نموذج الفئران قبل السريرية لدراسة نقص التروية-ضخ الاصابه في جراحه المجهرية الترميمية

Medicine

Your institution must subscribe to JoVE's Medicine section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

هنا ، ونحن وصف نموذج الحيوانية قبل السريرية لدراسة الفيزيولوجيا المرضية للاصابه نقص التروية-ضخ في الجراحة المجهرية الترميمية. هذا النموذج رفرف الجلد الحرة علي أساس الاوعيه الدموية الشرسوفي السطحية في الفئران قد تسمح أيضا لتقييم العلاجات المختلفة والمركبات لمواجهه الاضرار الناجمة عن نقص التروية-ضخ الضرر.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Ballestín, A., Casado, J. G., Abellán, E., Vela, F. J., Campos, J. L., Martínez-Chacón, G., Bote, J., Blázquez, R., Sánchez-Margallo, F. M. A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery. J. Vis. Exp. (153), e60292, doi:10.3791/60292 (2019).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

الاصابه بنقص التروية الضخ هو السبب الرئيسي لفشل رفرف في الجراحة المجهرية الترميمية. الجرذ هو النموذج المفضل الحيوانية قبل السريرية في العديد من مجالات البحوث الطبية الحيوية بسبب فعاليتها من حيث التكلفة وترجمتها إلى البشر. يصف هذا البروتوكول طريقه لإنشاء نموذج رفرف الجلد الحرة قبل السريرية في الفئران مع أصابه نقص التروية-ضخ. يتم الحصول بسهوله علي النموذج الموصوف 3 سم × 6 سم الخالي من الفئران الجلدية الحرة بعد وضع العديد من الحروف المركبة الوعائية وقسم الاوعيه الدموية. ثم ، 8 ح بعد الاهانه الدماغية والانتهاء من الجراحة المجهرية ، ورفرف الجلد الحرة يطور تلف الانسجه. ويمكن دراسة هذه الاضرار المتعلقة بالإصابات الناجمة عن نقص التروية في هذا النموذج ، مما يجعلها نموذجا مناسبا لتقييم العوامل العلاجية لمعالجه هذه العملية الفسيولوجية المرضية. وعلاوة علي ذلك ، يتم وصف اثنين من تقنيات الرصد الرئيسية في البروتوكول لتقييم هذا النموذج الحيواني: تكنولوجيا الموجات فوق الصوتية وقت المرور العابر وتحليل التباين سبيكل الليزر.

Introduction

أصبحت الجراحة المجهرية تقنيه جراحيه شائعه لأعاده الاعمار تسمح بالتدخلات (مثل نقل الانسجه الحرة) لاستعاده عيوب الانسجه المعقدة ، وأعاده زرع الأطراف المبتورة ، وحتى زراعه الانسجه المركبة.

تعد الإنشاءات الجراحية المجهرية مثاليه لمجموعه واسعه من العيوب الناجمة عن الإصابات الرضية أو الحروق أو اكتشاف الأورام. ومع ذلك ، هناك نسبه منخفضه من الفشل رفرف الحرة ، من بينها نقص ترويه-ضخ (I/R) الاصابه هي واحده من العوامل المسؤولة الرئيسية. جميع الانسجه التي يتم نقلها جراحيا المجهرية تحمل فتره إلزاميه من الاسكيميه تليها الضخ. هذه الفترة من الاسكيميه الاوليه عاده ما تكون جيده التحمل; التالي ، فان معدل نجاح العمليات الجراحية الدقيقة يتجاوز 90 ٪1،2. ومع ذلك ، فقط 63.7 ٪ من اللوحات التي تتطلب المراجعة الجراحية يمكن حفظها تماما3. الاضافه إلى ذلك ، في حالات أعاده زرع الاصبع يثبت تغير الإصابات ، فان معدل النجاح هو 66 ٪4؛ وفي حالات زراعه الانسجه المركبة التي تعاني من أصابه انا/r ، يتم زيادة النسب المئوية للرفض منذ أصابه i/r ينشط المناعة الفطرية5،6.

ولذلك ، فان دراسة هذه الظاهرة الفسيولوجية هي من الفائدة. النماذج الحيوانية ضرورية للتحقيق في أليات الفسيولوجية وتقييم العلاجات الجديدة قبل ان يمكن تطبيقها علي البشر7. تشريح السفينة وأوجه التشابه الفسيولوجية بين الفئران والبشر تجعل الفئران نموذجا مثاليا للتحقيق في العمليات البيولوجية مثل الاصابه التي تصيب الإنسان.

هنا ، نقدم بروتوكولا مفصلا لإنشاء نموذج رفرف الجلد الحرة الفئران مع الاصابه/R ، فضلا عن إمكانيات مختلفه للتقييمات داخل وبعد العملية الجراحية. والهدف العام لهذه الطريقة هو وصف نموذج ما قبل السريرية المفيدة لدراسة الإصابات من النوع الأول/الصاد والعلاجات الممكنة للحد من الاضرار ذات الصلة.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

وقد أجريت جميع الإجراءات وفقا للجنة الاخلاقيه لمركز الجراحات الطفيفة التوغل في خيسوس اوغون والمبادئ التوجيهية للرعاية الاجتماعية للحكومة الاقليميه التي تستند إلى التشريعات الاوروبيه.

1. التحضير المسبق والجراحي

  1. الفئران بيت Wistar وزنها 290-350 ز في أقفاص في 22-25 درجه مئوية مع الحصول مجانا علي الطعام والماء. تاقلم لمده أسبوع قبل الجراحة لمنع المشاكل الناجمة عن الإجهاد.
  2. وضع الفئران في غرفه التعريفي التخدير ، وتسليم 5 دقائق من الأكسجين (0.5-1 لتر/دقيقه) ، واستخدام المبخر لتقديم 5 ٪ سيفوفلوران للحث علي التخدير.
  3. اخرج الجرذ من الغرفة بمجرد ان يسبب التخدير. مكان استنشاق قناع علي الفئران وتوفير معدل تدفق 2 ٪ سيفوفلوران للحفاظ علي التخدير. التحقق من عدم وجود استجابه لقرصه اصبع القدم.
  4. استخدم مرهم لحماية العين لمنع جفاف القرنية وتلفها.
  5. مراقبه الحيوانية تحت التخدير العام علي النحو التالي: وضع ميزان الحرارة المستقيم (35.9-37.5 درجه مئوية) ، والتحقق من لون الغشاء المخاطي ، ووضع مقياس التاكسج نبض القوارض للتحقق من التشبع O2 (> 95 ٪) ومعدل ضربات القلب (250 – 450 bpm).
  6. استخدام دعم الحرارة (منصات التدفئة الكهربائية أو البطانيات المياه المتداولة) لتجنب انخفاض حرارة الجسم وتحسين استعاده التخدير بعد الإجراءات.
  7. حقن 5 مل من محلول ملحي الفسيولوجية تحت الجلد الدافئة للحفاظ علي الترطيب السليم.
  8. توفير الادويه المسكنة والمضادة للالتهابات (meloxicam 1 مغ/كغ/يوم) والمضادات الحيوية الوقائية (انروفلوكساسين 7.5 ملغ/كغ/يوم) جلد قبل الاجراء ولمده 5 أيام بعد الجراحة.
  9. حلق المنطقتين البطنية والاربيه للحيوان.
  10. تطبيق الموضعية povidone-اليود ، تليها 70 ٪ الايثانول. تغطيه الحيوانية مع ثني معقمه.

2. الحرة الجلد رفرف نموذج الجراحة

  1. باستخدام علامة جراحيه ، رسم 3 سم × 6 سم رفرف مطابقه واحده من الجانبين 6 سم مع خط البطن الأوسط. بعد ذلك ، قم باجراء شق جلد بطول 6 سم في الخط الأوسط من البطن وفتحين عموديتين بطول 3 سم في الجزء العلوي والسفلي من الشق النصفي بطول 6 سم.
  2. للبدء في تشريح تصميم 3 سم × 6 سم رفرف الجلد ، واستخدام مقص وملقط Adson لرفع رفرف (بدلا من مشرط) بسبب الحركة الجلد.
  3. سحب برفق رفرف من منطقه الجمجمة نحو منطقه الذيليه للمساعدة في تشريح وتحديد القمل شرسوفي محاطه النسيج الضام فضفاضة وفيرة.
  4. تشريح القمل رفرف دون لمسها أو عن طريق استيعاب اديفينتيتيا اقل قدر ممكن لتجنب اتلاف جدار السفينة.
  5. استخدم خيوط النايلون 8/0 لاوككلودي بواسطة الحروف المركبة للاوعيه الفخذية القريبة ، والاوعيه الفخذية الجانبية المحيطة بالفخذ ، والاوعيه الدموية. التالي ، يتم توفير التروية من رفرف من الشريان الفخذي ويستمر مباشره من خلال الشريان الشرسوفي السطحية ، في حين يتم تنفيذ الصرف الوريدي بواسطة الوريد الشرسوفي السطحية نحو الوريد الفخذي.
  6. المشبك عنوله الاوعيه الدموية ومن ثم قطع عليه لبدء فتره نقص التروية 8 ح. اثناء الاجراء استخدام البطانيات الكهربائية للحفاظ علي درجه الحرارة. يتم إعطاء اثنين من حقن 5 مل من الحارة (25 درجه مئوية) 0.9 ٪ محلول ملحي جلد. يتم تنفيذ الاداره الاولي 2 ح بعد بداية الاجراء; والثانية في نهاية الاجراء للحصول علي الشفاء السليم للحيوان.
  7. استخدام محلول ملحي heparinized (100 U/mL) لحقنت رفرف وأزاله الدم الراكد من دوران الاوعيه الدقيقة.
  8. استخدم خيوط النايلون 10/0 لاجراء العمليات الجراحية المجهرية.
  9. بعد 8 ح من الاسكيميه ، انتشار رفرف عن طريق أزاله المشابك ميكرووعائيه والتحقق من الرضفة الوعائية كما هو موضح أدناه.

3. تقييم العمليات الجراحية

  1. اجراء اختبار الرضفة اليدوي (اختبار فارغه وأعاده الملء) للوريد والشريان. للقيام بذلك ، واستخدام اثنين من ملقط الجراحية الدقيقة ، وضعها البعيدة إلى الانسمام وأداء الحلب. الإفراج عن أقرب ملقط إلى موقع اناستاوموسيس أولا. إذا استمر تدفق الدم بعد إفراغ قسم الاوعيه الدموية ، فان الانسمام هو براءة اختراع.
  2. تقييم تدفق الدم باستخدام مقياس الجريان بالموجات فوق الصوتية في وقت العبور والمجسات الجراحية المجهرية.
    1. قياس قطر الاوعيه عنوله من أجل اختيار الحجم المناسب لتحقيقات تدفق.
      ملاحظه: ويمكن لمسبار تدفق مم 0.7 قياس السفن تتراوح بين 0.4 مم إلى 0.7 مم ؛ يمكن لمسبار تدفق مم 1.0 قياس السفن تتراوح بين 0.7 مم إلى 1.0 مم ؛ يمكن لمسبار تدفق مم 1.5 قياس السفن تتراوح بين 1.0 مم إلى 1.5 مم.
    2. ضع السفينة المستهدفة في نافذه الاستشعار بالموجات فوق الصوتية (بين العاكس ومحولات التيار) لمسبار التدفق لقياس حجم التدفق.
      ملاحظه: عقد التحقيق محايده إلى الطائرة من السفينة ، لتجنب اي توتر أو سحب.
    3. تحقق من جوده الاقتران الصوتي من خلال ملاحظه ان جميع القضبان خضراء علي الشاشة.
      ملاحظه: إذا كان من الصعب الحصول علي اقتران الصوتية جيده ، واستخدام هلام الموجات فوق الصوتية أو محلول المالحة الفسيولوجية موضعيا.
    4. عندما يتم تحقيق اقتران جيد ويتم وضع السفينة في النافذة الصوتية دون اي توتر ، انقر علي زر التسجيل علي الشاشة لتخزين البيانات.
      ملاحظه: للحصول علي قياس موثوق وصحيح ، تاكد من ان نمط الموجي هو متكررة باستمرار.
  3. مره واحده القيام به ، واستخدام حمض البوليجليوليك (بغ) 4-0 الغرز مضفر القابلة للامتصاص (16mm 3/8 الثلاثي ابره) لإغلاق الجلد. استخدام نمط توقف بسيطه للحفاظ علي موقف القوه والانسجه إذا تم عض جزء من خياطه قباله بواسطة الفئران بعد الجراحة.
  4. تقييم دوران الاوعيه الدقيقة لرفرف باستخدام تحليل التباين بالليزر (LASCA).
    1. اجراء تسجيل جديد لكل الحيوانية ولكل متابعه الدراسة. لهذا ، انقر فوق ملف/تسجيل جديد. يتم فتح نافذه جديده ، ويتم عرض لوحه الاعداد . ثم قم بتحرير معلومات اسم المشروع ، الموضوع ، المشغل واسم التسجيل.
    2. لاستنساخ القصوى ، توحيد المعلمات التالية: مسافة العمل ، ومنطقه القياس ، وكثافة النقاط ، ومعدل الإطار ، وظروف الاضاءه المحيطة.
      1. ضبط المسافة العمل عن طريق تحريك الليزر فيما يتعلق الانسجه. تكبير أو تصغير راس الليزر نحو الانسجه ذات الفائدة. للتحقق من القيمة المقاسه ، انقر فوق اعداد الصورة. هنا ، حدد عند 12.0 سم.
      2. توحيد منطقه القياس عن طريق إدخال العرض والارتفاع المطلوبين في اعداد الصورة. المقاييس رفرف المصممة 3 سم × 6 سم. لهذا القياس ، حدد عرض 4.0 سم وارتفاع 7.0 سم للحصول علي بعض المساحة الاضافيه.
      3. تعيين كثافة نقطه عاليه في اعداد الصورة. عاليه ومتوسطه ومنخفضه هي الخيارات الثلاثة.
    3. في اعداد التقاط الصور ، حدد معدل الإطارات (10 صور/s) للتسجيل والمدة (1 دقيقه) من التسجيل.
      ملاحظه: لديك نفس حاله الضوء المحيط في غرفه الجراحة اثناء التشغيل أو تنفيذ التقييمات.
    4. انقر فوق الزر تسجيل لبدء التسجيل. يتم استبدال لوحه الاعداد بلوحه التسجيل. يتم حفظ البيانات تلقائيا. أخذ لقطات اثناء الاجراء لتمكين المزيد من المقارنة.
      ملاحظه: يمكن تغيير مقياس ترويه لتحسين التصور (انقر فوق أدوات | الفلاتر وموازين ألوان | مقياس بيرفيوجن | يدوي 0-150) ، ولكن قيم ترويه تقاس ستتاثر. قبل وبعد التسجيل ، يمكن إنشاء مناطق مختلفه من الاهتمام (ROIs) لقياس التروية داخلها. هنا ، ونحن تقييم فقط منطقه رفرف تمارس (3 سم × 6 سم).
  5. استخدم برنامج ImageJ لقياس مناطق البقاء والنخر.
    1. حدد موقع المسطرة علي جانب الرفرف ثم التقط صور التحكم للقياسات المجهرية لمنطقه البقاء بالرفرف.
    2. لتقييم الصور ، افتح واجهه المستخدم ImageJ. انقر فوق الملف وافتح الصورة التي سيتم قياسها.
    3. حدد خط مستقيم في مربع الاداات ورسم خط مستقيم علي 1 سم من المسطرة. انقر علي تحليل | تعيين مقياس وإدخال في مربع النص لمسافة المعروفة قيمه 1 سم.
    4. انقر علي أداه تحديد المضلع ورسم خطوط المضلع علي رفرف لحساب منطقه قابله للحياة. في نهاية المطاف ، انقر علي تحليل | القياس للحصول علي قيمه المنطقة.
  6. وضع خلع الملابس بعد العملية الجراحية علي الحيوانية قبل السكن لمنع تشويه الذات من منطقه الجراحة. بعد الإجراءات ، يتم إيواء الكائنات الحيوانية في أقفاص بشكل فردي ، في غرفه مع التحكم في درجه الحرارة (22 درجه مئوية إلى 25 درجه مئوية).

4. تقييم ما بعد الجراحة وأخذ عينات الانسجه

  1. تخدير الفئران في 7 أيام بعد العملية الجراحية لتقييم رفرف وأخذ العينات الانسجه باتباع نفس الخطوات الموصوفة سابقا في هذا البروتوكول (الخطوات 1.2 و 1.3). التحقق من عمق التخدير بسبب عدم وجود استجابه لقرصه اصبع القدم.
  2. تصوير المنطقة الجراحية لتمكين القياسات المجهرية للمناطق البقاء علي قيد الحياة والنخر رفرف. قم باجراء القياسات المجهرية بعد العملية الجراحية بعد الخطوات نفسها من التقييم داخل الجراحة التي تم شرحها من قبل في البروتوكول (الخطوة 3.5).
    ملاحظه: انتبه اثناء استخدام أداه تحديد المضلع عن طريق رسم الخطوط علي الرفرف الذي يحدد المنطقة القابلة للحياة (مقاسه بالسم2). ويمكن حساب النسبة المئوية للمنطقة قابله للحياة كما (سم2 من منطقه قابله للحياة/سم2 من مجموع رفرف المنطقة) × 100.
  3. تقييم الدوران المجهري لرفرف باستخدام تقنيه lasca (الخطوة 3.4) لتصور وقياس الاختلافات ترويه
  4. بعد تحليل المجهرية ، وأزاله الغرز 4/0 وترتفع رفرف لأعاده تقييم تدفق الدم عنله الاوعيه الدموية باستخدام الموجات فوق الصوتية وقت المرور العابر.
  5. اجراء أخذ العينات الانسجه بواسطة طوليا تقسيم رفرف إلى جزاين من 1.5 سم × 6 سم.
    1. تزج جزء واحد في حاويه خزعة مع 4 ٪ بارافورمالدهيد في درجه حرارة الغرفة لمزيد من التحاليل النسيجية.
    2. إدخال الجزء الآخر من الانسجه في أنبوب التبريد ، تزج في النيتروجين السائل ثم ، بالتبريد الأنبوب عن طريق تخزينه في-80 درجه مئوية للتحليلات الجزيئية في المستقبل.
  6. موت ببطء الفئران تحت التخدير العام استنشاق باستخدام حقن داخل الداخل السريع من 2 M KCl/kg وفقا لتوصيات اللجنة الاخلاقيه.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

علي الفور بعد إنشاء المفاخرات الجراحية المجهرية ، حصلنا علي كميات اعلي من تدفق الدم من الحد الأدنى من التدفقات الموصي بها في الأدب8؛ وهكذا ، كانت جميع العمليات الجراحية المجهرية براءات الاختراع 1 أسبوع بعد الجراحة (الشكل 1).

Figure 1
الشكل 1: تقييم تدفق الدم بالموجات فوق الصوتية في وقت المرور العابر. (ا) موضع مسبار التدفق الجراحي المجهري لتقييم تدفق الدم. (ب) نمط تدفق الدم والكمية التي تم الحصول عليها من الاوعيه المفاخرة من القمل الرفرف. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 2
الشكل 2: تقنيه تحليل التباين بالليزر. (ا) التصور من الدم الاوعيه الدموية الانسجه الدقيقة في الحالة الفسيولوجية. (ب) التصور من الدم الاوعيه الدموية التروية الدموية خلال نقص التروية. (ج) تصور الدم المجهري لأنسجه الاوعيه الدموية مباشره بعد الضخ. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

وكانت منطقه البقاء علي قيد الحياة رفرف بعد 8 ح من الاسكيميه والضخ اللاحقة حول 40 ٪. وأظهرت النتائج المنشورة سابقا9 اختلافات هامه إحصائيا عندما تمت مقارنه هذا النموذج مع اللوحات حيث لم يكن قد لحقت الاهانه الدماغية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

أصبحت عمليات نقل الانسجه الحرة المجهرية الطريقة المفضلة لأعاده بناء العيوب الكبيرة. تحدث فتره من نقص التروية اثناء عمليات النقل المجانية للانسجه. عندما تتجاوز هذه الفترة التسامح الانسجه ، يمكن ان يسبب أصابه الأول/R فشل الحرة رفرف9. قد يساعد وصف المنهجية لتطوير نموذج قبل السريرية فعاله من حيث التكلفة والانتقالية لدراسة أصابه/R في الجراحة المجهرية الترميمية قياده دراسة المركبات المختلفة لمواجهه هذه العملية الفيزيولوجيا المرضية.

في النموذج الحيواني الموصوف ، بعد وضع الحروف المركبة الوعائية ورفع الرفرف الحر ، لم يلاحظ اي تنازلات في تدفق الدم المؤخر ، ولا الم أو العرج. كما وصفت كوتشي وآخرون10 , نموذجنا أيضا ترك ثلاث طرق التبعية من خلال الشبكات العضلية.

رصد اللوحات الحرة من الاهميه الكبرى11، كما الإنقاذ يرتبط عكسيا إلى المدة بين ظهور الاسكيميه والاعتراف السريرية. لهذا الغرض ، يجب ان تدرس اللوحات الحرة داخل وبعد الجراحة.

في العملية ، واستخدام علي نطاق واسع فارغه واختبار أعاده الملء أو دوبلر الصوتية تمكين تحديد ولكن ليس التقدير الكمي للتدفق وجود أو غياب من خلال اناستاوسيس12. لهذا السبب ، استخدمنا تكنولوجيا الموجات فوق الصوتية وقت العبور ، وهي طريقه جديده تسمح للجراحين لقياس تدفق الدم من العمليات الجراحية المجهرية13. في دراستنا ، كانت جميع العمليات الجراحية المجهرية براءات الاختراع بعد 8 ساعات من الاهانه الدماغية وكذلك في نهاية الدراسة. علي الفور بعد إنشاء المفاخرات الجراحية المجهرية ، لاحظنا ارتفاع حجم تدفق الدم من الحد الأدنى الموصي به في الأدب8. وتنبا هذا القمل جيده ترويه في نهاية الدراسة ، مما يدل علي ان النتائج لم تتاثر التقنية الجراحية الدقيقة ولكن بدلا من سلسله الإصابات I/R من الاحداث. ومع ذلك ، هذه التقنية ليست خاليه من القيود. للحصول علي نتائج موثوق بها ، يجب ان تكون التحقيقات الجراحية المجهرية محايده للطائرة السفينة ، وليس سحبها أو خلق اي توتر. وهناك حاجه إلى اقتران الصوتية جيده للحصول علي اشاره مناسبه ، والتي يمكن تحقيقها باستخدام هلام الموجات فوق الصوتية أو المالحة. اشاره اقتران عاليه الجودة ، التي توفرها المعدات ، هي معلمه هامه للنظر خلال القياسات.

وقد استخدمنا LASCA ، والمعروف أيضا باسم الليزر سبيكل التباين التصوير أو التصوير بالليزر سبيكل ، بعد الجراحة14. وتمثل هذه التكنولوجيا تقنيه قيمه لرسم خرائط الوقت الحقيقي شبه الكمي للتدفق داخل اللوحات الحرة كما تم التحقق منها هنا. ويتمثل أحد القيود في ان النتائج تقدم في وحدات اعتباطية ولا ترتبط مباشره بقيم التدفق الفعلي. وبهذا المعني ، يلزم اجراء مزيد من البحوث للتحقق من صحة هذا الارتباط. الليزر دوبلر الجريان هو أكثر شيوعا ولكنها محدوده من حقيقة انه يقيس فقط ترويه في نقطه واحده في رفرف ، في حين lasca يسمح للكشف عن التغيرات الاقليميه في الجلد ترويه داخل رفرف15. وعلاوة علي ذلك ، أشارت دراسة حديثه16 إلى ان lasca يمكن ان يتنبا بالمناطق المعرضة لمخاطر عاليه من نخر رفرف بعد الجراحة. وتشير نتائجنا إلى ان LASCA هي تقنيه واعده لمراقبه اللوحات الحرة بشكل شبه وبعد العملية الجراحية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

وليس لدي المؤلفين ما يفصحون عنه.

Acknowledgments

تم تنفيذ المشروع البحثي في مركز الجراحات الطفيفة التوغل في خيسوس اوغون (CCMIJU) ، وهو جزء من Nanbiosis ICT. وأجريت الدراسة بمساعده من وحدات Nanbiosis التالية: U21 ، غرفه العمليات التجريبية ؛ U22 ، السكن الحيواني ؛ و U14 ، العلاج الخلوي. وقد دعم هذا العمل مشروع ISCIII PI16/02164. ولم يكن لهذا الممول اي دور في تصميم الدراسة ، وجمع البيانات وتحليلها ، وقرار النشر ، أو اعداد المخطوطات. ونتوجه بالشكر الخاص إلى ماريا بيريز علي اعدادها للأرقام وعلي فرناندا كاريزوسا لما قدمته من تشجيع ودعم مستمرين للمراجع العلمية.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
AureFlo Unit Transonic (Ithaca, USA) N/A Transit-time ultrasound flowmeter equipment
Commbined Basic Hand- and Reconstructive Surgery Set (round handle) S&T AG (Neuhausen, Switzerland) RHR-SET. Art.No.00795 Set of microsurgical instruments
FLOW-i Maquet Critical Care AB (Solna, Sweeden) N/A Anesthesia Delivery System
Micro clamps ABB-1 S&T AG (Neuhausen, Switzerland) 00408V Double microvascular clamp with frame
Micro clamps ABB-11 S&T AG (Neuhausen, Switzerland) 00414V Double microvascular clamp without frame
Micro clamps B-1 S&T AG (Neuhausen, Switzerland) 00396V Sigle microvascular clamp
Nylon suture 10/0 Laboratorio Aragó (Barcelona, Spain) 19921 Microsurgical suture
OPMI Pentero 800 Carl Zeiss AG (Oberkochen, Germany) N/A Surgical microscope
PeriCam PSI System Perimed AB (Järfälla, Sweden) N/A Laser speckle contrast analysis equipment
Philips Intellivue MX450 Philips Medizin Systeme (Böblingen, Germany) N/A Monitoring system
Protector posoperatorio para roedores Fundación Centro de Cirugía de Mínima Invasión Jesús Usón (Cáceres, Spain) P201400272 Postoperative protector for rodents

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Siemionow, M., Arslan, E. Ischemia/reperfusion injury: a review in relation to free tissue transfers. Microsurgery. 24, (6), 468-475 (2004).
  2. Wang, W. Z., Baynosa, R. C., Zamboni, W. A. Update on ischemia-reperfusion injury for the plastic surgeon: 2011. Plastic and Reconstructive Surgery. 128, (6), 685-692 (2011).
  3. Chen, K. T., et al. Timing of presentation of the first signs of vascular compromise dictates the salvage outcome of free flap transfers. Plastic and Reconstructive Surgery. 120, (1), 187-195 (2007).
  4. Sears, E. D., Chung, K. C. Replantation of finger avulsion injuries: a systematic review of survival and functional outcomes. The Journal of Hand Surgery. 36, (4), 686-694 (2011).
  5. Caterson, E. J., Lopez, J., Medina, M., Pomahac, B., Tullius, S. G. Ischemia-reperfusion injury in vascularized composite allotransplantation. The Journal of Craniofacial Surgery. 24, (1), 51-56 (2013).
  6. Amin, K. R., Wong, J. K. F., Fildes, J. E. Strategies to Reduce Ischemia Reperfusion Injury in Vascularized Composite Allotransplantation of the Limb. The Journal of Hand Surgery. 42, (12), 1019-1024 (2017).
  7. Barre-Sinoussi, F., Montagutelli, X. Animal models are essential to biological research: issues and perspectives. Future Science OA. 1, (4), (2015).
  8. Shaughness, G., Blackburn, C., Ballestin, A., Akelina, Y., Ascherman, J. A. Predicting Thrombosis Formation in 1-mm-Diameter Arterial Anastomoses with Transit-Time Ultrasound Technology. Plastic and Reconstructive Surgery. 139, (6), 1400-1405 (2017).
  9. Ballestin, A., et al. Ischemia-reperfusion injury in a rat microvascular skin free flap model: A histological, genetic, and blood flow study. PloS One. 13, (12), 0209624 (2018).
  10. Kochi, T., et al. Characterization of the Arterial Anatomy of the Murine Hindlimb: Functional Role in the Design and Understanding of Ischemia Models. PloS One. 8, (12), (2013).
  11. Smit, J. M., Zeebregts, C. J., Acosta, R., Werker, P. M. Advancements in free flap monitoring in the last decade: a critical review. Plastic and Reconstructive Surgery. 125, (1), 177-185 (2010).
  12. Krag, C., Holck, S. The value of the patency test in microvascular anastomosis: Correlation between observed patency and size of intraluminal thrombus: An experimental study in rats. British Journal of Plastic Surgery. 34, 64-66 (1981).
  13. Selber, J. C., et al. A prospective study of transit-time flow volume measurement for intraoperative evaluation and optimization of free flaps. Plastic and Reconstructive Surgery. 131, (2), 270-281 (2013).
  14. Briers, D., et al. Laser speckle contrast imaging: theoretical and practical limitations. Journal of Biomedical Optics. 18, (6), 066018 (2013).
  15. Zotterman, J., Bergkvist, M., Iredahl, F., Tesselaar, E., Farnebo, S. Monitoring of partial and full venous outflow obstruction in a porcine flap model using laser speckle contrast imaging. Journal of Plastic, Recontructive and Aesthetic Surgery. 69, (7), 936-943 (2016).
  16. Zotterman, J., Tesselaar, E., Farnebo, S. The use of laser speckle contrast imaging to predict flap necrosis: An experimental study in a porcine flap model. Journal of Plastic, Recontructive and Aesthetic Surgery. 72, (5), 771-777 (2019).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics