مبادئ في مواقع محددة التكنولوجيا (SSR) Recombinase

Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Summary

وقد أدى ظهور التكنولوجيا في مواقع محددة (SSR) recombinase ونظام لجنة المساواة العرقية / لوكس للتقدم عديدة في البيولوجيا الجزيئية ، وأثبتت نفسها باعتبارها أداة قيمة لتقييم وظائف الجينات في الحيوانات المعدلة وراثيا. ويناقش هذا اللقاء آلية إعادة التركيب من قبل موقع معين recombinase Cyclization (لجنة المساواة العرقية) وكيفية استخدام هذا الإنزيم قد أدى إلى تطوير الطفرات الشرطي ، الذي مزايا هامة على طرق تقليدية من الاستراتيجيات.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Bucholtz, F. Principles of Site-Specific Recombinase (SSR) Technology. J. Vis. Exp. (15), e718, doi:10.3791/718 (2008).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

مواقع محددة recombinase (SSR) تتيح تقنية التلاعب بالجينات لاستكشاف هيكل وظيفة الجين وأصبح أداة لا يتجزأ من البيولوجيا الجزيئية. مواقع محددة recombinases هي بروتينات التي تربط لتسلسل الهدف متميزة الحمض النووي. وكان أول وصف لنظام لجنة المساواة العرقية / لوكس في البكتيريا خلال عام 1980. لجنة المساواة العرقية recombinase هو النوع الأول الذي يحفز topoisomerase مواقع محددة من الحمض النووي تأشب بين موقعين (بموضع X - P1 أكثر) loxP. نظام لجنة المساواة العرقية / لوكس لا يتطلب أي العوامل المساعدة. متواليات LoxP تحتوي على مواقع الربط متميزة لجنة المساواة العرقية التي تحيط recombinases تسلسل الأساسية الاتجاه حيث إعادة التركيب وإعادة ترتيب تأخذ مكان. عندما الخلايا تحتوي على مواقع loxP وأعرب عن recombinase لجنة المساواة العرقية ، وهو حدث يحدث إعادة التركيب. يتم قطع الحمض النووي المزدوج تقطعت بهم السبل في كلا الموقعين من قبل loxP recombinase لجنة المساواة العرقية ، ترتيبها ، وligated ("المقص والصمغ"). منتجات الحدث تأشب تعتمد على التوجه النسبي للتسلسل غير المتماثلة.

وكثيرا ما يستخدم SSR التكنولوجيا باعتبارها أداة لاستكشاف وظائف الجينات. هنا ويحيط هذا الجين في المصالح مع لجنة المساواة العرقية loxP المواقع المستهدفة ("floxed"). وعبرت ثم الحيوانات مع الحيوانات معربا عن recombinase لجنة المساواة العرقية تحت سيطرة أحد المروجين أنسجة معينة. في الأنسجة التي تعبر عن لجنة المساواة العرقية recombinase ذلك بربط الهدف تسلسل الجين والمكوس floxed. تسيطر الجينات الحذف يسمح التحقيق في وظيفة الجين في أنسجة معينة وعند نقاط زمنية مختلفة. تحليل وظائف الجينات توظيف التكنولوجيا SSR --- الطفرات المشروط -- ومزايا هامة على عموميات تدق التقليدية حيث الحذف الجين المميتة بشكل متكرر.

Comments

3 Comments

  1. Hi. The presentation was good and substantial. It would much good if the delicate concepts of selection are also included. Thank you. Cheers, Lopez Gilsinia Gilroy

    Reply
    Posted by: Anonymous
    May 31, 2008 - 5:54 AM
  2. request for article

    Reply
    Posted by: Anonymous
    January 13, 2010 - 7:59 AM
  3. request for the articel

    Reply
    Posted by: Anonymous
    July 8, 2010 - 4:52 PM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics