Author Produced

Optimalisering av mansjettteknikken for Murine hjertetransplantasjon

* These authors contributed equally
JoVE Journal
Immunology and Infection

Your institution must subscribe to JoVE's Immunology and Infection section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

Vi introduserer en indre rørtilnærming til mansjetten teknikk for mus cervical heterotopisk hjertetransplantasjon for å hjelpe evert fartøyet over mansjetten. Vi fant at samarbeid mellom to erfarne kirurger markert forkorter operasjonstiden.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Ma, Y., Xie, B., Dai, H., Wang, C., Liu, S., Lan, T., Xu, S., Yan, G., Qi, Z. Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation. J. Vis. Exp. (160), e61103, doi:10.3791/61103 (2020).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Murine hjertetransplantasjon har blitt utført i mer enn 40 år. Med fremskritt i mikrokirurgi har visse nye teknikker blitt brukt til å forbedre kirurgisk effektivitet. I laboratoriet vårt har vi optimalisert mansjettteknikken med to store trinn. Først brukte vi den indre rørteknikken til å sette inn et midlertidig indre rør i den ytre halsvenen og halspulsåren for å lette eversjon av fartøyet over mansjetten. For det andre utførte vi fullstendig heterotopisk hjertetransplantasjon gjennom samarbeid mellom to erfarne kirurger. Disse endringene reduserte effektivt driftstiden til 25 minutter, med en suksessrate på 95%. I denne rapporten beskriver vi disse prosedyrene i detalj og gir en ekstra video. Vi tror at denne rapporten om forbedret mansjettteknikk vil gi praktisk veiledning for murine heterotopisk hjertetransplantasjon og vil forbedre nytten av denne musemodellen for grunnleggende forskning.

Introduction

Etableringen av mus heterotopisk hjertetransplantasjon gjennom ende-til-ende anastomose i magen i 1973 var en viktig milepæl i grunnleggende transplantasjon immunologi forskning1. Denne modellen ga et viktig og gyldig verktøy for å analysere mekanismene for iskemi reperfusjon skade2, immunologisk avvisning, ogtoleranse 3,4. Imidlertid kan den komplekse og tidkrevende naturen til operasjonen samt potensialet for infeksjoner føre til alvorlige perioperative abdominal adhesjoner og inflammatoriske reaksjoner, noe som resulterer i lav effektivitet for heterotopisk hjertetransplantasjonsmodell.

Den cervikale heterotopisk hjertetransplantasjon teknikken ble først beskrevet av Chen i 19915. I denne modellen er mottakerens ytre halsvene anastomosed til lungearterien i transplantatet og halspulsåren er anastomosed til den stigende aorta. De viktigste fordelene med denne metoden er bekvemmeligheten av overvåking og reduksjon av traumer til mottakeren. I samme år beskrev Matsuura en forbedret teknikk, hvor slutten av den ytre halsvenen og halspulsåren ble everted over en Teflon mansjett og festet med en circumferential silke ligatur6. Noen forskere festet også mansjetten til høyre lungearterie i donorhjertet før du setter mansjetten inn i mottakerens ytrehalsvene 7. Så langt har mansjettteknikken blitt mye brukt i ulike vaskulære pedikletransplantasjonsmodeller, inkludert de for lunge8,lever9og nyre10 transplantasjon.

Til dags dato er det flere vanskeligheter forbundet med mansjetten teknikk. For eksempel er halspulsåren vanskelig å evert over mansjetten på grunn av den ekstra elastisiteten, noe som resulterer i at vevet vender bakover. Derfor kan ekstra praksis og en mikrokirurgisk dilator være nødvendig for å fullføre dette trinnet. I tillegg kan livmorhalskarpreparatet ta opptil 25 minutter.

For å løse disse problemene introduserer vi den indre rørteknikken, som er basert på mansjettens teknikk og inkluderer å feste mansjetten på den ytre halsvenen og halspulsåren ved hjelp av et indre rør for å hjelpe til med eversjon av karveggen. I tillegg, med enkel trening, reduseres mottakerforberedelsen til 15, 5 minutter. Denne teknikken reduserer kompleksiteten i operasjonen og krever ikke ekstra praksis eller bruk av en vaskulær dilator. Det kan brukes i all transplantasjon immunforskning, spesielt for å verifisere tredjeparts immuntoleranse der mottakeren mottar to hjerte allografts, en i magen og den andre i nakken11. Vi anbefaler også samarbeid mellom to dyktige kirurger for å etablere denne modellen, med en kirurg som forbereder mottakerdyret og den andre høsting og implantering av donorhjertet. Slikt samarbeid kan forkorte operasjonstiden til 25 minutter. Ved hjelp av denne optimaliserte prosedyren har vi etablert syngeneic, allogen12,13,14,15,16,17,18,19og xenogeneiske mus hjertetransplantasjon modeller20.

Begrunnelsen for utviklingen av den indre rørteknikken var å redusere operasjonstiden for etablering av en mus hjertetransplantasjon modell med høy suksessrate. Optimalisering av cervical hjertetransplantasjon modell letter oppkjøpet av høy suksessrater i en kort periode med kirurgi tid sammenlignet med den tradisjonelle sutur og mansjett teknikk21. Videre kan samarbeidsmodellen ytterligere redusere den varme iskemiske tiden til donorhjertet sammenlignet med operasjoner utført med en enkelt operatør.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Dyr (BALB/c, C57BL/6, mann, 8-12 uker) ligger i et spesifikt patogenfritt anlegg ved Xiamen University Laboratory Animal Center. C57BL/6 brukes som mottaker og BALB/c brukes som donor. Alle prosedyrene utføres i henhold til retningslinjene for institusjonell dyreomsorg og bruk (IACUC).

MERK: Et sett med mikrokirurgiske instrumenter, inkludert en mikrosaks, mikrorette tang, mikro buede tang og mikronålholdere, er nødvendige for operasjonen (Tabell og materialer, figur 1B, C, D, E). Ett par engangs bulldog klemmer (Figur 1F) er nødvendig. To mansjetter for den ytre halsvenen og halspulsåren er utarbeidet ved å kutte de tilpassede polyamidrørene med en nr. Diameteren på venen og arteriemanmantten er henholdsvis 0,9 mm og 0,55 mm. I tillegg er diameteren på det indre røret for den tilsvarende venemansjetten 0, 6 mm, og disse av det indre røret for den tilsvarende arteriemanmantten er 0,28 mm (figur 1G).

1. Forberedelse til mottaker

  1. Bedøv mottakermusen med pentobarbital (60 mg/kg, i.p). Bruk atraumatiske mekaniske klippere for å fjerne håret i høyre laterale livmorhalsområde.
  2. Bruk en steril bomullsspisapplikator til å tørke av det kirurgiske området med jodantiseptisk etterfulgt av 70 % etanol.
  3. Plasser musen i liggende posisjon på operasjonsplattformen. Dekk musen med steril gasbind.
  4. Bruk en oftalmisk saks til å lage et tverrgående snitt fra den nedre en tredjedel halsen midtlinjen til høyre skulder-kragebeinledd.
  5. Isoler høyre ytre halsvene med mikro buede tang for å eksponere nok lengde, kutt av grenene via elektrokoagulasjon, og ligate fartøyet i den distale enden ved hjelp av en 6-0 silkesytur.
  6. Klem den eksterne halsvenen proksimalt ved hjelp av en bulldogklemme og transect venen proksimalt til ligaturen ved hjelp av en mikrosaks.
  7. Vask fartøyets lumen med 100 U/ml 0-4 °C heparinisert saltvann for å fjerne eventuelt gjenværende blod.
  8. Trekk den ytre halsvenen gjennom venenmansjetten ved hjelp av mikrorette tang; sett venens indre rør inn i lumen som en stent, og evert fartøyet veggen over mansjetten med mikro rette tang (Figur 2A).
  9. Fest det evertede karendeotelet ved den proksimale enden av mansjetten ved hjelp av en circumferential 8-0 silkesytur (figur 2B).
  10. Bruk mikrorette tang for å trekke venens indre rør fra venen fartøyet.
  11. Utfør stump disseksjon med mikro buede tang for å isolere høyre halspulsåren ved siden av den indre kanten av sternocleidomastoid.
  12. Klem den høyre halspulsåren proksimalt ved hjelp av en bulldogklemme, ligate halspulsåren distally ved hjelp av en 6-0 silke sutur, og bruk en mikrosaks til å transect halspulsåren proksimalt til ligaturen.
  13. Vask halspulsåren med 100 U/ml 0-4 °C heparinisert saltvann for å fjerne eventuelt gjenværende blod.
  14. Før halspulsåren gjennom arteriemansjetten og sett arteriens indre rør inn i arterien ved hjelp av mikrorette tang (figur 2C).
  15. Evert fartøyet over mansjetten ved hjelp av mikro rette tang; fikse det evertede karets endotelium ved hjelp av et circumferential 8-0 silkesytur (figur 2D).
  16. Trekk arteriens indre rør ut av arterien med mikrorette tang.
    MERK: Bevar mottakerens undermandibulære kjertelen.

2. Donor forberedelse

  1. Bedøv donormusen med pentobarbital (60 mg/kg, i.p). Bruk atraumatiske mekaniske klippere for å fjerne håret i bukregionen.
  2. Plasser musen i liggende posisjon på operasjonsplattformen. Dekk musen med steril gasbind.
  3. Bruk en steril bomullsspisapplikator til å tørke av det kirurgiske området med jodantiseptisk etterfulgt av 70 % etanol.
  4. Lag et abdominalt midtlinjesnitt med en oftalmisk saks og utsett bukhulen.
  5. Bruk mikro buede tang for å eksponere den dårligere vena cava, og injiser deretter 200 μL av 100 U/ml 0-4 °C heparinisert saltvann per 20 g kroppsvekt gjennom den dårligere vena cava.
  6. Utfør thoracotomi med oftalmisk saks, klipp av ribbeina gjennom de bilaterale midaxillary linjesnittene, vend den fremre brystveggen utover for å avsløre thoraxhulen.
  7. Avgifter thymus med mikro buede tang.
  8. Eksponer aorta, og deretter perfuse 200 μL av 100 U/ ml 0-4 ° C heparinisert saltvann til koronararterien gjennom aortabuen.
    MERK: Unngå å perfusere noen gassbobler inn i donorhjertet.
  9. Bruk en mikrosaks til å transect den stigende aorta i begynnelsen av aortabuen.
  10. Transect lungearterien i begynnelsen av de to hovedgrenene med en mikrosaks.
  11. Ligate overlegen vena cava og dårligere vena cava proximally ved hjelp av en 6-0 silke sutur og bruke en mikro saks til å transect venen distally til ligaturen.
  12. Ligate lungeårene sammen, omgås, ved hjelp av en enkelt 6-0 silke sutur, og kuttet av venen grener distally til ligatur ved hjelp av en mikro saks.
  13. Fjern hjertetransplantatet fra det omkringliggende bløtvevet; bevare den i 0-4 °C heparinisert saltvann.

3. Hjerteimplantasjon

  1. Plasser donorhjertet opp ned i mottakerens høyre halsområde.
  2. Legge inn lungearterien til donorhjertet til en 6-0 silkeløkke med mikrorette tang.
  3. Vikle fartøyet lumen rundt venen mansjett, og stram deretter 6-0 silke sutur løkker rundt mansjetten for å band fartøyet felles.
  4. Utfør anastomose av graftets aorta og arteriemansjetten ved å følge trinnene som er beskrevet i trinn 3.2.
  5. Slipp den klemmede halsvenen etterfulgt av den klemmede halspulsåren. Hold fartøyets ledd uhåndtert og sørg for at blodstrømmen er uhindret.
    MERK: Sinusrytmen som vender tilbake til mer enn 200 ganger innen 1 min, anses som normal.
  6. Fukt donorhjertet med varm (37 °C) saltvann og inspiser om transplantatet blør. Sett pulserende hjerte pode inn i subkutan plass, og deretter sutur snittet.

4. Postoperativ omsorg og graft vurdering

  1. Ta opp tiden til normal sinusrytme og bevaring av normal sinusrytme i minst 5 minutter etter klemmefrigjøring for å overvåke den postoperative graftfunksjonen.
  2. Plasser mottakeren alene på et varmt teppe til mottakeren våkner opp fra anestesi. Administrer buprenorfin analgesi, 0,05 mg/kg, s.c, ved slutten av operasjonen og hver 12.
  3. Registrer vekten og postoperativ gjenopprettingsstatus for mottakeren daglig. Ved >15 % vekttap i forhold til det på operasjonsdatoen, hemiplegisk lammelse eller infeksjon, euthanize mottakeren via terminal isofluran innånding21.
  4. Overvåk pode overlevelse ved palpasjon daglig. Operasjonen anses å være vellykket hvis murine allograft overlever i > 72 timer. Vurder graft-funksjonen, som tidligere rapportert22: Skala 3 - kraftig pulserende og frekvens; Skala 2 - mindre pulserende; Skala 1- flimmer og overhengende avvisning; eller Scale - 0, tap av hjerteslag og fullstendig avvisning.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Kirurgisk operasjonstid

Etter trening kan en dyktig kirurg utføre operasjonen innen 35 minutter ved hjelp av den indre rørteknikken, hvor det kreves ca. 15,5 minutter for mottakerforberedelse, 10,9 minutter er nødvendig for donorforberedelse, og 4,4 minutter er nødvendig for donorhjerteanastomoser. Den kalde og varme iskemitiden (fra donorpreparat til hjerteimplantasjon) reduseres til 15,3 minutter sammenlignet med operasjonen ved hjelp av mansjettens teknikk uten indre rørteknikk og suturteknikk (Tabell 1)21.

Vi designet en samarbeidsmodell for å ytterligere forbedre effektiviteten av operasjonen. Som vist i skjematisk (Figur 3), begynner en kirurg å utføre mottakerforberedelse først, etterfulgt av initiering av donorpreparatet av en annen kirurg etter 4-5 minutter. Etter 15-16 minutter skal den første kirurgen ha fullført mottakerforberedelsen, da den andre kirurgen er ferdig med å høste donorhjertet, bør begynne å anastomosere donorhjertet i mottakeren. Denne samarbeidsmodellen krever at hver kirurg skal trenes i bare en enkelt del av mansjetten teknikk og ytterligere forkorter den totale driftstiden til ca 25 minutter. En analyse av > 600 heterotopisk murintransplantasjoner utført via samarbeid mellom to kirurger i løpet av de siste to årene ved Organ Transplantation Institute of Xiamen University indikerer en suksessrate for hjertetransplantasjon ved hjelp av denne teknikken på opptil 95%.

Overlevelse av major histokompatibilitet kompleks hjerte mismatchet og matchet hjerte grafts

Major Histocompatibility Complex (MHC), utpekt "H-2", har blitt brukt til å bestemme genetiske forskjeller og likheter. Donor-mismatched MHC antigener kan utløse graft avvisning ved å samhandle direkte med mottakeren T-celler eller indirekte som donor MHC-avledede peptider uttrykt på mottaker MHC molekyler23. Et fullstendig MHC-uoverensstemmelser BALB/c (H-2d)allograft hjerte kan avvises, med en median overlevelsestid på 7,5 dager etter transplantasjon i C57BL/6 (H-2b) mottakermus (Figur 4A). I våre studier overlevde syngeneiske hjertetransplantasjoner mer enn 100 dager, bortsett fra i ett sjeldent tilfelle på grunn av et 15% vekttap sammenlignet med normal vekt før operasjonen.

Hjerte allografts kan høstes for histopatologisk undersøkelse på tidspunktet for avvisning. Figur 4B viser utseendet på markerte cellemedierte avvisningsegenskaper, som inflammatorisk celleinfiltrasjon, vevødem og mikrovaskulær okklusjon. Syngeneiske grafts er nær normalt uten tegn på myocyte nekrose eller inflammatorisk celle infiltrasjon.

Effekt av indre rør på vaskulær endotel

For å evaluere skaden på det vaskulære endotelet etter å ha satt det indre røret inn i lumen, 100 dager etter syngeneisk hjertetransplantasjon, kan det vaskulære endotelet til anastomoseområdet samles og farges av immunfluorescerende. I denne analysen ble det ikke observert noen åpenbar innsnevring av vaskulær vegg, trombose eller fortykning av intima (figur 4C). Elektron mikroskopisk avbildning viste at en jevn endotel og en vanlig langsgående kamdannelse, med endotelcellene arrangert pent og tett, uten åpenbare sedimenter på overflaten (Figur 4D).

Figure 1
Figur 1: Et sett med sterile kirurgiske instrumenter:
(A) Fine tang og oftalmisk saks; (B) Mikro buede tang; (C) Micro rette tang; (D) Mikro nål holdere; -EMikrosaks; BulldogFklemmer; (G) En arterie indre rør (rød prikket pil) og mansjett (rød solid pil), sammen med en vene indre rør (svart prikkete pil) og mansjett (svart solid pil). Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 2
Figur 2: Mottakerforberedelse.
(A) Sett venens indre rør inn i det eksterne halsvenefartøyet; (B)Evert venen fartøyet over mansjetten og fikse den ved hjelp av en circumferential 8-0 silke sutur; (C) Sett arteriens indre rør inn i arteriens lumen i arteriekaret; (D)Evert venen fartøyet over mansjetten og fikse den ved hjelp av en circumferential 8-0 silke sutur. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 3
Figur 3: Operasjonstid for hvert trinn i heterotopisk murintransplantasjon. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 4
Figur 4: (A) Overlevelsestid for hjertetransplantat. Kaplan-Meier-plottet som viser overlevelsen til hjerteleger (BALB/c) og syngeneiske grafts (C57BL/6) fra donormus transplantert til C57BL/6 mottakermus (n=12 mus/gruppe); (B) Mikroskopisk undersøkelse av C57BL/6 (venstre) Isograft og Wild Type BALB/c Allograft (høyre) på dag 7 etter transplantasjon (Skala barer, 50 um; forstørrelse × 400); (C) Immunofluorescens (Skala barer, 50 μm; forstørrelse × 400) (D) Elektron mikroskopi Skanning av vaskulær endotel i transplantasjon (venstre) og naiv (høyre) mottaker. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Anastomose teknikk Forberedelsestid for mottaker Donor forberedelse tid Hjerteimplantasjonstid Kald og varm iskemi tid Total driftstid
5.5.1 Cervikal heteropisk Sutur N N N < 45 min N
6. Cervikal heteropisk Mansjett 45 min. 15 min. 10 min. N N
24.00.24 Cervikal heteropisk Mansjett 15 min. 20 min. 15 min. 25-40 min. < 60 min
25.00.25 Abdomen heterotopisk Sutur N N N N 35 min.
7. Cervikal heteropisk Mansjett N 20 min. N 30 min. 35 min.
26. Cervikal heteropisk Mansjett N 20 min. 20 min. < 35 min N
4.4 .4 Abdomen heterotopisk Sutur 60–70 min. 6–7 min. N N 75 min.
21.00.20 Cervikal heteropisk Mansjett N N 7 min. 20 min. 45 min.
27. Abdomen heterotopisk Sutur N 10-15 min. N N 45-60 min
28. Cervikal heteropisk Mansjett 25 min. 20 min. 15 min. 20 min. 60 ± 8 min
29.00.20 Cervikal heteropisk Mansjett 31.9 min. 21.1 min. 5.1 min. 28.5 min. 57.8±3.9 min
29.00.20 Cervikal heteropisk Sutur 25.2 min. 20.5 min. 30.8 min. 51.3 min. 83.9±2.9 min
Cervical Heterotopic i vår protokoll Mansjett 15.5 min. 10.9 min. 4.4 min. 15.3 min. 35 min.
(Enkel betjening)
23 min.
(Samarbeid)

Tabell 1: Sammenligning av tid for ulike faser i forskjellige mus hjertetransplantasjon teknikker.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Mus hjertetransplantasjoner modeller er viktige verktøy for transplantasjon immunologi forskning, som verktøy og materialer for å evaluere immunmekanismer av denne modellen og et stort antall genmodifiserte mus er tilgjengelig. Mikrokirurgiske tekniske utfordringer, som fartøysys og eversjon, har imidlertid begrenset den utbredte bruken. I den foreliggende studien har vi undersøkt visse kjernetekniske utfordringer ved murine hjertetransplantasjon og har fått gode resultater. Et kritisk trinn i protokollen innsetting av et indre rør inn i lumen som en stent for å evert fartøyet veggen over mansjetten. Dette optimaliseringstrinnet løser den tekniske utfordringen med å everting arteriekaret på grunn av behovet for en omfattende strekning. Personer uten mikrokirurgisk dyktighet kan begynne å utføre teknikken etter to måneders trening, noe som også vil hjelpe til med den brede anvendelsen av denne modellen.

Etter vår erfaring vil et passende indre rør forbedre transplantasjonsresultatene. Den utvendige diameteren på det indre røret bør være litt mindre enn den indre diameteren til mottakerens blodkar. Videre bør sløve polypropylenrør eller sylindere med en glatt overflate brukes som midlertidige indre kjerner for å unngå å skade det vaskulære endotelet. I våre hender oppstod ingen trombose i de 5% av modellene som mislyktes, selv om trombe er en viktig faktor for svikt etter anastomose ved hjelp av suturteknikken. Ved hjelp av disse modne modellene har våre laboratorier publisert flere grunnleggende forskningsartikler som har blitt anerkjent av peer korrekturlesere14,15,16,17,18,19.

Operasjoner utført innen 35 minutter var ikke signifikant forskjellig i forhold til den tradisjonelle mansjettteknikken, men den kalde og varme iskemitiden var betydelig lavere enn andre teknikker (tabell 1). Ved hjelp av samarbeidsmodellen reduserer ytterligere gjennomsnittlig driftstid til 23-25 minutter, noe som gjenspeiles i anestesitiden til mottakerens mus og i donorhjerteimplantasjonstiden. En annen fordel med mansjetten teknikken at det begrenser den varme iskemisk tid (Tabell 1). Siden ingen ispose brukes til å beskytte hjertetransplantatet mot den varme kroppstemperaturen til musemottakeren, tilsvarer den varme iskemisk tid anastomosetiden. Den optimaliserte mansjettteknikken innebærer fremstilling av begge mansjettene på mottakeren for å forenkle anastomoseprosedyren og forkorter følgelig anastomosetiden. Derfor begrenser mansjetten teknikken den varme iskemisk tid til bare 4,4 minutter i gjennomsnitt.

Det er imidlertid visse viktige trinn å merke seg med den nye teknikken diskutert. Pass på å bevare submandibular kjertelen til mottakermusen i cervikale heterotopisk hjertetransplantasjon30, da submandibular kjertelen kan brukes til å fikse hjertetransplantatet og unngå vridning av karene. Unngå å skade vagusnerven når du isolerer den ytre halsvenen og halspulsåren, da skade kan føre til nakkehemiplegi hos mottakeren. Trykket på bulldogklemmene bør opprettholdes ved 20-25 gram for å unngå klipsskade eller lekkasje av fartøy. Vask lumen av karene og mansjettene med 0-4 ° C heparinisert saltvann for å fjerne eventuelle gjenværende blod- og gassbobler; Dette forhindrer emboli i grafts etter reperfusjon. Bruk en 1 ml sprøyte for å perfusere donoren med 0-4 °C heparinisert saltvann og øk hastigheten til 50 μL per sekund for å opprettholde et passende trykk. Under anastomose må ikke det omsyler det omkrets 8-0 suturer (brukes til å fikse det everted vaskulære endotelet til mansjettene) i lumen i graft arteriene.

Selv om det er begrensninger for samarbeidsmodellen, som inkluderer behovet for mikrokirurgiske teknikker, tilgjengeligheten av to samtidige mikroskoper og dobbelt så mange dyktige kirurger, har det likevel vist seg å være en vellykket tilnærming til å utføre vaskularisert organtransplantasjon. Den bredere anvendelsen kan ytterligere bidra til å utvikle nye immunsuppressive protokoller og studie av mekanismene for akutt og kronisk avvisning i transplantasjonsområdet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne har ingenting å avsløre.

Acknowledgments

Dette arbeidet ble støttet av Fujian Provincial Health Education Joint Research Project (WKJ2016-2-20), National Natural Science Foundation of China (81771271 og 81800664), National Key R & D Program of China (2018YFA0108304) og Education and Scientific Research Project for unge og middelaldrende lærere i Fujian-provinsen (JAT170714), Natural Science Foundation of Hunan Province of China (2019JJ50842) og Huxiang Young Talents of Hunan Province (2019RS2013).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Artery cuff Self-made Polyamide tube. diameter: 0.55 mm,length: 1.0 mm
Artery inner tube Self-made Polyamide tube. Diameter: 0.28mm
Micro curved forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory WA3050 1/8 arc, 0.3-mm tip without a hook
Micro needle holders Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory WA2050 0.2-mm tip
Micro scissors Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory WA1050 Straight, blade length: 10 mm
Micro straight forceps Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory WA3060 0.15-mm tip without a hook
Scanlan Vascu-Statt Bulldog Clamps Scanlan International Inc 1001-531 Clamping pressure 20–25 grams
Vein cuff Self-made Polyamide tube. diameter: 0.9 mm,length: 1.2 mm
Vein inner tube Self-made Polyamide tube. Diameter: 0.6 mm

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transplantation Proceedings. 5 (1), 733-735 (1973).
  2. Que, W. et al. Prolonged cold ischemia time in mouse heart transplantation using supercooling preservation. Transplantation. (2019).
  3. Wang, C. Y. et al. Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions. Circulation. 105 (13), 1609-1614 (2002).
  4. Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy. Nature Protocols. 2 (3), 471-480 (2007).
  5. Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52 (6), 1099-1101 (1991).
  6. Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique. Transplantation. 51 (4), 896-898 (1991).
  7. Wang, Q., Liu, Y., Li, X. K. Simplified technique for heterotopic vascularized cervical heart transplantation in mice. Microsurgery. 25 (1), 76-79 (2005).
  8. Li, W. et al. Surgical technique for lung retransplantation in the mouse. Journal of Thoracic Disease. 5 (3), 321-325 (2013).
  9. Kamada, N., Calne, R. Y. A surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat. Surgery. 93 (1 Pt 1), 64-69 (1983).
  10. Chen, H., Zhang, Y., Zheng, D., Praseedom, R. K., Dong, J. Orthotopic kidney transplantation in mice: technique using cuff for renal vein anastomosis. PLoS One. 8 (10), e77278 (2013).
  11. Miller, M. L. et al. Spontaneous restoration of transplantation tolerance after acute rejection. Nature Communications. 6, 7566 (2015).
  12. Lin, Y. et al. Overexpression of Jagged-1 combined with blockade of CD40 pathway prolongs allograft survival. Immunology and Cell Biology. 93 (2), 213-217 (2015).
  13. Xie, B. et al. Combined costimulation blockade inhibits accelerated rejection mediated by alloantigen-primed memory T cells in mice. Immunological Investigations. 38 (7), 639-651 (2009).
  14. Shao, W. et al. Combination of monoclonal antibodies with DST inhibits accelerated rejection mediated by memory T cells to induce long-lived heart allograft acceptance in mice. Immunology Letters. 138 (2), 122-128 (2011).
  15. Dai, H. et al. Blockade of CD27/CD70 pathway to reduce the generation of memory T cells and markedly prolong the survival of heart allografts in presensitized mice. Transplant Immunology. 24 (4), 195-202 (2011).
  16. Yan, G. et al. Inhibition of accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonged allograft survival by arsenic trioxide. Immunological Investigations. 42 (5), 438-454 (2013).
  17. Yan, G. et al. Inhibiting accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonging allograft survival by 1alpha,25-dihydroxyvitamin D(3) in nude mice. Immunology Letters. 149 (1-2), 54-61 (2013).
  18. Lin, Y. et al. Arsenic trioxide is a novel agent for combination therapy to prolong heart allograft survival in allo-primed T cells transferred mice. Transplant Immunology. 25 (4), 194-201 (2011).
  19. Shao, W. et al. CD44/CD70 blockade and anti-CD154/LFA-1 treatment synergistically suppress accelerated rejection and prolong cardiac allograft survival in mice. Scandinavian Journal of Immunology. 74 (5), 430-437 (2011).
  20. Li, Y. et al. A highly reproducible cervical cuff technique for rat-to-mouse heterotopic heart xenotransplantation. Xenotransplantation. (2017).
  21. Oberhuber, R. et al. Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique. Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).
  22. Blanchard, J. M., Pollak, R. Techniques for perfusion and storage of heterotopic heart transplants in mice. Microsurgery. 6 (3), 169-174 (1985).
  23. Felix, N. J. et al. H2-DMalpha(-/-) mice show the importance of major histocompatibility complex-bound peptide in cardiac allograft rejection. Journal of Experimental Medicine. 192 (1), 31-40 (2000).
  24. Tomita, Y. et al. Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice. Transplantation. 64 (11), 1598-1601 (1997).
  25. Niimi, M. The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: experience of 3000 operations by one surgeon. Journal of Heart and Lung Transplantation. 20 (10), 1123-1128 (2001).
  26. Wang, K., Zhang, N., Li, H. Improved technique of mouse heterotopic heart graft retransplantation. Microsurgery. 26 (3), 200-202 (2006).
  27. Plenter, R. J., Grazia, T. J. Murine heterotopic heart transplant technique. Journal of Visualized Experiments. (89) (2014).
  28. Ratschiller, T. et al. Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice. Journal of Visualized Experiments. (102), e52907 (2015).
  29. Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant. Experimental and Clinical Transplantation. 8 (3), 245-249 (2010).
  30. Fukunaga, N., Bissoondath, V., Rao, V. Submandibular Gland-preserving Technique for Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice. Transplantation. 102 (11), e464-e465 (2018).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please sign in or create an account.

    Usage Statistics