Bestemme Egg befruktning Rate av Bemisia tabaci med en Cytogenetic teknikk

Genetics

Your institution must subscribe to JoVE's Genetics section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Vi presenterer en enkel cytogenetic teknikk bruker 4, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) å avgjøre befruktning hastigheten og primære sex forholdet haplodiploid invasiv pest Bemisia tabaci.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Bondy, E. C., Hunter, M. S. Determining the Egg Fertilization Rate of Bemisia tabaci Using a Cytogenetic Technique. J. Vis. Exp. (146), e59213, doi:10.3791/59213 (2019).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

A few species of sap-sucking whiteflies are some of the most damaging terrestrial pests worldwide because of the crop damage they inflict and plant viruses they vector. Til tross for mange studier av biologi av disse artene i ulike miljøer, en nøkkel livshistorie parameter, avkom sex prosenter, har fått lite oppmerksomhet, men er viktig for å forutsi populasjonsdynamikk. Primære sex ratio (sex ratio på oviposition) av Bemisia tabaci har aldri blitt rapportere, men det finnes ved å bestemme egg befruktning frekvensen av denne haplodiploid insekt. Teknikken innebærer dechorionation egg med blekemiddel, en rekke fiksering trinn og påføring av de generelle DNA fluorescerende flekken, DAPI (4, 6-diamidino-2-phenylindole, en DNA-bindende fluorescerende farge), binde til kvinnelige og mannlige pronuclei. Her presenterer vi teknikken, og et eksempel av anvendelsen, å teste om en endosymbiotic bakterie, Rickettsia sp. nr. bellii, påvirket primære sex forholdet mellom B. tabaci. Denne metoden kan hjelpe i befolkningsstudier av whiteflies, eller å finne ut om sex tildeling finnes med visse miljømessige stimuli.

Introduction

Studiet av sex tildeling eller relativ investeringen i mannlige og kvinnelige avkom, er en hjørnestein i atferdsdata økologi1,2,3. I tillegg til sin makt for å teste adaptive modeller av atferd, kan vite sex allokering strategi en organisme forbedre modeller av sin populasjonsdynamikk. I mange arter kontrolleres sex tildeling av mødre. For å avgjøre sex tildeling, er det viktig å bestemme primære sex ratio eller andelen kvinner ved egg deponering. Selv om sex ratio på voksen fremveksten kan gi hint til sex tildeling, kan differensial utviklingsmessige dødelighet mellom mannlige og kvinnelige yngel vanligvis skew voksen sex ratio vesentlig. Hos noen arter Hymenoptera, rekkefølgen av insekter inneholder ants, bier og veps, er primære sex ratio fastslått med cytogenetic analyser, farging embryo for å vise genetisk DNA. Fordi hymenopterans er haplodiploid, et begynnende mannlige egg er haploid og inneholder bare den kvinnelige pronucleus (n), mens begynnende kvinnelig egg er diploide og inneholder både mannlige og kvinnelige pronuclei (2n). Selv om Aleyrodidae, sap-fôring familien sann bugs (Nebbmunner) kjent som whiteflies, er også haplodiploid, har det ikke vært etablert analysen til å finne primære sex ratio i disse insekter. Dette er kanskje overraskende gitt intensiteten i studiet av noen kosmopolitiske alvorlige skadedyr i denne familien og betydningen av sex prosenter i konkurransedyktige interaksjoner whiteflies4,5,6,7 ,8,9,10 og populasjonsdynamikk generelt. I haplodiploid insekter også, er sex ratio ubegrenset av sex besluttsomhet systemer, slik at muligheten for selektiv befruktning og labil sex forholdstall som varierer med miljø2. Her presenterer vi en teknikk for å bestemme primære sex ratio av arter kompleks av whiteflies kollektivt kjent som sweetpotato whitefly, B. tabaci. Dette en Artsnavnet omfatter mer enn 28 arter verdensomspennende11og inkluderer noen av de mest ødeleggende globale invasiv skadedyr12,13. Bruk av denne teknikken å avgjøre sex tildeling mønstre i B. tabaci og andre Aleyrodidae vil gi en mer grundig undersøkelse av variabler, inkludert temperatur, verten anlegget, endosymbiotic bakterier eller anlegg/whitefly patogener, som kan påvirke whitefly primære sex forholdstall og whitefly populasjonsdynamikk.

Vi er klar over noen sammenlignbar egg flekker teknikker for B. tabaci. Protokollen er praktisk med flekker metodene som brukes for andre insekt-egg14 som den utelater en overnatting fiksering trinn, og derfor kan fullføres innen 3 h. Som et eksempel på et program, en endosymbiotic bakterie, Rickettsia sp. nr. bellii, er assosiert med kvinnelig skjevhet i våre laboratorier linjer B. tabaci Midtøsten-Asia Minor 1 (MEAM1)15,16. I en B. tabaci MEAM1 laboratorium linje ("MAC1," samlet fra Maricopa Agricultural Center), vi teste om Rickettsia-infiserte (R+) kvinner gjødsle mer egg enn infisert (R-) kvinner.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Merk: Kontroller at alt arbeid er utført ved romtemperatur i et godt ventilert område eller under avtrekksvifte. Alle "drops" i denne protokollen er definert som 5-20 µL, avhengig av operatørens preferanse.

1. første installasjon

  1. Kan kvinne whiteflies å oviposit på ren blader. Klipp burene eller blader kuttet til å passe på agar i en Petriskål er eksempler på oviposition arenas. Lage et coverable hull i klippet bur eller Petriskål dekselet for å sette inn og fjerne voksne. Alternativt kan du raskt sette et fartøy samlet voksne på is og deretter sette dem på bladet. Begrense tiden mellom oviposition og egg fiksering til mer enn 60 min, for å sikre observasjon av sæd overgangen til den faderlige pronucleus i egg.
    Merk: Egg ikke fjernet fra bladet kan bli oppdratt til voksen registrere voksen sex ratio.
  2. Før eller under whitefly oviposition, forberede en microscope skyve av rensning den med såpe og vann, tørk den godt, og deretter strekke et stykke parafin film over ene enden, sørge for at parafin filmen overflaten ikke bryte (figur 1).
    Merk: Parafin filmen er hydrofobe og semi ugjennomsiktig, tillater væske å danne drops og egg å lettere se.

2. Dechorionation

  1. Med et glass Pasteur Pipetter, legge dråper bleike løsning (0,83% natriumhypokloritt) til parafin filmen.
    Merk: Det er enklere å holde orden på egg hvis bare 2-3 egg i hver dråpe. Alternativt, for å administrere et stort egg tall, samle egg i dråper av 1 x fosfat-bufret saltvann (PBS).
    Forsiktig: Bleach er etsende; Bruk hansker når du håndterer bleke og pust ikke.
  2. Fjern de voksne whiteflies fra bladet.
  3. Sett bladet under et mikroskop for å se eggene klart og samle egg enkeltvis og nøye med en tynn sonde. For å gjøre en sonde, setter du inn en minuten nadel pin på 45° eller på en komfortabel arbeider vinkel i en smeltet pipette tips (figur 2).
  4. Overføre eggene blekemiddel eller 1 x PBS. Hvis bruker 1 x PBS, fjerne 1 x PBS med et glass Pasteur Pipetter når alle eggene er samlet inn, og deretter legge blekemiddel til eggene.
    Merk: Når samle egg, sakte løfte egg fra sin base til pedicel fjernes fra bladet. Pedicel er klebrig, og egg vil vanligvis holde seg til probespissen før den er dyppet i blekemiddel.
    Merk: Det anbefales å bruke separat glass Pasteur Pipetter for reagenser, og Pipetter kan endres med varme å gjøre tips smalere og redusere risikoen for tilfeldigvis aspirating whitefly egg. For å hindre rester og forurensning, rengjør Pipetter med deionisert vann etter hver bruk.
  5. Vent i 10 min. Hvis det er interesse for embryogenesis i egg eldre enn 1 h, la eggene i blekemiddel i opptil 15 min.
    Merk: For egg som er opptil 1 h gamle, er 10 min tilstrekkelig.

3. fiksering

Merk: Disse trinnene er tatt fra en Hymenopteran protokollen17.

  1. Fjern blekemiddel (inneholder plasmocitara fragmenter) med et glass Pasteur pipette og kaste den. Legge til drops iseddik med et glass Pasteur Pipetter og vente 3 min.
    Forsiktig: Fortsette med dette under avtrekksvifte. Iseddik er etsende; slitasje hansker når håndtering iseddik og ikke pust, spesielt i kombinasjon med gjenværende blekemiddel.
  2. Fjerne iseddik med et glass Pasteur pipette og legge dråper Clarkes løsning (3:1 av absolutt etanol: iseddik) med et glass Pasteur pipetter. Vent til de fleste av løsningen har fordampet (eller 10 min maks).
  3. Legge til dråper 70% etanol eggene med et glass Pasteur pipette og vente til de fleste av etanol har fordampet (eller 10 min. maks).

4. farging

  1. Fjern alle gjenværende etanol med et glass Pasteur pipette og legge dråper 1 x PBS til eggene med et glass Pasteur pipette å få pH nær 7.0. Satt mikroskop lysbildet i en fuktighet kammer å hindre uttørking, for eksempel i en tom pipette tips boks med en våt tørkepapir inne (Figur 3). Vent minst 30 min.
    Merk: Dette er det beste punktet hvis pause er nødvendig, som fuktighet kammeret kan hindre uttørking.
  2. Fjerne 1 x PBS med et glass Pasteur pipette, og legge til dråper 0,1 μg/mL DAPI, en DNA fluorescerende flekk, med et glass Pasteur pipetter. Satt mikroskop lysbildet i en mørk fuktighet kammer og vent minst 15 minutter.
    Forsiktig: DAPI er en irriterende, så håndtere det med hansker.

5. vask

  1. Fjern DAPI med et glass Pasteur pipette.
  2. Legge til dråper 1 x TBST (5 x løsning laget av 30 g Tris, 43,8 g NaCl, 5 mL polysorbat 20 og 1.0 g NaN3 [pH 7.5] og brakt til 1 L med PCR klasse vann) til eggene med et glass Pasteur pipetter. Vent på 5 minutter før du fjerner 1 x TBST med et glass Pasteur pipette. Gjenta dette trinnet 2 ganger.

6. montering

  1. Etter siste vask, Pipetter forsiktig alle eggene fra parafin filmen på en ren del av mikroskopet lysbildet. Fjerne overflødig 1 x TBST; deretter legge til 20 µL av montering media (80% glyserol og 20% 1 x TBST med 2% n-propyl-gallate) og plassere et rent dekke lysbilde på egg.
  2. For langtidslagring, forsegle dekke lysbildet med klart neglelakk, og deretter lagre lysbildet i mørket på 2 ° C eller umiddelbart vise den under fluorescerende mikroskop.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

For å teste om Rickettsia påvirker befruktning frekvensen av B. tabaci MEAM1 kvinner, oppdratt vi Rickettsia-infisert (R+) eller infisert (R-) B. tabaci på cowpea planter (Vigna unguiculata) i separate bur på 27 ° C, 70% relativ fuktighet og en 16 h lys/8 h mørke fotoperiode. R+ og R- fjerde skikkelsen whiteflies ble forsiktig fjernet fra blader og isolert i 200 µL stripe rør. Når voksne kom, de var samlet i grupper på 50% kvinner og overført til ren blader i Petri retter (n = ~50-100/leaf) for 4 dager med mating. Grupper av ca 20 kvinner og flere menn ble deretter overført til en ren blad disk (ett for R- voksne, ett for R+ voksne) i 35 mm Petri retter på 1% agar. Petriskål lokket hadde vært kuttet ut og fint stoff mesh brukes for containment forhindret også overflødig kondens. Etter ca 45 min, alle voksne ble fjernet, noen av eggene ble brukt for å bestemme befruktning frekvensen og eggene som ikke ble samlet var oppdratt til voksen beregne voksen sex ratio. En kohort for en enkelt dag, både R+ og R- whiteflies, ble definert som en blokk. Det var sju blokker for å beregne befruktning satsen eller primære sex ratio, mens det var seks kvartaler for beregning av voksen sex ratio, som det var ikke nok leftover egg fra ett kvartal til bakre til voksen. En generalisert lineær modell ble brukt i statistikkpakke R for å avgjøre om befruktning priser eller voksen sex forhold var betydelig påvirket av Rickettsia infeksjon og/eller blokkere. Svar variablene var andelen av befruktet egg/alle egg eller andelen kvinnelige voksne/alle voksne, mens forklarende variabler var blokk og Rickettsia infeksjonsstatus.

Egg dechorionation etterfulgt av DAPI kjernefysiske flekker tillatt entydig tildelingen befruktning (og embryo kjønn) når observert med et fluorescerende mikroskop (Figur 4). For dette eksperimentet, 90 egg lagt av R-B. tabaci MEAM1 kvinner og 82 egg av R+B. tabaci MEAM1 kvinner ble scoret. Som for egg oppdratt til voksen, ble 60 R- og 95 R+ voksne scoret. Mens en kvinnelig skjevhet i voksen sex forhold har vist konsekvent i tidligere studier15,18,19, i denne studien, voksen R+ var sex ratio (69% kvinner, median) kvinnelige-partisk forhold til R - kvinner (50% kvinner, median), men sex forholdstall i de to behandlingene var ikke signifikant forskjellig (χ2 = 1.02, df = 1, p = 0.31; Figur 5). De primære R- sex ratio (60% befruktet egg, median) var kvinnelige-partisk sammenlignet med R+ sex ratio (44% befruktet egg, median), men var heller ikke signifikant forskjellig (χ2 = 0,51, df = 1, p = 0.47), gir ingen bevis for større befruktning priser av R+ kvinner (figur 5). Blokk også ikke har en betydelig effekt på primært (χ2 = 0.29, df = 1, p = 0,59) eller voksen (χ2 = 1,20, df = 1, p = 0,27) sex ratio.

Figure 1
Figur 1: bilde av et mikroskop lysbilde med parafin film og dråper blekemiddel. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 2
Figur 2: et eksempel på en sonde, gammeldags med varme, fra en pipette tips og en minuten nadeln pin. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 3
Figur 3: et eksempel på en fuktighet kammer, fashioned fra en tom pipette Verktøytips-boksen og en wet papirhåndkle. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 4
Figur 4: Fluorescerende mikroskop bilder av B. tabaci egg. (en) B. tabaci MEAM1 befruktet, begynnende kvinnelige egget. (b) Unfertilized, begynnende mannlige egg. Egg var fast på mindre enn 1 time etter oviposition og farget med DAPI. Grunnlaget for hvert egg er fluorescing på grunn av bakteriell DNA (Portiera, Hamiltonella, og muligens Rickettsia) i bacteriome stamfar cellen, som er inkludert i avslappet egg20,21. I hvert egg, den kvinnelige pronucleus er nær midten av egg og kvinnelige egget bare, sperm er synlig som en lyse strek nær toppen av egget ligger antagelig en autofluorescing micropyle. Bildene er skjermbilder tatt fra en Z-stabel generert video, produsert av en laserskanning AC confocal invertert mikroskop. Skala barer ble beregnet fra tidligere mikroskop bilder. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 5
Figur 5: Primære og voksen sex prosenter av Rickettsia-smittet eller infisert B. tabaci. Boksen og whisker tomter primære sex ratio (prosentandel av befruktede egg eller andelen kvinnelige zygotes) i svart sammenlignet med voksen sex ratio (prosent av voksne kvinner) i grått, av Rickettsia-infisert (R+) og infisert (R -) B. tabaci MEAM1, "MAC1" genetisk linje. Boksen og whisker tomter vise medianen den midterste linjen, gjennomsnittet som et plusstegn og øvre og nedre kvartiler som linjer som gjør endene av boksen, og området er representert i ytre linjene fra boksen. For R- egg scoret: n = 90; for R+ egg scoret: n = 82. For R- voksne telles: n = 60; for R+ voksne telles: n = 95. I en logistisk analyse av primære sex ratio (andelen befruktede egg) i statistikkpakke R, fant ingen signifikante effekter for blokk (n = 7, χ2 = 0.29, df = 1, p = 0,59) eller for Rickettsia infeksjon (χ2 = 0,51, df = 1, p = 0.47). Voksen sex-forhold, som påvirket av blokken (n = 6) og Rickettsia infeksjonsstatus tilsvarende ble analysert. Her også, ingen signifikante effekter ble funnet for blokk (χ2 = 1,20, df = 1, p = 0,27) eller Rickettsia infeksjon (χ2 = 1.02, df = 1, p = 0.31). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Denne protokollen er først til å fange befruktning satsen eller primære sex forholdet mellom B. tabaci. Utfordringen med denne protokollen er at det krever forskere å lære å håndtere whitefly egg raskt, sikre at ikke mer enn 1 h har gått siden eggene ble oviposited til de er fast. Under innledende eksperimenter var egg som ble løst på 3t eller flere postoviposition for gammel til å observere befruktning, som syngamy hadde skjedd og mitotisk divisjoner ble igangsatt. Mellom 1 til 3 h tok pronuclei en avrundet form. Mens tidlig tilstedeværelsen av to kjerner indikerer et befruktet egg, litt senere, apposition av to kjerner i forberedelse til syngamycan synes å være en kjernen, og senere igjen, de to produktene i første mitotisk Division finnes i både mannlige og kvinnelige egg. Derfor skillet mellom kjønnene er ikke klart på disse senere tidspunkt, og vi anbefaler begrense intervallet fra oviposition til fiksering til 1 h som en konservativ. Det er også vanskelig å lære å være forsiktig med egg hver overføring av flytende slik at de ikke er tilfeldigvis aspirated inn pipette. På tiden vise egg under fluorescerende mikroskop, kan noen av eggene har brutt under protokollen, så disse egg kan ikke sexed og regnet som pronuclei og eggeplomme kan ha rømt. Ellers når operatøren blir komfortabel med denne fremgangsmåten, kan protokollen fullføre beleilig innenfor 3 h, som det ikke krever en overnatting fiksering trinn. Det er også fleksible i at den kan modifiseres til stain eldre egg, for disse forskerne dekke utvikling.

Bruk av denne protokollen inkluderer forskning på sex tildeling. Selv om mange dusinvis av studier av whitefly biologi har rapportert voksen sex prosenter i ulike miljøer, voksen sex ratio forvirre sex tildeling av mor med sex-spesifikke utviklingsforstyrrelser dødelighet av nymfer og gjøre det umulig å finne årsaken Eventuelle sex ratio mønster. Cytogenetic teknikken beskrevet her kan muligheten for forståelse whitefly sex tildeling mønstre mer generelt. Mens store dispersiv befolkningen B. tabaci og andre skadedyr som drivhuset-whitefly, kan Trialeurodes vaporariorum, forutsies resultere i 1:1 sex prosenter, ofte utstilt i laboratoriet innstillinger22, 23, vi også forutsi at reproduktive forstyrrelser, endosymbionts og potensielt verten anlegget kvalitet kan påvirke primære sex ratio. At disse samme faktorer kan også påvirke sex-spesifikke dødelighet mønstre under utvikling, systematisk forvrenger kjønnsforholdet anslår, understreker behovet for en direkte mål på primære sex ratio.

Mens kvinnelige skjevhet knyttet Rickettsia infeksjon er konsekvent funnet i genetisk linjen "MAC1"15,18,19, var voksen sex forholdstallene ikke betydelig kvinnelige partisk i denne studien. Primære sex ratio observert med cytogenetics teknikken ikke var betydelig partisk enten. Vi censused primære og voksen sex prosenter av B. tabaci kvinner på bare 1 dag, begynnelsen av en oviposition kamp, når kvinner var 4-5 dager gamle, så sex forholdstallene studerte ikke kan har representert sex forholdstallene som vi observert over lengre perioder. Likevel teknikken gjorde det mulig å fastslå befruktning satsen eller primære sex ratio og, i dette tilfellet, viste en korrespondanse mellom primære og voksen sex forholdstallene.

Bestemme befruktning kan også være nyttig i tilfeller der forskere vil kanskje bestemme reproduktiv isolasjon blant whitefly populasjoner. Mens det har vært et spørsmål om noen kontroverser12,24,25, det er nå generelt akseptert at navnet B. tabaci refererer til titalls kryptisk Art, med bevis blir levert av både genetiske divergens og krysset tester der noen kvinner er produsert12,25. I disse studiene, ville det være av interesse å vite hvor isolasjon oppstår. Overføres sæd, og heterospecific sperm gjødsle egg, eller, forsøkte parring mislykkes? Om fastsettelse av primære sex ratio, denne teknikken kan bestemme om primære sex ratio er påvirket av endosymbionts, egoistisk genetiske elementer eller en av mange faktorer, blant annet fra Art, konkurrenter, rovdyr, parasitoider, patogener, verten anlegget eller abiotiske effekter.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne ikke avsløre.

Acknowledgments

Denne forskningen ble finansiert av en NSF stipend (DEB-1020460) til M.S.H. og USDA AFRI stipend (2010-03752) til M.S.H. Forfatterne takker Brennan Zehr til farging whitefly egg med mye dyktighet og Zen. Forfatterne takker Mike Riehle for tillater bruk av hans fluorescerende mikroskop for bildebehandling. Forfatterne takker Suzanne Kelly og Marco Gebiola for egg bilder. Forfatterne takker Suzanne Kelly og Jimmy Conway for å hjelpe på avgjørende øyeblikk under forsøkene.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
1x PBS Any
1x TBST Any 5x solution made from 30 g Tris, 43.8 g NaCl, 5 mL Tween-20 and 1.0 g NaN3 pH 7.5, and brought to 1 L with PCR grade water
Bleach Clorox Any household bleach will work as long as it can be diluted to 0.83% Sodium hypochlorite
Clear nail polish Any
DAPI dilactate Santa Cruz Biotechnology sc300415
Ethanol Any Dilute to 70% EtOH
Fluorescent microscope Nikon Nikon Eclipse 50i was used in this experiment, but any fluorescent microscope with 340/380 nm excitation filter and at least 4-10x magnification can be used
Glacial acetic acid Mallinckrodt UN2789
Glycerol Any
Microscope Wild A Wild M5A microscope was used for this experiment, but any microscope where the operator can clearly see the whitefly eggs can be used
Microscope slide covers Any Methods are for 18 mm x 18 mm sized slide covers. More mounting media will need to be added for larger slide covers.
Microscope slides Any
Minuten nadel pins BioQuip 1208SA Minuten nadel pins are optional for fashioning as probes with pipette tips
NaCl Any
NaN3 Any
n-propyl-gallate Sigma/Santa Cruz Biotechnology P3130/sc-250794
Parafilm Bemis
Pasteur pipettes Fisher Scientific 13-678-20A Fisherbrand Disposable Borosilicate glass Pasteur pipettes 5.75 in. A Bunsen burner may also be needed if operator would like to lengthen and narrow pipettes
PCR grade water Any
Pipette tips Any Pipette tips are optional for fashioning as probes with minuten nadel pins
Small dropper bulb Any Must fit on Pasteur pipette
Tris Any
Tween-20 Any

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Charnov, E. L. Sex ratio in spatially structured populations. The Theory of Sex Allocation. May, R. M. Princeton University Press. Princeton, NJ. 67-92 (1982).
  2. Godfray, H. C. J. Parasitoids: behavioral and evolutionary ecology. Princeton University Press. Princeton, NJ. (1994).
  3. Bourke, A. F. G., Franks, N. R. Social Evolution in Ants. Princeton University Press. Princeton, NJ. (1995).
  4. Pascal, S., Callejas, C. Intra- and interspecific competition between biotypes B and Q of Bemisia tabaci (Hemiptera: Aleyrodidae) from Spain. Bulletin of Entomological Research. 94, (4), 369-375 (2004).
  5. Liu, S. -S., et al. Asymmetric mating interactions drive widespread invasion and displacement in a whitefly. Science. 318, (5857), 1769-1772 (2007).
  6. Crowder, D. W., Sitvarin, M. I., Carrière, Y. Mate discrimination in invasive whitefly species. Journal of Insect Behavior. 23, (5), 364-380 (2010).
  7. Crowder, D. W., Sitvarin, M. I., Carrière, Y. Plasticity in mating behaviour drives asymmetric reproductive interference in whiteflies. Animal Behaviour. 79, (3), 579-587 (2010).
  8. Tsueda, H., Tsuchida, K. Reproductive differences between Q and B whiteflies, Bemisia tabaci, on three host plants and negative interactions in mixed cohorts. Entomologia Experimentalis et Applicata. 141, 197-207 (2011).
  9. Wang, P., Crowder, D. W., Liu, S. -S. Roles of mating behavioural interactions and life history traits in the competition between alien and indigenous whiteflies. Bulletin of Entomological Research. 102, (4), 395-405 (2012).
  10. Sun, D. -B., Li, J., Liu, Y. -Q., Crowder, D. W., Liu, S. -S. Effects of reproductive interference on the competitive displacement between two invasive whiteflies. Bulletin of Entomological Research. 104, (3), 334-346 (2014).
  11. Liu, S. -S., Colvin, J., De Barro, P. J. Species concepts as applied to the whitefly Bemisia tabaci systematics: how many species are there? Journal of Integrative Agriculture. 11, (2), 176-186 (2012).
  12. Invasive Species Specialist Group. Global Invasive Species Database. Available from: http://iucngisd.org/gisd/100_worst.php (2018).
  13. Gilbertson, R. L., Batuman, O., Webster, C. G., Adkins, S. Role of the insect supervectors Bemisia tabaci and Frankliniella occidentalis in the emergence and global spread of plant viruses. Annual Review of Virology. 2, (1), 67-93 (2015).
  14. Giorgini, M., et al. Rickettsia symbionts cause parthenogenetic reproduction in the parasitoid wasp Pingala soemius (Hymenoptera: Eulophidae). Applied and Environmental Microbiology. 76, (8), 2589-2599 (2010).
  15. Himler, A. G., et al. Rapid spread of a bacterial symbiont in an invasive whitefly is driven by fitness benefits and female bias. Science. 332, (6026), 254-256 (2011).
  16. Cass, B. N., et al. Dynamics of the endosymbiont Rickettsia in an insect pest. Microbial Ecology. 70, (1), 287-297 (2015).
  17. Vavre, F., de Jong, J. H., Stouthamer, R. Cytogenetic mechanism and genetic consequences of thelytoky in the wasp Trichogramma cacoeciae. Heredity. 93, (6), 592-596 (2004).
  18. Cass, B. N., et al. Conditional fitness benefits of the Rickettsia bacterial symbiont in an insect pest. Oecologia. 180, (1), 169-179 (2016).
  19. Hunter, M. S., Asiimwe, P., Himler, A. G., Kelly, S. E. Host nuclear genotype influences phenotype of a conditional mutualist symbiont. Journal of Evolutionary Biology. 30, 141-149 (2017).
  20. Gottlieb, Y., et al. Inherited intracellular ecosystem: symbiotic bacteria share bacteriocytes in whiteflies. FASEB Journal. 22, (7), 2591-2599 (2008).
  21. Luan, J., Sun, X., Fei, Z., Douglas, A. E. Maternal inheritance of a single somatic animal cell displayed by the bacteriocyte in the whitefly Bemisia tabaci. Current Biology. 28, (3), 459-465 (2018).
  22. Guo, J. -Y., Cong, L., Wan, F. -H. Multiple generation effects of high temperature on the development and fecundity of Bemisia tabaci (Gennadius) (Hemiptera: Aleyrodidae) biotype B. Insect Science. 20, (4), 541-549 (2013).
  23. Cui, X., Wan, F., Xie, M., Liu, T. Effects of heat shock on survival and reproduction of two whitefly species, Trialeurodes vaporariorum and Bemisia tabaci biotype B. Journal of Insect Science. 8, (24), (2008).
  24. Boykin, L. M. Bemisia tabaci nomenclature: Lessons learned. Pest Management Science. 70, (10), 1454-1459 (2014).
  25. Qin, L., Pan, L. -L., Liu, S. -S. Further insight into reproductive incompatibility between putative cryptic species of the Bemisia tabaci whitefly complex. Insect Science. 23, (2), 215-224 (2016).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics