تقنيات زراعة الكلب في الحيوانات الكبيرة والصغيرة

Neuroscience

Your institution must subscribe to JoVE's Neuroscience section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

والهدف من هذا البروتوكول هو إظهار تقنيات المحاصيل المأمونة في الحيوانات الصغيرة والكبيرة للحصول على عينات مرضية من الأنسجة لاختبار داء الكلب.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Jarvis, J. A., Brown, K. T., Appler, K. A., Fitzgerald, D. P., Davis, A. D. Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals. J. Vis. Exp. (149), e59574, doi:10.3791/59574 (2019).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

يتلقى مختبر داء الكلب التابع لوزارة الصحة في ولاية نيويورك ما بين 6000 و9000 عينة سنوياً، ويجري اختبار داء الكلب في الولاية بأكملها، باستثناء مدينة نيويورك. مختبر داء الكلب necropsies مجموعة متنوعة من الحيوانات تتراوح في الحجم من الخفافيش إلى bovids. معظم هذه العينات هي الحيوانات التي تظهر علامات عصبية، ومع ذلك، أقل من 10٪ اختبار إيجابي فعلا لداء الكلب. مما يعني الصدمة، والآفات أو غيرها من العوامل المعدية كسبب لهذه الأعراض. بسبب خطر الهباء الجوي العوامل المعدية غير المشخصة، لا يستخدم مختبر داء الكلب أدوات الطاقة أو المناشير. وسيتم تقديم ثلاث تقنيات necropsy للالحيوانات التي لا يمكن اختراق جماجمها مع مقص. وقد نفذ المختبر هذه التقنيات للحد من التعرض المحتمل للعوامل المعدية، والقضاء على التلاعب غير الضروري في العينة وتقليل وقت المعالجة. مزايا تقنية مفضلة مقابل أخرى تخضع للفردي المدرب معالجة العينة.

Introduction

إن العمل على أرضية مختبر داء الكلب أمر خطير بطبيعته. في بعض الأحيان، تصل العينات مع ريش porcupine جزءا لا يتجزأ، والأجسام الغريبة بما في ذلك الأسهم / الرصاص / الكريات أو شظايا العظام المكشوفة التي قد تخترق التفاف الشحن واقية. التعبئة والتغليف غير لائق يمكن أن يؤدي إلى تسرب، مما يعرض للخطر الأفراد الذين فك العينات. وبالإضافة إلى الإصابة البدنية، فإن فنيي المحاصيل النيكروبية يتعرضون لخطر التعرض لعوامل معدية حيوانية غير معروفة من الجهاز العصبي الوطني وسوائل الجسم في العينات. بالإضافة إلى ذلك ، قد تنقل الطفيليات الخارجية التي تحملها العينة أمراضًا حيوانية أخرى ، حيث يُنظر إلى البراغيث والقراد عادة ً على الحيوانات المقدمة. وحسب الموقع الجغرافي والأنواع التي تنطوي عليها الأمراض المعرضة تختلف. فيروسات الأربو، مثل فيروس التهاب الدماغ في الفروسية الشرقية (EEEV) أو فيروس غرب النيل (WNV)، والأمراض المنقولة بالقراد بما في ذلك مرض لايم أو التولاريميا، والبكتيريا المسببة لحم ضفية السل أو السل، وprions المعدية اسم عدد صغير من المخاطر المحتملة1 , 2 , 3.

والغرض من هذه الأساليب هو إظهار تقنيات المحاصيل الآمنة والفعالة باستخدام الأدوات التي تقلل إلى أدنى حد من إمكانية الهباء الجوي على عكس أدوات الطاقة أو المناشير4و5. عادة ، فإن المحاصيل من الحيوانات الصغيرة في مختبر داء الكلب يتطلب قطع العضلات القحفية واستخدام مطرقة وإزميل لفتح الجزء الظهري الكنوع من calvarium6. إزالة هذه المنطقة من calvarium يكشف الدماغ الخلفي، بما في ذلك المخيخ بأكمله وجذع الدماغ القحفي. يمكن إجراء تقنيات المحاصيل النازرة المعدلة على الجزء البطني من الجمجمة، وتجنب العضلات القحفية الكبيرة والمناطق الأكثر سمكا من الجمجمة. ومع ذلك، فإن هذه التقنيات النيوروبسية المعدلة لا يمكن إلا عندما تكون العينة بدون فقرات عنق الرحم.

وبالمثل ، يمكن إزالة أنسجة الدماغ في الحيوانات الكبيرة عن طريق فصل العضلات القحفية وفتح الجزء الظهري الصددي من الجمجمة7. ويلزم بذل جهد كبير لفضح المخيخ وجذع الدماغ حيث أن جماجم الحيوانات الأكبر حجما ً هي عموماً أكثر سمكاً. لتجنب اختراق الجمجمة ، يتم وضع رأس الحيوان الكبير بحيث يواجه الجزء الفينتو-كودال من الجمجمة الفني. باستخدام الأدوات المعدلة، تتم إزالة المخيخ وجذع الدماغ من خلال ماغنوم اللبو. وهذا يشبه طريقة اكتساب العينة التي أوصى بها مختبر الاتحاد الأوروبي المرجعي TSE لتحقيقات اعتلال الدماغ الاسفنجي (TSE) المنقولة8. يجب إزالة الفقرات القحفية مسبقاً لتوفير الوصول إلى ماغنوم اللبو.

وتطبيق هذه التقنيات مفيد للفنيين المدربين تدريبا مناسبا في مختبرات داء الكلب. كما يتلقى مختبر داء الكلب عينات من مختلف الأحجام، من الخفافيش الأحداث إلى الكبار مشروع الخيولوالفني لديه عدة طرق للاختيار من بينها على أساس الظروف الفردية. كما أن الطريقة المثبتة لحيواني كبير مناسبة أيضاً للأطباء البيطريين الذين يقومون بزراعة النيبروفيات في الميدان، حيث أن شحن رأس حيواني كبير بالكامل لاختبار داء الكلب أمر مرهق ومكلف. ومن خلال تنفيذ أي من هذه التقنيات، سيؤدي ذلك إلى تحسين السلامة عن طريق تقليل إمكانات إنتاج الهباء الجوي، وتقليل مناولة العينة، وتوفير وقت المعالجة. ومع ذلك، وبما أن الحقل لا يتمتع بنفس المزايا التي يتمتع بها المختبر الذي أنشئ خصيصاً لاختبار داء الكلب، فمن الضروري أن تركز أي تعديلات تُدخلت على هذه الإجراءات على السلامة، ولا سيما استخدام معدات الحماية الشخصية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

تمت الموافقة على جميع الطرق الموصوفة من قبل لجنة الرعاية والاستخدام المؤسسية للحيوانية التابعة لمركز وادسوورث (IACUC).

1- الإعداد

  1. دون PPE، في الحد الأدنى لحماية العين (النظارات أو درع الوجه)، وقناع الجراحية أو N-95، والقفازات غير اللاتكس.
  2. إعداد منطقة العمل، من الناحية المثالية مجلس الوزراء السلامة الحيوية (BSC)، مع سطح العمل المتاح تغطية(على سبيل المثال، ورق الكرافت أو منصات ماصة) والأدوات necropsy نظيفة (الشكل 1).
  3. وضع العينة على سطح العمل واستخدام الأدوات للتلاعب بها لتقييم حالة العينة بما في ذلك الأدلة على التحلل، والأضرار التي لحقت الجمجمة، والمخاطر المحتملة (على سبيل المثال، ريش porcupine، شفرات مشرط)، ونوعية قطع الرأس.

2. طريقة البطني

ملاحظة: عندما يتم قطع رأس العينة بشكل صحيح في خط الفك، سيتم الكشف عن ماغنوم الفورامن وcondyle القذالي. الطريقة البطنية أقل تعقيدا لاسترداد المخيخ وجذع الدماغ.

  1. وضع العينة مع الجانب البطني حتى والأنف توجيه غير محالة نحو الجزء الخلفي من BSC.
  2. عقد مطرقة العظام / مطرقة في اليد اليمنى (إذا اليد اليمنى) وفي الوقت نفسه عقد إزميل أعضاء المجلس في اليد اليسرى.
  3. ضع الإزميل في زاوية 45 درجة مع نقطة زاوية الإزميل توجيه بين الجانب الأيمن من العظام الزمنية والعظام القذالي مما يجعل فتح "V".
  4. ضرب الجزء العلوي من إزميل مع المطرقة حتى العظام اثنين منفصلة. جعل قطع إلى المتاخمة للعظام أساسالفيني.
  5. كرر على الجانب الأيسر من العظام الزمنية / العظام القذالي (الشكل2A).
  6. ثني منطقة "V" من الجمجمة إلى الأسفل مع إزميل. كشف كامل منطقة rhombencephalon من الدماغ (المخيخ وجذع الدماغ) (الشكل2B).
  7. استخرج جذع الدماغ والمخيخ بالمقص وملقط. إزالة أي قطع المتبقية من الجمجمة إذا لم الجذعية الدماغ والمخيخ لم يخرج في قطعة واحدة.

3. طريقة الظهر

ملاحظة: إذا كانت العينة لديها قطع رأس ضعيف (اللومانوم اللاظاهرة) ولا يمكن إزالة الرقبة بسهولة أثناء المحاصيل أو إذا كان يشتبه في تلف المخيخ، يجب استخدام الطريقة الظهرية.

  1. وضع dorsally العينة مع الأنف توجيه غير محتفى نحو الجزء الخلفي من BSC.
  2. باستخدام tenacula الورم، واستيعاب العضلات الزمنية اليسرى مع أسنان tenacula وقفل عن طريق الضغط على المقبض.
  3. قطع العضلات الزمنية وصولا الى العظام مع سكين نحت حاد.
  4. تدوير العينة 180 درجة مع tenacula وسكين (وليس اليد) وتكرار العملية على العضلات الزمنية المعاكسة. كشف الجمجمة.
  5. ضع إزميل في زاوية 45 درجة مع نقطة زاوية الإزميل في وسط الجمجمة عند منعطف العظم الجداري والباري.
  6. ضرب الجزء العلوي من إزميل مع مطرقة حتى يتم فتح أفقي على النصف العلوي من الجمجمة في العظام الجدارية.
  7. تدوير العينة 180 درجة وتكرار العملية على الجانب الآخر.
  8. إدراج نقطة من إزميل في نهاية قطع 1 (الشكل3A)وعلى 90 درجة من فتح أفقي. ضرب مع المطرقة حتى يصل فتحة العظام القذالي (حوالي 10 سم اعتمادا على حجم العينة).
  9. لفة العينة وكرر على الجانب الآخر في نهاية قطع 2.
    ملاحظة: مع عينة الظهرية والأنف المتمركزة نحو الجزء الخلفي من BSC، فتحات في الجمجمة تشبه رأسا على عقب "U".
  10. أدخل أسنان التيلاكولا في الجمجمة في الجزء السفلي من "U" ونقب نحو نفسه. فضح نهاية الكاودال من المخوّل والمخيخ (الشكل3B).
  11. استخدام مقص كما مغرفة ونقب من المخيخ بأكمله من داخل التجويف.
  12. استخدام ملقط الأنسجة لندف خارج الدماغ تنبع من.

4. طريقة حيوانية كبيرة

  1. وضع العينة بحيث الجزء الظهري من الجمجمة على اتصال مع سطح necropsy مع الجزء الكاوي ة من الجمجمة وforamen magnum التي تواجه الفني.
  2. أدخل السكين الخنجر المعدل في ماغنوم الفرجبين بين الحبل الشوكي والغضروف الشوكي قدر الإمكان.
  3. النتيجة حول الحبل الشوكي لفصل المخيخ والدماغ تنبع من السحايا العمود الفقري. بعد إدخال السكين من خلال ماغنوم اللطوام، زاوية بلطف السكين لمتابعة على طول الجمجمة قدر الإمكان.
  4. أدخل ملعقة كيمياء أو ملعقة رفيعة، طويلة التعامل معها في الفضاء بين الأنسجة العصبية والسحايا الشوكي.
  5. التحقيق حول الحبل الشوكي والمخيخ لضمان قطع الاتصال إلى السحايا العمود الفقري.
  6. عقد جذع الدماغ مع ملقط. من ناحية أخرى، تقدم ملعقة rostrally ثم dorsally لسكوب حتى المخيخ. في وقت واحد سحب مرة أخرى على جذع الدماغ مع ملقط ومغرفة من المخيخ باستخدام الملعقة.
    ملاحظة: قد يستغرق الأمر أكثر من محاولة واحدة لاستعادة المخيخ كافية لاختبار داء الكلب.

5. آخر necropsy

  1. التخلص من جميع المواد التي يمكن التخلص منها (القفازات، والوسادات، وأغطية منطقة العمل) والأنسجة غير المستخدمة في النفايات الخطرة بيولوجياً.
  2. تنظيف وتطهير جميع الأدوات مع طريقة المتاحة (على سبيل المثال، غسالة الصحون الصناعية، الأوتوكلاف، مطهر الكيميائية، يغلي).
  3. تنظيف وتطهير جميع أسطح العمل مع التبييض 20٪ و / أو 70٪ الإيثانول.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

جميع العينات الأرضية المقدمة مع الجماجم بين 31 يناير 2019 و28 فبراير 2019 كانت لديها معلومات عن وجود الرقبة وطريقة النيوروبسي التي تم جمعها. وخلال تلك الفترة، تم زرع 170 رأساً مع تمثيل 18 نوعاً. 52% (89/170) تم قطع رأسها بشكل صحيح. أما الفقرات المتبقية فكانت مرفقة بفقرة واحدة على الأقل، بما في ذلك ثلاث عينات من الجسم كله. استعملت الأسلوب بطنيّة كان 75% (128/170) من الوقت, من أنّ, أعناق كان حاضرة على 49. العينات المقدمة مع الرقبة سوف يكون إزالتها خلال necropsy للسماح للطريقة البطني كلما كان ذلك ممكنا. وقدمت ثلاثة الحيوانات الكبيرة (البقر والغزلان والخنازير) وفي حالتين تم استخدام بروتوكول الحيوانات الكبيرة. لم يتم استخدام بروتوكول الحيوان الكبير على الخنزير لأن عينات أنسجة الدماغ الإضافية كانت مطلوبة لإجراء اختبارات إضافية. وقدم السنجاب مع جمجمة سحقت وقطع ببساطة بعيدا أنسجة الدماغ الجلد المكشوفة، وبالتاليلم تستخدم أي من الأساليب المذكورة أعلاه (الجدول 1).

على تقديمات سليمة جديدة، وسوف تنتج جميع الطرق الثلاثة مع الأنسجة المطلوبة لنتائج اختبار تشخيص داء الكلب موثوق بها. في بعض الأحيان ، لا يمكن إزالة المخيخ وجذع الدماغ سليمة ، على الرغم من أنه بعد إزالة جميع الأنسجة من الدماغ الخلفي يمكن تحديد هذه الأنسجة ومعالجتها وفقا لذلك.

ولا يمكن لهذه الطرق القيمة الثلاث أن تعوض عن سوء نوعية العينات التي حدثت قبل استلامها في المختبر. ويمكن أن تؤثر الصدمات والتحلل وسوء أساليب قطع الرأس على النتيجة بغض النظر عن مدى كفاءة جمع العينات.

Figure 1
الشكل 1: الأدوات المستخدمة في زراعة الكلب. مقص مايو حاد حاد حاد، ملقط لخلع الملابس برؤوس ناعمة بدون أسنان، عضو مجلس العظام إزميل العظام، مطرقة مطرقة مطرقة العظام، قفل الورم-tenacula، سكين نحت مطعم الجودة، تعديل سكين خنجر، ملعقة الكيمياء، و شحذ ملعقة كبيرة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 2
الشكل 2: الطريقة البطنية للزراعة. (أ) موقع التخفيضات: نقطة مكان إزميل في قاعدة السهم، وقطع في اتجاه السهم الأخضر وكرر بعد السهم الأصفر تشكيل "V" حول ماغنوم foramen. حدق "V" وصولا الى فضح جذع الدماغ والمخيخ. (ب) جذع الدماغ (الأخضر) والمخيخ (الأزرق) عندما يتعرض باستخدام الطريقة البطنية من necropsy. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 3
الشكل 3: طريقة الظهر من النيوروبس. (أ) موقع التخفيضات: مكان نقطة من إزميل في قاعدة السهم وقطع في اتجاه السهم في ترتيب لاحظ تشكيل "U". حدق "U" إلى أسفل لفضح المخيخ مع جذع الدماغ تحته. (ب) المخيخ (دائرة) عند التعرض باستخدام طريقة الظهرية. جذع الدماغ يكمن تحت مباشرة وغير مرئية حتى تتم إزالة المخيخ. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الانواع الفقرات المرفقة طريقة تستخدم V = البطيني، D = dorsal، LA = الحيوان الكبير مجموع تعليقات
تحمل لا الخامس 2
القط لا الخامس 32
القط لا د 3 2 صغيرة بما فيه الكفاية لفتح الجمجمة مع مقص، 1 كان abcess التي كان يجري التحقيق فضح أعلى الجمجمة
القط نعم الخامس 11
القط نعم د 8
البقر لا لا 1
ذئب لا الخامس 1
ذئب نعم الخامس 2
ذئب نعم د 3
الغزلان لا لا 1
الكلب لا الخامس 19 سنة
الكلب لا د 3
الكلب نعم الخامس 2 1 كان الكلب الصغير
الكلب نعم د 18 سنة
النمس لا الخامس 1
ف يشر لا الخامس 1
تحلق السنجاب نعم د 1 الجسم كله
الثعلب الرمادي لا الخامس 2
الثعلب الرمادي نعم الخامس 4
خنزير نعم الخامس 1
النيص لا الخامس 1
الراكون لا الخامس 16 سنة
الراكون لا د 1 المجمده
الراكون نعم الخامس 26
الثعلب الأحمر لا الخامس 2
الظربان لا الخامس 1
الظربان نعم الخامس 3
السنجاب لا الخامس 1
السنجاب نعم د 1 كامل الجسم، سحق الجمجمة، مقص المستخدمة لقطع الجلد إلى تجويف الدماغ المكشوفة
اةي ؛ زمنك لا د 1
محمد الدوسري نعم د 1 الجسم كله
مجموع 170
توزيع المجموع
مع الرقبة 81
لا الرقبة 89
طريقة بطني 128
طريقة دورسال 39
طريقة حيوانية كبيرة 2
طريقة أخرى 1
طريقة بطني مع الرقبة 49

الجدول 1: توزيع العينات التي تتطلب إزالة الأنسجة من الجمجمة المقدمة من 31 يناير 2019 حتى 28 فبراير 2019 في مختبر داء الكلب التابع لوزارة الصحة بولاية نيويورك.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

العينات المقدمة لداء الكلب necropsy غالبا ما يكون لها تاريخ من العلامات السريرية متوافقة مع مرض عصبي. قد يرتبط وجود المرض السريري بمجموعة متنوعة من الاضطرابات، بما في ذلك الأمراض الحيوانية، مما يزيد من خطر الإصابة بعدوى مكتسبة في المختبر على الموظفين. وللحد من هذه المخاطر، تم تنفيذ تقنيات تقلل من مناولة العينات ومعالجتها.

تمثل الأساليب التي تم عرضها حدثًا necropsy لإزالة الأنسجة المطلوبة من الحيوان الواحد فقط. تتم معالجة عينات متعددة أكثر شيوعًا في نوبة وهناك حاجة إلى الرعاية لضمان عدم وجود تلوث متبادل بين العينات. سطح العمل النظيف (ورق كرافت أو منصات يمكن التخلص منه)، ومجموعة جديدة من الأدوات النظيفة والمطهرة، والتغييرات القفازات إلزامية. وبمجرد الحصول على الأنسجة، يمكن اتباع بروتوكول المختبر الفردي للمعالجة، بما في ذلك صنع شرائح للتنظير المجهري أو استخراج الحمض النووي الريبي للأساليب الجزيئية.

وهناك عدة شروط مسبقة أساسية للنجاح في تنفيذ هذه التقنيات في المختبر أو الميدان. ويعتبر التطعيم السابق ضد داء الكلب والمعدات الشخصية أمراً حاسماً لأي شخص يُشفى بالحيوان المشتبه به في داء الكلب. يجب على الأفراد العاملين في مختبرات داء الكلب اختبار مصلهم كل ستة أشهر لضمان وجود مستوى كاف من الأجسام المضادة لداء الكلب10. من المهم أن نتذكر أن الأمراض الحيوانية الحيوانية الأخرى، مثل EEEV، WNV واعتلال الدماغ الاسفنجي البقري (BSE)، تقدم علامات مماثلة لداء الكلب، ويمكن أن تحدث أيضا في الحيوانات المشتبه بها داء الكلب11،12.

والأدوات الملائمة التي تتم صيانتها جيدا ضرورية لأداء المحاصيل النُصَوَّة بأمان. وبمجرد إزالة عينة من حقيبتها الخطرة بيولوجيا، ينبغي التلاعب بها فقط مع الأدوات، وليس اليدين، للحد من احتمال وقوع حوادث. قبل المحاصيل الحيوانية الصغيرة ، يجب على الفني تقييم حالة العينة لتحديد ما إذا كان من الممكن اتباع نهج بطني مفضل من خلال قاعدة الجمجمة. مع الحيوانات الكبيرة قد يكون مرهقا جدا لتقييم حالة العينة بشكل كامل كما قد تحتاج إلى إزالة فقرات إضافية قبل استرداد الأنسجة من خلال ماغنوم اللطوام.

وتتمثل القيود في جميع تقنيات المحاصيل، بما في ذلك حالة العينة، ونوعية الأنسجة، وكمية فقرات عنق الرحم المتبقية. لن تؤثر فقرات عنق الرحم على نتائج تحليل داء الكلب، ولكن الأنسجة المتحللة بشدة قد تؤدي إلى نتائج غير مرضية. طرق جزيئية أكثر حساسية في تشخيص داء الكلب قد تسمح بإجراء اختبارات ناجحة في عينات معينة غير قادرة على اختبارها عن طريق الفحص المباشر للجسم الفلورسنت (DFA)، بما في ذلك العينات المتحللة بشدة13. ومع ذلك، لا يمكن لأي قدر من الحساسية أن يحل محل الحاجة إلى أخذ عينات الأنسجة المناسبة.

وهناك مشكلة شائعة في مختبر داء الكلب هو تلقي أنسجة الدماغ غير مناسبة أو غير كافية للاختبار عند إجراء المحاصيل الحيوانية الكبيرة في هذا المجال. بدون الأنسجة المطلوبة، وإذا كانت الأنسجة الإضافية غير متوفرة لإعادة التقديم، سيقوم مختبر داء الكلب لدينا بإجراء اختبارات على الأنسجة المتاحة ولكنه غير قادر على التحقق من العينة السلبية، وبدلاً من ذلك فإنه غير مرض للاختبار. هناك طرق أخرى منشورة لمجموعات الأنسجة الميدانية مثل طريقة القش أو الطريق المداري الرجعي14. كلا الأسلوبين جمع أنسجة الدماغ دون الحاجة إلى فتح الجمجمة. يتم إدخال القش أو ماصة المتاح إما من خلال ماغنوم foramen أو ثقب خلق في مقبس العين ودفعت من خلال الدماغ، أخذ أساسا عينة الأساسية وليس بالضرورة أخذ عينات من المقطع العرضي الكامل من جذع الدماغ. وبما أن هذه الأساليب الميدانية لا تجمع العينات بطريقة تعتبر مرضية للاختبار في مختبرنا، فإن هذه العمليات لا تظهر أو تستكشف في هذه الورقة.

في هذا المجال يمكن أن يكون necropsy الحيوان كبيرة تحديا للأفراد الذين لم يتم تدريبهم على إزالة الأنسجة الصحيحة لاختبار داء الكلب. بدلا من ذلك يتم تقديم رأس كامل من الحيوان، والتي يمكن أن تزن بين 20-45 كجم، وخلق النقل مرهقة لكل من الطبيب البيطري الميداني ومختبر داء الكلب الفنيين. وقد قدمت طلبات متكررة للتدريب على تقنية المحاصيل الحيوانية الكبيرة إلى مختبرنا. الهدف من هذه المخطوطة هو توزيع هذه المعلومات على الأفراد والجماعات الذين يمكن أن يستفيد عملهم من هذه التقنيات.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.

Acknowledgments

ونحن ممتنون لمركز وادسوورث التابع لوزارة الصحة في ولاية نيويورك لدعمه هذا المشروع. كما نود أن نعترف بالدعم المقدم من إيمي ويلسي وفرانك بليسديل من مركز ودسوورث التابع لوزارة الصحة، وLL Ranch، ألتامونت، نيويورك.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Chemistry spoon Any
Curved, sharp-blunt mayo scissors Sklar 14-2055 Sklar Operating Scissors 5-1/2 Inch Premium OR Grade Stainless Steel Finger Ring Handle Curved Sharp/Blunt
Large sharp restaurant-quality carving knife Dexter P94848 8" Scalloped Utility Knife, white handle
Locking tumor-tenacula Diamond Scientific and Surgicals N/A Czerny Tenaculum Forcep
Modified stiletto knife (6.5 inch long blade carving knife ground to 0.5 inch wide) Dexter P94848 Modified 8" Scalloped Utility Knife, white handle
Orthopedic mallet-hammer Mortech N/A Postmortem hammer with hook
Sharp councilman orthopedic bone chisel Shandon 60-5 Councilman's Chisel Blade: 2 in x 2.25 in standard 7 in
Sharpened tablespoon or other long handled spoon Any
Smooth-tipped tissue dressing forceps without teeth Shandon 63-03 Shandon Broad Point Dressing Thumb Forceps
Powder-free non-latex gloves Any
Safety glasses, goggles, or faceshield Any
Surgery or N-95 mask Any
Kraft paper, butcher paper, absorbent pad, etc Any

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). West Nile virus activity - United States, 2009. MMWR Morbidity and Mortality Weekly Report. 59, (25), 769-772 (2010).
  2. McDaniel, C. J., Cardwell, D. M., Moeller, R. B. Jr, Gray, G. C. Humans and cattle: A review of bovine zoonoses. Vector Borne and Zoonotic Diseases. 14, (1), 1-19 (2014).
  3. Spickler, A. R. Zoonotic diseases. Merck Veterinary Manual. Available from: https://www.merckvetmanual.com/public-health/zoonoses/zoonotic-diseases (2019).
  4. Wenner, L., Pauli, U., Summermatter, K., Gantenbein, H., Vidondo, B., Posthaus, H. Aerosol generation during bone-sawing procedures in veterinary autopsies. Veterinary Pathology. 54 , (3), 425-436 (2017).
  5. Green, F. H. Y., Yoshida, K. Characteristics of aerosols generated during autopsy procedures and their potential role as carriers of infectious agents. Applied Occupational and Environmental Hygiene. 5, (12), 853-858 (1990).
  6. Barrat, J. Simple technique for the collection and shipment of brain specimens for rabies diagnosis. Laboratory techniques in Rabies 4th Edition. Meslin, F. X., Kaplan, M. M., Koprowski, H. World Health Organization. 425-427 (1996).
  7. Ness, S. L., Bain, F. T. How to perform an equine field necropsy. American Association of Equine Practitioners. 55, 313-316 (2009).
  8. Animal & Plant Health Agency. Sample requirements for TSE testing and confirmation – EURL guidance. Available from: https://protect2.fireeye.com/url?k=09f00f8d-55d40ec4-09f2f6b8-0cc47aa8d394-3f805f032cc98df8&u=https://science.vla.gov.uk/tse-lab-net/documents/tse-oie-rl-samp.pdf (2019).
  9. New York State Department of Health, Wadsworth Center. Rabies reports. Available from: https://www.wadsworth.org/programs/id/rabies/reports (2019).
  10. CDC. Protocol for postmortem diagnosis of rabies in animals by direct fluorescent antibody testing: A minimum standard for rabies diagnosis in the United States. Available from: https://www.cdc.gov/rabies/pdf/rabiesdfaspv2.pdf (2019).
  11. Miller, L. D., Davis, A. J., Jenny, A. L., Fekadu, M., Whitfield, S. G. Surveillance for lesions of bovine spongiform encephalopathy in U.S. cattle. Developments in Biological Standardizations. 80, 119-121 (1993).
  12. Andrews, C., Gerdin, J., Patterson, J., Buckles, E. L., Fitzgerald, S. D. Eastern equine encephalitis in puppies in Michigan and New York states. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. 30, (4), 633-636 (2018).
  13. Appler, K., Brunt, S., Jarvis, J. A., Davis, A. D. Clarifying indeterminate results on the rabies direct fluorescent antibody test using real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction. Public Health Reports. 134, (1), 57-62 (2019).
  14. Chapter 7. Brain removal. Laboratory techniques in Rabies 5th Edition. Rupprecht, C. E., Fooks, A. R., Abela-Ridder, B. World Health Organization. 67-72 (2018).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics