특정 사이트 Recombinase (SSR) 기술의 원리

Biology

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Summary

특정 사이트 recombinase (SSR) 기술과 Cre 호텔 / 훈제 연어 시스템의 출현은 분자 생물학에 많은 발전을 주도하고, 유전자 변형 동물의 유전자 기능을 평가하기위한 유용한 도구로 자신을 증명되었습니다. 이 인터뷰는 Cyclization recombinase (Cre 호텔) 방법과이 효소의 사용이 전략을 밖으로 전통 노크에 비해 상당한 장점을 가지고 조건부 돌연변이 유발의 개발 하였다하여 사이트 특정 재조합의 메카니즘을 설명합니다.

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Bucholtz, F. Principles of Site-Specific Recombinase (SSR) Technology. J. Vis. Exp. (15), e718, doi:10.3791/718 (2008).

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Abstract

특정 사이트 recombinase (SSR) 기술은 유전자 구조의 조작은 유전자 기능을 탐색 허용하고 분자 생물학의 중요한 도구가되고있다. 특정 사이트 recombinases는 별개의 DNA 대상 시퀀스에 바인딩 단백질입니다. Cre 호텔 / 훈제 연어 시스템은 먼저 1980 년대 동안 bacteriophages에서 설명했습니다. CRE recombinase 두 loxP (X - P1 이상의 로커스) 사이트 간의 DNA의 특정 사이트 재조합을 catalyzes 입력 난 topoisomerase입니다. Cre 호텔 / 훈제 연어 시스템은 어떤 cofactors을 필요로하지 않습니다. LoxP 시퀀스는 재조합 및 다시 정렬하기이 이루어지는 방향 핵심 순서를 서라운드 Cre 호텔의 recombinases에 대한 별개의 바인딩 사이트를 포함하고 있습니다. 세포 loxP 사이트를 포함하고 Cre 호텔 recombinase 표현하면, 재조합 이벤트가 발생합니다. 두 번 좌초 DNA는 Cre 호텔 recombinase에 의해 두 loxP 사이트에서 잘라 재배열하고, ( "가위와 접착제") 출혈도 잡았입니다. 재조합 이벤트의 제품은 비대칭 시퀀스의 상대적인 방향에 따라 달라집니다.

SSR 기술 자주 유전자 기능을 탐색하는 도구로 사용됩니다. 여기에 관심의 유전자는 Cre 호텔 대상 사이트 loxP ( "floxed")로 둘러싸인 있습니다. 동물은 다음 조직 특정 발기인의 통제하에 Cre 호텔 recombinase을 표현하는 동물 교차하고 있습니다. Cre 호텔 recombinase을 표현하는 조직에서는 타겟 시퀀스에 바인딩하고 floxed 유전자를 excises. 제어 유전자 삭제는 특정 조직에서 서로 다른 시간 지점에서 유전자 기능을 조사 수 있습니다. SSR 기술 --- 조건부 돌연변이 유발을 고용 유전자 기능 분석 - 유전자 삭제가 자주 치명적인 전통적인 노크 - 아웃에 비해 상당한 장점이 있습니다.

Comments

3 Comments

  1. Hi. The presentation was good and substantial. It would much good if the delicate concepts of selection are also included. Thank you. Cheers, Lopez Gilsinia Gilroy

    Reply
    Posted by: Anonymous
    May 31, 2008 - 5:54 AM
  2. request for article

    Reply
    Posted by: Anonymous
    January 13, 2010 - 7:59 AM
  3. request for the articel

    Reply
    Posted by: Anonymous
    July 8, 2010 - 4:52 PM

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