit Dateneingabe zum geografischen Informationssystem gewonnen werden.

Die Sentinel-Insekt-Methode ist natürlich flexibel in einer Vielzahl von Szenarien relevant zu sein - überall ein kleiner Käfig platziert werden können, Sterblichkeit, die Daten gesammelt werden können. Beispielsweise haben wir Pestizid mit Sentinel Käfige in und um simulierte städtische und ländliche Gebäude10 und US Militärzelte (unveröffentlichte Daten 2017-2018), zusätzlich mehrere Szenarien der Wüste, gemäßigten und tropischen Studien Vegetation19,20,21,22 [einschließlich hissen Käfige bis zu 60 ft in Kiefer Baldachin zur Messung der vertikalen Mortalität nach einer großen Antenne Anwendung (unveröffentlichten Daten 2011-2017)]. Wenn der Boden zu schwer ist zu Sentinel Käfig Stangen legen oder es bevorzugt wird auf Beton oder Asphalt Bereiche, einfache steht oder Betonsteine können konstruiert werden, um die Pole zu unterstützen. Für Szenarien, gespritzte Flüssigkeit Larviziden zu untersuchen kann das Protokoll legen Sie leere Kunststoff Einweg 1 qt Tassen Larvicide Sentinel standortübergreifend erfassen geändert werden. Diese Schalen können später mit Wasser und Moskito Larven zur Messung der Wirksamkeit der Anwendung7,23,24,25gefüllt werden. Verwenden Sie Bodenfliesen mit der klebrigen Seite bis zu halten Tassen auf dem Platz in Wind und halten Sie Deckel in der Nähe schnell GAP und sammeln Sie folgende Post-Spray Haltezeit zu. Alternativ können Tassen belassen, Wetter natürlich oder in einer kontrollierten Umgebung zu untersuchen, die Langlebigkeit einer verbleibenden Larvicide Behandlung offen gelassen.

Um Tröpfchen Dichte und Tröpfchen Spektren im gesamten Einsatzgebiet zu untersuchen, Folie Spinner platziert werden können in der Nähe von Sentinel Insekt Positionen - aber vorsichtig sein, die der Strudel von den Spinnen-Folien nicht den Fluss des Pestizids Sprays beeinflusst die Sentinel Insekten. Ähnlich wie bei Zuordnung Sterblichkeit, zusätzliche Spalten in der Attributtabelle für Sentinel Standorte für Tröpfchen zugesetzt werden und Parameter abzuleiten interpolierte Deckungen zu färben. Beachten Sie, dass Tröpfchen Sammlung Aspekte hinzufügen fordern eine Erhöhung der Anzahl der Mitarbeiter auf dem Gebiet, mit engagierten Teams zum Beispiel sorgfältig sammeln Folien und unterstützen die Spray-Operator mit Farbstoff Zusatzstoffe. Mit zusätzlichen Materialien und Personal-Teams, können diese Methoden zur gleichzeitige Studien mit Larven und Erwachsenen Wächter, mehrere Anwendungsmodi Durchführung zusammengeführt werden (Antenne, Boden, tragbare), oder Pestizide Side-by-Side (siehe repräsentative Ergebnisse).

Obwohl das wichtigste Protokoll für Moskitos geschrieben wurde, haben wir erfolgreich Freilandversuche mit Sandfliegen und Dreck-Zucht fliegen als Wachposten mit nur geringfügigen Änderungen an den Sentinel Käfige und insgesamt Protokoll durchgeführt. Zum Beispiel, es ist nicht praktisch, sex-adult Sandfliegen oder Dreck Zucht fliegt damit gemischtgeschlechtlichen Chargen in Sentinel Käfige verwendet werden, wie dies die Kolonie zu entlasten wird da weniger Exemplare als benötigt werden, bei der Arbeit mit Mücken. Für Sandfliegen muss ein sehr feines Netz für die Sentinel-Käfige verwendet werden; Sandfliegen sind darüber hinaus nicht betäubt aber stattdessen direkt in fertig montierten Käfige durch eine Kautschuk-Schlitz über ein Loch in die Seite des Zylinders geklebt mit Aspirators hinzugefügt.

Figure 8
Abbildung 8: zusätzliche Szenarien zeigen die Flexibilität des Systems der Sentinel. Die Sentinel-Protokoll für die Untersuchung von Pestizid-Wirksamkeit auf dem Gebiet ist sehr flexibel, siehe Sentinel Käfige gehisst in Abständen bis zu 60 ft durch Kiefer Baldachin (A) und einer nahe gelegenen Freifläche (B) die Fähigkeit der Antenne ULV-Pestizid-Spray, dringen zu untersuchen Vordach. Die Sentinel-System kann leicht angepasst werden um Larvicide Sprays gezielt unreife Moskito Stufen unter Verwendung Einweg Plastikbecher Tröpfchen (C) erfassen drinnen und (D) im Freien in einem simulierten Stadtgebiet zu untersuchen. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Die Wirksamkeit-Mapping-Methode ist natürlich flexibel, da es auf Interpolation beruht ist ein Standardverfahren in den meisten GIS Programme26. Im Allgemeinen verwendet Interpolation bekannte Daten an Sollwerte Daten in der Umgebung schätzen. Es gibt mehrere Arten von Interpolation Techniken27 die ausgewählt werden können basierend auf die räumliche Verteilung und Dichte der Sterblichkeit Punktdaten. Wir haben inverse Distanz Gewichtung (IDW) verwendet, die höheren statistische Gewichtung zuweist bekannten Daten aus Punkte näher zu den unbekannten Punkten wird geschätzt. Problembehandlung für das Gebiet Teil der Methode konzentriert sich auf Kontrolle Sentinel Sterblichkeit (d. h. wenn Sterblichkeit liegt bei > 25 % in Steuerelementen, und es ist sicher, die die Anwendung keine auf die Kontrollzone, etwas in der Umgebung anders als Auswirkungen das Pestizid verursacht Sterblichkeit, die Analyse zu verwirren, werden; dann wird der Prozess müssen wiederholt oder an einen anderen Speicherort verschoben werden). Die häufigsten Sicherheitslücken in der Zuordnung Teil der Methode sind Produktion von Qualität Datentabellen im GIS, so es wichtig ist, sorgfältig Daten einfügen, so dass die richtigen Daten an die richtigen Punkte (reading Frame) ausgerichtet sind und richtig beschriften Spalten für die einzelnen Sterblichkeit Zeit Periode, Pestizid, Geräte usw.

Die Sentinel-Insekt-Methode soll kein absolutes Maß der Wirksamkeit. Vielmehr bietet die Methode die Möglichkeit, relative Wirksamkeit eines Pestizids (unter einer bestimmten Umgebung, Applikationsgeräten, Verdünnungsmittel, Ziel Insekt und Technik) zu dem gleichen Pestizid unter verschiedenen Bedingungen zu vergleichen oder um verschiedene Pestizide zu vergleichen unter den gleichen Bedingungen. Die Methode beinhaltet keine Pestizid Tröpfchen oder Wirkstoff erfassen, obwohl Apparate für die Untersuchung dieser Aspekte können leicht im Raster angrenzend an Käfigen sentinel platziert werden. Die Sentinel-Käfig-Methode misst nicht Wirksamkeit der Pestizid-Sprays gegen Insekten im Flug ist möglich, aber nicht praktisch28. Eine lebhafte Kontroverse besteht, ob die Art des Netzes auf Sentinel Effekte Käfige Messungen von Pestiziden sprühen Wirksamkeit14,29,30,31. Dies ist jedoch nicht sehr relevant für unser Ziel der Untersuchung relative Wirksamkeit einer Formulierung in Umgebungen oder mehrere Formulierungen in einer Umgebung (die mit einem standard Käfig mit einen standard Netztyp durchgeführt werden kann).

Beispielsweise ergibt eine aktuelle Studie im Vergleich Sentinel Käfig Sterblichkeit über drei ähnliche Antenne Pestizid Anwendung Experimente durch Jahrzehnte, jeweils mit verschiedenen Sentinel Käfig Methoden, alle mit vergleichbaren Ergebnissen10getrennt. Ebenso gibt es Kontroverse darüber, ob man auf "saubere" Käfige (d.h., Käfige, die nicht besprüht) Sentinel Insekten übertragen. Wieder Daten von Sentinel Insekt Sterblichkeit betrachtet werden, relative und nicht absolute und beschäftigen sich nicht mit zusätzlichen Mortalität von Sentinel Insekten Kontakt mit Pestiziden festhalten an den Käfig oder mesh. In der Tat, in natürlichen Umgebungen haften Pestizid-Sprays auch natürliche Oberflächen an, die Zielinsekten kontaktieren können. Wir haben bereits festgestellt, dass Mortalität induziert beim Umgang mit Mücken, CO2- oder Kälte-basierte Betäubung enthalten übersteigen Sterblichkeit von der Kontaktaufnahme ein Schädlingsbekämpfungsmittel, das auf Käfige (unveröffentlichte Daten 2008) vorhanden gewesen sein könnte. Eine weitere Einschränkung ist, dass die Relevanz und Anwendbarkeit der sentinel Käfig Sterblichkeit Ergebnisse in den lokalen natürlichen Populationen der Ziel-Insekten noch nicht vollständig bekannt. Allerdings sind die näher genealogisch der Kolonie aufgezogen Sentinel Insekten zu den einheimischen Arten, desto stärker die Anwendbarkeit der Wirksamkeit Karten für die lokale Bevölkerung ist.

In Zukunft wäre es Variationen dieser Methode vorteilhaft für Änderungen angepasst Pestizid-Anwendungen mit unbemannte Flugsysteme (UAS) beinhalten. Aktuelle Entwicklungen mit UAS Einsatz im operativen Vektorregelung gehören Pestizid-Anwendungen (in bestimmten, Larvicide Formulierungen gezielt bei unreifen Moskito Habitat) über und durch sehr unzugänglichen Stellen. Um relevante Informationen aus Sentinel Studien zu erhalten, müssten Sentinel Insekt Stationen in unzugänglichen Stellen so weit wie möglich platziert werden. Ein Beispiel für relevante Informationen testet die Fähigkeit der FH effektiv erreichen einen bestimmten Bereich mit Larvicide, mit der nur Line-of-Sight Pilotierung von einem Betreiber, die den Zielbereich nicht direkt beobachten kann. Dieses Szenario erfordern die Entwicklung von anderen FH bereitstellen und Abrufen von Sentinel Käfige oder Larvicide Sammlung Tassen und andere zu Rekord Meteorologie in dieser unzugänglichen Zielgebieten. Mortalitätsdaten aus solch einem Szenario können analysiert werden, in das GIS als mit etablierten Szenarien, mit zusätzlichen Karten-Features wie Auswirkungen von natürlichen Hindernissen, Mikrohabitat und Mikrometeorologie, die von solchen Effekten während mehr Standardanwendungen mit abweichen LKW, Flugzeug oder tragbare Sprühgeräte. Erweiterte Funktionen von GIS wie Visualisierung von 3-dimensionalen Interpolationen der Sterblichkeit von erweiterten Sentinel Platzierung in vertikale und horizontale Gitter sind auch Möglichkeiten für sowohl Standard-als auch aufstrebende Anwendungstechnologie.

Disclosures

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte offenlegen.

Acknowledgments

Wir möchten die Wissenschaftler und Techniker auf das Coachella Valley Mücke und Vector Control Bezirks- und der US-Armee medizinische Forschung Direktion-Kenia Experte Produktion der Kolonie Insekten Exemplare und Zusammenarbeit an der Feldstudien zu danken die unveröffentlichten Daten in die repräsentativen Ergebnisse produzieren. Diese Forschung wurde durch das US Department of Agriculture (USDA) - Agricultural Research Service und dem US Department of Defense (DoD) bereitgestellt Krieg - Fighter-Schutzprogramm (DWFP) unterstützt. Erwähnung von Handelsnamen oder kommerzielle Produkte in dieser Publikation ist ausschließlich zum Zweck der Bereitstellung von spezifischen Informationen und bedeutet keine Empfehlung oder Billigung durch die USDA, DoD oder DWFP. Die USDA ist eine Chancengleichheit Anbieter und Arbeitgeber.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Bioassay racks:
plastic tube lid Visipak 192224
1.25-in PVC coupler SCH-40 Lowes PVC 00100 0800
1/4-in OD brass rod K&S Engineering 1165
Name Company Catalog Number Comments
Bioassays:
FDA silicone o-rings S-500-70 Alltek seal and packing PA-2127-12
fine screening Walmart 40310-0000-063 white T-310
cotton balls Fisher Brand Large cotton balls (non-sterile)
plastic tubes Visipak 775674
regulator Norgren R83-200-RNEA
reguilator gauge Wika Instrument Corp 4315031
CO2 canister 20 lb capacity
CO2 chamber Mainstays Modified tupperware container (16 cup)
1/4-in tygon tubing
maglite aspirator and tubes Bioquip 2809D D-cell maglite aspirator
modified PVC pipe for o-rings Lowes PVC 07112 0600 SCH-40 pipe modified by cutting tool on inner surface to accommodate bioassay tube
Pupal separator John W. Hock Co. 5412
Name Company Catalog Number Comments
Field sentinel cages:
1/2 pt cardboard can body Neptune 295
1/2 pt cardboard cup lid Neptune 295A
coarse screening Walmart 41721-0540-063 white T-1721
Velcro cable ties 8-in x 1/2-in Velcro Brand VEL91140
rubber band National Institutes for the Blind 7510-01-058-9974
cotton balls Fisher Brand Large cotton balls (non-sterile)
PVC spacers Lowes PVC 04010 0600 Modified by cutting into 18-in length pieces and cutting half off of the end (lengthwise)
Tray totes Blue Ridge Thermalforming 400-3N-WHT-ABS
Name Company Catalog Number Comments
Field bioassay set-up equipment:
60-in tread-in post Jeffers.com T8T4
1 ft3 cardboard boxes USP S-18344
Deli cups WNA Inc. APCOMBO16
18-in x 18-in linolium tiles Lowes LSS4307BPS
Name Company Catalog Number Comments
Sentinel cage transport:
48 qt Island Breeze cooler Igloo
16-in x 19-in. terry towels Ability One 7920-01-454-1150
garbage bags 13 gal (kitchen size)

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Britch, S. C., et al. A mobile App for military operational entomology pesticide applications. Journal of the American Mosquito Control Association. 30, (3), 234-238 (2014).
  2. Britch, S. C., et al. Evaluation of barrier treatments on native vegetation in a southern California desert habitat. Journal of the American Mosquito Control Association. 25, (2), 184-193 (2009).
  3. Britch, S. C., et al. Residual mosquito barrier treatments on U.S. military camouflage netting in a southern California desert environment. Military Medicine. 175, (8), 599-606 (2010).
  4. Britch, S. C., et al. Longevity and efficacy of bifenthrin treatment on desert-pattern US military camouflage netting against mosquitoes in a hot-arid environment. Journal of the American Mosquito Control Association. 27, (3), 272-279 (2011).
  5. Rogers, A. J., Beidler, E. J., Rathburn, C. J. A cage test for evaluating mosquito adulticides under field conditions. Mosquito News. 17, (3), 194-198 (1957).
  6. Rathburn, C. B. Jr, Rogers, A. J., Boike, A. H. Jr, Lee, R. M. Evaluation of the ultra-low volume aerial spray technique by use of caged adult mosquitoes. Mosquito News. 29, 376-381 (1969).
  7. Aldridge, R. L., Golden, F. V., Britch, S. C., Blersch, J., Linthicum, K. J. Truck mounted Natular 2EC (spinosad) ULV residual treatment in a simulated urban environment to control Aedes aegypti and Aedes albopictus in North Florida. Journal of the American Mosquito Control Association. 34, (1), 53-57 (2018).
  8. Chaskopoulou, A., Latham, M. D., Pereira, R. M., Koehler, P. G. Droplet sampling of an oil-based and two water-based antievaporant ultra-low volume insecticide formulations using Teflon- and magnesium oxide-coated slides. Journal of the American Mosquito Control Association. 29, (2), 173-176 (2013).
  9. Bonds, J. A. S., Greer, M. J., Fritz, B. K., Hoffmann, W. C. Aerosol sampling: comparison of two rotating impactors for field droplet sizing and volumetric measurements. Journal of the American Mosquito Control Association. 25, (4), 474-479 (2009).
  10. Britch, S. C., et al. Aerial ULV control of Aedes aegypti with naled (Dibrom) inside simulated rural village and urban cryptic habitats. PLoS One. 13, (1), e0191555 (2018).
  11. Knapp, F. W., Roberts, W. W. Low volume aerial application of technical malathion for adult mosquito control. Mosquito News. 25, 46-47 (1965).
  12. Lofgren, C. S., Anthony, D. W., Mount, G. A. Size of aerosol droplets impinging on mosquitoes as determined with a scanning electron microscope. Journal of Economic Entomology. 66, (5), 1085-1088 (1973).
  13. Haile, D. G., Mount, G. A., Pierce, N. W. Effect of droplet size of malathion aerosols on kill of caged adult mosquitos. Mosquito News. 42, 576-583 (1982).
  14. Hoffmann, W. C., Fritz, B. K., Farooq, M., Cooperband, M. F. Effects of wind speed on aerosol spray penetration in adult mosquito bioassay cages. Journal of the American Mosquito Control Association. 24, (3), 419-426 (2008).
  15. Aldridge, R. L., Wynn, W. W., Britch, S. C., Linthicum, K. J. Aspirator gun for high-throughput mosquito bioassays. Journal of the American Mosquito Control Association. 28, (1), 65-68 (2012).
  16. Aldridge, R. L., et al. High-throughput mosquito and fly bioassay system for natural and artificial substrates treated with residual insecticides. Journal of the American Mosquito Control Association. 29, (1), 84-87 (2013).
  17. Abbott, W. S. A method of computing the effectiveness of an insecticide. Journal of Economic Entomology. 18, 265-267 (1925).
  18. Healy, M. J. R. A table of Abbott's correction for natural mortality. The Annals of Applied Biology. 39, (2), 211-212 (1952).
  19. Britch, S. C., et al. Evaluation of ULV and thermal fog mosquito control applications in temperate and desert environments. Journal of the American Mosquito Control Association. 26, (2), 183-197 (2010).
  20. Britch, S. C., et al. Evaluation of ULV applications against Old World sand fly (Diptera: Psychodidae) species in equatorial Kenya. Journal of Medical Entomology. 48, (6), 1145-1159 (2011).
  21. Dunford, J. C., et al. SR450 and Superhawk XP applications of Bacillus thuringiensis israelensis against Culex quinquefasciatus. Journal of the American Mosquito Control Association. 30, (3), 191-198 (2014).
  22. Haagsma, K. A., Breidenbaugh, M. S., Linthicum, K. J., Aldridge, R. L., Britch, S. C. Development of Air Force aerial spray night operations: high altitude swath characterizations. U.S. Army Medical Department Journal. 47-59 (2015).
  23. Henke, J. A. Fighting Aedes aegypti in the desert. Proceedings and Papers of the Eighty-Fifth Annual Conference of the Mosquito and Vector Control Association of California. 85, 24-25 (2017).
  24. Britch, S. C., et al. Ultra-low volume application of Natular 2EC (spinosad) larvicide as a residual in a tropical environment against Aedes and Anopheles species. Journal of the American Mosquito Control Association. 34, (1), 58-62 (2018).
  25. Golden, F. V., et al. Ultra-low volume application of Natular 2EC (spinosad) as a residual in a hot-arid environment against Aedes aegypti. Journal of the American Mosquito Control Association. 34, (1), 63-66 (2018).
  26. Hay, S. I., Lennon, J. J. Deriving meteorological variables across Africa for the study and control of vector-borne disease: a comparison of remote sensing and spatial interpolation of climate. Tropical Medicine & International Health. 4, 58-71 (1999).
  27. Tunalioğlu, N. Quality test of interpolation methods on steepness regions for the use in surface modelling. Technical Gazette (Tehnički vjesnik). 19, (3), 501-507 (2012).
  28. Rathburn, C. B., Rogers, A. J. Field tests of mists and dusts against caged adults of Aedes taeniorhynchus (Wied.). Report of the Thirtieth Annual Meeting, Florida Anti-Mosquito Association. 38-43 (1959).
  29. Breeland, S. G. Effect of test cage materials on ULV malathion evaluations. Mosquito News. 30, 338-342 (1970).
  30. Boobar, L. R., Dobson, S. E., Perich, M. J., Darby, W. M., Nelson, J. H. Effects of screen materials on droplet size frequency-distribution of aerosols entering sentinel mosquito exposure tubes. Medical and Veterinary Entomology. 2, 379-384 (1988).
  31. Bunner, B. L., Posa, F. G., Dobson, S. E., Broski, F. H., Boobar, L. R. Aerosol penetration relative to sentinel cage configuration and orientation. Journal of the American Mosquito Control Association. 5, (4), 547-551 (1989).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics